WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:     | 1 || 3 |

««Биологическое разнообразие видов рода Trichoderma (Fungi, Ascomycetes, Hypocreales) и их роль в функционировании микробиоты и защите растений в агроценозах различных почвенно - климатич ...»

-- [ Страница 2 ] --

Рис. 4. Бинарное древо родства изолятов рода Trichoderma по ITS - последовательности: 1T.spp.62; 2- T.spp.61; 3-T.asperellum35; 4- T.spp.Tr 32 Riz; 5-T.oblongisporum 11 з; 6T.koningii65; 7-T.asperellum60; 8- T.spp.Tr 5(2); 9- T.spp.K 3 Riz; 10- T.spp.67.

Построено по фингенпринтам ПЦР анализа в 8% ПААГ изолятов, выделенные из Раифского заповедника РТ ПЦР анализ изолятов из тепличного грунта подтвердил низкое видовое и высокое внутривидовое разнообразие. Вероятно, это связано с тем, что после ежегодной интродукции одного гетерогенного вида на высоком популяционном уровне происходит расщепление на клоны. Исследование изолятов из грунтов показало, что из гетерогенной популяции максимальное преимущество в экологической нише получают наиболее конкурентоспособные клоны с высокой антагонистической активностью к фитопатогенным микромицетам и высоким уровнем фитотоксичности.

Расщепление гетерогенной популяции на клоны было подтверждено ПЦР анализом с использованием праймеров к ITS последовательностям.

Природные популяции грибов, как правило, являются гетерогенными.

Процесс выщепления клонов в популяции с последующим их обособлением, перегруппировкой и доминированием определенных форм способствует раскрытию адаптивных свойств вида (Чикин, Лихачев, 1997).

Популяционная гетерогенность изолятов Trichoderma, выделенных на территории РТ Существование генетически гомогенных популяций в природных условиях проблематично. Известно, что в геноме одной клетки может быть уже заложена способность расщепления на варианты. Известно, что на основании физиолого–биохимических критериев гетерогенность природных популяций может быть определена как возрастная, половая, морфологическая, генетическая и пространственная. Нами проводилось сравнение морфометрических параметров, кинетических и других параметров, определяющих стратегию жизни гетерогенных популяций Trichoderma.

Известно, что повышение гетерогенности является адаптивным фактором, способствующим распространению изолятов Trichoderma. Для оценки популяционных различий в пределах одного вида мы сравнивали размеры конидий изолятов из разных климатических зон и экологических ниш с помощью компьютерной программы Paint. Следует отметить, что был возможен анализ зонального распространения достаточно изученных областей и доминирующих видов: T. viride, T. koningii, T. harzianum, T.

asperellum, T. atroviride, T. citrinoviride, T. saturnisporum, T. spirale, T.

oblongisporum, T. longibrachiatum.

При сравнении выборок выяснили, что внутри популяций из разных климатических зон нет достоверных различий в размере конидий Минимальная вариабельность размеров конидий отмечена для видов T.citrinoviride и T. oblongiosporum (рис. 5). Мы провели сравнительный анализ размеров конидий видов, выделенных на территории РТ, видов, распространенных на территории России (описанных Александровой в 2000 г), и видов, распространенных на различных территориях, описанных Самюельсом (2002). Нами отмечена достоверная разница между конидиями только по ширине. Так, конидии изолятов группы T. koningii из РТ более крупные и более округлые, чем конидии, описанные Александровой (2000) и Самюэльсом (Samuels, 2002). Аналогичную картину наблюдали при анализе конидий изолятов других видов (рис. 6). Известно, что в условиях почвы наибольшей выживаемостью обладают более мелкие формы, которые А 4,5

–  –  –

Рис.5 Морфологическая характеристика конидий видов Trichoderma, распространенных на территории РТ обладают повышенной адаптационной способностью и летучестью, что способствует расширению ареала распространения. Вероятно, отмеченное нами снижение численности видового разнообразия видов Trichoderma на территории РТ обусловлено селекцией изолятов с более крупными размерами конидий.

ширина, Хсред

–  –  –

2,5 1,5 0,5 А Б В Рис. 6. Сравнительный анализ размеров конидий T. koningii (А – местные изоляты; Б – по Александровой, 2003; В – по Samuels, 2004) Сравнительный анализ размеров конидий изолятов, выделенных из эталонных почв, антропогенных ландшафтов и современных горизонтов почв показал, что размеры конидий изолятов, полученных из современных почвенных горизонтов, уменьшаются. Таким образом, нами выявлена общая тенденция уменьшения размеров конидий изолятов, выделенных из современных горизонтов по сравнению с конидиями изолятов из погребенных почв. Установлено, что размеры конидий сапротрофных изолятов также меньше по сравнению с размерами конидий ризосферокомпетентных изолятов.

По-видимому, снижение размеров конидий является адаптационным механизмом. Вероятно, повышение интенсивности прямого и косвенного антропогенного воздействия в современных горизонтах почв привело к селекции и выживаемости популяций Trichoderma с более мелкими конидиями. Аналогичная тенденция отмечена при исследовании степени удаления от зоны ризосферы. Удаление микромицета от растения-эдификатора (из зоны ризосферы) сопровождалось селекцией и преобладанием в микробиоценозе популяций с более мелкими и шиповатыми конидиями. Исследование морфометрических показателей видов с шиповатыми конидиями показало, что по мере созревания конидии проходят стадии от форм с гладкой поверхностью к формам с шиповатой поверхностью. Вероятно, повышение доли видов Trichoderma с гладкими конидиями в микромицетном сообществе связано с ранней стадией сукцессии экологической ниши, и может являться диагностическим признаком возраста почвенных горизонтов или использоваться для оценки интенсивности антропогенного воздействия на популяции в природных условиях.

Вегетативная совместимость клонов в популяциях Trichoderma и культурально-морфологические типы Важным биотехнологическим свойством при промышленном использовании Trichoderma является стабильность признаков, характерная только для моноспоровых изолятов. Известно, что популяции грибов представляют собой мозаику клонов, одним из изолирующих механизмов которых являются различные культурально-морфологические типы колоний, реакции вегетативной совместимости и гетерокариоз. Мицелиальные грибы формируют анастомозы, что играет важную роль в адаптации грибов.

Установлено, что парасексуальная рекомбинация между тесно связанными видами и предположительно несовместимыми штаммами некоторых видов более выражена под влиянием стрессов среды. На самом деле, несовместимость штаммов между собой и даже между видами может быть преодолена мутацией единственного гена. Возможность горизонтального переноса генов (обмен неполовым путем между различными видами или несовместимыми родами) стала причиной появления новых генов в различных грибах. Мутации и стресс могли изменить половой процесс и межвидовую совместимость. Гетерокариоз играет большую роль в жизни грибов. Анастомозы между гифами с последующей миграцией ядер приводят к исчезновению внутрипопуляционных единиц – индивидуумов, клонов и интеграции их в единую сеть мицелия, что также резко усиливает адаптационные возможности. Нами были исследованы природные гетерогенные популяции Trichoderma и их расщепление на клоны (табл. 7).

Сравнительный анализ колоний гетероспоровых популяций местных изолятов позволил выделить 2 стабильных культурально–морфологических типа из раннее описанных четырех. Гетероспоровые популяции в большей степени (54%) были представлены вторым культурально–морфологическим типом, из них 20% приходилось на изоляты T. koningii, на изоляты T.

atroviride, по 6,6% пришлось на изоляты T. longibrahiatum, T. viride, T.asperellum, по 3,3% у изолятов T. harzianum и T. saturnisporum, и 43,3% у неидентифицированных изолятов.

