«ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ ВЫЯВЛЕНИЯ ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО НЕКРОЗА ГЕМОПОЭТИЧЕСКОЙ ТКАНИ ЛОСОСЕВЫХ РЫБ ...»

155. Troyer RM, LaPatra SE, Kurath G. Genetic analyses reveal unusually high diversity of infectious hematopoietic necrosis virus in rainbow trout aquaculture. // J Gen Virol. – 2000. - №81. – Р. 2823–2832.

156. Verrier-Charleux V., Graillat G., Chevalier Y., Pichot C., Revillon A. Synthesis and characterization of emulsifler-free quaternarized vinylbenzylchloride latexes. // Colloid. Polym. Sci. - 1991. - Vol. 269. P.398-405.

157. Walker, P.J. et al.: In: Van Regenmortel M.H.V., Fauquet C.M., Bishop D.H.L., Carstens E.B., and 7 others (Eds). The 7th report of the Internatinal Committee for Taxonomy of Viruses. Academic Press, San Diego. – 2000.

158. Wells, I. Theory and Practice of Rapid Immunodiagnostic Tests, BioDot

Workshop, BioDot, Irvine, CA; Tel: 714-440-3694; Fax: 714-440-3685; e-mail:

biodot@biodot.com; Website: www.biodot.com.

159. Williams K, Blake S, Sweeney A, Singer J.T., Nicholson B.L. Multiplex reverse transcriptase PCR assay for simultaneous detection of three fish viruses. // J. Clin.

Microbio. – 1999. - №37. – Р. 4139-4141.

160. Winton J.R. and Einer-Jensen K. (2002). Molecular diagnosis of infectious hematopoietic necrosis and viral hemorrhagic septicemia. In: Molecular Diagnosis of Salmonid Diseases, Cunningham C.O., ed. Kluwer, Dordrecht, The Netherlands, P.

49–79.

161. Winton J.R. Immunization with viral antigens: Infectious haematopoietic necrosis. // Dev. Biol. Stand. – 1997. - № 90. – Р. 211–220.

162. Wolf K. (1988) Infectious hematopoietic necrosis. In: Fish Viruses and Fish Viral Diseases. Cornell University Press, Ithaca, New York, USA, P. 83–114.

163. Wood, W.G., Gadow, A. “Immobilization of Antibodies and Antigens on MacroSolid Phases– A Comparison between Adsorptive and Covalent Binding”. // J.

Clin. Chem. Clin. Biochem. – 1983. – №21. – Р. 789-797.

164. www.lumex.ru.

7 СПИСОК ИЛЛЮСТРИРОВАННОГО МАТЕРИАЛА

Рисунки:

1. Схематичное изображение генома вируса ИНГТ (с. 14).

2. Схематичное изображение вириона вируса ИНГТ (с. 15).

3. Схема лабораторной диагностики ИНГТ (с. 22).

4. Принцип ПЦР-РВ (с. 26).

5. Сущность РАЛ (с. 29).

6. Диагностический ПЦР-чип с лиофилизированной тест-системой для проведения ОТ-ПЦР-РВ (с. 43).

7. Система четырех крестов для оценки результатов РАЛ при выявления вируса ИНГТ (с. 51).

8. Схема внесения образцов в микрореакторы чипа (с. 53).

9. Монослой культуры клеток RTG-2 до и после заражения вирусом ИНГТ (с. 59).

10. SDS-ПААГ-электрофорез в денатурирующих условиях очищенного антигена вируса ИНГТ (с. 60).

11. Электрофореграмма препаратов МА против вируса ИНГТ, выделенных из асцитов №1-18 (по результатам электрофореза в 12,5% SDS-ПААГ в восстанавливающих условиях) (с. 62).

12. Вестерн-блот-анализ связывания МА №1-18 с белками вируса ИНГТ (с. 62).

13. Влияние рН ГСБР на степень адсорбции антител на поверхности латексов с разными ионогенными группами (с. 70).

Таблицы:

1. Техническая информация о некоторых клеточных линиях рыб (с. 40).

2. Структура праймеров и зондов для выявления вирусов ИНГТ, ВГС и ВВК в ОТ-ПЦР-РВ с применением диагностических ПЦР-чипов (с. 41).

3. Компоненты для адсорбции антител против вируса ИНГТ на поверхности латексов (с. 42).

