WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:   || 2 |

«И КРОЛИКОВ И ИХ КОРРЕКЦИЯ МОДИФИЦИРОВАННЫМ ФИТОБАКТЕРИАЛЬНЫМ СРЕДСТВОМ ...»

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

Максарова Дарима Дамбаевна

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА

ПОВРЕЖДЕНИЙ ЖЕЛУДКА,ПЕЧЕНИ БЕЛЫХ КРЫС

И КРОЛИКОВ И ИХ КОРРЕКЦИЯ МОДИФИЦИРОВАННЫМ

ФИТОБАКТЕРИАЛЬНЫМ СРЕДСТВОМ

06.02.01 - диагностика болезней и терапия животных,

патология, онкология и морфология животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук

Благовещенск – 2012

Работа выполнена в Федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Бурятский государственный университет»

Научный консультант: доктор биологических наук, профессор Тармакова Светлана Степановна

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, старший научный сотрудник Гамидов Микаил Гамид оглы доктор биологических наук, профессор Овчаренко Нина Дмитриевна доктор биологических наук, профессор Абидуева Елена Юрьевна

Ведущая организация: ФГБОУ ВПО «Красноярский государственный аграрный университет»

Защита состоится ____________2012 года в _____ часов на заседании диссертационного совета Д 220.027.02 в ФГБОУ ВПО «Дальневосточный государственный аграрный университет» по адресу: 675005, Амурская область, г. Благовещенск, ул. Политехническая,86, факс: (4162)526280.

E-mail: dalgau@tsl.ru.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФБГОУ ВПО «Дальневосточный государственный аграрный университет».

Автореферат разослан «___» _____________________ 2012г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук Самусенко О.Л.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Одной из важнейших проблем медицинской науки и практики здравоохранения, ветеринарной медицины является профилактика и лечение заболеваний органов пищеварительной системы, имеющих большой удельный вес среди заболеваний внутренних органов. Язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки встречается у 3-13 % лиц с заболеваниями органов пищеварения и поражает людей наиболее активного трудоспособного возраста, обусловливая временную, а иногда и стойкую утрату трудоспособности. Язвенная болезнь характеризуется образованием язвы желудка или двенадцатиперстной кишки вследствие расстройства общих и местных механизмов нервной и гуморальной регуляции основных функций гастродуоденальной системы (Баранская Е.К., 2000; Лапина Т.Л. и др., 2001;Ивашкин В.Т. и др., 2002; Титов С.Е., 2011).

В настоящее время определены основные и предрасполагающие факторы заболевания. К основным факторам относятся: 1) нарушения гуморальных и нейрогуморальных механизмов, регулирующих пищеварение и регенерацию тканей; 2) расстройства механизмов пищеварения; 3) изменения структуры слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки.

Несмотря на значительные успехи в изучении патогенеза язвенной болезни желудка, разработки новых лекарственных средств для ее профилактики и лечения, уровень заболеваемости среди населения остается достаточно высоким.

По данным ВОЗ заболевания печени также занимают существенное место в мире среди причин нетрудоспособности и смертности населения. Так, гепатит В является самой распространенной вирусной инфекцией, в мире около 2000 млн. инфицированных и 350 млн. хронических носителей. Многообразными стали токсические и аллергические повреждения органов гепатобилиарной системы, как результат попадания с пищей и водой различных ксенобиотиков, включая фармакологические препараты. Это обусловливает большое социальное и медицинское значение создания и применения новых лекарственных средств для профилактики и лечения заболеваний органов пищеварительной системы, среди которых особого внимания заслуживают лекарственные средства природного происхождения, обладающие антиульцерогенным и гепатозащитным действием (Убашеев И.О., 1997;

Тармакова С.С., 1999; Амосова Е.Н. и др., 1998; Кухаренко Н.С., 2003;Николаев С.М., 2003; Крылова С.Г., 2005; Шевченко В.П., 2005; Панин А.Н., 2006;

Шендеров Б.А., 2005; Хавкин А.И., 2006; Овод А.С., 2007; Яковенко О.П., 2008;

Скрыпник И.Н., 2009; Жаркова М.С. и др., 2010; Ушкалова Е.А., 2010;

Кодратьева Е.В., 2011).

Известно, что в терапии заболеваний органов пищеварительной системы определенное место занимают лекарственные средства растительного происхождения, холосас, сок подорожника, легалон, силибор, карсил, которые являются биогенетически сложившимися комплексами и обладают большим сродством к живым системам, но при их использовании не учитывается состояние микробиоценоза кишечника, которое также претерпевает патологические изменения.

Дисбиотические состояния, связанные с микроэкологическими изменениями кишечника, в настоящее время стали интересовать практически всех клиницистов, а пробиотические препараты, корригирующие нарушенную нормальную микрофлору, широко используются при комплексной терапии как энтеральных, так и парентеральных инфекционных процессов (Бондаренко В.М. и др., 2005). Дисбактериозы кишечника различной этиологии остаются важной медикосоциальной и экологической проблемой и выявляются практически у всех больных с гастроэнтерологической патологией. Так, 90% россиян страдают заболеваниями органов системы пищеварения, которые характеризуются хроническим и рецидивирующим течением. Известно, что желудочно-кишечная экосистема человека и животных рассматривается как одна из важных систем защиты организма. В физиологических условиях микрофлора, главным образом, анаэробные представители индигенной микрофлоры, обеспечивают колонизационную резистентность пищеварительного тракта, антитоксическое действие, поддержание оптимального уровня метаболических и ферментативных процессов, иммунный статус, антимутагенную и антиканцерогенную активности (Шендеров, 1998).

Природные, техногенные и другие экстремальные факторы негативно воздействуют на организм, его микрофлору и приводят к синдрому нарушений микроэкологии пищеварительного тракта – дисбактериозам, что ведет к иммунодепрессии, изменению проницаемости кишечной стенки иизбыточному бактериальному росту,что в конечном итоге приводит к бактериальной транслокации – пассажу микроорганизмов и их продуктов из кишечника во внекишечные среды (Folwaczny C., 2000; Cirera I.etal., 2001; Воробьев А.А., 2004; BellotP. etal., 2007).

Таким образом, актуальным является создание комплексного средства, которое положительно влияло бы на функциональное состояние органов пищеварительной системы, а также нормализовало нарушения микробиоценоза кишечника, что позволит расширить ассортимент средств.

Цель исследования. Обосновать новые подходы к коррекции морфофункциональных повреждений желудка, печени белых крыс и кроликов различной этиологии и оценить терапевтическую эффективность сконструированного модифицированного фитобактериального средства, включающего экстракт плодов шиповника, чистую культуру бифидобактерий на молочной основе и природный цеолит Холинского месторождения, при лечении заболеваний желудка и печени, и использование его в целях профилактики.

В соответствии с целью работы были поставлены следующие задачи:

1. Выявить действие модифицированного фитобактериального средствапри морфофункциональных повреждениях стенки желудка белых крыс и кроликов на различных экспериментальных повреждениях желудка;

2. Исследовать влияние модифицированного фитобактериального средства на биоэлектрическую активность желудка кроликов на модели желчного гастрита;

3. Оценить действие модифицированного фитобактериального средства при морфофункциональных повреждениях печени белых крыс на моделях острого и хронического токсических гепатитов;

4. Выявить влияние комплексного действия модифированного фитобактериального средства на микроэкологические нарушения в толстом отделе кишечника при токсических поражениях печени белых крыс.