К четвертому типу принадлежат 46% из исследованных изолятов:

19,2% изолятов T.koningii, 3,8% пришлось на изоляты T.atroviride, T.oblongisporum, по 11,5% приходиться на изоляты T.harzianum, T.viride, 7% принадлежит изолятам T.asperellum, оставшиеся 38,5% пришлось на неидентифицированные штаммы. Наблюдаемая нами модель природных расщеплений гетерогенных популяций в лабораторных условиях на агаризованных средах была подтверждена регистрацией клонального расщепления в тепличных грунтах. Это природная модель ускоренного эволюционного развития аллохтонных гетерогенных популяций в оптимальных условиях молодой экологической ниши.

–  –  –

Вегетативная совместимость автохтонных изолятов Trichoderma При исследовании взаимодействия между гетероспоровыми популяциями и моноспоровыми клонами нами были обнаружены различные реакции вегетативной совместимости: образование мицелиального валика из гиф воздушного мицелия, взаимное проникновение мицелия (нейтральная или индифферентная реакция), а также реакции несовместимости барраж, бордюр и ограничение роста.

Вегетативная совместимость типа валик выявлена у 14,3% исследованных изолятов: 3,6% у T.koningii, по 1,8% у изолятов T.atroviride, T.harzianum, T. saturnisporum, T.asperellum,. У 9% отмечена индифферентная реакция: 3,6% у изолятов T.koningii, по 1,8% у T.atroviride. Вегетативная совместимость типа мелдинг выявлена у 3,6% исследованных изолятов: по 1,8 % у неидентифицированных изолятов.

Вегетативная несовместимость типа бордюр выявлена у 8,9% изолятов: по 1,8% у T.longibrahiatum, 3,6% у изолятов T.viride; барраж – у 7,1% исследуемых изолятов: 5,3% у T.koningii, 9% у неидентифицированных изолятов. У оставшихся 50% исследованных изолятов выявлен смешанный тип реакций. При расщеплении гетероспоровых популяций на моноспоровые клоны преобладает тип вегетативной несовместимости бордюр – 48% барраж у 4% клонов. Среди типов вегетативной совместимости преобладает валик мелдинг-реакция обнаружена у 16% клонов, индифферентная реакция выявлена у 8% исследуемых клонов. Сравнительный анализ общих частот проявления типов реакций совместимости выявил тенденцию к увеличению у гетероспоровых популяций реакций смешанного типа (50%), на втором месте

- реакции совместимости (26,9%) и реже всего отмечены реакции несовместимости.

Гетерокариоз изолятов Trichoderma, выделенных из почв РТ В связи с многоядерностью клеток и отсутствием препятствий на пути миграции ядер у грибов широкое развитие получило явление гетерокариоза.

Нами отмечалась генетическая неоднородность ядер, внешним проявлением которого являлось скачкообразное возникновение сальтантов (неустойчивых или лабильных штаммов и гетеротипов). На поверхности колоний нами отмечалось образование секторов, отличающихся характером роста или окраской, внезапно проявляющихся в моноспоровых культурах на некотором расстоянии от центра колонии. Так, отмечалось образование светлоокрашенных секторов, которые называют аберрантными пятнами мицелия.

Интенсивность спороношения Исследования интенсивности спороношения выявили как видовую дифференциацию, так и клональную изменчивость (рис. 7). Наибольшая интенсивность спороношения характерна для T. harzianum и T. spirale (110конидий/мл), во вторую группу были отнесены T.asperellum и T.atroviride (90-110*105 и 80-90*105 конидий/мл, соответственно), а в третью T.viride и T.koningii – 60-80 конидий/мл.

Взаимоотношения с фитопатогенными микроорганизмами Известно более 100 разнообразных антибиотических веществ, активно продуцируемых грибами Trichoderma. Показана способность Trichoderma к регуляции жизнедеятельности почвенных микроорганизмов и эффективному ингибированию развития многих почвенных фитопатогенов даже при отсутствии непосредственного прямого контакта мицелиев. Эти свойства широко используются для отбора наиболее перспективных штаммов биологического контроля in vitro при разработке биологических методов борьбы с различными возбудителями сельскохозяйственных культур, как в полевых, так и в условиях теплицы.

–  –  –

Рис. 7 Интенсивность спороношения видов Trichoderma на КГА при 28°С.

Нами рассматривалась внутривидовая и видовая дифференциация по признаку взаимоотношения с отдельными группами почвенных микроорганизмов в опытах in vitro и in vivo. Показана способность к регуляции жизнедеятельности более 40 видов микромицетов-фитопатогенов и сапротрофов. Отмечен видовой и внутривидовой полиморфизм по признаку фунгистатичности.

Для 34,1% исследуемых изолятов характерен Втип антагонистической активности (обоюдное подавлении при контакте): по 9 % для изолятов T.koningii, T.asperellum; по 2,3% для T.viride, T.harzianum, 4,5% - для T.atroviride; С-тип антагонистической активности (обоюдное подавление на расстоянии) характерен для 11,4% исследованных штаммов:

по 4,6% для изолятов T.koningii и T.harzianum. В1-тип реакции (обоюдное подавление при контакте и дальнейшим переходом к паразитизму) выявлен у 9% изолятов: T.viride – 2,3%, T.harzianum – 4,6% и у T.atroviride – 2,3%.

Наиболее интенсивное проявление фунгистатичности в опытах in vivo отмечено в тепличных грунтах, где отмечено наиболее оптимальное сочетание комплекса эдафических факторов для большинства изолятов Trichoderma. По мере увеличения сроков эксплуатации грунтов увеличивается гетерогенность автохтонной популяции, и, как следствие усиления конкурентных взаимоотношений, возрастает доля изолятов с высокой фунгистатической активностью.

Стратегии жизни изолятов Trichoderma в экосистемах Стратегия жизни определяется как способ выживания и поддержания стабильности популяции в сообществах и экосистемах. Всего выделено 3 типа стратегий, которые эволюционно закрепились в результате действия, соответственно, отбора эксплуатации (в условиях ненасыщенности среды микроорганизмами), насыщения (в климаксном сообществе при максимальной конкуренции) и в неблагоприятных условиях. Нами исследовались все типы сред.

