WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:   || 2 | 3 | 4 |

«Флавоноиды растений Fagopyrum sagittatum Gilib. (гречихи посевной) и серпухи венценосной (Serratula coronata L.) (методы выделения, идентификация веществ, перспективы использования) ...»

-- [ Страница 1 ] --

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ АВТОНОМНОЕ

ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО

ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ

ДАЛЬНЕВОСТОЧНЫЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

На правах рукописи

МЯГЧИЛОВ АЛЕКСЕЙ ВИКТОРОВИЧ

Флавоноиды растений Fagopyrum sagittatum Gilib. (гречихи посевной) и серпухи венценосной (Serratula coronata L.) (методы выделения, идентификация веществ, перспективы использования) 03.02.14 – биологические ресурсы Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Научные руководители:

Горовой П.Г., д.б.н., профессор, академик РАН Соколова Л.И., к.х.н., доцент Владивосток – 2014 г.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ 5–9 1 Обзор литературы 10–4

1.1 Рациональное использование отходов зернового производства 10–15

1.2 Биологически активные вещества гречихи 15–2

1.3 Биологически активные вещества серпухи венценосной 26–

1.4 Методы выделения и идентификации флавоноидов растений 31–45 2 Экспериментальная часть 46–65

2.1 Объекты исследования 46–51 2.1.1 Гречиха посевная – Fagopyrum sagittatum Gilib. 46–49 2.1.2 Серпуха венценосная – Serratula coronata L.s.l. 49–51

2.2 Аппаратура и условия анализа 52–53

2.3 Очистка растворителей и приготовление растворов 53–56 2.3.1 Реактивы 535 2.3.2 Очистка растворителей и приготовление диагностических растворов 54 2.3.3 Приготовление стандартных растворов (рутина, лютеолина, ориентина и кверцетина) и построение градуировачных графиков 55 2.3.4 Приготовление рабочих растворов (витексина, 3–метилкверцетина, апигенина и изокемпферида), выделенных из исследуемого растительного сырья 2.3.5 Приготовление рабочего раствора ситостеролина 56

2.4 Определение влажности образцов растительного сырья 56

2.5 Выбор оптимальных условий выделения флавоноидов из исходных растительных объектов 56–57

2.6 Количественное определение суммы флавоноидов в полученных экстрактов 57–59

2.7 Статистическая обработка данных 59–60

2.8 Приготовление и разделение экстрактов

–  –  –

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования. Растения издавна являются основным постоянно возобновляемым источником биологически активных соединений.

Региональная сторона проблемы викариантов Дальнего Востока России состоит в рациональном использования местных видов лекарственных растений.

Актуальность этой проблемы объясняется географической и климатической спецификой региона и, как следствие, большим количеством местных видов, замещающих применяемые в официальной медицине лекарственные растения.

Несмотря на значительное и всем известное разнообразие дальневосточной флоры, использование ее видового состава в официальной медицине составляет 1,5 %. Для Приморского края известно лишь 77 видов растений, разрешенных Минздравом России для медицинского использования. Это объясняется слабой изученностью дальневосточных лекарственных растений [Степанова, 1997;

Воробьева, 2004].

Особое место в лекарственной флоре Дальнего Востока России занимают растения богатые флавоноидами байкальский, володушка (шлемник козелецелистная, зверобой большой, тысячелистник благородный, ромашка дисковидная) [Максимов, Кулеш, Горовой, 2002]. Многие из них представляют собой резерв для расширения лекарственной сырьевой базы региона.

Одним из малоизученных и распространенных на всей территории Дальнего Востока и Сибири растений, является серпуха венценосная – Serratula coronata L.s.l. Препараты серпухи венценосной (настои и отвары) в основном находят применение только в народной медицине как вяжущее, желчегонное, противовоспалительное и седативное средство венценосная, [Серпуха электронный ресурс]. Серпуха венценосная, произрастающая в Приморском крае, может являться и перспективным источником для выделения биологически активных веществ частности флавоноидов), необходимых для (в фармацевтической промышленности.

Помимо поиска источников биологически активных соединений не менее актуальной является задача рационального использования растительных ресурсов, поиск путей внедрения в значительной степени безотходных технологий, позволяющих избегать проблем утилизации опасных отходов, образующихся в результате переработки растительного сырья.

Гречиха наиболее популярное сельскохозяйственное растение, давно вошедшее в практику пищевого использования. Популярность этого растения обусловлена не только его высокими вкусовыми качествами, но и ценными свойствами, благодаря высокому содержанию флавоноидов, в первую очередь рутина [Клыков, 2000; Determination of optimised......, 2008; Comparison of phenolic...., 2008; Анисимова, 2010; Клыков, 2014]1. Однако большое количество отходов (шелуха семян2, трава3), остающихся после переработки, делают ее использование малоэффективным. Из отходов гречихи получают полисахариды, целлюлозу, красители и пищевые добавки, фурфурол, лекарственные препараты и антиоксиданты [Возобновляемые источники химического сырья....., 2004]. Шелуха гречихи используется в основном в качестве топлива, наполнителя для подушек, упаковки фруктов и хрупких товаров [Каминский, Карунский, Бабич, 2000; Возобновляемые источники химического сырья....., 2004].

Извлечение биологически активных соединений их отходов гречихи позволяет решить проблему комплексного использования этого растения.

Цели и задачи исследований. Целью работы являлось исследование состава флавоноидов отходов производства гречихи посевной (Fagopyrum и серпухи венценосной sagittatum Gilib.) (Serratula coronata L.s.l.), произрастающих на российском Дальнем Востоке.

Задачи исследований:

1) исследовать оптимальные условия выделения флавоноидов из растения (шелухи, травы) гречихи посевной и надземных органов (соцветия, листья, стебли) серпухи 1 Библиографическая ссылки оформлены в соответствии с ГОСТ Р 7.0.5–2008 БИБЛИОГРАФИЧЕСКАЯ ССЫЛКА. Общие требования и правила оформления.

2 Шелуха – кожура семян некоторых растений.

3 Трава – надземная часть растений (стебли и листья с соцветиями).

венценосной;

2) разработать схему выделения и очистки флавоноидов из этанольных экстрактов (шелухи, травы) гречихи посевной и надземных органов (соцветия, листья, стебли) серпухи венценосной;

3) установить химическое строение выделенных соединений;

4) оценить общее содержание флавоноидов и массовую долю индивидуальных соединений в исходном растительном сырье.

Научная новизна. Впервые из шелухи гречихи количественно выделены биологически активные соединения ситостеролин, относящийся классу фитостеролов и флавоноид витексин. Определена массовая доля этих веществ в траве и шелухе гречихи посевной.

Количественное содержание флавоноидов в надземной части дальневосточных популяций серпухи венценосной (Serratula coronata) оценено впервые.

Методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии проведено разделение флавоноидов гречихи посевной (шелухи, травы) и надземных органов (соцветия, листья, стебли) серпухи венценосной.

Впервые показано, что доминирующим флавоноидом в шелухе гречихи является ориентин.

Проведено Теоретическая и практическая значимость работы.

исследование химического состава флавоноидов в отходах (траве, шелухе) производства гречихи посевной Fagopyrum sagittatum и надземной части (соцветия, листья, стебли) серпухи венценосной Serratula coronata.

Разработаны методики количественного анализа флавоноидов в исследуемых растительных объектах.

Исследованы оптимальные условия (температура, соотношение сырье :

экстрагент, время экстракции, соотношение компонентов экстрагента) выделения флавоноидов из отходов производства гречихи (шелухи, травы) и надземной части растения серпухи венценосной для комплексной переработки исходного растительного сырья при получении веществ для фармацевтической промышленности.

