WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |

«Структурные изменения селезенки мышей при воздействии иглоукалывания и лазера во временном аспекте диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук ...»

-- [ Страница 1 ] --

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение

высшего профессионального образования «Чувашский государственный

университет имени И.Н. Ульянова»

На правах рукописи

Кроткова Ольга Сергеевна

Структурные изменения селезенки мышей при воздействии

иглоукалывания и лазера во временном аспекте

диссертация

на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

03.03.04 – клеточная биология, цитология, гистология

Научный руководитель

доктор медицинских наук

доцент Гурьянова Е.А.

Чебоксары – 2015

ОГЛАВЛЕНИЕ

Введение

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Современные представления о селезенке как об органе иммуногенеза 11

1.1. Гистологическое строение селезенки 12

1.2. Нейромедиаторы селезенки

1.3. Клеточный состав селезенки

1.4. Морфологическое строение селезенки при иммуномодулирующих воздействиях

2. Иммуномодулирующее влияние акупунктуры 27

3. Иммуномодулирующее влияние низкоинтенсивного лазерного излучения

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 36

2.1. Материалы исследования

2.2. Методы исследования

ГЛАВА 3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 42

3.1. Морфофункциональная характеристика селезенки интактной группы мышей

3.2. Морфофункциональная характеристика селезенки мышей через 1 ч после иглоукалывания в точку GV 14 52

3.3. Морфофункциональная характеристика селезенки мышей через 1 ч после иглоукалывания в точку LI 11 59

3.4. Морфофункциональная характеристика селезенки мышей через 1 ч после иглоукалывания в точки GV 14 и LI 11 66

3.5. Морфофункциональная характеристика селезенки мышей через 6 ч после иглоукалывания в точки GV 14 и LI 11 74

3.6. Морфофункциональная характеристика селезенки мышей через 8 ч после иглоукалывания в точки GV 14 и LI 11 83

3.7. Морфофункциональная характеристика селезенки мышей через 24 ч после иглоукалывания в точки GV 14 и LI 11 93

3.8. Морфофункциональная характеристика селезенки мышей через 1 ч после инфракрасного низкоинтенсивного лазерного излучения на точку GV 14 ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ 111

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК ИЛЛЮСТРАТИВНОГО МАТЕРИАЛА 155

СПИСОК СО

–  –  –

Среди методов функциональной регуляции организма особое место занимает метод воздействия на биологические активные точки – акупунктура [30, 53, 111, 113, 115, 219]. С древних времен к нам дошли разные вариации этого метода – воздействие иглой, полынной сигарой, металлическим шариком и др. В XX веке к ним добавились электропунктура и лазеропунктура, в том числе и инфракрасное низкоинтенсивное лазерное излучение (НИЛИ) точек акупунктуры (ТА) [112, 161, 219].

В последнее время, в связи с ухудшением экологической обстановки, увеличением количества аллергических заболеваний и иммунодефицитных состояний, усилился интерес практических врачей к акупунктуре, как к методу, улучшающему работу иммунной системы и увеличивающему резервные возможности организма [30, 120, 237]. Установлено, что иглоукалывание (ИУ), в зависимости от выбора точек, оказывает регулирующее действие на все звенья иммунитета. Однако, в большей степени акупунктура действует на клеточный иммунитет и факторы неспецифической резистентности организма [1, 111, 150].

Во многом этот процесс формируется за счет изменения активности лимфоидных органов, в том числе – селезенки [16, 29]. Под действием лазерного излучения возникают ответные комплексные адаптационные нервно-рефлекторные и нервно-гуморальные реакции с активацией симпатоадреналовой и иммунной систем [27]. Вместе с тем тонкие механизмы в реализации иммуномодулирующего эффекта акупунктуры в литературе не представлены.

Известно, что одним из звеньев реализации механизма акупунктурной иммуномодуляции является изменение активности биологически активных веществ (нейроаминов), которые играют роль трансмиттеров и участвуют в метсной регуляции многих органов [29, 52].

В настоящее время известно значение нейромедиаторных структур в реализации нейрогуморальной регуляции селезенки в первые часы после ИУ [29].

Однако в современной литературе отсутствуют детальные данные об изменении содержания нейромедиаторов, количестве Т-лимфоцитов и макрофагов селезенки и об их временной соподчиненности при акупунктурных методах воздействия в 1е сутки после процедуры.

Таким образом, уточнение морфологических характеристик структур селезенки после акупунктурных методов воздействия позволило бы конкретизировать показания к данным методам лечения, стать основой исследования механизма акупунктурной регуляции и выявить участие иммунокомпетентных клеток селезенки в реализации иммуномодулирующего эффекта акупунктуры, что обусловило цель нашего исследования.

Цель и задачи исследования

выявить изменение цитоморфологического и

Цель исследования:

нейромедиаторного статуса селезенки мышей при воздействии иглоукалывания и инфракрасного низкоинтенсивного лазерного излучения во временном аспекте.

Задачи:

1. Изучить содержание биогенных аминов (гистамина, катехоламинов, серотонина) и количество клеточных элементов (мегакариоцитов, плазмоцитов, клеток с картинами митоза, тучных клеток) в селезенке через 1 ч после иглоукалывания в одну точку акупунктуры (GV 14 или LI 11) или одновременно в две точки акупунктуры (GV 14 и LI 11), обладающие иммунорегуляторным действием.

2. Исследовать содержание биогенных аминов (гистамина, катехоламинов, серотонина) и количество клеточных элементов (мегакариоцитов, плазмоцитов, клеток с картинами митоза, тучных клеток) в селезенке после иглоукалывания в точки GV 14 и LI 11 через 6, 8, 24 ч.

3. Определить особенности локализации и количественного распределения CD3+-клеток (зрелых Т-лимфоцитов) и CD68+-клеток (макрофагов) в зонах селезенки мышей после иглоукалывания в точки GV 14 и LI 11 через 24 ч после процедуры.

4. Сравнить содержание биогенных аминов (гистамина, катехоламинов, серотонина) и количество клеточных элементов (мегакариоцитов, плазмоцитов, клеток с картинами митоза, тучных клеток) в селезенке через 1 ч после воздействия иглоукалыванием и инфракрасным низкоинтенсивным лазерным излучением на точку GV 14.

Научная новизна

Впервые описана динамика содержания биогенных аминов (гистамина, катехоламинов, серотонина) в структурах селезенки мышей через 1 ч после иглоукалывания в одну точку акупунктуры (GV 14 или LI 11) и через 1, 6, 8 и 24 ч после иглоукалывания в точки GV 14 и LI 11, а также через 1 ч после воздействия инфракрасным низкоинтенсивным лазерным излучением на точку GV 14.

Выявлены корреляционные связи между биогенными аминами (гистамином, катехоламинами, серотонином) в селезенке мышей через 1 ч после иглоукалывания в одну точку акупунктуры (GV 14 или LI 11) и через 1, 6, 8 и 24 ч после иглоукалывания в точки GV 14 и LI 11, а также через 1 ч после воздействия инфракрасным низкоинтенсивным лазерным излучением на точку GV 14.

