WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 8 |

«МНОГОУРОВНЕВЫЙ АНАЛИЗ СОСТОЯНИЯ КОРНЕОСКЛЕРАЛЬНОЙ ОБОЛОЧКИ ГЛАЗА В РЕАЛИЗАЦИИ НОВЫХ ПОДХОДОВ К ДИАГНОСТИКЕ И ЛЕЧЕНИЮ ПЕРВИЧНОЙ ОТКРЫТОУГОЛЬНОЙ ГЛАУКОМЫ ...»

-- [ Страница 2 ] --

После образования зрелых сшивок коллаген становится нерастворимым в воде и кислотах. В процессе старения организма неферментативный путь (гликация) играет ключевую роль. В настоящее время отсутствует полное описание всех химических реакций, приводящих к конечным продуктам гликации (advanced glycation end-products - AGEs). С возрастом в коллагенсодержащих тканях наблюдается увеличение сшивок, образованных путем гликации, и это проявляется уменьшением проницаемости, увеличением жесткости и потерей эластичности ткани [140, 141].

Концентрация поперечных сшивок определяет механические характеристики соединительной ткани. Коллагеновая ткань была бы неспособна выдерживать физиологические нагрузки в отсутствии поперечных сшивок [61, 141, 187, 311].

Предполагается, что аналогичные изменения должны происходить и в корнеосклеральной оболочке. Так, определенная в эксперименте на интактных глазах свиней ригидность глазного яблока составила 0,0047 ± 0,0005 мм рт.ст./мкл. В то же время на глазах, обработанных 1% раствором глицеральдегида (химическим агентом, увеличивающим количество поперечных сшивок), этот показатель растет до 0,0063 ± 0,0006 мм рт.ст./мкл, а при обработке 4% раствором глицеральдегида - до 0,0071 ± 0,0005 мм рт.ст./мкл [252].

Проведенные нами ранее исследования свидетельствуют о том, что прогрессирование ПОУГ приводит к формированию избыточных поперечных химических связей в коллагеновых структурах склеры, повышающих ее жесткость [66, 68].

В настоящее время для оценки структурной стабильности коллагена в различных видах соединительной ткани широко используется метод термического анализа, который был нами использован для получения этих данных. Термомеханическая стабильность коллагена характеризуется показателем температуры денатурации. Она существенно зависит от посттрансляционной модификации макромолекул коллагена, от упаковки макромолекул в фибриллы, волокна и пучки, от взаимодействия коллагена с другими матриксными макромолекулами. Вышесказанное осуществляется путем формирования внутри- и межмолекулярных поперечных сшивок. Термически индуцированные трансформации коллагена, включающие, в том числе, распад сшивок, отражают общее состояние коллагеновой структуры [65, 180]. Нами был использован метод дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК), с измерением Тm для определения уровня внутри- и межмолекулярной связанности соединительной ткани [68, 145, 185, 242, 246, 348]. Были четко установлены термодинамические параметры денатурации коллагена - Тm и энтальпия Hд для полностью гидратированного фибриллярного коллагена. Они соответственно составили 6440C и 655 Дж/г коллагена [266, 330]. Выявлено, что величина Hд и форма кривой денатурации здоровых и патологически измененных тканей существенно различаются между собой [168]. Полученные нами и Н.А.

Даниловым данные свидетельствуют о существенном возрастании уровня поперечной связанности склеры по мере прогрессирования глаукоматозного процесса [43]. Повышение Тд соответствует увеличению стабильности коллагенового волокна, что вызвано образованием внутри- и межмолекулярных ковалентных связей, а уменьшение энтальпии денатурации коллагена в тканях может быть объяснено возрастанием более термостабильной фракции коллагена, сохраняющей конформацию тройной спирали при нагревании.

Накопление в склере конечных продуктов гликации (КПГ), связанное с активацией процессов патологического старения тканей глаза при глаукоме, может вызвать рост поперечных сшивок коллагена склеры. В последние годы в литературе описывается резкое повышение содержания КПГ в экстрацеллюлярном матриксе диска зрительного нерва, решетчатой мембране и сетчатке глаукомных глаз [320]. Однако флуоресцентный анализ, который позволяет определить уровень конечных продуктов гликации, - демонстрирует одинаковый уровень флюоресценции образцов склеральной ткани здоровых пожилых людей и пациентов той же возрастной группы с разными стадиями ПОУГ, что демонстрирует одинаковый уровень КПГ [277]. Данных об увеличении активности лизилоксидазы и образовании поперечных сшивок ферментативным путем (не флуоресцируют) в литературе не описано. Известно, что при глаукомном процессе в трабекулярной сети возрастает уровень трансглутаминазы и индукторов её синтеза [189, 340, 342].

В проведенных нами ранее исследованиях высказано предположение, что трансглутаминаза способствует образованию поперечных сшивок амидной природы между аминокислотными остатками глутамина и гидроксилизина (не флуоресцируют). Подобные сшивки весьма устойчивы к нагреванию и должны оказывать влияние на рост Тд, однако вследствие своей аналогичности белковым пептидным связям они полностью разлагаются при кислотном гидролизе, не позволяя выявить изменения при аминокислотном анализе [44].

Известно, что динамическое равновесие матрикса склеральной ткани поддерживается одновременно протекающим синтезом коллагена в тканях и его деградацией матриксными металлопротеиназами (ММП). Вероятно, в ткани склеры при глаукоме происходят патологические изменения, связанные со сдвигом этого тонкого равновесия, в результате скорость деградации уменьшается по сравнению со скоростью синтеза, количество коллагена увеличивается, растет и Тд, повышается жесткость склеральной ткани. Повышение протеолитической устойчивости «сшитой» склеры к действию тканевых матриксных металлопротеиназ, возможно обуславливает существенное накопление склерального коллагена.

Белки экстрацеллюлярного матрикса разрушаются матриксными металлопротеиназами, которые представляют собой семейство кальций- и цинкзависимых внеклеточных эндопротеиназ [269, 328]. ММП подразделяются на классов: коллагеназы ММП-1, ММП-8 и ММП-13, которые разрушают интерстициальный коллаген I, II, III [198, 233], желатиназы ММП-2 и ММП-9, разрушающие коллаген и желатин [251, 268], стромилизины ММП-3 и ММП-10 и матрилизины ММП-7 и ММП-26, которые разрушают ламинин, фибронектин и другой нефибриллярный коллаген [219, 271],мембранно-ассоциируемые ММП (MMП-14, MMП-15, ММП-16, ММП-17, ММП-24 и ММП-25 - способны денатурализовать многие внеклеточные белки) и другие, к ним относятся ММПММП-19, ММП-20, MMП-21, MMП-23, MMП-27 и MMП-28, которые не удалось классифицировать [234]. Существуют также и тканевые ингибиторы матриксных металлопротеиназ (TIMP). S. Huang определил, что во влаге передней камеры содержатся МMП-1, МMП-2, МMП-7, МMП-9, TIMP-1 и TIMP-2 [212], а в тканях трабекулы глаза человека и быка выявлены МMП-1, МMП-3, МMП-4, TIMP-1 [138].