Предложена упрощенная схема выделения и очистки флавоноидов из исходного растительного сырья без освобождения экстракта от липидов и последующей избирательной экстракции флавоноидов органическими растворителями.

Предложенная схема комплексной переработки шелухи и травы гречихи позволяет выделять из исходного сырья (биологических ресурсов) флавоноиды и ценное биологически активное соединение класса фитостеролов – ситостеролин.

Методология и методы исследования.

При проведении исследований использованы современные методы анализа состава смесей веществ и их количественного содержания в исследуемых растительных объектах: дифференциальная спектрофотометрия, обращенно– фазовая высокоэффективная жидкостная хроматография. Строение индивидуальных соединений изучено методами инфракрасной–, ядерно– магнитнорезонансной спектроскопии и масс–спектрометрии с различными способами ионизации.

Положения, выносимые на защиту.

1. Условия выделения флавоноидов из отходов гречихи посевной (травы, шелухи) Fagopyrum sagittatum и надземной части (соцветия, листья, стебли) серпухи венценосной Serratula coronata.

2. Упрощенная схема выделения и очистки флавоноидов из экстрактов исследуемых растительных объектов без освобождения флавоноидов от липидов и последующей избирательной экстракции органическими растворителями.

3. Состав и количественное соотношение флавоноидов в отходах производства гречихи (травы, шелухи) и надземной части (соцветия, листья, стебли) серпухи венценосной.

4. Ситостеролин биологически активное соединение класса фитостеролов, впервые выделен из отходов производства гречихи (шелухи).

Степень достоверности и апробация работы.

Достоверность полученных результатов подтверждена привлечением современных физико-химических и физических методов анализа и сравнением их с опубликованными данными.

Основные результаты работы доложены на XX Российской молодежной научной конференции «Проблемы теоретической и экспериментальной химии», посвященной 90–летию Уральского государственного университета им. А.М.

Горького (Екатеринбург, 2010 г.), на XXI молодежной научной конференции «Проблемы теоретической экспериментальной химии», посвященной 150–летию со дня рождения академика Н.Д. Зелинского (Екатеринбург, 2011 г.), V Международном симпозиуме «Химия и химическое образование» (Владивосток, 2011 г.), Международной молодежной научно – практической конференции «Альфред Нобель и достижения мировой науки и цивилизации за 110 лет»

(Казань, 2011 г.), V Всероссийской конференции с международным участием «Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья»

(Барнаул, 2012 г.), на II Международной виртуальной интернет конференции «Биотехнология. Взгляд в будущее» (Казань, 2013 г). Результаты исследований отражены в 9 печатных работах (3 статьи и 6 тезисов докладов).

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Рациональное использование отходов зернового производства В настоящее время актуальной задачей, стоящей перед промышленностью и сельским хозяйством является разработка технологий комплексной переработки отходов производства в целевые продукты, которые позволяют безотходно использовать исходное сырье, избегая при этом накопления их в окружающей среде. Перспективным сырьем для получения различных функциональных продуктов являются отходы сельскохозяйственного производства.

При выращивании и переработке зерна злаковых культур (риса, проса, овса), образуется отходы в виде соломы, шелухи, лузги, мучки (или отрубей), которые до сих пор не находят эффективного применения. Из многочисленных отходов наиболее полно используют отходы рисового производства (шелуха, лузга, солома).

При переработке отходов риса лузги) получают ряд (шелухи, неорганических веществ: фосфат кальция, силикаты, легковесный уголь, высокоуглеродистую золу зависимости от способа переработки).

(в Высокоуглеродистую золу используют для покрытия только что отлитых стальных слитков и для изготовления различных строительных изделий, добавляя ее в бетонные блоки, кирпичи, черепицу, шифер [Возобновляемые источники химического сырья....., 2004].

Из органических веществ, получаемых при переработке шелухи, лузги, а также рисовой соломы, большая часть приходится на метанол, этанол, уксусную, левулиновую, фитиновую кислоты, ацетон, фурфурол, полисахариды, ксилозу, лигнин, который является сырьем для получения ванилина [Возобновляемые источники химического сырья....., 2004].

Измельченную смесь мучки с рисовой лузгой используют в качестве добавки в комбикорм для сельскохозяйственных животных [Возобновляемые источники химического сырья....., 2004]. Рисовая мучка является ценным сырьем, из которого экстрагируют до 14 % столового масла, а обезжиренный шрот представляет собой высокобелковый экстракт, используемый в хлебопекарном производстве [Никогда, 2012].

Отходы (лузга), получаемые при переработке злаковых культур (овса и ячменя), богаты клетчаткой и минеральными веществами. Их используют в основном виде брикетов в комбикормовой промышленности. При переработке зерна проса получают отходы в виде лузги. Основными компонентами лузги проса является клетчатка (50 %), пентозаны (28 %), минеральные вещества (13 %).

Используют лузгу проса как удобрение, а также для получения моносахаридов при кислотном гидролизе, для утепления различных хозяйственных построек, как сырье для изготовления строительного материала (керамзита) [Отходы производства, электронный ресурс].

В начале XXI века в России возрос интерес к отходам гречихи. Гречиха посевная (Fagopyrum sagittatum Gilib.) – важная пищевая культура, обладающая высокой экологической адаптивной способностью.

В процессе производства гречневой крупы ежегодно образуются многотонные отходы в виде соломы, шелухи, мелкого щуплого зерна, мучки (отрубей). Часть соломы в общей надземной массе растения зависит от сорта и составляет 42 – 62 %. В результате очистки зерна образуется около 67 % крупы ядрицы, 7 % продела, 6 % отруби (мучка) и 20 % лузги [Возобновляемые источники химического сырья..., 2004; Лоскутова, Кленышева, электронный ресурс].

В настоящее время основными потребляемыми продуктами из гречихи являются гречневая крупа, мука, чай. Отруби и щуплое зерно гречихи используется в качестве концентрированного корма для сельскохозяйственных животных в составе комбикорма [Ванг, Чен, Фенг, 2010].

Крайне нерационально используется солома, причем количество растительных отходов несколько раз превосходит долю целевой выращенной продукции. Непосредственное внесение в землю, в качестве органического удобрения приводит к тому, что азот в почве используется не для питания корневых систем, а для процессов разложения органических остатков.

Особенностью химического состава соломы гречихи является то, что ее органическое вещество на 80 % состоит из клетчатки, соединенной в прочный лигноцеллюлозный комплекс, который мало поддается воздействию микроорганизмов и ферментов желудочно–кишечного тракта животных, вследствие чего перевариваемость ее низкая Кленышева, [Лоскутова, электронный ресурс]. При сжигании соломы образуется зола, содержащая: Ca – 6,8 %, K – 11,66 %, P – 2,1 %. Высокое содержания калия делает солому гречихи уникальным источником для получения поташа [Шкорина, 2007].

В литературе имеются сведения, по использованию соломы в сельском хозяйстве в качестве мульчи для борьбы с водой и ветровой эрозией на землепахотных полях. Мульчирование создает благоприятные условия для впитывания воды в почву, уменьшает опасность поверхностного стока, ослабляет испарение влаги. При оставлении стерни и соломы в случае замены обычной обработки почвы поверхностной, на 40 – 60 % уменьшается скорость ветра над поверхностью почвы, вследствие этого угроза ветровой эрозии становится менее опасной [Использование соломы...., 2011].

Издавна для обеспечения чистоты в животноводческих помещениях и накопления качественных органических удобрений, используют солому гречихи в качестве подстилки. Солома отвечает большинству требований, предъявляемых к подстилке: мягкая, сухая, влагоемкая, немаркая, без запаха и плесени, способна поглощать газы, убивать многие микроорганизмы и обладает ценностью как удобрение [Применение соломы....., 2004].

