WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 5 |

«Структурные изменения селезенки мышей при воздействии иглоукалывания и лазера во временном аспекте диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук ...»

-- [ Страница 2 ] --

Нейрональная иммуномодуляция. При взаимодействии афферентных нервных волокон рецепторов (нервных окончаний) ТА с миелиновыми (A) волокнами механорецепторов или немиелиновыми (C) волокнами ноцицептивных рецепторов происходит передача стимулов в дорсолатеральные волокна спинного мозга (спинальный рефлекс, деполяризации афферентных волокон) с активацией ингибирующего боль комплекса [137]. Активация ноцицептивных афферентных волокон (индукция боли) начинается с синтеза K+, брадикинина, ацетилхолина, простагландинов и субстанции P клетками спинальных ганглиев и Гассерова ганглия [197, 203].

Соответственно, когда осуществляется постановка акупунктурной иглы, происходит активация нервных окончаний, и это вызывает секрецию эндогенных опиоидов в них. Нервные окончания играют важную роль в контроле болевых ощущений [173, 200, 208]. Восприятие стимулов осуществляется по неоспиноталамическим и палеоспиноталамическим проводящим путям в таламусе и в таламокортикальном пути в коре. Система, контролирующая боль, ингибирует болевые сигналы, которые поступают по нервной системе. Эта контролирующая система получила название «система обезболивания» [111, 175]. Когда система, контролирующая боль, активирована, нейроны, отростки которых выходят из среднего мозга, периакведуктального серого вещества в перивентрикулярную область, направляют свои стимулы к большому ядру шва и ретикулярному парагигантоклеточному ядру. Затем эти стимулы совместно с ингибирующим боль комплексом поступают в дорсолатеральный пучок спинного мозга. В системе обезболивания имеются нейротрансмиттеры: эндорфин, энкефалин и СТ [146, 161, 190, 204, 207].

Энкефалин секретируется большой частью нервных волокон, проходящих в периакведуктальном сером веществе и в веществе перивентрикулярного ядра и оканчивается в большом ядре шва; он имеет высокое сродство к опиоидным рецепторам и m1 [142]. Энкефалин, связываясь с m1 рецепторами создает супра-спинальную анальгезию, с -рецепторами – создает спинальную анальгезию. Стимуляция боли вызывает секрецию СТ в нервных волокнах, находящихся в большом ядре шва и заканчивающихся в дорсальном роге спинного мозга [226]. В свою очередь, этот процесс также вызывает секрецию энкефалина в местных нейронах спинного мозга. Считается, что секретируемый энкефалин вызывает пресинаптическое и постсинаптическое торможение в местах, где находятся синапсы C и A типов нервных волокон в дорсальном роге

– спинальной пластинки-V [179].

ИУ вызывает изменения концентрации K+, Na+, Ca++ в нейронах, а также значительные изменения в потенциале действия нервных клеток [135].

Установлено, что при ИУ в плазме крови и тканях головного мозга увеличивается уровень эндоморфина-1, -эндорфина, энкефалина и СТ [112]. Активация и блок серотониновых рецепторов [5-HT (1A)] по-разному влияют на иммунный ответ [154]. Серотонинэргическая система обеспечивает включение системы гипоталамус-гипофиз-кора надпочечников. Характер действия глюкокортикостероидов на иммунитет зависит от количества гормонов: при физиологических концентрациях иммунитет стимулируется, резистентность организма к действию патогенных факторов повышается; при более высоких концентрациях глюкокортикостероидов, выделяющихся эндогенно в результате ИУ выявляется их тормозное действие на иммуногенез (развивается лимфопения, снижается функциональная активность и количество Т-лимфоцитов, тормозится продукция антител и их фиксация на клетках-мишенях) и выраженное противовоспалительное и противоаллергическое действие (уменьшается продукция лимфокинов и кининов, уменьшается миграция макрофагов в очаг воспаления и их функциональная активность, стабилизируются мембраны ТК) [111].

При акупунктурном воздействии, помимо секреции эндогенных опиоидов, осуществляется секреция АКТГ из передней доли гипофиза. Опиоиды обеспечивают обезболивающий эффект, который ингибируется налоксоном и гипофизэктомией. Воздействие акупунктуры на иммуномодуляцию в основном связано с ретикулярной формацией ствола головного мозга и выработкой медиаторов (КСФ, АКТГ, холецистокинина, бомбезина, энкефалина, динорфина и т.д.), принимающих участие в контроле обратной связи. Воздействие акупунктуры на уровне ретикулярной формации ствола мозга стимулируется выделение мозговым веществом надпочечников адреналина и НА. Адреналин, активируя аденилатциклазу, ведет к накоплению в лимфоцитах циклического аденозинмонофосфата (цАМФ), что снижает их функциональную активность, причем это наиболее выражено по отношению к неспецифическим Тсупрессорам, вследствие чего может ускоряться развитие ранних фаз иммунологического ответа и повышаться ранняя противоинфекционная защита [111].

Нейрогуморальная иммуномодуляция. Установлено наличие рецепторов эндогенных опиоидных пептидов в клетках иммунной системы [111, 138].

Доказано, что ИУ влияет на уровень сывороточного иммуноглобулина [111].

Акупунктура эндокринных точек на обоих ушах, совместно с точками Хэ-гу (LI 4) и Ся-гуань (ST 7) вызывает значительное повышение IgA в слюне у пациентов, которые ранее имели низкий уровень IgA, и уменьшается у тех лиц, кто ранее имел более высокий уровень IgA [111, 230]. Электроакупунктура в точку Цзусань-ли (ST 36) у крыс вызывает увеличение уровня ИЛ-2, ИНФ- и приводит к активации NK-клеток в селезенке, а также к увеличению уровня -эндорфина и ИНФ- в сыворотке крови [150].

Влияние ИУ на иммунную систему связано с эффектами -эндорфина, метионина и лейцин-энкефалина. Установлено, что лейкоциты содержат проопиомеланокортин матричной рибонуклеиновой кислоты (мРНК). В связи с этим, лейкоциты могут синтезировать АКТГ и -эндорфин из промолекул. Кроме того, эндогенные опиоидные рецепторы были найдены на B-лимфоцитах, Т-лимфоцитах, NK-клетках, гранулоцитах, моноцитах, тромбоцитах и в сложных терминальных комплексах. Имеются химические и физические сходства между опиоидными рецепторами в нейроэндокринной системе и опиоидными рецепторами иммунной системы [111, 206, 225].

Известно, что -, - и -эндорфины участвуют в иммунном ответе. В то время как -эндорфин, как метионин-энкефалин и лейцин-энкефалин, играет важную роль в производство антител, -эндорфин не имеет такого эффекта.

Эндорфин и энкефалин повышают активность NK-клеток, генерацию CD8+ клеток, хемотаксис моноцитов и продукцию ИФ-, ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-4 и ИЛ-6. В свою очередь, метэнкефалин оказывает стимулирующее действие на активность NK-клеток, Е-розеткообразование, антителозависимую клеточную цитотоксическую миграцию лейкоцитов.

Существенная роль в нейрогуморальной стимуляции иммунитета, достигаемая специальным подбором акупунктурного рецепта, принадлежит системе гипоталамус-гипофиз-щитовидная железа [16]. Это осуществляется благодаря стимулирующему действию тиреоидных гормонов на функцию тимуса, повышению микроциркуляции и окислительных процессов в тканях, что оптимизирует энергетическое и пластическое обеспечение иммунных процессов.