J. Bradley в экспериментах на выделенных глазах человека установил изменение проницаемости трабекулярной ткани при воздействии ММП. Так, при добавлении МMП-2, МMП-3, МMП-9 происходит увеличение проницаемости трабекулярной ткани на 160%, а при воздействии интерлейкином-1, повышающим активность всех типов ММП, проницаемость увеличивается на 140%, и, наоборот, при обработке TIMP-2 она снижается до 40% от исходного уровня [148].В литературе есть данные об изменении содержания ММП и их ингибиторов в тканях глаза пациентов с ПОУГ, а M. Kowalski утверждает, что металлопротеиназы, являясь протеолитическими ферментами, участвуют в патогенезе глаукомы и имеют решающее значение в ее диагностике [240].S.

Rnkk заявляет о повышении уровня МMП-1, разрушающей коллагены I, II, III, VII, VIII, X, желатин, и МMП-3, разрушающей II, III, IV, V, IX, X, XI, желатин, фибронектин, ламинин в углу передней камеры больных ПОУГ. Однако, по данным того же исследования автор получил, что уровень их основных ингибиторов, TIMP-1 и TIMP-3 тоже повышен [297]. J. Seo утверждает, что в теноновой капсуле глаукомных глаз увеличивается содержание ММП-1 и 2, однако ничего не говорится об уровне их ингибиторов [308].Некоторые авторы получили экспериментально доказанное увеличение содержания ингибиторов ММП и индукторов их синтеза в водянистой влаге глаз с ПОУГ: образцы водянистой влаги таких больных понижали способность к деградации коллагена I in vitro [188, 255]. В результате, по мнению S. Rnkk, причиной нарушения оттока у пациентов с ПОУГ может быть дисбаланс между активностью протеиназ и их ингибиторов. В свою очередь G. Avila по результатам ряда проведенных исследований, утверждает, что причиной ухудшения оттока внутриглазной жидкости через трабекулярную сеть у пациентов с ПОУГ может стать сниженная активность коллагеназ и их ингибиторов [139]. S. Xu также сообщает об увеличении MMП-2, MMП-9, TIMP-1 и TIMP-2 в решетчатой пластинке крыс с хронически повышенным ВГД [344].

Таким образом, однозначного мнения об уровне концентрации матриксных металлопротеиназ и их тканевых ингибиторов во влаге передней камеры и тканях глаз пациентов с первичной открытоугольной глаукомой на сегодняшний день не существует. Ясно, что нарушен их баланс, в результате чего происходит излишнее накопление коллагеновых белков и уплотнение внеклеточного матрикса соединительной ткани глазных структур.

Особый интерес, учитывая все выше сказанное, представляет механизм действия аналогов простагландина, которые широко применяются в клинике для лечения пациентов с ПОУГ. Препараты данной группы снижают ВГД, улучшая увеосклеральный отток водянистой влаги путем воздействия на различные подклассы простагландиновых рецепторов [97]. Латанопрост, травапрост, тафлюпрост, биматопрост и другие подобные препараты являются аналогами простагландина F2, механизм их гипотензивного действия окончательно не определен, однако ряд исследований демонстрируют их значение в регуляции активности ММП [235]. Экспериментальные исследования демонстрируют, что длительная обработка материала клеток цилиарной мышцы человека аналогами простагландина повышает в них активность про-МMП-1 на 254%, про-МMП-3 на 128% [250]. В других исследованиях выявлено увеличение уровня МMП-1, 2, 3 и 9 классов в ткани цилиарной мышцы [339]. Интересный эксперимент был проведен на глазах обезьян: на протяжении некоторого времени в один глаз закапывали аналоги простагландинов, а второй служил контролем. Далее в парных глазах определяли содержание коллагена I, III и IV типов. Было выявлено, что в опытных глазах уровень коллагена снизился на 45% по сравнению с контролем [300]. Описанные эксперименты конечно не доказывают прямую причинно-следственную связь между увеличением уровня ММП и снижением ВГД, они демонстрируют возможности местной терапии аналогами простагландинов увеличивать деградацию экстрацеллюлярного матрикса дренажных путей, тем самым улучшая увеосклеральный отток [245].

Итак, можно заключить, что корнеосклеральная оболочка глаза пациентов с ПОУГ является более плотной и менее проницаемой. Это может быть связано с избыточным накоплением экстрацеллюлярного матрикса, в первую очередь, с накоплением коллагена, деградация которого затруднена из-за нарушенного метаболизма фиброзной оболочки глаза.

1.2. Значение микроэлементного дисбаланса в патогенезе ПОУГ 1.2.1. Роль микроэлементов в метаболизме глазных тканей Одним из известных факторов, участвующих в возникновении и прогрессировании ПОУГ, является нарушение гидродинамики внутриглазной жидкости (ВЖ), связанное как с деструкцией дренажной системы глаза, так и с изменением состава, физико-химических свойств (в частности, динамической вязкости и когезивности) и скорости циркуляции ВЖ [100]. Кроме того, важную роль в развитии ПОУГ могут играть метаболические показатели ВЖ, в первую очередь ее белковый, солевой и микроэлементный состав, обеспечивающий трофические и обменные процессы во многих структурах глаза. С середины прошлого столетия взгляд на микроэлементы (МЭ) только с точки зрения дефицитных состояний сменился представлением о них как о факторах, определяющих жизненно важные процессы в органах и тканях, а также осуществляющих реализацию генетических программ [5, 80, 102]. Значение микроэлементов - большой группы химических веществ, содержание которых в организме не превышает 10 -9-10-12 мас/% - в жизнедеятельности клеток и поддержании постоянства внутренней среды организма чрезвычайно велико и многообразно и не уступает роли витаминов [286]. Существенные особенности жизненно необходимых МЭ в их оптимальных дозах состоят в том, что каждый из них активирует более или менее обширную группу ферментов (хотя механизмы активации могут быть различными). Они входят в состав более чем тысячи ферментов нейронов и глии, участвуют в синтезе нейроспецифических белков и миелина, стабилизируют цитоскелет нейрона, участвуют в синтезе нейромедиаторов, нейропептидов, катехоламинов, формируют пул антиоксидантов, обеспечивают транссинаптическое проведение нервных импульсов.

В связи с этим им уделялось немалое внимание и при изучении физиологических и патологических процессов в органе зрения [88, 119, 124, 128, 133].

Обнаружено, что такие микроэлементы как медь, цинк, железо, кобальт, никель, марганец, барий, ванадий, титан, кремний и некоторые другие постоянно присутствуют практически во всех структурах здорового глаза: в сетчатке, сосудистом тракте, хрусталике, стекловидном теле, роговице и склере [30, 114, 128, 166, 176, 177]. Отмечается возрастная динамика их концентрации, специфическая для разных глазных составляющих. В частности, в сетчатке и зрительном нерве в первые два десятилетия жизни уровень меди, алюминия, кобальта, марганца несколько увеличивается, а затем опять снижается, в стекловидном теле с возрастом происходит постепенное накопление кремния, а в зрительном нерве железа.

Особая роль в метаболизме глазных тканей принадлежит цинку, поскольку он связан с функционированием в организме более чем 200 ферментов, вовлеченных, в первую очередь, в продукцию нуклеиновых кислот (ДНК и РНК) и в другие важнейшие метаболические процессы. К этим ферментам относятся супероксиддисмутаза, карбоксил-пептидаза А, лизилоксидаза, каталаза, тирозиназа, дегидрогеназа сетчатки и др. В частности, наше внимание привлекло участие цинка в метаболизме белков, в особенности коллагена и протеогликанов, которое считается таким фундаментальным, что его сравнивают в этом отношении с незаменимой аминокислотой [5, 157, 211, 230, 298].