Большая часть публикаций по использованию отходов производства гречихи посвящена получению рутина из зеленой массы растения (чаще цветков и листьев) для фармацевтической промышленности [Возобновляемые источники химического сырья....., 2004].

Наибольший интерес среди отходов производства гречихи вызывает ee шелуха, объемы которой при производстве продукта (крупы) составляет около 20 % от массы зерна. Следовательно, ежегодно возобновляется огромное количество растительного сырья, которое до сих пор не находит эффективного использования. В литературе немногочисленны и технические предложения по ее использованию [Возобновляемые источники химического сырья....., 2004].

Сведения, полученные от предприятий по очистке зерна, также свидетельствуют о том, что шелуха гречихи используется в основном в качестве топлива, наполнителя для подушек, упаковки фруктов и хрупких товаров [Каминский, Карунский, Бабич, 2000; Возобновляемые источники химического сырья...., 2004].

Для создания комплексной схемы переработки этих отходов необходимы данные о химическом составе сырья разных сортов. Из отходов гречихи получают полисахариды, целлюлозу, красители, пищевые добавки, фурфурол, лекарственные препараты [Возобновляемые источники химического сырья....., 2004].

Гречневая шелуха представляет большой интерес с точки зрения получения флавоноидов, целлюлозы, коричневого пигмента и полисахаридов. В работах Ванг Инг и др. [2010], Ю.Л. Жеребина и др. [Фармакологические свойства..., 1984] описано использование шелухи гречихи как исходного материала для выделения и рафинирования коричневого пигмента гречихи, проведено исследование его физических и химических свойств. Результаты показали, что коричневый пигмент гречихи устойчив к свету, теплу, ионам металла и является потенциальным источником для получения натуральных красителей. Коричневый пигмент применяется в производстве безалкогольных напитков, вина, сладостей, тортов, соевого соуса и уксуса [Ванг, Чен, Фенг, 2010].

В работе Ю.Л. Жеребина и др. [Фармакологические свойства...,1984] описан способ получения водорастворимого меланинового красителя из гречневой шелухи с использованием метода щелочной экстракции и последующим его осаждением из раствора при помощи кислотного гидролиза. Полученный меланиновый краситель многократно промывают водой и доочищают с помощью диализа [Фармакологические свойства...,1984]. По-видимому, выделение и производство красителей является перспективным направлением использования отходов гречихи.

С.А. Мирошников и др. [Пат. 2396002 Российская Федерация....,2010] предложили способ утилизации шелухи гречихи для получения питательного корма. Использование шелухи в качестве корма в натуральном виде невозможно из–за высокого содержания в ней клетчатки и значительного количества минеральных веществ, придающих жесткость цветочным пленкам, что может привести к травмированию пищеварительного тракта животных. Предлагаемый способ заключается в обработке лузги гречихи щелочной фракцией электроактивированной воды с pH 9–10 и окислительно-восстановительным потенциалом – 800 мВ до влажности 20% и дальнейшему экструдированию4 при температуре 100 °С и давлении 10 МПа. Применение такой химической обработки позволяет разрушить лигнино-целлюлозные связи, препятствующие воздействию ферментов пищеварительных соков на потенциально перевариваемую целлюлозу, значительно уменьшить содержание клетчатки и повысить питательную ценность шелухи гречихи [Пат. 2396002 Российская Федерация....,2010].

М.Н. Дадашев и др. Российская Федерация...,2004] [Пат.2222995 предложили способ получения биологически активных веществ из лузги гречихи.

Метод предусматривает селективную экстракцию сырья диоксидом углерода при 35 С и 20–30 МПа в течение 60–120 минут с последующей регенерацией растворителя и сепарацией целевого продукта. Сепарацию целевого продукта проводят в одной ступени сепаратора при 20 С и давлении 0,1 МПа. Такой способ выделения позволяет получить биологически активные вещества из лузги гречихи с максимальным сохранением их природного баланса [Пат.2222995 Российская Федерация...,2004].

Благодаря высокому содержанию солей калия в золе и растворах золы 4 Экструдирование – наиболее эффективный способ повышения питательной ценности зерновых и зернобобовых компонентов кормовой массы. В процессе приготовления корма зерно подвергается кратковременному, но очень интенсивному механическому и баротермическому воздействию за счет высокой температуры, давления и сдвиговых усилий в винтовых рабочих органах экструдера, в результате чего происходят структурно-механические и химические изменения исходного сырья.

шелухи гречихи, Е.Д. Шкориной [2007] предложено использовать водные экстракты золы для извлечения соединений калия методом электродиализа.

Как показано Е.Д. Шкориной [2007], экстракты шелухи и соломы гречихи проявляют ингибирующую способность в отношении коррозии малоуглеродистой стали в кислых растворах, моделирующих морскую среду. Предложено использование этих продуктов для производства ингибиторов коррозии.

1.2 Биологически активные вещества гречихи

Гречиха посевная является потенциальным источником биологически активных веществ (БАВ) [Исследование химического состава...., электронный ресурс]. Проведенными исследованиями Ванг Инг и др. (2010) показано, что гречиха содержит девять жирных кислот, из которых 75 % приходится на масляную и линолевую кислоты, обладающие антиоксидантной активностью.

Массовая доля белка в гречихе составляет от 15–17 %. Белки представлены в основном глобулинами, относительное содержание которых достигает 64,5 %, альбуминами - 12,5 %, глютелинами - 8,0 %, небольшого количества спирторастворимого белка и глютена. Белок гречихи способен блокировать накопление жира и увеличивать биологическую активность супероксиддисмутазы, каталазы и глутатионпероксидазы, обладает противоопухолевым действием и препятствует старению [Ванг, Чен, Фенг, 2010].

Помимо высококачественных белков и жирных кислот гречиха богата аминокислотами. Семена гречихи в основном содержат аминокислоты: аргинин, лизин и цистин [Ванг, Чен, Фенг, 2010].

А.Г. Клыковым [2014] проведено исследование аминокислотного состава семян разных сортов гречихи, произрастающих в Приморской крае Дальнего Востока России (таблица 1).

–  –  –

А.Г. Клыковым [2014], установлено, что семена гречихи обладают повышенными содержанием аминокислот лизина и треонина, являющихся дефицитными для белков зерна злаковых культур. Также из его данных следует, что преобладающей незаменимой аминокислотой в семенах гречихи является лейцин [Клыков, 2014].

Витаминный комплекс гречихи содержит каротин, витамин В6, рибофлавин, тиамин, никотиновую и фолиевую кислоты и витамин Е, обладающий антиоксидантными свойствами [Мисюрева, 1998].

В.И. Сергиенко и др. [Возобновляемые источники химического сырья..., 2004] приводят сведения о содержании в гречихе витаминов: А – 0,003 мг / 100 г;

B1 – 0,16 мг / 100 г; B2 – 0,084 мг / 100 г; E – 2,3 мг / 100 г.

В работе И.А.Туевой [2006] представлена информация о составе полисахаридов шелухи гречихи. Содержание водорастворимых полисахаридов составляет 1,88 %, пектиновых веществ 1,13 %, гемицеллюлозы А 7,74 % и B гемицеллюлозы 2,99 %. Мономерный состав представлен глюкозой, галактозой,

–  –  –

Особая ценность гречихи состоит в наличии таких биологически активных соединений как флавоноиды.