Под действием тиреоидных гормонов происходит накопление ацетилхолина в крови, что приводит к активации гуанилатциклазы и ведет к накоплению в лимфоцитах циклического гуанозинмонофосфата (цГТФ), стимулируя функцию 33 Т-лимфоцитов. Кроме того, ранее была показана возможность стимуляции методом акупунктуры выработки тимусом и костным мозгом гормональных веществ, специфически стимулирующих иммуногенез. Так, электростимуляция точек ушной раковины животных может вызывать повышение продукции костным мозгом миелопептида (В-активина), стимулирующего антителообразовательную функцию плазмацитов [15].

На протяжении последних десятилетий лечение при помощи инвазивных вмешательств или общие радикальные операции модифицируются в менее инвазивные методы, обладающими меньшими побочными эффектами.

Перспективность акупунктуры и ее современных разновидностей заключается во взаимосвязанной коррекции состояния нервной и иммунной систем, в выраженной ее терапевтической эффективности и отсутствии существенных побочных эффектов [1]. Учитывая вышеперечисленные эффекты, акупунктура может быть применена при иммунных патологиях, для уменьшения риска инфекционных заболеваний, а также в качестве средства медицинской реабилитации.

3. Иммуномодулирующее влияние инфракрасного низкоинтенсивноголазерного излучения

В настоящее время инфракрасное НИЛИ нашло широкое применение в терапии заболеваний сердечно-сосудистой, дыхательной, мочеполовой, эндокринной, иммунной систем, онкологических заболеваний, а также в стимуляции регенераторных процессов [11, 44, 88, 201].

Наиболее перспективным способом доставки инфракрасного НИЛИ является лазеропунктура. Доказано, что воздействие инфракрасного НИЛИ в ТА влияет на многоуровневые рефлекторные и нейрогуморальные реакции организма: улучшается местная микроциркуляция, увеличивается синтез простагландинов Е и F, эндорфинов, энкефалинов, происходит активация антиоксидантной защиты клеток и увеличение электропроводимости мозговой ткани [195]. Таким образом, раздражение ТА какого-либо меридиана сопровождается изменениями физиологических характеристик соответствующего ему органа, нормализующими нарушенную деятельность.

Известно, что одним из основных механизмов реализации терапевтического действия инфракрасного НИЛИ является активация иммунной и эндокринной систем, мобилизация внутренних резервов организма [12, 17, 214, 220]. При этом функциональная активность лимфоцитов, возрастает содержание белка в плазме крови [76].

Транскутанное инфракрасное НИЛИ активирует клеточные элементы дермы и соединительной ткани, эндотелий и гладкомышечные клетки сосудов, нервные рецепторы и др. [13, 152]. Поглощение квантов света стимулирует образование в клетках биологически активных молекул, являющихся вторичными мессенджерами, которые опосредуют усиление и генерализацию первичного фотосигнала. Взаимодействие лазерного излучения с биотканями определяется длиной волны, дозой облучения, интенсивностью потока энергии [91].

Известно, что при инфракрасном НИЛИ стимулируется продукция активных форм кислорода и оксида азота нейтрофилами и макрофагами [128, 183]. В свою очередь, эти продукты опосредованно оказывают влияние на синтез ДНК в гемопоэтических клетках, вызывая тем самым усиление продукции цитокинов, клеточной пролиферации и белкового синтеза, активируя иммунную систему [12]. Действие инфракрасного НИЛИ на фибробласты (in vitro) приводит к усиленной генерации внутриклеточного эндогенного -ИФН [198]. По мнению ряда авторов [13], инфракрасное НИЛИ активирует макрофагальную активность, способствуя кооперации макрофагов с Т- и В-лимфоцитами с индукцией иммунного ответа.

С другой стороны, инфракрасное НИЛИ рассматривается как неспецифический фактор, повышающий сопротивляемость организма [66]. Ряд авторов [63, 136] считает, что инфракрасное НИЛИ выступает в роли биорегулятора как клеточной биохимической активности, так и физиологических функций организма в целом – нейроэндокринной, эндокринной, сосудистой и иммунной систем. Лазерная терапия при правильном применении позволяет организму восстановить нарушенный гомеостаз. Детальное изучение механизмов инфракрасного НИЛИ на ТА важно, как для оценки показаний к данному методу лечения, так и для оценки рисков осложнений.

Таким образом, анализ литературных данных определил наименее изученные аспекты механизма акупунктурой иммуномодуляции в 1-е сутки после процедуры. В литературе отсутствуют данные о закономерности изменений структуры и цитоархититоники селезенки в ответ на однократную процедуру ИУ и лазеропунктуры. Поэтому всестороннее изучение этих методов иммуномодуляции представляет несомненный экспериментальный интерес и практическую значимость, что побудило предпринять настоящее исследование.

36

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы исследования

Работа выполнена в соответствии с принципами доказательной медицины.

При проведении исследования и изложении материала были использованы общенаучные методы познания – наблюдение, анализ, сравнение, синтез, обобщение и логический подход.

Экспериментальное исследование проведено с использованием 255 беспородных белых мышей-самцов, массой от 19 до 23 г (подбирали по принципу аналогов с учетом клинико-физиологического состояния, возраста, пола, живой массы). Животные содержались в условиях вивария, согласно правилам лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ (ГОСТ Р 50258-92, ГОСТ 3 51000.3-96 и 51000.4-96) с соблюдением Международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых при экспериментальных исследованиях (1997).

Проведенное исследование единогласно одобрено на заседании этического комитета медицинского факультета ФГБОУ ВПО «Чувашского государственного университета имени И.Н. Ульянова». Объектом исследования служили селезенка экспериментальных животных, предметом исследования – клеточные элементы структур селезенки мышей.

ИУ и инфракрасное НИЛИ проводили в одно и то же время суток после установления локализации ТА с помощью анатомо-топографического метода и стандартного прибора Элитерис 5 УМ – 003. Измерения выполнялись на стабилизированном постоянном токе величиной 2 мкА при напряжении 1V.

Локализация изучаемых точек следующая: ТА LI 11 – находится на верхней конечности, в латеральном конце локтевой складки, ТА GV 14 – между остистыми отростками VII шейного (CVIII) и I грудного позвонка (ThI) [84].

Выбранные меридианы относятся к классическим акупунктурным меридианам и соответствуют: LI – меридиану толстого кишечника (Large Intestine), GV 14 – заднесрединному меридиану (Governing Vessel) [76] (Рисунок 1).

Рисунок 1 – Схема расположения акупунктурных точек у грызунов (Ли Чжун Чжень, 2004).

Для изучения селезенки мышей экспериментальные животные были разделены на три серии (Таблица 1).

Первая серия исследований была проведена на 105 белых беспородных мышах-самцах. Животные были разделены на группы: 1-я – интактная – без воздействия (№=15); 2-я – контрольная – ИУ проводили сбоку от меридиана, рядом с каждой исследованной точкой на расстоянии 5 мм (№=45) с целью исключить влияние на результаты эксперимента стрессового фактора; 3-я – опытная – ИУ проводили стальными иглами (производство завод «Контур», Чебоксары) в течение 10 мин в ТА GV 14 и/или LI 11 (№=45). Селезенку извлекали через 1 ч после процедуры.

Вторая серия исследований была проведена на 45 белых беспородных мышах-самцах. Серия была разделена на группы: 1-я – интактная – без воздействия (№=15); 2-я – контрольная – мыши, которым проводили инфракрасное НИЛИ на ТА с выключенным датчиком (№=15) с целью исключить влияние на результаты эксперимента стрессового фактора; 3-я – опытная – мыши, подвергшиеся инфракрасному НИЛИ на ТА в течение 2-х мин. Для проведения процедуры использовали контактную методику облучения воротниковой области шеи на проекцию точки GV 14 с помощью лазерного прибора «Матрикс»

(полупроводниковый импульсный на кристалле GaAs с длиной волны – 0,89 мкм (890 нм), мощность излучения – 5 Вт, частота следования импульсов – 80 Гц, средняя мощность излучения – 0,75~1 мВт, площадь облучаемого участка до см2, доза облучения до 0,72 Дж/см2, производство Москва). Селезенку извлекали через 1 ч после процедуры.

