WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |

«Экспериментальная и производственная оценка элективных питательных сред и дезинфектантов при туберкулезе крупного рогатого скота ...»

-- [ Страница 1 ] --

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ

ОБЩЕОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧЕРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ

«Белгородский государственный аграрный университет имени В.Я. Горина»

На правах рукописи

Жабина Виктория Юрьевна

Экспериментальная и производственная оценка элективных

питательных сред и дезинфектантов при туберкулезе крупного

рогатого скота

06.02.02 – Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

ДИССЕРТАЦИЯ

на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Научный руководитель:

доктор ветеринарных наук Коваленко Анатолий Михайлович Белгород – 2015

ОГЛАВЛЕНИЕ

Общая характеристика работы

1.0. Обзор литературы

Возбудители туберкулеза и его формы изменчивости

1.1.

Методы диагностики туберкулеза крупного рогатого скота................14 1.2.

1.2.1. Аллергический метод диагностики………

Лабораторные методы диагностики туберкулеза животных................21 1.3.

1.3.1. Бактериоскопический метод исследования

1.3.2. Культуральный метод исследования

1.3.3. Патологоанатомический метод исследования

Характеристика эпизоотического процесса при туберкулезе крупного 1.4.

рогатого скота

Дезинфицирующие средства применяемые для уничтожения 1.5.

микобактерий

2.0. Собственные исследования

Материал и методы исследования

2.1.

3.0. Результаты исследований

Характеристика эпизоотической ситуации по туберкулезу крупного 3.1.

рогатого скота в Российской Федерации

3.2. Эпизоотический статус ООО "Семхоз Ракитянский" ММК с.Васильевка Ракитянского района, Белгородской области

3.3. Динамика выявления животных реагирующих на ППД–туберкулин для млекопитающих

3.4. Эффективность применения молекулярно–генетического теста при исследовании биоматериала на туберкулез

Результаты поисковых исследований по разработке плотной 3.5.

синтетической элективной питательной среды для первичного выделения микобактерий

Изучение влияния методов предпосевной обработки биоматериала на 3.6.

рост микобактерий, в том числе L–форм при посевах на питательные среды

Изучение сравнительной эффективности дезинфицирующих 3.7.

средств

3.7.1. Изучение выделяемости культур микобактерий из объектов внешней среды

3.7.2. Изучение бактерицидных свойств анолитов приготовленных по технологии «АКВА–ЭХА» в камеральных условиях

3.7.3. Сравнительное изучение дезинфицирующих свойств растворов, полученных по технологии в условиях «АКВА–ЭХА»

неблагополучного по туберкулезу хозяйства

4.0. Обсуждение результатов исследований

5.0.Выводы

Практические предложения

Список сокращений и условных обозначений

Список используемой литературы

Список иллюстрированного материла

Приложения

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Среди инфекционных болезней человека и животных особое место занимает туберкулез. С тех пор, когда Р. Кохом был открыт возбудитель туберкулеза, претерпели значительные изменения положения о развитии и проявлении инфекционного и эпизоотического процессов (Гулюкин М.И. с соавт. 2011, 2012; Данко Ю.Ю., 1998,1999;

Донченко А.С. с соавт., 1995,1997; Найманов А.Х. с соавт., 2013,2014;

Овдиенко Н.П. с соавт., 1999,2009; Ткаченко А.А., 2000; Шаров А.Н., 1982 и др.). В 20 веке возросла роль, так называемых атипичных микобактерий и их роль в патологии животных и людей (Ильинская З.Д., 1973; Каграманов А.И., 1963; Мартма О.В., 1991; Урбан В.П. с соавт., 1974,1982,1995 и др.). Открытие L–форм у возбудителя туберкулеза заставило изменить и по новому решать вопросы диагностики и профилактики, эпизоотологии и эпидемиологии болезни (Васильев В.Н., 1971; Гертман М.И., 1988; Дорожкова И.Р. 1995; Кузин А.И., 1978 и др.). Инфицирование организма не всегда приводит к заболеванию.

По данным медицинских исследователей к 20 летнему возрасту практически все люди инфицированы возбудителем туберкулеза. В тоже время количество больных на 100 тысяч жителей колеблется от 17 до 50 случаев. Этот сложный вопрос еще далеко не познан наукой. Нельзя до конца считать решенным вопрос о взаимосвязи различных видов микобактерий: патогенных, потенциально патогенных, атипичных и сапрофитов (Агапова М.Ф. с соавт., 2011; Бойко А.А. с соавт., 1991; Кассич Ю.Я., 1990; Кузин А.И., 1978; Кузьмин В.А. с соавт., 2012; Урбан В.П. с соавт., 1983; Шаров А.Н., 1982; Щуревский В.Е. с соавт., 1984 и др.).