Флавоноиды – группа биологически активных веществ полифенольной природы, в основе которых лежит фенилпропановый скелет, состоящий из C6–С3

–С6 –углеродных единиц. Свое название они получили от латинского слова “flavus” желтый, т.к. первые выделенные флавоноиды имели желтый цвет [Глинкевич, Софрович, 1983; Шелюто, 2003].

Флавоноиды способны укреплять стенки кровеносных сосудов (обладают сосудоукрепляющим действием). Благоприятное влияние флавоноидов на состояние капиллярной системы обычно проявляется в снижении патологически повышенной проницаемости капилляров и в устранении их ломкости и хрупкости. Именно это свойство Р–витамина открывает широкие возможности для терапевтического применения [Беляков, Васильев, Федорова, 1973].

Флавоноиды способствуют сохранению аскорбиновой кислоты в организме, приводят к её накоплению в органах, прежде всего в надпочечниках. Учитывая эти данные, флавоноиды рекомендуют больным С–гиповитаминозом в комплексе с аскорбиновой кислотой [Беляков, Васильев, Федорова, 1973].

Флавоноиды также оказывают нормализующее влияние на лимфоток, с чем, по-видимому, согласуется их противоотечное действие [Беляков, Васильев, Федорова, 1973].

Наряду с действием на сосуды, флавоноиды известны и как слабые кардиотонические средства, которые способны снижать ритм сердечных сокращений и увеличивать их амплитуду. По имеющимся данным, кверцетин, рутин и другие флавонолы восстанавливают силу утомленного или гиподинамического сердца, нормализуют пульс; некоторые флавоноиды обладают слабым гипотензивным действием [Беляков, Васильев, Федорова, 1973].

Флавоноидные соединения (кверцетин, лютеолин) влияют на состав крови, снижают уровень холестерина и –липопротеидов [Беляков, Васильев, Федорова, 1973].

Одним из ценных свойств флавоноидов является их положительное влияние на функцию печени. Они усиливают желчеотделение, улучшают ее детоксицирующую способность по отношению к таким веществам, как барбитураты, мышьяк. Детоксикации организма способствует свойство флавоноидов оказывать мочегонное действие. Некоторые флавоноиды, содержащиеся в растениях семейства норичниковые благоприятно влияют на пищеварение, понижают тонус гладкой мускулатуры кишечника, оказывают спазмолитическое действие при спазмах мускулатуры желудочно–кишечного тракта [Беляков, Васильев, Федорова, 1973]. Большое значение придается противовоспалительному действию флавоноидов, с чем, возможно, связаны их противоязвенное, ранозаживляющее, жаропонижающее и вяжущее действие.

Привлекают внимание и антимикробные свойства флавоноидов. Установлено отрицательное влияние кверцетина на содержание грамположительных бактерий, а флавонов и халконов – на бактерии стафилококка [Беляков, Васильев, Федорова, 1973]. Антимикробное действие отмечено у антоцианов [Беляков, Васильев, Федорова, 1973].

В литературе имеются сведения о противоопухолевом, радиозащитном и эстрогенном действии–изофлавонов. Благодаря эстрогенному действию флавоноиды могут способствовать воспроизводительной функции организма [Беляков, Васильев, Федорова, 1973].

Группа флавоноидов включает четыре основных подгруппы, которые классифицируются по месту присоединения кольца B к пропановому фрагменту:

1) подгруппа – собственно флавоноиды (производные флавана, флавона, аурона, халкона);

2) подгруппа – изофлавоноиды;

3) подгруппа – неофлавониды;

4) подгруппа – бифлавоноиды.

1 Собственно флавоноиды [Шелюто, 2003]

1.1 Производные флавана (хромана, бензо – – пирона)

–  –  –

Аментофлавон В растениях флавоноидные соединения, кроме катехинов и лейкоантоцианов, сравнительно редко встречаются в свободном состоянии (агликоны). Подавляющее большинство их представлено разнообразными гликозидами. Многообразие флавоноидных гликозидов обусловлено значительным набором сахаров и возможностями присоединения их в ряде положений, а также тем, что сахара могут иметь различную величину окисных циклов, конфигурацию гликозидных связей, порядок сочетаний между ними.

Характерной особенностью является то, что такие сложные смеси часто встречаются в одном и том же растительном материале [Глинкевич, Софрович, 1983].

В качестве углеводной части могут быть моно–, ди– и трисахариды.

Моносахаридами являются обычные для растений сахара: D–глюкоза, D– галактоза, В некоторых случаях встречаются D–ксилоза, L–рамноза.

специфические дисахариды: рутиноза (рамноза и глюкоза), софороза (2 молекулы глюкозы) [Глинкевич, Софрович, 1983].

Сахара могут присоединяться к агликону в 3, 7, 3', 4' и других положениях.

Для флавоноидов характерно наличие гидроксильных групп практически во всех положениях ароматических колец. Многие агликоны содержат метоксильные группы.

Все известные флавоноидные гликозиды разделяются на следующие группы:

– О–гликозиды, которые являются доминирующими гликозидами и составляют основную группу флавоноидов. В О–гликозидах сахара cвязаны с агликоном полуацетальной связью через атом кислорода. О–гликозиды в зависимости от количества сахаров, положения и порядка присоединения делятся на моногликозиды, биозиды, дигликозиды и смешанные гликозиды [Глинкевич, Софрович, 1983; Коноплева, 1999].

С–гликозиды или гликофлавоноиды составляют вторую группу

– флавоноидов, которые в свою очередь разделяются на С–моногликозиды, С– дигликозиды, С–О–дигликозиды, С–О–биозиды. В гликофлавоноидах углеводные заместители связаны с агликоном через углеродный атом в 6 или 8–м положении [Глинкевич, Софрович, 1983; Коноплева, 1999].

К третьей группе флавоноидных гликозидов относятся так называемые комплексные соединения. Они представляют собой ацилированные гликозиды различных групп и в зависимости от положения ацильного заместителя, делятся на гликозиды депсиноидного типа и гликозиды со сложноэфирной связью в углеводных заместителях [Глинкевич, Софрович, 1983; Коноплева, 1999]. В депсиноидах агликоны обычно связаны с ароматическими кислотами, но известны и сложные эфиры с алифатическими кислотами. Из комплексных гликозидов выделены и идентифицированы бензойная, n–оксибензойная, протокатеховая, n–оксикоричная, кофейная, феруловая, синаповая, уксусная, пропионовая кислоты [Глинкевич, Софрович, 1983].

Флавоноиды гречихи представлены: подземная часть (корни) – рутином;

проростки– 3–рамноглюкозид кверцетина, 3–рамногалактозид кверцетина, 3– рамнозид кверцетина, 3–рутинозид кемпферола [Клыков, 2014], витексин, изовитексин, ориентин, изоориентин [Chromatographic and Клыков, рутин, spectrophotometric...,1967; Hegnauer, 1969; 2014], лейкоантоцианидин, фагопирин [Клыков, 2014]; надземная часть рутин, кверцетин, кверцитрин, глюкозогалактозид кверцетина, цианидин глюкозид;

соцветия рутин; зеленые плоды рутин, кверцетин, кверцитрин [Клыков, рутин, витексин, изовитексин, ориентин, изоориентин семена 2014];

[Dietrychszostak, Oleczek, 1999; Максимов, Кулеш, Горовой, 2002; Клыков, 2014];

шелуха семян рутин, кверцетин, гиперин, витексин, изовитексин, ориентин, изоориентин [Watanabe, Ohshita, Tsushida, 1997; Максимов, Кулеш, Горовой, 2002;

Клыков, 2014].

