WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:   || 2 | 3 | 4 |

«Максимова Ольга Владимировна «Оценка микробиоты кишечника у детей с аллергическими заболеваниями в зависимости от массы тела» 03.02.03. – Микробиология Диссертация на соискание ученой ...»

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

Максимова Ольга Владимировна

«Оценка микробиоты кишечника у детей с аллергическими

заболеваниями в зависимости от массы тела»

03.02.03. – Микробиология

Диссертация на соискание ученой степени

кандидата биологических наук

Научный руководитель:

- Зверев Виталий Васильевич

академик РАН, д.б.н., профессор

Научный консультант:

- Гервазиева Валентина Борисовна

д.м.н, профессор,

заслуженный деятель науки РФ МОСКВА – 2015 Оглавление Список сокращений

Введение

Глава 1 Обзор литературы

1.1 ФОРМИРОВАНИЕ МИКРОБИОТЫ

1.2 СОСТАВ МИКРОБИОТЫ ЧЕЛОВЕКА.

1.3 ФУНКЦИИ МИКРОБИОТЫ.

1.4 ВЗАИМОСВЯЗЬ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ С

СОСТОЯНИЕМ МИКРОБИОТЫ КИШЕЧНИКА.

1.5 ВЗАИМОСВЯЗЬ ОЖИРЕНИЯ С МИКРОБИОТОЙ КИШЕЧНИКА

1.6 МЕХАНИЗМЫ, СВЯЗЫВАЮЩИЕ КИШЕЧНУЮ МИКРОБИОТУ

И ОЖИРЕНИЕ

Глава 2 Материалы и методы.

2.1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДЕТЕЙ, ВКЛЮЧЕННЫХ В

ИССЛЕДОВАНИЕ.

2.2. БИОЛОГИЧЕСКИЙ МАТЕРИАЛ.

2.3 МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.3.1 ОБЩЕКЛИНИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ

2.3.2. ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 3 Результаты собственных исследований

3.1 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДЕТЕЙ.

3.1.2 КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДЕТЕЙ С

АЛЛЕРГИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ.

3.1.2 КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА УСЛОВНО ЗДОРОВЫХ

ДЕТЕЙ…………………………………………………………………….63

3.2 ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЛЕПТИНА И МАРКЕРОВ ВОСПАЛЕНИЯ У

ДЕТЕЙ С РАЗЛИЧНОЙ МАССОЙ ТЕЛА.

3.3 ИССЛЕДОВАНИЕ МИКРОБИОТЫ КИШЕЧНИКА У ДЕТЕЙ С

РАЗЛИЧНОЙ МАССОЙ ТЕЛА.

3.3.1 ИССЛЕДОВАНИЕ ОБЛИГАТНОЙ МИКРОБИОТЫ

КИШЕЧНИКА

3.3.1 ИССЛЕДОВАНИЕ ФАКУЛЬТАТИВНОЙ И ТРАНЗИТОРНОЙ

МИКРОБИОТЫ КИШЕЧНИКА.

3.4 ИЗУЧЕНИЕ СООТНОШЕНИЯ FIRMICUTES/ BACTEROIDETES

У ДЕТЕЙ С РАЗЛИЧНОЙ МАССОЙ ТЕЛА.

Глава 4 Заключение.

Выводы

Список литературы.

–  –  –

ИМТ – Индекс массы тела ВОЗ – Всемирная Организация Здравоохранения ЛПВП – липопротеины высокой плотности ЖКТ – желудочно-кишечный тракт ДК – дендритные клетки АПК – антиген-презентирующие клетки МКБ – молочнокислые бактерии КЖК – короткоцепочечные жирные кислоты ИЛ – интерлейкин ФНО – – фактор некроза опухоли альфа СРБ – С-реактивный белок ЛПС – липополисахарид ИФН – интерферон TLR – Толл-подобные рецепторы NOD - Нод-подобные рецепторы БА – бронхиальная астма АР – аллергический ринит АД – атопический дерматит

Введение Актуальность темы исследования

Аллергические заболевания по-прежнему остаются актуальной проблемой практического здравоохранения. Помимо роста числа аллергических заболеваний, параллельно наблюдается увеличение в популяции числа лиц с избыточным весом и ожирением. В настоящее время в развитых странах мира до 25% подростков имеют избыточную массу тела, а 15% детского населения страдает ожирением. По некоторым данным, в Российской Федерации ожирение выявлено у 5,5% детей, проживающих в сельской местности, и у 8,5% - в городской [15; 161].

Отмечается существенная связь ожирения с развитием и утяжелением аллергической патологии [2; 79].

Несмотря на значительное внимание научной общественности к экологическим факторам, в том числе к особенностям питания в детском возрасте, исследователям до сих пор не удавалось окончательно установить определяющие факторы в формировании аллергической реактивности и ожирения. Согласно гигиенической гипотезе, изменения в окружающей среде, связанные с так называемым «западным образом жизни», привели к снижению микробного контакта в раннем возрасте и таким образом нарушили формирование нормального защитного иммунитета, обусловив становление аллергического фенотипа [115].

Отсутствие у ребенка достаточной стимуляции иммунной системы слизистой оболочки кишечника может привести к срыву формирования оральной толерантности и развитию хронического воспаления, на фоне которого могут развиваться аллергические реакции на пищу (пищевая аллергия/пищевая непереносимость с синдромом раздраженной кишки), сопровождающиеся, как правило, дисбактериозом кишечника. Во многих клинических исследованиях было показано, что кишечная микробиота, взаимодействуя с лимфоидной тканью, ассоциированной с кишечником, обеспечивает первую линию защиты организма хозяина [35;41].

В то же время в эксперименте на мышах было установлено, что микроорганизмы кишечника участвуют в энергетическом обмене, поддержании контроля массы тела и ожирении [133]. Дисбаланс микробиоты кишечника приводит к развитию резистентности к инсулину и формированию хронического воспаления [45;44]. Таким образом, ранние манипуляции с микробными сообществами кишечника могут предложить новую стратегию по предотвращению аллергической сенсибилизации и накоплению избыточной массы тела.

Степень разработанности темы исследования

В последнее время представление о роли микробиоты человека, ее многообразии, о выполняемых ею функциях и участии в патогенезе различных инфекционных и неинфекционных заболеваний значительно расширилось. На сегодняшний день все больше различных заболеваний связывают с нарушениями состава и функционирования микробиоты кишечника. Согласно современной классификации микроорганизмов, отраженной во 2-ом издании (2001 г.) руководства Берджи, бактерии делят на два домена: Bacteria и Archaea. В домен Bacteria входят 22 типа, из которых медицинское значение имеют следующие: Тип ВIV DeinococcusThermus, Тип В XII Proteobacteria, Тип В XIII Firmicutes, Тип В XIV Actinobacteria, Тип В XVI Chlamydiae, Тип В XX Bacteroidetes. Используя молекулярно – генетические методы исследования, P.B.Eckburg и соавтр. в 2005г. установили, что доминирующими микроорганизмами в кишечнике человека, составляющими более 90% всех бактерий, являются представители типа Bacteroidetes (Bacteroides) и Firmicutes (Bacillus, Streptococcus, Staphylococcus, Clostridium, Lactobacillus, Enterococcus, Peptococcaceae, Peptostreptococcus и др.) [4].

