WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |   ...   | 9 |

«МАТЕРИАЛЫ международной научно практической конференции «Пчеловодство России на пути вступления в ВТО» г. Ярославль 18 – 23 октября 2012 г. ОРГАНИЗАТОРЫ: Правительство Ярославской ...»

-- [ Страница 5 ] --

В лабораторных опытах использовался метод диффузии в агар Сабуро различных концентраций сочетаний сульфадиметоксина и трихопола с препаратами из лука и наблюдением за ростом микроорга низмов в течение 10 суток при 300С. Контролем служили чашки Петри с агаром, засеянным возбудите лями аскосфероза, но не подвергавшиеся воздействию препаратов. Полученные результаты свидетель ствуют, что наибольшим противоаскосферозным действием обладает сочетание 1 г сульфадиметоксина с 0,5 г трихопола в дозе на литр и 1:2/20 100 мл препарата лука (см. таблицу). Подобный лекарственный симбиоз задерживает рост аскосфера апис на 22 мм против 22,3 мм у рекомендуемого антибиотика нис татина. Сравнительно высокий эффект показан сочетанием 0,5 г сульфадиметоксина с 0,125 г трихопола и 1:2/20 100 мл экстракта лука, задержавшим рост аскосфера апис на 21,6 мм.

–  –  –

Перспективные прописи сочетанных препаратов испытывались на токсичность для пчел методом скармливания изолированным группам пчел в течение 12 суток. Подкормки задавались с интервалами в 3 суток (см. таблицу). Анализ наблюдений показал, что скармливание сочетаний фармакопейных и рас тительных препаратов в сахарном сиропе приводило к незначительному увеличению отхода пчел по срав нению с контролем на чистом сахарном сиропе (1,5:1).

Апробация полученных результатов проведена на неблагополучной по варроозу и аскосферозу па секе, где сформировали 2 группы по 5 семей. Опытным семьям 10 и 15 мая дали лечебную подкормку, со держащую 0,5 г сульфадиметоксина и 0,125 г трихопола на литр сиропа с 20 мл препарата из лука. На сле дующем этапе 4, 13 и 18 июня 2012 г. обработали водным аэрозолем вышеперечисленных препаратов. Че рез каждый цикл воспроизводства пчел определяли пораженность гнезда варроозом и аскосферозом.

Полученные данные свидетельствуют о высокой антипаразитарной и антимикозной активности двухцикличных обработок больных семей сочетанием сульфадиметоксина и трихопола с препаратами из лука. Испытание комплексного препарата позволило на 75 85% уменьшить интенсивность поражения пчелиного гнезда клещами варроа и микозами по сравнению с необработанными пчелиными семьями.

По нашим наблюдениям, повышенная санирующая активность пчел способствует активизации про цесса агрессивности насекомых и ингибирует рефлекс на взяток. Возможно, это характеризуется нару шением генетического синтеза.

Полученные результаты позволяют рекомендовать лекарственный комплекс из сульфадиметоксина, трихопола и препарата из лука для оздоровления пчелиных семей, пораженных варроозом и аскосферозом.

ЗДОРОВЬЕ ПЧЕЛ – ВАЖНЕЙШИЙ КРИТЕРИЙ РАЗВИТИЯ

СОВРЕМЕННОГО ПЧЕЛОВОДСТВА

Аликин Ю.С.1, Афиногенов А.З.1, Батуев Ю.М.2, Гробов О.Ф.2, Подгорный В.Ф.1 1 Закрытое акционерное общество «Велепрес», 2 ГНУ ВНИИ экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко РАСХН, г. Москва Ежегодные централизованные поставки пчел по всей стране способствовали распространению болезней, ранее не встречавшихся в данной местности. Отсутствие современных диагностических систем на бакте риальные и вирусные болезни не дает возможности оценить качество проводимых лечебно профилактических 62 мероприятий. Ветеринарный контроль за этими инфекциями почти отсутствует в связи с малой разрабо танностью диагностических систем. Сложившееся положение усугубляет недостаточность наших знаний о вирусах пчел, об их иммунной системе и генетической устойчивости. В связи с тем, что переносчиком вирусных инфекций у пчел являются паразитирующие на них клещи, возникает необходимость сочетания противовирусной и акарицидной обработки, направленной как для борьбы против, например, варроато за, так и на укрепление и стимуляцию пчелиной семьи. Точно такая же задача возникает и при других за болеваниях пчел бактериальной этиологии. Учитывая то, что клинические признаки вирусных болезней пчел часто имеют невыраженную картину, а серологические методы диагностики не обладают достаточ ной чувствительностью, ассоциированные инфекции у пчел: вирусной, бактериальной и грибковой приро ды очень быстро и широко распространяются.

Одним из вариантов решения этого вопроса является разработка высокочувствительной и специ фичной иммуноферментной тест системы для диагностики основных вирусных болезней пчел. Такая тест система необходима также для оценки зараженности меда вирусами пчел.

Поэтому требуется безотлагательная разработка современных диагностических систем и компле ксных лечебно профилактических препаратов на основе последних достижений биотехнологии с учетом механизмов генетической устойчивости и особенностей иммунитета различных пород пчел.

На протяжении последних нескольких десятков лет внимание ученых привлечено к ферментам, раз рушающим вирусы, и подавляющих или профилактирующих вирусные заболевания у пчел. Препараты на основе фермента эндонуклеазы Serratia marcescens (эндонуклеаза бактериальная и эндоглюкин) – наи более подходящие средства для этой цели по своим свойствам.

Ферменты обмена нуклеиновых кислот (НК) играют важную роль как в процессах реализации по тенциала генотипа, так и в научных исследованиях в области молекулярной биологии, генетической ин женерии и биотехнологии. Но изучение механизма действия нуклеаз привлекательно с позиций выясне ния их роли в качестве эффекторных молекул противовирусной защиты клеток. Одним из наиболее изу ченных энзимов этого класса является секретируемая эндонуклеаза Serratia marcescens.

В основе предположений о возможном противовирусном действии нуклеаз ферментов, разрушаю щих НК, лежат следующие факты и соображения. Общеизвестно, что эффекторный (рабочий) механизм системы интерферона у позвоночных, направленный на элиминацию вирусной инфекции, основан на ак тивации собственных эндонуклеаз в клетке. Именно с помощью нуклеаз организм и его клетки защища ются от вирусов.

Эффективность действия препаратов эндонуклеазы бактериальной и эндоглюкина у пчел К списку нуклеаз, проявляющих противовирусные свойства на моделях in vitro, относят панкреати ческие РНК азы, ДНК азы, а также эндонуклеазу Serratia marcescens [1]. Установлено, что рибонуклеазы обладают выраженной противовирусной активностью в отношении таких РНК содержащих вирусов, как вирусы гриппа, полиомиелита, клещевого энцефалита. Дезоксирибонуклеазы тормозят синтез и размно жение ДНК содержащих вирусов, осповакцины, аденовируса, герпеса. Эндонуклеаза Serratia marcescens способна расщеплять НК как РНК, так и ДНК содержащих вирусов. Фермент тормозит размножение, со ответственно, вирусов везикулярного стоматита и осповакцины в культуре клеток куриных фибробластов.

Инактивация ферментативных свойств нуклеаз приводит также к потере их противовирусной актив ности. Установлено, что нуклеазы не инактивируют нативный вирус вне клетки и действуют, в основном на вирус, размножающийся в клетках. Наблюдается прямая зависимость противовирусной активности эн донуклеазы от концентрации фермента в среде.

Клиническое применение ферментов показало высокую эффективность ДНК азы при заболевани ях человека, вызываемых вирусом герпеса и аденовирусами, а РНК азы при клещевом энцефалите у лю дей и легочных патологиях [2].