Основная доля флавоноидов в растении приходится на рутин. Известно, что в траве гречихи сортов Приморская и Изумруд, культивируемых на Дальнем Востоке (Приморский край) в период с 1997 по 1999 гг., массовая доля рутина в сырье составляла от 2,4 до 3,0 % [Клыков, 2000]. По данным М.М. Анисимовой [2011] в траве гречихи, культивируемой в Самарской области массовая доля рутина составляла 2,5 – 3,7 %. При исследовании динамики содержания рутина в надземной и подземной частях растений видов: гречихи обыкновенной (Fagopyrum esculentum), татарской (F. tataricum) и полузонтичной (F. cymosum) в различных фазах развития растения (бутонизация, начало цветения, массовое цветение) уже в начале вегетации обнаруживается различия по количеству рутина во всех органах растения [Клыков, 2000] (таблица 4).

Таблица 4 – Содержание рутина в различных органах гречихи в разные от фазы развития (в % от массы сухого сырья) [Клыков, 2000] Часть или Начало Начало Массовое орган вегетации Бутонизация цветения цветение Плодообразование растения Fagopyrum esculentum Moench Надземная 2,5 3,0 3,7 3,8 2,2 часть

–  –  –

В Канадских сортах гречихи (Кото, Манкан, Манизоба, Кобан) массовая доля рутина в семенах составляет 0,017 – 0,025 % [Rutin and flavonoid...., 2007].

Имеются сведения о содержании рутина в семенах других видов Fagopyrum: F.

homotropicum, F. tataricum. Содержание рутина в семенах – F. homotropicum и F.

Tataricum составляет (0,074–0,143 %) и (1,570 –1,795 %) соответственно [Rutin and flavonoid...., 2007]. По данным I.Choi et al. [Suppressive effects...., 2007] в семенах гречихи, культивируемых в Республике Корея, помимо флавоноидов рутина и кверцетина, идентифицировали флавоноид кверцетрин (кверцетин–3–O–

-L–рамнозид).

Помимо гликозидов флавонолов и флавонов гречиха богата катехинами.

Семена гречихи в основном содержат: катехин (0,6 – 6,6 мг/100 г), эпикатехин (2,3

– 11,0 мг/100 г), эпикатехингаллат (0,4 – 2,2 мг/100 г), эпикатехин–3–О– диметилгаллат (0,1 – 1,1 мг/100 г), процианидин В2 (0,3 – 1,1 мг/100 г), процианидин В5 (0,4 – 1,1 мг/100 г), эпиафзелехин–(4–6)–эпикатехин (0,3 – 0,9 мг/100 г), эпиафзелехин–(4–8)–эпикатехин–р–ОH–бензоат (0,1 – 0,9 мг/100 г), эпиафзелехин–(4–8) – эпикатехин–метилгаллат (0,1 – 0,3 мг/100 г), эпиафзелехин

–(4–8)–эпикатехин–(3, 4–диметил)–галлат (1,7 – 5,7 мг /100 г) [Identification of galloylated....,2008].

Катехины шелухи гречихи представлены: (+)–катехин, 1–О––D–

–  –  –

По данным М. Watanabe [1997] в шелухе гречихи, культивируемой в Японии, идентифицировали: рутин – 0,004 %, витексин – 0,005 %, изовитексин – 0,003 % и гиперин – 0,005 %.

Сведения о содержании флавоноидов в шелухе гречихи, культивируемой на территории Приморского края в литературе практически отсутствуют [Клыков, 2000, 2014].

1.3 Биологически активные вещества серпухи венценосной

Одним из малоизученных растений, распространенных на территории Дальнего Востока России, является серпуха венценосная – Serratula coronata L.s.l.

Настои и отвары серпухи венценосной в основном находят применение только в народной медицине как вяжущее, желчегонное, противовоспалительное, противолихорадочное, противорвотное и седативное средство [Серпуха венценосная, электронный ресурс].

Настой корневищ принимали при поносе и гастралгии; больных желтухой обмывали отваром травы; листья и корневища использовали при рвоте, гонорее, опухолях и грыже, траву применяли при болезнях горла и органов дыхания, а также при анемии и лихорадках [Шретер, 1975].

Отваром травы поили при сумасшествии, параличе, эпилепсии, неврозах.

Использовали в качестве ранозаживляющего средства и при лечении рака [Шретер, 1975]. Серпуха венценосная, произрастающая в Приморском крае, может являться перспективным источником для выделения флавоноидов, необходимых для фармацевтической промышленности.

Серпуха венценосная – Serratula coronata содержит сложный комплекс биологически активных веществ (БАВ): фитоэкдистероидов, витаминов, макро– и микроэлементов, незаменимых аминокислот, флавоноидов [Серпуха венценосная....., электронный ресурс].

Особое внимание серпуха венценосная привлекла с момента обнаружения в этом растении фитоэкдистероидов, обладающих: антиоксидантным, кардиолопротекторным, радиопротекторным, антибактериальным, антифунгальным, анаболитическим, гиполипидемическим, противовоспалительным, адаптогенным действиями [Пунегова, 2004; Буданцев, 2013]. Содержание фитоэкдистероидов в растении составляет не менее 0,7 % [Серпуха венценосная....., электронный ресурс]. Основным фитоэкдистероидом растения серпухи венценосной является 20–гидроксиэкдизон (экдистерон), максимальное количество которого отмечено в листьях (1,7 %) [Серпуха венценосная.

..., электронный ресурс; Исследование химического состава...., 2003]. В серпухе венценосной содержатся аюгастерон, интегристерон А, 22– ацетат экдизона, 2–ацетат 20–гидроксиэкдизона, 3–ацетат 20–гидроксиэкдизона, 22–ацет полиподина В, 26–ацетат(24S)–инокостерона, 20,22–O–(R–этилиден)–20– гидроксиэкдизон, С, 20,22–О–(Rэтилиден)аюгастерон 22–дезокси–20,21– дигидроэкдизон, 22–дезокси–20–гидроксиэкдизон, 5,20–дигидроксиэкдизон, 22– дегидро20дезоксиаюгастерон С, 1–гидрокси–22–дезокси–20,21–дидегидроэкдизон, 22–дезокси–20,21–дидегидроэкдизон, 2,3,20R,22R,25–пентагидрокси–5–холеста– 6,8(14)–диен, 24–метиленинидастерон, стахистерон В, 14,15–эпоксид стахистерона В, 14,15–эпокси–14,15–дигидростахистерон В, 1–гидрокси–20,22–дидегидротаксистерон, аюгастерон–20,22–ацетонид, аюгастерон С–20,22–ацетонид, 20,22– дидегидротаксистерон, 20–гидроксиэкдизон–20,22–(5'–гидроксиметил)фурфурилиден А), аюгастерон С–20,22–(5'–гидроксиметил)фурфурилиден (серфуростерон (серфуростерон В), (2,3,5,11,22R)–22,25–эпокси–2,3,11,14,20–пентагидроксихолест– 7–ен–6–он((11)–11–гидроксишидастерон), (2,3,5,14,22R)–2,3,20,22,25– пентагидроксихолест–7ен–6он, (2,3,5,22R)–2,3,20,22,25–пентагидроксихолест–7–ен– 6–он, 2,3,20R,22R,25–пентагидрокси–5,14–холест–7–ен–6он, 2,3,20R,22R,25– пентагидрокси–5–холеста–6,8(14)–диен, (2,3,5,22R)–2,3,14,20,22– пентагидроксихолест–7–ен–6–он (понастерон А), –эклизон, аюгастерон D, 22–О– ацетил–20–гидроксиизовитексирон, птеростерон, туркестерон, 25– гидроксидакрихайнастерон, 22–дезокси–20–гидроксиэкдизон (таксистерон), 20,26– дигидроксиэкдизон,14–эпи–20–гидроксиэктизон, 20–гидроксиэкдизон–20,22– моноацетонид, 22–эпи–20–гидроксиэкдизон, (5)–20–гидроксиэкдизон, 22–дезокси– 20,21–дигидроксиэкдизон, 5,25–дигидроксидакрихайнастерон (херкестерон), 2– дезокси–3–эпи–4,20–дигидроксиэкдизон (коронатастерон), 25–S–инокостерин, макистерон А, аюгастерон С, макистерон С, дакрихайнастерон, экдизон, полиподин В, инокостерон [Серпуха венценосная..., электронный ресурс; Володин, Лукша, Дайман, 1998; Экдистероиды в культурах..., 2002; Пчеленко, Метелкина, Володина, 2002; Буданцев, 2013].