Анализ литературы свидетельствует о том, что микробиота кишечника активно исследуется при таких заболеваниях, как воспалительные заболевания кишечника [46;76;92;98;131;140], целиакия [54;121], сахарный диабет 2 типа [45;93;101;146], аллергические заболевания в частности, бронхиальная астма [34;127], [85; 86], заболевания сердечно – сосудистой [30; 117] и нервной системы [59; 84;

119].

Кроме того, существует ряд работ, посвященных изучению взаимосвязи между микробиотой кишечника и ожирением [91;97;130;133].

Большинство из них было выполнено на животных моделях. Исследования микробиоты кишечника у людей были единичными, проводились у взрослых пациентов и оказались не однозначными. В некоторых исследованиях было показано, что у пациентов с ожирением численность Bacteroidetes снижена, а Firmicutes повышена [104; 105; 148]. В то же время получены и противоположные результаты, согласно которым у пациентов с избыточным весом и ожирением численность Bacteroidetes была повышена, а Firmicutes снижена [137]. В других работах разницы в соотношении Firmicutes/Bacteroidetes у тучных и худых пациентов не обнаруживали [63; 89].

Следует отметить, что практически не был изучен количественный и качественный состав микробиоты кишечника у здоровых детей в зависимости от их массы тела. В этой связи изучение микробиоты кишечника у детей разных возрастных групп и с различной массой тела, с наличием аллергических заболеваний и сопутствующей патологии, представляет особый интерес.

–  –  –

условно здоровых (группа сравнения), и дать им клинико – иммунологическую характеристику.

Исследовать структуру микробиоты кишечника у детей 2.

сформированных групп с различной массой тела.

Определить количественные и качественные различия 3.

родового состава микробиоты кишечника у детей исследуемых групп с учетом особенностей анамнеза и массы тела.

Сравнить показатели микробиоценоза кишечника детей с 4.

аллергическими заболеваниями в зависимости от массы тела.

Научная новизна исследования

Впервые изучена и охарактеризована микробиота детей и подростков с аллергическими заболеваниями в зависимости от массы тела.

Выявлены качественные и количественные различия облигатной и факультативной микробиоты кишечника у детей с аллергическими заболеваниями и различной массой тела с учетом способа вскармливания и родоразрешения, в сравнении с условно здоровыми детьми.

Аллергическая патология и ожирение по-разному связаны с численностью облигатной и факультативной микробиоты кишечника детей. Так, впервые показано, что численность Bacteroidetes у детей с аллергическими заболеваниями во всех весовых категориях снижена, в отличие от условно здоровых детей, у которых число этих микроорганизмов снижено только при ожирении. При этом бронхиальная астма и аллергический риноконъюктивит ассоциированы со снижением численности Bacteroidetes по мере увеличения массы тела.

Количество анаэробных кокков также снижалось с увеличением массы тела у всех детей с аллергией, независимо от ее клинических проявлений. В то же время аллергические заболевания ассоциированы с выявлением Bacillus spр. в микробиоте кишечника вне зависимости от массы тела детей.

Впервые установлено увеличение высеваемости Clostridium spр. у детей с повышением массы тела независимо от наличия аллергии.

Таким образом, полученные на основе культуральных методов данные исследования микробиоты кишечника детей с различной массой тела и проанализированные с учетом современной классификации микроорганизмов, позволили заключить, что наличие аллергии не влияло на соотношение Firmicutes/Bacteroidetes. В то же время обнаружена четкая взаимосвязь соотношения этих микроорганизмов с увеличением массы тела у здоровых детей, а именно, с набором веса количество Firmicutes увеличивалось за счет Clostridium spp., а численность Bacteroidetes снижалась.

Теоретическая и практическая значимость исследования

Выявленные качественные и количественные изменения в составе облигатной и факультативной микробиоты кишечника у детей с аллергическими заболеваниями отражают нарушение микробиоценоза слизистой оболочки и могут способствовать развитию воспалительного процесса в ЖКТ, особенно у детей с ожирением. В пользу этого суждения свидетельствует установленное нами значимое увеличение биомаркеров воспаления (лептин, СРБ и ФНО-) у этих детей. В этой связи оценка микробиоты кишечника и ее результаты могут быть использованы как критерии субклинического воспаления в кишечнике при увеличении массы тела в динамике развития детей. Выявленные изменения в микробиоте позволят обеспечить подбор оптимальных пробиотических препаратов с целью ее коррекции.

Поскольку выявленные показатели количественного состава облигатной и факультативной микробиоты у условно здоровых детей с различной массой тела отличались от используемых в практике стандартов, следует рекомендовать в клинической практике обращать внимание на массу тела исследуемого пациента при оценке дисбактериоза кишечника.

Полученные результаты внедрены и используются в цикле лекций кафедры микробиологии, иммунологии и вирусологии ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России и в практике гастроэнтерологов диагностического центра ДГП №48 г. Москвы.

Методология и методы исследования

–  –  –

Основные положения диссертации, выносимые на защиту Аллергическая патология и ожирение по-разному 1.

взаимосвязаны с изменениями численности облигатной и факультативной микробиоты кишечника детей. Аллергические заболевания у детей ассоциированы с пониженной численностью Bacteroidetes spp. и наличием Bacillus spр. во всех весовых категориях, а также со снижением численности анаэробных кокков по мере увеличения массы тела.

Ожирение, в свою очередь, характеризуется снижением Bacteroidetes spp., в особенности у здоровых детей, и увеличением численности Clostridium spр., независимо от наличия аллергии. У детей с аллергическими заболеваниями изменяется родовой состав Firmicutes, что в целом не влияет на их соотношение с Bacteroidetes. У здоровых детей по мере повышения массы тела соотношение численности Firmicutes/Bacteroidetes увеличивается.

Снижение численности Bacteroidetes, анаэробных кокков и 2.

энтерококков у детей ассоциировано с бронхиальной астмой и аллергическим ринитом, а численность Clostridium прямо коррелировала с увеличением массы тела детей. При атопическом дерматите только численность анаэробных кокков обратно коррелировала с массой тела.

Степень достоверности и апробация результатов О достоверности полученных результатов свидетельствует использование сертифицированных реагентов и современных бактериологических, биохимических и иммунологических методов исследования. Достоверность полученных результатов подтверждена статистическими методами.

Диссертация апробирована на конференции кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России, протокол № 10 от 28 августа 2015 года.

Результаты исследования были доложены на конференции молодых ученых ФГБНУ НИИВС им. И.И. Мечникова г. Москва, 23 апреля 2014 г., конференции молодых ученых, посвященной 170-летию И.И. Мечникова, ФГБНУ НИИВС им. И.И. Мечникова и ФГБНУ ИПВЭ им. М.П. Чумакова г. Москва 15-16 апреля 2015 г. и на XV Всероссийском научном форуме с международным участием имени академика В.И. Иоффе «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге», 1-4 июня 2015.

–  –  –

Основное содержание работы

отражено в 9 научных публикациях: 4 статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ, в зарубежном журнале – 1, в других изданиях – 4.

–  –  –

Работа состоит из введения, основного текста (обзор литературы и главы собственных исследований), заключения, списка сокращений, списка литературы. Работа изложена на 118 страницах машинописного текста, иллюстрирована 10 рисунками, 2 таблицами. Библиографический указатель включает 168 наименования, из них 28 отечественных и 140 зарубежных источников литературы.