Научная новизна. Экспериментально обоснован новый подход к терапии язвенных повреждений желудка и токсических гепатитов. Дана оценка морфофункционального состояния желудка белых крыс и кроликов при его повреждении на фоне стимуляции восстановления модифицированным фитобактериальным средством. Установлено, что испытуемое модифицированное фитобактериальное средство способствует более ускоренному, по сравнению с контролем, восстановлению морфофункционального состояния желудка крыс и кроликов.

Наряду с этим, в работе выявлено, что патологический процесс в стенке желудка у кроликов (при желчном гастрите) сопровождается угнетением биоэлектрической активности желудка. Введение подопытным животным модифицированного фитобактериального средства оказывало стимулирующее влияние на восстановление электрической активности желудка в процессе заживления язвенного дефекта в стенке органа.

У испытуемых животных установлена способность модифицированного фитобактериального средства ингибировать свободно радикальное окисление липидов и стабилизировать биологические мембраны, благодаря чему обеспечивается ускоренное восстановление структуры и функций желудка.

При остром и хроническом токсическом повреждениях печени гепатотропным ядом установлена способность модифицированного фитобактериального средства улучшать морфофункциональное состояние печени, которое характеризуется торможением перекисного окисления липидов в биологических мембранах гепатоцитов, снижением проявлений синдромов воспаления печени. Выявлены особенности механизма действия исследуемого средства при токсических повреждениях печени.

Показана эффективность применения модифицированного фитобактериального средства в клинической практике с целью профилактики расстройств пищеварения у телят крупного рогатого скота до 1-месячного возраста.

Теоретическая и практическая ценность работы. Выполненная работа представляет значительный интерес в теоретическом и практическом аспектах.

В частности, выраженная терапевтическая эффективность модифицированного фитобактериального средства на моделях язвенных повреждений стенки желудка и при токсических повреждениях печени, предотвращает выраженные деструктивные изменения клеток, тканей и органов, в целом, за счет ингибирующего влияния модифицированного фитобактериального средства на перекисное окисление липидов мембран и стабилизацию последних. Это обусловило активацию нуклеинового обмена, полиплоидизацию, ускорение митоза, т.е. активацию клеточной и внутриклеточной регенерации. На основе молекулярно-биологического механизма представляется возможным объяснить стимуляцию регенераторных процессов при повреждениях желудка и печени, выявить некоторые аспекты противовоспалительного и стимулирующего регенерацию эффектов при воздействии модифицированным фитобактериальным средством.

Вышеперечисленные эффекты позволяют рекомендовать его для дальнейшего внедрения в медицинскую и ветеринарную практику.

В целом, полученные данные могут быть использованы и учтены не только в научно-исследовательской работе, гуманитарной и ветеринарной практике, но и в учебном процессе на лекциях и практических занятиях, при написании учебных и справочных пособий.

Внедрение результатов научных исследований.

На основании результатов научных исследований разработаны рекомендации в целях профилактики расстройств пищеварения телят до 1месячного возраста и молодняка крупного рогатого скота, которые внедрены в животноводческих хозяйствах Республики Бурятия.

После представления материалов экспериментальных исследований модифицированного фитобактериального средства в Фармокопейный и Фармакологический комитеты МЗ России, а также в Ветеринарный биологический фармакологический совет Департамента ветеринарии МСХиП РФ, испытуемое средство может быть рекомендовано для доклинических и клинических испытаний с целью получения готового лекарственного препарата.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Модифицированное фитибактериальное средство эффективно при морфофункциональных повреждениях желудка лабораторных животных (белых крыс и кроликов).

2. Модифицированное фитобактериальное средство эффективно при структурнофункциональных повреждениях печени белых крыс при остром и хроническом токсических гепатитах.

3. Введение модифицированного фитобактериального средства при остром токсическом повреждении печени, инициированном CCl4, улучшает микроэкологическое состояние толстого отдела кишечника белых крыс, которое проявляется в увеличении титра бифидо- и лактобактерий, снижении пула условнопатогенных микроорганизмов.

4. Модифицированное фитобактериальное средство эффективно в профилактических целях при расстройствах пищеварения у молодняка крупного рогатого скота.

Апробация работы. Основные материалы экспериментальных исследований доложены, обсуждены и одобрены на:IV Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва, 1997);Международной научно-практической конференции "Природные минералы на службе у человека" (Новосибирск, 1997); научно-практической конференции факультета ветеринарной медицины БГСХА им.В.Р. Филиппова (Улан-Удэ, 1997);Международной конференции ветеринарных морфологов «Актуальные вопросы видовой и возрастной морфологии животных и пути совершенствования преподавания морфологических дисциплин» (Улан-Удэ, 1998);Всероссийской конференции "Экологическая патология: вопросы биохимии, фармакологии, клиники" (Чита, 1997); научно-практической конференции (Казань, 1997); научно-практической конференции (Барнаул, 1998); научно-практической конференции БНЦ СО РАН (Улан-Удэ. 1998);

научно-практической конференции ВСГТУ (Улан-Удэ, 1998);V Международной научно-практической конференции «Проблемы охраны окружающей среды и рационального природопользования Прикаспия и сопредельных регионов» (Элиста, 2006);Международной научно-практической конференции «Роль физиологии в современном естествознании» (Чита, 2007);

Международной научной конференции «Нейрогуморальные механизмы регуляции органов пищеварительной системы в норме и при патологии»

(Томск, 2007); Международной научной конференции, посвященной 15-летию БГУ «Актуальные исследования Байкальской Азии» (Улан-Удэ, 2010);IX Международной научно-практической конференции «Проблемы охраны окружающей среды и рационального природопользования Прикаспия и сопредельных регионов» (Элиста, 2010); XI; XII Международных научнопрактических конференциях «Фундаментальные и прикладные исследования, разработка и применение высоких технологий в промышленности» (СанктПетербург, 2011); II; IIIМеждународных научно-практических конференциях «Высокие технологии, фундаментальные и прикладные исследования в физиологии и медицине» (Санкт-Петербург, 2011; 2012).

Публикации по теме диссертации. По теме диссертации опубликовано 35печатных работ. Из них 1 монография, 18 статей в журналах и материалах Международных конференций, рекомендуемых ВАК для публикаций материалов докторских диссертаций.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из следующих разделов: введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов исследования, списка использованной литературы и приложений. Работа изложена на 275 страницах компьютерного текста и иллюстрирована 35 таблицами, 45 микрофотографиями и 7 рисунками. Список литературы включает 446 источников, из них иностранных 123.

Материал и методы исследований

Экспериментальные исследования с целью изучения влияния модифицированного фитобактериального средства на морфофункциональные повреждения желудка, печени белых крыс и кроликов и оценка их терапевтической эффективности при лечении заболеваний желудка и печени проведены в научных лабораториях Бурятского государственного университета, Бурятской государственной сельскохозяйственной академии им.

В.Р. Филиппова, лаборатории биологически активных веществ Института общей и экспериментальной биологии СО РАН в период с 1995 по 2011 гг.

