WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 9 |

«РАЗРАБОТКА НОВЫХ СРЕДСТВ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЭШЕРИХИОЗОВ ТЕЛЯТ И ПОРОСЯТ ...»

-- [ Страница 2 ] --

Телята в первые дни жизни лишены иммуноглобулинов – главного фактора защиты, поэтому основным фактором их защиты от желудочнокишечных инфекций выступает молозиво матери, где за пять недель до родов накапливаются защитные антитела из сыворотки крови. При этом иммуноглобулины активно всасываются в тонком отделе кишечника посредством пиноцитоза. Такое свойство кишечника сохраняется после рождения на 24-30 часов, затем происходит перестройка кишечного эпителия. Большей же всасывающей активностью кишечник обладает в первые 6-10 часов после рождения теленка [77, 186, 187, 188, 211].

С целью формирования нормальной микрофлоры кишечника для компенсации физиологического дисбактериоза в первые же дни после рождения с дачей молозива рекомендуется задавать препараты, имеющие в своем составе живую микрофлору кишечника (пробиотики) или продукты их метаболизма, призванные развивать собственную нормальную кишечную микрофлору[42, 43, 179, 180, 214, 215].

Использование пробиотиков энтероспорина и ветома-1.1 в комплексной терапии больных диспепсией телят, ускоряет сроки выздоровления животных на 3-4 суток и повышает эффективность лечения.

При этом у телят леченных пробиотиками энтероспорин и ветом-1.1 происходит нормализация микрофлоры кишечника, отмечается снижение количества энтерококков до 108 КОЕ/г, а изменений со стороны бифидобактерий и лактобацилл не наблюдается [93, 94, 95, 182, 251, 252].

При лечении желудочно-кишечных заболеваний телят и поросят применяли пробиотические препараты «Бифидумбактерин суппозитории», «Лактобактерин», «Окарин», «Лактобифидол» [59, 209, 211, 236, 237, 238, 239, 240]. При применении указанных препаратов авторы констатировали повышение выживаемости на 5-10,6 % уменьшение заболеваемости поросят бактериальными желудочно-кишечными заболеваниями на 11,4-24 %, у поросят же на 10-14,3 и 27-66,6 % соответственно. У молодняка, получавшего препарат, отмечалось достоверное повышение уровня белка, в частности его глобулиновых фракций. При применении препарата «Лактобифадол» повышалась и фагоцитарная активность клеток крови, что свидетельствует о его стимулирующем влиянии на неспецифическую резистентность организма.

При испытании влияния препарата «Стрептобифида-форте» на способность иммунной системы к клеточному и гуморальному иммунному ответу, было установлено, что гуморальное образование антител вызывается активизацией всех клеток иммунной системы организма. При даче новорожденным телятам пробиотического препарата «Байкал ЭМ-1» на основе симбиотического комплекса из 86 штаммов микроорганизмов, большую часть из которых составляют молочнокислые бактерии и компоненты-антогонисты гнилостной микрофлоры, обеспечивается защита желудочно-кишечного тракта молодняка от вредных микробов а также восстанавливается нормальная кишечная микрофлора. При этом указанные авторы отмечают, что весьма важным моментом является как можно более раннее назначение пробиотиков, так как нормальная микрофлора – самый первый и безопасный стимулятор иммунной систему у новорожденных [114, 115, 140, 180].

Для повышения реактивности организма кроме пробиотиков возможно применение препаратов как синтетического, так и природного происхождения, которые обладают общим неспецифическим и специфическим влиянием на организм в целом. Их спектр довольно широк – это сыворотки, вакцины, тканевые препараты, витамины, комплексы макрои микроэлементов, антибиотики [87, 88, 89, 133, 212, 223, 278, 289, 290, 291, 292].

Отмечено, что при поении телят неполноценным молозивом или молозивом с плохой усвояемостью у телят возникает гипо- или аглобулинемия, что снижает резистентность организма. Для устранения этих отклонений необходимо использовать средства, которые содержат лактоиммуноглобулины, иммуноглобулины сыворотки крови, в том числе иммуноспецифические, а также кровяные препараты [34, 35, 65, 69, 159, 163, 164, 165,166, 241].

Причиной многих негативных изменений в организме животных часто выступает нарастающее влияние техногенных стрессовых факторов, а также ухудшение состояния экологии [37, 39, 69, 159, 161, 162, 181, 298, 299, 300].

Установлена прямая корреляция между неспецифической резистентностью и состоянием обмена веществ у коров, развитием плода в утробе матери и выживаемостью новорожденных животных, поэтому систему «мать-плод-новорожденный» нужно воспринимать как целостную систему [79, 185, 186, 187, 221].

Создание у телят колострального иммунитета посредством активной иммунизации коров является действенным методом профилактики, вызываемых разными энтеропатогенами, желудочно-кишечных заболеваний.

Это связано, прежде всего, с рядом физиологических особенностей новорожденных телят, поросят и ягнят.

Главной из них является то, что ввиду особенностей своего строения, плацента коров и свиноматок не пропускает через себя крупномолекулярные гаммаглобулины от организма матери к плоду. Поэтому в крови новорожденных животных это белок отсутствует и они лишены защиты от генетически чужеродных патогенов. Иммунная система новорожденных животных примитивна и несформирована и поэтому не в состоянии адекватно отвечать на поступающие антигены выработкой гуморального и клеточного иммунитета пока не получат необходимого количества колостральных антител с молозивом матери. В составе молозива содержится в 10-20 раз больше гаммаглобулинов, чем в сыворотке крови. В нем содержится множество биологически активных веществ, Т-, В-лимфоцитов и макрофагов. Белки содержащиеся в молозиве являются неспецифическими защитными белками. Для того же, чтобы телята получали с молозивом и специфические белки (против конкретных антигенов) рекомендуется проводить вакцинацию маточного поголовья во второй половине стельности.

Подбор вакцин для прививки животных зависит от конкретной эпизоотической обстановки в хозяйстве. При установке сроков прививок необходимо руководствоваться тем, чтобы в момент родов в сыворотке крови и молозиве матерей содержалось максимальное количество специфических иммуноглобулинов. Приобретенный при этом пассивный иммунитет должен обеспечивать надежную защиту новорожденных животных от желудочнокишечных заболеваний в первые дни и недели их жизни [123, 156, 163, 198, 214, 215, 231, 273].

Необходимо отметить, что на фоне возникновения иммунодепрессии очень часто вакцинация животных является малоэффективной. В настоящее время имеется большое количество сведений, которые говорят о том, что большая часть заболеваний крупного рогатого скота происходит на фоне иммунодепрессии и возрастных иммунодефицитов в частности.Это явилось основанием для применения при иммунизации коров-матерей препаратов, обладающих иммуномодулирующими и антиоксидантными свойствами [71, 73, 128, 131, 216, 221].