Глава 1 Обзор литературы

1.1 ФОРМИРОВАНИЕ МИКРОБИОТЫ

Традиционно считалось, что кишечник новорожденных стерилен при рождении. За последние годы появились доказательства того, что бактерии присутствуют в амниотической жидкости in utero даже у здоровых новорожденных за счет «феномена бактериальной транслокации», но число и разнообразие микроорганизмов достаточно низкое [25]. Дети подвергаются воздействию множества микробов из разных источников сразу же после рождения и колонизируются микроорганизмами, с которыми они впервые сталкиваются либо при прохождении через родовые пути матери, либо с кожи, в зависимости от условий родоразрешения ребенка [16; 60].

Заселение желудочно-кишечного тракта ребенка микробиотой начинается в интранатальном периоде, и эта стадия называется «условноасептической». Вторая стадия наступает через 10–12 часов после рождения

– стадия «нарастающего инфицирования» или «нарастающей колонизации». В этот период колонизация осуществляется гетерогенными микроорганизмами, в основном, микроорганизмами матери (при раннем прикладывании к груди) или «микроорганизмами родильного дома».

Поскольку ткани кишечника новорожденного богаты кислородом, то в первую очередь в нем идет активный рост аэробных и факультативно – анаэробных бактерий, таких как стафилококки, энтерококки и кишечная палочка [64]. Они быстро размножаются, поглощая кислород, и создают при этом необходимые условия для роста микроаэрофилов и строго анаэробных бактерий. С 3–5-го дня наступает третья стадия трансформации микробиоты, в результате которой происходит вытеснение молочнокислыми бактериями (бифидобактерии, лактобациллы, молочнокислые и фекальные стрептококки) других микроорганизмов. В это время молочнокислые бактерии становятся основной резидентной микробиотой кишечника [13].

В мире выполняется ряд крупных исследовательских проектов, включающих метагеномные и геномные исследования микробиоты, которые позволили установить ее состав, индивидуальные особенности и взаимосвязь с различными факторами: возрастом, полом, заболеваниями и т.д. [162].

Так, метагеномный анализ показал, что микроорганизмы у ребенка в начале жизни обогащаются генами, которые облегчают использование лактата, при питании младенца грудным молоком или искусственной молочной смесью [96]. Интересно, что функциональные возможности усвоения гликанов растительного происхождения проявляются до введения в рацион твердой пищи. Это говорит о том, что кишечник ребенка готов перейти на другую, не только молочную пищу еще до окончательных изменений в диете. К концу первого года жизни бактериальный состав детей приближается к микробиоте взрослого человека [126] и полностью соответствует таковой к 2,5 годам [96].

Широкое использование оперативного родоразрешения может стать одной из причин нарушения микробной колонизации кишечника младенца.

Доказательством является серия исследований, сравнивающих состав кишечной микробиоты у детей, рожденных путем кесарева сечения и вагинальным способом. Было обнаружено, что у детей, рожденных с помощью кесарева сечения, в кишечнике обитает меньше полезных микроорганизмов-бактероидов и намного меньше распространены полезные штаммы кишечной палочки по сравнению с детьми, рожденными естественным путем [36]. Помимо этого, у детей-искусственников значительно выше количество представителей семейств Verrucomicrobiaceae и Peptostreptococcaceae, относящихся к Firmicutes.

Нарушение микробиоты кишечника, которая оказывает неоценимую помощь организму в формировании иммунной системы, связано с возрастающим количеством хронических заболеваний. У детей, рожденных путем кесарева сечения, повышен риск заболевания астмой, ожирением, диабетом 1-го типа. Однако грудное вскармливание защищает от этих и других болезней, хоть и не со 100%-ной определенностью [36].

Кроме того, у детей, рожденных с помощью кесарева сечения, достоверно выше вероятность развития диарей и сенсибилизации к пищевым аллергенам по сравнению с детьми, родившимися вагинальным путем [102]. Ученые из Швеции проанализировали кишечную микробиоту 24 младенцев: 9 из этих детей родились с помощью кесарева сечения, 15 – вагинальным способом [82]. Для определения микробного состава кишечника секвенировали ДНК бактерий из образцов фекалий младенцев через неделю после рождения, а затем через 1, 3, 6, 12 и 24 месяца.

Результаты исследования показали, что у детей, родившихся с помощью кесарева сечения, в кишечнике не хватало представителей одной из основных групп кишечных бактерий, которые Bacteroidetes, присутствовали у всех рожденных естественным путем. Кроме того, у некоторых из этих младенцев бактерии группы Bacteroidetes так и не заселяли кишечник вплоть до 12-месячного возраста. Кроме того, исследователи изучили уровеньTh1- и Th2-ассоциированных хемокинов в образцах крови младенцев через 6, 12 и 24 месяца после рождения.

Хемокины — это низкомолекулярные белки, контролирующие миграцию клеток иммунной системы в организме. Высокий уровень Th2 ассоциированных хемокинов способствует развитию аллергии, а Th1хемокинов, наоборот, ликвидацию этих последствий. В крови детей, родившихся путем кесарева сечения, отмечался дисбаланс Th1- и Th2ассоциированных хемокинов, и поэтому такие дети могли быть более чувствительными к аллергенам [82].

Кроме того, микроорганизмы матери является одним из главных факторов, определяющих состав кишечной микробиоты младенца, и может влиять на вес ребенка в будущем.

Ученые изучили микробиоту беременных женщин с нормальным и избыточным весом. У пациенток с избыточным весом отмечался высокий уровень Bacteroides,Clostridium и Staphylococcus aureus в период между 1-ым и 3-им триместрами беременности. Кроме того, численность Bifidobacterium была выше у тех женщин, которые показали относительно низкую прибавку в весе во время беременности. Женщины с избыточной массой тела, как правило, рожали более тяжелых младенцев [51]. Так как ожирение может быть связано с осложнениями во время беременности и с повышением риска для здоровья новорожденных, исследователи изучили фекальную микробиоту 50 беременных женщин с избыточным и нормальным весом, в зависимости от их ИМТ, а также проанализировали биохимические показатели крови.

Оказалось, что у женщин с избыточным весом снижена численность и и наоборот повышена численность Bifidobacterium Bacteroides, Staphylococcus, Enterobacteriaceae и E. coli, по сравнению с пациентками с нормальным весом. Кроме того, численность кишечной палочки была выше у женщин с чрезмерной прибавкой веса во время беременности, а у пациенток с нормальным весом численность Akkermansia muciniphila была выше. У всех пациенток, увеличение общего числа бактерий и доли Staphylococcus связано с повышением уровня общего холестерина в плазме крови. Рост числа Bacteroides связан с повышением уровня ЛПВП и фолиевой кислоты и понижением уровня триацилглицеринов. Повышение численности Bifidobacterium spp. приводило к повышению уровня фолиевой кислоты. Увеличение доли Enterobacteriaceae, в частности кишечной палочки, связано с повышением уровня ферритина и снижением трансферрина, в то время как повышение численности Bifidobacterium spp.

приводила к противоположным результатам. Поэтому состав микробиоты кишечника тесно взаимосвязан с массой тела, набором веса и метаболическими биомаркерами во время беременности, что может иметь важное значение в поддержании здоровья женщин и детей. [132].

