WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:   || 2 |

«МОЛЕКУЛЯРНАЯ ТАКСОНОМИЯ И МОРФОЛОГИЯ НЕМАТОД НАДСЕМЕЙСТВА THELASTOMATOIDEA, ОБИТАЮЩИХ В НАЗЕМНЫХ ЧЛЕНИСТОНОГИХ ...»

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

Гузеева Елена Александровна

МОЛЕКУЛЯРНАЯ ТАКСОНОМИЯ И МОРФОЛОГИЯ

НЕМАТОД НАДСЕМЕЙСТВА THELASTOMATOIDEA,

ОБИТАЮЩИХ В НАЗЕМНЫХ ЧЛЕНИСТОНОГИХ

03.02.04 – зоология

03.02.11 – паразитология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

МОСКВА 2010

Работа выполнена в лаборатории фауны и систематики паразитов Центра паразитологии Института проблем экологии и эволюции имени А.Н. Северцова РАН и на кафедре зоологии беспозвоночных Биологического факультета Московского государственного университета имени М.В. Ломоносова.

Научные руководители:

доктор биологических наук, профессор Чесунов Алексей Валерьевич доктор биологических наук Спиридонов Сергей Эдуардович

Официальные оппоненты:

доктор биологических наук, профессор Горохов Владимир Васильевич Всероссийский институт гельминтологии имени К.И. Скрябина РАСХН кандидат биологических наук Чижов Владимир Николаевич Центр паразитологии Института проблем экологии и эволюции имени А.Н.

Северцова РАН

Ведущая организация: Санкт-Петербургский государственный университет.

Защита состоится 12 апреля 2010 г. в 15 ч. 30 мин. на заседании диссертационного совета Д 501.001.20 в Московском государственном университете имени М.В. Ломоносова по адресу: 119991, г. Москва, Ленинские горы, д. 1, стр. 12, МГУ имени М.В. Ломоносова, Биологический факультет, ауд. М-1.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Биологического факультета МГУ имени М.В. Ломоносова.

Автореферат разослан 25 февраля 2010 г.

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук Барсова Лариса Ивановна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Нематоды (Nematoda) – второй по числу видов после насекомых тип животного царства (Hodda, 2007). Значительное число паразитических форм среди них делает эту группу привлекательным объектом для изучения эволюционной истории возникновения и развития паразитизма.

Наряду с хорошо исследованными в разных научных и прикладных аспектах паразитическими нематодами растений и позвоночных животных, нематоды беспозвоночных все еще остаются сравнительно малоизученной группой. Особый интерес представляют оксиуриды, или острицы. Современная систематика рассматривает оксиурид как представителей отдельного инфраотряда Oxyuromorpha (De Ley, Blaxter, 2002). Хотя оксиуриды относятся к нематодам со сравнительно богатой и разнообразной морфологией, так и не была разработана их устойчивая классификация. Нематоды этой группы представляют значительный теоретический интерес, как одно из направлений развития паразитизма в пределах типа. Многие хозяева оксиурид, и в особенности членистоногие, легко культивируются в лаборатории и могутстать модельным объектом для изучения паразито-хозяинных отношений и испытания различных препаратов, подавляющих развитие гельминтов. Все это делает актуальной задачу углубленного изучения оксиурид в целом и, в частности, оксиурид различных членистоногих и других беспозвоночных животных.

Цель и задачи исследования. Цель исследования – изучение морфологии и основных онтогенетических стадий нематод семейства Thelastomatidae и проведение филогенетического анализа надсемейства Thelastomatoidea на основе изучения последовательностей D2D3 сегмента большой субъединицы рибосомы.

Поставлены следующие задачи:

1. изучить строение различных стадий онтогенетического развития нескольких видов из разных родов нематод семейства Thelastomatidae;

2. изучить ультраструктуру яйцевых оболочек у Blatticola blattae из рыжего таракана;

3. получить нуклеотидные последовательности D2D3 сегмента 28S рДНК нескольких видов нематод из разных родов надсемейства Thelastomatoidea;

4. провести поиск апоморфий и синапоморфий в эволюционных линиях, выявленных в пределах надсемейства Thelastomatoidea с помощью молекулярных методов.

Научная новизна. Впервые изучена фауна паразитических нематод у восьми видов тараканов из лабораторных культур и двух видов тропических тараканов подсемейства Panesthiinae из Вьетнама и Австралии. Переописан один вид (Hammerschmidtiella cristata Spiridonov, 1984) и описан новый вид нематод (Severianoia blapticola Guzeeva, 2009). Проведено сравнительное изучение разных онтогенетических стадий трех видов теластоматид – Hammerschmidtiella cristata, Leidynema delatorrei и L. portentosae. Впервые исследована ультраструктура яйцевых оболочек нематод Blatticola blattae. Впервые получены и депонированы в Генбанке (NCBI GenBank) последовательности большой субъединицы рибосомы для теластоматоидей трех семейств, 18 родов и 20 видов. Проведен анализ филогенетического развития нематод надсемейства Thelastomatoidea и выявлено несколько основных линий их эволюционного развития, для которых обнаружены характерные морфологические апоморфии.

Теоретическое и практическое значение работы состоит в разработке основы для построения естественной системы нематод надсемейства Thelastomatoidea, опирающейся на данные филогенетического анализа, и учитывающей как морфологические, так и молекулярные признаки. Использование последних позволяет решить вопрос о таксономической принадлежности некоторых групп этих нематод (например, нематод рода Mesidionema из дождевых червей, ранее ошибочно отнесенных к надсемейству Drilonematoidea).

Продемонстрирована возможность использования нуклеотидных данных по домену D2D3 28S рДНК для решения вопросов систематики на уровне вида-рода (идентификация собранного в поле материала, доказательство конспецифичности, дифференциация видов в пределах рода). Ультраструктурное изучение оболочек яиц Blatticola blattae позволило выявить новый тип организации яйцевых оболочек у теластоматид. Продемонстрирована ценность нематод B. blattae, как учебного и модельного объекта, обладающего значительно большей наглядностью и простотой в изучении и получении, по сравнению с классическим объектом практических занятий – аскаридой.

Апробация работы. Материалы диссертации представлены на V Международном нематологическом симпозиуме (г. Владивосток, 2003);

Юбилейной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых МФСХ ТГУ (г. Томск, 2004); XLIII Международной научной студенческой конференции “Студент и научно-технический прогресс” (г. Новосибирск, 2005); VI Международном нематологическом симпозиуме (г. Москва, 2005); II межрегиональной научной конференции “Паразитологические исследования в Сибири и на Дальнем Востоке” (г. Новосибирск, 2005); Международной научной конференции “Фауна, биология, морфология и систематика паразитов” (г. Москва, 2006); VII Международном нематологическом симпозиуме “Нематоды естественных и трансформированных экосистем” (г. Петрозаводск, 2007); V Международном конгрессе нематологов (Австралия, г. Брисбен, 2008); IV Всероссийском съезде Паразитологического общества при РАН “Паразитология в XXI веке – проблемы, методы, решения” (г. Санкт-Петербург, 2008); XIX Симпозиуме Южно-Африканского общества нематологов (ЮАР, г. Хейзивью, 2009); Международном нематологическом симпозиуме “Нематоды в тропических экосистемах” (Вьетнам, г. Ханой, 2009).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 14 научных работ, из которых 7 – статьи (2 в журналах, рекомендованных ВАК), 7 – тезисы докладов.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на … страницах и представляет собой рукопись, состоящую из введения, обзора литературы, материалов и методов, результатов, обсуждения, выводов, списка литературы из 114 источников, из которых 86 на иностранных языках. Текст иллюстрирован 34 рисунками и 9 таблицами.