Третья серия исследований была проведена на 105 белых беспородных мышах-самцах. Животные были разделены на группы: 1-я – интактная – без воздействия (№=15); 2-я – контрольная – ИУ проводили сбоку от меридиана, рядом с каждой исследованной точкой на расстоянии 5 мм (№=45) с целью исключить влияние на результаты эксперимента стрессового фактора; 3-я – опытная – ИУ проводили стальными иглами (производство завод «Контур», Чебоксары) в течение 10 мин в ТА GV 14 и LI 11 (№=45). Селезенку извлекали через 6, 8 и 24 ч после процедуры.

Таблица 1 – Число мышей, использованных в эксперименте

–  –  –

ИУ – иглоукалывание, ИКНИЛИ – инфракрасное низкоинтенсивное лазерное излучение Исследуемый материал – селезенку – извлекали у мышей после декапитации, после чего часть материала фиксировали в 10% нейтральном забуференном формалине, а также изготавливали криостатные срезы органа толщиной 15 мкм.

39

2.2. Методы исследования

1. Окраска гематоксилином и эозином применялась для оценки характера воздействия акупунктурных методов на структуры селезенки мышей [7]. Селезенку фиксировали в 10% нейтральном забуференном формалине в течение 24 ч, промывали проточной водой, затем выполняли стандартную проводку, после чего заливали в парафин, готовили парафиновые срезы и выполняли окраску по стандартной методике.

2. Люминесцентно-гистохимический метод Кросса, Евена, Роста [117] использовался для выявления тканевого гистамина. Метод основан на реакции паров ортофталевого альдегида с гистамином, в ходе которой образуется флюоресцирующее соединение производных имидазолилэтиламина. При исследовании срезов под люминесцентным микроскопом Leica (Германия) образовавшийся комплексный продукт дает при большом содержании гистамина желтое свечение, при среднем – зеленое, малом – голубое. Криостатные срезы обрабатывали в предварительно разогретой камере парами ортофталевого альдегида в термостате при Т=100 в течение 10 сек. Затем срезы помещались в другую камеру с парами воды при Т=100 на 2 мин, далее высушивались в термостате при Т=70 в течение 5 мин.

3. Для выявления КА и СТ в аминосодержащих структурах селезенки использовался люминесцентно-гистохимический метод Фалька-Хилларпа [133] в модификации Е.М. Крохиной [42]. Криостатные срезы толщиной 15 мкм обрабатывались в параформальдегидной камере в течение 60 мин при Т=80 и затем заключались в полистирол. Приготовленные препараты просматривались под люминесцентным микроскопом Leica (Германия), при этом продукты конденсации КА формальдегидом дают ярко-зеленую флуоресценцию, а карболины, которые в подобных реакциях формируют СТ – белое и желтое свечение.

4. Количественное содержание гистамина, КА и СТ в структурах селезенки оценивали с помощью цитоспектрофлуориметрии [37]. Анализ производился на люминесцентном микроскопе Leica при помощи микрофлуориметрической насадки ФМЭЛ-1А. Интенсивность свечения измерялась в единицах флуоресценции (условные единицы – у.е.) по шкале регистрирующего прибора-усилителя. Для удобства обработки цифровые значения умножали на 100.

5. С целью определения влияния того или иного биоамина на общий процесс определяли серотониновый (Is) индекс, являющийся средней величиной от суммы частных соотношений содержания биоаминов.

6. Окраска толуидиновым синим по А. Унна применялась для контроля состояния тканевых мукополисахаридов и гепарина в ТК в структурах селезенки мышей [71]. Анализ популяции ТК проводили по методике Д.П. Линдер с соавторами (1980): определяли количество клеток в 1 мм2 среза селезенки, соотношение по степени дегрануляции, а также степень сульфатации гепарина.

7. Иммуногистохимические методики с использованием моноклональных антител применялись для выявления CD3+- и CD68+-клеток в селезенке мышей с использованием иммуногистохимических автостейнеров AUTOSTAINER-360 (THERMO) и с применением систем визуализации Leica. В работе использованы следующие моноклональные антитела:

1) Поликлональное антитело к кластеру дифференцировки лимфоцитов 3 типа (CD3+), клон M-20 (Santa Cruze, США) (маркер зрелых Т-лимфоцитов);

2) Моноклональное антитело к кластеру дифференцировки 68 типа (CD68+), клон ED-1 (Abcam, Великобритания) (маркер макрофагов).

Материал для исследования фиксировали 10% нейтральным забуференным формалином в течение 24 ч, заливали в парафин, готовили срезы толщиной 4 мкм, которые затем наносили на высокоадгезивные стекла и высушивали при Т=37С в течение 18 ч. Восстановление антигенной активности осуществлялось в цитратном буфере рН 6,0 в автоклаве при Т=96С в течение 30 мин с последующим остыванием в течение 90 мин. В качестве внутреннего контроля реакции служила неиммунизированная кроличья сыворотка. За положительную иммуногистохимическую реакцию на антитела к CD3+ принимали коричневую окраску мембраны клетки, а CD68+ – коричневую окраску цитоплазматических гранул.

8. Постоянные микропрепараты изучались с помощью бинокулярного микроскопа «МИКМЕД 6» (LOMO) при увеличениях 10*10, 10*20, 10*40, 10*100.

Микрофото получали с использованием насадки DV 1000 (5 Mp).

9. Компьютерная морфометрия. Количественные морфометрические измерения в структурах селезенки мышей выполнены с применением программы «Микро-Анализ» (Санкт-Петербург, 2010).

10. Количество клеточных элементов (мегакариоциты, плазмоциты, клетки миелоидного ряда, ретикулярные клетки, клетки с картинами митоза (находящиеся на стадии мета- или анафазы), ГЛК) подсчитывали в 1 мм2 среза селезенки мышей. Количественное распределение адренергических нервных волокон, ТК и ГЛК определялось путем подсчета их в одном поле зрения микроскопа при увеличении 10*100.

11. Корреляционный анализ использовался для выявления взаимосвязи между нормально распределенными количественными признаками. Сила предполагаемой взаимосвязи между величинами определялась по значению коэффициента корреляции [57]. Если коэффициент корреляции меньше 0,3, то связь в паре слабая; 0,3-0,7 – умеренная; 0,7-1,0 – сильная. Положительный коэффициент корреляции означает однонаправленное изменение средних значений в исследуемой паре, отрицательный – разнонаправленную динамику изучаемых показателей.

12. Статистическую обработку полученных цифровых данных проводили с помощью персонального компьютера Intel Core 2 Duo с помощью пакета Microsoft Office 2003 (Word и Excel) методом вариационной статистики с оценкой достоверности по t-критерию Стьюдента [57]. В работе приводятся следующие показатели: M – средняя арифметическая величина; m – ошибка средней арифметической величины.

42

ГЛАВА 3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Морфофункциональная характеристика селезенки интактной группы мышей При обзорной окраске селезенки интактной группы мышей гематоксилином и эозином картина была типичной [21, 29, 32, 54, 62, 67, 74, 79, 83, 89, 99, 102, 114, 118, 132, 169, 177]. В лимфоидных узелках селезенки различимы центральная артерия, расположенная чаще всего на его периферии и окруженная лимфоцитами ПАЛМ, герминативный центр, мантийная и маргинальная зоны (Рисунок 2). Выявляются лимфоидные узелки, сливающиеся между собой, представленные преимущественно широкоплазменными лимфоцитами. Наши данные в этой части совпадают с данными литературы [7, 18, 19, 182]. Соотношение числа лимфоидных узелков с герминативными центрами селезенки к общему числу лимфоидных узелков составляет – =0,51±0,02.