Изменения, происходящие во взглядах на развитие инфекционного, эпидемического и эпизоотического процессов выделяют туберкулез в отдельную группу болезней, при которой объекты внешней среды имеют существенно важное значение в возникновении и распространении данной инфекции. Принимая во внимание, что развитие инфекционного и характер эпизоотического процесса определяют целый комплекс факторов, среди которых основная роль отводится возбудителю болезни, вопросы диагностики туберкулеза, в части аллергического и бактериологического методов диагностики, имеют существенно важное значение в определении эпизоотического статуса животноводческих хозяйств (Боганец Н.С., 2005;

Донченко А.С. с соавт., 1995;1997; Донченко Н.А., 2004; Ерошенко Л.А. с соавт., 2001; Ткаченко А.А., 2000; Урбан В.П., 1966;1974;1996 и др.).

Туберкулез относится к заболеваниям, при которых аллергия участвует как обязательный компонент основного патологического процесса (Авербах М.М. с соавт., 1976; Найманов А.Х., 1981, с соавт. 2014; Овдиенко Н.П. с соавт., 1996; Урбан В.П., Данко Ю.Ю., 1983; Урбан В.П., 1966,1982,1983;

Шаров А.Н., 1970 и др.). По своей природе туберкулиновая проба это высоко специфическая реакция иммунокомпетентных клеток с аллергеном (Авербах М.М. с соавт., 1976). Неуклонно изменяющиеся условия экологического баланса, во многом неконтролируемое и бессистемное применение большого количества химиотерапевтических препаратов оказывают влияние на иммунобиологическую реактивность организма животных. В конечном итоге наблюдаются сбои в работе иммунной системы. Это проявляется неадекватной реакцией организма на те или иные средства специфической профилактики и диагностике. Применительно к аллергической диагностики туберкулеза, по– прежнему проблемной задачей является своевременное выявление животных с латентной формой или в начале развития инфекционного процесса (Найманов А.Х., 2014;).

Еще одной проблемой является низкие ростовые свойства микобактерий при их культивировании на питательных средах. В рутинной лабораторной практике это существенно затрудняет своевременное выделение и последующую видовую идентификацию микобактерий (Аликаева А.П., 1979;

Букова Н.К. с соавт., 2004; Донченко А.С. с соавт., 2000,2006; Евглевский А.А.

2004; Корнева И.Н. с соавт., 2002; Тарасова Е.В. с соавт., 2012 и др.).

Особую значимость в системе мер борьбы с туберкулезом придается дезинфекции помещений и скотных дворов. В настоящее время для дезинфекции животноводческих помещений, наряду с известными средствами, предлагается целый ряд новых, качественно улучшенных дезинфектантов (Аржаков В.Н., 2002, с соавт., 2004; Березнев А.П. с соавт., 1990, 1994;

Борознов С.Л. с соавт., 2006; Бутко М.П. с соавт., 2003; Высоцкий А.Э. с соавт., 2006 и др.). Выбор того или иного дезинфектанта определяется не только рекомендациями производителей. Большое значение имеют результаты независимых экспертиз, в том числе научно–производственных испытаний.

Все вышеизложенные проблемные вопросы приняты нами во внимание и определили цель и задачи диссертационного исследования.

Цель и задачи исследования. Целью исследований является экспериментальная и производственная оценка элективных питательных сред для выращивания микобактерий и новых дезинфектантов для обеззараживания животноводческих объектов при туберкулезе крупного рогатого скота

В соответствии с целью были обозначены следующие задачи:

1.Изучить эпизоотическую ситуацию и диагностическую эффективность аллергической диагностической пробы при туберкулезе крупного рогатого скота.

2.Разработать новую, более эффективную плотную питательную среду для первичного выделения микобактерий из биоматериала, полученного от животных убитых с диагностической целью.

сравнительное изучение ростовых свойств

3.Провести усовершенствованной полужидкой питательной среды Белгородской ГСХА и среды Дорожковой И.Р. для выделения L–форм микобактерий.

4.В экспериментальных и полевых опытах изучить возможность применения экологически безопасных, анолитных дезинфицирующих растворов, полученных по технологии «АКВА–ЭХА», для обеззараживания микобактерий туберкулеза.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Результаты изучения эффективности аллергической диагностической пробы при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота в условиях ООО "Семхоз Ракитянский" ММК с. Васильевка, Ракитянского района, Белгородской области.