Однако проблема поиска новых иммуностимулирующих средств для лечения и профилактики вторичных иммунодефицитов животных является актуальной, не смотря на то, в современных условиях в ветеринарии используются различные иммуномодуляторы природного и синтетического происхождения. Высказываются мнения о необходимости рациональных подходов при использовании различных иммуномодуляторов при лечении и профилактике иммунодефицитов [83, 84, 110, 114, 119, 174, 202, 250, 253, 261, 268].

В настоящее время успешность профилактики многих инфекционных болезней контролируется благодаря массовой иммунизации. Большую практическую значимость имеет выяснение возможности и эффективности одновременного применения вакцин и средств с иммуностимулирующей активностью с одной стороны и изыскание доступных и эффективных препаратов для стимуляции иммуногенеза, с другой [69, 78, 103, 111, 148, 177, 260, 288, 297, 301, 302].

Установлено положительное влияние синтетически полученного многофункционального феромона матки медоносной пчелы (9-оксо-2-Едеценовая кислота) на иммунный статус и состояние обмена веществ у продуктивных животных, а также иммуномодулирующую активность и лечебные свойства 9-ОДК при диспепсии, бронхопневмонии телят и поросят;

маститах у коров [25].

Имеются сведения, что препараты «Нитокс 200» и «Кетофен»

предотвращают послеродовую патологию свиноматок и повышают сохранность полученного приплода, а «Миксоферон» и препараты цитрированной крови свиней профилактируют острые расстройства пищеварения новорожденных [25, 141]. По данным ряда авторов применение препаратов «Тиосульфана», «Тилокалина» и «Селимакцида» приводят к значительно быстрому восстановлению клинических и гематологических показателей больных диспепсией и колибактериозом телят по сравнению с традиционным для хозяйств лечением. Препараты оптимизируют обменные процессы, повышая содержание белков и снижая активность ферментов аспартатаминотрансферазы, аланинаминотрансферазы, креатинкеназы, амилазы, лактатдегидрогеназы, гамма-глутамилтрансферазы. Основными действующими веществами «Трисульфана» являются антибиотики (тилан, стрептомицин сульфат) и химиотерапевтическое средство сульфамин.

«Тилоколин», состоит из тилозина, колистина сульфата и пролонгатора, а «Селимакцид» представляет из себя диэтиламмониевую соль N-метиламино-1-фенилметансульфоновой кислоты [109, 195, 275, 276, 277].

Однако несмотря на имеющиеся положительные результаты проблема поиска современных средств для надежной иммунопрофилактики и терапии эшерихиозов новорожденных телят для восстановления функционирования иммунной системы и повышения резистентности животных к негативному многофакторному воздействию окружающей среды, остается весьма актуальной.

1.3 Эшерихиозная диарея поросят Эшерихиоз (синонимы: колибактериоз, колибациллез, коли-инфекция) — остро протекающая инфекционная болезнь поросят первых дней жизни, чаще проявляется в виде энтеритной и энтеротоксемической форм.

С развитием промышленного свиноводства эшерихиоз стал серьезной проблемой для промышленных свиноводческих комплексов, с поточной 34 системой воспроизводства стада, и причиняет хозяйствам огромный экономический ущерб.

Этиологическая структура и биология возбудителей.

Основной причиной заболевания и гибели поросят от эшерихиоза является возбудитель Е. coli, чаще всего его энтеропатогенные штаммы, которые обладают следующими факторами вирулентности – гемолизинами, энтеротоксинами, колицинами и антигенами адгезии, детерминирующими, главным образом, плазмидами.

При этом наиболее важными факторами вирулентности считаются:

энтеротоксигенность – продукция энтеротоксинов, стимулирующих эпителий кишечника (цитотонических) или же его повреждающих (цитотоксических);

инвазивность – проникновение в эпителий кишечника с дальнейшим размножением в эпителии или прохождением через него без размножения с генерализацией или без таковой; адгезивность – синтез адгезивных антигенов, посредством коих бактериальные клетки прикрепляются к энтероцитам кишечника макроорганизма и проявляют свое болезнетворное действие. В естественных условиях выше перечисленные факторы действуют не по отдельности, а в комплексе, в целом создавая инфекционный процесс, а действие каждого отдельно взятого фактора может быть малозначительным.

Большинство ученых в настоящее время считает, что кишечная палочка энтеротоксигенных штаммов отличается от других способностью к прикреплению на поверхности эпителия тонкого отдела кишечника и заселению его, к образованию термолабильного (ТЛ) и менее патогенного термостабильного (ТС) или одновременно оба токсина. Как термостабильный, так и термолабильный энтеротоксин у новорожденных телят увеличивают секрецию жидкости и электролитов из слизистой оболочки тонкого отдела кишечника и снижают их абсорбцию [17,96,99].

В настоящее время ключевую роль в определении патогенности энтеротоксигенных эшерихий отводят наличию пили-антигенов или адгезинов. Известно, что неонатальную колидиарею в более чем 90 % случаев вызывают E.coli, продуцирующие энтеротоксины и способные синтезировать адгезивные антигены К88, К99, 987Р и F41. На основе реакции адгезивной гемагглютинации выделяют две разновидности адгезивных фимбрий E.coli. Агглютинационная способность одних адгезивных фимбрий подавляется Д-маннозой, которые получили название маннозочувствительных фимбрий или фимбрий 1-го типа или общие фимбрии, неспецифические адгезины. Наряду с маннозочувствительными у E.coli обнаружены адгезивные фимбрии, реакция иммуноадгезивной гемагглютинации у которых Д-маннозой не тормозится. Они названы маннозоустойчивыми фимбриями, или специфическими антигенами адгезии.

Маннозочувствительные и маннозоустойчивые фимбрии у E.coli различаются также по устойчивости к нагреванию, действию 0,5%-ного раствора формальдегида и особенно по оптимальным условиям выращивания для маннозочувствительных фимбрий оптимальным условием

E.coli:

выращивания является жидкая питательная среда, инкубация в течение 48 часов в статическом состоянии, а для маннозоустойчивых фимбрий агаровая питательная среда, инкубация при 37°С. Фимбрии 1-го типа или F1 имеются у большинства сапрофитических, энтеротоксигенных и энтеропатогенных изолятов E.coli. Они встречаются одни или в сочетании с маннозоустойчивыми фимбриями (К88, К99, 987Р, F41). В отличие от фимбрий I типа (F1), имеющихся у изолятов E.coli весьма различного происхождения, специфические антигены адгезии встречаются преимущественно у энтеротоксигенных клеток E.coli, колонизирующих слизистую оболочку кишечника [98].

Раньше было принято считать, что пили (фимбрии) штаммоспецифичны. Однако результаты исследованийпоследних лет показывают, что у бактерий одного штамма могут быть фимбрии нескольких типов. Так наиболее часто у E.coli встречается сочетание К99 и F41, реже К987 и К88 адгезинов [377].