Аминокислотный состав надземной части растения серпухи венценосной представлен аспаргиновой кислотой (0,3 – 1,0 г/100 г), треонином (0,2 – 0,4 г/100 г), серином (0,2– 0,4 г/ 100 г), глутаминовой кислотой (0,4 – 0,9 г/100 г), пролином (0,2–1,1 г/100 г), глицином (0,2–0,4 г/100 г), аланином (0,2–0,5 г/100 г), валином (0,3 г/100 г), изолейцином (0,1–0,3 г/100 г), лейцином (0,3–0,6 г/100 г), фенилаланином (0,3 г /100 г), лизином (0,2 – 0,5 г/100 г), аргинином (0,2– 0,4 г/100 г) [Алиева, 2002].

В.Ю.Андреев и А.С.Ангаскиев [2011] приводят результаты исследования содержания макро– и микроэлементов в надземной части растения серпухи венценосной, собранной в окрестностях города Томска в 2008 г. В таблице 6 приведены данные по составу 28 элементов, из которых макроэлементы представлены Ca, Na, Fe. В ряду микроэлементов отмечено высокое содержание:

Sr, Ba, Zn, Rb, Cr, Br, La, Cs.

Таблица 6 – Содержание макро– и микроэлементов в траве серпухи венценосной, собранной в окрестностях г. Томска в 2008 г [Андреев, Ангаскиев, 2011]

–  –  –

Cерпуха венценосная способна накапливать жизненно важные элементы, как натрий, имеющий большое значение в деятельности кардиомицитов, в изменении их электрической активности и в осуществлении сократительной функции; железо, участвующее в процессах кроветворения и входящее в состав гемоглобина эритроцитов; цинк и селен, обладающее антиоксидантными свойствами; хром, регулирующий углеводный и жировой обмен; кобальт, являющийся составной частью витамина В12 и способствующий увеличению гемоглобина в крови. В то же время избыточное содержание таких элементов в организме, как Сo, Fe и Zn, может привести к нарушению электрической проводимости сердца; Ba, Sb и Se –изменению аорты, сердечных клапанов, размеру сердечных камер [Андреев, Ангаскиев, 2011].

Витаминный комплекс серпухи венценосной содержит каротиноиды (130– 135 мг/100 г), витамин К (0,38 – 0,41 мг/100 г), витамин С (19,0 21,0 мг/100 г) [Ангаскиева, 2003].

Имеются сведения о составе полисахаридов серпухи венценосной произрастающей в Сибири; содержание водорастворимых полисахаридов составляет 2,43 – 2,55 %, пектиновых веществ 0,41 – 0,48 %, гемицеллюлозы А 2,4 % и B 0,32 – 0,61 % [Ангаскиева, 2006].

В серпухе венценосной обнаружены апигенин, 3–метилкверцетин, лютеолин, кверцетин, лютеолин–4––D–глюкозид, кверцетин–4––D–глюкозид [Bohlmann, Czerson, 1976; Monitoring the antioxidant..., 2004; Буданцев, 2013], 5,7,4–тригидрокси–3–метоксифлавон [Bohlmann, Rode, Waldau, 1967; Darnley Gibbs, 1974; Bohlmann, Czerson, 1976; Соколов, 1993; Буданцев, 2013], кемпферол [Monitoring the antioxidant..., 2004].

Флавоноиды серпухи венценосной, произрастающей в Сибири, представлены рутином, апигенином, лютеолином, кверцетином, кемпферолом и гликозидами лютеолина и кверцетина [Ангаскиева, 2006]. Описан соcтав флавоноидов других видов рода Serratula: S. cichoracea, S. tinctoria, S. lycopifolia [Bohlmann, Rode, Waldau, 1967; Яцюк, Лященко, 1969; Глызин, Баньковский, Мельникова, 1972; Соколов, 1993; Flavonoids of S. cichoracea...., 2007; S. tinctoria, Буданцев, 2013]. В Serratula cichoracea идентифицированы a source..., 2009;

флавоноиды: 3–метилкверцетин, апигенин, акацетин, лютеолин, генкванин [Aliouche, 2007]. Флавоноидный состав S. tinctoria представлен: лютеолином, 3– метилкверцетином, лютеолин–4––D–глюкозидом, лютеолин–7––D– глюкозидом, апигенином, лютеолином Лященко, Глызин, [Яцюк, 1969;

Баньковский, Мельникова, 1972; Соколов, 1993; S. tinctoria, a source..., 2009;

Буданцев, 2013]; S. lycopifolia- 5,7,4-тригидрокси-3-метоксифлавоном [Bohlmann, Rode, Waldau, 1967].

1.4 Методы выделения и идентификации флавоноидов из растений

Для флавоноидов, как и для большинства природных соединений, не существует универсальных методов выделения. В зависимости от свойств веществ, особенностей растительного сырья и ряда других факторов прибегают к наиболее подходящему из известных методов выделения: избирательная экстракция, хроматография и др.[Беляков, Васильев, Федорова, 1996].

Для выделения флавоноидов проводят экстракцию растительного материала, как правило, одним из низших спиртов (метиловый [Flavonoids of the aerial part of Centaurea pullata, 2005; Optimal recovery..., 2005; Louaar, 2007;

Flavonoids from Chrysanthemum fuscatum, 2007; Flavonol glycosides..., 2007;

Determination of optimised...., 2008; Flavonoids aglicones from Centaurea sphaerocephala, 2008], этиловый [Исследование химического состава...., 2003;

Optimal recovery...., 2005; Flavonoids of Serratula cichoracea..., 2007; Kurkin, Sharova, 2007; Анисимова, Куркин, Ежков, 2010; Каримов, Юлдашев, Ботиров, 2012] или ацетоном [Optimal recovery....., 2005; Ванг, Чен, Инг, 2010]).

Спиртовое извлечение упаривают, к остатку добавляют горячую воду и после охлаждения удаляют неполярные соединения (хлорофилл, жирные и эфирные масла) из водной фракции хлороформом [Phenolic compounds from Centaurea Africana, 2006; Louaar, 2007; Flavonoids aglicones from Centaurea sphaerocephala, 2008], четыреххлористым углеродом [Глинкевич, Софрович, или гексаном. Далее флавоноиды из водной фазы извлекают 1983] последовательно этиловым эфиром (агликоны), этилацетатом (в основном монозиды) и бутанолом (биозиды, триозиды) [Сиротский, 1987; Aglycone flavonoids of Centaurea tougourensis, 2006; Louaar, 2007; Flavonoids aglicones from Centaurea sphaerocephala, 2008].

Описан метод выделения флавоноидов из корней девясила – Inula L., путем водной ультразвуковой экстракции при комнатной температуре и нагревании до 40° С [Получение сухого экстракта...., 1999].

Для сравнения проводили экстракцию методом настаивания (мацераций).