Впервые описаны особенности локализации и количественного распределения иммунокомпетентных клеток (CD3+ (зрелых Т-лимфоцитов) и CD68+ (макрофагов)) в зонах селезенки мышей после иглоукалывания в точки GV 14 и LI 11 через 6, 8 и 24 ч.

Впервые изучено в сравнительном аспекте влияние на селезенку иглоукалывания и инфракрасного низкоинтенсивного лазерного излучения на точку GV 14.

Положения диссертации, выносимые на защиту

1. Иглоукалывание в точку GV 14 увеличивает количество мегакариоцитов в красной пульпе, в точку LI 11 – увеличивает число выявляемых адренергических нервных волокон, а в точки GV 14 и LI 11 – вызывает ускорение размножения клеток во всех зонах лимфоидного узелка селезенки через 1 ч после процедуры.

2. Инфракрасное низкоинтенсивное лазерное излучение на точку GV 14 увеличивает содержание гистамина в гранулярных люминесцирующих клетках герминативного центра, тогда как иглоукалывание в точку GV 14 – увеличивает содержание гистамина в лимфоцитах периартериальной лимфоидной муфты селезенки через 1 ч после процедуры.

Теоретическая и практическая значимость работы

Полученные данные дополняют знания об организации лимфоидных узелков селезенки и входящих в их состав клеточных элементов при воздействии иглоукалывания. Выявленные морфофункциональные особенности селезенки после иглоукалывания в разные комбинации точек позволяют объяснить специфичность применения различных точек акупунктуры в клинической практике.

Полученные в результате настоящего исследования данные о распределении клеток красной пульпы селезенки после акупунктурных методов воздействия, которые могут быть использованы в качестве базовых в научноисследовательских работах и при проведении экспериментов на лабораторных животных.

Обнаруженная иммуномодулирующая активность акупунктурных методов (иглоукалывания и инфракрасного низкоинтенсивного лазерного излучения) подтверждает перспективность их дальнейшего изучения в качестве возможного метода иммунопрофилактики и позволяет расширить показания к данному методу лечения.

Результаты работы являются основанием для продолжения изучения морфогенеза лимфоидной ткани селезенки, ее роли в развитии иммунного ответа на акупунктуру.

Полученные в работе данные представляют интерес для клинической акупунктуры с точки зрения гистофизиологического обоснования преимущества инфракрасного низкоинтенсивного лазерного излучения.

Апробация работы

Материалы диссертации доложены и обсуждены на VII Международном конгрессе «Здоровье и образование – XXI век» (Москва, 2007); на X, XII Межрегиональном конференции-фестивале научного творчества учащейся молодежи «Юность большой Волги» (Чебоксары, 2008, 2010); на XVI Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов» (Москва, 2009); на Международной научно-практической конференции «Урбанизация и Здоровье» (Киев, 2010); на 22-ой, 24-ой Европейской студенческой конференции (Берлин, 2010, 2013); на 84-ой конференции студенческого научного общества «Мечниковские чтения-2011»

(Санкт-Петербург, 2011); на 5-ой Международной медицинской конференции (IOMC 2012) (США, 2012); Всероссийской научной – Интернет конференции с международным участием «Спектрометрические методы анализа в науке и технике» (Москва, 2013); XII Конгрессе Международной ассоциации морфологов и VII Съезде Российского научного медицинского общества анатомов, гистологов и эмбриологов (Тюмень, 2014).

Внедрения результатов исследования

Основные положения диссертации внедрены в клиническую работу БУ «Первая Чебоксарская городская больница имени П.Н. Осипова» г. Чебоксары, а также включены в лекционный курс в ФГБОУ ВПО «Чувашский государственный университет имени И.Н. Ульянова» и АУ Чувашской Республики «Институт усовершенствования врачей» МЗСР ЧР.

Рационализаторские предложения №1164 «Способ акупунктурой стимуляции нейромедиаторных структур селезенки крыс в иммунном ответе», выданное 24.12.2010 г. и №1173 «Способ иммунной активации нейромедиаторных структур селезенки при помощи лазерного излучения», выданное 23.06.2015 г.

применяются в работе студенческого научного кружка кафедры общей и клинической морфологии и судебной медицины ФГБОУ ВПО «Чувашский государственный университет имени И.Н. Ульянова».

Публикации по теме диссертации По теме диссертации опубликовано 25 печатных работ, в том числе 7 в ведущих изданиях, рекомендованных ВАК России.

–  –  –

Диссертация изложена на 174 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, результатов собственного исследовании, обсуждения результатов, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, включающего 239 источника (104 отечественных, 135 иностранные публикации), списка иллюстративного материла, списка сокращений, 9 приложений. Диссертация иллюстрирована 9 таблицами и 72 рисунком, из которых 27 – микрофотографий.

11

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Современные представления о селезенке как об органе иммуногенеза Селезенка является крупнейшим лимфоидным органом, вносящим весомый вклад в развитие и поддержание иммунных реакций, происходящих в организме [67, 108, 160, 181, 215]. В настоящее время некоторые авторы считают ее главным органом иммуногенеза [32, 212]. Селезенка окружена соединительнотканной капсулой, которая состоит из коллагеновых и эластических волокон, содержит миоциты и фиброциты, с поверхности покрыта мезотелием [65, 182]. От капсулы внутрь отходят трабекулы, содержащие сосуды и соединительную ткань, расположенную радиально [132]. В крупных трабекулах проходят артерии, вены, нервные волокна, которые входят в строму селезенки в области ее ворот, образуя трабекулярное древо. Капсула и трабекулы селезенки составляют грубую строму органа, мягкую строму органа составляет ретикулярная ткань [83]. Ретикулярные волокна, отходящие от капсулы и трабекул, вместе с ретикулярными клетками образуют трехмерную сеть. Эта сеть позволяет быстро изменить объем селезенки при сокращении миоцитов капсулы и трабекул, выполняя резервуарную функцию [212].

Паренхима органа делится на белую и красную пульпу. Белая пульпа состоит из высокоорганизованных скоплений Т- и В-лимфоцитов. Т-лимфоциты расположены непосредственно вдоль артерий пульпы около наружной оболочки их стенки, образуя Т-зависимую зону селезенки – периартериальную лимфоидную муфту (ПАЛМ) [8]. Кроме того, в селезенке выделяют В-зависимую зону (герминативный центр) и смешанные Т- и В-зависимые зоны (мантийная и маргинальная) [48]. При люминесцентных методах исследования в пределах зон селезенки определяются гранулярные люминесцирующие клетки (ГЛК) [21].

1.1. Гистологическое строение селезенки

Т-лимфоциты располагаются в петлях ретикулярной стромы [67, 79].

Большинство лимфоцитов ПАЛМ несут на своей поверхности маркеры – антигены, которые объединены в кластеры дифференцировки (CD: cluster of differentiation). CD4+ – это маркер Т-хелперов, части макрофагов и дендритных клеток, кроме того здесь имеются CD8+-клетки, являющиеся маркерами цитотоксических Т-лимфоцитов, части NK-клеток (NK: natural killer) и дендритных клеток, они представлены в меньшем количестве [209, 229]. В ПАЛМ, кроме T-лимфоцитов, несущих в своей мембране молекулы главного комплекса гистосовместимости (MHC: major histocompatibility complex) II класса, находятся и дендритные клетки с длинными цитоплазматическими расширениями [158, 217]. Эти клетки называются интердигитирующими дендритными клетками (ИДК).