Первый созданный на основе эндонуклеазы Serratia marcescens противовирусный препарат полу чил название эндонуклеаза бактериальная. Технология его была разработана совместными исследова ниями НИКТИ БАВ и ИЦИГ СО АН СССР [3]. Препарат предполагался в качестве противовирусного сред ства для широкого спектра заболеваний у различных организмов.

Для пчеловодства эндонуклеаза бактериальная была разработана в 1973 1984 гг. в НИКТИ биоло гически активных веществ (г. Бердск, Новосибирской обл.). Это был первый противовирусный препарат в истории пчеловодства, предназначенный для профилактики острого и хронического паралича и других вирусных заболеваний пчел. Этапы создания препаратов для этих целей представлены в табл. 1. В 1984 г. эндонуклеаза бактериальная была разрешена ГУВ СССР к широкой практике в пчеловодстве.

–  –  –

При использовании этого средства на практике выявился ряд недостатков препарата, проявивших ся в невысокой эффективности, нестабильности его растворов, в значительной зависимости эндонукле азной активности от температуры среды, неудобстве применения формы препарата на практике и т.п.

Все это послужило основанием для дальнейшей работы по усовершенствованию его лекарственной фор мы и, в конечном счете, привело к разработке препарата второго поколения. Он получил название эндог люкин. По результатам технологических и биохимических исследований, а также биологических испыта ний препарата в экспериментальных и производственных условиях ГУВ СССР в 1992 г. разрешило его широкие производственные испытания, а в 1996 году Департамент ветеринарии РФ утвердил его в каче стве противовирусного средства и стимулятора развития в пчеловодстве.

Традиционное применение эндонуклеазы у пчел было основано на профилактическом противови русном эффекте. Но одновременно наблюдали стимулирующий эффект препарата. Трактовка данного феномена, по видимому, связана с наличием в пчелиных семьях латентных и длительно существующих (персистирующих) вирусов, которые угнетают развитие пчел, и их уничтожение с помощью эндонуклеазы позволяет пчелосемье начать быстро развиваться. Степень развития, оцениваемая по силе семей и ко личеству расплода, колеблется от 20 до 140% по сравнению с контрольными – 0 20% [4].

У других насекомых, в частности у хлопковой совки, используемой при получении вирусных препа ратов для защиты растений – виранов, применение эндонуклеазы предполагалось в качестве средства защиты их от вирусных заболеваний в процессе выращивания. Сначала требуется защитить этих насеко мых от бакуловирусов, вызывающих у них заболевания ядерного и цитоплазматического полиэдроза, гра нулеза. Как показали опыты, если в контрольных группах у капустной совки вирус ядерного полиэдроза вызывает гибель 60% особей, а цитоплазматического – 70%, то обработка препаратами эндонуклеазы бактериальной снижала гибель соответственно до 25 и 38,3%. У хлопковой совки вирус цитоплазматичес кого полиэдроза вызывает гибель до 50% особей, и после использования эндонуклеазы гибель снижает ся до 23,3%. У озимой совки вирус гранулеза поражает до 80%, а ядерного полиэдроза до 65%, эндонук леаза защищает насекомых и гибель совки от этих заболеваний соответственно снижается до 31,6 и 23,3%. Эти работы подтвердили наличие противовирусных эффектов у эндонуклеазы Serratia marcescens не только на пчелах, но и у других видов насекомых [5].

Профилактические противовирусные эффекты эндонуклеазы наблюдали у телят в опытах по защите их от ОРЗ на промышленных животноводческих комплексах [6]. Эти заболевания органов дыхания телят вы зываются, главным образом, РНК и ДНК вирусами различных семейств: инфекционного ринотрахеита (герпес ), парагрипп 3 (ортомиксо ), аденовирусами I и II (адено ), вирусом диареи (рота ), респираторным синтициальным вирусом (парамиксо ), парвовирусами. Поэтому оправдано применение эндонуклеазы, нес пецифически расщепляющей РНК и ДНК вирусов. Как показали наблюдения, аэрозольное применение эн донуклеазы в 4 раза снижает частоту респираторных заболеваний у телят и ослабляет их тяжесть.

Однако противовирусный эффект можно достичь не у всех организмов. Так проведенные нами ис следования противовирусных эффектов эндонуклеазы у низших позвоночных, у рыб на модели рабдови русной инфекции карпа, не подтвердили возможности её использования для этих целей.

Эндонуклеаза может быть использована при выращивании вегетативно размножающихся сельско хозяйственных растений методом апикальной меристемы. Высокоэффективно противовирусное приме нение эндонуклеазы для получения безвирусных сортов картофеля, где препарат используется для повы шения приживаемости и оздоровления меристем растений [7]. В результате применения эндонуклеазы Serratia marcescens наблюдается увеличение числа прижившихся меристем в 2 2,5 раза, длины ростков картофеля в 2 3 раза и ускорение морфогенеза у прижившихся меристем в 1,5 2 раза.

Для применения в пчеловодстве разработаны препараты второго поколения – эндоглюкин и др.

Производственные испытания эндоглюкина в качестве противовирусного средства и стимулятора разви тия пчелиных семей проводились на пасеках Московской и Новосибирской областей [8 10]. Применение противовирусного препарата эндоглюкина помогает избежать потерь в весенне летний период, оздорав ливать семьи, быстрее наращивать их силу, а в результате получить больше отводков, меда и других про дуктов пчеловодства. Эндоглюкин – препарат второго поколения эндонуклеазы бактериальной, разрабо тан в 1988 – 1992 гг. в НИКТИ БАВ и был внедрен в производство ООО «Диафармом».

К большому сожалению авторов препарата Эндоглюкин руководство ООО «Диафарм» оказалось неспособным организовать масштабное производство этого перспективного лекарственного средства:

были нарушены интеллектуальные права авторов, свернуто производство на основе выданной Россель хознадзором лицензии, сокращен технический персонал, прекращена работа ОБТК.

Поэтому актуальной задачей для авторов препарата явилось: поиск потенциального инвестора и производителя, восстановление процесса производства.

Перспективным ветеринарным лекарственным препаратом на основе бактериальной эндонуклеазы заинтересовались новосибирские предприниматели, которые предложили авторам этого препарата сот рудничество на условиях лицензионного договора. Для совместной работы по данному направлению бы ло учреждено ЗАО «Велепрес» (что означает «ветеринарные лекарственные препараты и средства»).

Вместе мы постараемся восстановить регистрацию препарата на территории РФ и возобновить его про изводство для применения в пчеловодстве, животноводстве, птицеводстве.

Литература

1. Салганик Р.И., Трухачев А.А., Баталина Т.А. Противовирусное действие дезоксирибонуклеазы и ри бонуклеазы//Ингибиторы вирусной активности. Рига. 1972. С. 147 152.

2. Лекарственные средства, применяемые в медицинской практике в СССР / Под ред. М.А. Клюева. М.:

Медицина, 1989. С. 104, 320 321.

3. А.с. 537512 СССР. МКИ С12N9/10. Способ выделения эндонуклеазы // О.И. Полидорова, Р.И. Салга ник, Л.П. Сенженко, В.К. Старостина. N1780634/13; Заявлено 03.05.72; Опубл. 30.01.84, Бюл. № 4. C.

4.

4. Салганик Р.И., Загребельный С.Н., Грачева С.Ф. и др. Эндонуклеаза бактериальная – средство про филактики вирусного паралича пчел //Ветеринария. 1985. № 5. С. 42 44.

5. А.с. N 1422418 СССР. Способ борьбы с вирусными инфекциями насекомых // П.Л. Талпалацкий, Б.И.

Бондурянская, Р.В. Выборнов и др. N 4073281. Приор. от 02.06.86. Зарег. 08.05.88.

6. Дьяченко С.Н., Галахарь Н.Л., Салганик Р.И. // Изв. СО АН СССР. Серия биол. наук. 1988. № 6. В. 1.

С. 139 143.