Для решения вопроса о стратегиях, все члены изученной нами коллекции были расположены в пространстве KrL- континуума, где каждый изолят занял свое место. Изоляты в тепличных грунтах после термической обработке и в ризосфере растений чаще реализуют r-отбор. В группе rстратегов отмечена тенденция к специализации в условиях окружающей среды. Грибы используют в качестве основного механизма тропизм– векторизированный пронизывающий рост гиф. В твердофазных гетерогенных средах, подобных почве, тропизм имеет преимущество перед таксисом. Высокая колонизирующая способность грибов обусловлена гигантскими размерами периферической зоны и возможностью транслокации субстратов вдоль гиф. Количественной мерой успеха при первом приближении служит линейная скорость роста гиф. В ходе сукцессии по вегетации растений отмечен переход в популяционной структуре к преобладанию К-стратегов. Для Trichoderma характерно расположение на rKоси экологических стратегий KrL- континуума, благодаря высокой скорости роста. Все выделенные нами изоляты по скорости роста в условиях KrL делятся на 3 группы: с низкой и высокой удельной скоростью и промежуточная группа. Для Trichoderma чаще отмечались высокие значения максимальной скорости роста, поиск субстрата с низкой эффективностью, но на больших расстояниях. Активная миграционная способность оправдана только при r–типе стратегии, когда энергоемкий процесс механического движения повышает вероятность попадания в благоприятную микрозону и приводит к взрывному росту популяции. В прикорневой зоне растений прижизненные выделения подчинены суточным ритмам, а положение локусов экссудации меняется из-за роста корня. Ризосфера, в связи с этим, служит характерным примером оазиса жизни для микробов с r-стратегией жизни, где условия нелимитированного роста и пионерские стадии микросукцессии создаются ежедневно, но не в одной точке пространства, а в разных микрозонах. Среди выделенных нами изолятов современных и антропогенных ландшафтов преобладали виды с r-типом стратегии, а в погребенных почвах и могильниках с rK – типом стратегии. В зоогенных местообитаниях миграции способствуют насекомые и нами отмечены транзитные изоляты Trichoderma. В других местообитаниях рост r–стратегов возобновляется со значительно меньшей частотой, чем в ризофере. На свежем опаде отмечена вспышка роста изолятов с r–стратегией. Способность к использованию микроорганизмами труднодоступных и полимерных соединений рассматривается как проявление L–отбора. Выработка способности усваивать труднодоступные соединения есть один из способов избежать прямой конкурентной борьбы за предпочтительные субстраты, но дефицитные, следовательно это не К–стратегия. Приобретение данной способности энергетически затратно, поскольку утяжеляет метаболическую машину новыми блоками (также как в случае приспособления к неблагоприятным условиям – влажности, солености температуры и др.

) и замедляет рост популяции. Следовательно, это не r–стратегия. Признаки использования полимеров и синтеза гидролаз (высокая активность у бацилл и грибов-гидролитиков) можно рассматривать как проявление биоценотической патиентности - переход на «менее ценный корм» из–за конкурентного давления. Отсюда становится понятным экологический смысл тесной корреляции признаков спорообразования, деполимеразной активности и антибитикообразования у обширной группы микроорганизмов, в том числе медленнорастущих грибов. Все они слабые конкуренты в прямой борьбе за дефицитные доступные субстраты, поэтому они приспособились сохранять свою жизнеспособность путем перехода в споры, атаки полимеров растительного опада и «отпугивания» конкурентов токсическими метаболитами. Перечисленные микроорганизмы тяготеют к L–полюсу LK– и Lr–континуумов, на противоположном К-полюсе находятся простекобактрии, а на r–полюсе – грибы–сахаролитики, ризобии, псевдомонады и энтеробактерии. Нами было показано наличие изолятов, занимающих промежуточное положение, т.е. LKr-континиум.

Концепция стратегий жизни привлечена для объяснения происхождения различий в индивидуальных кинетических характеристиках изученных нами изолятов Trichoderma.

Нами обнаружены ризосферкомпетентные виды Trichoderma, жизнедеятельность которых приурочена к ризосфере. Они по комплексу характерных признаков отнесены в группу r-стратегов, для которых отмечена тенденция к специализации в условиях окружающей среды.

Аналогичная группа выявлена нами в тепличных грунтах после пропаривания, где создаются максимально благоприятные условия для реализации r- стратегии жизни. Наблюдаемая нами в ризосфере и грунтах после пропарки активная миграционная способность грибов оправдана только при r–типе стратегии.

Анализ соотношения Trichoderma по стратегии жизни показал, что 1,4% изолятов занимает среднее положение между r-, L- и K-стратегами. К этой группе стратегов были отнесены изоляты T. citrinoviride, 51,39% тяготеет к r–стратегам (все виды встречаются), 8,33% - переходные формы между r- и K- (T.citrinoviride,T.asperellum, T.longibrachiatum, T.harzianum), 20,83% - тяготеет к K-стратегам (T.citrinoviride, T.asperellum, T.

longibrachiatum, T. koningii), 11,11% - тяготеет к L-стратегам (Т.asperellum и группа Т.koningii), 6,94% - переходные формы между r- и L- (Т.asperellum, Т.koningii, Т.harzianum) (рис. 8).

Обобщение доступных сведений о кинетике роста на средах с различным содержанием доступных субстратов, антагонистической активности, интенсивности спороношения, гидролазной активности и других изученных свойств позволило расположить их в поле треугольника rKL по координационному принципу. Выполненная координация носит чисто иллюстративный не количественный характер и может быть использована в целях прогноза эволюции популяций Trichoderma (рис. 8).

Представляет интерес конструирование подобных схем для конкретных экосистем и проверка их адекватности по критерию согласия с наблюдаемой в природных средах динамикой.

Рис. 8. Стратегии жизни комплекса видов рода Trichoderma, распространенных на современной поверхности территории РТ и глубинных горизонтах могильников и древних поселений (обозначения: треугольник – изоляты, выделенные из Раифского заповедника; круг – из современных агроценозов; прямоугольник – из древних захоронений) Ферментативная активность автохтонных изолятов грибов Trichoderma Антагонистическая активность Trichoderma, перспективных для сельского хозяйства как биофунгициды, определяется активностью гидролаз, в частности, целлюлаз и протеаз. Известно, что грибы рода Trichoderma являются продуцентами ксиланаз, используемых для повышения перевариваемости кормов для животных.

Нами исследовался гидролазный комплекс (ксиланазная, протеазная и целлюлазная активности) Trichoderma при культивировании на растительных отходах.

Наибольший показатель протеазной активности характерен для изолятов, выделенных из погребенных почв и могильников. Так максимальная активность протеазной активности отмечена у изолята T.323, который равен 229,7508 IUl-1, наименьший показатель протеазной активности у изолята T. 306 и равен 6,8001 IUl-1.

Наибольшей целлюлазной активностью обладают изоляты Т.328, T.harzianum (18), Т.2, их показатели, соответственно, равны 1,1986 IUml-1,

1.37 IUml-1, 1.31 IUml-1.

Ксиланазная активность превышала активность промышленного продуцента ксиланаз и составила для изолятов Т.302, Т.303 и Т.328 8,8172 IUml-1, 8,2469 IUml-1 и 5,0275 IUml-1, соответственно.

Кинетика изолятов Trichoderma Нами проводились исследования кинетических показателей при переходе с лабораторных на природные среды и в полевых условиях. В лабораторных микроэкосистемах строго контролируются экотопические условия (влажность, темепература, освещенность) и возможна точная регистрация параметров жизнедеятельности при сохранении близкого к естественному составу сообщества богатства межорганизменных взаимоотношений. Полевые исследования проводились в защищенных грунтах (закрытый тип экосистем) и открытых экосистемах – агроценозы по выращиванию зерновых и сеянцев сосны.

Отмечена зависимость амплитуды и емкости среды от исследуемого типа экосистем. Наибольший популяционный уровень сохраняется длительное время при интродукции в тепличный грунт и достигает 50*105 КОЕ/1г почвы и характеризуется более интенсивными колебаниями и короткими амплитудами (25-30 дней).

Физиологическое состояние почвенных микроорганизмов до субстратного обогащения отвечает умеренно низкой метаболической активности. В парующей почве (хранящейся во влажном состоянии в лаборатории) микроорганизмы не голодают и используют в качестве субстрата почвенные органические вещества. Важнейшими факторами элиминирования микроорганизмов в благоприятных зонах почвы является выедание их беспозвоночными - простейшими, микроартроподами и, в меньшей степени, многоклеточными животными. Другие факторы элиминирования, такие как лизис бактериофагами и бделловибрионами, действие хищных бактерий и антибиотиков, играют подчиненную роль.