Благодарности. Автор глубоко признателен своим научным руководителям Сергею Эдуардовичу Спиридонову и Алексею Валерьевичу Чесунову за многолетнюю помощь, всестороннюю поддержку и чуткое руководство. Особую благодарность за неоценимую возможность работы по электронной микроскопии автор выражает Георгию Натановичу Давидовичу, Анатолию Георгиевичу Богданову и Светлане Вячеславовне Полевой, а также всем сотрудникам Межкафедральной лаборатории электронной микроскопии Биологического факультета МГУ имени М.

В. Ломоносова. За содействие и создание теплой, благоприятной обстановки для работы автор благодарен Елене Сергеевне Ивановой и всем коллегам по лаборатории фауны и систематики паразитов Центра паразитологии Института проблем экологии и эволюции имени А.Н. Северцова РАН и сотрудникам кафедры зоологии беспозвоночных Биологического факультета МГУ имени М.В. Ломоносова. За первые шаги в исследовательской работе и предоставление материала я благодарна Сергею Владимировичу Лукьянцеву, сотрудникам Московского зоопарка Михаилу Вячеславовичу Березину и Татьяне Владимировне Компанцевой за возможность работы с лабораторными культурами тараканов, Юлии Константиновне Зограф и Ольге Владимировне Ежовой за помощь в освоении методов трансмиссионной электронной микроскопии.

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. История изучения нематод надсемейства Thelastomatoidea В разделе представлены основные этапы в истории изучения теластоматоидей: с момента обоснования в 1929 г. Л. Травассосом надсемейства Thelastomatoidea и семейства Thelastomatidae и до их положения в современной системе, предложенной П. Де Леем и М.Л. Блакстером в 2002 г. (Цит. по Скрябин, 1951; De Ley, Blaxter, 2002).

Тип Nematoda Potts, 1932 Класс Chromadorea Inglis, 1983 Отряд Rhabditida Chitwood, 1933 Инфраотряд Oxyuridomorpha De Ley et Blaxter, 2002 Надсемейство Thelastomatoidea Travassos, 1929 Семейство Hystrignathidae Travassos, 1919 Семейство Thelastomatidae Travassos, 1929 Семейство Protrelloididae Chitwood, 1932 Семейство Travassosinematidae Rao, 1958

1.2. Общая морфология теластоматоидей В разделе дано морфологическое описание нематод-теластоматоидей.

1.3. Жизненный цикл теластоматиодей В разделе описан жизненный цикл теластоматоидей, одной из особенностей которого является то, что эмбриональное развитие завершается линькой личинки первого возраста, последующим сокращением длины ее тела и образованием почти сферической, покоящейся внутри оболочки яйца личинки 2-й стадии. В таком состоянии личинка пребывает до заглатывания следующим подходящим хозяином (Спиридонов, 1983).

1.4. Экология и образ жизни теластоматоидей Нематоды надсемейства Thelastomatoidea населяют заднюю кишку, различных насекомых: тараканов (Blattoptera), прямокрылых (Orthoptera:

Tettigoniidae; Gryllidae и Gryllotalpidae), пластинчатоусых жуков (Coleoptera:

Scarabaeidae), жуков-водолюбов (Coleoptera: Hydrophilidae) и личинок двукрылых (Diptera: Tipulidae), а также многоножек (Myriapoda: Diplopoda) и дождевых червей (Oligochaeta). Это типичные обитатели беспозвоночных с хорошо развитой пищеварительной системой, которая обеспечивает почти полное переваривание пищи, медленное продвижение ее по кишечнику, довольно длительное удерживание содержимого в задней кишке и богатую бактериальную флору (Филипьев, 1934; Спиридонов, 1998).

1.5. Изучение структуры яйцевых оболочек В разделе рассмотрены общая схема и особенности организации оболочки (или скорлупы) яиц оксиурид, которая состоит из пяти слоев: наружного и внутреннего маточных слоев, вителлинового (желточного), хитинового и липидного (Bird, 1971). Три последних имеют эндогенное происхождение и формируются за счет материала ооцита, маточные слои откладываются на поверхности яйца в результате секреторной активности железистого эпителия матки (Юшин, 2001).

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава состоит из четырех разделов, посвященных сбору материала и описанию методик обезвоживания нематод, приготовления глицериновых препаратов, исследования в световом, сканирующем и трансмиссионном электронных микроскопах, а также проведению молекулярно-филогенетического анализа (таблица 1).

В настоящей работе объектом исследований выбран 21 вид нематод надсемейства Thelastomatoidea. Собранный материал представлен как разными личиночными стадиями, так и половозрелыми особями самцов и самок. Хозяевами изученных теластоматоидей являются тараканы восьми видов, а также дождевые черви, многоножки, медведки и пластинчатоусые жуки (по одному виду).

Насекомые были предоставлены из культур инсектариев Московского зоопарка (М.В. Березиным) и кафедры защиты растений Института биологии, экологии, почвоведения, сельского и лесного хозяйства Томского государственного университета (С.В. Лукьянцевым), а также собраны С.Э. Спиридоновым в лесу национального парка Би Дуп-Нуй Ба (Вьетнам) и в Квинсленде (Австралия).

Электронно-микроскопические исследования и работа по приготовлению ультратонких срезов проводились в Межкафедральной лаборатории электронной микроскопии Биологического факультета МГУ имени М.В. Ломоносова.

–  –  –

3. РЕЗУЛЬТАТЫ

3.1. Особенности морфологии и онтогенетического развития теластоматид на примере Blatticola blattae из рыжего таракана В разделах 3.1.1. и 3.1.2. приводятся морфологические описания взрослых особей (самцов и самок) и личинок самок 3-й и 4-й стадий развития, а также кратко рассмотрены особенности анатомического строения Blatticola blattae и описаны два продольных среза поздней линяющей личинки 1-й стадии на уровне истмуса и базального бульбуса пищевода.

3.1.3. Тонкая морфология и ультраструктура яйцевой оболочки Blatticola blattae Яйца Blatticola blattae продолговатые, заостренные к обоим концам, 105–130 мкм в длину и 45–56 мкм в ширину. Крышечка отсутствует (рис. 1А).

Оболочка, толщиной около 2 мкм состоит из пяти слоев: двух маточных (наружного и внутреннего), вителлинового, хитинового и липидного.

Самый внутренний слой оболочки – это тонкий осмиофильный липидный слой, подстилающий, в свою очередь, хитиновый, который отличается значительно меньшей электронной плотностью и относительно гомогенной структурой (его толщина равна 0.76–0.79 мкм) (рис. 2). На вершинах яйцевой оболочки данный слой утолщается в 2–3 раза. С внешней стороны он покрыт в виде двойной мембраны липопротеидным вителлиновым слоем. Далее следует внутренний маточный слой (в толщину 0.7–0.74 мкм), который состоит из переплетающихся между собой в тесном контакте электронно-плотных волокон и содержит обособленные друг от друга полости, частично заполненные маточным секретом.