По литературным данным известно, что существует 4 типа дендритных клеток: ИДК миелоидного происхождения (дендритные клетки Т-зависимых зон периферических органов иммуногенеза), дендритные клетки лимфоидного происхождения (дендритные клетки тимуса), клетки Лангерганса (эпителиального происхождения), фолликулярные дендритные клетки (ФДК) герминативного центра селезенки и лимфоузлов [70, 118, 193].

ИДК относятся к моноцитарно-макрофагальной системе [218]. По данным литературы, они представляют собой клетки, осуществляющие представление пептидных антигенов для индукции первичной клеточной иммунной реакции [80, 140, 164, 232].

Предполагается, что ФДК имеет мезенхимальное происхождение [129, 163].

Также существует мнение, что ФДК являются предшественниками стромальных клеток костного мозга, его миелоидных или лимфоидных клеток, мезенхимальных предшественников или моноцитов [211]. ФДК способны удерживать комплекс антиген-антитело на своей поверхности в течение длительного времени. Основная функция ФДК – предотвращение апоптоза, а также пролиферация предшественников В-лимфоцитов в герминативном центре селезенки [166, 167].

ПАЛМ делится на глубокую и периферическую части. В периферической части ПАЛМ преобладают Т-лимфоциты, однако в ней встречаются и Влимфоциты, поступившие сюда в результате миграции из маргинальной зоны и лимфоидных узелков селезенки, здесь также присутствуют специализированные макрофаги [186].

Лимфоидные узелки представляют собой скопления Т- и В-лимфоцитов, плазмоцитов и макрофагов в петлях ретикулярной ткани [193, 196]. Лимфоидные узелки с герминативным центром называют первичными, а без герминативного центра – вторичными [58].

Вторичные лимфоидные узелки возникают, когда специфические В-лимфоциты принимают участие в иммунных реакциях селезенки, и существуют ограниченный срок. Первичные лимфоидные узелки имеют типичную структуру:

состоят из мелких рециркулирующих В-лимфоцитов, экспрессирующих иммуноглобулины (Ig: immunoglobulin) M и IgD. В-лимфоциты проходят через сеть ФДК [212]. У грызунов рециркулирующие В- и Т-лимфоциты первоначально входят в маргинальную зону. Из маргинальной зоны В-лимфоциты направляются в периферическую часть ПАЛМ, а затем в мантийную зону вторичных узелков.

Если антиген не встречается, В-клетки покидают селезенку через красную пульпу.

T-лимфоциты, напротив, непосредственно направляются в ПАЛМ, где они оседают в течение некоторого времени, прежде чем покинут селезенку через красную пульпу.

Если рециркулирующие В-лимфоциты встречают специфический антиген, который находится на поверхности ФДК в виде иммунных комплексов, они «арестовывают» его в пределах лимфоидного узелка [187].

Т-лимфоциты, активированные дендритными клетками, направляются в периферическую часть ПАЛМ. Там они сталкиваются с предварительно активированными рециркулирующими В-лимфоцитами, которые могут быть связаны со специфическим антигеном в крови через их поверхностные Ig. Кроме дендритных клеток, B-клетки также могут презентировать антиген CD4+ Тлимфоцитам. Таким образом, активируются В- и Т-лимфоциты «арестованные» в периферической части ПАЛМ, если они распознаются антигеном. Адекватная помощь от Т-клеток приводит к пролиферации и дифференцировке B-лимфоцитов в плазмоциты в периферической части ПАЛМ и вокруг маргинальной зоны. Эти скопления В-клеток называются экстрафолликулярными очагами [209]. В-клетки персистируют в течение короткого периода (около 10 дней), после однократного введения антигена, а потом подвергаются апоптозу [139, 189]. Они формируют условия для развития герминативных центров. Комплексы антиген-антитело, образованные Ig в экстрафолликулярных очагах, локализуются на поверхности ФДК в первичных лимфоидных узелках. ФДК захватывают такие комплексы с помощью Fc-рецепторов комплемента и сохраняют их в течение нескольких месяцев и даже лет. «Арест» рециркулирующих B-клеток, проходящих через лимфоидные узелки, происходит, когда они встречаются с соответствующим антигеном. Происходит процесс пролиферации, и начинается процесс гипермутаций тех частей их генов Ig, которые кодируют антигенсвязывающие белки. Этот процесс может привести к повышению аффинности связывания по отношению к антигену и к позитивному отбору соответствующих В-клеток.

Гипермутация генов Ig, как полагают, ограничена герминативным центром.

Таким образом, гипермутация генов Ig может быть использована для идентификации В-клеток, поступивших в герминативный центр [209].

Функцией герминативного центра селезенки является антиген зависимая пролиферация и дифференцировка В-лимфоцитов [141, 239]. Возможно, ФДК направляют рециркулирующие В-лимфоциты к первичным лимфоидным узелкам и играют решающую роль в клеточной дифференцировке внутри герминативного центра [209]. В каждом первичном лимфоидном узелке присутствуют макрофаги, тогда как во вторичных узелках обнаруживаются лишь их «остатки». CD4+ Т-лимфоциты внутри первичных узелков распределены равномерно, внутри вторичных – локализуются на границе герминативного центра и мантийной зоны [67].

ПАЛМ и лимфоидные узелки окружены маргинальной зоной, которая отделяет их от красной пульпы. Маргинальная зона отделятся от ПАЛМ и лимфоидных узелков кровеносными сосудами (маргинальным синусом).

Эндотелий маргинального синуса, обращенный к лимфоидному узелку – перфорирован, обеспечивая свободный доступ антигенов, эритроцитов, рециркулирующих В-лимфоцитов в маргинальную зону [194]. Маргинальная зона отличается от окружающей ее красной пульпы более плотным расположением лимфоцитов. Пространство маргинальной зоны не выстлано эндотелиальными клетками, хотя она содержит эритроциты. Таким образом, маргинальная зона может рассматриваться как часть «открытого» кровообращения селезенки [79].

Среди В-лимфоцитов маргинальной зоны различают В-клетки памяти, которые образовались в ходе ответа на антигены, а также незрелые В-лимфоциты, поступившие из кровотока [114]. В случае встречи с антигенами незрелые Вклетки мигрируют в герминативный центр и ПАЛМ, где подвергаются процессам пролиферации и дифференцировки [177].

«Соединительные мостики», представленные плазмобластами, соединяют тяжи красной пульпы с глубокой частью ПАЛМ [185]. Эти соединения указывают путь, по которому происходит миграция плазмобластов в красную пульпу.

Следует отметить, что в ходе этой миграции плазмобласты дифференцируются в плазмоциты [151].

