WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


«КЛЕТКИ И КРОВЕНОСНЫЕ СОСУДЫ ДЕРМЫ ЧЕЛОВЕКА В ОНТОГЕНЕЗЕ ...»

На правах рукописи

ПЕТРОВ ВАДИМ ВИТАЛЬЕВИЧ

КЛЕТКИ И КРОВЕНОСНЫЕ СОСУДЫ ДЕРМЫ ЧЕЛОВЕКА В

ОНТОГЕНЕЗЕ

03.03.04 – клеточная биология, цитология, гистология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Казань – 2015

Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном

образовательном учреждении высшего профессионального образования «Чувашский государственный университет имени И.Н. Ульянова»

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Гунин Андрей Германович

Официальные оппоненты:

Яглов Валентин Васильевич – доктор медицинских наук, профессор, зав. лабораторией развития эндокринной системы Федерального государственного научного бюджетного учреждения «Научноисследовательский институт морфологии человека».

Гумерова Аниса Азатовна – доктор медицинских наук, профессор кафедры морфологии и общей патологии Федерального государственного автономного учреждения высшего профессионального образования "Казанский (Приволжский) федеральный университет".

Ведущая организация:

Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова» Министерства здравоохранения Российской Федерации.

Защита состоится 17 апреля 2015 года в 10 часов на заседании диссертационного совета Д 208.034.01 при ГБОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (420012, г. Казань, ул. Бутлерова, 49).

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ГБОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (420012, г. Казань, ул. Бутлерова, 49 б) и на сайте: www.kgmu.kcn.ru.

Автореферат разослан «__» _________2015 года.

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук, профессор Зубаирова Л.Д.

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность. Проблема возрастных изменений в различных органах и тканях является одним из самых актуальных и приоритетных для современной медицины и биологии. Эта актуальность обусловлена в первую очередь существенным увеличением рисков развития различных видов патологий. С одной стороны, это может быть связано с уменьшением эффективности функционирования иммунной системы с возрастом, а с другой угасанием в большинстве клеточных типов процессов пролиферации и синтетической активности (Zouboulis et al., 2008).

В рамках этой проблемы несомненный интерес, в частности для дерматологии и косметологии, представляют вопросы возрастных изменений кожи. Причем, несмотря на кажущуюся хорошую изученность возможности современной медицины свидетельствует о том, что до настоящего времени мы не можем полноценно предотвратить появление признаков старения кожи (Sanz-Jaka et al., 2009). Для преодоления проблемы старения кожи необходимо знать закономерности, лежащие в основе этих изменений, в то время как таких сведений до настоящего времени явно недостаточно (Carlos Lpez-Otn et al., 2013). На протяжении жизни кожа человека претерпевает комплекс морфофункциональных изменений. Главное место среди них занимают изменения в состоянии межклеточного вещества дермы, где происходит ферментативное разрушение и замедление синтеза новых коллагеновых и эластических волокон, уменьшение содержания гиалуроновой кислоты и протеогликанов, вместе с тем в дерме происходит изменение архитектоники волокон и накопление фрагментированных коллагеновых и эластических волокон (Kohl et al., 2011; Naylor et al., 2011;

Nguyen, Eklouh-Molinier et al., 2014). Различные волокна и аморфный компонент соединительной ткани, как и ферменты, участвующие в их разрушении, являются продуктами жизнедеятельности клеток, локализованных в дерме, поэтому вполне очевидно, что изменения в составе межклеточного вещества напрямую связаны с изменениями в клеточном составе дермы. Однако возрастные изменения клеточной популяции дермы практически не охарактеризованы. Более того данные по этому вопросу порой имеют противоречивый характер (Bentov et al.

, 2014). Так, к настоящему времени остаются неизвестны фенотипические особенности, функциональная и пролиферативная активность дермальных фибробластов в возрастном аспекте (Khavkin, Ellis, 2011). Кроме фибробластов, в дерме присутствуют клетки костномозговой природы, такие как лейкоциты, тучные клетки, натуральные киллеры, гематопоэтические стволовые клетки и другие (Rijken, Bruijnzeel, 2009; Vukmanovic-Stejic et al., 2011; Wang et al., 2012).

Изменения в содержании и функциональной активности всех этих клеток изучены в основном на моделях индуцированного старения кожи, в то время как физиологические возрастные изменения остаются мало исследованными (Cho et al., 2009; Kim et al., 2009; Rijken, Bruijnzeel-Koomen, 2011). Так, имеются противоречивые сведения о возрастных изменениях содержания тучных клеток в дерме человека с фетального периода до глубокой старости (Enerback, Wingren, 1980; Gilchrest et al., 1982; Montagna, Carlisle, 1990). А сведения о возрастных изменениях популяции эозинофилов в дерме человека в литературе вообще отсутствуют.