Наружный маточный слой представляет собой довольно сложную структуру из плотно прилегающих камер, преимущественно в виде шестигранной призмы (рис.

3). В тангенциальной плоскости они имеют форму шестиугольника, местами пятиугольника (0.87–0.910.59–0.67 мкм), в поперечном сечении – четырехугольника (0.58–0.60.49–0.53 мкм), и ограничены стенками из рыхлого материала средней электронной плотности, толщиной от 30 до 50 нм (рис. 3В).

Между ними существует щелевидное пространство в 8–15 нм (рис. 3Г). Со стороны, направленной к внутреннему маточному слою (в плоскости шестиугольной грани), у отдельных камер хорошо различимы выступы, несущие на себе темно-окрашенные частицы (рис. 1Б; 3Г). В совокупности эти камеры образуют своеобразную сотовидную структуру. Снаружи поверхность всей яйцевой оболочки покрыта дополнительным тонким электронно-светлым волокнистым слоем, в высоту до 63 нм. В нем хорошо различимы особые тяжи, расстояние между которыми составляет примерно 24 нм. В местах стыка смежных камер данный слой пронизан порами.

3.2. Сравнительное изучение стадий онтогенетического развития теластоматид тараканов Раздел включает морфологические описания личинок самцов и самок 3-й и 4-й стадий развития трех видов теластоматид – Hammerschmidtiella cristata, Leidynema delatorrei и L. portentosae. Данные описания сопровождаются таблицей основных морфометрических показателей исследованных нематод, масштабированными графическими рисунками и фотоснимками со сканирующего электронного микроскопа.

3.3. Анализ последовательностей D2D3 участка большой субъединицы рибосомы для разграничения видов и определения таксономической принадлежности теластоматид тараканов 3.3.1. Использование нуклеотидных последовательностей D2D3 участка 28S рДНК для дифференциации двух видов теластоматид рода Hammerschmidtiella Нуклеотидные данные были использованы для разграничения двух видов рода Hammerschmidtiella – H. cristata и типового вида рода H. diesingi. Для оценки межродовой изменчивости по данному домену ДНК в список исследуемых таксонов были включены представители еще трех родов теластоматид: Cranifera, Leidynema и Severianoia (таблица 2).

–  –  –

Различия между двумя видами хаммершмидтиелл составляют 74 нуклеотида (10.3% от общего числа сравниваемых нуклеотидов), в то время как между представителями рода Hammerschmidtiella и нематодами трех других родов – от 130 до 151 нуклеотида на исследованный участок (от 16.2 до 21.3% от общего числа сравниваемых нуклеотидов). Таким образом, наблюдается определенный разрыв в уровне межвидовых и межродовых различий.

3.3.2. Использование нуклеотидных последовательностей D2D3 участка 28S рДНК для подтверждения конспецифичности самцов и самок теластоматид тараканов Последовательности D2D3 участка большой субъединицы рибосомы использованы для подтверждения конспецифичности самцов и самок теластоматид рода Aoruroides, выделенных из вьетнамских тараканов подсемейства Panesthiinae.

На основе полученных нами последовательностей, а также двух последовательностей для нематод этого же рода из Австралии, депонированных в ГенБанке (NCBI GenBank) А. Джексом с соавторами (Jex et al., 2006;

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/) было построено выравнивание.

Визуальное изучение этого выравнивания не только показало полную идентичность последовательностей для самца и самки, но и позволило выявить различия в шесть нуклеотидов между теластоматидами рода Aoruroides из Австралии и Вьетнама.

3.3.3. Использование нуклеотидных последовательностей D2D3 участка 28S рДНК для определения собранного в природе материала по теластоматидам тараканов Последовательности D2D3 сегмента большой субъединицы рибосомы использовали для определения выделенных нами видов теластоматид из австралийских тараканов-панестиин. Проведено сравнение с последовательностями, депонированными А. Джексом с соавторами в ГенБанке (NCBI GenBank) (Jex et al., 2006; http://www.ncbi.nlm.nih.gov/).

Выравнивание показало почти абсолютное совпадение нуклеотидных последовательностей между выявленными нами представителями родов Desmicola, Cordonicola и Blattophila с последовательностями из ГенБанка. Таким образом, данные теластоматиды относятся, как минимум, к тем же родам, что и ранее исследованный австралийский материал.

3.4. Использование анализа нуклеотидных последовательностей большой субъединицы рибосомы для реконструкции филогении теластоматид беспозвоночных 3.4.1. Оптимизация методов анализа и списка анализируемых таксонов надсемейства Thelastomatoidea В данном варианте филогенетического анализа в качестве внешней группы сравнения был выбран вид Plectus minimus (рис. 4А). Анализ проводился методами максимальной экономии и связывания ближайших соседей. В результате оба метода анализа дали деревья со сходной топологией. Большая часть представителей надсемейства Thelastomatoidea образовывала единую группу с разным уровнем бутстрэп-поддержки: 93% в МР-анализе и 65% в NJ-анализе.

Нематоды рода Travassosinema примыкали к внешней группе; рода Cameronia и Hystrignathus образовывали на кладограммах отдельные ветви, которые прилегали к базальному узлу для всех остальных теластоматоидей.

Анализ взаимосвязи внутренних узлов филогении теластоматоидей показал, что в обоих вариантах анализа 100% бутстрэп-поддержку получили группы из двух родов Cranifera и Severianoia, Binema и Singhiella и двух видов рода Leidynema – L.

appendiculata и L. portentosae; 90% бутстрэп-поддержки в MP-дереве и 100% в NJдереве – группа паразитов тараканов, состоящая из родов Hammerschmidtiella, Bilobostoma, Malaspinanema и Blattophila, соответственно, 98% и 96% поддержки демонстрировала группа из родов Aoruroides, Desmicola, Cordonicola и Thelastoma.

Типовой для семейства и надсемейства род Thelastoma, оказывается связанным с одним из терминальных узлов филогении группы. В данных кладограммах стабильную связь, хотя и с низкими уровнями бутстрэп-подержки с группой (Mesidionema+(Binema+Singhiella)) демонстрирует род Syphacia (паразиты задней кишки мышевидных грызунов). Представители рода Blatticola (B. blattae) связаны в обоих кладограммах со срединными узлами полученных деревьев и занимают положение, близкое к базальному узлу для всех теластоматоидей.

При использовании в качестве внешней группы сравнения нематод вида Plectus minimus топология деревьев была, в общих чертах, сходной, но положение некоторых ветвей варьировало. Большая часть внутренних узлов филогении теластоматоидей оставалась неразрешенными, поскольку показывала низкий уровень поддержки. В качестве внешней группы сравнения выбран вид Ascaris lumbricoides (рис. 4Б).

Анализ кладограмм, полученных с использованием Ascaris lumbricoides в качестве внешней группы, показал, что отношения между основными выявленными эволюционными линиями теластоматоидей все же не разрешены, хотя и демонстрируют в некоторых случаях более высокий уровень поддержки.

Так, представители родов Hystrignatus, Travassosinema и Cameronia образовывают единую группу. Бустстрэп-поддержка монофилии Thelastomatoidea оказывается средней при анализе методом максимальной экономии и очень слабой в анализе по методу максимального правдоподобия (84% и 56%, соответственно). Различным представляется и положение на кладограммах нематоды Syphacia obvelata, а также взаимоотношения этого таксона с нематодами надсемейства Thelastomatoidea. В обоих вариантах анализа хорошую поддержку показывает группа из родов Aoruroides, Desmicola, Cordonicola и Thelastoma, а также эволюционная линия из пяти полученных нами последовательностей нематод тараканов (Bilobostoma, двух видов Hammerschmidtiella, а также родов Malaspinanema и Blattophila).