Содержание цинка в различных тканях глаза распределяется (в порядке убывания) следующим образом: сетчатка (преимущественно ее пигментный эпителий), хориоидея, цилиарное тело, радужка, зрительный нерв, склера, роговица, хрусталик [230]. В склере, так же, как в стекловидном теле и, особенно в хрусталике, его концентрация с годами уменьшается [128, 179]. Это вполне может быть связано с возрастным снижением активности биосинтеза белков, в частности, коллагена, поскольку экспериментально показано, что недостаток цинка вызывает снижение содержания последнего в соединительной ткани вследствие замедления пролиферации фибробластов - клеток, синтезирующих коллаген [184]. Еще одним важным свойством цинка является его участие как антиоксиданта в регуляторном антиокислительном воздействии по отношению к перекисному окислению липидов (ПОЛ), т.е. в стабилизации и защите клеточных мембран и биополимеров от повреждающего действия свободных радикалов. В этом отношении цинк действует не один: он является частью комплекса микроэлементов, необходимых для поддержания нормального статуса глазных тканей [172, 270, 273].

В первую очередь концентрация цинка в биологических жидкостях и тканях тесно взаимосвязана с содержанием еще одного микроэлемента-биотика - меди.

Медь, как и цинк, обладает высокой биологической активностью, поскольку она участвует в деятельности многих ферментов и гормонов, оказывает существенное влияние на рост и нормальное развитие органов и тканей [77].

Медь постоянно обнаруживается в глазных структурах. Максимальное ее количество концентрируется в сетчатке, поскольку медь (вместе с цинком) является кофактором металлоферментов, регулирующих структурные процессы в этой ткани [289]. Довольно высока концентрация меди в роговице, хориоидее и зрительном нерве, меньше меди в хрусталике и склере и совсем незначительное количество в стекловидном теле [96, 128]. С возрастом уровень меди увеличивается в норме лишь в сосудистом тракте, а в сетчатке, ядре хрусталика, роговице и склере падает [128, 166, 167, 176, 177, 179].

В низких концентрациях ионы меди проявляют свойства инициаторов ПОЛ, тогда как в более высоких концентрациях медь ингибирует окисление. Участие медь-зависимого фермента супероксиддисмутазы в механизме защиты от повреждающего действия ПОЛ и активных форм кислорода, разрушающих коллагеновые структуры, является одной из самых важных функциональных ролей меди [25, 42, 260, 261, 314]. Второй не менее фундаментальной функцией меди считается участие медь-содержащего фермента лизил-оксидазы в формировании поперечных связей в молекуле коллагена, т.е. в процессе его биосинтеза и созревания [102, 237, 263, 287]. Экспериментально показано, что содержание коллагена повышается при пероральном введении меди [293].

Железо также относится к группе жизненно важных микроэлементов, поскольку входит в состав ряда дыхательных ферментов (каталазы, пероксидазы, цитохрома и др.), которые активно участвуют в окислительно-восстановительных процессах, в кроветворении и гемоглобинообразовании.

Железо обнаруживается практически во всех структурах глаза: его высокая концентрация, незначительно изменяющаяся с возрастом, отмечается в сосудистом тракте, несколько меньшая в сетчатке, зрительном нерве, стекловидном теле и склере [130, 176, 177]. В то же время в ядре хрусталика содержание железа, значительное в молодом возрасте, резко снижается после 40 лет [179].

Процессы окисления могут протекать только в присутствии оксидаз, в состав которых входит железо в виде металлокомплекса [102]. Однако в случае превышения его оптимальной концентрации прооксидантные свойства железа могут способствовать интенсификации процессов ПОЛ в тканях глаза [46, 53].

Катализированное железом ПОЛ ингибируется цинком, медь-содержащими агентами - церулоплазмином и супероксидисмутазой, а также витамином Е [44,146].

Активную роль в формировании и функционировании соединительной ткани играет кремний и его соединения, которые, непосредственно участвуя в биосинтезе коллагена, придают коллагеновым структурам прочность и эластичность [37]. Имеются данные о достаточно высоком содержании кремния (также и титана) в хрусталике [54, 95]. Надо иметь в виду, что в больших концентрациях этот элемент активирует процессы свободнорадикального окисления, что может привести к развитию общей и глазной патологии, например, катаракты [1, 10, 91].

Одним из постоянно присутствующих в глазных структурах микроэлементов является кобальт, который, как полагают, участвует в регуляции энергетического баланса, угнетая гликолитические процессы. В норме пик его накопления в тканях глаза наблюдается в 20-40 лет [337]. К этому времени более 50% его общего содержания в глазном яблоке концентрируется в роговице и склере [96, 128,177]. Последнее обстоятельство обосновывает интерес к изучению обмена кобальта при миопии.

В число микроэлементов, принимающих то или иное участие в обмене соединительной ткани и функционировании антиокислительной защитной системы организма, входят также бор, алюминий, селен, хром, никель и некоторые другие [30, 95, 102, 160, 287]. Однако сведения об их функциональной роли в физиологии и патологии глазных структур, которые могли бы представлять значительный интерес, весьма скудны и фрагментарны.

Отмечена связь нарушений метаболизма отдельных микроэлементов с некоторыми глазными заболеваниями. Выявлено снижение уровня железа, дисбаланс цинка и меди в сыворотке крови при патологии сетчатки (пигментном ретините, возрастной макулодистрофии и болезни Штаргарта) [163, 178, 202, 289, 312, 313], а также во влаге передней камеры при глаукоме: в последнем случае содержание меди оказалось увеличенным [134]. Концентрация меди достоверно повышена также в катарактальном хрусталике [88, 117, 128, 142, 218, 294]. При сенильной катаракте отмечаются и другие нарушения обмена микроэлементов, в частности, увеличение уровня железа в крови. Воспалительные заболевания глаз также сопровождаются повышением содержания железа в хрусталике, камерной влаге и даже в стекловидном теле [262]. Отмечено повышение содержания кобальта в сетчатке больных с абсолютной глаукомой и при субатрофии глаза [128]. У больных сахарным диабетом развитие диабетической ретинопатии может также происходить на фоне нарушения обмена меди, магния, хрома, цинка [332].

При этом показано, что создание искусственного дефицита последнего в сетчатке и хориоидее вызывает диабетические изменения глазного дна у животных [90, 345].

В системе антиокислительной защиты клеток участвует магний, повышающий резистентность к свободнорадикальному окислению [73, 118]. Рост и формирование молодых тканей (в том числе и соединительной ткани) также требует увеличения концентрации Mg, а его недостаток снижает уровень белка [105, 182, 183]. Отмечено, что после 60 лет содержание магния в ядре хрусталика резко снижается [337]. Особой роли магния в метаболизме тканей глаза, в том чиле соединительной и нейрональной ткани в норме и при глазных заболеваниях посвящен отдельный раздел данного обзора.

1.2.2. Роль микроэлементов в апоптозе ганглиозных клеток и деструкции соединительной ткани при глаукоме Проведенное недавно сравнительное изучение белкового состава ВЖ глаз с ПОУГ и с возрастной катарактой показало, что 8 из 250 идентифицированных белков являются маркерами глаукомного процесса, при этом один из них транстиретин (тироксин-связывающий преальбумин, обеспечивающий транспорт тироксина и ретинола) оказался наиболее специфичным в отношении ПОУГ: его содержание в ВЖ в 2 раза выше, чем в контрольной группе [199].

