WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:     | 1 | 2 || 4 |

«ГИДРОЛИЗ РАЦЕМИЧЕСКИХ АМИДОВ ФЕРМЕНТАМИ ПОЧВЕННЫХ АКТИНОБАКТЕРИЙ ...»

-- [ Страница 3 ] --

В результате экспериментов было выявлено, что среди штаммов, использующих фенилглицинонитрил в качестве источника азота, 9 штаммов были способны гидролизовать рацемический субстрат с образованием Dизомера, 13 – с образованием L-изомера и 53 штамма не проявляли стереоселективности (таблица 15).

________________________

4 Результаты получены лично.

–  –  –

Изучена динамика гидролиза фенилглицинонитрила клетками штаммов 10и, 25, М1, 4-1, Ас6, 6-1, обладающих наибольшей удельной активностью гидролиза D,L-фенилглицинонитрила (D,L-ФГН). Показано, что штамм Rhodococcus rhodochrous 4-1 обладает максимальной активностью гидролиза D,L-ФГН (рисунок 28). На основании полученных результатов он был выбран для дальнейшего исследования.

–  –  –

качестве индукторов в концентрации 0,1%. После 48 часов инкубации измеряли оптическую плотность, амидазную и нитрилгидратазную активность клеток. Затем проводили трансформацию 50 мМ D,Lфенилглицинонитрила.

В результате данного эксперимента было выявлено, что увеличение нитрилгидролизующей активности клеток вызывали все использованные нитрилы (рисунок 29). Клетки, индуцированные 0,1% бензонитрилом, показали максимальную активность по отношению к D,Lфенилглицинонитрилу.

–  –  –

Рисунок 29 – Индукция нитрилгидролизующей активности клеток R. rhodochrous 4-1 разными нитрилами.

Для определения влияния концентрации индуктора на активность были использованы разные концентрации бензонитрила – 0,025, 0,05 и 0,1%.

Клетки, индуцированные 0,05% бензонитрилом, гидролизовали L-изомер D,L-фенилглицинонитрила с максимальной скоростью (1,5 мкмоль/мг/мин) и энантиомерным избытком (68%). Повышение концентрации индуктора до 0,1% приводило к снижению скорости и степени конверсии. Вероятно, в более высокой концентрации индуктор оказывал токсичный эффект на бактериальные клетки.

5.1.3. Трансформация D,L-фенилглицинонитрила изолированной амидазой R. rhodochrous 4-1 Дальнейшие исследования по трансформации рацемического фенилглицинонитрила проводили с использованием изолированных нитрилгидролизующих ферментов – нитрилгидратазы и амидазы. Изучали влияние концентрации субстрата на активность и стереоселективность Lспецифичной амидазы (рисунок 30).

–  –  –

Рисунок 30 – Влияние концентрации D,L-фенилглицинонитрила на энантиомерный избыток (1) и активность (2) амидазы R. rhodochrous 4-1.

Было показано, что высокие концентрации субстрата значительно снижали энантиомерный избыток реакции и увеличивали активность амидазы. Максимальный энантиомерный избыток (93,6%) наблюдали при концентрации фенилглицинонитрила 10 мМ.

–  –  –

5.1.5. Влияние иммобилизации нитрилгидратазы и амидазы R. rhodochrous 4-1 на стереоселективность реакции Для повышения биокаталитической эффективности процесса трансформации D,L-фенилглицинонитрила неселективная нитрилгидратаза и L-специфическая амидаза были совместно иммобилизованы методом ковалентной сшивки и методом поперечно-сшитых агрегатов (ПСФА).

Отмечено, что при ковалентной сшивке амидазы с активированным хитозаном, стереоселективность реакции повышается. Так, соотношение L- и D-энантиомеров фенилглицина в реакции, катализируемой ферментом в

–  –  –

В результате экспериментов было показано, что биоконверсия 10 мМ D,L-фенилглицинонитрила при температуре 10°С поперечно сшитыми агрегатами амидазы ведет к получению L-фенилглицина с выходом 48% и энантиомерным избытком 98%.

5.2. Биотрансформация L-фенилаланинамида5 Поиск микроорганизмов, обладающих L-специфической амидазной активностью по отношению к L-фенилаланинамиду осуществляли среди новых выделенных штаммов и нитрилгидролизующих штаммов лабораторной коллекции.

Методом тонкослойной хроматографии был проведен качественный анализ продуктов трансформации L-фенилаланинамида. Установлено, что гидролиз фенилаланинамида до аминокислоты фенилаланина осуществляют 16 штаммов (рисунок 33, 34, 35).

–  –  –

Фенилаланинамид Рисунок 34 – Разделение продуктов биотрансформации L-фенилаланинамида методом ТСХ: А-фенилаланинамид, К-фенилаланин.

На следующем этапе скрининга была проведена количественная оценка гидролазной активности микроорганизмов. Установлено, что максимальную активность по отношению к фенилаланинамиду проявляет штамм R.

erythropolis 6-2 1 (рисунок 36).

–  –  –

Рисунок 35 – Трансформация L-фенилаланинамида бактериальными штаммами.

В результате исследования температурной зависимости гидролиза, было показано, что максимальная скорость реакции наблюдалась при 50°С, что соответствует оптимальной температуре работы амидазы (таблица 17).

–  –  –

11-2 1,7 1,8 1,1 6-2 1 0,09 1,2 0,09 11-8 2,2 3 2,8 6-2 1 5,5 6,2 5,1 6-1 1,9 5 1,6

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Исследования энзиматического гидролиза нитрилов начались с 1980-х годов и касались, в основном, конверсий простых ахиральных нитрилов.

Интерес к стерео-, регио- и хемоселективности нитрилгидролизующих ферментов повысился относительно недавно – в начале 1990-х гг.

(Martinkova, Kren, 2002).

Процессы стереоселективного гидролиза нитрилов до соответствующих карбоновых кислот часто осуществляются при совместном функционировании нитрилгидратазы и амидазы (Fournand, Arnaud, 2001).

Стереоспецифическая конверсия нитрилов целыми клетками описана в патентной литературе (Jallageas et al., 1994). Однако тщательный анализ выявляет, что стереоселективна именно амидаза (Gilligan et al., 1993).

Известны лишь единичные примеры стереоселективности нитрилгидратаз (Payne et al., 1997; Masutomo et al., 1995).

Проведен скрининг микроорганизмов, способных гидролизовать D,Lлактамид до D- и L-изомеров молочной кислоты. В результате селекции получены штаммы – продуценты амидаз R. rhodochrous 4-1 и Arthrobacter sp.

6-1, клетки которых обладали наибольшей D-стереоселективностью по отношению к рацемическому лактамиду.

Исследовано влияние различных факторов на стереоселективные свойства амидаз, как изолированных, так и функционирующих в клетке.

Установлено, что изолированные ферменты проявляют более высокую стереоселективность, чем амидазы, имеющие внутриклеточную локализацию. Вероятно, это связано с наличием клеточной мембраны, которая создает значительные препятствия для диффузии субстрата к ферменту, снижая его стереоселективные свойства. Кроме того, в клетках имеется несколько ферментов, способных трансформировать субстрат в продукты противоположной конфигурации. Например, было показано, что индукция нитрилазы Rhodococcus sp. CGMCC 0497, которая обладает противоположной стереоселективностью, ведет к снижению энантиоселективности амидазы того же штамма (Wu, 2002).

В экспериментах было выявлено, что максимальная амидазная активность штамма R. rhodochrous 4-1 проявляется при росте на среде с многоатомными спиртами – сорбитом, инозитом, дульцитом. Подобный эффект известен у штамма R. erythropolis MTCC 1526, максимальная амидазная активность которого проявлялась при использовании сорбитола в качестве источника углерода (Bhalchandra et al., 2009). Максимальная активность амидазы штамма Arthrobacter sp. 6-1 зарегистрирована при росте на муравьиной кислоте.