Экспериментальные исследования проводились на: половозрелых 60 белых мышах обоего пола, полученных из питомника РАМН «Столбовая»; 650 белых беспородных крысах обоего пола массой 180-220 г, полученных из питомника филиала №5 ГНЦ «Институт биофизики федерального управления «Медбиоэкстрем» при Минздраве России г. Ангарск; 50 беспородных кроликах обоего пола массой 3-4 кг; 8 собаках. Животные находились в стандартных условиях содержания вивария на обычном рационе кормления.

Экспериментальные исследования осуществляли в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приказ МЗ СССР №755 от 12.08.77 г.).

Штаммы бифидобактерий Bifidobacterium Bifidum 1 и Bifidobacterium longum В 379 Mполучены из МНИИЭМ им.Г.Н. Габричевского (Москва).

Эксперименты по активизации и культивированию бифидобактерий проводили на основе обезжиренного коровьего молока.

Сухой экстракт плодов шиповника Rosa(ГФ XI, ст. 38) получен водным экстрагированием с последующим высушиванием. Экстракт представлял собой легкорастворимый аморфный порошок коричневого цвета.

Цеолитсодержащая порода Холинского месторождения Бурятии по ТУ 2163представляла собой порошок серого цвета с размерами частиц 0,1-1,0 мм и содержанием клиноптилолита в среднем 55%.

Морфологию микроорганизмов содержимого толстого отдела кишечника и чистой культуры бифидобактерий B. Bifidum 1и B. longum В 379 M изучали с помощью фазово-контрастной микроскопии. Препараты для световой микроскопии готовили по стандартной методике, окрашивали по Граму и микрофотографировали.

Клинические исследования проведены на базе ФГУП учхоза «Байкал»

(Иволгинский район Республики Бурятия).

Для оценки морфофункционального состояния желудка и определения терапевтической эффективности модифицированного фитобактериального средства при повреждениях желудка были использованы общепринятые экспериментальные модели: аспириновогоповреждения СОЖ (300 мг/100 г массы peros в течение 7 дней 1 раз в сутки); атофанового – (300 мг/кг в 5 % растворе диметилсульфоксида (ДМСО), внутрибрюшинно, однократно); бутадионового– (300 мг/кг внутримышечно в виде 15 % взвеси на ацетоне, однократно);

резерпинового– (10 мг/кг в 5 % растворе ДМСО peros, однократно) (Барнаулов О.Д. и др., 1982); острой язвы по Shay (Shay Н. et al.,1945). Также применяли экспериментальную модель хронического повреждения желудка – гипосекреторный «рефлюкс-гастрит», вызванный интрагастральным введением медицинской желчи в объеме 10 мл/кг массы животного, 1 раз в сутки в течение 14 дней (Аруин Л.И. и др.,1976; Федотовских Н.Н. и др., 1987) и модель ацетатной язвы желудка по Okabe (Okabe S. etal., 1971).

Использование широкого набора экспериментальных моделей повреждений слизистой оболочки желудка (СОЖ) различными ульцерогенными агентами и факторами является обоснованным, поскольку позволяет более объективно оценить антиульцерогенную активность и очертить диапазон применения изучаемого модифицированного фитобактериального средства с учетом патогенетического варианта язвенной болезни гастродуоденальной зоны.

При аспириновом, атофановом, бутадионовом, резерпиновом повреждениях СОЖ производили морфометрию деструкций СОЖ и рассчитывали индекс Паулса.

Модифицированное фитобактериальное средство вводили peros в дозе мл/100 мг массы крысы. В качестве препарата сравнения использовали кверцетин в изоэффективной дозе 50 мг/кг массы 1 раз в сутки. Контрольная группа животных получала дистиллированную воду в эквиобъемном количестве.

При аспириновом повреждении СОЖ, рефлюкс-гастрите, острой язве по Shayи хронической язве по Окабэ определяли темп желудочной секреции, общую кислотность желудочного сока, содержание свободной соляной кислоты по методу Михаэлиса, исследовали ферментообразующую функцию желудка по В. Т.

Туголукову (Меньшиков и соавт., 1987).

Перекисное окисление липидов определяли по содержанию малонового диальдегида в гомогенате стенки желудка крыс по методу И.Д. Стальной (1977).

В условиях эксперимента «рефлюкс-гастрит» вызывали введением кроликаммедицинской желчи с помощью зонда в объеме 5 мл/кг массы 1 раз в сутки до кормления животных в течение 24 дней. Модифицированное фитобактериальное средство в дозе и препарат сравнения кверцетин вводили с помощью зонда в желудок кроликов спустя 2 часа после введения желчи. По аналогичной схеме животным контрольной группы вводили дистиллированную воду. Исследования проводили на 10 и 20 сутки от начала эксперимента. В гомогенате ткани желудка определяли содержание конечного продукта перекисного окисления липидов (ПОЛ)– малонового диальдегида (МДА).

Для оценки параметров желудочной секреции накладывали лигатуру напривратник желудка под наркозом (гексенал 1% в объеме 1 мл/кг массы) за часов до сбора желудочного сока. В желудочном соке определяли общую кислотность и свободную соляную кислоту общепринятым титрационным методом. После забора желудочного сока производили морфометрию деструкции слизистой оболочки желудка. Для каждого вида повреждений слизистой оболочки желудка рассчитывали "язвенный индекс" Паулса.

Кроме того, у кроликов с желчным гастритом дана электрофизиологическая оценка влияния модифицированного фитобактериального средства путем регистрации электрических потенциалов желудка. Биоэлектрические сигналы с исследуемого органа изучали на 7, 14 и 21 сутки с момента начала введения медицинской желчи и начала экспериментальной терапии. При анализе полученных ЭГГ определяли общий уровень биоэлектрической активности – ОУБА (усл.ед), частоту импульсов в минуту –ЧИ, среднюю величину амплитуды

– СВА (мВ) по С.М. Лисовской (1958).

Гистологическому исследованию подвергали материал, полученный из краев и дна язвы, переульцерозной зоны. Отобранный материал фиксировали в 10%-ом водном растворе нейтрального формалина. Приготовление гистопрепаратов осуществляли по общепринятой методике (Волкова О.В. и др., 1982), путем заливки материала в парафин. Полученные гистологические срезы окрашивали по ван Гизон, Нахласу, гемотоксилином и эозином.

Микрофотографирование гистологических препаратов проводили с использованием микроскопа «CarlZeiss».

Опыты по моделированию острого токсического гепатита проводили на белых беспородных крысах введением 50%-ного масляного раствора тетрахлорметана (CCl4) (чда, ГОСТ 20288-86)в объеме 0,4 мл/100 г массы крысы ежедневно в течение четырех дней (Левшин Б.И., 1973), который разводили ex tempore в стерильном оливковом масле в соотношении 1:1.

Хронический токсический гепатит у белых крыс моделировали подкожным введением 50%-ного масляного раствора CCl4 в объеме 0,2 мл/100 г массы животного два раза в неделю в течение 2-х месяцев.

Испытуемое модифицированное фитобактериальное средство вводили животным интрагастрально с 61 дня в объеме 1мл/100 г массы животного один раз в сутки. Материал для исследований отбирали сразу после начала введения CCl4, а также через 28 дней от начала введения модифицированного фитобактериального средства. Контрольная группа животных получала дистиллированную воду в эквиобъемном количестве.