Отличия между кладограммами, полученными методами максимальной экономии и максимального правдоподобия, незначительны и сводятся к тому, что в ML-кладограмме роды Cranifera, Severianoia и Leidynema объединяются между собой с очень слабой поддержкой, тогда как в кладограмме, построенной по методу максимальной экономии, эти три группы теластоматоидей не образуют единой группы. Род Blatticola в ML-кладограмме при несущественной поддержке примыкает к базальному узлу для всех Thelastomatoidea, тогда как в MPкладограмме он связан с узлом, единым для трех ветвей теластоматид тараканов (((Cranifera+Severianoia)+Leidynema)+(Bilobostoma+Hammerschmidtiella)+(Malaspinema+Blattophila)).

В полученных кладограммах положение оксиурид рода Syphacia “неустойчивое”, общий уровень бутстрэп-поддержки для большей части внутренних узлов этих кладограмм оказывался низким. В окончательном варианте анализа было решено использовать в качестве внешней группы сравнения вид Ascaris lumbricoides и исключить из числа анализируемых таксонов оксиуриду позвоночных.

3.4.2. Анализ филогении Thelastomatoidea с использованием Ascaris lumbricoides в качестве внешней группы сравнения Анализ такого состава таксонов был проведен всеми четырьмя методами (рис. 5). Бутстрэп-поддержка некоторых узлов значительно выросла при исключении сифаций. На кладограмме, построенной по методу максимальной экономии, 100% поддержку имеет базальный узел для всех теластоматоидей, кроме нематод родов Mesidionema, Binema и Singhiella. В то же время другие базальные узлы филогении теластоматоидей не получают достоверной поддержки (например, группа из родов Hystrignathus, Travassosinema и Cameronia). Поддержка группы из родов Aoruroides, Desmicola, Cordonicola и Thelastoma, также очень высокая и достигает 99%. В данных кладограммах высоким уровнем поддержки характеризуется объединение родов Cranifera и Severianoia, рода Leidynema и группы из четырех родов теластоматид тараканов (Bilobostoma, Hammerschmidtiella, Malaspinanena и Blattophila).

Изменчивым, как и в предыдущих вариантах анализа, оказывается положение рода Blatticola, который или образует единый кластер с ветвью Aoruroides, Desmicola, Cordonicola, и Thelastoma, однако без существенного уровня поддержки, или просто связан с базальным узлом для всех теластоматоидей в NJ-кладограмме.

Результаты, полученные методом максимального правдоподобия, в целом, повторяют топологию двух деревьев, построенных методами максимальной экономии и связывания ближайших соседей, однако взаимоотношения среди выявленных групп теластоматоидей остаются неразрешенными.

Байесов анализ дает топологии фактически идентичные таковым, полученным методом максимального правдопобия. Достоверную поддержку в 100% демонстрирует группа из трех родов Binema, Singhiella и Mesidionema, и высокую поддержку – обратная вероятность 97% – монофилия теластоматоидей.

Достоверным в данном варианте анализа также представляется базальное положение рода Blatticola в пределах всего надсемейства. Следующий базальный узел, объединяющий группу Hystrignatus, Travassosinema и Cameronia, обладает незначительным уровнем поддержки, как и последующий узел, связывающий группу Aoruroides, Desmicola, Cordonicola, и Thelastoma, с группой оксиурид тараканов. Напротив, последняя группа – оксиуриды тараканов – получают достаточно высокую поддержку – 96% обратной вероятности в Байесовом анализе.

3.5. Биологическое разнообразие нематод тараканов и специфичность их связей с хозяевами 3.5.1. Распределение видов теластоматид по видам тараканов в исследованном материале Интересным представляется анализ распределения видов нематод семейства Thelastomatidae по таксономическим группам их хозяев. Из числа обследованных нами насекомых четыре вида тараканов не были заражены нематодами – это Cryptocercus sp., Nauphoeta cinerea, Panchlora nivea и Schultesia lampiridiformis.

Теластоматиды отличаются разной степенью специфичности по отношению к определенному виду насекомого, в организме которого они обитают. Так, у тараканов Blattella germanica и Leucophaea maderae отмечается паразитирование единственного и специфичного для этого вида хозяина вида теластоматид Blatticola blattae и Leidynema delatorrei, соответственно.

В то же время встречаются и ассоциации из нескольких видов нематод, обитающих в одном таком хозяине:

между Hammerschmidtiella и Leidynema, Leidynema и Cranifera, Cranifera и Severianoia.

Среди лабораторных культур тараканов максимальное число видов (три вида) теластоматид отмечалось у Periplaneta americana. При вскрытии крупных деревогрызущих тараканов-панестиин из Вьетнама и Австралии было выявлено значительно большее число видов нематод. Однако точная оценка их биологического разнообразия оказалась затруднительной из-за недостаточной разработанности систематики группы.

В разделе приведены краткие описания нескольких морфологических типов самцов и самок теластоматид, выделенных из задней кишки вьетнамских тараканов-панестиин.

3.5.2. Описание нового и переописание одного вида теластоматид В разделах 3.5.2.1. и 3.5.2.2. представлены переописание вида Hammerschmidtiella cristata Spiridonov, 1984 из таракана Gromphadorhina portentosa, содержащегося в культуре инсектария Московского зоопарка, и описание нового вида нематод Severianoia blapticola Guzeeva, 2009 из таракана Blaptica dubia из культуры инсектария Института биологии, экологии, почвоведения, сельского и лесного хозяйства Томского государственного университета. Каждый раздел включает таблицу основных морфометрических показателей, масштабированные графические рисунки и фотоснимки со сканирующего электронного микроскопа.

3.5.3. Распределение видов нематод-теластоматид по линиям эволюционного развития тараканов В данном разделе представлен анализ распределения теластоматид по отдельным эволюционным линиям насекомых подотряда Таракановые (Blattoptera).

В качестве основы были использованы филогенетические схемы взаимоотношений между отдельными эволюционными группами тараканов (Grandcolas, D’Haese, 2001).

Если для вида Leidynema appendiculata можно указать семь видов хозяев, относящихся к самым разным эволюционным линиям, то вид L. porentosae обитает в кишечнике только у мадагаскарских тараканов-громфадорин. Такая же высокая специфичность отмечается и для другой нематоды из громфадорин – Hammerschmidtiella cristata, притом, что другой вид хаммершмидтиелл – H. diesingi обнаруживается у блаттид и блаберид. Для некоторых форм можно указать специфичность на уровне отдельной эволюционной линии тараканов. Таким образом, можно заключить, что теластоматидам свойственны разные уровни специфичности в выборе хозяина.

4. ОБСУЖДЕНИЕ

В результате проведенных исследований получены новые данные по строению, тонкой морфологии и ультраструктуре поверхности тела и яйцевых оболочек теластоматид тараканов, а также построены кладограммы, отражающие возможные пути эволюционного развития теластоматоидей в целом.