Основной функцией красной пульпы селезенки является удаление чужеродных веществ из кровотока [209]. Красная пульпа представлена селезеночными тяжами (тяжами Бильрота), а также системой синусов, расположенной между ними. Тяжи Бильрота представлены лимфоцитами, плазматическими клетками, макрофагами, гранулоцитами, эритроцитами и тромбоцитами, расположенными в соединительной ткани. Терминальные артериолы красной пульпы, вытекающие из центральных артерий, непосредственно открываются в селезеночных тяжах. Тяжи Бильрота являются 16 частью «открытого» (медленного) кровообращения селезенки. Синусы селезенки представляют собой специализированные сосуды, которые могут быть соединены с другими терминальными ветвями центральной артерии. Они рассматриваются как «закрытая» (быстрая) часть кровообращения селезенки [79]. Следует отметить, что селезенка мышей является органом кроветворения, в котором, в отличие от человека, происходит дифференцировка не только клеток лимфоидного, но и гранулоцитарного, эритроцитарного и мегакариоцитрного ростков [98].

При люминесцентно-морфологических методах исследования среди ретикулярной ткани красной пульпы селезенки встречаются ГЛК [83].

Большинство лимфоцитов сети ретикулярных волокон представлены CD8+клетками [223]. Эти клетки участвуют в регуляции иммунного ответа, уничтожают опухолевые и вирусные клетки [147, 223].

1.2. Нейромедиаторы селезенки

Нейромедиаторами (нейротрансмиттерами) называются биологически активные химические вещества, с помощью которых происходит передача импульса от нервной клетки к нейронам через синаптическое пространство между ними, а также от нейронов к мышечной ткани. К нейромедиаторам относятся:

аминокислоты (гамма-аминомасляная кислота (ГАМК), глицин, глутаминовая кислота), катехоламины (КА) (адреналин, норадреналин (НА), дофамин), моноамины (серотонин (СТ), гистамин) и др. [121].

Взаимодействие нейромедиаторных систем обнаруживается на уровне рецепторов для нейромедиаторов и на уровне внутриклеточных посредников.

Ранее было изучено распределение гистамина, СТ, КА в селезенке крыс и мышей при различных воздействиях [9, 21, 29, 82, 83]. Выявлено, что в организме между нейротрансмиттерами существует тесная взаимосвязь. Нейромедиаторы и нейропептиды, высвобождающиеся из нервных окончаний, могут модулировать секрецию гормонов и функциональную активность клеток, в то время как КА и СТ являются регуляторами функций иммунной системы [127]. Проведенные исследования доказывают, что биогенные амины (гистамин, СТ, КА) влияют на иммунные реакции, такие как антителообразование, розеткообразование, цитотоксичность, миграцию и взаимодействие лимфоцитов [77, 122, 135, 157, 178, 199].

Изучение нейромедиаторного сигнала в 1-е сутки после ИУ можно рассматривать как попытку поиска факторов, инициирующих своеобразную реакцию органа и отличие от ответа на другие акупунктурные воздействия (лазера, электромагнитного поля крайне высокой частоты (КВЧ)). [16].

Люминесценция клеточных структур селезенки объясняется благодаря наличию в них нейромедиаторов: гистамина, СТ, КА [42, 117, 133]. При исследовании селезенки крыс и мышей люминесцентно-гистохимическими методами выявлено диффузное зеленоватое свечение лимфоидного узелка.

Светло-зеленым цветом люминесцирует центральная артерия, по ее стенке проходят нервные волокна, красная пульпа отличается темным свечением [21, 29, 83]. Красно-оранжевым светом люминесцируют макрофаги. ГЛК герминативного центра выявляются в виде крупных ярких гранулярных клеток, содержащих 3-4 крупные и более мелкие гранулы желтовато-белого цвета [23]. В красной пульпе располагаются мелкие гранулярные клетки, содержащие беловато-зеленоватые гранулы. Немногочисленные ГЛК обнаруживаются и в ПАЛМ. При исследовании срезов селезенки крыс и мышей на гистамин ГЛК отличаются менее интенсивным свечением [21, 83].

(3-имидазолилэтиламин) образуется из гистидина при Гистамин каталитическом влиянии гистидинкарбоксилазы. H1, H2, H3-рецепторы, через которые гистамин реализует свои эффекты, обнаружены во многих тканях, а также на лимфоцитах и тучных клетках (ТК) [192]. Резервуаром гистамина в клетке являются митохондрии. Большая часть гистамина в организме находится в связанном с белками, липидами, гепарином и дезоксирибонуклеиновой кислотой (ДНК) состоянии. Однако, под влиянием различных воздействий, он может легко переходить в свободную форму. Под действием антигенов, анафилатоксинов С3а и С5а, лейкотриенов гистамин высвобождается из ТК.

Гистамин, являясь регулятором важнейших биологических процессов, обладает разнообразными эффектами. Он активно действует на дифференцировку лимфоцитов, которая связана с появлением рецепторов к этому амину, повышает сопротивляемость организма к инфекционным агентам, ускоряет заживление ран [110]. С другой стороны, при моделировании клеточных иммунных реакций гистамин ингибирует Т-лимфоциты, способствует розеткообразованию, увеличивает число эозинофилов, моноцитов, нейтрофилов, является модулятором нейроэндокринной системы, усиливает фагоцитарную активность макрофагов и рост фибробластов за счет усиления синтеза белка и снижения синтеза ДНК, усиливает воспалительный процесс [24, 50, 216, 236].

относится к классу индолмоноаминов. Синтез СТ СТ (5-гидроксиотриптамина) осуществляется из триптофана энтерохромаффинными клетками желудочно-кишечного тракта, а также клетками эпифиза, лимфоидных органов, костного мозга, ТК и базофилами крови [224]. Депонируется СТ в хромаффинных клетках, тромбоцитах и ТК. СТ обнаружен в желудочнокишечном тракте (ЖКТ), тромбоцитах, селезенке, печени, почках, легких, центральной нервной системе (ЦНС). Также этот нейромедиатор выявлен в клетках системы предшественников аминов, участвующих в процессах усвоения и декарбоксилирования (APUD-серии (amine precursor uptake decarboxylation)) [93, 96].

Ранее было принято выделять 3 вида серотониновых рецепторов:

М-рецепторы в ЦНС, Д-рецепторы в гладких мышцах и ЦНС, Т-рецепторы в окончаниях афферентных нервов [24]. В настоящее время в организме обнаружены 7 типов серотониновых рецепторов. 5-HT1 (5-гидрокситриптамин) в гладких мышцах сосудов и желудочно-кишечного тракта; 5-HT2 в тромбоцитах, гладких мышцах сосудов и бронхов; 5-HT3 и 5-HT4 в ЦНС, ЖКТ, периферической нервной системе; 5-HT5 и 5-HT6 в ЦНС и 5-HT7 в кровеносных сосудах, ЖКТ.

Некоторые ученные считают, что рецепторы 5-НТ2 идентичны Д-рецепторам СТ;

рецепторы 5-НТ3 соответствуют рецепторам СТ Т-типа; рецепторы 5-НТ4 сходны с М-серотониновыми рецепторами [119, 130, 144, 145, 153, 154, 222].

Так же, как и гистамин, СТ находится в виде двух фракций: свободной и связанной. Большая часть – связанная, находится в клетках в виде гранул, не исключается, что и в комплексе с аденозинтрифосфатом (АТФ). Возможно, этот комплекс представляет собой резерв, поскольку он не подвергается действию моноаминоксидазы (МАО) [205].