Для оценки морфофункционального состояния печени при ее токсических повреждениях CCl4 были выбраны следующие методы исследования: определение интенсивности процессов перекисного окисления липидов – МДА в гомогенате ткани печени; сукцинатдегидрогеназы (СДГ) –в свежезамороженных срезах печени; патоморфологическое исследование печени.

Определение состава микрофлоры кишечника крыс, патоморфологические исследования печени проводили на 7, 14, 21-е сутки при моделировании острого токсического гепатита. Микробиологические исследования содержимого толстого отдела кишечника белых крыс проводили методом предельных разведений посевом на элективные питательные среды: бифидобактерии выявляли на среде Блаурокк, лактобактерии на среде МРС-4, клостридии на среде Вильсон-Блера, кишечную палочку на среде Эндо, Плоскирева, Левина, стафилококки на желточно-солевом агаре, грибы рода Candida на среде Сабуро, энтерококки на среде Калины с последующим изучением биохимических свойств и морфологической характеристики выделенных микроорганизмов.

Оценка безопасности природного цеолита проведена на беспородных лабораторных животных: мышах, крысах, собаках.

Острую токсичность природного цеолита оценивали в соответствии с руководящим нормативным документом РД-64-126-91по общепринятой методике Кербера. Класс токсичности природного цеолита определяли по классификации К.К. Сидорова (1973). Острую токсичность природного цеолитаизучали путем внутрибрюшинного введения, а также путем введения природного цеолита внутрижелудочно в водном растворе. Объем вводимой жидкости мышам не превышал 0,5 мл, для крыс – 2 мл.

При оценке LD50 цеолита были проведены серии опытов на 60 мышах с массой 18-20 г и 60 белых крысах с массой 160-180 г. Основные параметры острой токсичности препарата вычисляли при помощи статистического метода по Керберу.

Токсическое действие природного цеолита при длительном его введении было проверено согласно Правилам доклинической оценки безопасности фармакологических средств на 60 мышах с массой 18-25 г, 60 крысах с массой 160-210 г, 8 собаках с исходной массой 3-9 кг. Разным группам каждого вида животных препарат вводили в установленных трех дозах: 1/10, 1/8 и 1/6 LD50.

Животным природный цеолит давали с кормом в дозе 1800, 2300 и 3000мг/кг массы в течение 6 месяцев. Через 1,3 и 6 месяцев с начала опыта исследовали весовые показатели внутренних органов, биохимические и морфологические показатели крови.

Изучение возможных эмбриотоксического и тератогенного свойств природного цеолита проводили на 20-дневных плодах, полученных от половозрелых самок белых крыс. Критериями повреждающего действия природного цеолита во время беременности служили: гибель эмбрионов, аномалии развития плодов. Самок вскрывали на 20-й день беременности, плоды взвешивали, измеряли их кранио-каудальные размеры по методике А.П.Дыбана (1974).

Статистическая обработка полученных экспериментальных и клинических данных проводилась методами вариационной статистики с использованием критериев Стьюдента (В.К. Кузнецов, 1978). Различия между средними величинами считали статистически значимыми при Р0,05. Компьютерную обработку экспериментальных данных проводили с использованием программ «MicrosoftOfficeExcel 7.0».

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Характеристика модифицированного фитобактериального средства Модифицированное фитобактериальное средство готовили на стерильном обезжиренном коровьем молоке с использованием активизированной чистой культуры бифидобактерий шт.B. longum B 379 M, сухого экстракта плодов шиповника Rosa(ГФ XI, ст.38)(в экстракте из плодов шиповника аскорбиновой кислоты не менее 0,2%) и природного цеолита Холинского месторождения (клиноптилолит) фракцией 0,1-1,0 мм (ТУ 2163-002-12763074-97). Содержание клеток бифидобактерий в готовом средстве 8-9 lg КОЕ/см3.

При исследовании возможности культивирования бифидобактерий на молочной основе с экстрактом плодов шиповника и природным цеолитом выявлено ускорение роста бифидобактерий с повышением их кислотообразующей способности.

Морфология клеток бифидобактерий в модифицированном фитобактериальном средстве сохраняла характерную для них бифуркацию (рис.

1.).

Рис.1 – Бифидобактерии шт. В. longum B 379 M, выращенные на средеBlaurock. Окраска по Граму. Увел. 7 х 90.

Характерная для бифидобактерий штамма B.longumB379M микроскопическая картина опытных образцов свидетельствует о том, что условия культивирования, состав питательной среды отвечают требованиям для роста бифидобактерий в молоке.

В процессе приготовления бифидосодержащих средств на молочной основе самым важным свойством бактерий считаются их быстрый рост и способность сквашивать молоко.

Известно, что бифидобактерии (облигатные анаэробы) почти не растут в молоке, в отличие от молочнокислых бактерий. Развитие бифидобактерий может зависеть от особых веществ, так называемых бифидус факторов, которые практически отсутствуют в коровьем молоке.Химические исследования показали, что бифидус-факторы представляют собой смесь близких по составу олигосахаридов.

В настоящее время существует несколько направлений для получения олигосахаридов промоторов (стимуляторов роста) для бифидобактерий. Одним из них является выделение олигосахаридов из растительного сырья.

Стимулирующее действие олигосахаридов объясняется тем, что они играют важную роль в синтезе пептидогликана клеточных стенок бифидибактерий.

Оценка гастропротективного влияния модифицированного фитобактериального средства в опытах на белых крысах Влияние модифицированного фитобактериального средства на течение бутадионового повреждения слизистой оболочки желудка белых крыс После индуцирования бутадионовогоповреждения СОЖ белых крыс на фоне введения модифицированного фитобактериального средства и препарата сравнения кверцетина, на основе данных макроскопии СОЖ – качественной и количественной оценки деструкций, подсчитан индекс Паулса. На основании данных морфофункционального состояния СОЖ белых крыс дана оценка гастропротективного эффекта испытуемого средства.

Результаты эксперимента представлены в таблице 1.

–  –  –

Как видно из данных таблицы 1, на модели бутадионового повреждения слизистой оболочки желудкаисследуемое лекарственное средство оказало выраженный гастропротективный эффект.Так, индекс Паулса для точечных кровоизлияний в группах под влиянием кверцетина и модифицированного фитобактериального средства по сравнению с контрольной группой животных уменьшился соответственно в 2,1 и 2,05 раза, для эрозий – при введении кверцетина увеличился более чем в 2 раза, а при использованиимодифицированного фитобактериального средства остался на уровне контроля. Индекс Паулса для полосовидных язв при применении кверцетина уменьшился в 1,64 раза, а при применении модифицированного фитобатериального средства индекс Паулса уменьшился в 1,35 раза.

При гистологическом исследовании выявлено, что при повреждении желудка белых крыс бутадионом через 24 часа в собственно слизистой оболочке желудка и подслизистой основе обнаруживается инфильтрация клеточных элементов в мышечный слой (рис. 2).

А Б Рис. 2 – Повреждение желудка белых крыс бутадионом, контрольная группа.

Инфильтрация собственно слизистой желудка (А) и подслизистой основы (Б) клеточными элементами с проникновением их в мышечный слой. Окраска гематоксилином и эозином.

Увел.10х20.

Фармакотерапевтический эффект препарата сравнения кверцетина, реализовался преимущественно в плане ограничения генеза полосовидных язв.