7. А.с. N1585328 СССР. A1 MKИ С12 N5/00. Способ выращивания картофеля // И.Г. Атабеков, В.В.

Бойко, Т.И. Волкова и др. N4413537/31 13. Заявлено 20.04.88. Опубл. 15.08.90. Бюл. № 30. С. 4.

8. Батуев Ю.М. Эндонуклеаза и эндоглюкин – сравнивая эффективность // Пчеловодство. 1992. № 7 8.

C. 18 19.

9. Аликин Ю.С., Масычева В.И., Клименко В.П. и др. Эндоглюкин, препарат против вирусных заболева ний // Пчеловодство. 1996. № 4. C. 17 19.

10. Батуев Ю.М. Вирусные болезни пчел // Пчеловодство. 1996. № 2. С. 34 35.

БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПОСЛЕДСТВИЯ ОХЛАЖДЕНИЯ ПЧЕЛИНЫХ МАТОК

Еськов Е.К., декан факультета охотоведения и биоэкологи, профессор, д.б.н., заслуженный деятель науки и техники РФ, Российский государственный аграрный заочный университет, г. Балашиха, e mail:ekeskov@yandex.ru Как известно, пчелы под действием охлаждения впадают в состояние оцепенения. В таком состоянии у них резко замедляются обменные процессы и прекращается потребление корма, содержащегося в медовых зобиках. Но в состоянии холодового оцепенения продолжительность жизни ограничивается несколькими днями (Еськов, 1992, 1995).

В естественных условиях матки редко охлаждаются до состояния оцепенения. Это возможно, когда резкие осенне зимние похолодания застают маток в периферических межсотовых пространствах и вы нуждают задерживаться в них. Вероятность охлаждения маток возрастает с уменьшением численности пчел в семьях.

На охлаждение до температуры, стимулирующей холодовое оцепенение, матки подобно рабочим пчелам и трутням вначале реагируют активизацией локомоций. В этом выражается их стремление поки нуть зону с неблагоприятной температурой. Находясь в условиях, не позволяющих мигрировать из неб лагоприятной зоны, они вначале прекращают перемещаться, после чего быстро цепенеют. Так, матки, на ходящиеся в сетчатой клетке размером 1,5х5х3 см, реагируют на охлаждение до +4±1oС активным пере мещением в течение 7±0,8 мин. Остановившись, матки продолжают в течение 2 3 мин. двигать брюшком, крыльями и ногами. После чего остаются неподвижными в течение всего времени охлаждения, стимули ровавшего оцепенение.

Наличие в одной клетке с охлаждаемой маткой нескольких пчел (5 7) не влияет на скорость ее оце пенения. В такой ситуации пчелы индифферентно относятся к своей матке. Они не проявляют интереса к матке в то время, когда она подобно пчелам беспорядочно перемещается в клетке. Остановка и следую щее за этим оцепенением матки также не привлекает к ней пчел. Те из них, которые сохраняют актив ность дольше матки, продолжают активно передвигаться, а затем цепенеют в разных частях клетки. Та кие небольшие группы пчел, несмотря на присутствие матки, не предпринимают попытки агрегироваться и обогревать матку.

Оцепеневшие матки, активизируясь под влиянием разогрева, совершают вначале слабые движе ния ногами, сгибая и разгибая их вдоль тела. Повышение активности происходит после того, как матка, встав на ноги, поднимет тело. Чаще всего полному возобновлению локомоторной активности предшест вуют колебательные движения (раскачивания) тела из стороны в строну. Амплитуда этих колебаний дос тигает 2 4 мм. В этом динамика активизации маток и рабочих пчел в значительной мере совпадают.

Продолжительность активизации маток зависит от температуры и экспозиции охлаждения. В слу чае охлаждения в течение 15 мин. при 2,5±0,5oС активизация при 26±1oС происходит примерно за 6 мин.

Увеличению продолжительности охлаждения вдвое сопутствует увеличение затрат времени на активиза цию в 1,5 раза. Пчелы, оцепеневшие вместе с матками, активизируются обычно позже. Например, матки, находившиеся в течение 5 мин. при +4±1oС активизируются в среднем за 2,6 мин., а находившиеся с ни ми пчелы – за 3,3 мин.

Небольшие группы (до 10) пчел, оцепеневших вместе с маткой, после восстановления локомоций не проявляют к ней интереса. Но матка, возвращенная в гнездо после охлаждения до состояния оцепе нения, привлекает пчел. Аттрактивность к матке возрастает по мере ее активизации. Наибольшее коли чество пчел локализуется у матки перед полным восстановлением ее локомоторной активности. В это время их численность может превосходить свиту до оцепенения в 3 5 раз. В окружении пчел при 28±2oС активизации маток, находившихся в течение 1 ч при +5±0,5oС, происходит за 6±1 мин., а при 6±0,5oС – за 17±2 мин.

Охлаждение до температуры, не обладающей выраженной летальной эффективностью, может мо дифицировать репродуктивную функцию маток. Вероятность этой модификации возрастает с понижени ем температуры и увеличением экспозиции охлаждения. Не обнаружено изменения репродуктивной функции 1 3 суточных маток, охлаждавшихся до 0,5±0,5oС в течение 1 ч. Через несколько дней после возвращения этих маток в безматочные пчелиные семьи, они спаривались с трутнями и через некоторое время начинали откладывать оплодотворенные яйца. Не обнаружено так же влияния на плодовитость ох лаждения овулирующих разновозрастных маток до +5±0,5oС в течение 1 ч.

Задержку яйцекладки стимулирует длительное охлаждение при минусовой температуре. От нее и экспозиции охлаждения зависит продолжительность периода от активизации до начала яйцекладки. В пе риод этой репродуктивной диапаузы активизировавшиеся матки предпринимают попытки откладывать яйца, перемещаясь по сотам и опуская брюшко в ячейки. Но это характерное для яйцеклетки поведение не завершается яйцекладкой.

Она задерживается на 42±6 ч у маток, охлаждавшихся в течение 1 ч при 1., ±0,5oС. После такой же экспозиции при 6±0.5oС репродуктивная диапауза достигает 65±9 ч. В даль нейшем эти матки в течение 4 5 недель уменьшают репродуктивную активность, полностью прекращая откладку оплодотворенных яиц. Максимум репродуктивной активности, достигающий 320 57 яиц в сутки, приходится обычно на 7 9 сутки после охлаждения. Показателем нарушения яйцекладки служит отклад ка по два, реже – по три яйца в одну ячейку. Пчелы же оставляют в ячейке одну развивающуюся особь или уничтожают всех.

Охлаждение маток до температуры близкой к их замерзанию оказывало существенное влияние на состояние их потомства. У маток, охлаждавшихся при 6oС, примерно 50% потомства погибало на эмбри ональной и постэмбриональной стадиях развития. Однако у пчел, доживавших до стадии имаго, обнару жено увеличение в среднем на 2.3% длины передних крыльев, на 2% длины хоботков и на 2.5% ширины 4 х тергитов. Тенденция укрупнения пчел наблюдалась соответственно уменьшению плодовитости маток.

У трутней, развивавшихся из яиц, отложенной маткой через 1.5 2 месяца после охлаждения или на 2 й и 3 й годы ее жизни, обнаружено значительное уменьшение размеров тела. Длина их крыльев умень шалась в среднем на 10%, хоботков – на 7, а ширина 4 х тергитов – на 16%. Существенно уменьшались размеры гениталий (длина рожков – в 1.9, хитиновых пластин и луковиц – в 2 раза). Эти изменения обус ловлены тем, что трутни развивались в ячейках рабочего типа. Как известно, в норме матки откладыва ют неоплодотворенные яйца в крупные ячейки трутневого типа.

Неоплодотворенные яйца охлаждавшиеся матки откладывают обычно до последних дней жизни в течение всего сезона репродуктивной активности и погибают чаще всего в конце лета, начале осени. Не которые матки, пережившие зимовку, в течение следующего весенне летнего сезона возобновляли реп родуктивную функцию, но откладывают только неоплодотворенные яйца преимущественно в ячейки для рабочих пчел.