Клеточный состав красной пульпы селезенки мышей представлен лимфоцитами, мегакариоцитами, расположенными преимущественно под капсулой селезенки (Рисунок 3), а также очаговыми скоплениями плазмоцитов (Приложение 1).

Количество клеток с картинами митоза в красной пульпе в срезах селезенки интактной группы животных составляет – µ=260,20±11,69 клеток/мм (Приложение 1).

В срезах селезенки интактной группы мышей, обработанных по методу выявляются ТК, расположенные под капсулой (Рисунок 3, А. Унна, Приложение 2). Среди ТК по степени дегрануляции преобладают преимущественно Т0 (цельные формы) (78,04%), по степени зрелости гепарина: ортохромные (39,56%) и 1,2,3-метахроматичные (47,28%).

При иммуногистохимическом окрашивании срезов селезенки интактной группы на CD3+-клетки, их количество в герминативном центре и в ПАЛМ ниже, чем в маргинальной зоне и в красной пульпе селезенки (Рисунок 4, 6, Приложение 3).

Иммуногистохимическое окрашивание на CD68+ выявило максимальное их количество у интактной группы животных в ПАЛМ, а минимальное – в красной пульпе (Рисунок 5, 7, Приложение 3).

После обработки срезов по методу Кросса в герминативном центре и в красной пульпе селезенки мышей выявляются ГЛК разных типов (Рисунок 12, 13). I тип ГЛК представлен клетками разных размеров (от 5 до 18 мкм), характеризующимися лимонно-желтым свечением, с темным ядром и многочисленными одинаковыми по содержанию аминов и по размеру гранулами, такие клетки относятся к дендритным макрофагам [25, 29, 50, 52, 82, 83]. Размеры II типа ГЛК варьируют от 16 до 19 мкм, ядро не дифференцируется, в цитоплазме визуализируются яркосветящиеся гранулы разного размера и содержания аминов, такие клетки относятся к клеткам APUD-серии [29, 51]. Нами подсчитывалось общее число ГЛК в герминативном центре и в красной пульпе.

У интактной группы мышей количество ГЛК в герминативном центре ниже, чем в красной пульпе (Приложение 4).

В люминесцирующих структурах селезенки (лимфоциты герминативного центра и ГЛК герминативного центра, лимфоциты ПАЛМ, клетки красной пульпы и ГЛК красной пульпы) преобладающим нейроамином является гистамин (Рисунок 8, 9, 10, Приложение 5). При этом максимальное содержание гистамина определяется в ГЛК герминативного центра, а минимальное – в красной пульпе (Рисунок 8).

Рисунок 2 – Селезенка интактной группы мышей. В лимфоидных узелках различимы центральная артерия (1), герминативный центр (2), мантийная (3) и маргинальная зоны (4) Окраска гематоксилином и эозином. Микроскоп МИКМЕД 6. Увеличение 100 Рисунок 3 – Селезенка интактной группы мышей. Под капсулой расположены мегакариоциты (1), недегранулированные -метахроматинчные (2) и -ортохромные тучные клетки (3) Окраска полихромным толуидиновым синим по А. Унна. Микроскоп МИКМЕД 6.

Увеличение 400 Рисунок 4 – Селезенка интактной группы мышей. Немногочисленные + CD3 -клетки в красной пульпе Иммуногистохимическая реакция к CD3+. Микроскоп МИКМЕД 6. Увеличение 400 Рисунок 5 – Селезенка интактной группы мышей. В маргинальной зоне (1) скопление CD68+-клеток Иммуногистохимическая реакция к CD68+. Микроскоп МИКМЕД 6. Увеличение 400

–  –  –

Рисунок 6 – Распределение CD3+-клеток в селезенке интактной группы мышей (по оси ординат: количество клеток/мм2) ПАЛМ – периартериальная лимфоидная муфта

–  –  –

Рисунок 7 – Распределение CD68+-клеток в селезенке интактной группы мышей (по оси ординат: количество клеток/мм2).

ПАЛМ – периартериальная лимфоидная муфта При исследовании препаратов селезенки интактной группы мышей, обработанных по методу хорошо люминесцируют Фалька-Хиларпа, лимфоидные узелки, в которых визуально различимы: центральная артерия, ПАЛМ, герминативный центр, а также мантийная и маргинальная зона (Рисунок 13). На границе красной и белой пульпы определяется цепочка ГЛК. Во всех лимфоидных узелках определяются адренергические нервные волокна до 3 в одном поле зрения, идущие из капсулы селезенки по трабекулам в паренхиму, которые оплетают снаружи лимфоидные узелки, но в зоны не заходят. Каждая зона отделяется небольшим числом ГЛК. Чаще всего адренергические нервные волокна проходят по адвентиции сосудов, что совпадает с литературными данными [29, 83].

Все изучаемые структуры селезенки интактной группы мышей имеют значения IS от 1,26 до 1,47, различающиеся в зависимости от структуры (Рисунок 11).

При исследовании корреляционных связей между нейроаминами в люминесцирующих структурах селезенки интактной группы мышей по гистамин/гистамин сильные положительные связи не определены (Таблица 2).

Сильные отрицательные связи обнаружены между ГЛК герминативного центра и ГЛК красной пульпы, ГЛК красной пульпы и лимфоцитами герминативного центра.

По корреляционным взаимодействиям КА/КА сильных положительных связей также нет, обнаружена сильная отрицательная корреляционная взаимосвязь между ГЛК герминативного центра и лимфоцитами герминативного центра.

По СТ/СТ выявлены слабые корреляционные связи.

Поскольку корреляционные связи отражают взаимное регулирующее влияние структур, мы предполагаем, что морфологические изменения в лимфоидных узелках в селезенке мышей обусловлены активным взаимодействием ГЛК и лимфоцитов герминативного центра, ГЛК и клеток красной пульпы, ГЛК герминативного центра и ГЛК красной пульпы.

–  –  –

Рисунок 8 – Содержание гистамина в структурах селезенки интактной группы мышей (по оси ординат: у.е.) ГЛК – гранулярные люминесцирующие клетки, ПАЛМ – периартериальная лимфоидная муфта

–  –  –

Рисунок 9 – Содержание катехоламинов в структурах селезенки интактной группы мышей (по оси ординат: у.е.) ГЛК – гранулярные люминесцирующие клетки, ПАЛМ – периартериальная лимфоидная муфта 20

–  –  –

Рисунок 10 – Содержание серотонина в структурах селезенки интактной группы мышей (по оси ординат: у.е.) ГЛК – гранулярные люминесцирующие клетки, ПАЛМ – периартериальная лимфоидная муфта 1

–  –  –

Рисунок 11 – Серотониновый индекс структур селезенки интактной группы (по оси ординат: у.е.) ГЛК – гранулярные люминесцирующие клетки, ПАЛМ – периартериальная лимфоидная муфта Рисунок 12 – Селезенка интактной группы мышей. Гранулярные люминесцирующие клетки разных размеров в красной пульпе селезенки Метод Кросса. Микроскоп ЛЮМАМ. Увеличение 100 Рисунок 13 – Селезенка интактной группы мышей. Цепочка из гранулярных люминесцирующих клеток определяется на границе красной и белой пульпы, в которой различимы: центральная артерия (1), герминативный центр (2), мантийная (3) и маргинальная (4) зона Метод Фалька-Хиларпа. Микроскоп ЛЮМАМ. Увеличение 200

–  –  –

ГТ – гистамин, КА – катехоламины, СТ – серотонин, ГЛК – гранулярные люминесцирующие клетки, ПАЛМ – периартериальная лимфоидная муфта * p0,05; ** p0,01 Сильные корреляционные связи (0,7) обозначены жирным шрифтом, причем синим обозначены отрицательные корреляционные связи Умеренные корреляционные связи (0,3-0,7) обозначены курсивом

3.2. Морфофункциональная характеристика селезенки мышей через 1 ч после иглоукалывания в точку GV 14 При обработке срезов селезенки мышей гематоксилином и эозином после ИУ в точку GV 14 выявляются лимфоидные узелки с размытыми контурами. В ПАЛМ определяются группы лимфоцитов с митотически делящимися клетками.