Модифицированное фитобактериальное средство по выраженности гастропротективного эффекта превосходило препарат сравнения кверцетин в ограничении образования эрозий. Согласно критериям гастропротективного действия фармакологических агентов (Барнаулов О.Д. и др., 1982) при интерпретации данной серии экспериментов можно сделать вывод, что модифицированное фитобактериальное средство обладает отчетливым антиульцерогенным действием.

Исследование терапевтической эффективности модифицированного фитобактериального средства показало, что курсовое введение в экспериментально-терапевтических дозах на фоне язвенного дефекта слизистой оболочки желудка белых крыс различной этиологии(аспириновое, атофановое, бутадионовое, резерпиновое повреждения) оказывало антиульцерогенное действие, которое характеризовалось нормализацией структурнофункционального состояния слизистой оболочки желудка на более ранних стадиях патологического процесса.

Влияние модифицированного фитобактериального средства на течение хронической ацетатной язвы желудка по Оkabe у белых крыс Для оценки влияния модифицированного фитобактериального средства на функциональное состояние слизистой оболочки желудка белых крыс были выбраны показатели, характеризующие процессы перекисного окисления липидов, темп желудочной секреции, кислотность желудочного содержимого, а также деструктивные изменения СОЖ (табл.2).

–  –  –

Примечание: * – различия достоверны относительно интактной группы при Р0,05;

** – данные достоверны относительно контрольной группы при Р0,05.

Как следует из данных таблицы 2, в контрольной группе животных через 2е суток после индуцирования ацетатной язвы и в последующие сроки у животных отмечалась заторможенность, гиподинамия, потеря массы телав среднем на 8 %,вялое заживление операционного шва, гибель животных составила 30 %. На 7-е сутки исследования после индуцирования язвы желудка в 100 % случаев на слизистой оболочке желудка белых крыс отмечали точечные кровоизлияния, эрозии наблюдали у 80 % животных.

Развитие деструктивных процессов в слизистой оболочке желудка сопровождалось интенсификацией процессов перекисного окисления липидов в тканях желудка. Содержание МДА в гомогенате желудка контрольных животных увеличивалось в 5,31 раз по сравнению с интактной группой животных. При курсовом введении модифицированного фитобактериального средства содержание МДА на 7 сутки эксперимента снижалось в 1,57 раз до 0,044±0,004 ммоль/г по сравнению с контрольной группой животных (0,069±0,009 ммоль/г) и к концу эксперимента содержание малонового диальдегида в гомогенате желудка белых крыс составляло 0,021±0,005 ммоль/г.

У животных контрольной группы достоверно резко снизился темп желудочной секреции – в 2,83 раза, с одновременным снижением общей кислотности с 140,3±3,58 до 40,1±2,67ед. титра, а также уменьшилось содержание свободной соляной кислоты с 47,62±2,63 до 14,35±0,95 ед. титра и снизился дебит-час соляной кислоты в 2,43 раз.

Снизился процент животных с точечными кровоизлияниями до 60 % и 70% в группе животных, получавших модифицированное фитобактериальное средство и кверцетин, соответственно. Процент животных с эрозиями в группе животных, получавших модифицированное фитобактериальное средство, уменьшился до 50 %, а в группе животных, получавших кверцетин, до 60 % по сравнению с контрольной группой животных. Соответственно снизился и индекс Паулса для точечных кровоизлияний с 3,38±0,13 в контрольной группе и до 2,85±0,11 и 2,97±0,12 в опытной группе,и индекс Паулса для эрозий с 4,36±0,17 до 3,42±0,15 и 3,83±0,16. Положительная динамика сохранялась и на 14-е сутки. К 21-м суткам процент животных с точечными кровоизлияниями в группе животных, получавших модифицированное фитобактериальное средство, составлял 20 %, а в группе сравнения – 30%. В контрольной группе животных процент животных с точечными кровоизлияниями составил 70 %.Темп желудочной секреции у животных, получавших модифицированное фитобактериальное средство, повысился в 1,63 раз по сравнению с контрольной группой животных с одновременным увеличением количества свободной соляной кислоты в желудочном соке до 23,46±1,49 ед. титра. Общая кислотность содержимого желудка у животных, получавших модифицированное фитобактериальное средство, повысилась на 25,4±2,99 ед.

титра.

На 14-е сутки уменьшился процент животных с точечными кровоизлияниями до 60 % в группе животных, получавших модифицированное фитобактериальное средство и кверцетин, а процент животных с эрозиями в первой группе уменьшился до 40 %, во второй до 50 % по сравнению с контрольной группой животных. Соответственно снизился и индекс Паулса для точечных кровоизлияний с 3,04±0,11 в контрольной группе и до 2,17±0,14 и 2,25±0,20 в опытных группах соответственно и индекс Паулса для эрозий с 3,74±0,15 до 2,15±0,21 и 2,42±0,24.

На 21-е сутки эксперимента процент животных с точечными кровоизлияниями, получавших модифицированное фитобактериальное средство и кверцетин, составлял соответственно 20 % и 30 %, а в группе животных, получавших модифицированное фитобактериальное средство, животных с эрозиями не выявлено; в группе животных, получавших кверцетин, процент животных с эрозиями составил 20 %.

На 7-е сутки исследования площадь язвенных дефектов желудка у экспериментальных животных достоверно уменьшалась со 105,38±2,42 мм2 до 19,37±1,54 мм2.

На 14-е сутки наблюдения как следует из данных таблицы 4, в контрольной группе животных площадь язвенных дефектов составила 55,41±1,53 мм2.У животных, получавших модифицированное фитобактериальное средство, на 14е сутки исследований площадь язвенных дефектов уменьшилась до 8,14±0,02 мм2. Подобная динамика наблюдалась и в группе животных, получавших кверцетин, но площадь язвенных дефектов была больше во все сроки наблюдения, чем в группе животных, получавших модифицированное фитобактериальное средство (табл. 4).

Таблица 4 – Влияние модифицированного фитобактериального средства на течение язвы желудка по Okabe у белых крыс

–  –  –

Примечание: * – данные достоверны соответственно срокам исследования относительно контрольной группы животных при Р0,05.

В группе животных, получавших модифицированное фитобактериальное средство, на 21-е сутки наблюдения язв уже не наблюдалось, а в группе контрольных животных площадь язвенных дефектов составляла 32,16±1,27 мм2.

В группе животных, получавших препарат сравнения кверцетин, площадь язвенных дефектов достоверно уменьшалась с 32,16±1,27 мм2 до 3,49±0,08 мм2.

На поверхности дна язвенного дефекта наблюдали толстый слой фиброзной некротизированной ткани. На дне язвенного дефекта выявляли разрушение мышечного слоя, мышечные волокна расщеплены на отдельные фрагменты. В тканях дна язвы наблюдалась интенсивная клеточная инфильтрация. На краях язвенного повреждения отмечали циркуляторные расстройства в форме расширения кровеносных сосудов и стазов. Наблюдали деструктивные изменения в покровно-ямочном эпителии и железистом аппарате слизистой оболочки желудка. Просветы желез были резко расширенными, часть париетальных, а также добавочных клеток были деформированы.

Поверхностный слой язвы был образован бесструктурными некротическими массами, слизью, фибрином, десквамированным эпителием, отмечали инфильтрацию слизистой оболочки клеточными элементами (рис. 3).