4.1. Анализ морфологических особенностей теластоматоидей в сравнении с полученной филогенетической схемой группы Раздел, основанный на оригинальных и литературных данных, посвящен сравнительному анализу морфологии и жизненного цикла исследованных нематод надсемейства Thelastomatoidea.

4.2. Морфологические и молекулярные признаки в систематике теластоматид:

межвидовые и межродовые различия Одним из результатов исследования стало определение уровня нуклеотидных различий между видами теластоматид, относящихся к одному роду.

Такие данные были получены для двух видов у родов Hammerschmidtiella и Leidynema. Морфологическое сравнение хаммершмидтиелл, H. diesingi и H.

cristata, выявило существенные морфологические различия между ними (Гузеева, Спиридонов, 2009). Было показано, что данные виды значительно различаются в пропорциях корпуса и базальной части пищевода самок. У самцов H. cristata на передней губе клоакального отверстия хорошо различимы небольшие пальцевидные выступы, образующие особую гребневидную структуру, тогда как у H. diesingi подобные выступы отсутствуют. Заметные различия имеются и в строении яйцевых оболочек. Анализ последовательности D2D3 сегмента 28S рДНК выявил различия в 74 позициях, т.е. порядка 10% от сравниваемого участка.

Видимо, именно такой уровень соответствует уровню межвидовых различий у теластоматид.

Такое предположение подтверждается и сравнением видов Leidynema appendiculata и L. portentosae. У самцов L. portentosae имеются мощные латеральные крылья, а также две пары меньших по размеру крыльев спереди и сзади от основных, кутикулярное вооружение в виде выступов и шипов, отсутствующее у самцов типового вида рода L. appendiculata. Самки L.

appendiculata лишены выступа, несущего экскреторную пору, и выступа с вульварным отверстием, свойственные L. portentosae. Уровень нуклеотидных различий между двумя этими видами составляет 9.9% – величину того же порядка, что и для хаммершмидтиелл.

Данные по более короткой части D2D3 участка рибосомальной последовательности также были использованы для разграничения двух видов рода Aoruroides.

Можно видеть, что последовательности D2D3 сегмента 28S рДНК могут быть применены для достаточно надежного разграничения видов теластоматид. В то же время очевидна необходимость использования представительной части этого домена, поскольку более короткие последовательности не дают достоверного уровня различий.

4.3. Использование морфологических и молекулярных признаков в реконструкции эволюционной истории теластоматид и выделении надродовых групп в надсемействе Thelastomatoidea 4.3.1. Нематоды родов Binema и Singhiella из задней кишки медведок Нематоды родов Binema и Singhiella паразитируют в медведках (Gryllotallpidae) (Adamson, 1989; Adamson, Van Waerebeke, 1992).

Яйцевые оболочки не несут крышечек и имеют хорошо заметные пучки филаментов, отходящих от обоих полярных участков оболочки (Basir, 1956;

Leibesperger, 1960; Фам Ван Лык, Спиридонов, 1988; Adamson, Van Waerebeke, 1992; Spiridonov, Zograf, 2007). Самцы Binema и Singhiella имеют не менее 6–7 пар папилл с сохранением в преклоакальной области трех пар. У Binema имеется хорошо выраженная одинарная спикула с расширенной головкой, тогда как у Singhiella спикула отсутствует (Rao, 1958).

4.3.2. Группа, представленная родами Thelastoma–Cordonicola–Desmicola и Aoruroides В литературе нематоды данной филогенетической ветви описаны из разных беспозвоночных, но самым широким кругом хозяев обладают нематоды рода Thelastoma, отмеченные у дождевых червей, многоножек, скорпионов, тараканов и пластинчатоусых жуков (Poinar, 1978; Van Waerebeke, 1987; Adamson, Van Waerebeke, 1992; Spiridonov, Ivanova, 1998; Barus, Koubkova, 2002). Представители трех других родов, за исключением десмикол, которые обнаруживаются также у многоножек и пластинчатоусых жуков, известны только у тараканов (Basir, 1956;

Van Waerebeke, 1969; Spiridonov, Ivanova, 1998; Adamson, 1984a).

Группа, состоящая их двух родов Thelastoma и Cordonicola, представлена в кладограммах, построенных всеми четырьмя методами анализа. Самцы обоих родов имеют выраженный клоакальный выступ, на котором сгруппированы три пары папилл, и довольно тонкий филамент хвоста, где всегда хорошо различима пара каудальных папилл. Эллипсоидные оболочки яиц обычно без какой-либо скульптуры и орнаментации и лишены крышечек. По этим признакам к паре родов близки и представители рода Desmicola. Существенные отличия между тремя родами выявляются в строении головной капсулы. Нематоды рода Aoruroides в данной группе всегда занимают базальное положение преимущественно со средней статистической поддержкой (NJ – 93%, ML – 83%). И самцы, и самки Aoruroides имеют достаточно хорошо выраженные морфологические отличия: у самцов нет спикулы, клоакального выступа и характерного как для трех родов этой ветви расположения папилл; оконечность головного конца самок несет сильно выступающее кольцо из восьми псевдолабий. К числу других особенностей можно отнести строение пищевода самок: у Thelastoma, Cordonicola и Desmicola имеется длинный цилиндрический корпус, короткий истмус и грушевидный базальный бульбус; у Aoruroides он превращается в своеобразное, почти сферическое образование, соединенное с базальной частью посредством тонкого длинного и гибкого истмуса (Chitwood, Chitwood, 1934; Kloss, 1966; Jex et al., 2004).

4.3.3. Группа, представленная двумя видами рода Leidynema Нематоды рода Leidynema паразитируют только у тараканов (Adamson, 1989).

Самки характеризуются расширенной передней частью кишечника и наличием особого направленного назад сокращающегося зоба (Chitwood, 1932;

Спиридонов, 2001). Латеральные крылья их заканчиваются в области анального отверстия остроконечными шиповидными выступами (Chitwood, 1932;

Leibersperger, 1960; Van Waerebeke, 1978). У самцов наблюдается редукция хвостового конца. Клоакальное отверстие смещается почти на самую оконечность хвостового конца, вокруг которого располагаются три пары папилл.

Нематоды Leidynema portentosae отличаются от L. appendiculata и L.

delatorrei открывающимися на вершине особых выступов тела экскреторной порой и вульвой. На поверхности тела самцов этого вида на дорсальной стороне располагаются округлые кутикулярные выступы, тогда как на вентральной стороне

– столбчатые. Имеются три пары крыльев (Van Waerebeke, 1978; Reif et al., 2005).

Самцы типового вида рода не несут подобных образований на кутикуле, однако у L. delatorrei на головном конце на первых 14 кутикулярных кольцах хорошо различимы своеобразные “ребрышки” (Leibersperger, 1960).

4.3.4. Группа, представленная родами Cranifera и Severianoia Нематоды рода Severianoia обитают в кишечнике многоножек, тараканов и пластинчатоусых жуков, тогда как нематоды рода Cranifera, также как и Leidynema, отмечены только у тараканов (Chitwood, 1932; Pereira, 1935; Adamson, 1989;

Adamson, Van Waerebeke, 1992; Camino, Szathmary, 2001; Гузеева, 2009).