1.2 СОСТАВ МИКРОБИОТЫ ЧЕЛОВЕКА

Общая численность микроорганизмов, обитающих в различных биотопах человеческого организма, достигает величины порядка 1015, т. е.

число микробных клеток примерно на два порядка превышает численность собственных клеток макроорганизма. Отношения в этом сообществе имеют филогенетически более древнее происхождение и жизненно важны для обеих сторон системы организм-микробиота[16].

Значительная часть (около 60%) микрофлоры заселяет различные отделы желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), примерно 15–16% приходится на ротоглотку. Урогенитальный тракт, кроме вагинального отдела (9%), заселен довольно слабо (2%). Остальная часть микрофлоры находится на кожных покровах [27].

В любом микробиоценозе всегда имеются постоянно обитающие виды бактерий (автохтонные или индигенные, или резидентные микроорганизмы) – 90%, а также добавочные (сопутствующие, факультативные) – около 10% и транзиторные виды (случайные, аллохтонные, остаточные микроорганизмы) – 0,01% [27]. Ранее считали, что тонкая кишка стерильна. Однако позднее было установлено, что в физиологических условиях содержание бактерий в тонкой кишке колеблется от 104/мл в тощей до 107/мл содержимого в подвздошной кишке. При этом, в проксимальных отделах тонкой кишки обнаруживаются преимущественно грамположительные аэробные бактерии, в дистальных – грамотрицательные энтеробактерии и анаэробы [24].

Микробиоту кишечника подразделяют на мукозную и просветную [19]. Мукозная микробиота – это микробы, тесно ассоциированные со слизистой оболочкой кишечника, расположенные в слое слизи, в гликокаликсе - пространстве между ворсинками, и образующие плотный бактериальный слой, так называемую биопленку. Такая биопленка, как перчатка, покрывает слизистые оболочки. Микробиота в ней более устойчива к воздействию неблагоприятных факторов физической, химической и биологической природы по сравнению со свободно циркулирующими бактериями [27]. Наибольший удельный вес в мукозной микробиоте занимают бифидо- и лактобактерии. Просветную микробиоту составляют микробы, локализующиеся в просвете кишечника.

Подавляющее большинство микроорганизмов принадлежит к бактериям Firmicutes, Bacteroidetes, Actinobacteria и Proteobacteria, гораздо меньшее число принадлежит к Verrucomicrobia, Fusobacteria, Cyanobacteria. Грибы и Archaea составляют менее 1% от общего числа микроорганизмов [138].

По предварительным данным, состав микробиоты кишечника человека, по-видимому, определяет принадлежность организма к одному из трех энтеротипов. Каждый энтеротип определяется доминирующим видом микроорганизмов и получил соответствующее название:

Bacteroides, Prevotella и Ruminococcus. К примеру, энтеротип Bacteroides отличается активностью в отношении разложения углеводов, а также способствует выработке витаминов C, B2, B5 и H. Ruminococcus, наоборот, улучшает всасывание углеводов и повышает уровень сахара в крови. Он синтезирует фолиевую кислоту и витамин B1. Prevotella в процессе жизнедеятельности разрушает защитный слизистый покров, что, вероятно, предрасполагает к дефектам слизистой кишечника. Следовательно, энтеротип может указать на особенности обмена веществ и указать на предрасположенность к заболеваниям [162].

1.3 ФУНКЦИИ МИКРОБИОТЫ

Среди функций кишечной микробиоты следует выделить основные:

защитная, пищеварительная, метаболическая, иммуномодулирующая, антимутагенная и антиканцерогенная.

Защитная функция кишечной микробиоты, прежде всего, проявляется в формировании колонизационной резистентности по отношению к потенциально болезнетворным микроорганизмам за счет образования бактериостатических низкомолекулярных метаболитов (короткоцепочечные жирные кислоты, оксид азота, глутамат, гистамин, серотонин, мурамил дипептид и др.), деградации бактериальных токсинов, деконъюгации желчных кислот, продукции широкого спектра антимикробных веществ семейства бактерицинов [3;42].

Пищеварительная функция включает в себя синтез микроорганизмами ферментов: дисахаридаз, полисахаридаз и гликозидаз, расщепляющих некрахмальные полисахариды и пищевые волокна на мономеры, которые подвергаются ферментации; липаз, завершающих гидролиз жиров.

Ключевую роль в процессах деполимеризации таких субстратов играют бактерии, принадлежащие к семействам Bacteroides и Bifidobacterium.

Деконъюгация желчных кислот микроорганизмами определяет гипохолестеринемический эффект микробиоты [163]. Дефицит бифидобактерий и активные воспалительные процессы в толстой кишке способствуют накоплению в организме холестерина.

Метаболическая функция нормальной микробиоты состоит в синтезе эссенциальных нутриентов: витаминов группы В (тиамин, рибофлавин, пиридоксин, цианкобаламин, фолиевая, пантотеновая, никотиновая кислоты), биотина, витамина K, таких важных для организма аминокислот, как аргинин и глутамин; в метаболизации наркотиков, гормонов и канцерогенных веществ, включая дигоксинсульфасалазины и эстрогены.

Детоксицирующая способность индигенной микрофлоры кишечника вполне сопоставима с детоксицирующей функцией печени. Естественная микробиота кишечника тормозит процессы декарбоксилирования гистидина из пищи, уменьшая тем самым синтез гистамина, а следовательно, снижает риск пищевой аллергии у детей [18; 27;163].

Иммуномодулирующая функция осуществляется как по отношению к неспецифическим факторам защиты, так и собственно адаптивному иммунному ответу. За счет микробиоты происходит запуск и последующая активация синтеза неспецифических гуморальных факторов защиты (лизоцим, пропердин, комплемент) и клеточных (фагоцитоз). Воздействие на системы иммунитета включает в себя стимуляцию созревания лимфоидного аппарата кишечника, активацию синтеза sIgA и стимуляцию продукции цитокинов и интерферонов колоноцитами [73].

Что касается антимутагенной и антиканцерогенной функций, то на сегодняшний день доказана антиканцерогенная роль многих пробиотических штаммов [22].

Противоопухолевая активность выявлена у L. casei, L. acidophilus [23]. Антиканцерогенное действие лактобацилл основано на механизмах инактивации проканцерогенов, содержащихся в пище, угнетения активности ферментов, способствующих образованию мутагенов, стимуляции иммунных процессов противоопухолевой защиты, продукции соединений, способных ингибировать пролиферацию опухолевых клеток. Возможно это обусловлено полисахаридами клеточной стенки лактобацилл и выделяемыми во внешнюю среду полисахаридами. Под влиянием пробиотиков наблюдается снижение в фекалиях промоторов опухолевого роста, таких как свободные амины, азоредуктазы, нитроредуктазы и другие.

1.4 ВЗАИМОСВЯЗЬ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ С СОСТОЯНИЕМ

МИКРОБИОТЫ КИШЕЧНИКА

Кишечная микробиота человека оказывает значительное воздействие на организм развивающегося ребенка. В нормальных условиях микробиота положительно влияет на пищеварение, развитие оральной толерантности и контролирует рост и дифференцировку клеток кишечного эпителия [110].

Колонизация комменсальными бактериями происходит сразу же после рождения и продолжается в течение первого года жизни [31]. На нормальную колонизацию микробиоты может повлиять способ рождения, микроорганизмы матери и ее генотип, а затем грудное вскармливание и другие факторы окружающей среды [35].