Пчелы, пережившие зиму с охлаждавшимися матками, очевидно, адаптируются к их репродуктивной неполноценности. Показателем этого служит то, что пчелы доращивают интродуцируемый в их гнезда раз новозрастный расплод из других семей, не предпринимая попытки замены охлаждавшихся маток (не отстраивают на открытом расплоде маточников). По видимому, охлаждение не стимулирует полного прек ращения секреции маточного вещества. Вероятнее всего его недостаток пчелы испытывают только в пе риод завершения откладки матками оплодотворенных яиц. Поэтому замена охлаждавшихся маток наибо лее вероятна в период снижения их репродуктивной активности при откладке оплодотворенных яиц.

Таким образом, охлаждение маток до состояния холодового оцепенения в области температур, зна чения которых приближаются к температуре максимального переохлаждения приводит к утрате способ ности откладывать оплодотворенные яйца. Этому сопутствует снижение плодовитости. С откладкой ох лажденными матками яиц преимущественно в ячейки рабочего типа сопряжено воспроизводство трутней не соответствующих средней норме. Поэтому охлаждать маток, что рекомендуется для получения спер мы трутней (Богомолов, Борадачев, Грабски, 2012), биологически нецелесообразно.

Литература

1. Еськов Е.К. Микроклимат пчелиного жилища. М.: Россельхозиздат. 1983. 191 с.

2. Еськов Е.К. Экология медоносной пчелы. Рязань. 1995. 392 с.

3. Богомолов К., Борадачев А., Грабски Е. Подготовка спермы трутней для инструментального осеме нения пчелиных маток (практическая инструкция) // www. apiworld.ru

4. Еськов Е.К. Температура максимального переохлаждения у медоносных пчел и ее филогенетичес кая специфичность // Известия АН СССР. Сер. биол. 1984. № 4. С. 535 – 542.

МОЛЕКУЛЯРНО ГЕНЕТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВИРУСА

МЕШОТЧАТОГО РАСПЛОДА ПЧЁЛ

Батуев Ю.М., Ломакина Н.Ф.

ВНИИ экспериментальной ветеринарии им.

Я.Р. Коваленко, г. Москва Мешотчатый расплод – одна из распространенных вирусных болезней пчел, которая регистрируется на всех кон тинентах (Aubert, Ball et al., 2008). Сведения по мешотчатому расплоду в СССР известны, начиная с первой поло вины прошлого века. По результатам исследований патологического материала, поступающего в ВНИИ экспе риментальной ветеринарии, вирус мешотчатого расплода является наиболее частой причиной гибели пчелино го расплода на пасеках многих регионов, в том числе крупных пчелоразведенческих хозяйств. Подробности мож но найти в статье «Мешотчатый расплод» (Пчеловодство 2010, № 10). В настоящей работе приведены новые све дения о клинических признаках болезни и новые данные по генетическим особенностям ее возбудителя.

В справочниках по болезням пчел обычно приводят классические признаки мешотчатого распло да – это погибшие личинки пчел в виде мешочков, заполненных жидкостью. Однако обнаружить таких личинок можно только в случае тяжёлого протекания болезни. Часто в семьях пчёл, неблагополучных по мешотчатому расплоду, найти больных и погибших личинок почти невозможно. Пчёлы обнаруживают их и оперативно удаляют из улья.

Специалист по болезням пчел L. Bailey (Англия) проводил эксперименты по инкубации печатного расплода в термостате при отсутствии взрослых пчел. Был использован расплод из разных семей пасе ки, неблагополучной по мешотчатому расплоду. Установлено, что до 6% личинок могут погибать от этого вируса даже в семьях, которые казались абсолютно здоровыми. Таким образом, при невысокой степени поражения болезнь может оставаться незамеченной.

Известно, что кроме личинок рабочих пчел вирус может поражать личинок трутней. Однако в дос тупной литературе мы не нашли сведений о том, что именно на трутнёвом расплоде легче заметить бо лезнь, когда она протекает в лёгкой форме. Нами отмечено, что пчелы менее оперативно удаляют погиб ших личинок трутней (видимо из за более тяжелого веса), а погибших куколок трутней часто разгрызают и выбрасывают по частям. Так же как и у личинок рабочих особей, гибель личинок трутней происходит после их запечатывания. Пчелы распознают ячейки с погибшими личинками и вскрывают их.

В норме открытые личинки лежат колечком на дне ячейки. Только после запечатывания они вытя гиваются и начинают прясть кокон. Вытянувшиеся личинки в открытых ячейках указывают на патологию.

У пчеловодов выбрасывание личинок и куколок трутней обычно не вызывает особой тревоги. Счи тается, что это нормально. Пчелы, потратив столько сил на выращивание личинок трутней и доведя их до кондиции, вдруг одумались и решили выбросить этих дармоедов. На самом деле нормально, когда пче лы изгоняют трутней ближе к осени. В разгар сезона выбрасывание трутнёвого расплода указывает на болезнь. Скорее всего, то же самое происходит и с личинками рабочих особей, но менее заметно.

Иногда личинки, заражённые вирусом мешотчатого расплода, не погибают на стадии прядения ко кона, переходят в стадию предкуколки и долго остаются живыми. У них не накапливается жидкость под личиночной кутикулой. Внешне они выглядят нормально и на первый взгляд непонятно, почему пчелы вскрывают их ячейки. Однако если присмотреться, то у некоторых предкуколок сквозь личиночную кути кулу можно увидеть пигментированные глаза. В норме у личинок нет органов зрения. Зачатки конечнос тей и глаза появляются у предкуколок под личиночной кутикулой, но они белые. Даже после завершения стадии предкуколки, сбрасывания личиночной кутикулы и образования куколки, её тело некоторое время лишено пигментации. В доступной литературе мы не нашли сведений о том, что на стадии предкуколки может происходить пигментация глаз.

Для доказательства того, что личинки и предкуколки содержат вирус мешотчатого расплода, мы ис пользовали реакцию иммунодиффузии (РИД). Для идентификации вирусов пчёл эта серологическая ре акция была впервые использована L. Bailey. Нами было показано, что предкуколки с пигментированными глазами содержат вирус в большом количестве.

Следовательно, вирус мешотчатого расплода даже при интенсивном размножении в некоторых случаях не затрагивает жизненно важных органов. Предкуколка долго остаётся живой, но её метаморфоз нарушается. В вышеприведённом примере практически все ор ганы (кроме глаз) остановились в своём развитии. В других случаях куколка все же образуется, но с яв ными уродствами (нарушены пропорции между головой, грудью и брюшком, отсутствуют конечности). Ку колка, поражённая вирусом, может и не иметь никаких внешних дефектов. Таким образом, вирус мешот чатого расплода вызывает гибель не только личинок старшего возраста, но предкуколок и куколок. Пче лы старше 8 дней невосприимчивы к вирусу мешотчатого расплода. Более молодые пчёлы могут зара жаться и становятся вирусоносителями, какие либо видимые симптомы болезни у них отсутствуют, но на рушается функция сбора пыльцы и сокращается продолжительность жизни.

В 1960 70 гг L. Bailey с помощью РИД исследовал большое количество образцов личинок европейс кой пчелы A. mellifera, собранных в разных странах, и не выявил серологических различий между обнару женными в них изолятами вируса мешотчатого расплода. Вирус с небольшими отличиями физико хими ческих и серологических свойств был выделен L. Bailey et al. в 1982 г от погибших личинок азиатской пче лы Apis cerana, привезенных из Таиланда, и назван тайским вирусом мешотчатого расплода. В тот пери од тайский вирус мешотчатого расплода был широко распространен в семьях A. cerana в Таиланде, Бир ме, Индии и Непале, где вызывал массовую гибель пчелиных семей, которая достигала 90 95%.