Среди клеток красной пульпы встречаются мегакариоциты, окрашенные оксифильно, количество которых больше в 7,68 раза по сравнению с показателями контрольной группы мышей, клетки миелоидного ряда (промиелоциты, миелоциты) (Рисунок 14, 15, Приложение 1).

Количество митотически делящихся клеток в красной пульпе больше по сравнению с контрольной группой на 26,36% (Приложение 1).

В срезах селезенки мышей, обработанных по методу А. Унна ТК не выявляются. В ПАЛМ обнаружены лимфоциты с -метахроматичной окраской.

При исследовании срезов селезенки мышей, обработанных по методу Кросса, в герминативном центре выявляются ГЛК, количество которых больше по сравнению с контрольной группой в 2,85 раза. Количество ГЛК в красной пульпе по сравнению с контрольной группой практически не изменяется (Приложение 4).

В красной пульпе, в основном, встречаются тусклые слабо светящиеся ГЛК, очень редко – яркие с гранулами разного цвета и размера.

Рисунок 14 – Селезенка мышей через 1 ч после иглоукалывания в точку GV 14. В красной пульпе селезенки определяются клетки миелоидного ряда (обозначены стрелками) Окраска гематоксилином и эозином. Микроскоп МИКМЕД 6. Увеличение Рисунок 15 – Селезенка мышей через 1 ч после иглоукалывания в точку GV 14. Увеличение количества мегакариоцитов в красной пульпе селезенки (обозначены стрелками) Окраска полихромным толуидиновым синим по А. Унна. Микроскоп МИКМЕД 6.

Увеличение 200 Нами обнаружено, что содержание гистамина во всех исследованных структурах селезенки мышей больше по сравнению с контрольной группой: в ГЛК герминативного центра – на 66,92%, в ГЛК красной пульпы – на 53,38%, в лимфоцитах герминативного центра – на 49,82%, в лимфоцитах ПАЛМ – на 63,08%, в клетках красной пульпы – на 99,14% (Рисунок 16, Приложение 5).

При исследовании по методу Фалька-Хиларпа в ПАЛМ обнаруживаются темные и светлые зоны. Содержание КА в светлых зонах межклеточных пространств увеличивается. Содержание КА по сравнению с контрольной группой больше в ГЛК герминативного центра – на 79,31%. Содержание КА меньше: в ГЛК красной пульпы – на 24,84%, в лимфоцитах ПАЛМ – на 19,76% и в клетках красной пульпы – на 24,50% (Рисунок 17, Приложение 5).

Содержание СТ по сравнению с контрольной группой животных больше в ГЛК герминативного центра на 68,44%. Содержание СТ меньше: в ГЛК красной пульпы – на 25,77%, в лимфоцитах ПАЛМ – на 24,02% и в клетках красной пульпы – на 37,46% по сравнению с контрольной группой (Рисунок 18, Приложение 5).

Значения Is изменяются мало. Как и в контрольной группе животных Is остается выше единицы (Рисунок 19).

В контрольной группе мышей обнаружены разнонаправленные реакции, отличные от опытной группы, так по СТ/СТ во всех исследованных структурах выявлены слабые корреляционные взаимосвязи, кроме пары ГЛК герминативный центр и клетки красной пульпы, где обнаружена сильная положительная связь.

** ** ** ** **

–  –  –

Рисунок 16 – Содержание гистамина в структурах селезенки группы мышей через 1 ч после иглоукалывания в точку GV 14 (по оси ординат: у.е.) ИУ – иглоукалывание, ГЛК – гранулярные люминесцирующие клетки;

** p0,01 по сравнению с показателями в контрольной группе мышей ** ** ** **

–  –  –

Рисунок 17 – Содержание катехоламинов в структурах селезенки группы мышей через 1 ч после иглоукалывания в точку GV 14 (по оси ординат: у.е.) ИУ – иглоукалывание, ГЛК – гранулярные люминесцирующие клетки;

** p0,01 по сравнению с показателями в контрольной группе мышей ** ** 30 ** **

–  –  –

Рисунок 18 – Содержание серотонина в структурах селезенки группы мышей через 1 ч после иглоукалывания в точку GV 14 (по оси ординат: у.е.) ИУ – иглоукалывание, ГЛК – гранулярные люминесцирующие клетки;

** p0,01 по сравнению с показателями в контрольной группе мышей * ** **

–  –  –

Рисунок 19 – Серотониновый индекс структур селезенки группы мышей через 1 ч после иглоукалывания в точку GV 14 (по оси ординат: у.е.).

ИУ – иглоукалывание, ГЛК – гранулярные люминесцирующие клетки;

* p0,05; ** p0,01 по сравнению с показателями в контрольной группе мышей Корреляционная связь по гистамин/гистамин между люминесцирующими структурами селезенки мышей между ГЛК красной пульпы и лимфоцитами герминативного центра изменила знак и стала сильной положительной (Таблица 3). Сильные отрицательные корреляционные связи обнаружены в парах ГЛК герминативного центра/лимфоциты герминативного центра и ГЛК герминативного центра/ГЛК красной пульпы.

По взаимодействию КА/КА в парах: лимфоциты герминативного центра и лимфоциты ПАЛМ, ГЛК красной пульпы и лимфоциты герминативного центра, ГЛК красной пульпы и клетки красной пульпы выявлены сильные положительные связи.

В парах: лимфоциты герминативного центра/клетки красной пульпы, лимфоциты ПАЛМ/клетки красной пульпы, ГЛК красной пульпы/лимфоциты ПАЛМ обнаружены сильные отрицательные связи.

По взаимодействиям СТ/СТ выявлена сильная положительная связь ГЛК герминативного центра/лимфоциты герминативного центра. В парах: ГЛК герминативного центра/лимфоциты ПАЛМ, лимфоциты герминативного центра/лимфоциты ПАЛМ обнаружены сильные отрицательные корреляционные связи.

Таким образом, через 1 ч после ИУ в точку GV 14 увеличивается количество мегакариоцитов и появляются незрелые формы клеток миелоидного ряда. Вслед за этим усиливаются взаимосвязи между ГЛК, что свидетельствует о возможном усилении синтеза нейроаминов в этих клетках с увеличением выброса квоты нейроаминов в межклеточное пространство.

–  –  –

3.3. Морфофункциональная характеристика селезенки мышей через 1 ч после иглоукалывания в точку LI 11 После ИУ в точку LI 11 в срезах селезенки мышей, окрашенных гематоксилином и эозином, выявлены лимфоидные узелки разных размеров.

Количество мегакариоцитов в красной пульпе по сравнению с контрольной группой не изменяется, однако, по сравнению с группой мышей после ИУ в ТА GV 14 – уменьшена в 9,98 раз (Приложение 1).

Количество клеток с картинами митоза в красной пульпе больше на 22,77% по сравнению с контрольной группой животных (Приложение 1).

В срезах селезенки мышей, окрашенных по А. Унна, ТК не выявляются.

Однако, в мантийной и маргинальной зоне выявляются шарообразные группы лимфоцитов.