Кроме того, некоторые бактерии из окружающей среды могут защищать от аллергии. Как известно, иммунный ответ новорожденных Th2 доминирующий и в первый год жизни очень важен для создания нормального баланса Th1/Th2/Treg [29;30]. Вполне вероятно, что стимуляция иммунной системы микробными антигенами играет важную роль в этом процессе путем подавления Th2-обусловленного ответа и переходом либо к Th1 иммунному ответу, либо к активации Treg.

Действительно, в настоящее время, обе модели (отсутствие иммунной девиации и отсутствие иммунной супрессии) обсуждаются как возможные причины аллергии и поддерживаются рядом исследований [81]. Эти модели имеют нечто общее, индукция Th1 или Treg клеток подавляет Th2 ответ и таким образом может предотвратить развитие атопических заболеваний. Важными для поляризации и, следовательно, для развития нормального баланса Th1/Th2/Treg являются антиген-презентирующие клетки (АПК), которые осуществляют процессинг антигенов, представляют их Т-клеткам и обеспечивают определенную дифференциацию сигналов [99].

При атопических заболеваниях дендритные клетки (ДК) являются наиболее важными АПК. Тип дифференциации сигнала зависит от первичных стимулов и, следовательно, от факторов окружающей среды, например, микробные компоненты могут влиять на состояние дифференциации Т-клеток. Недавно было показано, что снижение риска развития аллергии в последующей жизни у детей, выросших в сельской местности, может быть связано с микроорганизмами, присущими этой окружающей среде [56]. Этот положительный эффект сельскохозяйственной среды рассматривается как результат активации врожденного иммунитета с помощью микробных компонентов. Например, была показана обратная корреляция между микробной нагрузкой, измеряемой по содержанию липополисахарида (ЛПС) или CpG мотива, и развитием атопических заболеваний у детей.

В образцах смывов, полученных с разных поверхностей коровника, были выделены и охарактеризованы две бактерии Lactococcus lactis G121 и Acinetobacter lwoffii F78, которые оказались способными защитить мышей в экспериментальной модели аллергии [153]. Авторы исследовали поляризационный потенциал ДК, стимулированных А. lwoffii F78, на наивных Т-клетках. Оказалось, что количество Th1-поляризационных генов (например, ICAM-1 и ИФН) индуцируется в ДК, стимулированных А. lwoffii F78, и эти ДК способны индуцировать Th1 дифференциацию и выделение ИФН - [56]. Индукция костимулирующей молекулы CD40 в сочетании с большим количеством ИЛ-12, индуцированных А. lwoffii F78, может быть важна, так как, с одной стороны CD40 положительно регулирует выработку ИЛ -12 после легирования CD40L и ИЛ -12, а с другой стороны, активирует с помощью ИЛ-12 рецепторы на Т-клетках и фактор транскрипции STAT4, который, в свою очередь, приводит к значительной продукции ИФН-.

Установлено, что ДК, обработанные А.lwoffii F78, положительно регулируют соотношение Tbet/GATA3 в наивных Т-клетках и в результате приводят к более управляемому Th1 иммунному ответу. Этот факт особенно важен, поскольку были описаны измененные или несбалансированные соотношения Tbet/GATA3 с низким уровнем Тbet и высоким уровенем GATA3 у пациентов с астмой [118].

Таким образом, повышение соотношения Tbet/GATA3 через влияние А.

lwoffii F78 может быть одним из механизмов защиты от аллергии в условиях влияния фермерского хозяйства и может поддержать теорию "отсутствия иммунного отклонения" как объяснение гигиенической гипотезы.

В ряде случаев у пациентов с аллергией наблюдается отсутствие Th1 дифференциации и защитной активности при индукции Th1 ответа. На протяжении последних нескольких лет были накоплены и представлены доказательства, в которых отмечено положительное влияние регуляторных Т-клеток, обосновавшее идею о «нехватке иммунной супрессии" как одной из объяснений гигиенической гипотезы [81]. В этой связи была исследована индукция регуляторных маркеров в иммунном ответе, таких как ИЛ-10 и TGF-, но никакой значительной экспрессии их генов при стимуляции А. lwoffii F78 не было обнаружено. Более того, большое количество индуцированного ИЛ-12 противоречило действию регуляторных механизмов, так как известно, что ИЛ-10 препятствует образованию ИЛ-12 [57]. И все же противоаллергическое действие образцов пыли из коровников было показано, и оно заключалось в подавлении иммунного ответа и регуляторных механизмов. В экспериментах с блокированием рецепторов ДК было установлено, что лиганды для TLR2, NOD1 и NOD2 не имели существенного значения для активации и поляризации ДК человека. В то же время C406 - антагонист TLR4 полностью блокировал активацию клеток А. lwoffii F78, доказывая, что TLR4 является наиболее важным рецептором, участвующим в Th1 поляризации при стимуляции ДК А. lwoffii F78.

Далее были определены и охарактеризованы компоненты клеточной стенки и другие структуры, полученные из А. lwoffii F78 [57]. При исследовании способности ЛПС А.lwoffii F78 стимулировать ДК была обнаружена аналогичная целостным бактериям способность активировать ДК через лигацию TLR4 и обеспечивать Th1 поляризацию. Ранее было показано, что эндотоксин приводит к Th1 поляризации и таким образом осуществляет противоаллергическое действие, которое зависит от его концентрации, времени обработки и биологической активности используемого ЛПС [77]. Однако не все эндотоксины одинаковы в своей активности. Так, Peters и соавт.(2006) показали, что ЛПС E.coli не обладает защитными свойствами независимо от концентрации, в сравнении с защитной активностью ЛПС, выделенного c конюшен животноводческих ферм Австрии. Что же касается ЛПС А. lwoffii F78, то он структурно отличается от ЛПС кишечной палочки, используемой в исследовании Peters и соавт., и этим определяется его биологическая активность в отношении ДК[126]. В эпидемиологическом исследовании в свое время была обнаружена тесная взаимосвязь между полиморфизмом в гене TLR4 и низким уровнем атопических заболеваний [159]. Таким образом, TLR4 во взаимодействии с микроорганизмами играют важную роль в активации врожденного иммунитета и являются главными игроками в иммунной девиации в раннем детстве.

Определенная роль в патогенезе аллергических заболеваний принадлежит тучным клеткам. Они являются регуляторными и многофункциональными клетками, расположенными в стратегически важных участках взаимодействия с окружающей средой, включая кожу, воздушные пути, сосудистые барьеры и желудочно-кишечный тракт, где они сталкиваются с антигенами и патогенами, а также комменсальными микрорганизмами. Одной из важных задач тучных клеток является защита от болезнетворных микробов. Путем секреции нескольких медиаторов, включая гистамин, протеазы, липидные медиаторы, про- и противоспалительные цитокины, тучные клетки регулируют иммунную систему и взаимодействуют с другими иммунными клетками [41].