Ареалы европейских и азиатских пчел на протяжении многих тысяч лет не совпадали. Массовый за воз европейских пчел в ареал азиатских произошел в прошлом веке. По отдельным сведениям, первые случаи интродукции пчел датируются более ранним периодом, например, в Японию европейскую пчелу впервые завезли в 1877 г. (Kojima et al, 2011). Пчел этих двух видов местные пчеловоды часто содержа ли на одних и тех же пасеках, где возможно и произошел переход некоторых возбудителей болезней с од ного вида пчёл на другой с дальнейшей адаптацией к новому хозяину. С вирусом мешотчатого расплода этого не произошло. В лабораторных условиях L. Bailey удалось заразить куколок европейской пчелы ви русом тайского мешотчатого расплода. Однако в естественных условиях для этого вируса, скорее всего, существует видовой барьер (Kojima et al, 2011; Se Eun Choe et al, 2011): у каждого вида пчел циркулиру ет только «свой» вирус.

По данным филогенетических исследований области РНК полимеразы вирусов мешотчатого расп лода, изолированных в разных географических местах и от разных видов пчел, выделяют три генотипа вируса: южно африканский, европейский и азиатский* [3].

Что представляют собой штаммы вируса мешотчатого расплода, циркулирующие среди пчёл на тер ритории России, до недавнего времени оставалось неизвестным. Это и побудило нас провести исследова ния на молекулярно генетическом уровне материала, в котором ранее методом РИД был установлен вирус мешотчатого расплода. Материал был собран в разные годы на пасеках Ставропольского Края (район Кис ловодска), Республики Адыгея (Майкоп), Калужской, Оренбургской, Архангельской и Московской областей (в том числе от семей пчел, завезённых из Узбекистана). Материал хранился в замороженном или лиофи лизированном виде. Исследовали также лабораторный штамм Tr5 вируса мешотчатого расплода, культиви руемый на куколках пчел и трутней методом микроинъекции. Идентификацию вируса проводили методами РИД и ПЦР (полимеразная цепная реакция). В РИД использовали сыворотки собственного производства, которые были получены иммунизацией кроликов вирионами, выделенными из погибших личинок с клини ческими признаками мешотчатого расплода из Калужской области (сыворотка № 6), и вирионами, выделен ными от погибших пчел с деформированными крыльями из Таджикистана (сыворотка № 58).

Образцы сывороток были отправлены в Великобританию (Rothamsted Experimental Station, Harpenden, Hertfordshire, UK), где их тестировала доктор Brenda V. Ball в РИД с разными вирусами пчел.

Сыворотка № 6 давала положительный результат только с эталонным штаммом Rothamstead вируса ме шотчатого расплода* (титр антител 1:128). Сыворотка № 58 не реагировала с этим штаммом, но реаги ровала с вирусом деформации крыльев (титр антител 1:64).

В ПЦР материал исследовали со специфическими праймерами к вирусам мешотчатого расплода (Tentcheva, 2004; Grabensteiner, 2001), деформации крыльев (Maori, 2007; Berenyi, 2006), острого парали ча (Tentcheva, 2004), Кашмир (Stoltz et al.,1995; Maori, 2007), черных маточников (Maori, 2007).

Во всех исследованных образцах подтверждено наличие вируса мешотчатого расплода. В двух про бах выявили присутствие одновременно двух вирусов – мешотчатого расплода и деформации крыльев.

Никакие другие вирусы из вышеперечисленных в исследованных пробах не обнаружили.

Для трех изолятов и лабораторного штамма вируса мешотчатого расплода была определена пер вичная структура фрагмента РНК полимеразы (последовательности зарегистрированы в международной базе данных GenBank под номерами JN83572 JN83575) и проведен филогенетический анализ. На полу ченной филограмме можно выделить 4 группы, или генотипа, из которых группы 1 3 были впервые опи саны Grabensteiner et al. (2001). Европейский генотип (группа 1) с эталонным штаммом из Великобрита нии объединяет вирусы Центральной Европы (Германия, Франция, Австрия, Венгрия, Испания) и Великоб ритании. В этой же группе вирусов оказались изоляты 207/4 и 212/3, выделенные в России (Московская обл. и Кисловодск, соответственно), гомология между которыми составляет 99%. Ближайшие их родственники присутствуют в Германии и Франции.

К азиатскому генотипу (группа 2) принадлежат вирусы из Южной Кореи, Китая, Непала, Индии и Японии. Среди них находится и тайский вирус мешотчатого расплода. Южноафриканский генотип (груп па 3) представлен одним изолятом из Южной Африки.

На обособленной ветви (группа 4) оказались два наших изолята: лабораторный штамм Tr5 и изолят 202/8, выделенный от семьи пчел, завезенной из Узбекистана. Гомология между ними составляет 94,2%, в то время как с представителями других групп она не превышает 80,6 83,5%.

Генетическое расстояние в пределах одной группы колеблется от 0,01 (группа 2) до 0,06 (группы 1 и 4), а между группами от 0,1 (группы 1 и 2) до 0,25 – 0,28 (группы 3 и 4). На этом основании группа 4 мо жет быть выделена в самостоятельный генотип.

* Термин предложен Se Eun Choe et al. (2011) вместо использованного ранее «дальневосточного ге нотипа» (Grabensteiner et al, 2001).

* Структура полного генома приведена в Genbank (AF092924). Штамм имеет европейский генотип.

Исследуемые в настоящей работе изоляты 1 ой и 4 ой генетических групп вируса мешотчатого расплода по разному вели себя в РИД с сыворотками № 6 и № 58. Все изоляты 1 и 4 геногрупп, положи тельно реагировали с сывороткой № 6 подобно эталонному штамму Rothamstead (Великобритания) виру са мешотчатого расплода европейского генотипа. C сывороткой № 58 положительно реагировали только изоляты 4 геногруппы вируса мешотчатого расплода и изоляты вируса деформации крыльев. В перекрё стной реакции между вирусом мешотчатого расплода 4 геногруппы и вирусом деформации крыльев се рологического родства не выявлено. Таким образом, в наших экспериментах было установлено, что сы воротка № 58 содержит антитела не только к вирусу деформации крыльев в титре 1:64, но и к вирусу ме шотчатого расплода генотипа 4 в титре 1:8. С вирусом мешотчатого расплода европейского генотипа (группа 1) реакция отсутствовала, что согласуется с данными B.V.Ball (см. выше). По всей видимости, ма териал из Таджикистана, который использовали для получения сыворотки № 58, содержал два морфоло гически схожих вируса – деформации крыльев и мешотчатого расплода генотипа 4.

На основании проведенных исследований можно сделать вывод о существовании двух генотипов вируса мешотчатого расплода у пчел A. mellifera на территории Российской Федерации. Один из них при надлежит европейской группе. Второй образует самостоятельную группу 4, ранее никем не описанную, которая занимает промежуточное положение между вирусами азиатского (гр.2) и южноафриканского (гр.3) генотипов.

Источником вируса мешотчатого расплода генотипа 4 в одном случае была семья пчел из Узбекис тана (изолят 202/8), в другом (материал, используемый для иммунизации) из Таджикистана (сыворотка № 58). Тем не менее, мы воздерживаемся от присвоения генотипу 4 вируса мешотчатого расплода названия по территориальному признаку (например, среднеазиатский), поскольку слишком мало данных имеется о его распространении. Подробную информацию о материалах и методах наших исследований можно най ти в журнале «Молекулярная генетика, микробиология и вирусология», 2012, №3.

Литература

1. Батуев Ю.М. // Пчеловодство. 2010.– №10. С. 24 27.

2. Ломакина Н.Ф., Батуев Ю.М. // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология, 2012, № 3 (в печати).