Была рассматрена система - интродуциованный изолят Trichoderma – красные калифорнийские черви. Отмечена регулирующая роль червей в регуляции количественного уровня интродуцируемых изолятов Trichoderma и их распространении.

Сильные стороны кинетического метода заключается в обеспечении возможности дифференцированного учета количества конкретного микроорганизма, реально действующего в природной среде, что совершенно необходимо для изучения потоков веществ и энергии в экосистемах.

Отмечена достоверная зависимость типа динамики от жизненной формы, адсорбента, внешних экотопических и комплекса антропогенных факторов. В тепличных грунтах наибольшие максимальные значения интродуцента (КОЕ/1г почвы) отмечены при использовании в качестве адсорбента растительных отходов, 60% и 80% влажности в сочетании с фундазолом и комплексом минеральных удобрений. В микроэкосистемах с выщелоченным черноземом, приближающимся по содержанию органических веществ к защищенным грунтам, интродуцируемый изолят стабилизируется на значительно более низком популяционном уровне и значения, сопоставимые с первым типом экологических ниш, отмечены только в случае интродукции изолята на минеральном сорбенте (цеолит). В полевых опытах на истощенной серой лесной почве в условиях экологической катастрофы была использована интродукция изолята в составе биоудобрения (компост на основе отходов очистных сооружений и изолят с высокой антагонистической активностью к комплексу фитопатогенов и фитотоксической активностью к семенам сорняков) (рис.9). Была отмечена стабилизация интродуцента на высоком популяционном уровне, что указывает на реализацию r–отбора.

Максимальное увеличение отмечено в составе компоста при использовании в качестве адсорбента растительных отходов.

Влияние биоудобрений на основе компостов с изолятами Trichoderma, адсорбированными на различных носителях В качестве основы коспостов использовали куриный помет – отход животноводческих ферм.

Многочисленные микроскопические исследования почв и поверхности растений, обнаружили факты частого обнаружения у культур грибов бактериальных спутников, что указывает на распространенность в природе ассоциированного развития этих организмов и несомненную важность данного экологического феномена. Крайне важными представляются взаимоотношения грибов с диазотрофными бактериями. Фиксация молекулярного азота крайне энергоемкий процесс и его активность в почве лимитирована недостатком мономерных субстратов.

У большинства растений улучшение азотного питания достигается секрецией значительной части продуктов фотосинтеза в фитоплану, что позволяет поддерживать жизнедеятельность ассоциативных азотфиксаторов (Умаров, 1983).

Грибы экскретируют большое количество высокоактивных гидролаз растительных полимеров, которые создают пул легкодоступных соединений для азотфиксирующих бактерий в гифосфере и почве.

0,14

–  –  –

Это может быть одним из объяснений экологической целесообразности образования грибами при гидролизе целлюлозы значительных количеств не метаболизируемых ими самими мономеров и олигосахаров.

Показано, что одним из факторов повышения азотфиксации при известковании дерново-подзолистых почв, является не только оптимизация условий и увеличение биомассы бактерий, но и рост встречаемости бактериальных спутников с высокой нитрогеназной активностью в гифосфере микроскопических грибов, развивающихся на растительных остатках и в почве.

При исследовании интродукции видов Trichoderma в выщелоченный чернозем было показано, что наибольшее достоверное влияние на азотфиксирующую активность почвы оказывают изоляты видов T.atroviride и T.citrinoviride (рис. 9).

Влияние экологической ниши и вида адсорбента на жизнеспособность Trichoderma

В качестве адсорбентов для получения биопестицида исследовали:

растительные отходы (опилки), органическое соединение (прокомпостированный отход птицеводческих фабрик), минеральное вещество (цеолит) и классический сорбент, используемый в Татарстане для получения биопестицида триходермина - шелуха семян ячменя (отход трихограмного производства).

Биопестицид для интродукции в чернозём использовался в виде спор адсорбированных на носителях. Количество в почве (КОЕ/1г почвы).

T.harzianum было максимальным при интродукции биопестицида на навозе и опилках. Меньшее значение обнаружено при использовании шелухи и цеолита в качестве носителя.

Интродукция биопестицида на различных носителях в чернозём сопровождалась флуктуациями численности микромицета с максимальными значениями для опилок и навоза на 5 и 7 сутки, что составило 260*105 и 160*105 КОЕ/1г почвы, соответственно, и минимальными значениями 1,0*102 и 0,16*103 КОЕ / г почвы на 30 и 60 сутки, соответственно (рис.9).

Trichoderma на цеолите и шелухе при инродукции в чернозём количественно флуктуирует на более низком уровне в течение 60 дней. Так, ёмкость среды для Trichoderma, адсорбированной на цеолите, составила 2,6*105 КОЕ/1г почвы, а для шелухи 4,8*105 КОЕ/1г почвы, с минимальными значениями 103 КОЕ/1г почвы на 7 и 60 сутки.

При известковании чернозёма отмечена положительная корреляция возрастающих концентраций извести с количеством интродуцентов на шелухе и цеолите.

Взаимоотношения Trichoderma с растениями Биотический аспект изучения Trichoderma предполагает обязательное изучение её взаимоотношения с эдификаторами, которыми являются фототрофные организмы.

–  –  –

-10000 Среди микромицетов нами выявлены виды биотрофы (паратрофы и симбиотрофы–эндофиты), ризосферокомпетентные, эккрисотрофные и сапротрофные формы. Показана способность к переходу от одного типа взаимоотношения к другому.

Главным регулирующим фактором типа взаимоотношений является спектр метаболитов, выделяемых растением, вид растения, стадия онтогенеза, физико–химические свойства почв. Отмечена зависимость типа воздействия от концентрации метаболитов Trichoderma. Эффект разведения вызывал разнонаправленный эффект на растения от стимуляции до ингибирования роста и развития. Нами отмечена индукция резистентности у растений (SAR) к фитопатогенным микроорганизмам после обработки семян метаболитами Trichoderma. Прикорневая зона растений характеризуется специфическими прижизненными выделениями с внутрисуточными ритмами, а положение локусов экссудации меняется из-за роста корня.

Ризосфера, в связи с этим, служит характерным примером оазиса жизни для микробов с r-стратегией жизни, где условия нелимитированного роста и пионерские стадии микросукцессии создаются ежедневно, но не в одной точке пространства, а в разных микрозонах.

Выделение метаболитов-стимуляторов роста растений ризосферокомпетентными интродуцентами наблюдается на ранних этапах развития растений, при нейтральных рН почвы, на фоне определенных типов углеводов (например, для T.asperellum - сахарозы и маннита). Нами было показано, что более 30% изолятов из современных горизонтов можно отнести к фитотоксическим, а из древних захоронений – более 70%. Тип влияния изолятов Trichoderma на растения изучен на 10 видах растений: зерновых, зернобобовых, овощных, хвойных, декоративных культурах, а также на семенах сорняков (щерица, подмаренник, бадяг). Длительное отсутствие контакта с растениями в глубинных слоях почвы привело к селекции изолятов с К-стратегией жизни, мощным гидролазным комплексом и отрицательным типом взаимодействия с современными сортами растений.