Самки родов Cranifera и Severianoia заметно отличаются друг от друга. Это касается как общей формы тела, так и формы пищевода, а также хвостового конца и оболочек яиц. В отличие от самок самцы Cranifera и Severianoia характеризуются рядом общих признаков: наличием четырех пар папилл с одинаковой топологией их расположения (преклоакальная, постклоакальная, латеральная и каудальная у основания филамента хвоста); наличием столбчатых кутикулярных выступов различной высоты на поверхности тела (у самцов S. blapticola они располагаются на вентральной стороне, а у самцов C. cranifera – как на дорсальной, так и на вентральной сторонах тела) и присутствием латеральных крыльев (Leibersperger, 1960; Гузеева, 2009).

4.3.5. Группа, состоящая из родов Bilobostoma и Hammerschmidtiella Провести анализ морфологических признаков сходства в пределах этой стабильной группы в построенных кладограммах сложно, поскольку род Bilobostoma с единственным известным видом B. exerovulva Jex, Schneider, Rose et Cribb, 2005 описан только по самкам. В мировой литературе представлено 12 видов теластоматид рода Hammerschmidtiella, преимущественно это обитатели кишечника тараканов и многоножек (Adamson, Van Waerebeke, 1992; Гузеева, Спиридонов, 2009).

Из признаков морфологического сходства, выявляемых на световом уровне, можно отметить лишь форму пищевода, поскольку и у хаммершмидтиелл, и у билобостом корпус пищевода расширяется кзади, образуя заметный метакорпальный бульбус (Lee, 1958; Jex et al., 2005; Гузеева, Спиридонов, 2009).

4.3.6. Группа, представленная родами Blattophila и Malaspinanema Подобная ситуация складывается и с анализом морфологических сходств и различий в группе двух родов Blattophila и Malaspinanema. Последний род был описан лишь на материале, состоящим из самок (Jex et al., 2005). Общей чертой самок Blattophila и самок рода Malaspinanema является переднее положение вульвы, V' = 30%.

4.3.7. Группа Hystrignathus+Travassosinema+Cameronia К числу групп, образующихся в кладограммах при всех методах анализа, относится ветвь из трех таксонов: пары Travassosinema+Cameronia и примыкающего к ним рода Hystrignathus. Представители рода Travassosinema – паразиты многоножек, тараканов и личинок пластинчатоусых жуков (Adamson, 1989).

Морфологическая особенность этих нематод состоит в наличии головного зонтика (умбракулюма) на переднем конце самок (Hunt, 1983). Яйца имеют эллипсоидную форму и лишены какой-либо скульптуры на поверхности, филаментов и крышечек. Самцы характеризуются короткими латеральными крыльями, заканчивающимися на уровне пищевода, редуцированным хвостовым концом с медианным терминальным мукро; тремя парами папилл, окружающими клоакальное отверстие, и спикулой с округлой головкой (Rao, 1958). Группа, сестринская для травассосинем, нематоды рода Cameronia – паразиты медведок, но совершено отличные по строению от Binema, Singhiella, Indiana и Pulchrocephala.

Важная отличительная особенность камероний – особые изогнутые яйца с двумя крышечками на каждом из полюсов. У самцов Cameronia почти полностью редуцирован хвостовой отдел тела, филамент хвоста представлен в форме небольшого дорзального шипа. Имеются три пары клоакальных латеровентральных папилл (Leibersperger, 1960).

Нематоды рода Hystrignathus паразитируют в особых камерах-выступах на задней кишке имагинальных стадий жуков семейства Passalidae. Самки крупные, с поперечными рядами направленных назад шипов. Самцы значительно меньше и лишены шипов, без спикулярного аппарата, хвостовой конец несет особый якоревидный терминус.

4.3.8. Объединение Mesidionema с парой Binema+Singhiella К числу необъяснимых объединений таксонов относится стойкое, хотя и слабо поддерживаемое в большинстве кладограмм образование единой группы из нематод Mesidionema от дождевых червей и пары родов нематод медведок – Binema+Singhiella.

Найти какие-либо морфологические признаки, поддерживающие такое объединение, не удается. Нематоды рода Mesidionema представляют необычное сочетание признаков: сильно измененная форма пищевода (укороченный овальный в проекции пищевод без разделения на корпус и базальную часть), самцы с четырьмя парами папилл и единственной спикулой. Образование данной группы следует рассматривать как артефакт, связанный, вероятно, с удаленностью как, Binema+Singhiella, так и мезидионем от всех остальных исследованных нематод.

Вероятно, в данном случае мы имеем дело с так называемым явлением притяжения длинных ветвей (long branch attraction).

4.4. Плезиоморфные и апоморфные признаки в таксономии и филогении оксиурид беспозвоночных Проведенный анализ основных морфологических признаков, характеризующих отдельные эволюционные линии, выделенные по результатам молекулярно-филогенетического исследования, позволяет оценить их таксономический вес и эволюционное значение. В данном разделе рассмотрены апоморфные и синапоморфные признаки в строении изученных теластоматоидей.

На рис. 6 представлены основные апоморфии и синапоморфии в эволюции нематод надсемейства Thelastomatoidea: 1 – редукция папилл у самцов; 2 – яйца веретеновидные, с искривленной продольной осью оболочки; 3 – яйца с неискривленной продольной осью оболочки; 4 – яйца с крышечкой; 5 – отсутствие крышечки; 6 – вместо крышечки система швов (дальнейшая эволюция признака, апоморфного для теластоматид); 7 – редукция хвостового конца у самцов; 8 – наличие кутикулярных выступов на поверхности тела самцов; 9 – формирование у самок корпуса пищевода с расширяющимся кзади метакорпальным бульбусом; 10 – переднее положение вульвы, V' = 30%; 11 – наличие зобовидного мешка (цекума) в передней части средней кишки самок; 12 – развитие монодельфной половой системы у самок; 13 – ярко выраженный у самцов клоакальный выступ в виде продолговатого расширяющегося кзади отростка тела (на нем располагаются три пары папилл и одна пара на филаменте хвоста); 14 – яйцевые оболочки несут пучки филаментов, отходящих от обоих полярных участков; 15 – паразитирование в тараканах.

ВЫВОДЫ

1. Теластоматиды, обитающие в задней кишке тараканов, составляют особую группу надсемейства Thelastomatoidea, в пределах которой можно выявить несколько эволюционных линий; достоверность этих линий подтверждается как в деревьях, построенных по молекулярным данным, так и по наличию характерных морфологических синапоморфий.

2. У культивируемых в инсектариях тараканов нами выявлен новый для науки вид этих нематод – Severianoia blapticola, тогда как в кишечнике тараканов, обитающих в тропических экосистемах, обнаружены многочисленные виды, сосуществующие в одной особи хозяина, причем большая часть выявленных форм относится к новым, неописанным видам. Предложен и опробован способ надежного отнесения к одному виду самцов и самок при сильно выраженном половом диморфизме, основанный на сравнении нуклеотидных последовательностей одиночных особей.

3. Изучение личиночных стадий теластоматид тараканов показало существование целого ряда морфологических адаптаций, сильно разнящихся между личинками разного пола и стадии. Для большей части личинок свойственно упрощенное строение пищевода, вероятно напоминающее его предковое состояние.

4. Изучение ультраструктуры оболочек яиц Blatticola blattae показало существенные различия в организации маточных слоев оболочки между этой нематодой и ранее изученными оксиуридами. Такие ультраструктурные различия соответствуют обособленному положению Blatticola на кладограммах, построенных по результатам анализа нуклеотидных последовательностей.