Многофункциональность тучных клеток объясняет их участие в патогенезе многих воспалительных заболеваний, в том числе при аллергиях, где их число и количество секретируемых медиаторов значительно увеличивается. Высвобождение медиаторов запускает секрецию слизи и электролитов, приводит к сокращению гладких мышц, запускает активацию нервных клеток и другие симптомы, характерные для аллергических реакций [41]. Регуляция выделения медиаторов тучными клетками является сложным процессом. Механизм активации тучных клеток определяется высоким сродством IgE к его FcR1-рецептору. IgEрецепторы объединяют несколько сигнальных путей, которые контролируют секрецию, связанную с медиаторами аллергии (гистамин и лейкотриены), индукцию Th2 цитокинов (ИЛ-4, ИЛ-5, и др.) и транскрипцию генов фактора некроза опухоли (ФНО). Воспалительные эффекты высвобождения гистамина опосредованы рецепторами гистамина H1-H4 [166]. Тем не менее, некоторые медиаторы тучных клеток, включая ИЛ-10 и гистамин могут иметь противовоспалительное действие и уменьшать воспаление [73].

В исследовании Oksaharju A. и соавт. 2011 г. использовали анализ микрочипов ДНК для более глубокого понимания взаимодействия между пробиотическими бактериями и перевиваемыми тучными клетками человека. Было показано, что живые пробиотические бактерии имеют видо-специфическое действие на тучные клетки человека. Наиболее значительные изменения в экспрессии генов тучных клеток обнаружены в регуляции генов, связанных с активацией тучных клеток и высвобождением медиаторов, в том числе FCER1A, FCER1G и HRH4, и иммунологических реакций, таких как высвобождение ИЛ8, ФНО-, CCL2 и ИЛ10. В ходе анализа оказалось, что лактобациллы влияют на экспрессию генов тучных клеток больше, чем другие бактерии.

Стимуляция тучных клеток в течение 24 часов L. rhamnosus GG и L.

Lc705 значительно подавляет экспрессию генов rhamnosus высокоаффинных рецепторов FCER1A, имеющих сродство к IgE, и HRH4 генов. Кроме того, стимуляция L. rhamnosus Lc705 подавляет экспрессию генов FCЕR1 рецептора FCER1G. Комбинация из Propionibacterium freudenreichii ssp. shermanii JS, Bifidobacterium animalis ssp. lactis Bb12, или Chlamydophila pneumoniae не влияют на экспрессию FCER1 и HRH4 генов.

FCЕR1 играет ключевую роль в обеспечении связанной с аллергией IgEобусловленной активации и дегрануляции тучных клеток [74], что было показано на модели FCЕR1-дефицитных мышей, у которых не проявлялись аллергические реакции после сенсибилизации.

После FCЕR1 агрегации, тучные клетки выделяют медиаторы воспаления, прежде всего гистамин. Гистамин является ключевым посредником в возникновении симптомов аллергии, а также играет важную роль в качестве модулятора иммунного ответа. Эффекты гистамина опосредуются через рецепторы для гистамина H1-H4, которые экспрессируются на поверхности многих клеток, включая тучные и другие воспалительные клетки, а также клетки эпителия. Недавно было обнаружено иммуномодулирующее действие гистаминовых H4 рецепторов [147] и доказана их роль в развитии аллергических заболеваний (ринит, экзема, астма, атопический дерматит). Они влияют на количество Трегуляторных клеток во вторичных лимфоидных органах, а также регулируют их хемотаксис и супрессорную активность. Кроме того, дефицит H4-рецепторов приводит к ухудшению противовоспалительного ответа из-за снижения количества T-регуляторных клеток в ЦНС во время острой фазы болезни и увеличения пропорции Th17-клеток [134].

Подавляя экспрессию генов FCER1 и HRH4, пробиотические лактобактерии могут ослаблять активацию тучных клеток и высвобождение медиаторов воспаления, связанных с аллергией.

Экспрессия гена, кодирующего фосфолипазу С, которая запускает высвобождение внутриклеточного кальция и дегрануляцию тучных клеток, подавляется после стимуляции штаммами Lc705 и LGG.

Кроме того, экспрессия генов, кодирующих семейство митоген-активированных протеинкиназ (МАРК), MAPK12, участвующих в передаче сигналов и приводящих к выработке Th2 цитокинов (ИЛ-3, ИЛ-4, ИЛ-5 и ИЛ-13) и продукции эйкозаноидов[74], также подавляется штаммами Lc705 и LGG, стимулирующими тучные клетки. Эти результаты показывают, что штаммы Lc705 и LGG оказывают супрессивное действие на экспрессию генов тучных клеток, которые участвуют в IgE сигнальном каскаде, и тормозят экспрессию IgE-рецепторов. Результаты исследований показывают, что комменсальные пробиотические бактерии не стимулируют тучные клетки, а скорее уменьшают их активацию. Тем не менее, стоит отметить, что этот эффект не является универсальным ответом на бактерии, потому что не все пробиотические бактерии или патогенные, например Chlamydophyla pneumoniae, одинаково влияют на экспрессию генов высокоаффинных IgE-рецепторов.

Предполагают, что использование пробиотиков может повлиять на неспецифическое воспаление через активацию врожденного иммунитета, тем самым, предотвращая симптомы аллергических заболеваний и сдвигая иммунный ответ в сторону Th1 типа [109]. В исследованиях in vitro было показано, что пробиотические бактерии индуцируют экспрессию и секрецию Th1 цитокинов в моноцитах, макрофагах и дендритных клетках [154]. Кроме того, в клиническом исследовании продемонстрировано, что неспецифическое воспаление, индуцированное штаммом LGG у склонных к аллергии детей, является одним из механизмов для предотвращения атопических заболеваний [109]. Тучные клетки, стимулированные L.

rhamnosus GG и L. rhamnosus Lc705, Bifidobacterium animalis ssp. lactis Bb12 или в их комбинации, или Chlamydophyla pneumoniae также индуцируют экспрессию гена, который кодирует противовоспалительный ИЛ-10. Секреция ИЛ-10 тучными клетками ограничивало хроническое воспаление в коже при аллергических реакциях [80]. Показано, что пробиотические штаммы Bifidobacterium стимулируют производство ИЛв иммунных клетках. Индукция ИЛ-10 в тучных клетках может участвовать в балансировке воспалительных процессов. Таким образом, супрессия FCER1 и HRH4 генов в сочетании с регуляцией ИЛ-10 после стимуляции Lactobacillus может подавлять воспалительные реакции при аллергии и других воспалительных заболеваниях, при которых тучные клетки, как известно, играют ключевую роль [41]. Так как Chlamydophyla pneumoniae активирует только ИЛ-10, не затрагивая FCER1 и HRH4, тучные клетки, стимулированные патогенными хламидиями, не оказывают те же клинические эффекты, что и пробиотические бактерии.

В исследовании Hui-ChingMei и соавт., 96 штаммов молочнокислых бактерий (МКБ) выделили из традиционных Тайваньских продуктов брожения и оценили их способность in vitro влиять на продукцию цитокинов периферическими мононуклеарами человека для выявления иммунологически активных штаммов. Штаммы Lactococcus lactis A17 с повышенной ИФН- продукцией, которые были сгруппированы как молочнокислые бактерии с доминирующим Th1 ответом, были представлены в качестве противоаллергических кандидатов. Существуют доказательства, что МКБ обладают Th1/Th2 регуляторным эффектом.

Лактококки увеличивают производство Th1 цитокинов ИЛ-12 и ИФН - и уменьшают продукцию Th2 цитокинов ИЛ-4 и ИЛ-5[112]. Другим противоаллергическим кандидатом является Lactobacillus paracasei штамм KW3110, ингибирующий продукцию Th2 цитокинов ИЛ-4, ИЛ-5 и ИЛ-13 [88]. Было высказано предположение, что штамм A17 с Th1поляризационным потенциалом может проявлять in vitro противоаллергический эффект и Иммуногенность МКБ in vivo.