3. Grabensteiner E, Ritter W, Carter MJ. et al. //Clin Diagn Lab Immunol. 2001. V.8 (1).P. 93 104.

АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ПОВЫШЕНИЯ АДАПТИВНОГО

ПОТЕНЦИАЛА МЕДОНОСНОЙ ПЧЕЛЫ APIS MELLIFERA В УСЛОВИЯХ

ПАСЕЧНОГО СОДЕРЖАНИЯ

Салтыкова Е.С, Николенко А.Г.

Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН, г. Уфа Среди важнейших проблем современности, возникших в результате технократического подхода к приро де – важнейшее значение приобретают экологические проблемы, связанные с загрязнением окружаю щей среды, нарушением равновесия в природе, истощением энергетических и сырьевых ресурсов. Медо носные пчелы расселились почти по всей нашей планете. Они живут как в районах с холодным климатом, где зимы продолжительные и суровые, так и в тропиках. Приспособляемость к разным климатическим и природным условиям оказалась поразительной. Под влиянием климата и особенностей медоносной фло ры исторически складывались и разные подвиды пчел, отличающиеся друг от друга по внешнему виду, характеру и некоторыми морфологическим признакам. Особенно большие различия наблюдаются меж ду южными и северными пчелами. По мнению Н.Н. Гранкина, все подвиды пчел, обитающие на террито рии России – это наш золотой фонд. Его надо беречь и уважать. Необходимо считаться с биологически ми особенностями каждой подвида и не ставить их в несвойственные им природно климатические усло вия. Южанки – для юга, северянки – для севера. И с этим нельзя не согласиться.

В нашей стране обитает несколько очень ценных подвидов пчел, из которых самое широкое расп ространение получила среднерусская лесная. Обитают эти пчелы в северо западных и центральных районах страны, на Урале, в Сибири, на Дальнем Востоке. Естественное их расселение, как полагают, было приостановлено Уральскими горами. Они универсальны в использовании взятков, быстро на них реализуются. Обусловлено это средой, в которой формировался подвид, – обилием древесной и травя нистой медоносной флоры. Эти пчелы превосходно работают буквально на всех древесных, кустарнико вых и травянистых растениях, выделяющих нектар и пыльцу. Особенно много меда собирают с сильных нектароносов. Рекордные медосборы с липы и кипрея принадлежат этим пчелам. Их по праву считают и лучшими опылителями гречихи. Однако вырубка лесов, а также массовый завоз и разведение пчел южных подвидов на пасеках негативно влияют на уникальный генофонд среднерусской лесной пчелы и ее адаптивный потенциал, это часто наблюдается в условиях пасечного содержания, что приводит к сни жению зимостойкости и устойчивости к заболеваниям.

Одной из важнейших задач отрасли пчеловодства является не только увеличение объема произво дства продукции пчеловодства, но и совершенствование существующих и разработка новых технологий получения экологически чистых продуктов, а также новых способов повышения адаптивности и продук тивности медоносной пчелы. В рамках данных проблем поиск методов повышения устойчивости медонос ных пчел к болезням и другим неблагоприятным факторам окружающей среды (резкие колебания темпе ратуры, действие токсикантов) продолжает оставаться одной из главных задач как прикладных, так и фундаментальных исследований.

Успешное содержание и разведение пчел возможно только при активной помощи со стороны чело века. Медоносная пчела очень давно стала объектом интенсивного использования, пчеловоды постоянно вмешиваются во все процессы, идущие в пчелосемьях, в надежде на повышение их продуктивности. Не поддаются перечислению все способы, когда либо применявшиеся в пчеловодстве для этой цели; можно лишь отметить основные направления работы, как экспериментальной, так и практической: это селекция по хозяйственно полезным признакам – зимостойкости, устойчивости к заболеваниям, продуктивности и т.п., разработка различных приспособлений, обеспечивающих лучшие условия содержания семей, а так же применение средств, позволяющих как подавить патогены, так и повысить жизнеспособность самих пчел. Именно последнее направление до недавнего времени вносило незаслуженно малый вклад в нау ку и практику пчеловождения. Однако уже в 70 х годах сотрудниками лаборатории Г.Ю. Ишмуратова Инс титута органической химии Уфимского научного центра были начаты разработки технологичных схем син теза аналогов природных биостимуляторов, основанных на компонентах маточного молочка (эктогормо нах) пчелиной матки, а также других природных биостимуляторов, таких, как паратирозол (синтетический аналог активного компонента экстракта из корня родиолы розовой). В настоящий момент ряд синтетичес ких аналогов этих природных веществ уже применяется пчеловодами: это препараты биосил, аписил, кандисил, апирой, уфамил и тирозан. Однако следует отметить, что биологически активные вещества, как показывает многолетний опыт, зачастую обладают множественными эффектами, и исследования их в лабораторных условиях с применением современных методов позволяют эти эффекты выявить. Пос кольку издавна известно, что внутренние резервы как одиночной пчелы, так и тем более целостной семьи пчел направлены также именно на эту цель, то несомненно, что детальное изучение тонкого механизма действия таких компонентов регуляторной системы организма пчелы, как эктогормоны, и в особенности

– маточное молочко, содержащее богатейший набор веществ с трофической, защитной и определяющей направление развития особи функциями, очень актуально. Как принято считать, в пчелиной семье основ ное назначение этого эктогормона – направленное воспитание матки. Это говорит о несомненном гона дотропном действии его, но, по видимому, этим не ограничиваются его возможные эффекты.

В наших экспериментах синтетический аналог компонента эктогормона (в частности, препарат апи сил) оценивался в первую очередь как иммуностимулятор, позволяющий перенести бактериальную ин фекцию. Пчелы, содержавшиеся в лабораторных условиях в капроновых садках размером 30х30х30 см?

(не менее чем по 100 особей) получали корм (60 % ный сахарно медовый сироп) с добавлением препара тов аписил в различных концентрациях (от 0,0001% до 0,2% по препарату) в течение 5 7 суток, после че го в течение 24 часов их содержали на корме с добавкой бактериального препарата на основе Bacillus thuringiensis (битоксибациллин, БТБ) в концентрации 0,5%. В контрольном варианте пчелам давали сироп без добавления биостимуляторов. Наблюдения за пчелами велись 10 суток, оценивалась выживаемость пчел как в опытном, так и в контрольном вариантах. В этих экспериментах было неоднократно подтверж дено иммуностимулирующее влияние аписила: этот препарат способствовал выживанию 58 74% особей по сравнению с 44 56% в вариантах без аписила.

Кроме иммуностимулирующего эффекта в лабораторных экспериментах по перенесению рабочи ми пчелами гипотермии было обнаружено адаптогенное действие аписила.

Пчел подкармливали сиропом с добавлением аписила (0,2%) в течение 7 8 суток, после чего подвергали их экспозиции при 13?С в те чение 15 минут. После завершения экспозиции при низкой температуре проводили наблюдения в тече ние недели, и оценивали выживаемость пчел. В этих экспериментах добавление аписила повышало вы живаемость пчел на 48 49% по сравнению с контрольным уровнем. Все эти результаты свидетельствуют о мощном адаптогенном влиянии аписила, по видимому, опосредующемся через нейроэндокринную сис тему насекомых и стабилизирующем их внутреннюю среду, что удалось показать и на уровне фермента тивной активности, в частности, активности ДОФА оксидазы, являющейся одним из показателей разви тия защитного ответа. Если в вариантах с БТБ без добавки биостимуляторов активность ДОФА оксида зы сильно снижена по сравнению с контрольным вариантом, то при предварительном содержании на кор ме с добавкой аписила активность фермента сохраняется на достаточно высоком уровне, несколько пре вышающем контрольный. Также увеличивалась активность антиоксидантных ферментов в первые 4 часа действия БТБ на фоне предварительного действия аписила. Аналогичные результаты были получены и в экспериментах с краткосрочным действием на пчел не только низкой, но и высокой температуры (50oС в течение 30 минут).