5. Нуклеотидные последовательности D2D3 сегмента 28S рДНК могут использоваться для решения вопросов систематики нематод надсемейства Thelastomatoidea, в том числе для первичного определения вновь обнаруживаемого в природе материала, и для разграничения близких видов теластоматид. Данные по этому участку ДНК могут быть использованы и в решении вопросов филогении Thelastomatoidea и Oxyurida, хотя не все внутренние узлы таких кладограмм оказываются разрешенными. Так, эти данные указывают на необходимость переноса в состав отряда Oxyurida нематод рода Mesidionema (семейство Mesidionematidae), обитающих в кишечнике дождевых червей.

6. Различные методы филогенетического анализа последовательностей D2D3 сегмента ДНК домена большой субъединицы рибосомы в результате дают деревья со сходной топологией, что может рассматриваться как свидетельство в пользу достоверности полученных кладограмм. Высокий уровень поддержки получает монофилия группы Thelastomatoidea, в понимании М.Л. Адамсона и Д.

ван Веребека, за исключением представителей компактной группы видов оксиурид медведок (Binema и Singhiella), а также паразитирующих в дождевых червях представителей рода Mesidionema.

7. К числу надежных синапоморфий, объединяющих всех Thelastomatoidea, можно отнести лишь признак редукции числа генитальных папилл и их концентрации вокруг клоакального отверстия у самцов. Некоторые другие эволюционные линии в пределах Thelastomatoidea характеризуются другими синапоморфиями, например, формированием особой веретеновидной формы оболочек яиц, а также образованием крышечек на полюсах яиц.

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Spiridonov S.E., Guzeeva E.A., Lukyantsev S.V. The sequence analysis of D2D3 domain of LSU rDNA of Thelastomatidae (Thelastomatoidea, Oxyurida) from hind gut of cockroaches. Abstracts of the 5th International Symposium of the Russian Society of Nematologists (Russia, Vladivostok, 13–17 July, 2003). Russian Journal of Nematology, 2003, V. 11, № 2, P. 148–149.

2. Гузеева Е.А. Нематоды надсемейства Thelastomatoidea в культурах лабораторных тараканов: зараженность и видовое разнообразие. Материалы юбилейной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых МФСХ. Томск: Дельтаплан, 2004, С. 86–88.

3. Гузеева Е.А. Изучение нематод надсемейства Thelastomatoidea.

Материалы XLIII международной научной студенческой конференции “Студент и научно-технический прогресс”: Биология. Новосибирск: Новосибирский государственный университет, 2005, С. 142–143.

4. Guzeeva E.A., Lukyantsev S.V. Thelastomatid nematodes in cockroaches of laboratory cultures: species diversity and intensity of infection. Abstracts of the 6th International Symposium of the Russian Society of Nematologists (Russia, Moscow, 13– 17 June, 2005). Russian Journal of Nematology, 2005, V. 13, № 2, P. 146–147.

5. Лукьянцев С.В., Гузеева Е.А., Мавропуло В.А. Паразиты кишечника тараканов. Материалы II межрегиональной научной конференции “Паразитологические исследования в Сибири и на Дальнем Востоке”.

Новосибирск: Арт-Авеню, 2005, С. 119–120.

6. Гузеева Е.А. Изучение биологических особенностей теластоматид, обитающих в кишечнике лабораторных насекомых. Материалы международной научной конференции “Фауна, биология, морфология и систематика паразитов”.

Москва: Российская академия наук, 2006, С. 101–103.

7. Guzeeva E.A., Spiridonov S.E. Distinction of two species of the genus Hammerschmidtiella (Thelastomatidae, Oxyurida) with SEM and molecular-taxonomic data. Abstracts of the 7th International Symposium of the Russian Society of Nematologists (Russia, Petrozavodsk, 9–14 July, 2007). Russian Journal of Nematology, 2007, V. 15, № 2, P. 166–167.

8. Guzeeva E.A., Malysheva S.V., Luc P.V., Spiridonov S.E. Intestinal parasitic nematodes of Vietnamese invertebrates: new findings. Abstracts of the 5th International Congress of Nematology (Australia, Brisbane, 13–18 July, 2008), P. 229.

9. Гузеева Е.А. Специфичность, видовые комплексы и структура инфрапопуляции нематод семейства Thelastomatidae (Oxyurida: Nematoda).

Материалы IV Всероссийского Съезда Паразитологического общества при Российской академии наук “Паразитология в XXI веке – проблемы, методы, решения”. Санкт-Петербург: Паразитологическое общество при Российской академии наук, 2008, С. 194–198.

10. Гузеева Е.А., Спиридонов С.Э. Дифференциация двух видов нематод рода Hammerschmidtiella (Thelastomatidae, Oxyurida) по морфологическим и молекулярным признакам. Зоологический журнал, 2009, Т. 88, № 2, С. 131–142.

11. Guzeeva E.A., Spiridonov S.E. The egg-shell ultrastructure of Blatticola blattae (Oxyurida: Thelastomatidae). Abstracts of the 19th Symposium of Nematological Society of Southern Africa (South Africa, Hazyview, 17–21 May, 2009), P. 54–55.



Pages:   || 2 |

Похожие работы:

«ГРИГОРЬКИНА ЕВГЕНИЯ СЕРГЕЕВНА УЧЕТ ВОЗРАСТНЫХ ОСОБЕННОСТЕЙ ВЕРХНЕЧЕЛЮСТНОЙ ПАЗУХИ В ДИАГНОСТИКЕ И ЛЕЧЕНИИ СИНУСИТА Специальность 14.01.03 – болезни уха, горла и носа АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Пенза 2016 Работа выполнена на кафедре стоматологии Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Пензенский государственный университет» Министерства Образования и науки...»

«ДОРОНИН Максим Игоревич ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ ВЫЯВЛЕНИЯ ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО НЕКРОЗА ГЕМОПОЭТИЧЕСКОЙ ТКАНИ ЛОСОСЕВЫХ РЫБ 03.02.02 «Вирусология» Aвтореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Владимир – 2015 Работа выполнена в федеральном государственном бюджетном учреждении «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГБУ «ВНИИЗЖ»). доктор биологических наук Научный руководитель: Мудрак Наталья Станиславовна Грищенко Леонид Иванович – Официальные...»

«УДК 572 ЛАПШИНА Наталья Евгеньевна ТЕМПЫ СТАРЕНИЯ МУЖЧИН И ЖЕНЩИН СТАРШЕ 60 ЛЕТ В СВЯЗИ С МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫМИ И НЕКОТОРЫМИ ГЕНЕТИЧЕСКИМИ ОСОБЕННОСТЯМИ 03.03.02 – «антропология» по биологическим наукам Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва – 2014 Работа выполнена на кафедре антропологии биологического факультета Московского государственного...»

«АНДРЕЕВА НАДЕЖДА МИХАЙЛОВНА МЕТОДИКА ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ДОРОЖНЫХ КАРТ ПРИ ЭЛЕКТРОННОМ ОБУЧЕНИИ СТУДЕНТОВ ИНФОРМАТИКЕ (на примере экономических и биологических направлений подготовки) 13.00.02 – Теория и методика обучения и воспитания (информатика, уровень профессионального образования) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Красноярск – 2015 Работа выполнена в Федеральном государственном автономном образовательном учреждении высшего...»