При изучении эпизоотологии неонатальной диареи было установлено, что в процессе субкультивирования полиантигенный состав E.coli может изменяться. Например, штамм, обладающий при первом культивировании пили 987Р + тип I, при втором культивировании имел пили К88 + тип I, а при третьем — только тип I. Штамм К88 + К99 после второго культивирования имел фимбрии К88 + К99 + тип I, а после третьего — К88 + тип I. Пили К88 и типа I более стабильно воспроизводились (сохранялись) в процессе субкультивирования, чем К99 и 987Р. Несмотря на изменения в составе адгезивных антигенов в процессе культивирования, группа О-антигена штамма не изменялась. У одних и тех же больных поросят выделяли штаммы с разными типами пили. Если в кишечнике животного происходят изменения в составе типов пили-антигенов под влиянием иммуноглобулинов и других факторов, то при вакцинации в зависимости от антигенного набора вакцин можно, ингибируя у E.coli одни фимбрии, стимулировать образование других штаммов с идентичными генетическими детерминантами.

Таким образом, прикрепляясь к эпителиальным клеткам, пили не разрушают их. Выполняя функцию якоря, они способствуют колонизации бактерий в кишечнике. При фиксации на слизистой оболочке бактерии выделяют энтеротоксин в клетки хозяина: метаболизм их изменяется, ухудшается всасываемость. В просвете кишечника накапливается повышенное количество жидкости. Это приводит к диарее, дегидратации, ацидозу и гибели животного [359, 386].

При эшерихиозе поросят преобладают эшерихии серогрупп О8, О9, О20, О78, О137, О138, О139, О141 и О149, которые имеют антигены адгезии К88, К99, 987Р и реже F41, большая часть из которых продуцируют ТЛ- и ТС-энтеротоксины, гемолизины и колицины.

Изучая полиадгезивные штаммы E.coli, выделенные от новорожденных поросят [224] пришли к выводу, что в России чаще регистрируют адгезивные антигены К88ас, К99 и F41. Причем, около 28% испытанных штаммов оказались полиадгезивными, большинство из которых несут одновременно 2плазмиды и обладают колициногенными и токсигенными свойствами.

Антиген адгезии К99 первоначально считался капсульным антигеном К99, далее как термолабильный трансмиссивный антиген Ксо и наконец в 1975 г.

он был обозначен как адгезивный антиген К99. Фимбрии К99 имеют спиралевидную форму и состоят из одинаковых повторяющихся белковых субъединиц с молекулярной массой 18500-19500. Изоляты E.coli K99 обладают выраженной специфичностью к агглютинации эритроцитов лошади и не агглютинируют эритроциты морской свинки. Такие изоляты E.coli в основном адгезируются на эпителии слизистой оболочки кишечника телят, поросят и ягнят. К эпителиальным клеткам кишечника адгезируются только капсульные формы E.coli K99, их мутанты (без капсул, но с адгезивным К99) оставаясь в просвете кишечника, не колонизируют его эпителий.

Изоляты E.coli с антигеном адгезии К99 проявляют высокую устойчивость к антибактериальным препаратам. Так, к ампициллину такие бактериальные изоляты устойчивы в 91% случаев, стрептомицину — в 92%, неомицину — в 75%, тетрациклину — в 97%, сульфаниламидам — в 91% случаев [367].

Изучая распространение различных адгезивных антигенов среди эшерихий — возбудителей колибактериоза поросят в Грузии [135, 136] исследовали 373 культуры патогенных E.coli и установили доминирование антигена F41 у E.coli, выделенных от павших при колибактериозе поросят:

281 из них агглютинировалось одной или несколькими антиадгезивными сыворотками, а 117 имели адгезивный антиген F41. Причем 46 штаммов агглютинировались только анти-F-41- сывороткой, остальные обладали одновременно антигеном F41 и адгезинами К99, К88 и 987Р. По данным этих авторов, из 117 культур E.coli 16 продуцировали одновременно адгезины F41 и К99; отмечены также сочетания антигена F41 с адгезинами К88ас, K88ad, K88ab и 987Р. Причем обнаружены не только бипилированные культуры, но и полиадгезивные штаммы типа F41+K99 + К88. Исследуя взаимосвязь адгезивного антигена F41 с О и К антигенами E.coli, авторы установили, что чаще штаммы F41 имели соматические антигены 020, 01, 0127, 085, 015, 053, 04 и капсульные К8, К89, К30, К85.

Культуры E.coli с адгезивным антигеном F41 выделяли, в основном, из кишечника (28,26%), фекалий (23,91%), селезенки (10,86%), сердца (10,86%) и в единичных случаях — из головного мозга, легких и желчи. Штаммы E.coli с адгезинами F41+K99 выявляли почти во всех органах, но чаще в фекалиях и почках (18,74%). Из 7 культур F41+K88ab 3 обнаружили в кишечнике. Адгезины F41 — К88ас выделяли из почек (23,52%), кишечника (17,64%), селезенки, желчного пузыря и легких (по 11,76%), F41+K88ad — селезенки, сердца и кишечника (по 22,72), а другие сочетания адгезина F41 — чаще из кишечника и фекалий.

Пирожковым М.К. [191] исследовано 326 штаммов, выделенных от различных видов животных, с целью подбора оптимальных питательных сред для максимального накопления адгезивных антигенов К88 и К99. На основании проведенных исследований автор сделал вывод, что оптимальными питательными средами для максимального накопления адгезивного антигена К88 являются бульон Хоттингера и МПБ; для получения антигена К99 — жидкие питательные среды Ледерберга, Эванса и полусинтетическая среда Минка.

Коллективом исследователей изысканы оптимальные условия культивирования К88- и К99-позитивных эшерихий. По их данным, наиболее приемлемой средой, из числа проверенных, для выращивания К88позитивных штаммов являются МПА, ферментативный гидролизат рыбной муки, кислотный гидролизат казеина. Условием для достаточно хорошего выражения антигена К88 на них является содержание аминного азота 40-108 мг%. Авторы считают, что лимитирующим фактором для синтеза антигена К88 является концентрация в питательной среде аминного азота [ 204].

Эшерихиозная диарея поросят в промышленных комплексах носит стационарный характер. Болеют животные в первые недели жизни и в возрасте 10-26 и 30-33 дней; регистрируется в любое время года и зависит от технологической цикличности производства. На фоне, обусловленном различными нарушениями технологических норм содержания, кормления и эксплуатации животных, болезнь протекает интенсивно как остроеэндогенное инфекционное заболевание, появление и циркуляция в хозяйстве новых особей вирулентных серовариантов E.coli обуславливают резкую активацию энзоотии и тяжелое течение инфекционных процессов [196].

В зависимости от механизма развития инфекционного процесса или подругому патогенеза, эшерихиоз у поросят может проявляться в форме коиэнтеритов, колисепсиса или колиэнтеротоксемии. Особенности патогенеза обуславливаются: состоянием животного (возраст, иммунологический статус); количеством и качеством возбудителя (доза возбудителя, попавшего в организм поросенка, вирулентность, серотип);

воротами проникновения его в макроорганизм, механизмом передачи и условиями внешней среды, при которых происходит взаимодействие макроорганизма с микроорганизмом [51, 196]. По их данным инкубационный период болезни у новорожденных поросят короткий, в среднем 12-18 часов.