Ранее было показано, что присутствие амидов или нитрилов в среде культивирования вызывает индукцию амидазной активности (Hughes et al., 1998). Нами установлено, что ацетонитрил служит не только источником азота для роста клеток, но и индуктором амидаз штаммов R. rhodochrous 4-1 и Arthrobacter sp. 6-1. Так, уровень амидазной активности при росте клеток R. rhodochrous 4-1 на среде с ацетонитрилом был в 2,5 раза выше, чем в контроле.

Количество образующейся биомассы на средах с разными источниками углерода было различным. Наибольшее накопление бактериальных клеток наблюдалось при выращивании их на среде с маннитом, инозитом, лимонной и янтарной кислотами. Однако строгой корреляции между накоплением клеток в культуре и биосинтезом фермента установлено не было.

В литературе имеются работы, посвященные исследованию влияния условий культивирования бактерий на их энантиоселективные свойства (Yamamoto et al., 1990; Yamamoto et al., 1991; Wu, 2002). Путем оптимизации состава среды для роста культуры Rhodococcus sp. CGMCC 0497, удалось повысить не только амидазную активность по отношению к 2фенилпропионамиду, но и S-стереоселективность штамма (Wu, 2002).

В данной работе использование оптимальных источников углерода и азота для роста и проявления амидазной активности привело к незначительному повышению (на 2-15%) стереоселективных свойств обоих штаммов.

Для изучения влияния иммобилизации на стереоселективность амидаз клетки штаммов R. rhodochrous 4-1 и Arthrobacter sp. 6-1 адсорбировали на пористом углеродном адсорбенте БАУ. В результате экспериментов было выявлено не только значительное снижение амидазной активности, но и полная потеря стереоселективности ферментов. Вероятно, снижение доли одного из оптических изомеров при трансформации иммобилизованными на углеродном носителе клетками вызвано присутствием носителя в образце, приводящее к рацемизации молочной кислоты.

Получены препараты амидазы R. rhodochrous 4–1, иммобилизованной методом ковалентной сшивки с хитозаном. Проведен сравнительный анализ некоторых каталитических свойств свободной и иммобилизованной на активированном хитозане амидазы. Показано, что иммобилизованный фермент сохраняет 50–60% исходной активности, проявляет большую термостабильность по сравнению с амидазой в растворе и сохраняет более 20% активности на протяжении пяти 24-часовых циклов трансформации акриламида. Установлено, что при иммобилизации методом ковалентной сшивки с хитозаном амидаза не теряет своих D-стереоспецифических свойств и катализирует гидролиз рацемического лактамида с энантиомерным избытком 31,6%.

Были получены поперечно-сшитые агрегаты ферментов при высаливании сульфатом аммония с одновременной сшивкой бифункциональными реагентами - глутаровым альдегидом и бензохиноном.

Метод поперечно-сшитых ферментных агрегатов в настоящее время является широко распространенным методом иммобилизации ферментов. Уже продемонстрировано успешное применение пероксидаз (Sulek et al., 2011), липаз (Wilson et al., 2006; Hara et al., 2008), нитрилаз (Kumar et al., 2010) и эстераз (Park et al., 2010), иммобилизованных поперечной сшивкой. Так, иммобилизация методом ПСФА оксинитрилазы позволила не только повысить стабильность фермента, но и увеличить выход реакции и оптическую чистоту получаемого продукта (ее увеличился с 91% до 95%) (Groger et al., 2001). Поперечно сшитые агрегаты амидазы R. erythropolis были успешно применены в энантиоселективном гидролизе 4-хлор-3гидроксибутиронитрила до соответствующей кислоты. Свободный фермент катализировал конверсию R-изомера с выходом 57% и энантиомерным избытком 52%. Благодаря использованию ПСФА выход реакции был увеличен до 85% с оптической чистотой 93% (Park et al., 2010).

Нами было показано, что иммобилизация амидаз методом поперечно сшитых ферментных агрегатов позволила увеличить стереоселективность трансформации D,L-лактамида с 78 до 92% для R. rhodochrous 4-1 и с 64 до 84% для Arthrobacter sp. 6-1 по сравнению с гидролизом лактамида ферментом в растворе. При этом сохранялось около 30% исходной активности ферментов в случае сшивки глутаровым альдегидом и 9-28% - в случае использования бензохинона.

Установлено, что стереоселективность амидаз является температурнозависимой. Образование изомеров молочной кислоты происходило в диапазоне 30-60°С, при этом максимальная активность амидаз наблюдалась при 50-60°С. Температура ниже 20°С и выше 60°С приводила к снижению энантиоселективности обоих ферментов. Очевидно, что важную роль в этом процессе играет температура рацемизации (Kaul et al., 2007).

Согласно теории переходного состояния, энантиоселективность является результатом разницы между свободной энергией активации энантиомеров, которая имеет энтальпический и энтропический компонент. В данном случае энтальпия и энтропия благоприятствуют образованию комплекса D-изомера с активным центром амидазы.

В ходе работы было показано, что энантиоселективность амидаз увеличивается в слабокислой среде и максимальна при рН среды, равной 6.0.

Подобное явление было описано в литературе для нитрилазы, 100 катализирующей стереоселективный гидролиз D,L-фенилглицинонитрила до D-изомера фенилглицина (Wang et al., 2001).

Проведены эксперименты по биотрансформации D,Lфенилглицинонитрила. Подобраны оптимальные условия гидролиза рацемического субстрата, которые соответствуют низкой скорости спонтанного (неферментативного) гидролиза с одновременной высокой активностью и стереоселективностью биокатализатора. В результате биоконверсии 10 мМ D,L-фенилглицинонитрила поперечно сшитыми агрегатами амидазы R. rhodochrous 4-1 был получен L-фенилглицин с выходом 48% и энантиомерным избытком 98%.

Опубликованные ранее данные сообщали о биоконверсии 5 мМ Dфенилглицинонитрила иммобилизованными клетками Rhodococcus sp. NOVO SP 361, которая приводила к получению 94% D-фенилглицина с энантиомерным избытком 92%. При увеличении концентрации субстрата до 100 мМ, наблюдался его быстрый распад, и D-фенилглицин был получен с выходом всего 37% (Wegman et al., 2000).

По данным литературы, максимальный выход D-фенилглицина (96%) с энантиомерным избытком 95% наблюдали при 5°С (Wegman et al., 2000).

Вероятно, низкая температура стабилизирует субстрат, склонный к спонтанной деградации и рацемизации.

Отмечено, что по отношению к D,L-лактамиду амидаза R. rhodochrous 4-1 проявляла D-стереоселективность, тогда как гидролиз D,Lфенилглицинонитрила проходил с образованием L-изомера. Подобное явление, наблюдаемое при стереоселективной трансформации субстратов другими ферментами, в научной литературе было обозначено термином «инверсия стереоселективности». В зависимости от структуры субстрата липазы Rhizomucor miehei и Humicola lanuginose проявляли разную энантиоселективность к эфирам 2-метилдекановой кислоты (Holmquist et al., 1993). D-пептидаза Actinomadura R39 проявляла строгую D-специфичность к ди- и трипептидам, а также гидролизовала тиоловые эфиры, чьи Стерминальные группы находились в L-конфигурации (Damblon et al., 1995).

Методом тонкослойной хроматографии проведен качественный анализ продуктов трансформации L-фенилаланинамида. Выявлено 16 штаммов, способных к гидролизу субстрата до аминокислоты.

Штамм R. erythropolis 6-2 1 трансформировал фенилаланинамид с максимальной амидазной активностью 6,2 мкмоль/мг/мин при 50°С.

Таким образом, изучены основные факторы, влияющие на стереоселективность амидаз, разработан эффективный метод получения гетерогенного биокатализатора, позволяющий увеличивать энантиомерную чистоту продукта реакции, показана возможность биотехнологического применения поперечно сшитых агрегатов амидазы в энзиматическом синтезе аминокислот.

ВЫВОДЫ

1. В процессе селекции получены штаммы – продуценты амидаз R. rhodochrous 4-1 и Arthrobacter sp. 6-1, способные к стереоселективной трансформации D,L-лактамида с максимальным энантиомерным избытком 44 и 43% соответственно.