«Курбонов Косим Муродович СОВРЕМЕННЫЕ ЭПИЗООТОЛОГО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ И НАДЗОР ЗА БРУЦЕЛЛЕЗОМ В РЕСПУБЛИКЕ ТАДЖИКИСТАН 14.02.02 – эпидемиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва – 2015 Работа выполнена в Таджикском научно-исследовательском институте профилактической медицины Министерства здравоохранения и социальной защиты населения Республики Таджикистан Научные руководители: Доктор медицинских наук, профессор...»

«Гармаева Татьяна Цыреновна ВИРУСНЫЕ ГЕПАТИТЫ В И С У БОЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ СИСТЕМЫ КРОВИ 14.01.21 – Гематология и переливание крови АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Москва 2012 Работа выполнена в Федеральном Государственном Бюджетном Учреждении «Гематологический научный центр» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации Научный консультант: д.м.н., профессор, академик РАМН Савченко Валерий Григорьевич...»

«Марцев Антон Андреевич ВЛИЯНИЕ ФАКТОРОВ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ НА ЗАБОЛЕВАЕМОСТЬ НАСЕЛЕНИЯ ВЛАДИМИРСКОЙ ОБЛАСТИ Специальность 03.02.08 экология (в биологии) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Владимир 2015 Работа выполнена на кафедре биологии и экологии Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Владимирский государственный университет имени Александра Григорьевича и...»

«ДУБОВСКИЙ ИВАН МИХАЙЛОВИЧ Эволюция резистентности вощинной огневки Galleria mellonella (L.) к энтомопатогенным бактериям и грибам 03.02.05 – энтомология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Новосибирск – 2015 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Институте систематики и экологии животных Сибирского отделения Российской академии наук в лаборатории патологии насекомых. доктор биологических наук,...»

«Фишман Вениамин Семенович СРАВНЕНИЕ ПРОСТРАНСТВЕННОЙ ОРГАНИЗАЦИИ ГЕНОМОВ ФИБРОБЛАСТОВ И СПЕРМАТОЗОИДОВ МЫШИ МЕТОДОМ Hi-C 03.02.07 – генетика Автореферат Диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Новосибирск 2015 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном научном учреждении «Федеральный исследовательский центр Институт цитологии и генетики Сибирского отделения Российской академии наук» в лаборатории генетики развития, г. Новосибирск....»

«ЗОЛОТУХИН ДМИТРИЙ СЕРГЕЕВИЧ РАЗРАБОТКА ФАГОИНДИКАЦИИ И УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ИДЕНТИФИКАЦИИ HAFNIA ALVEI С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ СПЕЦИФИЧЕСКОГО БАКТЕРИОФАГА 03.02.03 – микробиология 03.01.06 – биотехнология (в том числе бионанотехнологии) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Саратов – 2013 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Ульяновская государственная...»

«ЖИРКОВ АЛЕКСЕЙ ДМИТРИЕВИЧ ПРОФИЛАКТИКА МИКОТОКСИКОЗОВ ЛОШАДЕЙ ТАБУННОГО СОДЕРЖАНИЯ С ПРИМЕНЕНИЕМ ПРОБИОТИКА САХАБАКТИСУБТИЛ В УСЛОВИЯХ ЯКУТИИ 06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Новосибирск 2015 Работа выполнена в Государственном научном учреждении «Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства»...»

«Дандал Али Шебли ПАТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО БРОНХИТА КУР 06.02.02 «ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология» АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Владимир-2015 Работа выполнена в ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГБУ «ВНИИЗЖ) Россельхознадзора и в ФГБАОУ ВПО «Российский университет дружбы народов» Научный руководитель: Макаров Владимир...»

«Курбидаева Амина Султановна Изучение роли гена ICE2 Arabidopsis thaliana в контроле устойчивости растений к холоду Специальность 03.02.07 – генетика АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: д.б.н., профессор Ежова Т.А. Москва – 2015 Работа выполнена на кафедре генетики биологического факультета Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Московский...»

«ДОБРЕНЬКОВ ДМИТРИЙ СЕРГЕЕВИЧ ХАРАКТЕРИСТИКА БИОЦЕНОТИЧЕСКИХ ОТНОШЕНИЙ БАКТЕРИАЛЬНЫХ СООБЩЕСТВ ПОЛОСТИ РТА И МИКРОЭКОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИНЦИПОВ БИОКОРРЕКЦИИ 03.02.03 – Микробиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Волгоград Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения...»

«Подсвирова Ирина Александровна Микробиологический мониторинг патогенов гнойновоспалительных заболеваний в хирургических отделениях и отделении реанимации и интенсивной терапии в многопрофильном стационаре 03.02.03 – микробиология Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских наук Москва — 2014 Работа выполнена в ГБОУ ВПО Ставропольский государственный медицинский университет Минздрава Российской Федерации Научные руководители: Миронов Андрей...»

«СЕЛИФОНОВА Жанна Павловна СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ЭКОСИСТЕМ ЗАЛИВОВ И БУХТ ЧЕРНОГО И АЗОВСКОГО МОРЕЙ (РОССИЙСКИЙ СЕКТОР) Специальность 25.00.28 – Океанология Д 002.140.01 Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Мурманск, 2015 Работа выполнена в ФГБУН Мурманском морском биологическом институте КНЦ РАН и ФГБОУ...»

«ГОРДЕЕВА Ольга Федоровна ЗАКОНОМЕРНОСТИ НОРМАЛЬНОГО И ПАТОЛОГИЧЕСКОГО РАЗВИТИЯ ПЛЮРИПОТЕНТНЫХ СТВОЛОВЫХ И ТЕРАТОКАРЦИНОМНЫХ КЛЕТОК МЛЕКОПИТАЮЩИХ 03.03.04.– клеточная биология, цитология, гистология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Москва – 2014 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Институт биологии развития им Н.К. Кольцова РАН, Москва Научный консультант: Васецкий Сергей Григорьевич доктор...»

«ШАХТАМИРОВ Иса Янарсаевич КАРИОПАТОЛОГИЯ У ЖИВОТНЫХ В ЗОНАХ СТОЙКИХ ОРГАНИЧЕСКИХ ЗАГРЯЗНИТЕЛЕЙ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ 03.02.07 – генетика АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Санкт-Петербург Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении высшего профессионального образования «Чеченский государственный университет» Научный консультант: доктор биологических наук, профессор Кравцов Вячеслав Юрьевич Официальные оппоненты:...»

«САГИТОВА МИНЗИЛЯ ГАБДУЛХАЕВНА ГИГИЕНИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ ПОЛИСАХАРИДА «ГРАМО» В ПТИЦЕВОДСТВЕ 06.02.05 ветеринарная санитария, экология, зоогигиена и ветеринарно-санитарная экспертиза АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Казань – 2015 Работа выполнена в условиях кафедры зоогигиены федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Казанская государственная академия...»

«Орлова Кристина Вячеславовна ИЗУЧЕНИЕ КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКИХ И МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИХ АСПЕКТОВ КАРЦИНОМЫ МЕРКЕЛЯ 14.01.12 — онкология Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских наук Москва – 2015 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном научном учреждении «Российский онкологический научный центр имени Н.Н.Блохина» (директор – академик РАН, профессор Михаил Иванович Давыдов) Научные руководители: Демидов Лев Вадимович Доктор...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.