Выраженность зоны деструкции рассматривали как показатель активности язвенного процесса.

Рис. 3–Язва желудка белых крыс по Оkabe. 7-е сутки. Опытная группа с введением МФС.

Диффузная лейкоцитарная инфильтрация эпителия. Окраска гематоксилином и эозином.

Увел. 10 х 20.

Выявлено«нависание» слизистой оболочки над язвенным дефектом.

Противоположный край пологий, террасовидный.

При проведении гистоморфологических исследованийобнаружили, что в желудке животных, получавших модифицированное фитобактериальное средство с экстрактом плодов шиповника и природного цеолита, в отличие от контроля, слабее выражены гемодинамические нарушения и клеточная инфильтрация (рис. 4).

Рис.4 – Язва желудка белых крыс по Оkabe. 7-е сутки. Опытная группа с введением МФС.

Увеличение количества клеточных элементов в грануляционной ткани. Окраска гематоксилином и эозином. Увел. 7 х 40.

Результаты биохимических исследований сыворотки крови белых крыс, показывают, что у животных контрольной группы отмечено достоверное снижение уровня белка с 78,3±1,82г/л до 60,6±1,47 г/л; железа – в 1,67 раз, мочевой кислоты – в 1,75 раз, что свидетельствует о нарушении функции желудочно-кишечного тракта, вызванном повреждениями СОЖ и сопутствующим воспалительным процессом (табл. 3).

–  –  –

Примечание: * – различия достоверны относительно интактной группыпри Р0,05;

** – данные достоверны относительно контрольной группы при Р0,05.

Отмечено достоверное повышение уровня холестерина и малонового диальдегида до 1,8±0,13 ммоль/л и 0,0730,0017 нмоль/л соответственно.

При курсовом введении модифицированного фитобактериального средства на 7-е сутки отмечено статистически достоверное повышение содержания общего белка до 66,6±1,63 г/л, мочевой кислоты до 148,0±6,73 мкмоль/л, железа до 31,3±0,63 мкмоль/л и достоверное снижение общего билирубина и МДА у животных, получавших модифицированное фитобактериальное средство, по сравнению с контрольной группой животных. Подобную динамику наблюдали и в остальные сроки исследования.

Флавоноидные соединения и аскорбиновая кислота, входящие в состав модифицированного фитобактериального средства, оказывают антиоксидантное действие, выражающееся в способности ингибировать процессы перекисного окисления липидов и стабилизировать биологические мембраны клеток стенки желудка.

Природный цеолит в желудочно-кишечном тракте не всасывается, а проходит транзитом, взаимодействуя только на уровне селективного ионного обмена и избирательной сорбции при контакте с кровеносными и лимфатическими сосудами кишечной стенки, отдавая или забирая микро-, макроэлементы, катализируя биохимические реакции.

Результаты проведенных исследований при различных повреждениях слизистой оболочки желудка показали, что модифицированное фитобактериальное средство обладает терапевтическим действием. Показано, что у белых крыс с ацетатной язвой желудка в меньшей степени проявляются признаки воспаления: отечность и гиперемия стромы. Менее выражены стаз форменных элементов, дистрофия и десквамация покровного эпителия, а также нарушение рельефа слизистой оболочки желудка.

Морфофункциональная и электрофизиологическая оценка влияния модифицированного фитобактериального средства на течение желчного гастрита у кроликов При терапии желчного гастрита животных модифицированным фитобактериальным средством отмечали его позитивное влияние на активность секреторного аппарата СОЖ. Так, темп желудочной секреции на 49,0% был выше такового в контроле. Уровень общей кислотности превышал таковой в контроле на 67,2%. Ферментативная активность была значительно выше нормы во всех группах на 10- и 20-е сутки исследований.

При морфометрических исследованиях деструкции СОЖ определяли степень защиты испытуемым средством в ответ на повреждающее воздействие желчи. Индекс Паулса при повреждениях слизистой оболочки желудка эрозиями в опытной группе был в 26,8 раз меньше, чем в контроле; в 2 раза ниже у животных опытной группы, чему животных в группе сравненияпри повреждениях СОЖ полосовидными язвами; в 6,8 раза превышая данные контроля при повреждениях точечными кровоизлияниями (табл.5).

–  –  –

Индекс Паулса для полосовидных язв 14,3 6 3 Примечание: * - различия достоверны по сравнению с контролем при Р0,05.

У животных, получавшихмодифицированное фитобактериальное средство, дно язвенного дефекта, по сравнению с контролем, было очищено от некротических масс или покрыто тонким слоем детрита в виде скоплений слизи с примесью распадающихся лейкоцитов, эритроцитов и слущенных клеток.

Края язвы характеризовались уменьшением периульцерозного воспалительного вала. Вокруг язвы была значительно уменьшена зона гиперемии и отека. В отличие от контроля в более ранние сроки со дна язвы наблюдалось отторжение струпа, пропитанного фибринозным налетом, под которым обнаруживалась нежная, рыхлая грануляционная ткань с большим количеством вновь образованных капилляров.

К концу эксперимента регенераторные процессы в стенке желудка у части животных проявлялись в виде эпителиально-соединительнотканных разрастаний, наползающих на язвенную поверхность. В некоторых случаях обнаруживался полиморфизм покровного эпителия.

Кроме того, у кроликов с желчным гастритом дана электрофизиологическая оценка влияния МФС путем регистрации биоэлектрических потенциалов желудка. Установлено, что язвенное повреждение стенки желудка кроликов сопровождается угнетением биоэлектрической активности этого органа.

Биоэлектрические сигналы с исследуемого органа изучали на 7, 10 и 20есутки с момента начала введения медицинской желчи и начала экспериментальной терапии.

Введение животным модифицированного фитобактериального средства оказывало стимулирующее влияние на восстановление электрической активности желудка в процессе заживления язвенного дефекта в стенке органа.В контрольной группе кроликов, получавших только медицинскую желчь, выявлено угнетение биоэлектрической активности желудка, что подтверждается достоверным по сравнению с интактным контролем снижением величин ОУБА и СВА во все изучаемые сроки. Показатели электрогастрограмм у кроликов с «рефлюкс-гастритом», получавших модифицированное фитобактериальное средство, были достоверно выше, чем таковые у контрольных животных (табл. 6).

Таблица 6 – Показатели электрической активности желудка у кроликов с «рефлюкс-гастритом» (М±m; n = 8) Показатели электрогастрограмм Группа Сроки, сут.

животных ОУБА(усл. ед.) ЧИ в мин. СВА (мВ)

–  –  –

Примечание: * - достоверность по сравнению с контролем по срокам, Р 0,05.

При анализе данных таблицы 6 в группе контрольных животных, получавших только медицинскую желчь, выявлено угнетение биоэлектрической активности желудка, что подтверждается достоверным, по сравнению с интактным контролем, снижением величин ОБА и СВА во все изучаемые сроки. Введение животным МФС оказывало стимулирующее влияние на восстановление электрической активности желудка в процессе заживления язвенного дефекта в стенке органа.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют об антиульцерогенном действии модифицированного фитобактериального средства. Эффективное восстановление биоэлектрической активности и морфофункционального состояния желудка непосредственно связано с ионообменными, адсорбционными, биокаталитическими, антиоксидантными, антирадикальными свойствами модифицированного фитобактериального средства, которые реализуются в условиях желудка.