Известно, что современные сорта по уровню сахаристости представляют наиболее излюбленный объект для фитопатогенных микроорганизмов. Единственный растения, на которые выделенные нами изоляты Trichoderma оказывали чаще всего стимулирующее воздействие, это бобовые и зернобобовые культуры. Стимуляция бобовых и зернобобовых культур связана с ассоциацией изолятов Trichoderma с диазотрофами. Были выделены и испытаны бактерии рода Azotobacter spp. и Azospirillum spp. – симбиотрофы Trichoderma.

Нами исследовались причины преобладания фитотоксических форм у наиболее распространенных видов почвенных микромицетов рода Trichoderma, ответственных за супрессивность почв. Известно, что среди современных сортов зерновых и овощных культур нет здоровых. Отмечена высокая степень заспоренности семян и почв агроценозов фитопатогенными микроорганизмами. Обработка семян конидиями и физиологически активными метаболитами Trichoderma приводит к активации антагонистических и токсинобразующих свойств фитопатогенных микроорганизмов, заселяющих внутренние ткани семян. Усиление токсинообразования фитопатогенным микроорганизмом Fusarium spp. при обработке семян микроорганизмами-антагонистами отмечал также Монастырский (2004).

Таким образом, фитотоксическое действие изолятов из древних захороненных почв, вероятно, связано с активацией токсинообразования у эндогенных фитопатогенных микроорганизмов семян и сортовыми особенностями современных зерновых культур и конкуренцией с растением за питательные вещества в почве.

Использование Trichoderma в сельском хозяйстве Исследование фитосанитарного состояния почв РТ показало наличие высокого, порогового уровня семенных инфекций. Основной причиной увеличения инфекционного фона в современных агроценозах являются инфицированные семяна зерновых. Дополнительными причинами инфицирования почв и резервуарами возбудителей инфекций является пораженность семян сорняков (щерицы, подмаренника, бадяга) возбудителями корневых гнилей и плесневения. Показано влияние интродукции Trichoderma на различных сорбентах на уровень инфекционного фона почв и семян зерновых, зернобобовых, овощных культур, семян сорняков и сосны. Наибольший эффект снижения зараженности почв и восстановление супрессивности отмечено на серых лесных почвах и выщелоченном черноземе. Рассмотрена система применения изолятов Trichoderma с использованием биогеоценотического подхода, предполагающего применение природных механизмов восстановления супрессивности почв и регуляции жизнедеятельности растений за счет сукцессионных изменений в растительных сообществах (модель севооборота).

Использование изолятов для получения Trichoderma биофунгицидов, биогербицидов, биоудобрения, ферментных препаратов для животноводства Биоудобрения на основе компостов и Trichoderma Исследованы способы приготовления биокомпостов на основе компостированных отходов очистных сооружений г.Казани (ОСВ), животноводческих комплексов (высушенный куриный помет) и изолятов Trichoderma, адсорбированных на растительных, органических и минеральных носителях. Предварительно было исследовано действие комплекса тяжелых металлов, содержащихся в отходах очистных сооружений на кинетические, морфологические, генетические параметры и антагонистическую активность микромицета. Загрязнения окружающей среды, включая широкое употребление различных химических и биологических препаратов, может приводить к появлению или отбору генетических вариантов грибов с необычными для них свойствами, что дополнительно затрудняет их идентификацию.

ДНК штаммов Trichoderma, инкубировавшихся в полевом опыте с ОСВ в течении 6 и 12 месяцев, в микроэкосистемах с различным содержанием ТМ (5, 10 и 20 норм), а так же при культивировании на агаризованных средах с 1 и 10 нормами ТМ, анализировалась методом УП ПЦР с неспецифическими праймерами. Был получен специфический ПЦР-профиль для контрольного и экспериментальных изолятов.

В полевых и модельных опытах было показано достоверное влияние ТМ на морфологические, кинетические признаки, конкурентоспособность и антагонистическую активность Trichoderma при интродукции в виде водной суспензии без сорбента. В опытах in vitro отмечена положительная дозозависимая отрицательная корреляция изменения скорости роста, интенсивности спороношения и антагонистической активности. Методом УП ПЦР при использовании специально подобранных неспецифических праймеров отмечены отдельные точковые мутации и изменения в области 1650 п.н. Интенсивность изменений на генетическом уровне зависела от способа интродукции изолятов в экосистему с ТМ. Достоверные изменения в ПЦР паттернах отмечены при интродукции Trichoderma в виде водной суспензии конидий без сорбентов.и на агаризованных средах в лабораторных условиях и в полевых условиях в почве с 10 нормами ТМ.

Мутагенное действие ТМ в случае водной суспензии и отсутствие -в случаях с адсорбентами можно объяснить хорошо известным адаптивным механизмом (Звягинцев, 1985).

В случае генетической изменчивости под влиянием ТМ более эффективно различались выщепляющиеся клоны с изменениями по отдельным локусам ДНК «консервативные» праймеры. Выявляемые нами по ряду праймеров полиморфизмы (измененные по отдельным фрагментам ПЦР паттерны) могут быть использованы в качестве генетических маркеров клонов при использовании в биоудобрениях.

Влияние биоудобрений на биологическую активность почв Изменение общей биологической активности выщелоченного чернозёма РТ Для оценки общей биологической активности (БА) почвы, рассматриваемой как суммарный результат сопряженно протекающих микробиологических и химических процессов, использовали метод относительных единиц (Карягина, 1982). В показатель БА нами были включены следующие величины: общая и активная микробная биомасса, интенсивность дыхания и азотфиксации, протеазная активность, интенсивность разложения целлюлозы. При этом наибольший показатель принят за 100 единиц.

В черноземе уровень БА возрастает со временем с 48,3 относительных единиц (отн.ед.) до 234,05. Биоудобрение в динамике оказывает различное воздействие на БА - от индифферентного до стимуляции или ингибирования.

При этом интенсивность и тип воздействия зависят от вида адсорбента и изменяется в динамике. Отмечена положительная зависимость в динамике изменения БА почвы от количества жизнеспособных пропагул изолята Trichoderma, адсорбированного на опилках (r=0,92).

На фоне мелиорации отмечено усиление действия биоудобрений на уровень супрессивности и биологическую активность почв. Отмечено достоверное снижение уровня количества пропагул Bipolaris sorokiniana и возрастние азофиксирующей активности.

Использование растительных типов сорбентов для микромицетаинтродуцента позволило пролонгировать стимуляцию БА почвы до 60 дней на фоне возрастающих концентраций извести (рис. 10).

Таким образом, уровень БА чернозема, определяющий супрессивность почвы, может быть увеличен на ранних этапах как раздельным, так и комплексным воздействием исследуемых факторов (мелиорация и биологическая защита). Эффект пролонгирования стимуляции БА чернозема может быть достигнут только при одновременном использовании биопестицида на растительных сорбентах и известкования.

Показана положительная корреляционная зависимость численности жизнеспособных пропагул микромицета от проводимых в черноземе агротехнических мероприятий (применение известкования в возрастающих дозах) лишь в случае адсорбции Trichoderma на цеолите и шелухе.

Следовательно, адаптивные свойства у микромицетов-интродуцентов в агроценозе на фоне антропогенной нагрузки можно увеличить при правильном экологически обоснованном применении адсорбента.