2. Плотная синтетическая элективная питательная среда для первичного выделения микобактерий туберкулеза из биоматериала.

3. Результаты исследований по выделяемости микобактерий из объектов внешней среды в неблагополучном по туберкулезу крупного рогатого скота хозяйстве.

эффективности применения новых анолитных

4.Оценка дезинфицирующих растворов, полученных по технологии «АКВА–ЭХА» в условиях эксперимента и неблагополучного по туберкулезу крупного рогатого скота хозяйства.

Научная новизна. Разработана плотная питательная среда для первичного выделения микобактерий туберкулеза.

Экспериментально и в полевых условиях изучены обеззараживающие свойства новых экологически безопасных анолитных дезинфицирующих средств, приготовленных по технологии Показана «АКВА–ЭХА».

целесообразность применения в системе противотуберкулезных мероприятий экологически безопасных анолитов с содержанием активного хлора 250–400 мг/л и рH 5–7.

Практическая значимость работы. На основании проведенных исследований определена эффективность и представлены предложения по использованию нового состава элективной питательной среды для выращивания микобактерий туберкулеза; применения новых, экологически безопасных анолитных дезинфицирующих средств, полученных по технологии «АКВА–ЭХА» с содержанием активного хлора 250–400 мг/л и рH 5–7.

Апробация работы. Основные положения доложены и обсуждены на:

заседании кафедры инфекционной и инвазионной патологии

– Белгородского государственного аграрного университета (2014–2015);

конкурсном отборе по программе "Участник Молодежного Научно

– Инновационного Конкурса 2011" (УМНИК–2011);

– Всероссийском конкурсе на лучшую научную работу среди студентов, аспирантов и молодых ученых высших учебных заведений МСХ РФ в ЦФО в номинации "Ветеринарные науки" (Диплом за победу во II этапе, 2012г.);

Всероссийском конкурсе на лучшую научную работу среди студентов,

– аспирантов и молодых ученых высших учебных заведений МСХ РФ в номинации "Ветеринарные науки" (Грамота за III этап, 2012г.);

Международной научно–практической конференции

– XXVII «Естественные и математические науки в современном мире» НП «СибАК» (г.

Новосибирск, 2015 г.);

Международной научно–практической конференции

– XI «Стратегические вопросы мировой науки 2015» (Польша, 2015г.).

Публикации результатов исследований По теме диссертации опубликовано 6 научные работы, в том числе 4 в изданиях, рекомендованных ВАК РФ.

Объем и структура диссертационной работы. Диссертация изложена на 122 страницах компьютерного текста и включает: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения, список сокращений и условных обозначений, список используемой литературы, список иллюстрированного материала (всего 228 источников, из которых 44 иностранных). Диссертация иллюстрирована 14 таблицами и 8 рисунками.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1.Возбудители туберкулеза и его формы изменчивости В настоящее время из окружающей среды, биоматериала от животных и людей выделено и описано более 300 видов микобактерий. По современной классификации микроорганизмов, микобактерии относятся к роду Mycobacterium, семейству Mycobacteriaceae, ряда Actinomycetes (Берджи Д., 1997). Все они кислото – и спиртоустойчивые, хорошо окрашиваются по Циль– Нильсену, но у некоторых видов микобактерий на определенных стадиях роста в части клеток это свойство не наблюдают (Авербах М.М., 1976; Аликаева А.П., 1963; Борисов С.Е., 2001; Борисов Л.Б.. 2005; Вишневский Б.И. с соавт., 2002; Воробьев А.А., 2001; Донченко А.С. с соавт., 2002,2006; Драбкина О.Р., 1963; Иртуганова О.А., 2001; Кисиленко В.Н. с соавт. 2007; Козлов В.Е, 2004;

Лазовская А.Л., 1976; Мартма О.В. с соавт. 1991; Модель Л.М., 1958; Олескин А.В. с соавт., 2000; Azuma I., Kolbel H. K., 1978). Патогенными для животных и человека являются Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium bovis, Mycobacterium avium.