Одним из факторов, обеспечивающим нормальное функционирование любого органа, в том числе и кожи, является кровоснабжение. Однако ситуация с состоянием сосудистого обеспечения кожи в возрастном аспекте не совсем ясна. Большая часть данных о возрастном снижении кровоснабжения кожи получена без использования иммуногистохимических методов, кроме того все работы в этой области охватывают какой-либо один период жизни (Coolen et al., 2010), а количественного исследования сосудистого обеспечения дермы человека от эмбрионального периода до глубокой старости не было проведено. Поэтому изучение особенностей кровеносной системы кожи способствует установлению неисследованных механизмов, лежащих в основе возрастных изменений (Lee et al., 2010).

Недостаточная изученность различных аспектов функционирования кожи во многом связана с недостаточной информативностью классических морфологических подходов, которые не всегда позволяют адекватно выявлять различные типы клеток, однако с появлением методов иммуногистохимии появилась возможность корректно идентифицировать любые клетки и обозначить их функциональное состояние. Вышеизложенное убедительно показывает целесообразность и научную значимость исследования морфологической структуры кожи человека при старении.

Исходя из этого, целью настоящей работы явилось иммуногистохимическое изучение клеточного состава дермы человека и структурных характеристик ее кровеносных сосудов в онтогенезе.

В соответствии с целью были определены следующие задачи:

1. Исследовать количество фибробластов в дерме человека в онтогенезе и их пролиферативную активность на основании экспрессии ядерного антигена пролиферирующих клеток (PCNA).

2. Иммуногистоимически исследовать возрастные изменения количества клеток, содержащих общелейкоцитарный антиген CD45, в дерме человека.

3. Иммуногистоимически на основании экспрессии триптазы исследовать состояние популяции тучных клеток в дерме кожи человека в онтогенезе.

4. Иммуногистоимически на основании наличия главного основного белка (MBP) изучить возрастные изменения содержания эозинофилов в дерме человека.

5. Иммуногистоимически на основании иммунореактивности к фактору Виллебранда и белку межклеточных контактов эндотелиальных клеток CD31 исследовать количество кровеносных сосудов в дерме кожи человека в онтогенезе.

Научная новизна. Впервые выявлены изменения клеточного состава дермы человека с 22 недель внутриутробного развития до 85 лет, которые заключаются в том, что происходит нелинейное уменьшение содержания фибробластов дермы на протяжении жизни. Выявлены критические возрастные периоды, в которых отмечается резкое падение численности фибробластов дермы, к ним относят 30-40 недель неонатального периода, а также период между 11 и 20 годами жизни.

Новыми являются данные об изменении морфологии фибробластов в онтогенезе. Безусловной новизной обладают сведения о возрастных изменениях дермы, которые потенциально могут влиять на снижение числа фибробластов, включающие уменьшение количества пролиферирующих клеток дермы человека в онтогенезе, начиная с внутриутробного периода.

Приоритетными следует признать сведения о том, что количество CD45 положительных клеток в коже человека увеличивает с возрастом, причем увеличение их количества взаимосвязано с уменьшением общей численности фибробластов и их пролиферативной активностью.

Впервые получены данные о неуклонном и постепенном увеличении числа тучных клеток и изменении их морфологии в дерме человека в онтогенезе, а также впервые обнаружено полное отсутствие эозинофилов в коже здорового человека.

Впервые доказано, что возрастное уменьшение количества фибробластов дермы зависит от степени ее кровоснабжения. Впервые, иммуногистохимически, получены новые знания об уменьшении численности кровеносных сосудов при старении кожи.

Научно-практическая значимость. Результаты данной работы существенно расширяют наши знания о комплексных изменениях в дерме человека в онтогенезе. Впервые раскрыты новые механизмы, приводящие к возрастным изменениям в коже человека. Полученные данные могут быть полезными для разработки клинических подходов в профилактике и терапии возрастных изменений кожи. Практическая значимость настоящей работы заключается в использовании полученных данных при проведении научных исследований в гистологии, патологической анатомии и геронтологии. Они дополняют существующие данные в области возрастной гистологии и могут быть использованы при чтении лекций и проведении практических занятий на медицинских и биологических факультетах вузов.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Снижение численности фибробластов в дерме человека в онтогенезе обусловлено снижением их пролиферативной активности, увеличением численности CD45-положительных и тучных клеток, а также уменьшением количества кровеносных сосудов.

Апробация работы. Результаты работы, отражающие основные положения диссертации представлялись на ежегодных итоговых конференциях медицинского факультета Чувашского государственного университета им. И.Н. Ульянова (2010-2014), международной научной конференции «Актуальные проблемы психологии и медицины в условиях модернизации образования и здравоохранения» (Чебоксары, 2012), VIII международной заочной научно-практической конференции «Научная дискуссия: инновации в современном мире» (Москва, 2013), The 8th European Congress of Biogerontology joint with the 2nd International RESOLVE Meeting «Healthy Ageing and Regenerative Medicine» (Israel, 2013), научной конференции «Фундаментальные проблемы геронтологии и гериатрии», посвященной 20-летию со дня основания Геронтологического общества при Российской академии наук (Санкт-Петербург, 2014).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 12 печатных работ, из них 2 в зарубежных и 4 в отечественных ведущих рецензируемых научных журналах и изданиях, рекомендованных ВАК для защиты кандидатских и докторских диссертации, 6 тезисов докладов Международных и Всероссийских конференций и конгрессов.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов исследования, обсуждения и выводов. Объем диссертации 137 страницы машинописного текста. Работа содержит 60 рисунков. Список цитированной литературы содержит 8 отечественных и 186 зарубежных источников.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объектом исследования служила кожа, полученная при аутопсии, нижней части передней поверхности шеи (верхний угол стандартного разреза кожи при аутопсии) у плодов человека, умерших антенатально на сроке 20-40 недель беременности, а также у людей, умерших от различных причин в возрасте от 1 дня до 85 лет.