В срезах селезенки мышей, обработанных по методу Кросса, количество ГЛК в герминативном центре больше по сравнению с контрольной группой в 2,04 раза. Количество ГЛК в красной пульпе больше по сравнению с контрольной группой в 3,35 раза и увеличивается по сравнению с группой мышей после ИУ в ТА GV 14 – в 2,07 раза (Приложение 4).

В красной пульпе ГЛК образуют группы до 16 в одном поле зрения. ГЛК светятся тускло, гранулы не всегда различимы. Есть клетки, в которых светятся 1гранулы, в других – светятся все, но очень тускло. В герминативном центре выявляются до 6 слабо светящихся ГЛК в одном поле зрения. Ярко люминесцирует стенка центральной артерии, в ПАЛМ встречаются 2 ГЛК в одном поле зрения (Рисунок 21). Между лимфоидными узелками определяются ТК до 5 в одном поле зрения, они имеют цельные ядра, которые не светятся.

Содержание гистамина по сравнению с контрольной группой больше в лимфоцитах герминативного центра и в клетках красной пульпы – на 34,32% и на 62,09% соответственно, а в лимфоцитах ПАЛМ – меньше в 3,19 раза. По сравнению с группой мышей после ИУ в точку GV 14 содержание гистамина уменьшается: в ГЛК герминативного центра – на 19,31%, в ГЛК красной пульпы – на 46,24%, в лимфоцитах ПАЛМ – в 4,35 раза, в клетках красной пульпы – на 25,31% (Рисунок 22, Приложение 5).

В срезах селезенки мышей, обработанных по методу Фалька-Хиларпа, на границе красной и белой пульпы определяется цепочка из ГЛК (Рисунок 21).

Одновременно здесь увеличивается число выявляемых адренергических нервных волокон до 6 в одном поле зрения (Рисунок 20). Содержание КА по сравнению с контрольной группой меньше: в ГЛК красной пульпы – на 18,46%, в клетках красной пульпы – на 28,01%, а в лимфоцитах ПАЛМ больше – на 68,88%.

Содержание КА в ГЛК и лимфоцитах герминативного центра уменьшается по сравнению с группой мышей после ИУ в ТА GV 14 – в 2,27 раза и на 22,46% соответственно, а в ГЛК красной пульпы и в лимфоцитах ПАЛМ – увеличивается на 16,90% и в 2,45 раза соответственно (Рисунок 23, Приложение 5).

Содержание СТ по сравнению с контрольной группой меньше: в ГЛК герминативного центра – на 17,76%, в лимфоцитах герминативного центра – на 22,49%, в клетках красной пульпы – на 36,17%, а в лимфоцитах ПАЛМ – увеличивается на 59,43%. Содержание СТ по сравнению с группой мышей после ИУ в точку GV 14 в ГЛК и в лимфоцитах герминативного центра меньше в 2,49 раза и на 19,15% соответственно, а в ГЛК красной пульпы и в лимфоцитах ПАЛМ больше на 19,54% и на 98,93% соответственно (Рисунок 24, Приложение 5).

Is остается выше единицы. По сравнению с группой мышей после ИУ в точку GV 14 Is увеличен во всех структурах, кроме лимфоцитов ПАЛМ, где он уменьшен на 20,90% (Рисунок 25, Приложение 5).

Рисунок 20 – Селезенка мышей через 1 ч после иглоукалывания в точку LI 11. Гранулярные люминесцирующие клетки и увеличенное число выявляемых адренергических нервных волокон по краю лимфоидного узелка Метод Фалька. Микроскоп ЛЮМАМ. Увеличение Рисунок 21 – Селезенка мышей через 1 ч после иглоукалывания в точку LI 11. Цепочка из ГЛК на границе красной (3) и белой пульпы (1) селезенки, в которой различима центральная артерия (2) Метод Фалька-Хиларпа. Микроскоп ЛЮМАМ. Увеличение 100 ** ## ** ## ** ** ## ** ## ##

–  –  –

Рисунок 22 – Содержание гистамина в структурах селезенки мышей через 1 ч после иглоукалывания в точку LI 11 (контрольной и опытной групп) и через 1 ч после иглоукалывания в точку GV 14 (по оси ординат: у.е.) ИУ – иглоукалывание, ГЛК – гранулярные люминесцирующие клетки;

** p0,01 по сравнению с показателями в контрольной группе, ## p0,01 по сравнению с показателями в группе мышей после ИУ в GV 14 ** ## ** ** ** ## 30 ## ## **

–  –  –

Рисунок 23 – Содержание катехоламинов в структурах селезенки мышей через 1 ч после иглоукалывания в точку LI 11 (контрольной и опытной групп) и через 1 ч после иглоукалывания в точку GV 14 (по оси ординат: у.е.) ИУ – иглоукалывание, ГЛК – гранулярные люминесцирующие клетки;

** p0,01 по сравнению с показателями в контрольной группе, ## p0,01 по сравнению с показателями в группе мышей после ИУ в GV 14 ** 90 ## ** ** ** ## ## ## **

–  –  –

Рисунок 24 – Содержание серотонина в структурах селезенки мышей через 1 ч после иглоукалывания в точку LI 11 (контрольной и опытной групп) и через 1 ч после иглоукалывания в точку GV 14 (по оси ординат: у.е.) ИУ – иглоукалывание, ГЛК – гранулярные люминесцирующие клетки;

** p0,01 по сравнению с показателями в контрольной группе, ## p0,01 по сравнению с показателями в группе мышей после ИУ в GV 14 ** ** ## ** * ##

–  –  –

Рисунок 25 – Серотониновый индекс структур селезенки мышей через 1 ч после иглоукалывания в точку LI 11 (опытной и контрольной групп) и через 1 ч после иглоукалывания в точку GV 14 (по оси ординат: у.е.) ИУ – иглоукалывание, ГЛК – гранулярные люминесцирующие клетки;

** p0,01 по сравнению с показателями в контрольной группе, ## p0,01 по сравнению с показателями в группе мышей после ИУ в GV 14 При изучении корреляционных связей по содержанию биогенных аминов между люминесцирующими структурами селезенки мышей сильные положительные связи гистамин/гистамин впервые выявлены в парах: ГЛК красной пульпы и клетками красной пульпой, а также между лимфоцитами герминативного центра и лимфоцитами ПАЛМ (Таблица 4).

Разрыв связей по гистамин/гистамин по сравнению с контролем наблюдается между ГЛК герминативного центра и ГЛК красной пульпы.

По корреляционным связям КА/КА сильные положительные связи впервые выявляются между ГЛК герминативного центра и лимфоцитами герминативного центра, а также между лимфоцитами ПАЛМ и клетками красной пульпой.

По КА/КА появляются сильные отрицательные корреляционные связи между ГЛК герминативного центра и лимфоцитами ПАЛМ, ГЛК герминативного центра и клетками красной пульпой, лимфоцитами герминативного центра и клетками красной пульпой, лимфоцитами герминативного центра и лимфоцитами ПАЛМ.

Сильная положительная корреляционная связь по СТ/СТ выявлена между ГЛК герминативного центра и лимфоцитами ПАЛМ. Сильные отрицательные связи выявлены в парах: ГЛК герминативного центра/ГЛК красной пульпы, ГЛК красной пульпы/лимфоциты ПАЛМ, ГЛК герминативного центра/лимфоциты герминативного центра.

В контрольной группе обнаружены разнонаправленные показатели содержания биогенных аминов, отличные от показателей опытной группы, но схожие с показателями контрольной группы мышей, которым проводили ИУ рядом с точкой GV 14. Обнаружена сильная положительная связь между ГЛК герминативного центра и ГЛК красной пульпы. Эта связь положительная по всем трем нейромедиаторам.