Mycobacterium tuberculosis – это прямые или чуть изогнутые, тонкие, длинные палочки (0,3–0,6 мкм на 1–6 мкм) но иногда встречаются очень короткие или длинные формы. Клетки микобактерий содержат гранулы, которые расположены на полюсах, а их количество зависит от многих факторов. Деструктивные по клеточной стенке L–формы МБТ выделяют в основном из патологоанатомического материала от больных туберкулезом людей, которых лечили туберкулостатическими препаратами. На плотных питательных средах рост колоний (субкультур) M.tuberculosis наблюдают на 20–60 сутки, а добавление к среде 5–6% глицерина ускоряет и улучшает их рост. Микобактерии туберкулеза человеческого вида на плотных яичных средах вырастают в виде сухих рыхлых, матовых колоний неправильной формы (R– форма), гладких колоний, сливающихся между собой. На средах с добавлением бычьей сыворотки и картофельной среды с добавлением глицерина растут медленно, толстыми складчатыми слоями. Колонии МБТ имеют цвет слоновой кости, а при старении (60–90 суток) приобретают кремовый цвет. На жидкой или полужидкой среде рост колоний МБТ появляется на поверхности на 7–14 сутки. Наиболее благоприятная температура роста для этого вида микобактерий является 37°С, однако они могут вырастать и при 30–34°С (при рН 6,4–7), но значительно медленнее. При комнатной температуре и при 45°С культура M.tuberculosis роста не дает. Каталазная активность отсутствует. Реакция с теллуритом калия отрицательная, а с твин–80 дает иногда положительную реакцию. Культура обладает выраженной амидазной активностью и является возбудителем туберкулеза у людей. У зараженных (1 мг/см) морских свинок через 30–60 суток вызывает генерализованную форму туберкулеза, а у кроликов единичные туберкулезные поражения внутренних органов, что и является основным признаком дифференциации M.tuberculosis от M.bovis (Донченко А.С. с соавт., 1997; Тупота Н.Л., 2010; Урбан В.П., 1996; Черноусова Л.Н., 2002; Чичибанин Е.С., 1987,1990; Шаров А.Н., 1982; Beerwerth W., 1976;

Butler, Rey W., 1987; Corner L., 1988; Kopner E., 1933; Tsukamura M.A., 1980;

Valero–Guillen P.L., 1987).

Mycobacterium bovis – это прямые или чуть изогнутые, короткие, тонкие палочки (0,3–4,6 мкм на 1,5–2 мкм). При микроскопическом исследовании в середине клеток находят зерна (зерна Муха), которые расположены на краях микобактерий. Как размер микобактерий, так и количество в них зерен зависит от возраста культуры и условий их культивирования. Однако, полиморфизм у микобактерий отмечают не только при выращивании на питательной среде, но и при выделении их из патологического материала, где наряду с палочковидными формами могут присутствовать и кокковидные, удлиненные формы.

Наиболее благоприятная температура роста для M.bovis 37–38°С. При посеве с патологического материала на питательную среду Левенштейна– Йенсена первичный рост колоний этих микобактерий обнаруживают через 1–2 месяца, а иногда и позже. Добавление к яичным средам 8% и более глицерина подавляет рост микобактерий M.bovis. На плотных питательных средах M.bovis вырастают в виде сухих и бородавчатых колоний (R–форма), а при посеве из патологического материала на среду Левенштейна–Йенсена как правило вырастают мелкие круглые, влажные, почти прозрачные колонии цвета слоновой кости – сплошной рост (S–форма). Культура микобактерий бычьего вида микроаэрофильная, поэтому в жидкой и полужидкой питательной среде растет на поверхности среды. При пересевах культура быстро адаптируется в аэробной среде. При культивировании (t = 25°С и 45°C), на среде с добавлением 5% хлористого натрия культура МБТ роста не дают, каталазная, амидазная (с никотинамидом и пиразинамидом) активность и реакция с теллуритом калия и твин–80 негативные. M.bovis патогенен для крупного рогатого скота, других домашних и диких жвачных, приматов, хищников и людей. При внутримышечном заражении морских свинок и внутривенном кроликов на 30–90 сутки вызывает генерализованную форму туберкулеза (Ашимова К.К., 1991; Бойко А.А., 1991; Белоусов В.И., 2004; Воробьев А.А., 2001; Головьев Е.Л., 2001; Донченко с соавт., 2006; Дорожкова И.Р., 1982;

Евглевский Ал.А., 1997; Колычев Н.М., 1987; Кузин А.И., 1992; Лазовская А.Л., 1976; Найманов А.Х., 2014; Писарев А.И., 2000; Тупота Н.Л. с соавт, 2010;

Kubica G.P., 1981; Lugosi L., 1959; Tragati F., 1977).