2. Установлено, что оптимальными источниками углерода и азота для роста и проявляения амидазной активности R. rhodochrous 4-1 являются дульцит и ацетонитрил, Arthrobacter sp. 6-1 – муравьиная кислота и ацетонитрил соответственно. Показано, что оптимизированная среда не влияет на стереоселективные свойства штаммов по отношению к D,L-лактамиду.

3. Иммобилизация амидазы 4-1 методом R. rhodochrous ковалентной сшивки с 0,1% хитозаном привела к повышению термо- и операционной стабильности фермента. Показана возможность длительного хранения высушенного иммобилизованного ферментного препарата.

4. Образование поперечно сшитых агрегатов амидаз позволило увеличить стереоселективность трансформации D,L-лактамида с 78 до 92% для фермента из R. rhodochrous 4-1 и с 64 до 84% для фермента из Arthrobacter sp. 6-1 по сравнению с их нативной формой.

5. Определено, что максимальный энантиомерный избыток реакции трансформации D,L-лактамида наблюдается при рН 6.0 и температуре 40-60°С.

6. Установлено, что оптимальными условиями для биотрансформации D,L-фенилглицинонитрила являются температура реакции 10°С, концентрация субстрата 10 мМ, а наиболее эффективным биокатализатором этого процесса – поперечно сшитые ферментные агрегаты амидазы R. rhodochrous 4-1.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Беликов, В. М. Аминокислоты для сельского хозяйства, пищевой промышленности и здравоохранения / В. М. Беликов, В. Г. Дебабов, Н.

Я. Тюряев // Вестник АН СССР. – 1980. № 4. – С. 18-25.

2. Березин, И. В. Иммобилизованные ферменты. Современное состояние и перспективы / И. В. Березин, В. К. Антонов, К. Мартинек. – Москва:

МГУ, 1976. – т. 2. – 137 с.

3. Дебабов, В. Г. Биокаталитический гидролиз нитрилов / В. Г. Дебабов, А. С. Яненко // Обзорный журнал по химии. – 2011. – № 4. – С. 376Коваленко, Г. А. Каталитичсекие свойства глюкоамилазы, иммобилизованной на углеродном носителе Сибунит / Г. А. Коваленко, Л. В. Перминова, Т. Г. Терентьева, Г. В. Плаксин // Прикладная биохимия и микробиология. – 2007. – Т. 43. – № 4. – С. 412-418.

5. Кузнецова, М. В. Физиолого-биохимическая характеристика штаммов рода Rhodococcus - продуцентов нитрилгидратазы: дисс. … канд. биол.

наук: 03.00.07 / Кузнецова Марина Валентиновна. – П., 2004. – 123 с.

6. Лавров, К.В. Новая ациламидаза из Rhodococcus erythropolis ТА37, способная гидролизовать N-замещенные амиды / К.В. Лавров, И.А.

Залунин, Е.К. Котлова, А.С. Яненко // Биохимия. – 2010. – T. 75. – Вып.

8. – C. 1111-1119.

7. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. – Москва: Высшая школа, 1990. – 352 с.

8. Максимов, А. Ю. Влияние нитрилов и амидов на рост и нитрилгидратазную активность штамма Rhodococcus sp. gt1 / А. Ю.

Максимов и др. // Прикладная биохимия и микробиология. – 2003. – № 1. – С. 63-68.

9. Перцович, С.И. Алифатическая амидаза Rhodococcus rhodochrous – представитель семейства нитрилаз/цианидгидратаз / С.И. Перцович, Д.Т. Гуранда, Д.А. Подчерняев [и др.] // Биохимия. – 2005. – Т. – 70. – № 11. – С. 1556-1565.

10. Потапов, В. М. Стереохимия / В. М. Потапов // Москва: Химия, 1988. – 464 с.

11. Сафонова, Э. Н. Успехи в области синтеза и производства аминокислот / Э. Н. Сафонова, В. М. Беликов // Успехи химии. – 1974.

– № 9. – С. 1575-1609.

12. Тишков, В. И. Современные тенденции развития процессов биокаталитического синтеза хиральных соединений / В. И. Тишков, Е.

А. Зайцева // Вестник Московского Университета. – 2008. – Т.49. – № 2.

– С. 138-141.

13. Халиуллин, И. Г. Биоинформатический анализ и молекулярное моделирование участия Lys65 в каталитической триаде Dаминопептидазы из Ochrobactrum anthropi / И. Г. Халиуллин, Д. А.

Суплатов, Д. Н. Шалаева, М. Оцука, Я. Асано, В. К. Швядас // Acta naturae. – 2010. – № 2. – С. 70-74.

14. Хоулт Д. Определитель бактерий Берджи / Д. Хоулт // Москва: Мир, 1997. – Т. 1, 2.

15. Швядас, В. К. Ферментативное превращение рацематов в энантиомеры аминокислот / В. К. Швядас, И. Ю. Галаев // Успехи химии. – 1983. – № 12. – С. 2039-2071.

16. Шпак, В. С. Пути получения и использования синтетических аминокислот / В. С. Шпак, И. Я. Тюряев // Вестник АН СССР. – 1983.

№ 2. С. 107.

17. Якубке, Х.-Д. Аминокислоты. Пептиды. Белки / Х.-Д. Якубке, Х. М.

Ешкайт. – Москва: Мир, 1985. – 82 с.

18. Alcalde, M. Environmental biocatalysis: from remediation with enzymes to novel green processes / M. Alcalde, M. Ferrer, F. Plou, A. Ballesteros // Trends in Biotechnology. – 2006. – V. 24. – P. 281-287.

19. Alonso, F. Enantiomerically pure D-phenylglycine production using immobilized Pseudomonas aeruginosa 10145 in calcium alginate beads / F.

Alonso, O. Antunes, E. Oestreicher // Journal of the Brazilian Chemical Society. – 2007. – V. 18. – P. 566-572.

20. Alonso, F. Production of enantiomerically pure D-phenylglycine using Pseudomonas aeruginosa 10145 as biocatalyst / F. Alonso, E. Oestreicher, O. Antunes // Brazilian Journal of Chemical Engineering. – 2008. – V. 25.

– P. 1-8.

21. Arima, J. Bacillus D-stereospecific metallo-amidohydrolase: active-site metal-ion substitution changes substrate specificity / J. Arima, Y. Uesugi, T.

Hatanaka // Biochimie. – 2009. – V. 91. – P. 568-576.

22. Arnaud, A. Amidase activity of some bacteria / A. Arnaud, P. Galzy, J.

Jallageas // Folia Microbiologica. – 1976. – V. 21. – P. 178-184.

23. Asano, Y. A new D-stereospecific amino acid amidase from Ochrobactrum anthropi / Y. Asano, T. Mori, S. Hanamoto, Y. Kato, A. Nakazawa // Biochemical and Biophysical Research Communications. – 1989. – V. 162.

– P. 470-474.

24. Baek, D. Characterization of a thermostable D-stereospecific alanine amidase from Brevibacillus borstelensis BCS-1 / D. Baek, S.-J. Kwon, S.-P.

Hong, M.-S. Kwak, M.-H. Lee, J. Song, S.-G. Lee, K.-H. Yoon, M.-H. Sung // Applied and Environmental Microbiology. – 2002. – V. 69. – P. 980-986.

25. Baek, D. New thermostable D-methionine amidase from Brevibacillus borstelensis BCS-1 and its application for d-phenylalanine production / D.

Baek, J. Song, S-G. Lee, S. Kwon, Y. Asano, M.-H. Sung // Enzyme and Microbial Technology. – 2003. – V. 32. – P. 131-139.

26. Bauer, R. Enantioselective hydrolysis of racemic 2-phenylpropionitrile and other (R,S)-2-arylpropionitriles by a new bacterial isolate Agrobacterium tumefaciens strain d3 / R. Bauer, B. Hirrlinger, N. Layh, A. Stolz, H. J.

Knackmuss // Applied Microbiology and Biotechnology. – 1994. – V. 42. – P.1-7.

27. Bercovici, D. Industrial amino acids in nonruminant animal nutrition / D.

Bercovici, F. Fuller // Biotechnology in Animal Feeds and Animal Feeding.