Эти данные представляют особый интерес, поскольку накопление транстиретина в ВЖ может приводить к формированию амилоидных структур в тканях глаукомных глаз [186]. Действительно, в радужке и склере пациентов с ПОУГ были обнаружены проявления амилоидоза [78] МКЭ. С другой стороны, повышение уровня транстиретина активизирует процессы апоптоза в периферических нервных тканях [154]. При этом, как показали недавние исследования, апоптоз может быть также спровоцирован избытком или дефицитом определенных МЭ [108]. В частности, дефицит цитозольного магния в нейронах является наиболее ранним и точным маркером апоптоза нервных клеток [40, 79].

В последние годы было показано, что МЭ посредством определённых механизмов способны модулировать программу апоптоза [108]. Транспорт МЭ и их накопление в различных клетках обусловлены функциональными требованиями компонентов клетки и генетическими стимулами или патологически развивающимися механизмами проходимости. Поэтому даже умеренный дефицит или избыток МЭ в различных токсикологических моделях может оказывать длительное воздействие на процессы репопуляции клеток и апоптоза [6, 41]. Недавние открытия показали, что сутью механизма, лежащего в основе апоптоза, спровоцированного избытком или дефицитом МЭ, являются фундаментальные процессы митохондриального повреждения и активация каскада семейства белков, именуемых каспазами (известно около 10 видов каспаз) (рисунок 2). МЭ вовлечены в самосборку, синтез и регулирование митохондриальных ферментов, что вносит вклад в целостность комплексов дыхательной цепи [231].

–  –  –

Рисунок 2 - Избыток или дефицит МЭ приводит к фундаментальным процессам митохондриального повреждения и активации каскада семейства белков, именуемых каспазами, что лежит в основе апоптоза При ПОУГ одним из пусковых механизмов апоптоза является «глутаматовая токсичность», которая играет основную роль в каскаде вторичной дегенерации ганглиозных клеток сетчатки. E. Dreyer (1996) одним из первых сообщил о повышении концентрации глутамата в стекловидном теле глаз больных ПОУГ [173]. В этой же работе E. Dreyer отмечает, что в заднем отделе стекловидного тела обезьян с нелеченной экспериментальной глаукомой выявлено 7-кратное повышение концентрации глутамата по сравнению с нормой, что вызывало токсическое повреждение ретинальных ганглиозных клеток.

Активация глутаматом N-Methyl-D-Aspartate (NMDA) рецепторов увеличивает концентрацию внутриклеточного кальция и калия, приводит к повышению концентрации свободных радикалов, что, в свою очередь, включает механизм апоптотических ядерных превращений.

До недавнего времени не было предложено лекарственных средств, которые необратимо или длительно блокировали NMDA-рецепторы [48, 49]. Только в 2007 г. H. Lin продемонстрировал возможность ингибирования NMDA-рецепторов антиоксидантами в сочетании с цинком и медью [249]. В то же время C. Supuran et al. [317] показали, что наличие в сульфонамидах комплексов цинка (II) и меди (II) более эффективно понижает ВГД, чем дорзоламид. Это, по мнению авторов, свидетельствует о необходимости создания новых лекарственных средств, содержащих вышеперечисленные МЭ.

Как было указано выше, цинк входит в состав многих металлоферментов, в частности, находится в составе карбоангидразы - фермента, участвующего в образовании ВЖ. Проводятся исследования различных способов доставки цинка (хелатные соединения, пептиды, соли) для снижения ВГД при глаукоме [133]. В цилиарном теле Zn-содержащие ферменты из семейства карбоангидраз отвечают за образование ВЖ, а, следовательно, за регуляцию ВГД, однако они подвержены оксидативному повреждению и вследствие этого инактивации [153].

Недостаточность внутриклеточного Zn индуцирует апоптоз нейронов, фоторецепторов и астроцитов сетчатки в клеточной культуре [215]. В этой связи необходимо отметить, что в камерной влаге пациентов с глаукомой уровень Zn по данным N. Akyol et al. снижен [134].

В то же время ингибировать процесс апоптоза могут некоторые ММП, участвующие в катаболизме соединительнотканных структур [315]. Трехмерная структура профермента ММП человека содержит четыре иона Ca2+и два иона Zn2+, необходимых для катализа и стабилизации глобулы ММП. Поскольку транстиретин, о котором шла речь выше, является одним из субстратов ММП, то повышение его содержания [304] указывает на низкие уровни соответствующих ММП. При этом в некоторых тканях глаукомного глаза выявлен дисбаланс между уровнем ММП и их тканевых ингибиторов [130, 303]. На наличие такого дисбаланса косвенно указывает также повышенный уровень медиатора воспаления интерлейкина-8, регулирующего, в том числе, и экспрессию ММП в ВЖ пациентов с ПОУГ [243].

Определенные МЭ (например, селен, магний и связанные с ними белки) также могут ингибировать процесс апоптоза [135, 222, 303]. R. Bruhn et al.

сравнили уровень селена в плазме крови и камерной влаге пациентов с ПОУГ и в контрольной группе. Получив достоверную разницу, авторы предположили, что развитие глаукомы каким-то образом связано с дисбалансом селена [150]. Как известно, селен проявляет антиоксидантные свойства, его недостаток может иметь существенное значение при ПОУГ, поскольку оксидативное повреждение зрительного нерва, вызванное экзайтотоксичностью или ишемией, приводит к первичной нейрональной деструкции. Первичное повреждение усиливается в каскаде воспалительных реакций, приводящих к привлечению и миграции в зону очага макрофагов и микроглиальных клеток. Селен подавляет стрессиндуцированную миграцию и инвазию микроглиальных клеток, тем самым предотвращая вторичную гибель нейронов [164]. Селен также необходим для работы основного антиоксидантного фермента - глутатион пероксидазы [200].

Селен, как и некоторые другие макро- и микроэлементы (кальций, магний, цинк, медь, алюминий, кремний и др.), сопряжены с процессами биосинтеза коллагена и фибриллообразования, играют ключевую роль в посттрансляционных модификациях коллагена и в образовании поперечных связей (сшивок), а также участвуют в механизме антиоксидантной защиты [102].

Единичные исследования выявили, что в ВЖ пациентов с ПОУГ имеются определенные сдвиги в содержании вышеперечисленных микроэлементов [70, 128, 134, 150]. Повышенное содержание в ВЖ пациентов с ПОУГ Fe, обладающего прооксидантным действием, коррелирует с высоким уровнем в ВЖ железосодержащего белка трансферрина [239], что, безусловно, свидетельствует об активации процессов перекисного окисления на фоне ослабления антиоксидантной защиты в средах глаукомного глаза.

Подтверждением снижения при ПОУГ резистентности ВЖ к окислительному стрессу является также пониженный уровень Mg, который участвует в подавлении перекисных процессов.

Известно, что проникновение некоторых МЭ, в частности, железа, в клетку определяется уровнем аскорбиновой кислоты, и с другой стороны, при недостатке некоторых МЭ содержание аскорбиновой кислоты резко падает.