обусловлена выживаемостью этих бактерий в желудочно-кишечном тракте, так как они способны выживать в кислой среде и прикрепляться к поверхности слизистой оболочки. С другой стороны, было показано, что и убитые МКБ обладают иммуномодулирующим эффектом [120].

Yoshida и соавт. [165]сообщили, что живые Lactococcus lactis штамм C59, выделенные из стартерных молочных культур, подавляли продукцию специфических IgE у OVA-сенсибилизированных мышей путем регулирования ИЛ-4. Однако ингибирующее действие на продукцию IgE было потеряно, когда штамм C59 убивали нагреванием в этой же модели.

В то же время в другом исследовании [112] ингибирующие эффекты на продукцию IgE наблюдались в обеих группах мышей из линии BALB/c, иммунизированных как живыми (A17-A), так и убитыми нагреванием бактериями (A17-H). Человеческие мононуклеарные клетки периферической крови использовались исследователями для проверки иммунных реакций штамма A17 по выработке ИФН -. Мышам линии BALB /с овалбумин яичного белка (OVA) вводили интраперитонеально на 7, 11 и 14 день, а штаммы A17-A и A17-H давали перорально в течение 4 недель, чтобы изучить влияние лактококков на продукцию иммуноглобулинов и цитокинов. Экспрессию мРНК TLR и NOD рецепторов в клетках селезенки проанализировали в режиме PCR реального времени. В обеих группах мышей штаммы A17-A и A17-H модулировали OVA-индуцированные аллергические реакции. Вклеточный ответ был связан с уменьшением выработки IgE и повышением спецефических OVA-IgG2a, в то время как Т-клеточный ответ выражался в увеличении производства ИФН - и снижении продукции ИЛ-4. Штамм A17 также подавлял экспрессию мРНК NOD-1, NOD-2 и TLR-4. В этом исследовании штамм Lactococcus lactis A17 был представлен в качестве перспективного кандидата для профилактики и лечения аллергических заболеваний при пероральном использовании.

В нескольких эпидемиологических исследованиях сообщалось, что микробиота различается у младенцев от родителей с аллергическими заболеваниями и без них, проживающих в странах с высокой или низкой распространенностью аллергии [157].Оказалось, что микробиоту младенцев от родителей, не имеющих аллергии, чаще колонизируют лактобациллы. Здоровые дети колонизированы младенческими видами B.

longum и B.breve, а дети с экземой, как правило, колонизированы взрослыми видами B. adolescentis[123]. В исследованиях прошлых лет показано, что уменьшение микробного разнообразия, сопровождается уменьшением числа лактобацилл и бифидобактерий, и ранняя колонизация и связана с развитием Staphyloccocus aureus Clostridum difficile аллергических заболеваний в более позднем возрасте [142].

Сообщается также, что состав кишечной микробиоты не может быть приведен в первоначальное состояние после лечения антибиотиками [58].

Эти данные подчеркивают важную роль микробиоты в развитии иммунной системы и ее потенциал для иммунной регуляции таких заболеваний, как аллергия и аутоиммунные реакции.

Способность кишечной микробиоты влиять на иммунный ответ привела к новым подходам в терапии, которые используют эти различия в микробиоте в лечении и профилактике больных аллергией. В последние годы пробиотические бактерии были использованы с определенным успехом в предотвращении аллергических заболеваний у младенцев в группах высокого риска. Для оценки клинической эффективности этих подходов требуются дальнейшие клинические исследования с испытанием новых перспективных препаратов.

1.5 ВЗАИМОСВЯЗЬ ОЖИРЕНИЯ С МИКРОБИОТОЙ КИШЕЧНИКА

Существует целый ряд работ, проведенных на животных, в которых было показано, что геном организма хозяина модулирует состав микробиоты кишечника. У ob/ob мышей с генетически обусловленным ожирением в результате мутаций в кодирующем лептин гене прослеживалась взаимосвязь с изменениями в микробиоте кишечника [148]. Анализ 5088 бактериальных последовательностей гена 16S рРНК, выделенных из содержимого кишечника у ob/ob мышей, худых братьев и сестер с ob/+ и +/+генотипами, а также матерей с ob/+ генотипом, показал, что при гомозиготной мутации у ob/ob мышей в кишечнике было на 50% меньше и пропорционально возрастала численность Bacteroidetes Firmicutes [104]. Микробиота мышей с генотипом db/db (диабет) также различалась [78]. У мышей ob/ob, db/db микробиота кишечника характеризовалась более высокой численностью бактерий Firmicutes и низкой долей Bacteroidetes в отличие от их худых сородичей. Кроме того, Odoribacter, Prevotella и Rikenella наблюдали только у мышей с db/db генотипом, а Enterorhabdus встречали только в кишечнике худых мышей.

Однако вполне возможно, что изменения бактериального состава у мышей ob/ob и db/db были вторичны по отношению к гиперфагии.

Влияние кишечной микробиоты на метаболизм удобно изучать на примере близнецов, которые отличаются только комплекцией тела. В этом случае разница в обменных процессах обусловлена не генетическими причинами, а внешними факторами и видовым составом кишечных бактерий. В этой связи была проанализирована микробиота кишечника у 154 пациентов из группы монозиготных или дизиготных близнецов и их матерей. Оказалось, что у тучных людей в целом наблюдали меньшее микробное разнообразие по сравнению с худыми пациентами, в частности, была ниже доля Bacteroidetes, но выше численность Actinobacteria. Однако в отличие от предыдущих исследований на мышах, никаких существенных различий в доле Firmicutes не выявлено [150].

Дискуссия относительно соотношения Firmicutes/Bacteroidetes у людей, страдающих ожирением, до сих пор продолжается. В очередном исследовании проанализировали микробиоту худых и тучных добровольцев обоих полов и обнаружили, что группа бактерий Clostridium leptum и Clostridium coccoides, относящихся к Firmicutes, а также Bacteroides spp. превалировали в микробиоте обеих групп пациентов.



Pages:   || 2 | 3 | 4 |

Похожие работы:

«Якимова Татьяна Николаевна Эпидемиологический надзор за дифтерией в России в период регистрации единичных случаев заболевания 14.02.02 эпидемиология диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор...»

«Жабина Виктория Юрьевна Экспериментальная и производственная оценка элективных питательных сред и дезинфектантов при туберкулезе крупного рогатого скота 06.02.02 – Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата...»

«ШАЯХМЕТОВ МАРАТ РАХИМБЕРДЫЕВИЧ ИЗУЧЕНИЕ ПОЧВЕННОГО ПОКРОВА ЛЕСОСТЕПНОЙ ЗОНЫ ЗАПАДНОЙ СИБИРИ НА ОСНОВЕ ДИСТАНЦИОННОГО ЗОНДИРОВАНИЯ ЗЕМЛИ 03.02.13 – почвоведение Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук научный руководитель: доктор сельскохозяйственных наук, профессор Л.В. Березин Уфа...»