4. Исследование стабильности культуральных свойств штамма «Аркус 32/87» и изолята «Воронин 14/08» вируса ИНГТ в перевиваемых клеточных линиях RTG-2, EPC, FHM (n=3) (с. 55).

5. Влияние дозы заражения вируса ИНГТ на его репродукцию в культуре клеток RTG-2 (10 пассаж) (n=3) (с. 56).

6. Влияние дозы заражения и концентрации фетальной сыворотки крови КРС в составе поддерживающей среды на эффективность культивирования вируса ИНГТ в культуре клеток RTG-2 (10 пассаж) (n=5) (с. 57).

7. Оценка специфичности полученного культурального антигена вируса ИНГТ (n=3) (с. 59).

8. Характеристика моноклональных антител против антигенов вируса ИНГТ (с. 61).

9. Оценка взаимодействия моноклональных антител с белками вируса ИНГТ (по результатам вестерн-блот-анализа) (с. 63).

10. Оценка специфичности детектирующих МА № 4 и 15 против вируса ИНГТ в двойном сэндвич-варианте ИФА (n=3) (с. 64).

11. Поиск оптимального состава буферного раствора для синтеза латексных препаратов с разными ионогенными группами для выявления вируса ИНГТ (n=3) (c. 66).

12. Поиск оптимального блок-раствора для получения латексных препаратов, выявляющих вирус ИНГТ (n=3) (с. 68).

13. Поиск оптимальных значений рН ГСБР для получения латексных препаратов, выявляющих вирус ИНГТ (n=3) (с. 71).

14. Поиск оптимальных значений ионной силы ГСБР для синтеза латексных препаратов, выявляющих вирус ИНГТ (n=3) (с. 72).

15. Оптимальные значения диаметра микросфер с разными ионогенными группами для приготовления латексных препаратов, выявляющих вирус ИНГТ (n=3) (с. 75).

16. Оптимальные значения концентрации активных групп латексных частиц для синтеза препаратов, выявляющих вирус ИНГТ (n=3) (с. 76).

17. Влияние концентрации сенсибилизированных латексных частиц на активность РАЛ по выявлению вируса ИНГТ (n=3) (с. 78).

18. Влияние посадочной концентрации специфичных антител на степень их адсорбции и количественную чувствительность латексных диагностикумов (n=3) (с. 79).

19. Сравнительный анализ специфической активности латексных препаратов в зависимости от посадочной концентрации антител против вируса ИНГТ (n=3) (с. 80).

20. Сравнительный анализ латексных препаратов для выявления вируса ИНГТ, полученных на основе поликлональных и моноклональных антител (n=3) (с. 82).

21. Влияние физической и химической адсорбции антител на активность латексных препаратов, выявляющих вирус ИНГТ (n=3) (с. 84).

22. Коллоидная устойчивость латексных препаратов, выявляющих вирус ИНГТ, при их хранении в ГСБР с разными значениями ионной силы (n=3) (с. 85).

23. Влияние ПАВ на коллоидную стабильность и аналитическую чувствительность латексных препаратов, выявляющих вирус ИНГТ (n=3) (с. 87).

24. Оптимальные условия для синтеза и хранения латексных препаратов, выявляющих вирус ИНГТ (n=3) (с. 88).

25. Оптимизация температуры отжига праймеров для выявления вирусов ИНГТ, ВГС и ВВК в ОТ-ПЦР-РВ с применением диагностических ПЦР-чипов (n=3) (с. 92).

26. Режим термоциклирования при проведении ОТ-ПЦР-РВ с применением диагностических ПЦР-чипов (с. 92).

27. Оценка специфичности тест-систем для выявления вирусов ИНГТ, ВГС и ВВК методом ОТ-ПЦР-РВ с применением диагностических ПЦР-чипов (n=3) (с. 94).

28. Результаты реакции амплификации при исследовании образцов с разными значениями титра вирусов ИНГТ, ВГС и ВВК (n=3) (с. 95).

29. Эффективность амплификации фрагментов гена N вирусов ИНГТ, ВГС и ВВК в ОТ-ПЦР-РВ с применением ПЦР-чипов (n=3) (с. 96).

30. Диагностическая чувствительность и специфичность разработанных тестсистем для выявления вирусов ИНГТ, ВГС и ВВК методом ОТ-ПЦР-РВ с применением ПЦР-чипов (n=3) (с. 97).

8 ПРИЛОЖЕНИЯ