Форма проявления эшерихиоза также определяется количеством и вирулентностью возбудителя, условиями окружающей среды, резистентностью восприимчивых животных. Болезнь может протекать в сверхострой, острой, подострой и хронической формах.

В септической форме болезнь чаще протекает у новорожденных поросят и поросят-сосунов. При этом возможно острое и сверхострое течение, сопровождающееся высокой температурой тела и массовым падежом. Из клинических признаков присутствуют отказ от корма, угнетенное состояние, нарушение координации движения. Редко наблюдается диарея. При лабораторных исследованиях из органов и крови выделяются E.coli.

1.3.1 Профилактика и лечение эшерихиоза поросят Специфическая профилактика и иммунотерапия эшерихиоза поросят осложнены широким спектром биологических свойств и множественной 40 устойчивостью кишечной палочки к действию различных противомикробных препаратов.

В нашей стране с целью иммунопрофилактики эшерихиозов до 1981 года применяли поливалентную формол-тиомерсаловую вакцину против колибактериоза и паратифа пушных зверей, птиц, телят и поросят, состоявшую из инактивированной формалином бактериальной массы из 27 штаммов эшерихий 24 серогрупп и 12 штаммов сальмонелл 3-х сероваров (S.thyfimurium, S.dublin, S.choleraesuis) с общей концентрацией 4 млрд. см3 микробных клеток и алюмокалиевыми квасцами в качестве адъюванта. В эти же годы биологическая промышленность выпускала изготовленную на волах-продуцентах поливалентную гипериммунную сыворотку против колибактериоза и сальмонеллеза с использованием того же поливалентного антигена.

Низкая концентрация в вакцине и в поливалентном антигене для получения сыворотки эшерихий, идентифицированных только по Оантигену, как правило, не обеспечивала формирование у вакцинированных животных достаточно напряженного иммунитета, а наличие в составе сальмонеллезного компонента, вызывало повышенную реактогенность вакцины, особенно у телят.

С учетом указанных недостатков была предложена поливалентная ГОА формол-тиомерсаловая вакцина против колибактериоза (эшерихиоза) поросят, содержащая штаммы эшерихий 8 серогрупп (08, 09, 078, 0138, 0139, 0141, 0147 и 0149), обладающие антигеном К88, капсульными полисахаридными (К30, К35, К82, К80, К85 и К91) антигенами, выраженными гемолитическими свойствами, синтезирующими ТС и два штамма ТС- и ТЛ-энтеротоксины [38, 46, 189]. По мнению авторов после двукратной внутримышечной вакцинации супоросных свиноматок за 1-1,5 месяца до опороса вызывает формирование напряженного колострального иммунитета у новорожденных поросят до момента отъема, а при вакцинации поросят в период отъема — иммунитет длится до 6 месяцев.

Однако существующие способы специфической профилактики и лечения эшерихиоза все еще не совершенны, особенно в тех случаях, когда часто отмечается недостаточная напряженность иммунитета, связанная с множеством серотипов E.coli, вызывающих диарею у поросят. Кроме того, известно, что 10-30% свиноматок страдают синдромом мастит-агалактия [12]. Следовательно, они не способны передавать защитные антитела потомству. Ценность химио- и антибиотикотерапии для поросят также часто сомнительна. Обеспечить защиту от заболевания таких поросят в первые дни их жизни можно лишь путем пассивной иммунизации, применяя гипериммунные сыворотки или гомологичные иммуноглобулиновые препараты или антибиотики.

Изучена протективная эффективность микрокапсулированного (МК) IgY против энтеротоксигенных Escherichia coli, содержащих фимбриальный антиген К88 и вызывающих диарею у поросят-отъемышей. В опытах подтверждены предварительные наблюдения, что хитозан-альгинатные микрокапсулы (ХАМК) эффективно защищают IgY от инактивации желудочным соком, тем самым удается предотвратить развитие кишечных заболеваний. МК IgY оценен как средство, предотвращающее диарею, индуцируемую энтеротоксигенными формами E. coli у поросят [354].

В исследованиях Jamalludeen N. et al. [338] определена эффективность фагов, используемых по отдельности и в сочетании по предотвращению и лечению диареи у поросят-отъемышей 3-недельного возраста, экспериментально инфицированных энтеротоксигенным штаммом (ЭТШ) 0149:Н10:F4 Escherichia coli. С целью профилактики фаги вводили орально сразу после заражения, а с терапевтической целью – через 24 ч после заражения перед началом диареи. Состояние поросят оценивали по изменению веса, продолжительности диареи, тяжести течения болезни, уровню выделения ЭТШ через 6 дней после заражения. Таким образом, показано, что фаги, используемые как для профилактики, так и лечения, эффективно сдерживают течение диареи у поросят, экспериментально зараженных штаммом 0149:Н10:F4 E. coli. Эти данные были подтверждены в исследованиях других авторов [262, 263, 264, 265, 266].

Они изучали лечебно-профилактическую при эффективность применении поливалентного бактериофага на новорожденных поросятах.

Полифаг - смесь бактериофагов против возбудителей условно-патогенных бактерий: гемолитической кишечной палочки различных серологических вариантов, пастерелл, сальмонелл, стафилококков, стрептококков и протея.

Сравнительное изучение терапевтической эффективности полифага и поливалентной сыворотки против колибактериоза при отечной болезни поросят показало, что при внутримышечном применении полифага по 15 мл в течение 3-х дней, его лечебная эффективность составила 90,5%, выздоровление наступало в течение 3-5 дней. Применение поливалентной сыворотки привело к выздоровлению 80,4% больных энтнотоксемической формой эшерихиоза поросят. В тоже время сохранность в контрольной группе поросят составила 60%. Следовательно, лечебная эффективность поливалентного бактериофага на 10,1% выше по сравнению с таковой поливалентной сыворотки против колибактериоза.

1.4 Заключение по обзору литературы Анализ литературы по изучаемому вопросу показывает, что профилактика и лечение желудочно-кишечных болезней приобретает социальную значимость, поскольку параллельно с увеличением потребления животноводческой и птицеводческой продукции возрастает риск ее контаминации эшерихиями, сальмонеллами. Из-за снижения колонизационной резистентности кишечника происходит транслокация кишечных микроорганизмов в органы и ткани животных и птицы. Это обстоятельство свидетельствует о необходимости пересмотра сложившихся методологических подходов к профилактике и лечению при желудочнокишечных болезнях и необходимости разработки экологически безопасных препаратов нового поколения для коррекции кишечного биоценоза 43 животных, повышения колонизационной резистентности слизистой кишечника к контаминации условно-патогенной микрофлорой.

Действенным методом противоинфекционной защиты организма человека и животных является использование лечебно-профилактических вакцинных и сывороточных препаратов с целью иммунопрофилактики и иммунотерапии. Наиболее перспективным способом защиты новорожденных от возбудителей эшерихиоза является создание у новорожденных колострального иммунитета путем скармливания им молозива от иммунизированных коров и свиноматок. Сыворотка крови новорожденных не содержит в достаточном количестве специфических иммуноглобулинов, комплемента и пропердина, определяющих защитные свойства крови.