Chapter 6. – 1995.

– P. 93-113.

28. Bommarius, A. S. Synthesis and use of enantiomerically pure tert-leucine / A. S. Bommarius, M. Schwarm, K. Stingl, M. Kottenhahn, K. Huthmacher, K. Drauz // Tetrahedron Asymmetry. – 1995. – V. 6. – P. 2851-2888.

29. Bell, G. Biocatalyst behaviour in low-water systems / G. Bell, P. J. Halling, B. D. Moore, J. Partridge, D. G. Rees // Trends in biotechnology. –1995. – V. 13. – P. 468-473.

30. Bovara, R. Effects of water activity on Vmax and Km of lipase catalyzed transesterification in organic media / R. Bovara, G. Carrea, G. Ottolina, S.

Riva // Biotechnology Letters. – 1993. – V15. – P. 937-942.

31. Bovara, R. Water activity does not influence the enantioselectivity of lipase PS and lipoprotein lipase in organic solvents / R. Bovara, G. Carrea, G.

Ottolina, S. Riva // Biotechnology Letters. – 1993. – V. 15. – P. 169-174.

32. Bradford, M. M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding / M. M. Bradford // Analytical Biochemistry. – 1976. – V. 72. – P. 248–254.

33. Breuer, M. Industrial methods for the production of optically active intermediates / M. Breuer, K. Ditrich, T. Habicher, B. Hauer, M. Keeler, R.

Strmer, T. Zelinski // Angewandte Chemie International Edition. – 2004. – V. 43. – P. 788-824.

34. Broos, J. Flexibility of enzymes suspended in organic solvents probed by time-resolved fluorescence anisotropy. Evidence that enzyme activity and enantioselctivity are directly related to enzyme flexibility / J. Broos, A. J.

Visser, J. F. Engbersen, W. Verboom, A. Hoek, D. N. Reinhout // Journal of the American Chemical Society. – 1995. – V. 117. – P. 12657-12663.

35. Bruggink, A. Synthesis of -lactam antibiotics: chemistry, biocatalysis and process integration / A. Bruggink, P.D. Roy. – Dordrecht: Kluwer Academic Publishers, 2001. – 103 p.

36. Burteau, N. Stabilisation and immobilization of penicillin amidase / N.

Burteau, S. Burton, R. R. Crichton // FEBS Letters. – 1989. – V. 258. – P.

185-189.

37. Cai, G. Cloning, sequence analysis and expression of the gene encoding a novel wide-spectrum amidase belonging to the amidase signature superfamily from Achromobacter xylosoxidans / G. Cai, S. Zhu, X. Wang, W. Jiang // FEMS Microbiology Letters. – 2005. – V. 249. – P. 15-21.

38. Cantarella, M. Amidase-catalyzed production of nicotinic acid in batch and continuous stirred membrane reactors / M. Cantarella, L. Cantarella, A.

Gallifuoco, R. Intellini, O. Kaplan, A. Spera, L. Martnkov // Enzyme and Microbial Technology. – 2008. – V. 42. – P. 222-229.

39. Carrea, G. Effect of reaction conditions on the activity and enantioselectivity of lipases in organic solvents / G. Carrea, G. Ottolina, S.

Riva, F. Secundo // Biocatalysis in non conventional media. Progress in biotechnology. – 1992. – V. 8. – P. 111-119.

40. Cacaval, D. 6-Aminopenicillanic acid production in stationary basket bioreactor with packed bed of immobilized penicillin amidase-Penicillin G mass transfer and consumption rate under internal diffusion limitation / D.

Cacaval, M. Turnea, A.-I. Galaction, A. C. Blaga // Biochemical Engineering Journal. – 2012. – V. 69. – P. 113-122.

41. Chacko, S. A comparative study on the production of amidase using immobilized and dehydrated immobilized cells of Pseudomonas putida MTCC 6809 / S. Chacko, P. W. Ramteke, B. Joseph // Journal of Genetic Engineering and Biotechnology. – 2012. – V. 10. – P. 121-127.

42. Chand, D. Treatment of simulated wastewater containing toxic amides by immobilized Rhodococcus rhodochrous NHB-2 using a highly compact 5stage plug reactor / D. Chand, H. Kumar, U. D. Sankhian, D. Kumar, F.

Vitzthum, T. C. Bhalla // World Journal of Microbiology and Biotechnology. – 2004. – V. 7. – P. 679-686.

43. Chen, J. Microbial transformation of nitriles to high-value acids or amides / J. Chen, R.-C. Zheng, Y.-G. Zheng, Y.-C. Shen // Advances in Biochemical Engineering/Biotechnology. – 2009. – V. 113. – P. 33-77.

44. Chibata, I. Industrial application of immobilized enzyme system / I. Chibata // Pure and Applied Chemistry. - 1978. – V. 50. – P. 667-675.

45. Chibata, I. Production of L-amino acids by aminoacylase absorbed on DEAE-Sephadex / I. Chibata, T. Tosa, T. Sato, T. Mori // Methods in Enzymology. – 1976. – V. 44. – P. 746-759.

46. Choi, S.Y. Hydrolysis of the nitrile group in -aminophenylacetinitrile by nitrilase; development of a new biotechnology for stereospecific production of S--phenylglycine / S.Y. Choi, Y.M. Goo // Archives of Pharmacal Research. – 1986. – V. 9. – P. 45-47.

47. Colby, J. Immobilization of Rhodococcus AJ270 and use of entrapped biocatalyst for the production of acrylic acid / J. Colby, D. Snell, G. W.

Black // Chemical Monthly. – 2000. – V. 131. – P. 655-666.

48. Collet, A. Optical resolution by direct crystallization of enantiomer mixtures / A. Collet, M. J. Brienne, J. Jacques // Chemical Reviews. – 1980.

– V. 80. – P. 215-227.

49. Colombo, G. Application of structure-based thermodynamic calculations to the rationalization of the enantioselectivity of subtilisin in organic solvents / G. Colombo, G. Ottolina, G. Carrea // Tetrahedron: Asymmetry. – 1988. – V. 9. – P. 1205-1214.

50. Damblon, C. Thiolester substrates of DD-peptidases and beta-lactamases / C. Damblon, P. Ledent, G.-H. Zhao, M. Jamin, A. Dubus, M. Vanhove, X.

Raquet, L. Christiaens, J.-M. Frere // Letters in Peptide Science. – 1995. – V. 2. – P. 212-216.

51. Ducret, A. Lipase-catalyzed enantioselective esterification of ibuprofen in organic solvents under controlled water activity / A. Ducret, M. Trani, R.

Lortie // Enzyme and Microbial Technology. – 1998. – V. 22. – P. 212-216.

52. Egorova, K. Purification and properties of an enantioselective and thermoactive amidase from the thermophilic actinomycete Pseudonocardia thermophila / K. Egorova, H. Trauthwein, S. Verseck, G. Antranikian // Applied Microbiology and Biotechnology – 2004. – V. 65. – P. 38-45.

53. Fitzpatrick, P. How can the solvent affect enzyme enantioselectivity? / P.

Fitzpatrick, A. M. Klibanov // Journal of the American Chemical Society. – 1991. – V. 113. – P. 3166-3171.

54. Fukumura, Т. Purification and properties of a novel enzyme, L--amino-caprolactamase from Cryptococcus laurentii / Т. Fukumura, G. Talbot, H.

Misono, Y. Teramura, K. Kato, K. Soda // FEBS Letters. – 1978. – V. 89. – P. 298.

55. Galzy, P. Observations on nitrilase activity of some bacteria / P. Galzy, A.

Arnaud, J. C. Jallageas // Comptes Rendus de l'Acadmie des Sciences. – 1976. – V. 283. – P. 571-573.

56. Gilligan, T. Production of S-(+)-2-phenylpropionic acid from (R,S)-2phenylpropionitrile by the combination of nitrile hydratase and stereoselective amidase in Rhodococcus equi TG328 / T. Gilligan, H.