Для подсчета численности клеток был использован 518 кусочек кожи (200 женщин и 318 мужчин), во всех кусочках вычислялось количество фибробластов. Для исследования численности PCNA положительных клеток было использовано 139 кусочков кожи (35 женщин и 104 мужчин). Для исследования численности CD45 положительных клеток было использовано 151 кусочков кожи (62 женщин и 89 мужчин). Для подсчета количества тучных клеток было использовано 156 кусочков кожи (46 женщин и 110 мужчин). Для подсчета количества эозинофилов было использовано 46 кусочков кожи. Для определения численности сосудов, эндотелий которых экспрессирует антиген CD31 было использовано 85 кусочков кожи (32 женщин и 53 мужчин). Для подсчета количества сосудов, эндотелий которых экспрессирует фактор Виллебранда было использовано 92 кусочков кожи (35 женщин и 57 мужчин).

Все случаи группировались по возрастному принципу. Для антенатального периода были выбраны 10 недельные промежутки: 20-30 недель беременности (группа 1), 31-40 недель беременности (группа 2). Для постнатального периода все случаи группировались по 10 годичным интервалам: 1-10 лет (группа 3), 11-20 лет (группа 4), 21-30 лет (группа 5), 31-40 лет (группа 6), 41-50 лет (группа 7), 51-60 лет (группа 8), 61-70 лет (группа 9), 71 до 85 лет (группа 10).

При определении численности сосудов, эндотелий которых положительно окрашивается на фактор Виллебранда и антиген CD31 все случаи группировались по следующему возрастному принципу: 20-40 недель беременности (группа 1), 1-20 лет (группа 2), 20-40 лет (группа 3), 40-60 лет (группа 4), 60-85 лет (группа 5).

Методы исследования

1. Непрямой иммуногистохимический метод.

Данным методом при помощи антител, конъюгированных с пероксидазой (DakoCytomation, Glostrup, Denmark), выявлялись антигены, характерные для определенного типа клеток, такие как ядерный антиген пролиферирующих клеток (Polyclonal rabbit anti-PCNA antibody) (AHP1419, AbD Serotec, Oxford, UK), антиген CD45 (monoclonal mouse anti-human CD45;

M 0701, DakoCytomation, Glostrup, Denmark), триптаза тучных клеток человека (monoclonal mouse anti-human mast cell tryptase; M 7052;

DakoCytomation, Glostrup, Denmark), антиген MBP (основного (щелочного) белка эозинофилов) двух разных производителей (1. monoclonal mouse antihuman eosinophil major basic protein (CBL419, Chemicon International, Inc, Billerica, MA, USA); 2. monoclonal mouse anti-human eosinophil major basic protein (sc-59164, Santa Cruz Biotechnology Inc., Santa Cruz, CA, USA), фактор Виллебранда (monoclonal mouse anti-human vWF; sc-59164, Santa Cruz Biotechnology Inc., Santa Cruz, CA, USA), антиген CD31 (monoclonal mouse anti-human CD31; CBL419, Chemicon International, Inc, Billerica, MA, USA).

2. Окрашивание гематоксилином и эозином Данным методом определялась численность фибробластов. Также после завершения основного протокола постановки иммуногистохимических реакций производилось окрашивание гематоксилином.

Количественную оценку результатов исследования проводили с использованием системы компьютерного анализа микроскопических изображений, состоящей из светового микроскопа Olympus CX-21, цифровой камеры Olympus Camedia 4040z, персонального компьютера с операционной системой «Windows 7» и программы Sigma Scan Pro 5.0 software (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) согласно основным принципам стереологии в морфометрии.

При помощи светового микроскопа находились участки дермы без волосяных фолликулов, которые фотографировались при увеличении объектива 40х (Gunin AG et all, 2004; Gunin AG et all, 2005). Затем полученные снимки переносились на компьютер и при помощи программного обеспечения вычислялась площадь сфотографированных участков и подсчитывалось общее количество иммуннопозитивных клеток, а также фибробластов. Как минимум 10 случайно выбранных срезов фотографировались у каждого человека и 3-5 полей зрения были сфотографированы в каждом срезе.