Витамин Сучаствует в синтезе проколлагенов, происходящем на рибосоме, за которым следует гидроксилирование специфических пролинов и лизинов. Указанные посттрансляционные модификации коллагена, зависящие от содержания аскорбиновой кислоты, необходимы для правильной сборки полипептидных цепей коллагена в коллагеновые фибриллы [41]. Zafar Iqbal et al. [347], исследовав концентрацию аскорбиновой кислоты во влаге пациентов с катарактой и глаукомой, обнаружили ее пониженное содержание при ПОУГ: у 14 пациентов оно было очень низким, еще у 14 средне низким и только у двоих близким к норме. Схожие результаты получили M. Leite et al., обнаружившие снижение витамина С в камерной влаге, полученной во время первичных антиглаукомных операций, по сравнению с нормой, а также двукратное снижение - во влаге, взятой при повторных антиглаукомных вмешательствах [247]. Эти результаты также косвенно свидетельствуют о дисбалансе микроэлементов во внутриглазной жидкости пациентов с ПОУГ.

Еще одним микроэлементом, который, возможно, играет важную роль в патогенезе ПОУГ, является магний, поскольку фундаментальные исследования соединительной ткани показали ключевое участие магния в ее метаболизме.

Являясь универсальным регулятором обменных процессов, Mg2+ участвует в энергетическом (комплексирование с АТФ и активация АТФ-аз, окислительное фосфорилирование, гликолиз), пластическом (синтез белка, липидов, нуклеиновых кислот), электролитном обменах [79, 221, 318]. Можно предположить, что дефицит Mg2+ должен приводить к нарушению активности ММП (в частности, коллагеназ), которые начинают деградировать структурные компоненты внеклеточного матрикса (прежде всего коллаген) с более высокой скоростью.

Воздействие Mg2+ на соединительную ткань не ограничивается коллагеном и коллагенaзами, этот микроэлемент влияет на состояние микрофибрилл и эластина - основных компонентов гибких волокон. Деградация волокон эластина может значительно возрастать (в 2-3 раза) в присутствии Mg2+, а дефицит Mg2+ соответствует более низкой активности эластаз [41, 221]. В основном, однако, скорее кальциевые, а не магниевые ионы влияют на гибкие волокна: Ca 2+ необходим для активных центров эластаз, Ca 2+ также стабилизирует структуру микрофибрилл (в частности, через взаимодействия с фибриллином-1 [79] и микрофибрилл-связанным гликобелком-1 [318].

J. Pena et al. выявили эластоз решетчатой мембраны (РМ) при глаукомной оптической нейропатии (ГОН). Авторы обнаружили первичное нарушение синтеза эластина в ламинарных астроцитах при хронической экспериментальной ГОН [295]. Трансглутаминаза - фермент, формирующий поперечные глутаминлизиновые сшивки, соединяющие вместе цепи эластина, активизируется Ca 2+ и ингибируется Mg2+ [79, 221]. Mg2+ может ингибировать медь-зависимую лизилоксидазу (LOX) [318], также вовлеченную в поперечную сшивку цепей эластинов и/или коллагенов. Соответственно, дефицит Mg2+ может приводить к активизации поперечной сшивки коллагена и эластина, а этот процесс, наряду с увеличением активности ММП, приводит ксвоего рода грануляризации соединительной ткани и, как следствие, к увеличению ее жесткости.

По данным J. Ge [192], при ПОУГ отмечается нарушение реологических свойств крови (синдром «гипервязкости»), ассоциированное с аномальным уровнем Zn, Mg, Fe, что способствует ухудшению кровоснабжения глаукомного глаза и снижению зрительных функций.

А многие макро и микроэлементы (кальций, магний, цинк, медь, алюминий, селен и др.), сопряженные с процессами биосинтеза коллагена и его фибриллообразования, а также с механизмом антиоксидантной защиты играют ключевую роль в посттрансляционных модификациях коллагена и в образовании поперечных связей (сшивок). Тем самым, нарушение обмена микроэлементов может быть важным фактором патологических изменений биомеханических свойств корнеосклеральной оболочки глаз пациентов с ПОУГ.

Ремоделирование, то есть деградация коллагеновых волокон ВКМ, производится посредством матриксных металлопротеиназ (ММП).

Активность различных ММП чрезвычайно широка, поскольку они способствуют деградации большинства компонентов внеклеточной матрицы: интерстициальных коллагенов и коллагенов базальной мембраны, протеогликанов, декорина, фибромодулина, фибронектина. Несбалансированный протеолиз компонентов ВКМ порождается избыточной активностью ММП и потому ассоциирован с рядом серьезных хронических заболеваний. Для каждой ММП есть свой ингибитор.

Специфические ММП, деградирующие именно коллагеновые волокна и тем самым удаляющие основные структурные опоры соединительной ткани, называются коллагенaзами. Все внемембранные ММП схожи по полноатомной структуре индивидуальных глобул, и каждая глобула фермента включает четыре обязательных иона Ca2+ и два иона Zn2+. Трехмерная структура профермента MMП-1 человека содержит четыре иона Ca2+и два иона Zn2+, необходимых для катализа и стабилизации глобулы ММП. Эта пространственная структура очень важна и поддерживается исключительно кальцием и цинком (рисунок 3).

Рисунок 3 - Трехмерная структура профермента MMП-1 человека. Четыре иона Ca2+(большие сферы) и два иона Zn2+(малые темные сферы) необходимы для катализа и стабилизации глобулы ММП Источник: Журнал «Русский медицинский журнал», 2008., Т.8, №6, С.12.

Стоит отметить, что при глаукоме выявлено снижение уровня цинка в камерной влаге [169].

1.2.3. Значение магния в метаболизме соединительной ткани и активности матриксных металлопротеиназ Подробный анализ современного состояния научных исследований свидетельствует о том, что нарушение обмена определенных макро- и микроэлементов (кальция, магния, цинка, меди, алюминия, кремния, селена и др.), сопряженных с процессами биосинтеза коллагена и образования поперечных связей (сшивок), стабилизирующих его структуры, а также с механизмами антиоксидантной защиты, может быть важным фактором патологических изменений как гидродинамики внутриглазной жидкости, так и биомеханических свойств корнеосклеральной оболочки глаз пациентов с ПОУГ [31]. Схематическое представление феномена эксайтотоксичности, а также место ионов магния в его подавлении отображены на рисунке 4.

Рисунок 4 - Схематическое представление феномена эксайтотоксичности и роль ионов магния в его предупреждении Источник: Журнал «Лечащий врач», 2003., №4, С.59.

Кроме воздействия на клеточном уровне, ионы магния проявляют и другие свойства. Магний обладает системным гипотензивным эффектом, улучшает мозговой кровоток путем непосредственного воздействия на тонус сосудов, а также блокируя эндотелин-1. Последнее обстоятельство также существенно в контексте патогенеза ПОУГ, т.к. концентрация эндотелина-1 возрастает в ВЖ глаукомных пациентов [217], что, возможно, играет немаловажную роль в возникновении ишемии и гибели ганглиозных клеток сетчатки [22, 84-86, 120].

Показано, что Mg регулирует артериальное давление, улучшает мозговой кровоток путем непосредственного воздействия на тонус сосудов, а также блокируя эндотелин-1 [164, 318]. Ионы Mg2+ участвуют в регуляции активности ренин-ангиотензин-альдостероновой системы, и при их дефиците создаются более благоприятные условия для системной вазоконстрикции.