Экстракцию проводили настаиванием дважды при температуре 40С, выход экстрактивных веществ составил 27,2% через 3 часа, для ультразвуковой экстракции – 41,2% через 40 мин. При комнатной температуре 13,5 % для ультразвуковой экстракции. Для удаления полисахаридов из водяной вытяжки после ультразвуковой экстракции использовали 80%-ный этанол. Флавоноиды при этом остаются в растворе [Получение сухого экстракта...., 1999].

Для выделения гликозидов из водно–спиртового раствора проводилась экстракция этилацетатом, для агликонов – серным эфиром [Получение сухого экстракта...., 1999].

Довольно часто, для упрощения разделения суммарного экстракта или отдельных фракций, их подвергают химическим превращениям, с целью получения более устойчивых и менее полярных веществ. К таким способам относятся: метилирование, ацетилирование, кислотный и щелочной гидролиз [Шинкаренко, Бандюкова, Казаков, 1987].

Фракции флавоноидных соединений разделяют на индивидуальные компоненты обычно хроматографическими методами, которые используют для исследования качественного состава флавоноидов и для их количественного определения.

Выделение индивидуальных флавоноидных соединений проводится по механизму распределительной или адсорбционной хроматографии. Для разделения флавоноидных соединений в качестве неподвижной фазы используют силикагель [Ботиров, Дренин, Макарова, 2006; Aglycone flavonoids of Centaurea tougourensis, 2006; Шарова, Куркин, 2007; Flavonoids of Serratula cichoracea..., 2007; Louaar, 2007; Флавоноиды и терпеноиды..., 2008; Лобанова, Турецкова, 2011], полиамидный сорбент [Штейнбюк, Антоновский, Белозерова, 1985;

Сиротский, 1987; Ботиров, Дренин, Макарова, 2006; Шарова, Куркин, 2007;

Flavonoids from Chrysanthemum fuscatum, 2007; Flavonoids aglicones from Centaurea sphaerocephala, 2008; Флавоноиды и терпеноиды..., 2008; Лобанова, Турецкова, 2011] или целлюлозу [Глинкевич, Софрович, 1983; Получение сухого экстракта..., 1999]. Элюирование веществ проводят смесью хлороформа с метиловым спиртом с возрастающей концентрацией метилового спирта Флавоноиды и [Flavonoids of the aerial part of Centaurea pullata, 2005;

терпеноиды..., 2008; Serratula tintoria, a source..., 2009] или спиртово–водными смесями с возрастающей концентрацией спирта [Flavonoids of the aerial part of Centaurea pullata, 2005; Шарова, Куркин, 2007; Лобанова, Турецкова, 2011], если сорбентом служит полиамид, и 5-30%-ной уксусной кислотой в случае целлюлозы [Глинкевич, Софрович, 1983; Флавоноиды и терпеноиды...., 1999].

Для выделения индивидуальных флавоноидов существуют специфические методы. При выделении рутина из бутонов софоры японской экстракцию проводят горячей водой. При охлаждении водных извлечений рутин выпадает в осадок, его отфильтровывают и очищают перекристаллизацией из спирта [Глинкевич, Софрович, 1983].

K. H. Kim et al. [Optimal recovery..., 2005] предлагают метод выделения рутина (с чистотой 95 %) из надземной части гречихи. Метод включает экстракцию сырья 50 % раствором этанола при 80 С в течение 1 часа. Выделение рутина из экстракта на колонке с обращено-фазовом сорбенте HP–20 (стиролдивинилбензол) при элюировании 20 – 30 % раствором этанола, и перекристаллизацией из горячей воды при 4 С в течение 12 часов; выход рутина составил 92 %.

В работе Э.Р. Каримовой и др. [Групповой состав фенольных соединений..., 2011] описан способ получения рутина из лузги (шелухи) гречихи посевной.

Извлечение рутина из лузги гречихи проводили обработкой сырья 70 %–ым этанолом в аппарате Сокслета при умеренном нагревании в течение 4 часов.

Затем отработанную шелуху заливали 50 мл хлороформа и настаивали в течение суток. Объединяли этанольный и хлороформеннные экстракты, растворитель упаривали.

Фракцию рутина извлекали из сгущенного экстракта, в два приема кипящей водой по 20 – 25 мл, горячий раствор фильтровали и кристаллизовали при 10-12 °С. Выпавшие кристаллы рутина перекристаллизовывали из метанола.

Выход составил 1 % в пересчете на воздушно–сухое сырье [Групповой состав фенольных соединений...., 2011].

Для быстрого разделения и очистки флавоноидов от балластных веществ используется метод тонкослойной хроматографии (ТСХ). Для контроля за составом исходного экстракта, выходом индивидуальных соединений при колоночной хроматографии и идентификации состава смеси с использованием этанольных соединений применяется аналитическая ТСХ, проводимая на пластинках «Силуфол» в системе растворителей хлороформ–метанол (8:3) по объему [Юй, 2006; Гришина, Погодин, Лукша, 2008]. М.М. Анисимова [2011] для определения подлинности травы гречихи посевной разработала методику тонкослойной хроматографии для разделения флавоноидов. Разделение флавоноидов проводили на пластинках УФ–254» в системе «Силуфол растворителей: хлороформ : метанол : вода (26:14:3) или на пластинках «Сорбфил ПТСХ–П–А–УФ» в системе н–бутанол:уксусная кислота:вода В (4:1:2).

результате на хроматограмме обнаруживается доминирующее пятно с величиной Rf около 0,4 (рутин), с Rf –0,8 (кверцетин) и с Rf–0,6 (изокверцитрин).

При качественном определении методом ТСХ состава фенольных соединений (в частности флавоноидов) серпухи венценосной – Serratula coronata наилучшее разделение было достигнуто при использовании в качестве подвижной фазы смеси растворителей хлороформ:метанол (1:1) [Ангаскиева, 2006].



Pages:   || 2 | 3 | 4 |

Похожие работы:

«Цвиркун Ольга Валентиновна ЭПИДЕМИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС КОРИ В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКИ. 14.02.02 – эпидемиология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: заслуженный деятель науки РФ, лауреат Государственной премии СССР профессор, доктор медицинских наук Ющенко Галина Васильевна Москва – 20 Содержание...»

«ЖУРАВЛЕВА МАРИЯ СПАРТАКОВНА Количественная характеристика показателей иммунного ответа у кур на различные типы антигенов 06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Научный руководитель:...»

«РАХМАТУЛЛИН Рамиль Рафаилевич БИОПЛАСТИЧЕСКИЙ МАТЕРИАЛ НА ОСНОВЕ ГИДРОКОЛЛОИДА ГИАЛУРОНОВОЙ КИСЛОТЫ И ПЕПТИДНОГО КОМПЛЕКСА ДЛЯ ВОССТАНОВИТЕЛЬНОЙ И РЕКОНСТРУКТИВНОЙ ХИРУРГИИ...»

«АБДУЛЛАЕВ Ренат Абдуллаевич ГЕНЕТИЧЕСКОЕ РАЗНООБРАЗИЕ МЕСТНЫХ ФОРМ ЯЧМЕНЯ ИЗ ДАГЕСТАНА ПО АДАПТИВНО ВАЖНЫМ ПРИЗНАКАМ Шифр и наименование специальности 03.02.07 – генетика 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений ДИССЕРТАЦИЯ на соискание учёной степени кандидата...»

«Шершнева Анна Михайловна ПОЛИМЕРНЫЕ МИКРОЧАСТИЦЫ НА ОСНОВЕ ПОЛИГИДРОКСИАЛКАНОАТОВ: ПОЛУЧЕНИЕ, ХАРАКТЕРИСТИКА, ПРИМЕНЕНИЕ Специальность 03.01.06 – Биотехнология (в т.ч. бионанотехнологии) ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, Шишацкая Екатерина Игоревна...»