Содержание белка в сыворотке крови до приема молозива низкое, иммуноглобулины практически не обнаруживаются. Кроме того, в первые дни жизни отмечаются несовершенство минерального и водного обменов, повышенная проницаемость эпителия кишечника и недостаточно выраженная барьерная функция печени и другие факторы, обуславливающие низкую резистентность животных.

В виду того, что организм новорожденных животных еще не способен в достаточном количестве синтезировать защитные антитела и другие факторы специфической резистентности, иммунизация таких животных не дает желаемого результата. Поэтому целенаправленная вакцинация стельных коров и супоросных свиноматок может обеспечить новорожденных телят и поросят нужными материнскими антителами. Установлено, что для максимального повышения содержания иммуноглобулинов в молозиве и создания у новорожденных колострального иммунитета коров следует вакцинировать за 1,5-3 месяца до отела.

В последние годы отечественными исследователями предложены несколько типов вакцин. Одни получают вакцину путем смешивания комплексного анатоксина в равных пропорциях с антигеном, полученным из различных штаммов E. coli. По мнению авторов, способ позволяет получить вакцину, создающую высокий уровень антитоксического и антимикробного иммунитета, другие готовят вакцину из 10 штаммов энтеробактерий, инактивированных этанолом и депонированных на гидроокиси алюминия [139, 173].

Наиболее существенными факторами вирулентности патогенных эшерихий являются энтеротоксигенность – продукция энтеротоксинов, повреждающих кишечный эпителий; адгезивность – синтез адгезивных антигенов, посредством которых бактерии прикрепляются к энтероцитам слизистой тонкого кишечника макроорганизма и проявляют свое болезнетворное действие.

У энтеропатогенных эшерихий сложная антигенная структура, состоящая из соматического (О-антиген), поверхностного (капсульный, оболочечный, К-антиген) и жгутикового (Н-антиген). Соматический Оантиген представляет собой полисахаридно-протеино-липидный комплекс, в котором полисахарид определяет серологическую специфичность, липоид – токсичность, а белок – антигенность. Соматический О-антиген является термостабильным. Капсульный К-антиген – полисахарид, включает поверхностные антигены L, B и А, из которых L и B термолабильны, Аантиген – термостабилен. Значительным достижением в области изучения антигенной структуры E. coli является обнаружение у микроба нежгутиковых филаментов, представляющих собой тонкие нитевидные образования на поверхности микробной клетки.

Уже известно значительное число адгезивных антигенов: К99, К88, F41, 987Р, А20 [194].

Таким образом, приведенные доступные литературные данные свидетельствуют о большом научном интересе к проблеме эшерихиозов молодняка сельскохозяйственных животных и использованию различных средств для их лечения и профилактики. Это побудило нас к изысканию новых подходов при решении этой проблемы.

1.5 Обоснование и поиск направлений по созданию новых средств, обладающих иммунопротекторными свойствами при колибактериозе телят и поросят В настоящее время в нашей стране и за рубежом применяется ряд вакцин против эшерихиоза, содержащих значительное количество антигенов (цельноклеточные, ослабленные, инактивированные), приготовленные как из местных, так и из широкораспространенных штаммов E.coli; токсоиды (анатоксины), а также субъединичные вакцины.

Для профилактики колибактериоза в США использовали трехвалентный бактерин, приготовленный из инактивированных энтеротоксигенных штаммов Е. coli, способных продуцировать К88, К99 и 987Р антигены. Смертность в вакцинированной группе была в 8 раз меньше, чем в контроле [384, 385]. В ФРГ для профилактики эшерихиоза поросят применяли вакцину, содержащую 4 штамма с антигенами К88, К99, 987Р и F41, которая снижала процент больных диареей с 70 и 90 до 0 и 6 соответственно [313]. При вакцинации бактерин-токсоидом новорожденных поросят наблюдали стимуляцию продукции антител против наиболее важных пилезных антигенов (К88, К99, 987Р и F41) Е. coli. Применение вакцины против колибактериоза из очищенных пилей типа 1 и цельноклеточной вакцины, содержащей антигены К88, К99 и 987Р, а также пили типа 1, приводило к существенному снижению смертности от эшерихиоза поросят [335, 386].

Учитывая, что существующие методы получения чистых препаратов пили отличаются большой сложностью и значительной трудоемкостью, японские ученые предложили методику очистки пили К88 и К99, полученных от энтеротоксигенных штаммов Е. coli, используя афинную хроматографию [348].

Установлено, что субъединичные вакцины безопасны, иммуногенны, содержат минимальную концентрацию эндотоксина и поэтому не вызывают побочных реакций, эффективно защищают поросят от колидиареи через молозиво вакцинированных свиноматок [359].

В связи с открытием нового, четвертого антигена пилей энтеротоксигенных Е. coli, близкородственного или идентичного антигену F41, возникла необходимость выяснения возможности существования бактеринов, обеспечивающих защиту поросят против несущего такой антиген энтеротоксигенного Е. coli свиного происхождения. У супоросных свиноматок, вакцинированных 4-пили бактерином (К88, К99, 987Р и F41) отмечено появление существенно более высоких уровней сывороточных и колостральных антител, чем у свиноматок, вакцинированных 3-пили бактерином энтеротоксигенных Е. coli, содержащим 3 антигена пилей: К88, К99 и 987Р [194].

Используя технологию рекомбинантной ДНК, в США [340] разработана вакцина для профилактики диареи, вызываемой энтеротоксигенной Е. coli. Продукт, который является субъединичной вакциной, был приготовлен путем механического и химического удаления пили - адгезинов с поверхности полученных методом генной инженерии штаммов Е. coli. Эта вакцина содержит адгезины К88, К99 и 987Р с добавлениями адъюванта. Вакцинация супоросных свиноматок этой вакциной приводила к продукции антител, специфичных пили - антигенам.

Эти антитела передавались поросятам с молозивом и молоком, нейтрализовали адгезивность фимбрий и энтеротоксигенной Е. coli, предотвращая прикрепление этих бактерий, колонизацию ими кишечника и развитие заболевания. При контрольном заражении поросят от таких свиноматок смертность снижалась в 10-20 раз. Наблюдали также снижение заболеваемости, тяжести и длительности диареи.

Следует, однако, отметить, что опыт использования субъединичных вакцин против Е. небольшой. Поэтому всесторонне оценить coli эффективность и преимущества таких вакцин является актуальной задачей изучения эшерихиозов [381, 391].

Следовательно, благодаря достижениям в области иммуногенетики и генной инженерии, в последние годы получены новые данные об эшерихиозе. Установлены факторы патогенности Е. coli, вызывающей диарею поросят, пили - антигены и энтеротоксины. Эти новые сведения о возбудителе болезни позволяют раскрыть механизмы патогенеза и создать более совершенные субъединичные вакцины.