Гепатопротекторное действие модифицированного фитобактериального средства Фармакотерапевтическая эффективность модифицированного фитобактериального средства при остром токсическом гепатите Гепатопротекторное действие МФС показано на экспериментальных моделях в условиях острого токсического поражения печени CCl4.

По патогистологических исследованиях на 7-е сутки с момента введения четыреххлористого углерода в печени животных выявлены резкие структурные изменения, которые сводятся к значительным гемодинамическим нарушениям в виде полнокровия междольковых сосудов, расширения просвета центральных вен, утолщения их стенок с миграцией элементов крови в паренхиму органа, периваскулярного отека и расширения периваскулярного пространства, а также к выраженным изменениям гепатоцитов в форме жировой дистрофии.

В ранние сроки исследования в центре и вокруг некротических очагов отмечено снижение активности сукцинатдегидрогеназы (рис. 5).

А Б Рис. 5 – Острый токсический гепатит, 7-е сутки. Печень белой крысы. Снижение активности сукцинатдегидрогеназы (А) по сравнению с интактом (Б). Окраска по Нахласу.

10 х 10.

В паренхиме органа наблюдается в различной степени выраженная клеточная инфильтрация. Острый процесс повреждения печени тетрахлорметаном протекает с участием пролиферативно-инфильтрационных реакций с образованием инфильтратов в портальных и перипортальных зонах по ходу кровеносных сосудов и внутри долек.

В печени животных на 7-е сутки (контрольная группа животных) выявлены резкие структурные изменения в виде периваскулярного отека с очагами некроза. Повреждения носят характер жировой и клеточной инфильтрации.

Наблюдается мелко- и среднекапельная жировая инфильтрация. Характерны гемодинамические нарушения.

На 14-е сутки все отмеченные нарушения продолжают сохраняться. Также выявлена деструкция стенок кровеносных сосудов, краевое стояние лейкоцитов у стенки сосуда с миграцией клеточных элементов в паренхиму органа.

Гепатоциты с боковым или центральным расположением ядра, увеличены в размерах. Выражена клеточная инфильтрация внутри долек по ходу сосудов (рис. 6).

А Б Рис. 6 – Острый токсический гепатит, 14-е сутки. Контрольная группа. Печень белой крысы. Выраженная клеточная инфильтрация внутри долек по ходу сосудов (А) и желчному протоку (Б). Окраска гематоксилином и эозином. Увел. 10 х 20.

В паренхиме печени обнаруживались очаги некроза, локализованные чаще в центролобулярных зонах.

На фоне введения МФС в печени слабее выражены признаки токсического гепатита, в частности, зернистая и клеточная инфильтрация, гемодинамические нарушения. На 7-е сутки введения модифицированного фитобактериального средства в паренхиме органа выявлены гипертрофированные и двуядерные гепатоциты и клетки Купфера. В большинстве случаев отсутствовали выраженные альтеративные изменения, отмечалась сохранность структуры долек и балок.

У животных, получавших МФС, на 14-е сутки опытов гемодинамические нарушения и изменения в печени были выражены в гораздо меньшей степени, чем у контрольных животных. Центролобулярные очаги некроза исчезли, хотя гепатоциты, заполнившие их, еще не приближались к норме. Об активности регенераторных процессов судили по выявлению крупных темноокрашенных клеток с гипохромными ядрами, по частоте митозов и увеличению числа двуядерных гепатоцитов.

Клеточная инфильтрация внутри долек и по ходу сосудов не выражена. В инфильтратах преобладали гистиолимфоцитарные и макрофагальные элементы.



Pages:   || 2 |

Похожие работы:

«ВАГАЙЦЕВА КСЕНИЯ ВАЛЕРЬЕВНА ГЕНЕТИЧЕСКОЕ РАЗНООБРАЗИЕ ПОПУЛЯЦИЙ СЕВЕРНОЙ ЕВРАЗИИ ПО STR И SNP МАРКЕРАМ X-ХРОМОСОМЫ И ИХ ДНКИДЕНТИФИКАЦИОННЫЙ ПОТЕНЦИАЛ 03.02.07 генетика АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Томск – 2015 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном научном учреждении «Научно-исследовательский институт медицинской генетики», г. Томск Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Степанов Вадим...»

«Игошкина Ирина Юрьевна ОЦЕНКА ЭКОЛОГИЧЕСКОГО СОСТОЯНИЯ ВОДОЕМА ПРИРОДНОГО ПАРКА «ПТИЧЬЯ ГАВАНЬ» (г. ОМСК) ПО ПОКАЗАТЕЛЯМ РАЗВИТИЯ ФИТОПЛАНКТОНА 03.02.08 – экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Омск 2014 Диссертационная работа выполнена на кафедре экологии, биологии и природопользования ФГБОУ ВПО ОмГАУ им. П.А. Столыпина доктор биологических наук, профессор Научный руководитель: Баженова Ольга Прокопьевна Официальные...»

«Абросимова Светлана Борисовна Совершенствование методов селекции картофеля на устойчивость к золотистой цистообразующей нематоде (Globodera rostochiensis (Woll.) Специальность: 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата сельскохозяйственных наук Москва – 2014 Диссертационная работа выполнена в Государственном научном учреждении Всероссийский научно-исследовательский институт картофельного...»

«ЗАХАРОВА МАРИНА АЛЕКСАНДРОВНА ИССЛЕДОВАНИЕ СОДЕРЖАНИЯ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ И ПОЛУЧЕНИЕ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНОЙ ДНК ИЗ ГОНАД ПРЕСНОВОДНЫХ РЫБ БАЙКАЛЬСКОГО РЕГИОНА Специальность 03.01.06 – Биотехнология (в том числе бионанотехнологии) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Улан-Удэ – 2012 Работа выполнена на кафедре «Биотехнология» ФГБОУ ВПО «Восточно-Сибирский государственный университет технологий и управления» (ФГБОУ ВПО «ВСГУТУ») Доктор...»

«Шигапов Иршат Сайдашович ОСОБЕННОСТИ ФОРМИРОВАНИЯ И РАЗВИТИЯ МАЛЫХ ОЗЕР УРБАНИЗИРОВАННЫХ ТЕРРИТОРИЙ (НА ПРИМЕРЕ ГОРОДА КАЗАНИ) 25.00.36 Геоэкология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата географических наук Москва 2014 Работа выполнена в федеральном государственном автономном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Казанский (Приволжский) федеральный университет» на кафедре природообустройства и водопользования Научный...»

«Вайсвалавичене Валентина Юрьевна СТРУКТУРА СРЕДСТВ, МЕТОДОВ И УСЛОВИЙ РАЗВИТИЯ ДВИГАТЕЛЬНЫХ СПОСОБНОСТЕЙ У ДЕТЕЙ СТАРШЕГО ДОШКОЛЬНОГО ВОЗРАСТА 5-7 ЛЕТ 13.00.04 – теория и методика физического воспитания, спортивной тренировки, оздоровительной и адаптивной физической культуры АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Москва – 2015 Диссертационная работа выполнена на кафедре теории и методики базовых видов физического воспитания...»