В каждой группе рассчитывались средние арифметические величины (М) и их стандартные ошибки (m). Достоверность влияния возраста или пола на исследуемые параметры кожи оценивалась с помощью однофакторного дисперсионного анализа. Взаимосвязи между возрастом и параметрами кожи оценивались с применением непараметрического рангового корреляционного анализа Спирмена. Корреляционный анализ выполнялся без разделения данных на возрастные группы. Достоверными считали отличия при р0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Настоящее исследование показало, что численность фибробластов в дерме прогрессивно снижается с возрастом (рисунок 1). Возрастное уменьшение количества этих клеток, возможно, является наиболее существенным для появления признаков старения кожи. Фибробласты продуцируют все компоненты межклеточного вещества, включая коллагеновые и эластические волокна, аморфный компонент (Lorenz et al., 2008). Уменьшение численности фибробластов, скорее всего, приводит к нарушению обновления межклеточного вещества дермы. Хорошо известно, что именно изменения в состоянии межклеточного вещества дермы связаны с появлением признаков стареющей кожи. Уменьшение численности фибробластов в дерме, наблюдаемые в возрастном аспекте, также может быть обусловлено снижением скорости обновления этой клеточной популяции или менее активным образованием новых фибробластов из малодифференцированных предшественников (Naru et al., 2009; Zouboulis et al., 2008). Кроме того, снижение численности фибробластов в дерме в процессе старения может быть вызвано активацией апоптоза (Kim, Park et al., 2009; Mammone et al., 2006). Были также описаны изменения в множестве других функциональных параметров фибробластов с возрастом (Fisher et al., 2008; Simpson et al., 2010; Varani et al., 2006).

Рисунок 1 – Данные по численности фибробластов в дерме людей различного возраста (М±m). Разделение на возрастные группы указано в тексте. n - количество случаев. p0,001 - однофакторный дисперсионный анализ.

В полном спектре возрастных периодов настоящее исследование показало уменьшение численности PCNA-положительных фибробластов в дерме (рисунок 2,3). PCNA является компонентом ДНК-полимеразы, которая необходима для синтеза и репарации ДНК Этот белок присутствует в клетках, находящихся в G1, S, G2 и M-периодах клеточного цикла (Prives, Gottifredi, 2008). Следовательно, PCNA может рассматриваться в качестве маркера пролиферирующих клеток или клеток, находящихся в клеточном цикле, а не в G0-периоде (Gunin et al., 2005). Этот факт позволяет заключить, что одной из причин возрастного уменьшения численности фибробластов в дерме является снижение их пролиферативного потенциала.

–  –  –

Рисунок 2 – Данные по численности фибробластов и PCNAположительных клеток в дерме людей различного возраста (М±m). p0,001 однофакторный дисперсионный анализ.

Рисунок 3 – Данные о процентном отношении PCNA-положительных клеток к количеству фибробластов в дерме людей различного возраста (М±m). p0,001 - однофакторный дисперсионный анализ.

Результаты настоящего исследования демонстрируют, что в дерме человека с 20 недель беременности и до 85 лет присутствуют тучные клетки, количество которых увеличивается с возрастом (рисунок 4,5). Была также обнаружена отрицательная корреляционная взаимосвязь между увеличением количества тучных клеток и уменьшением численности PCNA+ фибробластов. Следовательно, можно предположить, что уменьшение численности фибробластов и их пролиферативного пула обусловлено деятельностью тучных клеток. Механизмы этих взаимоотношений не ясны.

Можно предположить, что данный эффект обусловлен секреторными продуктами тучных клеток. Тучные клетки являются источником высокотоксичных веществ, которые способны оказывать влияние на синтез белков, необходимых для прохождения клеток по клеточному циклу, а также приводить к нарушению функций и к гибели фибробластов (Gilfillan et al., 2011; Naylor et al., 2011).

Рисунок 4 – Данные по численности тучных клеток в дерме людей различного возраста (М±m). p0,001 - однофакторный дисперсионный анализ.

Рисунок 5 – Данные о процентном отношении тучных клеток к количеству фибробластов в дерме людей различного возраста (М±m).

p0,001 - однофакторный дисперсионный анализ.

Наши результаты показали практически полное отсутствие эозинофилов в дерме здорового человека независимо от возраста. Другие исследователи также отметили, что в норме в дерме человека имеется очень незначительное количество эозинофилов (Steigleder, Inderwisch, 1975;

Leiferman et al., 1989). Вместе с тем имеется множество заболеваний кожи, в патогенезе которых эозинофилам отводится немаловажная роль (Steigleder, Inderwisch, 1975). Эозинофилия в дерме также продемонстрирована после ультрафиолетового облучения (Leiferman et al., 1989).

Исследование показало, что в дерме человека, начиная с антенатального периода и до глубокой старости, выявляются CD45+ клетки.

Их численность увеличивается с возрастом (рисунок 6,7).

Возможно, это явление обусловлено воспалительными процессами, происходящими в коже на протяжении жизни. Эти воспалительные процессы вызваны различными эндогенными и экзогенными факторами, такими как ультрафиолетовое облучение, изменения температуры и влажности окружающей среды, компонентами пищи, токсическими метаболитами, образующимися в ходе обмена веществ. Клетки эпидермиса, фибробласты дермы, клетки сосудов, вовлеченные в воспалительный процесс, продуцируют факторы, привлекающие в очаг воспаления лейкоциты, макрофаги, тучные клетки (Levakov et al., 2012; Wolf et al., 2012). Лейкоциты, макрофаги, находящиеся в воспалительном очаге, активируются и начинают вырабатывать множество биологически активных веществ, среди которых также имеются факторы, способствующие привлечению новых лейкоцитов и других клеток костномозгового происхождения (Hwang et al., 2011). В результате в дерме появляется много клеток костномозгового происхождения. С течением времени воспалительные процессы в дерме повторяются, что, возможно, и приводит к возрастному увеличению клеток костномозговой природы.