В нашей стране с целью иммунопрофилактики эшерихиозов до 1981 года применяли поливалентную формол-тиомерсаловую вакцину против колибактериоза и паратифа пушных зверей, птиц, телят и поросят, представляющую собой инактивированную формалином бактериальную массу из 27 штаммов эшерихий 24 серогрупп с общей концентрацией 4 млрд.

см3 микробных клеток и алюмокалиевыми квасцами в качестве адъюванта [126, 127].

Однако указанная вакцина не способствовала формированию у вакцинированных животных иммунитета достаточной напряженности, а сыворотка, полученная от вакцинированных животных не обладала протективными свойствами.

В последующем была предложена поливалентная ГОА формолтиомерсаловая вакцина против колибактериоза поросят, содержащая штаммы эшерихий 8 серогрупп (О8, О9, 078, О132, О139, О141, О147 и О149), обладающие капсульными полисахаридными (К3О, К35, К82, К80, К85 и К91) антигенами, антигеном К88, выраженными гемолитическими свойствами, синтезирующими ТС и два штамма ТС- и ТЛ-энтеротоксины. По мнению авторов, двукратная внутримышечная вакцинация супоросных свиноматок за 1-1,5 месяца до опороса формирует напряженный колостральный иммунитет у новорожденных поросят в течение предотъемного периода [144, 189].

Для защиты телят от колибактериоза была проведена вакцинация коров поливалентной гидроокись-алюминиевой формол-тиомерсаловой вакциной против колибактериоза. Телята, получавшие молозиво от иммунизированных указанной вакциной коров, оказались устойчивыми к экспериментальному пероральному заражению односуточной культурой Е. coli серогруппы О78 [63, 64].

Канадские исследователи проводили вакцинацию коров очищенным антигеном Е. coli, содержащим адгезины К99, и полным клеточным бактерином. В сравнительных опытах на коровах с использованием 3 видов вакцин: из очищенного антигена Е. coli (K99) с добавлением 0,05% формалина, убитых формалином микробных клеток Е. coli; убитых формалином (0,3%) микробных клеток из 6 энтеротоксигенных штаммов Е.

coli. У коров, иммунизированных за 6 и 3 недели до отела очищенным антигеном К99, у телят диарею не наблюдали; из 9 телят 2-й группы, полученных от иммунизированных 2-й вакциной коров, заболело диареей 3 и пал 1; из 6 телят, привитых третьей вакциной, заболело и пало 4 животных в течение 24-72 часов [305, 306].

Положительные результаты вакцинации стельных коров энтеротоксигенными штаммами E. coli получены в Российской Федерации, США, Франции, Италии и других странах [139, 173, 312, 316, 331, 387].

Однако, существующие способы специфической профилактики и лечения эшерихиоза все еще несовершенны, так как часто отмечается недостаточная напряженность иммунитета, связанная с множеством серотипов Е. coli, вызывающих диарею телят и поросят. Ценность химио- и антибиотикотерапии для телят и поросят не всегда однозначна. Обеспечить защиту от заболевания молодняка в первые дни их жизни можно лишь путем пассивной иммунизации, применяя гипериммунные сыворотки или гомологичные иммуноглобулины в первые дни жизни, трансфузия крови от матери или иммунизированной коровы, а также терапевтическое и профилактическое применение специфических гипериммунных сывороток.

Отечественной биологической промышленностью выпускаются «Поливалентная антитоксическая сыворотка против паратифа и колибациллеза телят, ягнят, овец и птиц». Основными недостатками указанных лечебно-профилактических сывороток являются низкий титр антител или полное отсутствие их к адгезивным антигенам К88, К99, 987Р и F41, а также ТЛ- и ТС-энтеротоксинам [146].

Учеными ВГНКИ предложен «Способ получения сыворотки, антиадгезивной и антитоксической против эшерихиоза сельскохозяйственных животных». Сыворотка содержит комплекс антител против соматических О9, О78, О141, бескапсульных К3О, К80 и К87 антигенов, обеспечивающих нейтрализацию патогенного действия эшерихий у различных видов. Сыворотку применяют с лечебной и профилактической целью в хозяйствах, неблагополучных по эшерихиозу молодняка сельскохозяйственных животных. С профилактической целью сыворотку выпаивают новорожденным телятам в смеси с молозивом в первые три выпойки по 10-15 мл. Терапевтический эффект сыворотки повышается при введении ее внутримышечно. При тяжелом течении болезни сыворотку вводят внутрибрюшинно повторно через 1-3 дня в тех же дозах [145, 146] В своих сообщениях авторы приводят результаты разработки и изучения эффективности полиспецифической гипериммунной сыворотки против рота-, короновирусного гастроэнтерита и эшерихиозной диареи новорожденных поросят. На свиньях продуцентах авторы получили лечебно-профилактическую сыворотку с высоким титром специфических антител: к E.coli K88-12, 64 log2, E.coli К99 – 11,64 log2, E.coli 987P – 11,64 log2 и ТЛ-, ТС – токсином E.coli – 3 log2. Ими установлено, что применение полиспецифической сыворотки с лечебно-профилактической целью позволило в стационарно неблагополучном хозяйстве сократить гибель новорожденных поросят в 3,3 раза и тем самым повысить их сохранность на 12,9% [158, 159].

Однако из-за наличия большого множества серотипов и сложной антигенной структуры возбудителя эшерихиоза, несмотря на определенные успехи в борьбе с колидиареей молодняка сельскохозяйственных животных, до настоящего времени вопросы специфической профилактики и лечения данной патологии остаются несовершенными.

Поэтому для лечения больных телят и поросят применяют дополнительные этиотропные средства и регидратационные растворы в сочетании с другими патогенетическими и симптоматическими веществами, а также диетическими средствами, ферментными, белковыми и гормональными препаратами. Из этиотропных средств наиболее часто применяют, сульфаниламидные и нитрофурановые препараты, а также антибиотики [87, 88, 89, 92, 275, 276, 278].

В своих исследованиях в качестве химиотерапевтического средства для лечения колибактериоза применяли комбинацию карбадоса (3 мг/кг живой массы), с хлорквиналдолом (20 мг/кг) и хлорпиридазы (30 мг/кг) в индифферентном носителе. Изученную комбинацию, выпускаемую в Венгрии под фирменным названием Доксулан, можно успешно применять при лечении диареи у телят и поросят эшерихиозной этиологии [346]. Однако известно, что длительная и частая бессистемная дача антибактериальных препаратов приводит к появлению устойчивых к данным препаратам микроорганизмов (собенно опасно в этом отношении применение малых доз препаратов), токсичности для животного, возникновению дисбактериоза, нарушениям в иммуногенезе и аллергизации организма [97, 99].

В современной медицине продукты пчеловодства (мед, пчелиный яд, маточное молоко) как лечебные и профилактические средства, повышающие тонус организма известны давно и широко применяются. В последние годы наметилась четкая тенденция к использованию биологически активных продуктов пчеловодства в животноводстве.