Mycobacterium avium – это тонкие, прямые или изогнутые, превышающие по длине микобактерии бычьего и человеческого видов палочки. В мазках из одной культуры могут встречаться как незернистые, так и с выраженной зернистостью микобактерии. Форма и размер микобактерий птичьего вида зависит от химического состава питательной среды, на котором их культивировали, продолжительности сроков выращивания культуры и других причин. В M.avium сильно развит полиморфизм, вследствие чего в препаратах, окрашенных по методу Циль–Нильсена, оказываются как в виде кокковидных форм, так и длинных палочек. Рост культуры микобактерий туберкулеза птичьего вида на плотных яичных средах появляется раньше, чем у культур микобактерий туберкулеза бычьего и человеческого видов – на 15–30 сутки.

Колонии, как правило, влажные, мелкие, гладкие, блестящие, маслянистые, имеют вид закругленных бляшек цвета слоновой кости. На плотных питательных средах иногда образуются кольцевые колонии с валикообразными краями. При старении культура иногда имеет желтоватый цвет. Оптимальная температура роста M.avium 40°С, но могут расти, как при комнатной температуре, так и при 45°С. Микобактерии туберкулеза птичьего вида не растут на питательной среде с 5% – хлористого натрия, имеют отрицательную каталазную активность, не гидролизуют твин–80 и имеют положительную реакцию с теллурит калия и обладают выраженной никотинамидазной и пиразинамидазной активностью. M.avium патогенен для домашних, диких, синантропных и зоопарковых птиц и свиней. У зараженных внутривенно кроликов через 30–60 суток вызывает септическая форму, а у цыплят – генерализованную форму туберкулеза (Драбкина О.Р., 1963; Иртуганова О.А., 2001; Кисиленко В.Н. с соавт.2007; Шаров А.Н., 1982; Beerwerth W., 1976;

Kolbel H.K., 1978).

Атипичные микобактерии.

Первую попытку классифицировать эту большую и гетерогенную группу сделал Е. Раньон в 1959 году. Исходя из пигментообразования и скорости роста, он разделил микобактерии на четыре группы:

1) фотохромогенные;

2) скотохромогенные;

3) нефотохромогенные;

4) быстрорастущие.

Атипичные микобактерии имеют форму прямых или слегка изогнутых палочек с закругленными краями, которые окрашиваются по методу Циль– Нильсена в красный цвет. На синтетических питательных средах они вырастают быстрее, чем истинные возбудители туберкулеза. Атипичные микобактерии не прихотливы к элективным питательным средам. Рост колоний на питательных средах наблюдается на 7–30 сутки и зависит от вида микобактерий. Оптимальная температура роста – 37°С, но они хорошо растут как при комнатной температуре, так и t = 45 и 52°С.

К первой группе фотохромогенных микобактерий относят культуры, которые произрастают на питательных средах в течение 20–30 суток при температуре 37°С. Они не создают пигмент в темноте, но при культивировании их на свете, или после искусственного освещения создают пигмент желтого или оранжевого цвета. К этой группе относятся M.kansasii и M.marinum (Оттен Т.Ф., Васильев А.В., 2005).

Вторая группа – скотохромогенные микобактерии. К ним относятся микобактерии, рост которых проявляется через 10–20 суток при температуре 37°С в виде гладких, блестящих, маслянистой консистенции колоний.

Особенностью этой группы микобактерий является образование желтого, оранжевого или терракотового пигмента как на свету так и в темноте. К этой группе относятся M.scrofulaceum и M.gordonae (Быкова С.Ю., 1994; Ильинская З.Д., 1973; Каграманов А.И., 1963).

Третья группа – нефотохромогенные микобактерии. Представители этой группы очень гетерогенные и морфологически полиморфные. Рост культур на питательных средах при 37°С наблюдается через 10–30 суток после их посева в виде гладких, блестящих колоний (S–форма), а иногда и шероховатых колоний (R–форма). Они могут расти и при комнатной температуре, но значительно медленнее. Микобактерии видов M.avium и M.intracellulare могут расти при 40– 45°С, а M.xenopi при 52°С. Представители этой группы не образуют пигмента, кроме M.xenopi, которые в процессе роста имеют светло–желтый цвет. Что касается вида M.intracellulare, то при старении (40–60 день) они могут приобретать кремовый цвет. К этой группе относятся виды: M.avium, M.intracellulare, M.terrae, M.gastri, M.triviale, M.nonchromogenicum и M.xenopi (Литвинов В.И. с соавт., 2008; Осипова Е.П., 2004; Урбан В.П. с соавт., 1966,1974; Щуревский В.Е., 1984; Lefford M.J., 1975,1984).