Все полученные нами результаты свидетельствуют об универсальном адаптогенном влиянии апи сила, и возможно, что применение его в практике пчеловодства не должно ограничиваться только исполь зованием для усиления приема личинок на маточное воспитание. Скорее всего, тонкие механизмы адап тогенного воздействия аписила непосредственно связаны со стабилизацией деятельности всего регуля торного аппарата, начиная с ЦНС и ее триггерного отдела – нейросекреторных клеток мозга насекомых.

НОЗЕМАТОЗ МЕДОНОСНЫХ ПЧЁЛ НА ПАСЕКАХ РОССИИ

Зинатуллина З.Я.1, Жигилева О.Н.2, Игнатьева А.Н.3, Токарев Ю.С.4 1 ВНИИ ветеринарной энтомологии и арахнологии РАСХН, г. Тюмень, nosema4@mail.ru 2 Тюменский государственный университет, г. Тюмень 3 ВНИИ защиты растений РАСХН, г. Санкт Петербург 4 ВНИИ защиты растений РАСХН, г. Санкт Петербург Оценивая результаты зимовки, пчеловоды нередко обнаруживают ослабленные пчелиные семьи, сы рость внутри гнезда, опоношенность внутренних стенок улья, а в некоторых случаях гибель маток. При чиной такого состояния может быть бактериальная кишечная инфекция, недоброкачественные корма в период зимовки, а также классическое проявление нозематоза. Для уточнения диагноза необходимо ис следовать пробы пчел на нозематоз, а корма на падь и наличие веществ токсичных для пчел.

Впервые на возбудителя этого заболевания обратил внимание Денгофф Лейкарт, который в 1857 году принял их за споры грибов. В 1863 году Лейдик выявил их сходство по форме со спорами пебрины шелковичного червя – Nosema bombycis. В 1906 и 1907 гг. почти одновременно возбудителем заинтере совались английские исследователи и Е. Цандер. (Цандер, 1927). В 1909 году Е. Цандер опубликовал статью с описанием возбудителя Nosema apis.(Zander, 1909). До 70 х годов было проведено много иссле дований вышеназванного патогена пчёл. В 1996 г. был описан новый возбудитель нозематоза – Nosema ceranae (Fries et al., 1996), выделенный из дальневосточной пчелы Apis cerana. С начала 2000 годов по всему миру прокатилась волна гибели пчелиных семей. (Higes et al., 2005; Chauzat, 2005). В России на эту проблему пчеловоды обратили внимание в 2002 году (Сотников, Гробов, 2003), когда на многих пасеках наблюдался «осенний слет» пчел. При анализе причин такого явления наряду с варроатозом, вирусными заболеваниями и отравлениями, не исключалось патогенное воздействие нового возбудителя ноземато за – N. ceranae (Higes et al., 2005). N. ceranae распространен почти во всем мире (Higes et al., 2005; Fries et al., 2010; Klee et al., 2007; Paxton et al., 2007; Chen et al., 2008; Chauzat, 2005). По мнению ряда авторов, вновь выявленный возбудитель нозематоза вытесняет N. apis из популяции медоносных пчел (Klee et al., 2007; Paxton et al., 2007). Исследования показывают, что N. ceranae уже длительное время существовал на пасеках: в США с 1995 года (Chen et al., 2008), в Европе (Финляндии) с 1998 года (Paxton et al., 2007).

В настоящее время в России в ветеринарных лабораториях нозематоз диагностируют в соответ ствии с официально утвержденными «Методическим указаниям по лабораторным исследованиям на но зематоз медоносных пчёл», утвержденными 25 апреля 1985 года.

При работе с пчелами, зараженными возбудителями нозематоза, мы обнаружили, что споры разли чаются по форме и размерам, и предположили их принадлежность к двум разным видам. В связи с этим мы провели их морфометрию и генотипирование.



Pages:     | 1 |   ...   | 3 | 4 || 6 | 7 |   ...   | 9 |

Похожие работы:

«Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Воронежский государственный аграрный университет имени императора Петра I» Государственное научное учреждение «Научно-исследовательский институт экономики и организации АПК ЦЧР России Россельхозакадемии» Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия имени В.Я. Горина»...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Кубанский государственный аграрный университет» ИТОГИ НАУЧНОИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОЙ РАБОТЫ ЗА 2013 ГОД Материалы научно-практической конференции преподавателей 15 апреля 2014 года Краснодар КубГАУ УДК 001.8 «2013»(063) ББК 72 И Редакционная коллегия: А. И. Трубилин, А. Г. Кощаев, А. И. Радионов, И. А. Лебедовский, А. А. Лысенко, В. Т. Ткаченко,...»

«Министерство сельского хозяйства Российской Федерации Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия Факультет лесного хозяйства «ЛЕСНОЕ ХОЗЯЙСТВО – 2013.АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ И ПУТИ ИХ РЕШЕНИЯ» МЕЖДУНАРОДНАЯ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ ИНТЕРНЕТ-КОНФЕРЕНЦИЯ 6 декабря 2013 года – 6 января 2014 года ОРГАНИЗАТОРЫ КОНФЕРЕНЦИИ: Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РФ ДЕПАРТАМЕНТ НАУЧНО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКОЙ ПОЛИТИКИ И ОБРАЗОВАНИЯ ФГБОУ ВПО КОСТРОМСКАЯ ГСХА ТРУДЫ КОСТРОМСКОЙ ГОСУДАРСТВЕННОЙ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОЙ АКАДЕМИИ Выпуск 74 КОСТРОМА КГСХА УДК 631 ББК 40 Редакционная коллегия: Бородий С.А., Кузнецов С.Г., Парамонова Н.Ю., Полозов С.А., Сидоренко Ю.И., Репина Т.В., Рожнов А.В., Яцюк И.А. Ответственный за выпуск: Филончиков А.В. Труды Костромской государственной сельскохозяйственной академии. — Выпуск 74. — Кострома : КГСХА,...»

«Министерство сельского хозяйства Российской Федерации Министерство сельского хозяйства Республики Башкортостан ФГБОУ ВПО Башкирский государственный аграрный университет ООО «Башкирская выставочная компания» ИНТЕГРАЦИЯ НАУКИ И ПРАКТИКИ КАК МЕХАНИЗМ ЭФФЕКТИВНОГО РАЗВИТИЯ АПК Часть I ЭФФЕКТИВНОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ, ОХРАНА И ВОСПРОИЗВОДСТВО ПРИРОДНЫХ РЕСУРСОВ И ИННОВАЦИОННЫЕ ТЕХНОЛОГИИ ПРОИЗВОДСТВА ПРОДУКЦИИ РАСТЕНИЕВОДСТВА НАУЧНОЕ СОПРОВОЖДЕНИЕ ИННОВАЦИОННОГО РАЗВИТИЯ ЖИВОТНОВОДСТВА И ВЕТЕРИНАРНОЙ...»

«Министерство сельского хозяйства Российской Федерации ФБГОУ ВПО «Вологодская государственная сельскохозяйственная академия имени Н.В. Верещагина» «Первая ступень в науке» Сборник трудов ВГМХА по результатам работы Ежегодной научно-практической студенческой конференции Факультет ветеринарной медицины Вологда – Молочное ББК 65.9 (2 Рос – 4 Вол) П-266 Редакционная коллегия: к.в.н., доцент Рыжакина Т.П. к.б.н., доцент Ошуркова Ю.Л. к.в.н., доцент Шестакова С.В. П-266 Первая ступень в науке. Сборник...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «САРАТОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ Н.И. ВАВИЛОВА» СПЕЦИАЛИСТЫ АПК НОВОГО ПОКОЛЕНИЯ (экономические науки) Сборник статей Всероссийской научно-практической конференции САРАТОВ УДК 378:001.89 ББК 4 М74 М74 Специалисты АПК нового поколения (экономические науки): Сборник статей Всероссийской научно-практической конференции....»