«Малышев Алексей Владиславович КОМПЛЕКСНАЯ СИСТЕМА ПЕРСОНАЛИЗИРОВАННЫХ МЕРОПРИЯТИЙ ПО ПОВЫШЕНИЮ КЛИНИКОФУНКЦИОНАЛЬНОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ХИРУРГИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ ВИТРЕОРЕТИНАЛЬНОЙ ПАТОЛОГИИ 14.01.07 – глазные болезни Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Москва 2015 Работа выполнена на кафедре офтальмологии Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения дополнительного профессионального образования «Институт повышения...»

«ДОМНИНА Виктория Леонидовна ИССЛЕДОВАНИЕ ЭКОЛОГИЧЕСКОГО СОСТОЯНИЯ ВОДНЫХ ОБЪЕКТОВ Г. ТУЛА МЕТОДАМИ БИОИНДИКАЦИИ И БИОТЕСТИРОВАНИЯ 03.02.08 – экология (биология) Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Тула 2015 Работа выполнена на кафедре биологии и экологии Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Тульский государственный педагогический университет имени Л.Н....»

«БЕРЕЗИНА Елена Сергеевна ПОПУЛЯЦИОННАЯ СТРУКТУРА, ОСОБЕННОСТИ МОРФОЛОГИИ И ПОВЕДЕНИЯ И РОЛЬ ДОМАШНИХ СОБАК И КОШЕК В РАСПРОСТРАНЕНИИ ПРИРОДНО-ОЧАГОВЫХ ИНФЕКЦИЙ В РОССИИ 03.02.04 – зоология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Омск – 2015 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Омский государственный педагогический университет» и ФБУН «Омский НИИ...»

«ДРОБОТ Елена Игоревна РЕАКТИВНОСТЬ КЛЕТОК ВРОЖДЕННОГО ИММУНИТЕТА ПРИ ИНФЕКЦИИ, ВЫЗВАННОЙ РАЗНЫМИ ПЛАЗМИДНЫМИ ВАРИАНТАМИ YERSINIA PSEUDOTUBERCULOSIS 03.03.04 – клеточная биология, цитология, гистология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Владивосток – 2014 Работа выполнена в лаборатории клеточной биологии и гистопатологии ФГБУ «Научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологии имени Г.П. Сомова» СО РАМН. Научный...»

«Силкин Иван Иванович ВОЗРАСТНЫЕ И СЕЗОННЫЕ СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ПЕРЕСТРОЙКИ НЕКОТОРЫХ ПОЛОВЫХ, ЭНДОКРИННЫХ И МУСКУСНЫХ ПРЕПУЦИАЛЬНЫХ ЖЕЛЕЗ САМЦОВ ОНДАТРЫ 06.02.01 Диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Благовещенск 2013 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования...»

«Нгуен Тхи Тху Ха МЕДОНОСНЫЕ РЕСУРСЫ ЛЕСНОГО ФОНДА ЛЕНИНГРАДСКОЙ ОБЛАСТИ И ЦЕНТРАЛЬНОГО ВЬЕТНАМА 06.03.02 Лесоведение, лесоводство, лесоустройство и лесная таксация АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Санкт-Петербург 2015 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы исследования. Использование недревесных ресурсов вносит существенный вклад в улучшение качества жизни населения многих стран, включая Россию и Вьетнам. До настоящего...»

«УДК 572 СТУПИНА Ксения Сергеевна АНТРОПОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ И ДИНАМИКА САМООЦЕНКИ ДЕТЕЙ И ПОДРОСТКОВ (НА ПРИМЕРЕ УЧАЩИХСЯ ГИМНАЗИЙ Г. МОСКВЫ) 03.03.02 – антропология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва – 2011 Работа выполнена на кафедре антропологии биологического факультета Московского государственного университета...»

«Дьяков Юрий Петрович КАМБАЛООБРАЗНЫЕ (PLEURONECTIFORMES) ДАЛЬНЕВОСТОЧНЫХ МОРЕЙ РОССИИ (пространственная организация фауны, сезоны и продолжительность нереста, популяционная структура вида, динамика популяций) Специальность 03.00.10 – ихтиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Владивосток – 2009 Работа выполнена в лаборатории морских промысловых рыб Камчатского научноисследовательского института рыбного хозяйства и океанографии...»

«АБДУЛЛОЕВ ХУШБАХТ САТТОРОВИЧ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО БРОНХИТА КУР ГЕНОТИПА QX 06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Владимир – 2015 Работа выполнена в ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов» и ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГБУ «ВНИИЗЖ»). Макаров Владимир Владимирович,...»

«ПРОКОПЬЕВА Елена Александровна ФЕНОТИПИЧЕСКИЕ И ГЕНОТИПИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ПАНДЕМИЧЕСКОГО ВИРУСА ГРИППА А(H1N1)pdm09 ПРИ АДАПТАЦИИ К МЫШАМ РАЗЛИЧНОГО ГЕНОТИПА 03.02.02 вирусология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Санкт-Петербург, 2015 г. Работа выполнена в Федеральном бюджетном учреждении науки Государственном научном центре вирусологии и биотехнологии «Вектор», р.п. Кольцово, г. Новосибирск Научный руководитель: Шестопалов...»

«Исаев Аркадий Петрович ТЕТЕРЕВИНЫЕ ПТИЦЫ ЯКУТИИ: РАСПРОСТРАНЕНИЕ, ЧИСЛЕННОСТЬ, ЭКОЛОГИЯ 03.02.04 – Зоология Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Новосибирск 2014 Работа выполнена в лаборатории горных и субарктических экосистем Федерального государственного бюджетного учреждения науки Института биологических проблем криолитозоны Сибирского отделения Российской академии наук. Научный консультант: член-корреспондент РАН, доктор...»

«УДК 551.87 Любас Артем Александрович ПАЛЕОРЕКОНСТРУКЦИЯ СРЕДЫ ОБИТАНИЯ ПРЕСНОВОДНЫХ МОЛЛЮСКОВ В НЕОГЕН-ЧЕТВЕРТИЧНЫХ ВОДОТОКАХ С ЭКСТРЕМАЛЬНЫМИ ПРИРОДНЫМИ УСЛОВИЯМИ Специальность 25.00.25 – геоморфология и эволюционная география Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата географических наук Санкт-Петербург – 2016 Работа выполнена в лаборатории молекулярной экологии и биогеографии федерального государственного бюджетного учреждения науки Института...»

«Яшина Людмила Николаевна ГЕНЕТИЧЕСКОЕ РАЗНООБРАЗИЕ ХАНТАВИРУСОВ В ПОПУЛЯЦИЯХ ГРЫЗУНОВ И НАСЕКОМОЯДНЫХ АЗИАТСКОЙ ЧАСТИ РОССИИ 03.01.03 – молекулярная биология Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Кольцово 2012 Работа выполнена в Федеральном бюджетном учреждении науки «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Минздравсоцразвития Российской Федерации Официальные оппоненты: доктор биологических наук, доцент...»

«Берко Татьяна Владимировна Продуктивность и воспроизводительные Качества птицы родительского стада кросса «хайсекс коричневый» при использовании В кормлении тыквенного жмыха, Обогащенного биодоступной формой йода 06.02.10 – частная зоотехния, технология производства продуктов животноводства АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Волгоград – 2015 Диссертационная работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном научном...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.