Таким образом, ИУ в точку LI 11 приводит к изменению коэффициентов корреляции между биоаминсодержащими структурами. В регуляции насыщенности биогенными аминами клеточных элементов структур селезенки на данном этапе эксперимента ТК не принимают участия.

–  –  –

3.4. Морфофункциональная характеристика селезенки мышей через 1 ч после иглоукалывания в точки GV 14 и LI 11 При исследовании срезов селезенки мышей после одновременного ИУ в точки GV 14 и LI 11 наши исследования во многом совпадают с данными Гурьяновой Е.А. (2011). Так, при общей окраске гематоксилином и эозином выявляются лимфоидные узелки разных размеров, отдельные узелки имеют неправильную форму. Соотношение числа лимфоидных узелков с герминативными центрами селезенки к общему числу лимфоидных узелков больше, чем в контрольной группе на 53,66% и увеличено по сравнению с группой мышей после ИУ только в точку GV 14 на 21,15% (Приложение 1).

В красной пульпе селезенки мышей количество мегакариоцитов по сравнению с контрольной группой больше в 2,81 раза, увеличено по сравнению с группой мышей после ИУ в точку LI 11 в 2,83 раза, а по сравнению с группой мышей после ИУ только в точку GV 14 уменьшено в 3,52 раза. При параллельных окрасках около мегакариоцитов нами обнаружено большое число ГЛК, расположенных диффузно. Кроме того, в красной и белой пульпе селезенки обнаружены ретикулярные клетки, плазмоциты и эозинофилы (Приложение 1).

Количество клеток с картинами митоза в красной пульпе увеличено на 39,45% по сравнению с контрольной группой (Приложение 1).

В срезах селезенки, окрашенных по А. Унна, лимфоидные узелки не имеют определенной формы, в них обнаружены лимфоциты с -метахроматичной окраской цитоплазмы. Герминативный центр выражен. В ПАЛМ обнаруживаются шаровидные мелкие группы лимфоцитов, выявляется большое число сосудов.

Мантийная и маргинальная зона едины. Маргинальный синус хорошо выражен. В красной пульпе выявляются многочисленные группы лимфоцитов, они окрашены ярко -ортохромно (Рисунок 26). По периферии образованных лимфоидных узелков выявлено большое число ТК. Среди ТК по степени дегрануляции обнаружены преимущественно Т0 (цельные формы) (49,53%) и Т1+2 (частично дегранулированные формы) (44,37%), по степени зрелости гепарина:

1,2,3-метахроматичные (84,35%) ТК (Приложение 2).

При исследовании срезов селезенки мышей, обработанных по методу Кросса, в лимфоидном узелке зоны различаются плохо. Количество ГЛК в герминативном центре увеличено по сравнению с контрольной группой – в 2,69 раза. Количество ГЛК красной пульпы повышено по сравнению с контрольной группой в 2,59 раза и увеличено по сравнению с группой мышей после ИУ в точку GV 14 на 94,92% (Приложение 4).

В герминативном центре локализуются крупные ГЛК (до 24 мкм), имеющие гранулы разного размера. В красной пульпе выявлены ГЛК темно-желтого цвета, имеющие гранулы одинакового размера. В мантийной зоне и в ПАЛМ выявляются до 12 ГЛК в одном поле зрения, половина из них люминесцируют темно-желтым цветом, имеют гранулы одинакового размера.

В ГЛК герминативного центра содержание гистамина повышено по сравнению с контрольной группой – в 2,27 раза, увеличено по сравнению с группой мышей после ИУ в точку GV 14 и с группой мышей после ИУ в точку LI 11 – на 36,92% и на 69,70% соответственно. В ГЛК красной пульпы содержание гистамина увеличено по сравнению с контрольной группой – в 2,48 раза, и больше по сравнению с группой мышей после ИУ в ТА GV 14 и с группой мышей после ИУ в точку LI 11 – на 36,79% и в 2,54 раза соответственно. В лимфоцитах герминативного центра содержание гистамина повышено по сравнению с контрольной группой в 2,05 раза и увеличено по сравнению с группой мышей после ИУ в точку LI 11 на 29,22%. В лимфоцитах ПАЛМ содержание гистамина больше по сравнению с контрольной группой на 18,98% и увеличено по сравнению с группой мышей после ИУ в точку LI 11 в 3,10 раза, а по сравнению с группой мышей после ИУ в ТА GV 14 – уменьшено на 28,72%. В лимфоцитах красной пульпы селезенки мышей содержание гистамина по сравнению с контрольной группой также повышено на 66,36%, а по сравнению с группой мышей после ИУ в точку GV 14 – уменьшено на 25,03% (Рисунок 28, Приложение 5).

В срезах селезенки, обработанных по методу Фалька-Хиларпа, в мантийной зоне лимфоидного узелка селезенки определяются мелкие, расположенные в ряд, ГЛК, которые содержат небольшое число гранул.

Лимфоциты и ГЛК располагаются группами. По стенкам сосудов проходят адренергические нервные волокна до 7 в одном поле зрения, образующие сплетения. По ходу сосудов на адренергических нервных волокнах выявлены ТК

– яркие, увеличенны в объеме, некоторые их них частично дегранулированы.

Около центральной артерии выявлены -метахроматичные клетки.

Содержание КА в ГЛК герминативного центра увеличено по сравнению с контрольной группой на 57,99%, уменьшено на 36,82% по сравнению с группой мышей после ИУ в точку GV 14, а по сравнению с группой мышей после ИУ в ТА LI 11 – увеличено на 44,05%.

В лимфоцитах герминативного центра содержание КА уменьшено на 21,02% по сравнению с группой мышей после ИУ в ТА GV 14.

В лимфоцитах ПАЛМ содержание КА уменьшено по сравнению с группой мышей после ИУ в точку GV 14 и по сравнению с ИУ в точку LI 11 – на 30,36% и в 3,52 раза соответственно (Рисунок 29, Приложение 4).

Содержание СТ в ГЛК герминативного центра по сравнению с группой мышей после ИУ в ТА GV 14 снижено на 41,59%, а по сравнению с группой мышей после ИУ в ТА LI 11 – увеличено на 45,20%.

Рисунок 26 – Селезенка мышей через 1 ч после иглоукалывания в точки GV 14 и LI 11. Образование лимфоидных узелков (1) в селезенке мышей, группы лимфоцитов в красной пульпе (2) Окраска по А. Унна. Микроскоп МИКМЕД 6. Увеличение 100 Рисунок 27 – Селезенка мышей через 1 ч после иглоукалывания в точки GV 14 и LI 11. Адренергические нервные волокна в лимфоидном узелке селезенки Метод Фалька. Микроскоп ЛЮМАМ. Увеличение 1000 В ГЛК красной пульпы содержание СТ повышено по сравнению со всеми сравниваемыми экспериментальными группами мышей.

В лимфоцитах ПАЛМ содержание СТ уменьшено по сравнению со всеми сравниваемыми экспериментальными группами мышей. (Рисунок 30, Приложение 5).



Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 5 |

Похожие работы:

«Искам Николай Юрьевич ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ НОВОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ АЦИД-НИИММП НА ОСНОВЕ ОРГАНИЧЕСКИХ КИСЛОТ ПРИ ПРОИЗВОДСТВЕ ГОВЯДИНЫ 06.02.10 – частная зоотехния, технология производства продуктов животноводства; 06.02.08 – кормопроизводство, кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов. ДИССЕРТАЦИЯ на...»

«ПЛОТНИКОВА Марина Александровна МУЛЬТИПЛЕКСНЫЕ МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВИРУСИНДУЦИРОВАННОЙ ЭКСПРЕССИИ ЦИТОКИНОВ НА ОСНОВЕ МИКРОЧИПОВ И ПЦР Специальность 03.02.02 – вирусология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат биологических наук Васин Андрей Владимирович Санкт-Петербург – 201...»