Yamada, T. Nagasawa // Applied Microbiology and Biotechnology. – 1993.

– V. 39. – P. 720-725.

57. Goodman, M. Peptide homologs, isosteres, and isomers: a general approach to structure-activity relationships / M. Goodman // Biopolymers. – 1985. – V. 24. – P. 137-155.

58. Grger, H. Asymmetric synthesis of an (R)-cyanohydrin using enzymes entrapped in lens-shaped gels / H. Groger, E. Capan, A. Barthuber, K.D.

Vorlop // Organic Letters. – 2001. – Vol. 3. – P. 1969-1972.

59. Guo, Z.-W. Enantioselective Inhibition: A Strategy for improving the enantioselectivity of biocatalytic systems / Z.-W. Guo, C. J. Sih // Journal of the American Chemical Society. – 1989. – P. 6836-6841.

60. Hara, P. Sol-gels and cross-linked aggregates of lipase PS from Burkholderia cepacia and their application in dry organic solvents / P. Hara, U. Hanefeld, L.T. Kanerva // Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic. – 2008. – Vol. 50. – P. 80-86.

61. Hayashi, T. Characterization and cloning of an enantioselective amidase from Comamonas acidovorans KPO-2771-4 / T. Hayashi, K. Yamamoto, A.

Matsuo, K. Otsubo, S. Muramatsu, A. Matsuda, K. Komatsu // Journal of Fermentation and Bioengineering. – 1997. – V. 83. – P. 139-145.

62. Hemraj, S. Enzymatic production of D-amino acids / S. Hemraj, H.

Nandanwar, S. Gurinder, G. Hoondal, R. M. Vohra // Microbial Enzymes and Biotransformations. – 2005. – V. 17. – P. 91-104.

63. Hensel, M. Stereoselective hydration of (RS)-phenylglycine nitrile by new

whole cell biocatalysts / M. Hensel, S. Lutz-Wahl, L. Fischer // Tetrahedron:

Asymmetry. – 2002. – V. 13. – P. 2629-2633.

64. Hermes, H. Metabolism of amino acid amides in Pseudomonas putida ATCC 12633 / H. Hermes, L. Croes, W. Peeters, L. Dijkhuizen // Applied Microbiology and Biotechnology – 1993. – V. 40. – P. 519-525.

65. Hermes, H. Purification and characterization of an L-aminopeptidase from Pseudomonas putida ATCC 12633 / H. Hermes, H. Sonke, P. Peters, J.

Balken, J. Kamphuis, L. Dijkhuizen, E. Meijer // Applied and Environmental Microbiology. – 1993. – Vol. 59. – P. 4330-4334.

66. Hermes, H. Purification and characterization of an L-amino amidase from Mycobacterium neoaurum ATCC 25795 / H. Hermes, R. Tandler, T. Sonke, L. Dijkhuizen, E. Meijer // Applied and Environmental Microbiology. – 1993. – Vol. 60. – P. 153-159.

67. Hirose, Y. Drastic solvent effect on lipase-catalyzed enantioselective hydrolysis of prochiral 1,4-dihydropyridines / Y. Hirose, K. Kaiya, I. Sasaki // Tetrahedron Letters. – 1992. – V. 33. – P. 7157-7160.

68. Hoff, B. H. The enantiomer ratio strongly depends on the alkyl part of the acyl donor in transesterification with lipase B from Candida antarctica / B.

H. Hoff, H. W. Anthonsen, T. Anthonsen // Tetrahedron: Asymmetry. – 1996. – V. 7. – P. 3187-3192.

69. Hgberg, H.-E. Water activity influences enantioselectivity in a lipasecatalysed resolution by esterification in an organic solvent / H.-E. Hgberg, H. Edlund, P. Berglund, E. Hedenstrm // Tetrahedron: Asymmetry. – 1993.

– V. 4. – P. 2123-2126.

70. Holmquist, M. Lipases from Rhizomucor miehei and Humicola lanuginosa:

modification of the lid covering the active site alters enantioselectivity / M.

Holmquist, M. Martinelle, P. Berglund, I. Clausen, S. Patkar, A. Svendsen, K. Hult // Journal of Protein Chemistry. – 1993. – V. 12. – P. 749-757.

71. Hongpattarakere, T. Purification, characterization, gene cloning and nucleotide sequencing of D-stereospecific amino acid amidase from soil bacterium: Delftia acidovorans / T. Hongpattarakere, H. Komeda, Y. Asano // Journal of Industrial Microbiology and Biotechnology. – 2005. – V. 32. – P. 567-576.

72. Hongpattarakere, T. Isolation and screening of D-amino acid amidase producing bacteria from soil samples / T. Hongpattarakere, N. Seksun, A.

Suriya // Journal of Science Education and Technology. – 2003. – V. 25. – P. 255-265.

73. Hsiao, H.-Y. Enzymatic production of amino acids / H.-Y. Hsiao, J. Walter, D. Anderson, B. Hamilton // Biotechnology and Genetic Engineering Reviews. – 1988. – V. 6. – P. 179-219.

74. Hughes, J. Antonie Van Leeuwenhoek / J. Hughes, Y.C. Armitage, K.C.

Symes. – Netherlands: Kluwer Academic Publishers, 1998. – P. 107-118.

75. Inoue, A. Asymmetric synthesis of L--methylcysteine with the amidase from Xanthobacter flavus HR303 / A. Inoue, H. Komeda, Y. Asano // Advanced Synthesis and Catalysis. – 2005. – V. 347. – P. 1132-1138.

76. Ishige, T. Whole organism biocatalysis / T. Ishige, K. Honda, S. Shimizu // Current Opinion in Chemical Biology. – 2005. – V. 9. – P. 174-180.

77. Itoh, T. Enhanced enantioselectivity of the lipase-catalyzed hydrolysis by the addition of a catalytic amount of an amino alcohol / T. Itoh, E. Ohira, Y.

Takagi, S. Nishiyama, K. Nakamura // Bulletin of the Chemical Society of Japan. – 1991. – V. 64. – P. 624-627.

78. James, S. Unnatural amino acids in drug discovery / S. James // Chemistry Today. – 2003. – V. 6. – P. 66-68.

79. Kamphuis, J. New developments in the chemo-enzymatic production of amino acids / J. Kamphuis, W. Boesten, Q. Broxterman, H. Hermes, J.

Balken, E. Meijer, H. Schoemaker // Advances in Biochemical Engineering/Biotechnology. – 1990. – V. 42. – P. 134-186.

80. Kaul, P. Cross-linked amorphous nitrilase aggregates for enantioselective nitrile hydrolysis / P. Kaul, A. Stolz, U. Banerjee // Advanced Synthesis and Catalysis. – 2007. – V. 349. – P. 2167-2176.

81. Kaul, P. Stereoselective nitrile hydrolysis by immobilized whole-cell biocatalyst / P. Kaul, A. Banerjee, U.C. Banerjee // Biomacromolecules. – 2006. – V. 7. – P. 1536-1541.

82. Ke, T. Prediction of the solvent dependence of enzymatic prochiral selectivity by means of structure-based thermodynamic calculations / T. Ke, C Wescott, A. M. Klibanov // Journal of the American Chemical Society. V. 118. – P. 3366-3374.

83. Khamduang, M. Production of L-phenylalanine from glycerol by a recombinant Escherichia coli / M. Khamduang, K. Packdibamrung, J.

Chutmanop, Y. Chisti, P. Srinophakun // Journal of Industrial Microbiology and Biotechnology. – 2009. – V. 36. – P. 1267-1274.

84. Kinoshita, M. Factors influencing enantioselectivity of lipase-catalysed hydrolysis / M. Kinoshita // Tetrahedron. – 1996. – V. 52. – P. 5397-5406.

85. Kitaguchi, H. Effects of water and water-mimicking solvents on the lipasecatalyzed esterification in apolar solvents / H. Kitaguchi, I. Itoh, M. Ono // Chemistry Letters. – 1990. – V. 7. – P. 1203-1206.