Особую роль в этом отношении играет магний, обладающий не только выраженным нейропротекторным эффектом [40, 79], но и метаболической активностью, поскольку влияет на вязкость крови, снижает агрегационную способность тромбоцитов и поддерживает нормальный трансмембранный потенциал в электровозбудимых тканях, в том числе в сетчатке [186]. По данным J. Ge, при ПОУГ аномальный уровень Mg, Zn и Fe нарушает реологические свойства крови (синдром «гипервязкости»), что способствует ухудшению кровоснабжения глаукомного глаза и снижению зрительных функций [192].

Углубленные исследования соединительной ткани показали ключевое участие Mg в ее метаболизме [125, 274, 307, 346]. Предполагают, что дефицит Mg2+ приводит к нарушению активности ММП (в частности, коллагеназ) [125, 131, 132, 274].

Однако воздействие Mg2+ на соединительную ткань не ограничивается коллагеном и коллагенaзами, этот микроэлемент влияет на состояние микрофибрилл и эластина - основных компонентов гибких волокон, обеспечивающих адекватные биомеханические свойства соединительнотканных образований. Деградация волокон эластина может значительно возрастать (в 2-3 раза) в присутствии Mg2+, а дефицит Mg2+ соответствует более низкой активности эластаз [40, 221]. Mg2+ может ингибировать и медь-зависимую лизилоксидазу [307], также вовлеченную в поперечную сшивку цепей эластинов и/или коллагенов, регулируя тем самым биомеханический статус ткани.

Соответственно, дефицит Mg2+ может приводить к активизации поперечной сшивки коллагена и эластина, а этот процесс, наряду с нарушением активности ММП, приводит ксвоего рода грануляризации соединительной ткани [307] и, как следствие, к увеличению ее жесткости, выявленной клиническими исследованиями [67,68].

В отношении патогенеза глаукомы важно отметить, что трансглутаминаза фермент, формирующий поперечные глутамин-лизиновые сшивки, соединяющие вместе цепи эластина, активизируется Ca 2+ и ингибируется его естественным физиологическим антагонистом Mg2+ [40, 131, 132, 221, 307]. В этой связи важным является адекватный общий и локальный кальциево-магниевый баланс. В том числе при ПОУГ может иметь патогенетическое значение дисбаланс в системном поступлении кальция/магния. Показано, что регулярное несбалансированное употребление биологически активных добавок, содержащих кальций и железо выше пороговых значений (Ca800 мг/день, Fe18 мг/день), значимо увеличивает риск развития глаукомы [333].

В фундаментальных исследованиях соединительной ткани получен ряд подтверждений участия магния в ее метаболизме. При избыточном потреблении кальция и недостаточном потреблении магния происходит гиперактивация этого фермента. Эта зависимость важна для всех матриксных протеиназ, так как при нарушении баланса кальция и магния матриксная протеиназа приводит к избыточной деградации соединительной ткани. Полагают, что главной причиной патологического ремоделирования РМ также является избыточный синтез ММП.

Тот факт, что при глаукоме активность металлопротеиназ, расщепляющих межклеточный матрикс, существенно возрастает, был показан еще в 2001 г.: если в норме активность ММП в головке зрительного нерва невысока, то при глаукоме она возрастает в несколько раз [130]. Вследствие этого ткань (как невральная, так и склеральная) при повреждении не замещается рубцовой тканью, что, по мнению авторов исследования, приводит к потере невральной ткани и к формированию глаукомной экскавации [204, 295]. Результаты недавних исследований также показали усиление экспрессии металлопротеиназ при глаукоме и их участие в апоптозе ганглиозных клеток, в нарушении проницаемости гематоэнцефалического барьера, ремоделировании решетчатой мембраны, склеры и истончении роговицы при нормотензивной глаукоме [83, 195, 204]. При этом значительно возрастает продукция ММП-9, металлопротеиназы, ответственной за расщепление коллагена IV типа. Состояние экстрацеллюлярного матрикса и в первую очередь коллагеновых структур склеры при глаукоме пока изучено явно недостаточно.

Эксперименты на животных подтверждают влияние магния на биологическую активность ММП. У мышей с искусственно вызванным дефицитом магния стенка аорты была значительно тоньше, чем у контрольных животных. Специфическая окраска двух основных типов волокон (коллагена и эластина) показала существенные структурные изменения обоих компонентов.

Эти изменения корреллировали с повышением общей активности матриксных металлопротеиназ MMП-2 и MMП-9 [143].

В клетках гладкой мускулатуры сосудов у крыс добавление магния уменьшало общую активность MMП-2 прямо пропорционально дозе магния [346].

Возможно, что соответствующий сигнальный каскад запускается одним из белков-сенсоров магния. Нельзя исключать также и возможность прямого ингибирования различных ММП ионами магния через конкурентное связывание двухвалетных катионов в активном центре или через аллостерические взаимодействия с ММП.

Данные, приведенные выше, позволяют предположить, что дефицит Mg2+ должен, вероятно, приводить к повышению активности ММП (в частности, коллагеназ), которые начинают деградировать структурные компоненты ВКМ (прежде всего коллаген) с более высокой скоростью.

Эффекты Mg2+ на соединительную ткань не ограничиваются коллагеном и коллагенaзами. Микрофибриллы и эластин - основные компоненты гибких волокон. Деградация волокон эластина может значительно возрастать (в 2-3 раза) в присутствии Mg2+ [292]. Дефицит Mg2+ соответствует более низкой активности эластаз и большей концентрации гибких волокон. В основном, однако, скорее кальциевые, а не магниевые ионы влияют на гибкие волокна: Ca 2+ необходим для активных центров эластаз, Ca2+ также стабилизирует структуру микрофибрилл (в частности, через взаимодействия с фибриллином-1 [155] и микрофибрилсвязанным гликобелком-1 [159].

С одной стороны, при достаточной концентрации Mg2+секреция и активность ММП снижаются, что приводит к уменьшению деградации и ускорению белкового синтеза новых молекул коллагена. С другой стороны, дефицит магния способствует повышению секреции металлопротеиназ, усилению активности лизилоксидазы и трансглутаминазы. В результате дестабилизируется тРНК, замедляется синтез белков соединительной ткани. Очень важен факт участия магния в обслуживании АТФ, в частности при утилизации глюкозы.

Магниевые АТФ-азы концентрируются в митохондриях. АТФ синтезирует необходимую энергию. Этот процесс невозможен без дотации магниевых ионов для получения жизненной энергии и для задач по восполнению белков соединительной ткани.

Таким образом, некоторые макро- и микроэлементы (кальций, магний, цинк, медь, алюминий, кремний и др.), сопряженные с процессами биосинтеза коллагена и фибриллообразования, а также с механизмом антиоксидантной защиты играют ключевую роль в посттрансляционных модификациях коллагена и в образовании поперечных связей (сшивок).

Существенные особенности жизненно необходимых микроэлементов в их оптимальных дозах состоят в том, что каждый из них активирует более или менее обширную группу ферментов (хотя механизмы активации могут быть различными). В связи с этим им уделялось немалое внимание и при изучении физиологических и патологических процессов в органе зрения [128, 336]. Однако работ, направленных на изучение роли микроэлементов в патогенезе глаукомы крайне мало [70, 134, 236].

51 Анализ современного состояния научных исследований свидетельствует о перспективности изучения микроэлементного баланса в средах и тканях глаукомных глаз, особенно в склеральной ткани, для определения его патогенетической роли в развитии глаукомного поражения.

Учитывая потенциальную значимость местных и общих нарушений обмена магния в патогенезе глаукомы, представляется целесообразным оценить оправданность системного применения биодоступного магний-содержащего препарата в лечении пациентов с ПОУГ.