«ШАЯХМЕТОВ МАРАТ РАХИМБЕРДЫЕВИЧ ИЗУЧЕНИЕ ПОЧВЕННОГО ПОКРОВА ЛЕСОСТЕПНОЙ ЗОНЫ ЗАПАДНОЙ СИБИРИ НА ОСНОВЕ ДИСТАНЦИОННОГО ЗОНДИРОВАНИЯ ЗЕМЛИ 03.02.13 – почвоведение Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук научный руководитель: доктор сельскохозяйственных наук, профессор Л.В. Березин Уфа...»

«ПИМЕНОВА ЕКАТЕРИНА ВЛАДИМИРОВНА РАЗРАБОТКА МЕТОДА ОЦЕНКИ ЦИТОТОКСИЧНОСТИ АНТИГЕНОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ МЕЛИОИДОЗА IN VITRO НА МОДЕЛИ ПЕРЕВИВАЕМЫХ КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУР 03.02.03 – микробиология Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор...»

«Шумилова Анна Алексеевна ПОТЕНЦИАЛ БИОРАЗРУШАЕМЫХ ПОЛИГИДРОКСИАЛКАНОАТОВ В КАЧЕСТВЕ КОСТНОПЛАСТИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ Специальность 03.01.06 – биотехнология (в том числе бионанотехнологии) ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук Шишацкая Екатерина Игоревна Красноярск...»

«Аванесова Татьяна Андреевна ПОВЫШЕНИЕ КЛИНИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЭНДОВИТРЕАЛЬНОГО ЛЕЧЕНИЯ РЕГМАТОГЕННОЙ ОТСЛОЙКИ СЕТЧАТКИ НА ОСНОВЕ ОЦЕНКИ АНАТОМО-МОРФОЛОГИЧЕСКИХ И МИКРОЦИРКУЛЯТОРНЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ 14.01.07 глазные болезни Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук...»

«УДК 256.18(268.45) ШАВЫКИН АНАТОЛИЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ ЭКОЛОГО-ОКЕАНОЛОГИЧЕСКОЕ СОПРОВОЖДЕНИЕ ОСВОЕНИЯ НЕФТЕГАЗОВЫХ МЕСТОРОЖДЕНИЙ АРКТИЧЕСКОГО ШЕЛЬФА (НА ПРИМЕРЕ БАРЕНЦЕВА МОРЯ) Специальность 25.00.28 «океанология» Диссертация на соискание ученой степени доктора географических наук Мурманск – 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ...»

«ДЕМИНА ИРИНА ВЛАДИМИРОВНА РОЛЬ КУЛИКОМОРФНЫХ НАСЕКОМЫХ (DIPTERA, NEMATOCERA) В ФОРМИРОВАНИИ ПОТОКОВ ВЕЩЕСТВА И ЭНЕРГИИ ЧЕРЕЗ ГРАНИЦУ «ВОДА – ВОЗДУХ» ПОЙМЕННЫХ ОЗЁР р. ВОЛГА (САРАТОВСКАЯ ОБЛАСТЬ) 03.02.05 – энтомология 03.02.08 – экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научные руководители: кандидат биологических наук,...»

«ЗАУЗОЛКОВА Наталья Андреевна АГАРИКОИДНЫЕ И ГАСТЕРОИДНЫЕ БАЗИДИОМИЦЕТЫ ЛЕСОСТЕПНЫХ СООБЩЕСТВ МИНУСИНСКИХ КОТЛОВИН 03.02.01 – «Ботаника» ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель – кандидат биологических наук, И. А. Горбунова Абакан – 2015 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ... ГЛАВА 1....»

«ШИТОВ АЛЕКСАНДР ВИКТОРОВИЧ ВЛИЯНИЕ СЕЙСМИЧНОСТИ (НА ПРИМЕРЕ ЧУЙСКОГО ЗЕМЛЕТРЯСЕНИЯ И ЕГО АФТЕРШОКОВ) И СОПУТСТВУЮЩИХ ГЕОЛОГИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ НА АБИОТИЧЕСКИЕ КОМПОНЕНТЫ ЭКОСИСТЕМ И ЗДОРОВЬЕ ЧЕЛОВЕКА 25.00.36 – Геоэкология (науки о Земле) Диссертация на соискание ученой степени доктора геолого-минералогических наук Горно-Алтайск...»

«Шинкаренко Андрей Семенович Формирование безопасного и здорового образа жизни школьников на современном этапе развития общества Специальность 13.00.01– общая педагогика, история педагогики и образования Диссертация на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Научные...»

«СОКУР Светлана Александровна ОПТИМИЗАЦИЯ ИСХОДОВ ПРОГРАММ ВСПОМОГАТЕЛЬНЫХ РЕПРОДУКТИВНЫХ ТЕХНОЛОГИЙ У СУПРУЖЕСКИХ ПАР С ПОВЫШЕННЫМ УРОВНЕМ АНЕУПЛОИДИИ В СПЕРМАТОЗОИДАХ 14.01.01акушерство и гинекология Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научные руководители:...»

«Вафула Арнольд Мамати РАЗРАБОТКА ЭЛЕМЕНТОВ ТЕХНОЛОГИИ ВЫРАЩИВАНИЯ ПАПАЙИ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ЗДОРОВОГО ПОСАДОЧНОГО МАТЕРИАЛА И ЭКСТРАКТОВ С БИОПЕСТИЦИДНЫМИ СВОЙСТВАМИ ДЛЯ ЗАЩИТЫ ЕЕ ОТ ВРЕДНЫХ ОРГАНИЗМОВ Специальности: 06.01.07 – защита растений 06.01.01 – общее земледелие и растениеводство Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных...»

«РОМАНЕНКО НИКОЛАЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ АНЕМИЯ У БОЛЬНЫХ ОНКОГЕМАТОЛОГИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ: ОСОБЕННОСТИ ПАТОГЕНЕЗА, МЕТОДЫ КОРРЕКЦИИ, КАЧЕСТВО ЖИЗНИ 14.01.21. – гематология и переливание крови Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант – доктор медицинских наук, профессор...»

«ПОЕДИНОК НАТАЛЬЯ ЛЕОНИДОВНА УДК 602.3:582.282/284:57.086.83]:[681.7.069.24+577.34 БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ИНТЕНСИФИКАЦИИ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ СЪЕДОБНЫХ И ЛЕКАРСТВЕННЫХ МАКРОМИЦЕТОВ С ПОМОЩЬЮ СВЕТА НИЗКОЙ ИНТЕНСИВНОСТИ 03.00.20 – биотехнология Диссертация на соискание научной степени доктора биологических наук Научный консультант Дудка Ирина...»

«Ядрихинская Варвара Константиновна ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ОСТРЫХ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ В Г. ЯКУТСКЕ И РЕСПУБЛИКЕ САХА (ЯКУТИЯ) 03.02.08 – экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель кандидат биологических наук, доцент М.В. Щелчкова Якутск 2015...»

«ФЕДОРОВА Екатерина Алексеевна ХАРАКТЕРИСТИКИ ВИРУСА ГРИППА, ВЛИЯЮЩИЕ НА ПОКАЗАТЕЛИ ГУМОРАЛЬНОГО ИММУННОГО ОТВЕТА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ И ПРИ ВАКЦИНАЦИИ 03.02.02 – вирусология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: Доктор биологических наук, доцент И.В. КИСЕЛЕВА Санкт-Петербург – ОГЛАВЛЕНИЕ Раздел 1....»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.