Наша работа выявила взаимосвязь между увеличением количества CD45+ клеток и снижением количества фибробластов в дерме с возрастом.

Исследование также обнаружило отрицательную корреляционную взаимосвязь между увеличением количества CD45+ клеток и уменьшением численности PCNA+ фибробластов. Следовательно, можно предположить, что уменьшение численности фибробластов и их пролиферативного потенциала обусловлено деятельностью клеток костномозговой природы.

(Rijken et al., 2009; Vukmanovic-Stejic et al., 2011).

Рисунок 6 – Данные по численности CD45-положительных клеток в дерме людей различного возраста (М±m). p0,001 - однофакторный дисперсионный анализ.

Рисунок 7 – Данные о процентном отношении CD45-положительных клеток к количеству фибробластов в дерме людей различного возраста (М±m). p0,001 - однофакторный дисперсионный анализ.

Наши результаты показали, что фактор Виллебранда и CD31 выявляются в материале всех возрастных групп. Интенсивность окрашивания эндотелия на CD31 не имела возрастных изменений, а степень окрашивания эндотелия на фактор Виллебранда несколько возрастала с прогрессированием возраста. Можно предположить, что существует возрастная регуляция синтеза и секреции фактора Виллебранда. Механизмы этой регуляционной системы к настоящему времени абсолютно не ясны.

Подсчет количества сосудов в дерме показал, что численность сосудов, выявляемых как с помощью антител к фактору Виллебранда, так и с применением антител к CD31, планомерно уменьшается с возрастом (Рисунок 8,9).

Рисунок 8 – Данные по численности кровеносных сосудов с положительной окраской эндотелия на антиген CD31 в дерме людей различного возраста (М±m). p0,001 - однофакторный дисперсионный анализ.

Рисунок 9 – Данные по численности кровеносных сосудов с положительной окраской эндотелия на фактор Виллебранда в дерме людей различного возраста (М±m). p0,001 - однофакторный дисперсионный анализ.

Максимальное количество сосудов содержится в дерме плодов человека, а минимальное - у людей в возрасте 61-85 лет. Следует отметить, что оба примененных метода дают практически одинаковые результаты по численности сосудов, что делает проведенную работу более достоверной.

В настоящее время известен эффект фактора Виллебранда по торможению ангиогенеза (Luo et al., 2012). Поэтому возможно, что возрастание уровня фактора Виллебранда способствует уменьшению интенсивности ангиогенеза в коже с возрастом. Кроме того, фактор Виллебранда поддерживает воспалительную реакцию, цитотоксические продукты которой оказывают негативное влияние на ангиогенез (Hillgruber et al., 2013). Однако детальные механизмы выявленных изменений требуют дальнейшего изучения.

Корреляционный анализ показал наличие тесной корреляционной положительной взаимосвязи между численностью фибробластов и количеством кровеносных сосудов дермы. Следовательно, одним из заключений, которые можно сделать на основании результатов этого анализа, является то, что возрастное ухудшение кровоснабжения дермы вносит весомый вклад в снижение общей численности фибробластов в дерме и пролиферативного пула этих клеток. Таким образом, настоящая работа показывает новый механизм, который приводит к возрастному уменьшению численности фибробластов в дерме. Возможно, что этот факт должен быть ключевым в клинических подходах к профилактике и терапии возрастных изменений кожи, так как без адекватного кровоснабжения невозможно добиться нормального регенераторного потенциала ткани.

В исследовании использованы кусочки кожи, полученные от плодов мужского и женского пола, мужчин и женщин. Было интересно проверить значение пола для возрастных изменений параметров дермы. Для этого был выполнен однофакторный дисперсионный анализ, где в качестве фактора использована половая принадлежность. Результаты этого анализа не выявили достоверного (р0,05) влияния пола на изменения и общего числа, и числа PCNA позитивных фибробластов в дерме.

ВЫВОДЫ

1. Численность CD45-позитивных клеток в дерме человека увеличивается с течением жизни. Возрастное увеличение количества CD45-позитивных клеток в дерме коррелирует как с уменьшением общей численности фибробластов, так и падением количества PCNA-положительных фибробластов.

2. Число тучных клеток в дерме человека увеличивается с течением жизни.

Возрастное увеличение числа тучных клеток в дерме коррелирует с уменьшением общей численности и количества пролиферирующих фибробластов.

3. В дерме кожи человека имеются единичные эозинофилы, содержание которых не имеет возрастных особенностей.