1.2.4. Значение исследования слезной жидкости для анализа микроэлементого дисбаланса в тканях и средах глаза Наряду с исследованием системного метаболизма микроэлементов представляет большой интерес оценка состояния их обмена непосредственно в органе зрения. Единственную возможность такой прижизненной оценки дает анализ слезной жидкости, которая в настоящее время вызывает повышенный интерес офтальмологов - исследователей и клиницистов.

Слезная жидкость, состоящая на 98% из воды, содержит также белки и другие азотосодержащие соединения, углеводы, ферменты, липиды, гормоны, медиаторы, витамины, а также неорганические вещества. Их источником является не только слезная железа, но и ткани глаза [103]. Вследствие этого, при многих общих и особенно глазных заболеваниях качественный и количественный состав слезы изменяется, и ее успешно используют для диагностики патологических состояний глаза, прогнозирования их течения, а также для контроля проводимой терапии [26, 74, 122, 123, 127, 327].

Как уже отмечалось, слезная жидкость в числе других компонентов, содержит микроэлементы, однако ее элементный анализ до последнего времени был затруднен из-за отсутствия адекватных методов исследования проб малого объема, содержащих к тому же микроколичества искомых неорганических веществ [103, 193, 231]. В единичных работах, посвященных этой теме, указывается, что в норме содержание натрия, хрома, кобальта в слезе приближается к сывороточному, уровень калия, марганца и цинка даже выше, чем в сыворотке крови, а кальция, магния, железа и меди - ниже [193, 299]. Согласно данным литературы, концентрация Mg в слезной жидкости здоровых глаз также как и других МЭ сравнима (или немного ниже) с его уровнем в сыворотке крови, т.е. составляет для лиц старшей возрастной группы 0,66-0,99 ммол/л [38, 193].

Имеются данные об изменении содержания в слезе некоторых микроэлементов при воспалительных заболеваниях глаз [231]. Сведений, касающихся микроэлементного состава слезной жидкости глаукомных глаз, в доступной литературе встречаются не достаточно, хотя информация такого рода, по нашему мнению, была бы весьма полезна для выяснения возможной роли определенных микроэлементов в метаболизме глазных тканей, в частности, склеры в процессе развития и прогрессирования глаукоматозного процесса.

Таким образом, целый ряд микроэлементов непосредственно участвует в метаболизме соединительной ткани, а также в системе ПОЛ и антиоксидантной защиты глаза. Однако их роль в формировании биомеханических свойств склеральной ткани и в патогенезе глаукомы изучена крайне недостаточно. Повидимому, сравнительное изучение концентрации микроэлементов в волосах и слезной жидкости больных с глаукомой и соответствующих контрольных группах могло бы дать полезную информацию о состоянии их системного и местного обмена, в частности, о связи метаболизма определенных микроэлементов с биомеханическим статусом склеральной оболочки глаза при глаукоме.

1.3. Исследование биомеханичеких особенностей соединительной ткани глаза в условиях нагрузочных проб Описанные выше изменения структурных и биохимических свойств корнеосклеральной капсулы при ПОУГ лежат в основе изменения ее биомеханических характеристик.

Последние исследования, проведенные специалистами из университета Джонса Хопкинса (США), свидетельствуют о том, что центральную роль в патогенезе глаукомы могут играть биомеханические факторы [34, 69, 227, 282].

По мнению H. Quigley (программное сообщение на конгрессе EGS 2012), терапия глаукомы должна быть направлена на изменение биомеханических свойств склеры, которая может предотвратить развитие и прогрессирование заболевания.

Результаты моделирования J. Liu показывают, что биомеханические свойства роговицы оказывают большее влияние на результаты измерения ВГД, чем ее толщина или кривизна [149, 253]. Среди всех механических характеристик роговичных свойств модуль сдвига (т.е. показатель, характеризующий усилие, необходимое для горизонтального смещения одного слоя роговицы относительно другого) имеет наибольшее влияние на показания ВГД [89]. При измерении давления изменяется напряженно-деформированное состояние ткани роговицы, которое определяется, как было описано выше, механическими свойствами волокнистых структур, их особой архитектоникой, внутри- и межмолекулярными связями, а также биохимическим составом [152, 168, 174, 175]. Кроме того, важную роль в формировании биомеханического статуса роговицы играют ее макропараметры (геометрическая форма и размеры, толщина, радиусы кривизны), характеризующиеся значительными колебаниями в зависимости от пола, возраста, общей преломляющей способности глаза (клинической рефракции) и т.п. Распределение механических напряжений в роговице во многом определяется соотношением ее биомеханических параметров с соответствующими параметрами сопряженной с роговицей склеральной оболочкой глаза [67]. В отличие от роговицы, склера, вследствие хаотического расположения фибрилл и волокон, обладает высокой рассеивающей способностью, препятствующей проникновению боковых потоков света в полость глаза, и характеризуется другими механическими свойствами. Соотношение биомеханических показателей этих опорных оболочек до сих пор изучено недостаточно.

Длительная механическая деформация коллагеновых структур решетчатой мембраны склеры во многом обусловливает глаукомную экскавацию зрительного нерва. Однако значительные деформации структур диска и нервных тканей менее существенно зависят от непосредственного действия внутриглазного давления (ВГД) на внутреннюю поверхность диска, чем от опосредованного воздействия офтальмотонуса на склеру. В связи с этим индивидуальные вариации механических свойств склеры могут быть факторами риска развития глаукомы, а нарушения этих свойств могут обуславливать тяжесть развивающегося патологического процесса [68].

Наиболее эффективными способами хирургического лечения глаукомы являются такие, которые бы воздействовали на несколько патогенетических механизмов развития этого заболевания. Первые шаги в направлении улучшения биомеханических характеристик склеры уже сделаны в отечественной практике с применением быстро интегрирующегося коллагена для уменьшения механических напряжений в перипапиллярной зоне склеры у больных с далекозашедшей глаукомой [15,16, 19].



Pages:     | 1 || 3 | 4 |   ...   | 8 |

Похожие работы:

«Брит Владислав Иванович «Эффективность методов вакцинации против ньюкаслской болезни в промышленном птицеводстве» Специальность: 06.02.02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидат ветеринарных наук Научный руководитель:...»

«Лямина Наталья Викторовна УДК 591.148:574.52(262.5) ДИНАМИКА ПАРАМЕТРОВ ПОЛЯ БИОЛЮМИНЕСЦЕНЦИИ В ЧЁРНОМ МОРЕ И ИХ СОПРЯЖЁННОСТЬ С ФАКТОРАМИ СРЕДЫ 03.02.10 – гидробиология Диссертация на соискание учной степени кандидата биологических наук Научный руководитель д.б.н., профессор Ю. Н. Токарев Севастополь 2014 г. СОДЕРЖАНИЕ Стр. ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ И СОКРАЩЕНИЙ, СИМВОЛОВ, ЕДИНИЦ И ТЕРМИНОВ. ВВЕДЕНИЕ.. РАЗДЕЛ ИСТОРИЯ...»

«Мануйлов Виктор Александрович Генетическое разнообразие вируса гепатита В в группах коренного населения Сибири 03.01.00 – молекулярная биология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: член-корр. РАН, профессор, д.б.н. С.В. Нетесов...»