86. Kitaguchi, H. Enzymatic resolution of racemic amines: crucial role of the solvent / H. Kitaguchi, P. Fitzpatrick, J. Huber, A. M. Klibanov // Journal of the American Chemical Society. – 1989. – V. 111. – P. 3094-3095.

87. Kleemann, A. J. Pharmaceutical substances: syntheses, patents, applications / A. J. Kleemann, J. Engel, B. Kutschesr, D. Reichert. – Stuttgart: Thieme, 2001. – 1722 p.

88. Klibanov, A. M. Enzymatic production of optically active compounds in biphasic aqueous-organic systems / A. M. Klibanov, B. Cambou // Methods in Enzymology. – 1987. – V. 136. – P. 117-137.

89. Klibanov, A. M. Why are enzymes less active in organic solvents than in water? / A. M. Klibanov // Trends in biotechnology. – 1997. – V. 15. – P.

97-101.

90. Komeda, H. A novel d-stereoselective amino acid amidase from Brevibacterium iodinum: gene cloning, expression and characterization / H.

Komeda, Y. Asano // Enzyme and Microbial Technology. – 2008. – V. 43. – P. 276-283.

91. Komeda, H. Enhancement of the thermostability and catalytic activity of dstereospecific amino-acid amidase from Ochrobactrum anthropi SV3 by directed evolution / H. Komeda, N. Ishikawa, Y. Asano // Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic. – 2003. – V. 21. – P. 283-290.

92. Komeda, H. Gene cloning, nucleotide sequencing, and purification and characterization of the D-stereospecific amino-acid amidase from Ochrobactrum anthropi SV3 / H. Komeda, Y. Asano // European Journal of Biochemistry. – 2000. – V. 267. – P. 2028-2035.

93. Komeda, H. L-Stereoselective amino acid amidase with broad substrate specificity from Brevundimonas diminuta: characterization of a new member of the leucine aminopeptidase family / H. Komeda, N. Hariyama, Y. Asano // Applied Microbiology and Biotechnology. – 2006. – V. 70. – P. 412-421.

94. Komeda, H. S-Stereoselective piperazine-2-tert-butylcarboxamide hydrolase from Pseudomonas azotoformans IAM 1603 is a novel L-amino acid amidase / H. Komeda, H. Harada, S. Washika, T. Sakamoto, M. Ueda, Y. Asano // European Journal of Biochemistry. – 2004. – V. 271. – P. 1465Krieg, L. Identification and characterization of a novel D-amidase gene from Variovorax paradoxus and its expression in Escherichia coli / L. Krieg, H. Slusarczyk, S. Verseck, M.-R. Kula // Applied Microbiology and Biotechnology. – 2005. – V. 66. – P. 542-550.

96. Krieg, L. Screening for amidases: isolation and characterization of a novel D-amidase from Variovorax paradoxus / L. Krieg, M. Ansorge-Schumacher, M.-R. Kula // Advanced Synthesis and Catalysis. – 2002. – V. 9. – P. 965Kub, D. Biotransformation of nitriles by Rhodococcus equi A4 immobilized in LentiKats® / D. Kub, A. ejkov, J. Mask, V. Jirk, M.

Lemaire, E. Gallienne, J. Bolte, R. Stloukal, L. Martnkov // Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic. – 2006. – V. 39. – P. 59–61.

98. Kumar, S. Cross-linked enzyme aggregates of recombinant Pseudomonas putida nitrilase for enantioselective nitrile hydrolysis // S. Kumar, U.

Mohan, A.L. Kamble, S. Pawar, U.C. Banerjee // Bioresource Technology. – 2010. – Vol. 101. – P. 6856-6858.

99. Layh, N. Enrichment strategies for nitrile-hydrolysing bacteria / N. Layh, B.

Hirrlinger, A. Stolz, H-J. Knackmuss // Applied Microbiology and Biotechnology. – 1997. – V. 47. – P. 668-674.

100. Lee, Y.B. Bifunctional group participated nitrile group hydrolyzing enzyme model systems: hydrolysis of the nitrile group of -aminophenylacetonitrile to phenylglycineamide and phenylglycine by various thiol compounds / Y.B.

Lee, Y.M. Goo, J.K. Lee // Archives of Pharmacal Research. – 1988. – V.

11. – P. 285-291.

101. Leuchtenberger, W. Biotechnological production of amino acids and derivatives: current status and prospects / W. Leuchtenberger, K.

Huthmacher, K. Drauz // Applied Microbiology and Biotechnology. – 2005.

– V. 69. – P. 1-8.

102. Liljeblad, A. Biocatalysis as a profound tool in the preparation of highly enantiopure -amino acids / A. Liljeblad, L. Kanerva // Tetrahedron. – 2006.

– V. 62. – P. 5831–5854.

103. Lin, P. Identification and characterization of a new gene from Variovorax paradoxus Iso1 encoding N-acyl-D-amino acid amidohydrolase responsible for D-amino acid production / P. Lin, S. Su, Y. Tsai, C. Lee // European Journal of Biochemistry. – 2002. – V. 269. – P. 4868-4878.

104. Louwrier, A. The aim of amoxycillin production: characterization of a novel carbamoylase enzyme in the form of a crude, cell-free extract / A.

Louwrier, C.J. Knowles // Biotechnology and Applied Biochemistry. – 1977.

– V. 25. – P. 143-149.

105. Macadam, A. M. The stereospecific bioconversion of -aminopropionitrile to L-alanine by an immobilised bacterium isolated from soil / A. M.

Macadam, C. J. Knowles // Biotechnology Letters. – 1985. – V. 7. – P. 865Maerz, U. World markets for fermentation ingredients [Electronic source] / U. Maerz // World markets for fermentation ingredients. – 2005. – 144 p. – Режим доступа: http: //www.bccresearch.com.

107. Maestracci, M. The amidases from a Brevibacterium strain: study and applications / M. Maestracci, K. Bui, A. Thiery, A. Arnaud, P. Galzy // Advances in Biochemical Engineering/Biotechnology. – 1988. – V. 36. – P.

67-115.

108. Maestracci, M. Activity and regulation of an amidase (acylamide amidohydrolase, EC 3.5.1.4) with a wide substrate spectrum from a Brevibacterium sp. / M. Maestracci, A. Thiery, K. Bui, A. Arnaud, P. Galzy // Archives of Microbiology. – 1984. – V. 138. – P. 315-320.

109. Makhongela, H. S. A novel thermostable nitrilase superfamily amidase from Geobacillus pallidus showing acyl transfer activity / H. S. Makhongela, A.

E. Glowacka, V. B. Agarkar, B. T. Sewell, B. Weber, R. A. Cameron, D. A.

Cowan, S. G. Burton // Applied Microbiology and Biotechnology. – 2007. – V. 75. – P. 801-811.

110. Martinkova, L. Nitrile- and amide-converting microbial enzymes: stereo-, regio- and chemoselectivity / L. Martinkova, V. Kren // Biocatalysis and Biotransformation. – 2002. – V. 20. – P. 73-93.

111. Masutomo, S. Enantioselective hydrolysis of (RS)-2-isopropyl-4’chlorophenylacetonitrile by Pseudomonas sp. B21C9 / S. Masutomo, A.

Inoue, K. Kumagai, R. Murai, S. Mitsuda // Bioscience, Biotechnology and Biochemistry. – 1995. – V. 59. – P. 720-722.

112. May, O. Development of dynamic kinetic resolution processes for biocatalytic production of natural and non-natural L-amino acids / O. May, S. Verseck, A. Bommarius, K. Drauz // Organic Process Research and Development. – 2002. – V. 6. – P. 452-457.

113. Meijer, E. M. Use of biocatalysis in the industrial production of specialty chemicals / E. M. Meijer, W. H. Boesten, H. E. Schoemaker, J. A. van Balken. – Amsterdam: Elsevier Science Publishers, 1985. – P. 135-156.

114. Meth-Cohn, O. Regioselective biotransformations of dinitriles using Rhodococcus sp. AJ270 / O. Meth-Cohn, M.-X. Wang // Journal of the Chemical Society. – 1997. – P. 3197-3204.