Существуют 2 пути инактивации СТ. Ферментный путь осуществляется с помощью МАО; неферментный происходит при поглощении СТ ТК, а также при соединении его с фосфолипидами и мукополисахаридами, в частности, с гепарином.

СТ подавляет иммунитет, угнетает первичный иммунный ответ, увеличивает число Т-супрессоров, подавляет обратный захват НА нервными окончаниями и тромбоцитами, является либератором гистамина, а также совместно с гистамином участвует в реакции гиперчувствительности немедленного типа и высвобождается при реакции антиген-антитело [59, 77, 123].

Известно, что СТ в низких концентрациях активирует супрессорную активность, увеличивая выработку IgM и IgG В-лимфоцитами, а также контролируя скорость пролиферации иммунокомпетентных клеток [127, 210].

Синтез КА происходит в клетках мозгового вещества надпочечников, а также в клетках нервной системы из тирозина путем образования 3,4дигидроксифенилаланина (ДОФА) [134]. Далее из ДОФА образуется дофамин, после чего – НА и адреналин [121, 228].

Как и СТ, КА инактивируются ферментными и неферметными путями [126].

Первый путь осуществляется метилированием с катехоламин-ометилтрансферазой (КОМТ), окислительным дезаминированием, хиноидным окислением, ацетилированием и деметилированием метаболитов. Второй – в результате связывания с фосфолипидами, белками, гликозаминогликанами, кислотными радикалами, нуклеотидами с помощью нейрального и экстарнейрального захвата.

Известно, что КА увеличивают число лимфоцитов, снижают их апоптоз, усиливают фагоцитарную активность макрофагов, стимулируют пролиферацию В-лимфоцитов [107, 124, 180]. С другой стороны, КА ингибируют пролиферацию и цитотоксичность CD4+ и CD8+ лимфоцитов in vitro, уменьшают процентное содержание NK-клеток в селезенке и периферической крови [191, 202].

1.3. Клеточный состав селезенки

На кафедре общей и клинической морфологии и судебной медицины ФГБОУ ВПО «Чувашский государственный университет имени И.Н. Ульянова»

был изучен клеточный состав селезенки крыс и мышей при помощи люминесцентных методов [21, 29, 82, 83]. Установлено, что наиболее реагирующими клетками селезенки в ответ как на иммунопозитивные, так и на иммунонегативные воздействия являются ГЛК. В селезенке крыс и мышей, по данным некоторых авторов, присутствуют ТК, которые также участвуют в иммунных реакциях [46, 69, 102].

По литературным данным, большая часть макрофагов, ответственных за механическую фильтрацию, находится в селезенке [105, 176, 213]. Известно, что при действии хронического стресса наблюдается редукция Т-клеточных компартментов и дегенерация как Т-клеточных, так и В-клеточных субкомпартментов белой пульпы селезенки крыс [55, 67]. Вместе с тем, до настоящего времени существуют разногласия в понимании происхождения и дифференцировки ГЛК, не определено функциональное значение макрофагов и ТК в селезенке, их взаимодействие с Т- и В-клетками селезенки, что связано с недостатком исследований лимфоидной архитектоники селезенки при иммунологических воздействиях, и затрудняет понимание закономерностей становления иммуномодуляционных процессов в 1-е сутки после ИУ и лазера.

ГЛК были впервые найдены П.А. Мотавкиным в оболочках головного мозга [64]. В настоящее время ГЛК выявлены в тимусе, селезенке, аппендиксе, костном мозге, коже, лимфатических узлах, плаценте, пульпе зуба, гипоталамусе [20, 21, 25, 34, 38, 51, 52, 61, 75]. В литературе ГЛК, находящиеся в периферической нервной системе, также обозначены как малые интенсивнофлуоресцирующие клетки (МИФ-клетки). Они были выявлены в симпатических и парасимпатических ганглиях и в отводящих нервных стволах [131].

Известна классификация, согласно которой, ГЛК делятся на симпатоадреналозависимые и парасимпатоадреналозависимые [50]. Предложено, что часть ГЛК является дендритными клетками Лангерганса [24, 81]. В костном мозге ГЛК совместно с ТК участвуют в автономной регуляции [4].

По данным литературы, ГЛК герминативного центра селезенки играют роль аминопродуцентов, а ГЛК красной пульпы селезенки – в большей степени аминопоглотителей [24, 29]. Среди ГЛК присутствуют дендритные клетки, макрофаги, клетки диффузной нейроэндокринной системы (ДЭС), однако этиология части клеток остается неизвестной [51].

На сегодняшний день не существует единой классификации клеток, содержащих биогенные амины. Яглов В.В. предложил отнести клетки, с одной стороны поглощающие, выделяющие и инактивирующие биогенные амины, а с другой – продуцирующие олигопептидные нейрогормоны, к APUD-серии [94]. В свою очередь, APUD-серия является составной частью ДЭС. Клетки этой системы обладают способностью к специфической флуоресценции после обработки параформальдегидом, аутолюминесценции, наличием скрытой метахромазии [39].

APUD-серия включает 2 группы клеток. Первая группа содержит эндокринные клетки кишечника, кожи, почек, легких. Вторая группа клеток включает клетки волосяных луковиц, меланоциты, клетки Меркеля, фоторецепторные клетки сетчатки, половые клетки. Клетки второй группы относят к паранейронам [95].

В структурно-функциональном отношении клетки ДЭС делятся на клетки открытого и закрытого типа. Клетки открытого типа находятся в эпителии слизистых оболочек полых органов, их апикальные концы контактируют с содержимым соответствующих органов. На апикальных концах расположены микроворсинки, в мембране которых имеются рецепторные белки. Воспринимая информацию из внешней среды, клетки открытого типа реагируют выделением гормонов. Клетки закрытого типа не сообщаются с внешней средой. Они принимают информацию из внутренней среды организма и также реагируют выделением гормонов [97].

ТК являются частью ДЭС и источником многих биологических активных соединений [14, 100]. Впервые тинкториальные свойства ТК (мастоцитов, тканевых базофилов) изучал А.А. Максимов [14]. Немногочисленные ТК селезенки в норме были обнаружены в трабекулах и капсуле [21, 92].

В настоящее время считается, что источник развития ТК – плюрипотентная гемопоэтическая стволовая клетка красного костного мозга – CD34+ [14]. У мышей развитие ТК происходит под влиянием интерлейкина (ИЛ)-3, которое осуществляется в присутствии c-kit-лиганда фактор стволовых клеток (SCF: factor stem cell), связывающегося с соответствующим рецептором c-kit (рецептором ранних про-В-клеток, тирозинкиназным рецептором CD117) и также под влиянием фибробластов. Вполне возможно, что ИУ способствует проникновению ТК в область сосудов микроциркуляторного русла [235]. Считается, что предшественники ТК, как и лейкоциты крови, вступают в адгезивные взаимодействия с эндотелиоцитами сосудов микроциркуляторного русла [14]. На первых этапах адгезии происходит «качение» по поверхности венул эндотелия посредством Р-селектина.