4. Численность кровеносных сосудов дермы уменьшается с увеличением возраста. Также изменяется их расположение в дерме, в молодом возрасте они равномерно распределены по всему объему дермы, начиная с 21 лет увеличивается количество сосудов под эпидермисом и уменьшаться по мере приближения к гиподерме. Уменьшение количества кровеносных сосудов коррелирует с уменьшением, как общего количества фибробластов, так и снижением их пролиферации.

5. Общая численность фибробластов в дерме человека прогрессивно снижается с возрастом. Количество PCNA-позитивных фибробластов дермы, отражающих пролиферативную активность, также достоверно снижается в онтогенезе. Возрастное уменьшение количества фибробластов в дерме отчасти обусловлено снижением скорости их пролиферации.

Практические рекомендации

1. Полученные знания об уменьшении численности фибробластов и снижении их пролиферативной активности, использовать в клинических подходах к профилактике и терапии возрастных изменений кожи.

2. Учитывать полученные результаты настоящей работы об увеличении количества CD45-положительных и тучных клеток, уменьшении уровня васкуляризации, а также данные о практически полном отсутствии эозинофилов в дерме здорового человека, при чтении лекций и проведении практических занятий на кафедрах гистологии медицинских и биологических факультетах Вузов.

Список работ, опубликованных по теме диссертации:

1. Васильева, О.В. Пролиферация фибробластов кожи в процессе физиологического старения / О.В. Васильева, В.В. Петров, Н.К.

Корнилова, А.Г. Гунин // Клиническая и экспериментальная медицина.

Сборник научных трудов. Чебоксары. – 2010. – С. 30-31

2. Gunin, A.G. Age-related changes in proliferation, the numbers of mast cells, eosinophils, and cd45-positive cells in human dermis / A.G. Gunin, N.K.

Kornilova, O.V. Vasilieva, V.V. Petrov // J Gerontol A Biol Sci Med Sci.Vol. 66. – № 4. – P. 385-392.

3. Гунин, А.Г. Возрастные изменения численности и пролиферации фибробластов в коже человека / А.Г. Гунин, Н.К. Корнилова, В.В. Петров, О.В. Васильева // Успехи геронтологии. – 2011. – Т. 24. – № 1. – С. 43-47

4. Петров, В.В. Тучные клетки, эозинофилы, CD45-положительные клетки в коже человека при физиологическом старении / В.В.

Петров, О.В. Васильева, Н.К. Корнилова, А.Г. Гунин // Морфология в теории и практике: сб. материалов и тезисов (к 90-летию со дня рождения Д.С.Гордон). – Чебоксары: Изд-во Чуваш. ун-та, 2012. – С.

248-250.

5. Петров, В.В. Влияние тучных клеток в дерме на процесс старения кожи человека / В.В. Петров, О.В. Васильева, А.Г. Гунин // Актуальные проблемы психологии и медицины в условиях модернизации образования и здравоохранения. Материалы международной научной конференции, - Чебоксары 15-16 ноября 2012. – С.205-208.

6. Петров, В.В. Возрастные изменения содержания CD45+ клеток в дерме человека / В.В. Петров, О.В. Васильева, Н.К. Корнилова, А.Г.

Гунин // Успехи геронтологии. – 2013. – Т. 3. – № 3. – С. 598-603.

7. Петров, В.В. Возрастные изменения числа тучных клеток и эозинофилов в коже человека / В.В. Петров, О.В. Васильева, Н.К.

Корнилова, А.Г. Гунин // Онтогенез. – 2013. – Т. 44. – № 3. – С. 179Петров, В.В. Степень активности трансмембранного лиганда DLL4 и его взаимодействие с фибробластами в коже человека в процессе старения / В.В. Петров, О.В. Васильева, Н.Н. Голубцова, А.Г. Гунин // ”Научная дискуссия: инновации в современном мире”: материалы VIII международной заочной научно-практической конференции.

Часть II. (15 января 2013 г.). Москва: Изд. «Международный центр науки и образования», 2013. – С. 182-185

9. Vasilieva, O.V. Age-related changes in the number of vessels positively stained with CD31 and vWF antigens in human dermis / O.V. Vasilieva, V.V.

Petrov, N.N. Golubtzova, A.G. Gunin // The 8th European Congress of Biogerontology joint with the 2nd International RESOLVE Meeting, Beer Sheva – Dead Sea, Israel, March 10-13, 2013. – P. 89.

10. Гунин, А.Г. Кровеносные сосуды в дерме человека в процессе старения / А.Г. Гунин, В.В. Петров, О.В. Васильева, Н.Н. Голубцова // Успехи геронтологии. – 2014. – Т. 27. – № 1. – С. 54-61

11. Gunin, A.G. Age-related changes in angiogenesis in human dermis / A.G.

Gunin, V.V. Petrov, N.N. Golubtzova, O.V. Vasilieva, N.K. Kornilova // Experimental Gerontology. – 2014. – Vol. 55. – P. 143–151.

12. Голубцова, Н.Н. Возрастные изменения факторов ангиогенеза и пролиферации в коже человека / Н.Н. Голубцова, В.В. Петров, О.В.