Отмечена стимуляция отдельных параметров активности микробного сообщества в зависимости от типа адсорбента для Trichoderma в биоудобрении в динамике. Максимальная способность к стимуляции общей биологической активности показана для микромицета, адсорбированного на цеолите и шелухе. Это указывает на то, что тип адсорбента для микроорганизма в почве может оказывать влияние не только на жизнеспособность, но и увеличивать их метаболическую активность.

Отмечена положительная корреляция между уровнем биологической активности чернозёма и количеством Trichoderma, адсорбированной на растительном сорбенте, а на фоне мелиорации — с количеством микромицета-интродуцента, адсорбированного на цеолите.

Наибольший положительный эффект на биологическую активность и супрессивность почв от применения биоудобрений показан в случае применения в качестве интродуцента изолята Trichoderma в ассоциации с Azotobacter spp. и Trichoderma в ассоциации с Rhizobium spp. с использованием в качестве органических сорбентов навоза и соломы.

Использование Trichoderma как биофунгицида Усиление положительного эффекта изолята Trichoderma получено при использовании в качестве рострегулятора препарата «Агрохит» под яровые зерновые культуры. Показано, что метаболиты изолята Trichoderma вызывают снижение пораженности семян пшеницы возбудителями фузариоза и гельминтоспориоза. Максимальная биологическая эффективность в отношении возбудителя Fusarium spp. отмечена в случае сочетания с х о дс тв о

-400

-300

-200

-100

–  –  –

Рис. 10. Оценка относительного сходства биологической активности выщелоченного чернозема после различных типов антропогенного воздействия на 30-е сутки (к -контроль (почва), Tr.н. – Trichoderma (Т.) на навозе, Tr.o. – T. на опилках, Tr.ц. – T. на цеолите, Tr.ш. – T. на шелухе, NPK (к) – минеральные удобрения (контроль), NPK + Tr.н. – мин.удобрения + T. на навозе, NPK + Tr.o. – мин.удобрения + T. на опилках, NPK + Tr.ц. – мин.удобрения + Т. на цеолите, NPK + Tr.ш. – мин.удобрения + Т. на шелухе, известь (к) – контроль, NPK + изв.2т – мин.удобрения + СаСО3 (2т/га), NPK + изв.2т – мин.удобрения + СаСО3 (3т/га), NPK + изв.2т – мин.удобрения + СаСО3 (4т/га), NPK + изв.2т – мин.удобрения + СаСО3 (5т/га)

–  –  –

Т А Т+А Рис. 11. Влияние биоудобрения на основе сообщества T.asperellum с бактериями рода Azotobacter spp., адсорбированных на высушенном стерильном курином помете (Т – T.asperellum, A – Azotobacter spp., T+A – T.asperellum + Azotobacter) метаболитов и конидий изолятов Trichoderma.

Изучение зараженности яровой пшеницы на стадии онтогенеза выявило пораженность сорта Лада возбудителями септориоза и мучнистой росой.

Наибольшая биологическая эффективность биофунгицида показана против возбудителя септориоза при использовании биофунгицида с прилипателем (КМЦ), а против мучнистой росы в вариантах с метаболитами интродуцента Применение биопестицида в сочетании с регуляторами роста способствовало повышению урожайности на 16%. Максимальная биологическая эффективность показана для биофунгицида на основе метаболитов и конидий. Биологическая эффективность биофунгицида на основе Trichoderma сопоставима со стандартными биопестицидами фитоспорином и планризом.

Предпосевная обработка семян сосны Pinus silvestris холодотолерантным видом Trichoderma приводит к снижению поражения семян возбудителями плесневений родов Fusarium spp., Altemaria spp. и Cladosporium spp.

Интродукция биопестицида на основе изолята Trichoderma, адсорбированного на цеолите, в почву снижает степень отпада сеянцев сосны в 2,5 раза, что свидетельствует о положительном влиянии интродуцента на супрессивность истощенной серой лесной почвы лесопитомника.

При использовании биоудобрений на основе ОСВ и изолятов Trichoderma отмечено увеличение выхода здоровых сеянцев более чем в 3 раза по сравнению с контролем, что свидетельствует о положительном влиянии использования в качестве сорбента компоста.

Жизнеспособность интродуцента Trichoderma достоверно зависит от используемого в компосте адсорбента. Оптимальный результат достигается при интродукции Trichoderma на опилках. Внесение органического удобрения достоверно влияет на жизнеспособность биопрепарата только при использовании минерального адсорбента.

ВЫВОДЫ

1. Грибы рода Trichoderma являются типичными представителями почв на территории РТ. Выявлено 11 аборигенных видов, в том числе ранее неописанных. Природными резервуарами сохранения численности и видового разнообразия видов рода Trichoderma являются погребенные почвы древних поселений, могильники и почвы Раифского заповедника, где частота встречаемости составляет более 60%, а видовое разнообразие более 20 видов.

Современные антропогенные ландшафты характеризуются резким снижением частоты встречаемости (0-7%) и видового разнообразия (менее 4видов).

2. Высокий уровень полиморфизма и генетического разнообразия природных популяций и клонов Trichoderma поддерживается действием комплекса внешних факторов. Тяжелые металлы вызывают генные мутации у грибов рода Trichoderma. Природные популяции Trichoderma характеризуются высокой гетерогенностью. В состав аборигенных изолятов Trichoderma, выделенных на территории республики Татарстан, входят гетерогенные и моноспоровые клоны, представленные двумя культурально – морфологическими типами (II, IV).

3. Видовое разнообразие микромицетов снижается в ряду от эталонных почв (могильники, древние поселения, Раифский заповедник) к современным антропогенным ландшафтам, от поверхности корней к почве. Максимальным разнообразием характеризуются комплексы эталонных почв.

4. С помощью молекулярно-генетических, морфологических, кинетических и физиологических критериев в популяционной структуре местных изолятов выявлены культурально-морфологические клоны, отличающиеся типом жизненных стратегий. Положение выделенных изолятов в системе стратегии жизни характеризуется тенденцией к расположению в области rK-континиума эталонных почв, а из современных горизонтов, подверженных антропогенному воздействию - на противоположном r-полюсе с распространением в сторону rL-континиума.

5. Качественная популяционная структура видов Trichoderma представляет собой мозаику клонов с различным типом совместимости, скорости роста, интенсивности спороношения, отношения к субстрату и конкурентоспособности.

6. Тип взаимоотношения с растением изолятов Trichoderma – антагонистов к фитопатогенным грибам - определяется типом организмаэдификатора, инфицированностью эндогенными возбудителями заболеваний и физико-химическими характеристиками почв.

7. Преобладающим типом взаимоотношения местных изолятов Trichoderma является отрицательное воздействие на растения, связанное с активацией эндогенных фитопатогенных грибов при интродукции микромицетов-антагонистов. Роль природных изолятов Trichoderma заключается в сукцессионных изменениях структуры растительного сообщества. Определены экологические группы изолятов Trichoderma сапротрофов, эккрисатрофов и биотрофов, определяемые растениемэдификатором. В почве преобладают LK-стратеги, а в ризосфере растений отмечены сукцессионные изменения в составе гетерогенной популяции в зависимости от стадии вегетации от r к rK- и L-.

8. Тип экологической ниши определяет морфометрические и кинетические параметры изолятов Trichoderma. Обнаружена взаимосвязь между уровнем азотфиксирующей активности бактерий, интенсивностью эмиссии CO2 в почве и интродуцированным видом Trichoderma. Наибольшее достоверное воздействие на азотфиксирующие бактерии показано для видов T. atroviride и T. citrinoviride.