Известно, что в норме в кровотоке присутствуют только предшественники ТК. В тканях происходит дифференцировка и пролиферация предшественников ТК. По мере созревания предшественников ТК и старения организма способность к делению ТК снижается. В результате дифференцировки ТК изменяются тинкториальные свойства гранул ТК: они накапливают гепарин и гистамин, что выражается в изменении их окраски.

У мышей ТК делятся на 2 подтипа: типичные ТК соединительной ткани и атипичные ТК слизистых оболочек. Они отличаются по размерам: типичные ТК – 10-20 мкм, а атипичные ТК – 5-10 мкм. В гранулах типичных ТК основным протеогликанам является гепарин, а в гранулах атипичных ТК – хондритинсульфат. В типичных ТК выше концентрация биогенных аминов:

гистамина в расчете на одну ТК в 10-20 раз, а СТ – в 2-4 раза, чем в атипичных ТК. Факторы, продуцируемые Т-лимфоцитами, влияют на развитие атипичных ТК, тогда как типичные ТК мало зависимы от этих факторов. Из литературы известно, что типичные ТК и атипичные ТК представляют собой крайние фенотипы ТК, идентификация и типирование их затруднены, поскольку они имеют спектр промежуточных вариантов и в различных экспериментальных и патологических условиях способны обратимо менять свои фенотипические свойства [14].

При окраске полихромным толуидиновым синим по А. Унна ТК классифицируются по 2 критериям. По состоянию тканевых мукополисахаридов [23, 103]:

1) ортохромные виды с голубой окраской гранул в цитоплазме и несульфатированным незрелым гепарином в них;

2) 1-метахроматичные виды с фиолетовым окрашиванием гранул в цитоплазме и с более сульфатированным незрелым гепарином;

3) 2-метахроматичные виды, имеющие фиолетовую окраску гранул с красноватым оттенком в цитоплазме за счет созревания сульфатированного гепарина;

4) 3-метахроматичные виды с красно-фиолетовой окраской гранул в цитоплазме и почти зрелым гепарином;

5) -метахроматичные виды с пурпурной окраской и с сульфатированным зрелым гепарином в гранулах.

По степени дегрануляции [30, 47]:

1) Т0-формы – гранулы плотно расположены в цитоплазме, ядро визуально не определяется;

2) Т1-формы – гранулы располагаются внутри клетки, за пределы цитоплазматической мембраны не выходят, ядро хорошо просматривается;

3) Т2-формы – гранулы частично выходят за пределы неповрежденной цитоплазматической мембраны;

4) Т3-формы – полностью дегранулированные виды с разорванной цитоплазматической мембраной.

На сегодняшний день, связь между фенотипическими особенностями ТК и биологическими процессами, в которых они участвуют, раскрыты не до конца [148].

Макрофаги принимают активное участие в неспецифической защите организма от патогенных микроорганизмов [213]. В 1969 г. была сформулирована концепция «система мононуклеарных фагоцитов» [85]. Эта система объединила в себя монобласты, промоноциты, моноциты и тканевые макрофаги. Моноциты дифференцируются в тканевые макрофаги, и лишь менее 5% тканевых макрофагов способны к однократному делению. Тканевые макрофаги являются долгоживущими клетками.

Часть макрофагов селезенки имеет типичную структуру и функцию. Другие являются дендритными клетками макрофагальной природы и имеют костномозговое происхождение, обладают антигенпредставляющей функцией [45]. Типичные макрофаги располагаются или внутри синусов, или снаружи, среди адвентициальных или паренхиматозных клеток [143]. Они имеют неровную поверхность с многочисленными гребнями. Содержат много лизосом. В крупных лизосомах встречаются агрегаты ферритина, миелиновые фигуры, остатки поглощенных клеток [5, 169]. Для макрофагов селезенки мышей характерно то, что они окружены эритробластами [170]. В лимфатических узелках селезенки, богатых В-лимфоцитами, преобладают многоотростчатые ретикулярные клетки.

Эти клетки не фагоцитируют, имеют тонкий ободок цитоплазмы и соединены друг с другом десмосомами, они относятся к ИДК. Предполагается, что ИДК влияют на дифференцировку Т-лимфоцитов.

В качестве маркера макрофагов используется гликопротеид из семейства гликопротеинов лизосомальной мембраны (LAMP: lysosomal-associated membrane protein) – CD68+. Он оказывает влияние на фагоцитарную активность тканевых макрофагов, участвует во внутриклеточном лизосомальном метаболизме и во внеклеточных взаимодействиях.

В селезенке содержится около 35% Т-лимфоцитов и 65% В-лимфоцитов [56]. В- и Т-лимфоциты отличаются между собой многими параметрами, основной из которых способ распознавания антигена. В-лимфоцит распознает антиген в натуральном виде, тогда как Т-лимфоцит распознает низкомолекулярные пептиды, образованные в результате расщепления антигена и представляемые антигенпрезентирующими клетками (АПК) [7, 45].

Зрелые Т-лимфоциты имеют на своей поверхности молекулу CD3+, они осуществляют реакции клеточного иммунитета и иммунологический надзор за антигенным гомеостазом в организме, они делятся на подклассы в зависимости от иммунологических маркеров и выполняемых функций. В Т-зависимой зоне селезенки выявлено 75% CD4+-клеток, 25% – CD8+ [87]. Известно, что в норме в герминативном центре селезенки отсутствуют цитотоксические Т-лимфоциты (CD8+), они накапливаются в тяжах красной пульпы и в маргинальной зоне [155].

CD4+ лимфоциты дифференцируются под контролем АПК, который в случае инвазии микробными агентами передает информацию Т-лимфоцитам.

Если происходит распознавание ДНК и/или РНК (рибонуклеиновой кислотой), компонента бактерии, дендритные клетки стимулируют дифференцировку Т-хелперов 1 ((Th: Т helper)-1 – преимущественно способствуют развитию клеточного иммунного ответа), активируя цитотоксические лимфоциты; основной выделяемый цитокин – интерферон (ИФН)-; в случае распознавания грибковой инфекции, глистных инвазий, холерного токсина, дендритные клетки стимулируют Th-2 ответ (активируют В-лимфоциты, способствуя развитию гуморального иммунного ответа; продуцируют ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-13). [159].

Принято считать, что ИЛ-12 выступает как важнейший фактор, с помощью которого АПК осуществляет дифференцировку Т-клеток, тогда как дифференцировка Th-2 клеток происходит без подобных факторов, или таким фактором является ИЛ-4, а при отсутствии ИЛ-4 – паразитарные факторы [156, 187].

26

1.4. Морфологическое строение селезенки при иммуномодулирующихвоздействиях

Иммуномодулирующая терапия включает в себя специфические и/или неспецифические методы воздействия, направленные на устранение иммунных нарушений с использованием химических, физических и биологических методов [40]. Особый интерес представляет изучение событий, происходящих в исполнительных органах иммуногенеза при иммуномодулирующей терапии. В работах, посвященных исследованию морфологического строения и нейромедиаторного обеспечения селезенки, отсутствуют данные об иммуногистохимической характеристике лимфоцитов селезенки и их временной соподчиненности в первые сутки после иммуномодулирующих воздействий, в частности, после ИУ [29].

Установлено, что введение полиоксидония оказывает иммуномодулирующее действие, которое проявляется в увеличении количества лимфоидных узелков с герминативными центрами в селезенке мышей [89].