«МЕЖДУНАРОДНАЯ АКАДЕМИЯ НАУК ЭКОЛОГИИ И БЕЗОПАСНОСТИ ЖИЗНЕДЕЯТЕЛЬНОСТИ АКАДЕМИЯ ВОДОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК РФ ТОЛЬЯТТИНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ МЕЖОТРАСЛЕВОЙ НАУЧНО-ИНФОРМАЦИОННЫЙ ЦЕНТР ПЕНЗЕНСКОЙ ГОСУДАРСТВЕННОЙ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОЙ АКАДЕМИИ ПРИРОДНОРЕСУРСНЫЙ ПОТЕНЦИАЛ, ЭКОЛОГИЯ И УСТОЙЧИВОЕ РАЗВИТИЕ РЕГИОНОВ РОССИИ XIII Международная научно-практическая конференция Сборник статей январь 2015 г. Пенза УДК 574 ББК 28.08 П 77 Под общей редакцией: доктора технических наук, профессора...»

«ИННОВАЦИОННЫЙ ЦЕНТР РАЗВИТИЯ ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ INNOVATIVE DEVELOPMENT CENTER OF EDUCATION AND SCIENCE О ВОПРОСАХ И ПРОБЛЕМАХ СОВРЕМЕННЫХ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК Выпуск II Сборник научных трудов по итогам международной научно-практической конференции (6 июля 2015г.) г. Челябинск 2015 г. УДК 63(06) ББК 4я43 О вопросах и проблемах современных сельскохозяйственных наук / Сборник научных трудов по итогам международной научно-практической конференции. № 2. Челябинск, 2015. 22 с. Редакционная...»

«ГРАНТ БРФФИ БЕЛОРУССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ГЕОГРАФИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ ОО «БЕЛОРУССКОЕ ГЕОГРАФИЧЕСКОЕ ОБЩЕСТВО» БЕЛОРУССКИЙ РЕСПУБЛИКАНСКИЙ ФОНД ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ СОВРЕМЕННЫЕ ПРОБЛЕМЫ ЛАНДШАФТОВЕДЕНИЯ И ГЕОЭКОЛОГИИ (к 100-летию со дня рождения профессора В.А. Дементьева) МАТЕРИАЛЫ IV Международной научной конференции 14 – 17 октября 2008 г. Минск УДК 504 ББК 20.1 Т338 Редакционная коллегия: доктор географических наук, профессор И.И. Пирожник доктор географических наук,...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РФ ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «ОРЛОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» БЕЗОПАСНОСТЬ ПРОИЗВОДСТВ АПК: НОВЫЕ ВЫЗОВЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ Сборник материалов Всероссийской научно-практической конференции-выставки 25-26 апреля 2013 г. Орел УДК 331.4: 535.5 Безопасность производств АПК: новые вызовы и перспективы: материалы Всероссийской научно-практической конференциивыставки 25-26 апреля...»

«Федеральное агентство научных организаций России Отделение сельскохозяйственных наук РАН ФГБНУ «Прикаспийский научно-исследовательский институт аридного земледелия» Прикаспийский научно-производственный центр по подготовке научных кадров Региональный Фонд «Аграрный университетский комплекс» Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Волгоградский государственный аграрный университет» ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ И СОЦИАЛЬНОЭКОНОМИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ...»

«Министерство сельского хозяйства Российской Федерации ФГБОУ ВПО «Ульяновская ГСХА им. П.А.Столыпина» Материалы IV Всероссийской студенческой научной конференции (с международным участием) В мире научных открытий 20-21 мая 2015 г. Том VI Часть 1 Ульяновск 2015 Материалы IV Всероссийской студенческой научной конференции (с международным участем) «В мире научных открытий» / Ульяновск: ГСХА им. П.А.Столыпина, 2015. Т. VI. Ч.1. 270 с.Редакционная коллегия: В.А.Исайчев, первый проректор проректор по...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «ПРИМОРСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ» ИНСТИТУТ ЭКОНОМИКИ И БИЗНЕСА ПРОБЛЕМЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ ИННОВАЦИОННОГО РАЗВИТИЯ ЭКОНОМИКИ РЕГИОНА Материалы всероссийской научно-практической конференции, посвященной 55-летию Приморской государственной сельскохозяйственной академии 29-30 ноября 2012 года Уссурийск 20 УДК 001.8 ББК...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РФ МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА ПЕНЗЕНСКОЙ ОБЛАСТИ ПЕНЗЕНСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ГНУ «ПЕНЗЕНСКИЙ НИИСХ» РОСЕЛЬХОЗАКАДЕМИИ МЕЖОТРАСЛЕВОЙ НАУЧНО-ИНФОРМАЦИОННЫЙ ЦЕНТР ПЕНЗЕНСКОЙ ГОСУДАРСТВЕННОЙ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОЙ АКАДЕМИИ ИННОВАЦИОННЫЕ ТЕХНОЛОГИИ В АПК: ТЕОРИЯ И ПРАКТИКА III Всероссийская научно-практическая конференция Сборник статей Март 2015 г. Пенза УДК 338.436.33 ББК 65.9(2)32-4 Н 66 Оргкомитет: Председатель: Кшникаткина А.Н....»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФГБОУ ВПО «САРАТОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМ. Н.И. ВАВИЛОВА» Международная научно-практическая конференция СОВРЕМЕННЫЕ СПОСОБЫ ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНЫХ КАЧЕСТВ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ, ПТИЦЫ И РЫБЫ В СВЕТЕ ИМПОРТОЗАМЕЩЕНИЯ И ОБЕСПЕЧЕНИЯ ПРОДОВОЛЬСТВЕННОЙ БЕЗОПАСНОСТИ СТРАНЫ посвященная 85-летию со дня рождения доктора сельскохозяйственных наук, Почетного работника высшего профессионального образования Российской...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФГБОУ ВПО «Орловский государственный аграрный университет» ИНФОРМАЦИОННОЕ ПИСЬМО Уважаемые коллеги! 10-11 апреля 2014 года в ФГБОУ ВПО «Орловский государственный аграрный Университет» при поддержке Министерства сельского хозяйства Российской Федерации состоится III-я Международная научно-практическая конференция «Особенности технического и технологического оснащения посвященная современного сельскохозяйственного производства», актуальным...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РЕСПУБЛИКИ БАШКОРТОСТАН РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК РОССИЙСКИЙ ФОНД ФУНДАМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «БАШКИРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» ФУНДАМЕНТАЛЬНЫЕ ОСНОВЫ НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОЙ И ТЕХНОЛОГИЧЕСКОЙ МОДЕРНИЗАЦИИ АПК (ФОНТиТМ-АПК-13) Часть II МАТЕРИАЛЫ ВСЕРОССИЙСКОЙ...»

«МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «САРАТОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АГРАРНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ Н.И. ВАВИЛОВА» АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ РАЗВИТИЯ ФИЗИЧЕСКОЙ КУЛЬТУРЫ И СПОРТА В ВЫСШИХ УЧЕБНЫХ ЗАВЕДЕНИЯХ МИНСЕЛЬХОЗА РОССИИ Материалы Международной учебно-методической и научно-практической конференции САРАТОВ УДК 796 ББК 75 Актуальные проблемы и перспективы развития...»

«Федеральное агентство научных организаций России Отделение сельскохозяйственных наук РАН ГНУ Прикаспийский научно-исследовательский институт аридного земледелия Региональный Фонд «Аграрный университетский комплекс» Прикаспийский научно-производственный центр по подготовке научных кадров НАУЧНЫЕ И ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОДХОДЫ В РАЗВИТИИ АГРАРНОЙ НАУКИ (Материалы III Международной научно-практической конференции молодых учёных) Том II Москва – 201 Федеральное агентство научных организаций России...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.