Кивалкиной В.П. были опубликованы работы о широком спектре противомикробного действия и безвредности прополиса и о способности препаратов прополиса, при введении в организм, повышать неспецифические и специфические факторы иммунитета [58, 120, 121]. Интерес к этому препарату еще больше возрос в связи с обнаружением стимулирующего действия прополиса на факторы иммунитета [19, 20, 22, 24, 30, 31, 150, 152, 153, 155, 197, 244]. Исследованиями было доказано, что прополис повышает иммуногенные свойства вакцины против болезни Ауески, сальмонеллеза и чумы плотоядных [26, 129, 130, 149, 151].

Тетерев И.И., Бадьин В.А. [243] разработали и испытали в лабораторных и производственных условиях новый прополиссодержащий препарат пролонгированного действия – биогель 5, который эффективен для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний как инфекционной (эшерихиоз, сальмонеллез, псевдомоноз, ассоциированные бактериальные инфекции, парвовирусный энтерит и другие), так и неинфекционной этиологии (гастриты, энтериты). Ими показано, что биогель 5 обладает бактерицидным действием в отношении грамнегативной и грампозитивной бактериальной микрофлоры. Установлено, например, биогель 5 обеспечивал гибель клеток Escherichia coli, Salmonella Dublin, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Bacillus в течение первых суток при концентрации м.к. 75 млн./см 3.

cereus Вакцинация коров в животноводческих комплексах, неблагополучных по колибактериозу, вакциной Коли-Вак К99, на фоне стимуляции прополисом и оксиметилурацилом, с последующей стимуляцией телят с 7-дневного возраста, в течение 5 дней, способствует созданию высокого иммунного баланса [116, 179].

Прополис, применяемый как иммуномодулятор и иммуностимулятор на фоне иммунизации телят противодиплококковой вакциной, стимулировал Т- и В-систему иммунитета, способствовал восстановлению естественного микробиоциноза кишечника с активным повышением бифидо-и лактофлоры в 1,9 и 3,03 раза при одновременном понижении уровня условно-патогенных микроорганизмов [155, 280]. Сочетанное применение дибиомицина с водноспиртовой эмульсией прополиса повышает терапевтическую активность при колибактериозе ягнят, обеспечивая 92,5-100,0%-ную выживаемость с одновременным сокращением сроков лечения до 1-2 дней против 9-12 дней в контроле [249]. Комплексное применение прополиса и бифидумбактерина оказывает выраженное иммуномодулирующее действие на организм цыплят [294]. Применение комплексного препарата прополис + цеолиты вызывало активизацию бифидобактерий и лактобацилл в кишечнике у кобыл, с одновременным торможением размножения стафилококков, клостридий и микробов кандида, способствуя нормализации их соотношения, повышения колонизационной резистентности кишечника и нормализуя, тем самым, микробиоценоз кишечника лошадей [279].

Рядом авторов были проведены исследования по изучению влияния различных композиционных форм с продуктами пчеловодства на рост и развитие животных. Результаты изучения влияния различных композиционных форм с продуктами пчеловодства мед + прополис; мед + цветочная пыльца; мед + прополис + пшеничные отруби и мед + прополис + мумие на естественную резистентность поросят показали, что они способствовали, в различной степени активности, повышению среднесуточных приростов живой массы (в 1,42 раза), сохранности поголовья (в 1,75 раза), снижению заболеваемости и активации естественных защитных сил организма (повышение бактерицидной активности сыворотки крови - в 1,25, лизоцимной - в 3,11, фагоцитарной активности лейкоцитов - в 1,66 раза по сравнению с контролем) [19, 20, 152, 153].

Выпаивание поросят кумысом в сочетании с прополисом и пергой способствовало повышению живой массы на 0,11 кг (10-й день), 7 кг (30 день) и на 21,4 кг (70 день), сохранности поголовья (95%), а также оказывало иммуномодулирующий эффект, повышая функцию Т-клеток в 1,26 раза, Тхелперов - в 1,21 раза при одновременном понижении количества Тсупрессоров (в 1,7 раза). Кормление кобыл рационом, включающим композицию цеолит + прополисное молочко, в течение 14 дней оказывало корригирующее действие на иммунный статус животных. У животных, получавших указанную композицию, параметры естественного иммунитета (лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки) превышали контрольный уровень в 2,03 и 1,18 раза, способствуя выраженной активации защитных сил и созданию прочного иммунного баланса [19, 20, 154].

С учетом перспективности и эффективности продуктов пчеловодства, сотрудниками ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» разработана биологически активная кормовая добавка «Вита-Форце» на основе веществ аписогенного и фитогенного происхождения (мед, прополис, перга, обножка, пыльца, маточное молочко, пчелиный яд, воск, пчелиный подмор, травяная мука), обладающая антибактериальным, антитоксическим, антиоксидантным, декорпорирующим, адаптогенным, радиозащитным и метаболизмстимулирующим свойствами, а также сконструирован полифункциональный композиционный препарат «Полиаписоген», обеспечивающий 77-80%-ную выживаемость пораженных летальными дозами патологических агентов физической, химической и инфекционной природы [47, 104].

Обоснование и поиск, путем анализа специальной литературы, направлений по созданию новых средств профилактики и лечения колибактериоза телят и поросят убедительно указывает на то, что для конструирования антиэшерихиозного профилактического (вакцинного) препарата более эффективным является использование не цельноклеточных, а субъединичных вакцин на основе адгезивных антигенов, полученных из очищенных пилей (фимбрий) и наиболее важных штаммов К88, К99, 987Р и F41. При этом, с учетом литературных данных о том, что сочетание антигенов с иммуномодуляторами ведет к существенному повышению иммунного ответа, мы поставили перед собой задачу получения комплексных антигенов на основе пилезных антигенов и продуктов пчеловодства, как одного из эффективных иммуномодуляторов, а в качестве депонирующих агентов – субъединичные фракции природных адсорбентов монтмориллонитов.

Кроме того, разработка композиционного полиглобулинового комплекса, включающего глобулины, продукты пчеловодства, продукты метаболизма пробиотических микроорганизмов и природные адсорбенты, а также полиантигенного комплекса на основе пилезных (фимбриальных) антигенов в сочетании с хитин-хитозансодержащими (продукты пчеловодства) и высокодисперсными депонирующими агентами природными адсорбентами (класс монтмориллонитов), представляется вполне реальной, оправданной и перспективной, что и явилось предметом наших исследований.

2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Материалы и методы исследования Работа выполнялась в 2007-2014 гг. в отделе биобезопасности ФГБУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности» по заданию «Эпизоотический мониторинг» № госрегистрации 01200202602, 01200202604, а также в ветеринарных лабораториях области, в условиях хозяйств Краснооктябрьского, Сеченовского районов и непосредственно в личных хозяйствах граждан Краснооктябрьского района Нижегородской области.

Отдельные этапы работы были выполнены с участием профессора Низамова Р.Н., кандидатов наук Спиридонова Г.Н., Евстифеева В.В., Гумерова В.Г., которым выражаю искреннюю признательность.