Бальнеологические факторы (пресные ванны) изменяют цитоархитектонику органа у крыс: количество клеток на единице площади среза в герминативных центрах – уменьшается, а в ПАЛМ – возрастает. В пульпарных тяжах уменьшается количество разрушающихся клеток. Основное влияние пресных ванн на паренхиму селезенки заключается в равномерном увеличении числа плазмоцитов на площади всего органа. Это свидетельствует об усилении гуморального иммунитета [18].

При воздействии лечебной грязи у белых крыс через 1 и 7 суток после эксперимента происходит увеличение малодифференцированных элементов в Т-зависимых зонах селезенки, которое сочетается с накоплением малых форм лимфоцитов в селезенке. Через 14 суток после грязевых аппликаций происходит увеличение площади В-зависимой зоны селезенки с развитием реакции плазматических клеток, возрастанием содержания макрофагов, ТК [73].

Наиболее реагирующими клетками в селезенке в первые 4-е ч после ИУ являются ГЛК около герминативного центра лимфоидного узелка селезенки. Так, через 1 ч после ИУ содержание КА и СТ в ГЛК около герминативного центра лимфоидного узелка резко возрастает, активируется адренергическая иннервация лимфоидного узелка, усиливается бласттрансформация лимфоцитов [29].

Действие КВЧ-терапии на интактных крыс приводит к достоверному увеличению содержания КА и СТ в клеточных компартментах селезенки (кроме лимфоцитов Т-зоны) [9].

Выявлено, что при стимуляции иммунной системы материнского организма митогеном в ранние сроки беременности длительно повышается пролиферативный потенциал клеток селезенки потомства мышей [99].

2. Иммуномодулирующее влияние акупунктуры

Под иммуномодуляцией понимают направленное действие на отдельные звенья иммунной системы с целью стимуляции или подавления их деятельности [68]. К эффективным иммуномодуляторам относятся: биологически активные вещества типа ИЛ и лимфокинов; препараты из ткани тимуса и костного мозга;

фармакологические синтетические средства (левамизол, нуклеинат натрия, тимоген, иммунофан, синтетические аналоги нуклеозидов); нестероидные противовоспалительные средства; препараты растительного происхождения и многие другие [86]. Такие препараты, как правило, обладают малым терапевтическим эффектом и нередко имеют выраженные отрицательные побочные действия. В таких условиях разработка немедикаментозных методов лечения иммунопатологических состояний, в том числе методами иглорефлексотерапии, приобретает огромное значение. Наиболее часто и успешно акупунктура применяется при заболеваниях позвоночника и суставов, сердечнососудистой системы, нервной системы, ЖКТ, эндокринной системы, иммунной системы, зрительной системы, мочеполовой системы и др. [1, 2, 6, 35, 43, 60, 78, 112, 113, 162, 171, 234].

Исследования отечественных и иностранных ученых подтвердили иммуномодулирующее влияние акупунктуры [16, 84, 116]. Механизм действия иглорефлексотерапии на иммуногенез многообразен и может быть выражен в трех категориях: местной, нейрональной и нейрогуморальной иммуномодуляции.

В коже в области ТА существует Местная иммуномодуляция.

увеличенное число капилляров, симпатических нервных волокон, нервных окончаний по сравнению с интактными участками кожи. В точках акупунктуры и участками кожи рядом с ними наблюдается разность электрических потенциалов [174]. Во время пункции разница температур и электропроводимости иглы порождают низкоинтенсивный гальванический ток, выступающий как микроисточник энергии для возбуждения свободных нервных окончаний. Даже после снятия игл потенциал электрического поля продолжает выступать раздражителем в течение 72 ч в связи с высокой концентрацией ионов К+ в месте травмы и цепной реакцией [111].

Акупунктурные точки разделены на типы в зависимости от их структуры:

одни связаны с мышечными точками, которые производят максимальное сокращение мышц; другие – с билатеральными поверхностными нервами;

некоторые являются проекционными точками глубоких и поверхностных нервных сплетений; другие локализованы в мышечно-сухожильных переходах [172]. Гистологические отличия в рецепторных и эффекторных типах ТА могут выражаться в различных результатах лечения и могут быть полезны в определении показаний к данной методике [238]. Кроме того, специфические точки имеют характерные результаты воздействия, соответственно расположению, так точка LI 4 изменяет кишечную перистальтику, а точка SJ 6 применяется при лечении заболеваний уха [53,111].

Акупунктурные точки – это плотные локусы для ноциоцепторов (болевых рецепторов), рецепторов комплекса Гольджи, телец Мейснера, луковиц Краузе, гломусных телец, гладких мышц и нервно-мышечных соединительных рецепторов. Микротравмы, возникающие при пункции, инициируют выделение гистамина, брадикинина, гепарина, адренокортикотропного гормона (АКТГ), субстанции P, СТ и протеаз, которые инициируют местное воспаление. Кроме того, в этом принимают участие: фактор Хагемана (Фактор-XII) свертывающей системы, плазминоген, кинины и система активации комплемента, простагландины. Секретируемые вещества вызывают расширение сосудов, повышение проницаемости и местные реакции [172]. После расширения кровеносных сосудов, местного отека, миграции лейкоцитов и ТК, секреции цитокинов (фактор некроза опухоли (ФНО-), ИЛ-6, ИЛ-1)) происходит стимулирование выделения гипоталамусом кортикотропного рилизинг-гормона (КРГ) [53].

Секреция КРГ из гипоталамуса вызывает высвобождение АКТГ из гипофиза для стимуляции секреции глюкокортикостероидов, чтобы регулировать процессы воспаления и заживления. Благодаря КРГ лимфоциты секретируют кортикостероиды и противовоспалительные цитокины, такие как ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛтрансформирующий ростовой фактор- [115]. Активированные макрофаги, эндотелиальные клетки, фибробласты и лимфоциты выделяют колониестимулирующие факторы (КСФ), такие как гранулоцитарномакрофагальный КСФ, гранулоцитарный КСФ, КСФ макрофагов, ФНО и ИЛ-1.



Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |

Похожие работы:

«Хохлова Светлана Викторовна ИНДИВИДУАЛИЗАЦИЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ РАКОМ ЯИЧНИКОВ 14.01.12-онкология ДИССЕРТАЦИЯ На соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: Доктор медицинских наук, профессор Горбунова В.А Москва 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ Введение Глава 1. Обзор литературы 1.1. Общая характеристика рака яичников 1.1.1. Молекулярно-биологические и...»

«Бабкина Ирина Борисовна ИХТИОФАУНА БАССЕЙНА НИЖНЕЙ ТОМИ: ДИНАМИКА И СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ 03.02.04 – Зоология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель доктор биологических наук, профессор Романов Владимир Иванович Томск – 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ Введение.. Глава 1....»

«СЛАДКОВА Евгения Анатольевна ЦИТОАРХИТЕКТОНИКА И СВОЙСТВА ПОВЕРХНОСТИ ЛИМФОЦИТОВ У ЗДОРОВЫХ ЛЮДЕЙ (ДОНОРОВ) И ПРИ РАЗВИТИИИ ЛИМФОПРОЛИФЕРАТИВНЫХ ПРОЦЕССОВ НА ОСНОВЕ АТОМНО-СИЛОВОЙ МИКРОСКОПИИ 03.03.04 – клеточная биология, цитология, гистология Диссертация на соискание ученой степени кандидата...»