«СЕРГЕЕВА ЛЮДМИЛА ВАСИЛЬЕВНА ПРИМЕНЕНИЕ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ЗАКВАСОК ДЛЯ ОПТИМИЗАЦИИ ФУНКЦИОНАЛЬНО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ МЯСНОГО СЫРЬЯ И УЛУЧШЕНИЯ КАЧЕСТВА ПОЛУЧАЕМОЙ ПРОДУКЦИИ Специальность 03.01.06 – биотехнология ( в том числе бионанотехнологии) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель Доктор биологических наук, профессор Кадималиев Д.А. САРАНСК 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ.....»

«Карачевцев Захар Юрьевич ОЦЕНКА ПИЩЕВЫХ (АКАРИЦИДНЫХ) СВОЙСТВ РЯДА СУБТРОПИЧЕСКИХ И ТРОПИЧЕСКИХ РАСТЕНИЙ В ОТНОШЕНИИ ПАУТИННОГО КЛЕЩА TETRANYCHUS ATLANTICUS MСGREGOR Специальность: 06.01.07 – защита растений Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель: Попов Сергей...»

«Шапурко Валентина Николаевна РЕСУРСЫ И ЭКОЛОГИЧЕСКОЕ КАЧЕСТВО ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ (НА ПРИМЕРЕ БРЯНСКОЙ ОБЛАСТИ) Специальность 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«Очиров Джангар Сергеевич НАРУШЕНИЯ МИКРОНУТРИЕНТНОГО СТАТУСА ОВЕЦ И ИХ КОРРЕКЦИЯ ВИТАМИННО-МИНЕРАЛЬНЫМИ КОМПЛЕКСАМИ 06.02.01 – диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор ветеринарных...»

«Фирстова Виктория Валерьевна ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-ИММУНОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ВЫБОРА СТРАТЕГИИ ОЦЕНКИ ПОСТВАКЦИНАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА ПРОТИВ ЧУМЫ И ТУЛЯРЕМИИ 14.03.09 – Клиническая иммунология, аллергология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических...»

«Дорошенко Васса Борисовна ХОЗЯЙСТВЕННО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ И КАЧЕСТВЕННЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ МЯСА БЫЧКОВ КАЗАХСКОЙ БЕЛОГОЛОВОЙ ПОРОДЫ РАЗНЫХ ГЕНОТИПОВ 06.02.10 – частная зоотехния, технология...»

«Гуляева Анна Федоровна ТРАВЯНЫЕ МЕЛКОЛИСТВЕННЫЕ ЛЕСА КУЗНЕЦКОЙ КОТЛОВИНЫ: СИНТАКСОНОМИЯ, ЭКОЛОГИЯ, ГЕОГРАФИЯ 03.02.01 – «Ботаника» ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель д.б.н., ст.н.с. Н.Н. Лащинский Новосибирск 2014 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ..4 Глава 1. ИСТОРИЯ ИЗУЧЕНИЯ РАСТИТЕЛЬНОСТИ...»

«Цвиркун Ольга Валентиновна ЭПИДЕМИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС КОРИ В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКИ. 14.02.02 – эпидемиология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: заслуженный деятель науки РФ, лауреат Государственной премии СССР профессор, доктор медицинских наук Ющенко Галина Васильевна Москва – 20 Содержание...»

«Шершнева Анна Михайловна ПОЛИМЕРНЫЕ МИКРОЧАСТИЦЫ НА ОСНОВЕ ПОЛИГИДРОКСИАЛКАНОАТОВ: ПОЛУЧЕНИЕ, ХАРАКТЕРИСТИКА, ПРИМЕНЕНИЕ Специальность 03.01.06 – Биотехнология (в т.ч. бионанотехнологии) ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, Шишацкая Екатерина Игоревна...»

«Моторыкина Татьяна Николаевна ЛАПЧАТКИ (РОД POTENTILLA L., ROSACEAE) ФЛОРЫ ПРИАМУРЬЯ И ПРИМОРЬЯ 03.02.01 – Ботаника Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, старший научный сотрудник Н.С. Пробатова Хабаровск Содержание Введение... Глава 1. Природные...»

«БАДМАЕВА АЛИЯ АЗАТОВНА ИММУНОЛОГИЧЕСКОЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ АДАПТОГЕНОВ НА ФОНЕ ДЕБИКИРОВАНИЯ ПТИЦ Специальность: 06.02.02ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биол. наук, профессор Р.Т. Маннапова Москва 2014 Оглавление ВВЕДЕНИЕ ГЛАВА I. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР 1.1 Влияние дебикирования на организм...»

«ЖЕСТКОВА ДАРЬЯ БОРИСОВНА СОСТАВ И СТРУКТУРА ТРАВЯНИСТОГО ПОКРОВА ПРИДОРОЖНЫХ ТЕРРИТОРИЙ АВТОМАГИСТРАЛЕЙ КРУПНОГО ПРОМЫШЛЕННОГО ГОРОДА Специальность: 03.02.08 – Экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«СОЛОВЬЕВ Альберт Николаевич КЛИМАТОГЕННАЯ И АНТРОПОГЕННАЯ ДИНАМИКА БИОТЫ В МЕНЯЮЩИХСЯ ЭКОЛОГИЧЕСКИХ УСЛОВИЯХ ВОСТОКА РУССКОЙ РАВНИНЫ Специальность 03.02.08 – экология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Киров Оглавление Введение Глава 1. Обзор состояния проблемы климатогенной...»

«ПОРЫВАЕВА Антонина Павловна ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ И ПРАКТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ МОДЕЛИРОВАНИЯ ХРОНИЧЕСКОЙ ГЕРПЕСВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ 03.02.02 Вирусология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор Глинских Нина Поликарповна Екатеринбург 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ 1 ВВЕДЕНИЕ 2 ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ 2.1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ...»

«Чечулова Анна Васильевна ПРОГНОСТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ НАСЛЕДСТВЕННЫХ И ПРИОБРЕТЕННЫХ ФАКТОРОВ РИСКА ВЕНОЗНОГО ТРОМБОЭМБОЛИЗМА У ПАЦИЕНТОВ МОЛОДОГО ВОЗРАСТА 14.01.21 – гематология и...»

«ШИТОВ АЛЕКСАНДР ВИКТОРОВИЧ ВЛИЯНИЕ СЕЙСМИЧНОСТИ И СОПУТСТВУЮЩИХ ГЕОЛОГИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ НА АБИОТИЧЕСКИЕ И БИОТИЧЕСКИЕ КОМПОНЕНТЫ ЭКОСИСТЕМ (НА ПРИМЕРЕ ЧУЙСКОГО ЗЕМЛЕТРЯСЕНИЯ И ЕГО АФТЕРШОКОВ) 25.00.36 – Геоэкология (науки о Земле) Диссертация на соискание ученой степени доктора геолого-минералогических наук Горно-Алтайск 201...»

«МАХАЧЕВА ХАННА ГАДЖИЕВНА СОСТОЯНИЕ И ПЕРСПЕКТИВЫ МОДЕРНИЗАЦИИ ОТОРИНОЛАРИНГОЛОГИЧЕСКОЙ ПОМОЩИ В РЕСПУБЛИКЕ ДАГЕСТАН 14.01.03 – болезни уха, горла и носа 14.02.03 – общественное здоровье и здравоохранение Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научные консультанты: доктор медицинских наук, профессор Н.А. Дайхес доктор медицинских наук, профессор Л.М. Асхабова...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.