9. Разработана концепция использования природных изолятов, основанная на экологических стратегиях и консортивном подходе.

Грибы рода Trichoderma являются индикаторами супрессивности почв и могут быть использованы для диагностики уровня инфекционного фона агроценозов. Использование в практике сельского хозяйства при интродукциив почву должно быть основано на получении биоудобрения с использованием отходов бытового, промышленного и сельскохозяйственного производства с LK-стратегиями жизни изолятов рода Trichoderma в ассоциации с диазотрофами. Дана характеристика флуктуаций интродуцируемых популяций Trichoderma в различных типах почв.

10. Разработаны молекулярно-генетические маркеры для контроля жизнеспособности интродуцированных изолятов Trichoderma. C целью регуляции жизнедеятельности популяций Trichoderma и защиты растений от фитопатогенных микроорганизмов разработана технология комопостирования «под открытым небом» с использованием no-till технологий и применения холодостойких изолятов. С помощью совокупности избирательных характеристик определена безопасность интродукции микромицетов-антагонистов рода Trichoderma.

11. Интродукция Trichoderma на фоне компостов на основе осадков сточных вод с высоким содержанием тяжелых металлов, животноводческих комплексов, растительных остатков способствует снижению инфекционного фона отпада всходов Pinus sylvestris в антропогенных ландшафтах и повышению всхожести семян.

12. Максимальным гидролитическим комплексом обладают изоляты Trichoderma, выделенные из эталонных почв, что позволило использовать их для повышения гидролизуемости фуражных культур.

Основные публикации по теме работы

Монографии:

1. Алимова Ф.К. Микробная битехнология. (Глава 5. Защита растений.) / Ф.К. Алимова, И.Б. Лещинская, Б.М. Куриненко, В.И. Вершинина, Т.В.

Багаева, Л. И. Знаменская.- УНИПРЕСС:ДАС.: Казань, 2000. - 368 с.

2. Алимова Ф.К. Промышленное применение грибов рода Trichoderma/ Ф.К. Алимова.- Казань.: УНИПРЕСС ДАС, 2006. - 268 с.

3. Алимова Ф.К. Trichoderma/Hypocrea (Fungi, Ascomycetes,

Hypocreales): таксономия и распространение/ Ф.К. Алимова.- Казань.:

УНИПРЕСС ДАС, 2006. - 360 с.

Учебно – методические пособия:

4. Алимова Ф.К. Влияние условий культивирования на развитие микроорганизмов/ Методические указания // Ф.К. Алимова, Р.А. Сайманова.Казань.: Изд-во КГУ, 1986. - 31с.

5. Алимова Ф.К. Микроорганизмы и плодородие почв. Методические указания // Ф.К. Алимова, Н.Г.Захарова, Р.А. Сайманова. - Казань.: Изд-во КГУ, 1987. - 36с.

6. Алимова Ф.К. Методы культивирования анаэробов. Методические указания //Ф.К. Алимова, Сайманова Р.А. - Казань.: Изд-во КГУ, 1987. - 37с.

7. Алимова Ф.К. Современные методы в микробиологии. Учебнометодическое пособие //Ф.К. Алимова, Т.В. Багаева, Р.А. Сайманова, И.Е.

Черепнева. – Казань.: Изд-во КГУ, 1988. - 40с.

8. Алимова Ф.К. Методы определения токсичности почвы, количественного учета фитотоксических форм микроорганизмов и изучение их фитотоксических свойств / Учебно-методическое пособие //Ф.К. Алимова, Т.В. Багаева. – Казань.: Изд-во КГУ, 1990. - 40 c.

9. Алимова Ф.К. Биология почв. Методические указания к выполнению лабораторных работ /Ф.К. Алимова, Н.Г. Захарова. – Казань.: Изд-во КГУ, 1990. - 20с.

10. Алимова Ф.К. Периодическое культивирование микроорганизмов.

Методические указания к выполнению лабораторных работ //Ф.К. Алимова, С.Ю. Егоров, Н.Г. Захарова. – Казань.: Изд-во КГУ, 1991. - 21с.

11. Алимова Ф.К. Экология микроорганизмов. Методические указания к выполнению лабораторных работ //Ф.К. Алимова, Н.Г. Захарова, С.Ю.

Егоров. – Казань.: Изд-во КГУ, 1993. - 41с.

12. Алимова Ф.К. Биомониторинг почв. Учебное пособие //Ф.К.

Алимова, А.В. Гарусов, Н.Г. Захарова, О.Н. Ильинская, И.М. Скипина. – Казань.: Изд-во КГУ, 1999. - 40с.

13. Алимова Ф.К. Методы микробиологических исследований.



Pages:     | 1 || 3 |

Похожие работы:

«ГАБДУЛЛИН ФАИЛЬ ХАРИСОВИЧ ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНАЯ И БИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА КАЧЕСТВА МЯСА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ В РАЦИОНЕ АЭПК «БИОГУММИКС» 06.02.05 Ветеринарная санитария, экология, зоогигиена и ветеринарносанитарная экспертиза 03.03.01 Физиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Казань 2015 Работа выполнена в федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования...»

«ГУЛЬ ШАХ ШАХ МАХМУД БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ЦИТРУСОВОЙ МИНИРУЮЩЕЙ МОЛИ (Phyllocnistis citrella Stainton) В УСЛОВИЯХ ЮГО-ВОСТОЧНОГО АФГАНИСТАНА Специальность 06.01.07 – Защита растений АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Душанбе – 2014 Работа выполнена на кафедре защиты растений Таджикского аграрного университета им. Шириншоха Шотемура Научный руководитель: Кахаров Кахар Хабибуллаевич доктор сельскохозяйственных наук,...»

«Попов Игорь Олегович НАБЛЮДАЕМЫЕ И ОЖИДАЕМЫЕ КЛИМАТООБУСЛОВЛЕННЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ИКСОДОВЫХ КЛЕЩЕЙ IXODES RICINUS И IXODES PERSULCATUS НА ТЕРРИТОРИИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ И СТРАН БЛИЖНЕГО ЗАРУБЕЖЬЯ Специальность 03.02.08 «Экология» АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой...»

«УДК 574.587 Барбашова Марина Александровна МАКРОБЕНТОС ЛАДОЖСКОГО ОЗЕРА И ЕГО ИЗМЕНЕНИЯ ПОД ВЛИЯНИЕМ ФАКТОРОВ СРЕДЫ 03.02.08 – экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Санкт-Петербург Работа выполнена в лаборатории гидробиологии Федерального государственного бюджетного учреждения науки Институт озероведения Российской академии наук Научные руководители: Слепухина Татьяна Дмитриевна, доктор биологических наук Курашов Евгений...»

«НЕХОРОШКИНА Мария Олеговна POЛЬ ГEHEТИЧECКИХ ФAКТOPOB B PAЗBИТИИ BPOЖДЁHНЫХ PACЩEЛИH ГУБЫ И HЁБA CPEДИ HACEЛEHИЯ КPACHOДAPCКOГO КPAЯ 03.02.07 – генетика АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских наук Белгород – 2014 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Кубанский государственный медицинский университет» (ГБOУ BПO КyбГМУ) Министерства здравоохранения Российской Федерации...»