«Брит Владислав Иванович «Эффективность методов вакцинации против ньюкаслской болезни в промышленном птицеводстве» Специальность: 06.02.02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидат ветеринарных наук Научный руководитель:...»

«Цвиркун Ольга Валентиновна ЭПИДЕМИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС КОРИ В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКИ. 14.02.02 – эпидемиология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: заслуженный деятель науки РФ, лауреат Государственной премии СССР профессор, доктор медицинских наук Ющенко Галина Васильевна Москва – 20 Содержание...»

«Степина Елена Владимировна ЭКОЛОГО-ФЛОРИСТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СТЕПНОЙ РАСТИТЕЛЬНОСТИ ЮГО-ЗАПАДНЫХ РАЙОНОВ САРАТОВСКОЙ ОБЛАСТИ 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«ГЕНС ГЕЛЕНА ПЕТРОВНА Роль молекулярно-биологических маркеров и многофункционального белка YB-1 в лечении и прогнозе больных раком молочной железы 14.01.12 онкология Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант:...»

«Мухаммед Тауфик Ахмед Каид ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕНОТИПОВ С ХОРОШИМ КАЧЕСТВОМ КЛЕЙКОВИНЫ, ОТОБРАННЫХ ИЗ ГИБРИДНЫХ ПОПУЛЯЦИЙ АЛЛОЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ ЯРОВОЙ ПШЕНИЦЫ МЯГКОЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ДНК-МАРКЕРОВ Специальность 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Научный...»

«КАДЕРМАС ИРИНА ГЕННАДЬЕВНА ФОРМИРОВАНИЕ ФОТОСИНТЕТИЧЕСКОГО И СИМБИОТИЧЕСКОГО АППАРАТОВ РАСТЕНИЙ И ИХ ВКЛАД В ПОВЫШЕНИЕ ПРОДУКТИВНОСТИ АГРОЦЕНОЗОВ ГОРОХА ПОСЕВНОГО (Pisum sativum L.) 03.02.08 – экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор с. – х. наук,...»

«Смешливая Наталья Владимировна ЭКОЛОГО-ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ СИГОВЫХ РЫБ ОБЬ-ИРТЫШСКОГО БАССЕЙНА 03.02.06 Ихтиология Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель кандидат биологических наук, доцент Семенченко С.М. Тюмень – 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ...»

«МУСТАФАЕВ РОВШАН ДЖАЛАЛ ОГЛЫ «СОВРЕМЕННЫЕ ЛАЗЕРНЫЕ ТЕХНОЛОГИИ В ЛЕЧЕНИИ ПЕРИТОНИТА» (Экспериментально-клиническое исследование) Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук по специальности–14.01.17 хирургия Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор Гейниц А.В. Москва 2014 СПИСОК ПРИНЯТЫХ В РАБОТЕ...»

«Шестакова Вера Владимировна МОРФО-АНАТОМИЧЕСКИЕ И ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКИЕ КРИТЕРИИ СЕЛЕКЦИОННОЙ ОЦЕНКИ УСТОЙЧИВОСТИ ФОРМ РОДА CERASUS MILL. К КОККОМИКОЗУ Специальность: 06.01.05. – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений Диссертация на соискание учёной степени кандидата сельскохозяйственных наук Научный...»

«Труш Роман Викторович ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СКАЙ-ФОРСА И ЕГО ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИ КОЛИБАКТЕРИОЗЕ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ 06.02.03 – ветеринарная фармакология с токсикологией Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Научный руководитель Горшков Григорий Иванович заслуженный деятель науки РФ, доктор биологических наук, профессор Белгород – п. Майский 2015 г. СОДЕРЖАНИЕ...»

«ШИТОВ АЛЕКСАНДР ВИКТОРОВИЧ ВЛИЯНИЕ СЕЙСМИЧНОСТИ И СОПУТСТВУЮЩИХ ГЕОЛОГИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ НА АБИОТИЧЕСКИЕ И БИОТИЧЕСКИЕ КОМПОНЕНТЫ ЭКОСИСТЕМ (НА ПРИМЕРЕ ЧУЙСКОГО ЗЕМЛЕТРЯСЕНИЯ И ЕГО АФТЕРШОКОВ) 25.00.36 – Геоэкология (науки о Земле) Диссертация на соискание ученой степени доктора геолого-минералогических наук Горно-Алтайск 201...»

«ТУРТУЕВА ТАТЬЯНА АНАТОЛЬЕВНА РАЗРАБОТКА СБОРА НЕЙРОПРОТЕКТИВНОГО И ЭКСТРАКТА СУХОГО НА ЕГО ОСНОВЕ 14.04.02 фармацевтическая химия, фармакогнозия ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук Научный руководитель: доктор фармацевтических наук, профессор НИКОЛАЕВА ГАЛИНА ГРИГОРЬЕВНА Улан-Удэ – 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ...»

«Гуськов Валентин Юрьевич МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ И ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ БУРОГО МЕДВЕДЯ URSUS ARCTOS LINNAEUS, 1758 ДАЛЬНЕГО ВОСТОКА РОССИИ 03.02.04 – зоология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель доктор биологических наук, с.н.с. А.П. Крюков Владивосток – 2015 Оглавление Введение Глава 1. Обзор...»

«ПОЕДИНОК НАТАЛЬЯ ЛЕОНИДОВНА УДК 602.3:582.282/284:57.086.83]:[681.7.069.24+577.34 БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ИНТЕНСИФИКАЦИИ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ СЪЕДОБНЫХ И ЛЕКАРСТВЕННЫХ МАКРОМИЦЕТОВ С ПОМОЩЬЮ СВЕТА НИЗКОЙ ИНТЕНСИВНОСТИ 03.00.20 – биотехнология Диссертация на соискание научной степени доктора биологических наук Научный консультант Дудка Ирина...»

«Ульянова Онега Владимировна МЕТОДОЛОГИЯ ПОВЫШЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ВАКЦИН НА МОДЕЛИ ВАКЦИННЫХ ШТАММОВ BRUCELLA ABORTUS 19 BA, FRANCISELLA TULARENSIS 15 НИИЭГ, YERSINIA PESTIS EV НИИЭГ 03.02.03 – микробиология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант:...»

«БОЛОТОВ ВЛАДИМИР ПЕТРОВИЧ ОЦЕНКА СОДЕРЖАНИЯ И МИГРАЦИЯ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ В ЭКОСИСТЕМАХ ВОЛГОГРАДСКОГО ВОДОХРАНИЛИЩА Специальность: 03.02.08. Экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук,...»

«Шемякина Анна Викторовна БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ ВЕЩЕСТВА ДАЛЬНЕВОСТОЧНЫХ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ РОДА BETULA L. 03.02.14 – Биологические ресурсы Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Колесникова Р.Д. Хабаровск – 20 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ.. ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ПО ТЕМЕ ИССЛЕДОВАНИЙ. 1.1 Общие...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.