Васильева, А.Г. Гунин Материалы научной конференции // «Фундаментальные проблемы геронтологии и гериатрии» посвященный со дня основания Геронтологического общества при 20-летию Российской академии наук, 5-9 июня, г. Санкт-Петербург, Успехи геронтологии. 2014. – Т. 27. – №2. – С. 30

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

CD – Cluster of Differentiation, кластер дифференцировки PCNA – proliferating cell nuclear antigen, ядерный антиген пролиферирующих клеток MBP – Major Basic Protein, главный основной (щелочной) белок VWF – von Willebrand factor, фактор Виллебранда




Похожие работы:

«ЕЛАНСКИЙ Сергей Николаевич ВИДОВОЙ СОСТАВ И СТРУКТУРА ПОПУЛЯЦИЙ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ФИТОФТОРОЗА И АЛЬТЕРНАРИОЗА КАРТОФЕЛЯ И ТОМАТА Специальность 03.02.12 – «Микология» Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Москва Работа выполнена на кафедре микологии и альгологии Биологического факультета Московского Государственного Университета им. М.В. Ломоносова Научный...»

«НЕЧАЕВА ОЛЬГА ВИКТОРОВНА ХАРАКТЕРИСТИКА БИОЛОГИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ПОЛИМЕРНЫХ И ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ, УГЛЕРОДНЫХ НАНОТРУБОК НА МИКРООРГАНИЗМЫ И РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ СОЗДАНИЯ НА ИХ ОСНОВЕ ИННОВАЦИОННЫХ ПРЕПАРАТОВ 03.02.03 – микробиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Саратов 2013 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Саратовский...»

«АСКАРОВ АЙБУЛАТ ДАМИРОВИЧ ОЦЕНКА СОСТОЯНИЯ И ЗАЩИТНЫХ ХАРАКТЕРИСТИК ДРЕВЕСНО-КУСТАРНИКОВЫХ НАСАЖДЕНИЙ В УСЛОВИЯХ Г. УФЫ ПРИ ДЕЙСТВИИ ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ Специальности: 03.02.01. – Ботаника (биология), 03.02.08 – Экология (биология) Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Оренбург – 2015 Диссертационная работа выполнена на кафедре экологии и природопользования ФГБОУ ВПО «Башкирский государственный педагогический университет...»

«БЕРЕЗИНА Елена Сергеевна ПОПУЛЯЦИОННАЯ СТРУКТУРА, ОСОБЕННОСТИ МОРФОЛОГИИ И ПОВЕДЕНИЯ И РОЛЬ ДОМАШНИХ СОБАК И КОШЕК В РАСПРОСТРАНЕНИИ ПРИРОДНО-ОЧАГОВЫХ ИНФЕКЦИЙ В РОССИИ 03.02.04 – зоология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Омск – 2015 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Омский государственный педагогический университет» и ФБУН «Омский НИИ...»

«Харитонцев Борис Степанович Флорогенез и фитоценогенез на юге Западной Сибири Специальность: 03.00.05 – БОТАНИКА Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Екатеринбург – 2009 Работа выполнена в Институте экологии растений и животных Уральского отделения Российской академии наук Научный консультант – академик РАН, заслуженный деятель науки РФ, доктор биологических наук, профессор Горчаковский Павел Леонидович Официальные оппоненты: доктор...»

«ШАВЫКИН АНАТОЛИЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ ЭКОЛОГО-ОКЕАНОЛОГИЧЕСКОЕ СОПРОВОЖДЕНИЕ ОСВОЕНИЯ НЕФТЕГАЗОВЫХ МЕСТОРОЖДЕНИЙ АРКТИЧЕСКОГО ШЕЛЬФА (НА ПРИМЕРЕ БАРЕНЦЕВА МОРЯ) Специальность 25.00.28 – «океанология» Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора географических наук Мурманск – 2015 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Мурманский морской биологический институт Кольского научного центра Российской академии наук Официальные оппоненты:...»

«Абросимова Светлана Борисовна Совершенствование методов селекции картофеля на устойчивость к золотистой цистообразующей нематоде (Globodera rostochiensis (Woll.) Специальность: 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата сельскохозяйственных наук Москва – 2014 Диссертационная работа выполнена в Государственном научном учреждении Всероссийский научно-исследовательский институт картофельного...»

«Цвиркун Ольга Валентиновна ЭПИДЕМИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС КОРИ В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКИ. 14.02.02 эпидемиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Москва – 2014 Работа выполнена в Федеральном бюджетном учреждении науки « Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора Научный консультант: Заслуженный деятель науки РФ, профессор, доктор медицинских наук Ющенко...»

«Абросимова Светлана Борисовна Совершенствование методов селекции картофеля на устойчивость к золотистой цистообразующей нематоде (Globodera rostochiensis (Woll.) Специальность: 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата сельскохозяйственных наук Москва – 2014 Диссертационная работа выполнена в Государственном научном учреждении Всероссийский научно-исследовательский институт картофельного...»