115. Miller, J. E. Production of phenylalanine and organic acids by phosphoenolpyruvate carboxylase-deficient mutants of Escherichia coli / J.

E. Miller, Backman K. C., Connor M. J., Hatch R. T. // Journal of Industrial Microbiology. – 1987. – V. 2. – P. 143-149.

116. Nakai, T. Crystal structure of N-carbamyl-D-amino acid amidohydrolase with a novel catalytic framework common to amidohydrolases / T. Nakai, T.

Hasegawa, E. Yamashita, M. Yamamoto, T. Kumasaka, T. Ueki, H. Nanba, Y. Ikenaka, S. Takahashi, M. Sato, T. Tsukihara // Structure. – 2000. – V. 8.

– P. 729-738.

117. Nakamura, K. Effect of solvent structure on enantioselectivity of lipasecatalyzed transesterification / K. Nakamura, J. Takebe, T. Kitayama, A.

Ohno // Tetrahedron Letters. – 1991. – V. 32. – P. 4941-4944.

118. Nakamura, K. Structure of solvent affects enantioselectivity of lipasecatalysed transesterification / K. Nakamura, M. Kinoshita, A. Ohno // Tetrahedron. – 1995. – V. 51. –P. 8799-8808.

119. Nakamura, A. Principles and applications of homogeneous catalysis / A.

Nakamura, М. Tsutsui. – New York: John Wiley and Sons, 1980. – 204 p.

120. Ohtaki, A. Structure and characterization of amidase from Rhodococcus sp.

N-771: insight into the molecular mechanism of substrate recognition / A.

Ohtaki, K. Murata, Y. Sato, K. Noguchi, H. Miyatake, N. Dohmae, K.

Yamada, M. Yohda, M. Odaka // Biochimica et Biophysica Acta. – 2009. – V. 1804. – P. 184-192.

121. Okazaki, S. Crystal structure and functional characterization of a Dstereospecific amino acid amidase from Ochrobactrum anthropi SV3, a new member of the penicillin-recognizing proteins / S. Okazaki, A. Suzuki, H.

Komeda, S. Yamaguchi, Y. Asano, T. Yamane // Journal of Molecular Biology. – 2007. – V. 368. – P. 79-91.

122. Okazaki, S. Deduced catalytic mechanism of D-amino acid amidase from Ochrobactrum anthropi SV3 / S. Okazaki, A. Suzuki, H. Komeda, Y.

Asano, T. Yamane // Journal of Synchrotron Radiation. – 2008. – V. 15. – P.

250-253.

123. Orrenius, C. Candida antarctica lipase-B catalyzed kinetic resolutions substrate structure requirements for the preparation of enantiomerically enriched secondary alcanols / C. Orrenius, N. hrner, D. Rotticci, A.

Mattson, K. Hult, T. Norin // Tetrahedron: Asymmetry. – 1995. – V. 5. – P.

1217-1220.

124. Osprian, I. Large-scale preparation of a nitrile-hydrolysing biocatalyst:

Rhodococcus R 312 / I. Osprian, C. Jarret, U. Strauss, W. Kroutil, R. Orru,

U. Felfer, A. Willetts, K. Faber // Journal of Molecular Catalysis B:

Enzymatic. – 1999. – V. 6. – P. 555-560.

125. Otis, M. Synthesis and pharmacological evaluation of amide derivatives of non-steroidal anti-inflammatory drugs / M. Otis, L. Levesque, F. Marceau, J.

Lacroix, R. Gaudreault // Inflammopharmacology. – 1992. – V. 1. – P. 201Overbeeke, P. L. The temperature dependence of enzymatic kinetic resolutions reveals the relative contribution of enthalpy and entropy to enzymatic enantioselectivity / P. L. Overbeeke, J. Ottosson, K. Hult, J. A.

Jongejan, J. A. Duine // Biocatalysis and Biotransformation. – 1999. – V. 17.

– 61 p.

127. Ozaki, A. Enzymatic production of D-alanine from D,L-alaninamide by novel D-alaninamide specific amide hydrolase / A. Ozaki, H. Kawasaki, M.

Yagasaki, Y. Hashimoto // Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. – 1992. – V. 56. – P. 1980-1984.

128. Panke, S. Industrial multi-step biotransformations / S. Panke, A. Kmmel, M. Schmperli, M. Heinemann // Chemistry Today. – 2004. – V. 9. – P. 44Park, H.J. Biotransformation of amides to acids using a co-cross-linked enzyme aggregate of Rhodococcus erythropolis amidase / H. J. Park, K. N.

Uhm, H. K. Kim // Journal of Microbiology and Biotechnology. – 2010. – V. 2. – P. 325-331.

130. Payne, M.S. A stereoselective cobalt-containing nitrile hydratase / M. S.

Payne, S. J. Wu, R. D. Fallon // Biochemistry. – 1997. – V. 36. – Р. 5447Phillips, R. S. Temperature effects on stereochemistry of enzymatic reactions / R. S. Phillips // Enzyme and Microbial Technology. - 1992. – V.

14. – P. 417-419.

132. Prabu, S. C. Biodegradation of acrylamide employing free and immobilized cells Pseudomonas aeruginosa / S. C. Prabu, A. J. Thatheyus // International Biodeterioration and Biodegradation. – 2006. – V. 11. – P. 1-5.

133. Preparation process of optically active -aminated acids by biological hydrolysis of nitriles: patent 4366250 U.S.A. № US/06/209402 / J. C.

Jallageas, A. Arnaud, P. Galzy; заявл. 27.11.1991; опубл. 01.02.1994.

134. Pepechalov, I. Purification and characterization of the enantioselective nitrile hydratase from Rhodococcus equi A4 / I. Pepechalov, L.

Martnkov, A. Stolz, M. Ovesn, K. Bezouka, J. Kopeck, V. Ken // Applied Microbiology and Biotechnology. – 2001. – V. 55. – P. 150-156.

135. Process of preparing L- and D--amino acids by enzyme treatment of D,L-amino acid amide: patent 4080259 U.S. / W.H.J. Boesten, L.R.M. MeyerHoffman - № US/06/792006; заявл. 28.10.1985; опубл. 14.11.1978.

136. Schoemaker, H. Chemo-enzymatic synthesis of amino acids and derivatives / H. Schoemaker, Boesten W., Kaptein B., Hermes H., Sonke T., Broxterman Q., Tweel W., Kamphuis J. // Pure and Applied Chemistry. – 1992. – Vol. 64. – P. 1171-1175.



Pages:     | 1 | 2 || 4 |

Похожие работы:

«Дулепова Наталья Алексеевна ФЛОРА И РАСТИТЕЛЬНОСТЬ РАЗВЕВАЕМЫХ ПЕСКОВ ЗАБАЙКАЛЬЯ 03.02.01 – Ботаника Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель д.б.н., c.н.с., А.Ю. Королюк Новосибирск – 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ ГЛАВА 1. Материалы и методы исследования 1.1. Район и объект исследования 1.2....»

«Куяров Артём Александрович РОЛЬ НОРМАЛЬНОЙ МИКРОФЛОРЫ И ЛИЗОЦИМА В ВЫБОРЕ ПРОБИОТИЧЕСКИХ ШТАММОВ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У СТУДЕНЧЕСКОЙ МОЛОДЕЖИ СЕВЕРА 03.02.03 – микробиология 03.01.06 – биотехнология (в том числе бионанотехнологии) Диссертация на соискание учёной степени кандидата...»

«Бабкина Ирина Борисовна ИХТИОФАУНА БАССЕЙНА НИЖНЕЙ ТОМИ: ДИНАМИКА И СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ 03.02.04 – Зоология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель доктор биологических наук, профессор Романов Владимир Иванович Томск – 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ Введение.. Глава 1....»

«ПИМЕНОВА ЕКАТЕРИНА ВЛАДИМИРОВНА РАЗРАБОТКА МЕТОДА ОЦЕНКИ ЦИТОТОКСИЧНОСТИ АНТИГЕНОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ МЕЛИОИДОЗА IN VITRO НА МОДЕЛИ ПЕРЕВИВАЕМЫХ КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУР 03.02.03 – микробиология Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор...»