«СИНЕЛЬЩИКОВА Александра Юрьевна Ночная миграция дроздов рода Turdus в юго-восточной Прибалтике Специальность 03.02.04 – Зоология Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор, главный научный сотрудник К.В. Большаков Санкт-Петербург Оглавление Введение... 3 Глава 1. Особенности миграции...»

«Егорова Жанна Геннадьевна КОМПЛЕКСНАЯ ОЦЕНКА ПРОДУКТИВНОСТИ И КАЧЕСТВА МЯСА, ПОЛУЧЕННОГО ОТ СВИНЕЙ ПОСЛЕ ОВАРИОЭКТОМИИ 06.02.10 – частная зоотехния, технология производства продуктов животноводства ДИССЕРТАЦИЯ на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор технических наук, профессор Гиро Татьяна Михайловна Саратов – 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ.. 4 1 ОБЗОР...»

«БРИТАНОВ Николай Григорьевич ГИГИЕНИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПЕРЕПРОФИЛИРОВАНИЯ ИЛИ ЛИКВИДАЦИИ ОБЪЕКТОВ ПО ХРАНЕНИЮ И УНИЧТОЖЕНИЮ ХИМИЧЕСКОГО ОРУЖИЯ 14.02.01 Гигиена Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор...»

«ДЕНИСЕНКО ВАДИМ СЕРГЕЕВИЧ ОПЕРЕЖАЮЩАЯ ФИЗИЧЕСКАЯ ПОДГОТОВКА СТУДЕНТОВ УЧЕБНЫХ ЗАВЕДЕНИЙ СФЕРЫ ФИЗИЧЕСКОЙ КУЛЬТУРЫ В КОНТЕКСТЕ ОБЕСПЕЧЕНИЯ НЕПРЕРЫВНОСТИ ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ 13.00.04 – Теория и методика физического воспитания, спортивной тренировки, оздоровительной и адаптивной физической культуры ДИССЕРТАЦИЯ на соискание...»

«ШУБНИКОВА ЕЛЕНА ВЛАДИМИРОВНА ВЛИЯНИЕ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ И ФОРМ АДАПТИВНОЙ ИЗМЕНЧИВОСТИ НА ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ПАТОГЕННЫХ БУРКХОЛЬДЕРИЙ К ХИМИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИМ ПРЕПАРАТАМ 03.02.03 –...»

«Цвиркун Ольга Валентиновна ЭПИДЕМИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС КОРИ В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКИ. 14.02.02 – эпидемиология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: заслуженный деятель науки РФ, лауреат Государственной премии СССР профессор, доктор медицинских наук Ющенко Галина Васильевна Москва – 20 Содержание...»

«Артеменков Алексей Александрович КОНЦЕПЦИЯ ОПТИМИЗАЦИИ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ И ПОВЫШЕНИЯ АДАПТАЦИОННЫХ ВОЗМОЖНОСТЕЙ ЧЕЛОВЕКА 03.03.01 – Физиология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант: доктор биологических наук, профессор Брук...»

«Ковалев Сергей Юрьевич ПРОИСХОЖДЕНИЕ, РАСПРОСТРАНЕНИЕ И ЭВОЛЮЦИЯ ВИРУСА КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук 03.02.02 – вирусология ЕКАТЕРИНБУРГ 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ СЛОВАРЬ ТЕРМИНОВ И ОПРЕДЕЛЕНИЙ ВВЕДЕНИЕ ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ...»

«Искам Николай Юрьевич ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ НОВОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ АЦИД-НИИММП НА ОСНОВЕ ОРГАНИЧЕСКИХ КИСЛОТ ПРИ ПРОИЗВОДСТВЕ ГОВЯДИНЫ 06.02.10 – частная зоотехния, технология производства продуктов животноводства; 06.02.08 – кормопроизводство, кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов. ДИССЕРТАЦИЯ на...»

«ЕГОРОВА Ангелина Иннокентьевна МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ СТРУКТУРЫ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ У МУЖЧИН КОРЕННОЙ И НЕКОРЕННОЙ НАЦИОНАЛЬНОСТИ ЯКУТИИ В РАЗНЫЕ СЕЗОНЫ ГОДА 03.03.04 – клеточная биология, цитология, гистология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научные руководители: доктор медицинских наук, профессор Д.К....»

«ВУДС ЕКАТЕРИНА АНАТОЛЬЕВНА Фармакогенетические аспекты антиангиогенной терапии экссудативной формы возрастной макулярной дегенерации» 14.01.07 – Глазные болезни ДИССЕРТАЦИЯ на соискание учёной степени кандидата медицинских наук Научные руководители: доктор медицинских наук Будзинская Мария Викторовна кандидат биологических наук Погода Татьяна Викторовна Москва – 2015...»

«Петро ва Ю лия Геннад ь евна «ШКОЛА УХОДА ЗА ПАЦИЕНТАМИ» ПР И ПР ОВЕДЕНИИ МЕДИЦИНСКОЙ Р ЕАБИЛИТАЦИИ ПОСЛЕ ЦЕР ЕБР АЛЬНОГО ИНСУЛЬ ТА 14.01.11 – нервные болезни ДИССЕРТАЦИЯ на соискание учёной степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор медицинских наук, Пряников И.В. профессор Москва – 2015 стр ВВЕДЕНИЕ ГЛАВА 1. СПЕЦИФИКА И ОСОБЕННОСТИ ПРОВЕДЕНИЯ МЕДИЦИНСКОЙ...»

«Брит Владислав Иванович «Эффективность методов вакцинации против ньюкаслской болезни в промышленном птицеводстве» Специальность: 06.02.02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидат ветеринарных наук Научный руководитель:...»

«Петренко Дмитрий Владимирович Влияние производства фосфорных удобрений на содержание стронция в ландшафтах Специальность 03.02.08 экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Белюченко Иван Степанович Москва – 2014 г. Содержание Введение Глава 1.Состояние изученности вопроса и цель работы 1.1 Экологическая...»

«РЫЛЬНИКОВ Валентин Андреевич ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ И ПОДХОДЫ К УПРАВЛЕНИЮ ЧИСЛЕННОСТЬЮ СИНАНТРОПНЫХ ВИДОВ ГРЫЗУНОВ (на примере серой крысы Rattus norvegicus Berk.) Специальность 03.00.16 – экология Диссертация на соискание ученой степени...»

«Цховребова Альбина Ирадионовна ВЛИЯНИЕ ФАКТОРОВ СРЕДЫ НА РАЗВИТИЕ БЕСХВОСТЫХ АМФИБИЙ СЕВЕРНЫХ СКЛОНОВ ЦЕНТРАЛЬНОГО КАВКАЗА Специальность 03.02.14 – биологические ресурсы Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель доктор биологических наук профессор Калабеков Артур Лазаревич Владикавказ 2015 Содержание Ведение..3 Глава I. Обзор литературных данных. 1.1....»

«СИМАНИВ ТАРАС ОЛЕГОВИЧ ОПТИКОМИЕЛИТ И ОПТИКОМИЕЛИТ-АССОЦИИРОВАННЫЕ СИНДРОМЫ ПРИ ДЕМИЕЛИНИЗИРУЮЩИХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ 14.01.11 – Нервные болезни ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор медицинских наук М. Н. Захарова Москва – 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ Глава 1. Обзор литературы Оптиконевромиелит Аквапорины и их биологическая функция 13 Патогенез...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.