«Дандал Али Шебли ПАТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО БРОНХИТА КУР 06.02.02 «ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология» АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Владимир-2015 Работа выполнена в ФГБУ «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГБУ «ВНИИЗЖ) Россельхознадзора и в ФГБАОУ ВПО «Российский университет дружбы народов» Научный руководитель: Макаров Владимир...»

«ЖИРКОВ АЛЕКСЕЙ ДМИТРИЕВИЧ ПРОФИЛАКТИКА МИКОТОКСИКОЗОВ ЛОШАДЕЙ ТАБУННОГО СОДЕРЖАНИЯ С ПРИМЕНЕНИЕМ ПРОБИОТИКА САХАБАКТИСУБТИЛ В УСЛОВИЯХ ЯКУТИИ 06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Новосибирск 2015 Работа выполнена в Государственном научном учреждении «Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства»...»

«Абдуллоева Елена Юрьевна БИВАЛЕНТНАЯ ВАКЦИНА ПРОТИВ БОЛЕЗНИ МАРЕКА ИЗ ВИРУСА 1 И 3 СЕРОТИПОВ 03.02.02 «Вирусология» АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Владимир – 2015 Работа выполнена в федеральном государственном бюджетном учреждении «Федеральный центр охраны здоровья животных» ФГБУ «ВНИИЗЖ» доктор ветеринарных наук Камалова Научный руководитель: Наталья Евгеньевна Еремец Владимир Иванович – доктор Официальные оппоненты:...»

«КУРАНОВА Мирья Леонидовна КЛЕТОЧНЫЕ И МОЛЕКУЛЯРНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ПРОЯВЛЕНИЯ АТАКСИИ-ТЕЛЕАНГИЭКТАЗИИ 03.03.04 – Клеточная биология, цитология, гистология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Санкт-Петербург Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Институт цитологии Российской академии наук Научные руководители: кандидат биологических наук, доцент Спивак Ирина Михайловна Институт цитологии РАН...»

«ЕРМОШ ЛАРИСА ГЕОРГИЕВНА НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОДУКТОВ ПОВЫШЕННОЙ ПИЩЕВОЙ ЦЕННОСТИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ КЛУБНЕЙ ТОПИНАМБУРА 05.18.01 – Технология обработки, хранения и переработки злаковых, бобовых культур, крупяных продуктов, плодоовощной продукции и виноградарства АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора технических наук Красноярск – 2015 Работа выполнена в ФГАОУ ВПО «Сибирский федеральный университет» доктор биологических наук, профессор...»

«ОВСЯННИКОВ Алексей Юрьевич СЕЗОННАЯ СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ТРАНСФОРМАЦИЯ ФОТОСИНТЕТИЧЕСКОГО АППАРАТА ХВОИ PICEA PUNGENS ENGL. И P. OBOVATA LEDEB. НА ТЕРРИТОРИИ БОТАНИЧЕСКОГО САДА УРО РАН (Г. ЕКАТЕРИНБУРГ) 03.02.08 — «Экология (в биологии)» Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Санкт-Петербург Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки Ботанический сад Уральского отделения Российской академии наук...»

«КОРОБКО ДЕНИС СЕРГЕЕВИЧ КЛИНИКО-ГЕНЕТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ РАССЕЯННОГО СКЛЕРОЗА (НА ПРИМЕРЕ ПОПУЛЯЦИИ НОВОСИБИРСКОЙ ОБЛАСТИ) Специальность 14.01.11 нервные болезни АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва-2014 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования государственный «Новосибирский медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации Научный...»

«Лысков Дмитрий Федорович СИСТЕМАТИКА РОДА PRANGOS (UMBELLIFERAE, APIOIDEAE) И СБЛИЖАЕМЫХ ТАКСОНОВ: СОПОСТАВЛЕНИЕ МОРФОЛОГОАНАТОМИЧЕСКИХ И МОЛЕКУЛЯРНЫХ ДАННЫХ Специальность 03.02.01 – Ботаника АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва — 2015 Работа выполнена на биологическом факультете ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В.Ломоносова» Научный руководитель: Пименов Михаил Георгиевич доктор биологических наук,...»

«БУХАРОВА Надежда Владимировна АФИЛЛОФОРОВЫЕ ГРИБЫ ГОСУДАРСТВЕННОГО ПРИРОДНОГО ЗАПОВЕДНИКА «БАСТАК» 03.02.01 – ботаника АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Владивосток – 2013 Работа выполнена в лаборатории низших растений Федерального государственного бюджетного учреждения науки Биолого-почвенного института ДВО РАН Научный руководитель: кандидат биологических наук Булах Евгения Мироновна Научный консультант: кандидат биологических...»

«Бантыш Ольга Борисовна Биосинтез пептид-нуклеотидного антибиотика микроцина С и его гомологов Специальность 03.01.03 молекулярная биология АВТОРЕФЕРАТ Диссертация на соискание учной степени кандидата биологических наук Москва Работа выполнена в лаборатории молекулярной генетики микроорганизмов Федерального государственного бюджетного учреждения науки Института биологии гена Российской академии наук. Научный руководитель: Северинов Константин Викторович, доктор биологических...»

«НИКИТИНА ЕКАТЕРИНА ГЕННАДЬЕВНА ПАТТЕРН ЭКСПРЕССИИ микроРНК ПРИ ПРЕДОПУХОЛЕВЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ И РАКЕ ГОРТАНИ 14.01.12 – онкология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Томск Работа выполнена в федеральном государственном бюджетном научном учреждении «Томский научно-исследовательский институт онкологии» и Национальном исследовательском Томском государственном университете Научный руководитель: доктор биологических наук Литвяков Николай...»

«Фишман Вениамин Семенович СРАВНЕНИЕ ПРОСТРАНСТВЕННОЙ ОРГАНИЗАЦИИ ГЕНОМОВ ФИБРОБЛАСТОВ И СПЕРМАТОЗОИДОВ МЫШИ МЕТОДОМ Hi-C 03.02.07 – генетика Автореферат Диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Новосибирск 2015 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном научном учреждении «Федеральный исследовательский центр Институт цитологии и генетики Сибирского отделения Российской академии наук» в лаборатории генетики развития, г. Новосибирск....»

«Матрохина Ольга Иннокентьевна МЕДИКО-ДЕМОГРАФИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДОНОРОВ, НАГРАЖДЕННЫХ НАГРУДНЫМ ЗНАКОМ «ПОЧЕТНЫЙ ДОНОР РОССИИ» 14.01.21 – гематология и переливание крови Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Санкт-Петербург – 2015 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении науки «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства» Научный...»

«Мечов Максим Павлович КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РЕПАРАТИВНОГО ОСТЕОГЕНЕЗА ПРИ ИМПЛАНТАЦИИ ФИКСАТОРОВ С ПОКРЫТИЕМ НА ОСНОВЕ МЕТАЛЛОВ IV ГРУППЫ 06.02.04 – ветеринарная хирургия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Москва – 2015 Работа выполнена на кафедре ветеринарной хирургии ФГБОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана» Научный руководитель Шакирова Фаина Владимировна доктор...»

«Жакова Светлана Николаевна РЕПРОДУКТИВНАЯ БИОЛОГИЯ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ И КУЛЬТИВАРОВ РОДА СИРЕНЬ (SYRINGA L.) 03.02.01 – ботаника Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Пермь – 2015 Работа выполнена на кафедре ботаники и генетики растений Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Пермский государственный национальный исследовательский университет» Научный руководитель:...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.