«Куяров Артём Александрович РОЛЬ НОРМАЛЬНОЙ МИКРОФЛОРЫ И ЛИЗОЦИМА В ВЫБОРЕ ПРОБИОТИЧЕСКИХ ШТАММОВ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У СТУДЕНЧЕСКОЙ МОЛОДЕЖИ СЕВЕРА 03.02.03 – микробиология 03.01.06 – биотехнология (в том числе бионанотехнологии) Диссертация на соискание учёной степени кандидата...»

«Платонова Ирина Александровна ПОСТПИРОГЕННАЯ ТРАНСФОРМАЦИЯ НАДЗЕМНОЙ ФИТОМАССЫ В СОСНЯКАХ СЕЛЕНГИНСКОГО СРЕДНЕГОРЬЯ Специальность 06.03.02 – Лесоведение и лесоводство, лесоустройство и лесная таксация ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: д.б.н., с.н.с. Г.А. Иванова Красноярск – 2015...»

«СИДОРОВА ТАТЬЯНА АЛЕКСАНДРОВНА ОСОБЕННОСТИ АДАПТИВНЫХ РЕАКЦИЙ У ДЕВУШЕК К УСЛОВИЯМ ГОРОДСКОЙ СРЕДЫ 03.02.08 Экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, доцент Драгич О.А. Омск-2015 СОДЕРЖАНИЕ Введение.. Глава 1 Обзор литературы.. 1.1. Механизмы адаптации организма человека к окружающей среде 1.2. Закономерности развития...»

«АРУТЮНЯН ЛУСИНЕ ЛЕВОНОВНА МНОГОУРОВНЕВЫЙ АНАЛИЗ СОСТОЯНИЯ КОРНЕОСКЛЕРАЛЬНОЙ ОБОЛОЧКИ ГЛАЗА В РЕАЛИЗАЦИИ НОВЫХ ПОДХОДОВ К ДИАГНОСТИКЕ И ЛЕЧЕНИЮ ПЕРВИЧНОЙ ОТКРЫТОУГОЛЬНОЙ ГЛАУКОМЫ 14. 01. 07 глазные болезни Диссертацияна соискание ученой степени доктора медицинских наук Научные консультанты:...»

«Кузнецова Наталья Владимировна СОВРЕМЕННОЕ ГИДРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ РЕКИ ЯХРОМА КАК МОДЕЛЬНОЙ МАЛОЙ РЕКИ ПОДМОСКОВЬЯ 03.02.10 – гидробиология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук...»

«СЕРГЕЕВА ЛЮДМИЛА ВАСИЛЬЕВНА ПРИМЕНЕНИЕ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ЗАКВАСОК ДЛЯ ОПТИМИЗАЦИИ ФУНКЦИОНАЛЬНО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ МЯСНОГО СЫРЬЯ И УЛУЧШЕНИЯ КАЧЕСТВА ПОЛУЧАЕМОЙ ПРОДУКЦИИ Специальность 03.01.06 – биотехнология ( в том числе бионанотехнологии) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель Доктор биологических наук, профессор Кадималиев Д.А. САРАНСК 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ.....»

«ЯКОВЛЕВ Роман Викторович Древоточцы (Ьер1^р1ега, Cossidae) Старого Света 03.02.05 энтомология диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук САНКТ-ПЕТЕРБУРГ 2014 Оглавление Оглавление Введение Глава 1. История изучения древоточцев (Lepidoptera, Cossidae) Старого Света 1.1. Периоды изучения древоточцев Старого Света 1.1.1. Начальный этап 1.1.2. Этап первых...»

«ВАСИЛЬЕВА ИРИНА ОЛЕГОВНА РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ МЯСНОГО ПРОДУКТА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО КОМПОЗИТА НА ОСНОВЕ МОДИФИЦИРОВАННОГО КОЛЛАГЕНА И МИНОРНОГО НУТРИЕНТА 05.18.04 – Технология мясных, молочных и рыбных продуктов и холодильных производств 05.18.07 – Биотехнология пищевых продуктов и биологических...»

«ТРИФОНОВА Кристина Эдуардовна Особенности распределения штамма мезенхимальных стволовых клеток в условиях опухолевого роста после сингенной трансплантации мышам линии C57BL/6 03.01.06 – биотехнология (в том числе бионанотехнологии) ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата...»

«УДК 591.15:575.17-576.3 БЛЕХМАН Алла Вениаминовна ВНУТРИПОПУЛЯЦИОННАЯ И ГЕОГРАФИЧЕСКАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ ШИРОКОАРЕАЛЬНОГО ВИДА HARMONIA AXYRIDIS PALL. ПО КОМПЛЕКСУ ПОЛИМОРФНЫХ ПРИЗНАКОВ 03.00.15 генетика Диссертация на соискание ученой степени V кандидата биологических наук Научные руководители: доктор биологических наук,...»

«ШИТОВ АЛЕКСАНДР ВИКТОРОВИЧ ВЛИЯНИЕ СЕЙСМИЧНОСТИ И СОПУТСТВУЮЩИХ ГЕОЛОГИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ НА АБИОТИЧЕСКИЕ И БИОТИЧЕСКИЕ КОМПОНЕНТЫ ЭКОСИСТЕМ (НА ПРИМЕРЕ ЧУЙСКОГО ЗЕМЛЕТРЯСЕНИЯ И ЕГО АФТЕРШОКОВ) 25.00.36 – Геоэкология (науки о Земле) Диссертация на соискание ученой степени доктора геолого-минералогических наук Горно-Алтайск 201...»

«Флоринский Игорь Васильевич Теория и приложения математико-картографического моделирования рельефа Специальность 25.00.33 – картография Диссертация на соискание ученой степени доктора технических наук Пущино – 2010 СОДЕРЖАНИЕ Обозначения и сокращения Введение Глава 1 Основные понятия и методы моделирования рельефа 1.1 Цифровые модели рельефа и морфометрические характеристики 1.1.1 Методы...»

«УДК 256.18(268.45) ШАВЫКИН АНАТОЛИЙ АЛЕКСАНДРОВИЧ ЭКОЛОГО-ОКЕАНОЛОГИЧЕСКОЕ СОПРОВОЖДЕНИЕ ОСВОЕНИЯ НЕФТЕГАЗОВЫХ МЕСТОРОЖДЕНИЙ АРКТИЧЕСКОГО ШЕЛЬФА (НА ПРИМЕРЕ БАРЕНЦЕВА МОРЯ) Специальность 25.00.28 «океанология» Диссертация на соискание ученой степени доктора географических наук Мурманск – 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ...»

«ЕРОШЕНКО Дарья Владимировна ВЛИЯНИЕ ФАКТОРОВ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ НА ПЕРВЫЕ ЭТАПЫ ОБРАЗОВАНИЯ БИОПЛЕНОК БАКТЕРИЯМИ STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS 03.02.03 Микробиология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат медицинских наук, доцент Коробов В. П. Пермь – 2015 СТР. СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ...»

«АБДУЛЛАЕВ Ренат Абдуллаевич ГЕНЕТИЧЕСКОЕ РАЗНООБРАЗИЕ МЕСТНЫХ ФОРМ ЯЧМЕНЯ ИЗ ДАГЕСТАНА ПО АДАПТИВНО ВАЖНЫМ ПРИЗНАКАМ Шифр и наименование специальности 03.02.07 – генетика 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений ДИССЕРТАЦИЯ на соискание учёной степени кандидата...»

«ГАБЫШЕВ Виктор Александрович ФИТОПЛАНКТОН КРУПНЫХ РЕК ЯКУТИИ И СОПРЕДЕЛЬНЫХ ТЕРРИТОРИЙ ВОСТОЧНОЙ СИБИРИ 03.02.10 – Гидробиология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант Доктор биологических наук Доцент Л.Г. Корнева Якутск 2015 Оглавление ВВЕДЕНИЕ Глава 1. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Глава 2. ХАРАКТЕРИСТИКА РАЙОНА И ОБЪЕКТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.