«СОЛОВЬЕВ Альберт Николаевич КЛИМАТОГЕННАЯ И АНТРОПОГЕННАЯ ДИНАМИКА БИОТЫ В МЕНЯЮЩИХСЯ ЭКОЛОГИЧЕСКИХ УСЛОВИЯХ ВОСТОКА РУССКОЙ РАВНИНЫ Специальность 03.02.08 – экология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Киров Оглавление Введение Глава 1. Обзор состояния проблемы климатогенной...»

«Лёвкина Ксения Викторовна Влияние сроков, норм высева и удобрений на урожайность и качество зерна озимой твердой пшеницы в подзоне светло-каштановых почв Волгоградской области Специальность: 06.01.01 – общее земледелие, растениеводство Диссертация на соискание учёной степени кандидата сельскохозяйственных наук Научный...»

«Степина Елена Владимировна ЭКОЛОГО-ФЛОРИСТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СТЕПНОЙ РАСТИТЕЛЬНОСТИ ЮГО-ЗАПАДНЫХ РАЙОНОВ САРАТОВСКОЙ ОБЛАСТИ 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«МУХА (DIPTERA MUSCIDAE) КАК ПРОДУЦЕНТ КОРМОВОГО БЕЛКА ДЛЯ ПТИЦ НА ВОСТОКЕ КАЗАХСТАНА 16.02.02 – кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук КОЖЕБАЕВ БОЛАТПЕК ЖАНАХМЕТОВИЧ Научный руководитель – доктор биологических наук профессор Ж.М. Исимбеков...»

«Улановская Ирина Владимировна БИОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ HEMEROCALLIS HYBRIDA HORT. КОЛЛЕКЦИИ НИКИТСКОГО БОТАНИЧЕСКОГО САДА 03.02.01 – ботаника Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель д.б.н., профессор З.К. Клименко Ялта – 2015 СОДЕРЖАНИЕ Стр. ВВЕДЕНИЕ.. РАЗДЕЛ 1. ИСТОРИЯ...»

«Савельева Наталья Николаевна Генетический потенциал исходных форм яблони для создания устойчивых к парше и интенсивных колонновидных сортов 06.01.05. – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Мичуринск-наукоград РФ, 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ...»

«Черкасова Анна Владимировна НОВЫЕ КАРОТИНСОДЕРЖАЩИЕ БАД: ПОЛУЧЕНИЕ, СВОЙСТВА И ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ОБОГАЩЕНИЯ МОЛОЧНЫХ ПРОДУКТОВ Специальность: 05.18.07– Биотехнология пищевых продуктов и биологических активных веществ Диссертация на соискание ученой степени кандидата технических наук Научный руководитель: доктор технических наук,...»

«МАХАЧЕВА ХАННА ГАДЖИЕВНА СОСТОЯНИЕ И ПЕРСПЕКТИВЫ МОДЕРНИЗАЦИИ ОТОРИНОЛАРИНГОЛОГИЧЕСКОЙ ПОМОЩИ В РЕСПУБЛИКЕ ДАГЕСТАН 14.01.03 – болезни уха, горла и носа 14.02.03 – общественное здоровье и здравоохранение Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научные консультанты: доктор медицинских наук, профессор Н.А. Дайхес доктор медицинских наук, профессор Л.М. Асхабова...»

«Ядрихинская Варвара Константиновна ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ОСТРЫХ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ В Г. ЯКУТСКЕ И РЕСПУБЛИКЕ САХА (ЯКУТИЯ) 03.02.08 – экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель кандидат биологических наук, доцент М.В. Щелчкова Якутск 2015...»

«Решетникова Татьяна Валерьевна ФОРМИРОВАНИЕ ОРГАНИЧЕСКОГО ВЕЩЕСТВА ПОЧВЫ В КУЛЬТУРАХ ОСНОВНЫХ ЛЕСООБРАЗУЮЩИХ ПОРОД СИБИРИ Специальность 03.02.08 – «Экология (биология)» Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук Э.Ф. Ведрова Красноярск 2015 Содержание Введение..5 Глава 1....»

«Будилова Елена Вениаминовна Эволюция жизненного цикла человека: анализ глобальных данных и моделирование 03.02.08 – Экология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант доктор биологических наук, профессор А.Т. Терехин Москва 2015 Посвящается моим родителям, детям и мужу с любовью. Содержание Введение.. 5 1. Теория эволюции жизненного цикла. 19...»

«Максимова Ольга Владимировна «Оценка микробиоты кишечника у детей с аллергическими заболеваниями в зависимости от массы тела» 03.02.03. – Микробиология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: Зверев Виталий Васильевич академик РАН, д.б.н., профессор Научный консультант: Гервазиева Валентина Борисовна д.м.н, профессор, заслуженный деятель науки РФ МОСКВА – 2015 Оглавление Список сокращений Введение Глава 1 Обзор литературы 1.1...»

«ПОЛУЭКТОВА ЕКАТЕРИНА ВИКТОРОВНА ФИТОТОКСИЧЕСКИЕ МЕТАБОЛИТЫ ГРИБА PARAPHOMA SP. ВИЗР 1.46 И ПЕРСПЕКТИВЫ ИХ ПРАКТИЧЕСКОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ Шифр и наименование специальности: 03.02.12 – микология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: Берестецкий А.О. кандидат биологических наук Санкт-Петербург...»

«БОЛГОВА Светлана Борисовна РЫБНЫЕ КОЛЛАГЕНЫ: ПОЛУЧЕНИЕ, СВОЙСТВА И ПРИМЕНЕНИЕ Специальность: 05.18.07 Биотехнология пищевых продуктов и биологических активных веществ Диссертация на соискание ученой степени кандидата технических наук Научный руководитель: Заслуженный деятель науки РФ, доктор технических наук, профессор Антипова...»

«ПИМЕНОВА ЕКАТЕРИНА ВЛАДИМИРОВНА РАЗРАБОТКА МЕТОДА ОЦЕНКИ ЦИТОТОКСИЧНОСТИ АНТИГЕНОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ МЕЛИОИДОЗА IN VITRO НА МОДЕЛИ ПЕРЕВИВАЕМЫХ КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУР 03.02.03 – микробиология Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор...»

«Потапова Анна Викторовна ВЛИЯНИЕ ЗАГРЯЗНЕНИЯ ТРОФИЧЕСКИХ СУБСТРАТОВ ТЯЖЁЛЫМИ МЕТАЛЛАМИ И ХЛОРОРГАНИЧЕСКИМИ СОЕДИНЕНИЯМИ НА КАЧЕСТВО ЛОСИНОГО МОЛОКА 03.02.08 – Экология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, Баранов Александр Васильевич...»

«Ковалев Сергей Юрьевич ПРОИСХОЖДЕНИЕ, РАСПРОСТРАНЕНИЕ И ЭВОЛЮЦИЯ ВИРУСА КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук 03.02.02 – вирусология ЕКАТЕРИНБУРГ 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ СЛОВАРЬ ТЕРМИНОВ И ОПРЕДЕЛЕНИЙ ВВЕДЕНИЕ ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ...»

«Толмачева Алла Викторовна УДК 633.34:551.АГРОКЛИМАТИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА УСЛОВИЙ ВОЗДЕЛЫВАНИЯ СОИ В УКРАИНЕ 11.00.09 – метеорология, климатология, агрометеорология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата географических наук Научный руководитель: Полевой Анатолий Николаевич, доктор географических наук, профессор Одесса – 2015 СОДЕРЖАНИЕ стр. ВВЕДЕНИЕ РАЗДЕЛ І. БИОЛОГИЧЕСКИЕ...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.