–  –  –

Подопытные животные. В опытах было использовано 1418 животных, в том числе 355 белых мышей, 75 белых крыс, 47 кроликов, 634 новорожденных поросят, 90 новорожденных телят, 60 телят 2-4 мес.

возраста, 155 свиноматок, 72 гол. взрослого крупного рогатого скота.

Штаммы микроорганизмов: производственные штаммы E. coli «ПЛ-6»

№ 1154115 – эшерихиозной диареи поросят; 3 эпизоотических штамма E. coli «УК-2» № 1153/15 – возбудитель диареи поросят; штамм «КВ-1» № 1156/15 – возбудитель эшерихиоза поросят; штамм «ПЗ-3» № 378 – возбудитель эшерихиоза телят, полученные из коллекции штаммов лаборатории по изучению возбудителей особо опасных болезней ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»;

коммерческие производственные штаммы B. subtilis (шт. 3) и B. bifidum (шт.



Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 9 |

Похожие работы:

«Карачевцев Захар Юрьевич ОЦЕНКА ПИЩЕВЫХ (АКАРИЦИДНЫХ) СВОЙСТВ РЯДА СУБТРОПИЧЕСКИХ И ТРОПИЧЕСКИХ РАСТЕНИЙ В ОТНОШЕНИИ ПАУТИННОГО КЛЕЩА TETRANYCHUS ATLANTICUS MСGREGOR Специальность: 06.01.07 – защита растений Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель: Попов Сергей...»

«Моторыкина Татьяна Николаевна ЛАПЧАТКИ (РОД POTENTILLA L., ROSACEAE) ФЛОРЫ ПРИАМУРЬЯ И ПРИМОРЬЯ 03.02.01 – Ботаника Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, старший научный сотрудник Н.С. Пробатова Хабаровск Содержание Введение... Глава 1. Природные...»

«Палаткин Илья Владимирович Подготовка студентов вуза к здоровьесберегающей деятельности 13.00.01 общая педагогика, история педагогики и образования Диссертация на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Научные руководители: доктор биологических наук, профессор,...»

«Мухаммед Тауфик Ахмед Каид ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕНОТИПОВ С ХОРОШИМ КАЧЕСТВОМ КЛЕЙКОВИНЫ, ОТОБРАННЫХ ИЗ ГИБРИДНЫХ ПОПУЛЯЦИЙ АЛЛОЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ ЯРОВОЙ ПШЕНИЦЫ МЯГКОЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ДНК-МАРКЕРОВ Специальность 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Научный...»

«Ульянова Онега Владимировна МЕТОДОЛОГИЯ ПОВЫШЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ВАКЦИН НА МОДЕЛИ ВАКЦИННЫХ ШТАММОВ BRUCELLA ABORTUS 19 BA, FRANCISELLA TULARENSIS 15 НИИЭГ, YERSINIA PESTIS EV НИИЭГ 03.02.03 – микробиология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант:...»

«Якимова Татьяна Николаевна Эпидемиологический надзор за дифтерией в России в период регистрации единичных случаев заболевания 14.02.02 эпидемиология диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор...»

«Сухарьков Андрей Юрьевич РАЗРАБОТКА МЕТОДОВ ОЦЕНКИ ОРАЛЬНОЙ АНТИРАБИЧЕСКОЙ ВАКЦИНАЦИИ ЖИВОТНЫХ 03.02.02 «Вирусология» Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат ветеринарных наук, Метлин Артем Евгеньевич Владимир 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ 1 ВВЕДЕНИЕ 2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 2.1 Характеристика возбудителя бешенства 2.2 Эпизоотологические...»

«Цвиркун Ольга Валентиновна ЭПИДЕМИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС КОРИ В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКИ. 14.02.02 – эпидемиология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: заслуженный деятель науки РФ, лауреат Государственной премии СССР профессор, доктор медицинских наук Ющенко Галина Васильевна Москва – 20 Содержание...»

«БРИТАНОВ Николай Григорьевич ГИГИЕНИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПЕРЕПРОФИЛИРОВАНИЯ ИЛИ ЛИКВИДАЦИИ ОБЪЕКТОВ ПО ХРАНЕНИЮ И УНИЧТОЖЕНИЮ ХИМИЧЕСКОГО ОРУЖИЯ 14.02.01 Гигиена Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор...»

«Петренко Дмитрий Владимирович Влияние производства фосфорных удобрений на содержание стронция в ландшафтах Специальность 03.02.08 экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Белюченко Иван Степанович Москва – 2014 г. Содержание Введение Глава 1.Состояние изученности вопроса и цель работы 1.1 Экологическая...»

«ХАПУГИН Анатолий Александрович РОД ROSA L. В БАССЕЙНЕ РЕКИ МОКША 03.02.01 – ботаника Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель Силаева Татьяна Борисовна д.б.н., профессор САРАНСК ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ Глава 1. ИСТОРИЯ ИЗУЧЕНИЯ РОДА ROSA L. В БАССЕЙНЕ МОКШИ. Глава 2. КРАТКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РОДА ROSA L. 2.1. Характеристика рода Rosa L. 2.2. Систематика рода Rosa L. Глава 3....»

«Вафула Арнольд Мамати РАЗРАБОТКА ЭЛЕМЕНТОВ ТЕХНОЛОГИИ ВЫРАЩИВАНИЯ ПАПАЙИ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ЗДОРОВОГО ПОСАДОЧНОГО МАТЕРИАЛА И ЭКСТРАКТОВ С БИОПЕСТИЦИДНЫМИ СВОЙСТВАМИ ДЛЯ ЗАЩИТЫ ЕЕ ОТ ВРЕДНЫХ ОРГАНИЗМОВ Специальности: 06.01.07 – защита растений 06.01.01 – общее земледелие и растениеводство Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных...»

«Доронин Максим Игоревич ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ ВЫЯВЛЕНИЯ ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО НЕКРОЗА ГЕМОПОЭТИЧЕСКОЙ ТКАНИ ЛОСОСЕВЫХ РЫБ 03.02.02 «Вирусология» Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, Мудрак Наталья Станиславовна Владимир 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ 1 ВВЕДЕНИЕ 2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 2.1 Характеристика возбудителя инфекционного...»

«Брит Владислав Иванович «Эффективность методов вакцинации против ньюкаслской болезни в промышленном птицеводстве» Специальность: 06.02.02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидат ветеринарных наук Научный руководитель:...»

«АБДУЛЛАЕВ Ренат Абдуллаевич ГЕНЕТИЧЕСКОЕ РАЗНООБРАЗИЕ МЕСТНЫХ ФОРМ ЯЧМЕНЯ ИЗ ДАГЕСТАНА ПО АДАПТИВНО ВАЖНЫМ ПРИЗНАКАМ Шифр и наименование специальности 03.02.07 – генетика 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений ДИССЕРТАЦИЯ на соискание учёной степени кандидата...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.