«Яшина Людмила Николаевна ГЕНЕТИЧЕСКОЕ РАЗНООБРАЗИЕ ХАНТАВИРУСОВ В ПОПУЛЯЦИЯХ ГРЫЗУНОВ И НАСЕКОМОЯДНЫХ АЗИАТСКОЙ ЧАСТИ РОССИИ 03.01.03 – молекулярная биология Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Кольцово 2012 Работа выполнена в Федеральном бюджетном учреждении науки «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Минздравсоцразвития Российской Федерации Официальные оппоненты: доктор биологических наук, доцент...»

«Стяжкина Елена Владимировна ГЕНОТОКСИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ В КЛЕТКАХ КРОВИ У ПЛОТВЫ (RUTILUS RUTILUS L.) ИЗ ВОДОЁМОВ С РАЗНЫМ УРОВНЕМ РАДИОАКТИВНОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ 03.01.01 – «Радиобиология» Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва-2014 Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении науки «Уральский научно-практический центр радиационной медицины» Федерального медикобиологического агентства Российской Федерации, г. Челябинск...»

«ГОРЕЛИК Виктор Владимирович СИСТЕМА ПСИХОФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ОПТИМИЗАЦИИ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ОРГАНИЗМА ШКОЛЬНИКОВ 03.03.01 – Физиология (биологические науки) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Москва 2013 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования города Москвы «Московский городской педагогический университет». Научный консультант: Беляев Василий...»

«Нгуен Тхи Тху Ха МЕДОНОСНЫЕ РЕСУРСЫ ЛЕСНОГО ФОНДА ЛЕНИНГРАДСКОЙ ОБЛАСТИ И ЦЕНТРАЛЬНОГО ВЬЕТНАМА 06.03.02 Лесоведение, лесоводство, лесоустройство и лесная таксация АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Санкт-Петербург 2015 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы исследования. Использование недревесных ресурсов вносит существенный вклад в улучшение качества жизни населения многих стран, включая Россию и Вьетнам. До настоящего...»

«Авилова Анастасия Александровна Экологическая оценка годичной динамики тяжелых металлов в базовых компонентах лесных экосистем северной части Московского мегаполиса (на примере ЛОД РГАУ МСХА имени К. А. Тимирязева) Специальность 03.02.08 – экология (биология) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва – 2015 Работа выполнена на кафедре экологии ФГБОУ ВО «Российский государственный аграрный...»

«Олейникова Елена Михайловна СТЕРЖНЕКОРНЕВЫЕ ТРАВЫ ЮГО-ВОСТОКА СРЕДНЕЙ РОССИИ Специальность 03.02.01 – ботаника АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Воронеж – 2015 Работа выполнена на кафедре биологии и защиты растений ФГБОУ ВПО «Воронежский государственный аграрный университет имени императора Петра I» Османова Гюльнара Орудж кзы, доктор биоОфициальные оппоненты: логических наук, доцент, ФГБОУ ВПО «Марийский государственный...»

«БУХАРОВА Надежда Владимировна АФИЛЛОФОРОВЫЕ ГРИБЫ ГОСУДАРСТВЕННОГО ПРИРОДНОГО ЗАПОВЕДНИКА «БАСТАК» 03.02.01 – ботаника АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Владивосток – 2013 Работа выполнена в лаборатории низших растений Федерального государственного бюджетного учреждения науки Биолого-почвенного института ДВО РАН Научный руководитель: кандидат биологических наук Булах Евгения Мироновна Научный консультант: кандидат биологических...»

«ПШЕНИЧНЫЙ БОРИС ПАВЛОВИЧ ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ПРОБЛЕМЫ ИСКУССТВЕННОГО ПОДЪЕМА ГЛУБИННЫХ ВОД ОКЕАНА И ПУТИ РАЦИОНАЛЬНОГО ОСВОЕНИЯ ИХ РЕСУРСОВ 03.00.16 –Экология 03.00.18 – Гидробиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Москва – 2005 Работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском институте рыбного хозяйства и океанографии (ФГУП «ВНИРО») и...»

«КРАВЕЦ Виктор Сергеевич ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ И МОЛЕКУЛЯРНО-ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ДЕТЕЙ С АУТИЗМОМ И ИХ МАТЕРЕЙ 03.02.07 – генетика АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Белгород 2015 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении «Научный центр психического здоровья» Российской академии медицинских наук. Научный руководитель: Юров Иван Юрьевич, доктор биологических наук Официальные оппоненты: Курило Любовь...»

«Поташникова Дарья Марковна СРАВНЕНИЕ НОРМАЛЬНЫХ И ОПУХОЛЕВЫХ CD5-ПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ В-КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА. Специальность 03.03.04 – клеточная биология, цитология, гистология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва 2015 Работа выполнена на кафедре клеточной биологии и гистологии биологического факультета Московского Государственного Университета им. М.В. Ломоносова Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Воробьев Иван...»

«ШУМЕЕВ Александр Николаевич ПРЕСНОВОДНЫЕ И НАЗЕМНЫЕ ПЛАНАРИИ СЕВЕРО-ЗАПАДНОГО КАВКАЗА Специальность: 03.00.08 – зоология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Санкт-Петербург Работа выполнена в Лаборатории эволюционной морфологии Зоологического института Российской Академии наук. Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Ю.В. Мамкаев Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор А.И. Гранович кандидат...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.