Четвертая группа – быстрорастущие микобактерии. При температуре 37°С микобактерии этой группы вырастают через 3–5 суток после посева.

Некоторые виды из них могут расти при t 45°С и 52°С. На питательных средах вырастают в виде как S–форм, так и R–форм. Среди них есть как пигментированные, так и не образующие пигмента виды. К этой группе относятся виды: M.fortuitum, M.smegmatis, M.phlei, M.vaccae, M.dienhoferi, M.flavescens, M.ulcerans, M.peregrinum и M.chelonei (Александров А.А., 2003;

Альшенский М.В., 2004; Vialler I.G., 1973,1976; Zorawski C., 1974,1983,1987).

Все они имеют способность сенсибилизировать организм животных и птиц к туберкулину, что объясняется их антигенным родством с истинными возбудителями туберкулеза (Авербах М.М., 1976; Джупина С.И., 1991;

Гулюкин М.И., 2012; Найманов А.Х. с соавт., 2014; Овдиенко Н.П., 1999;

Ackermann L.J., 1974; Contrina N., Vera, 1986).

1.2.Методы диагностики туберкулеза крупного рогатого скота Согласно «Наставлением по диагностике туберкулеза животных», утверждённого Департаментом ветеринарии МСХ Российской Федерации от 18 ноября диагноз устанавливается на основании результатов 2002г., патологоанатомического, бактериологического, включая биологическую пробу, аллергического методов с учетом эпизоотологических.

Инфекционный процесс при туберкулезе у животных развивается очень медленно, первые иммунологические сдвиги могут проявляться не раньше чем через год после заражения. Сегодня клинически больные животные встречаются очень редко. Появление первых клинических признаков зависит от условий содержания, эксплуатации животных, степени вирулентности возбудителя и места его локализации. Нельзя забывать о влияние различных стресс–факторов: неполноценное кормление, низкая температура внутри животноводческих помещений в зимнее время, сквозняки, высокая влажность (Кузин А.И., 1978,1992; Kaufmann S., 1981; Khansari D.N., 1990.). На характер развития болезни влияет и физиологическое состояние животного (беременность, роды, интенсивная лактация). Чаще всего заболевание протекает преимущественно хронически (Вишневский Б.И. с соавт, 2002;

Кассич В.Ю., 2004; Урбан В.П., 1982,1996). Острое течение характеризуется быстрой потерей упитанности, нарушением функции дыхания, поражением наружных лимфатических узлов, желудочно–кишечного тракта, вымени и других систем и органов.

Такие патогенетические особенности должны быть приняты за основу при диагностике данной инфекции. Диагностику туберкулеза делят на прижизненную и посмертную. Среди предложенных прижизненных специфических методов диагностики, заслуживает внимание аллергический метод диагностики.

1.2.1.Аллергический метод диагностики В 1890 году Р. Кохом был получен туберкулин и внедрен в медицинскую практику вначале для терапии туберкулеза у человека, а затем для диагностики туберкулеза крупного рогатого скота. Клеменс Фон Пирке в 1906 году ввел понятие "аллергия". Аллергия, сверхчувствительность иммунной системы организма на повторное введение аллергена. Инфекционная аллергия связана с участием: бактерий, риккетсий, вирусов грибов, простейших, глистов и продуктов их жизнедеятельности. Как известно, реакция замедленного типа свойственна инфекционной аллергии (Авербах М. М., 1976; Chavez P. R., 1984;

Enarson D.A., 2000).

Суть диагностики туберкулеза основана на явлении повышенной чувствительности замедленного типа организма, инфицированного микобактериями, на повторное введение аллергена. У крупного рогатого скота аллергия наступает через 72 часа в виде повышения местной температуры, болезненности и разлитой отечности (Урбан В.П. с соавт., 1982,1983; Шаров А.Н., 1980).

После признания аллергической реакции на туберкулин как специфического диагностического теста, не утихают дискуссии среди исследователей и практиков о степени достоверности метода и методики его проведения (Кассич В.Ю., 2004). На сегодняшний день в диагностике туберкулеза применяют внутрикожную, глазную и внутривенную аллергическую реакцию. О благополучии стада судят по показаниям аллергической диагностической пробы в отношении туберкулеза и степени распространения туберкулеза в неблагополучном стаде. Официально признанным прижизненным методом диагностики, считается внутрикожная туберкулиновая проба. По мнению большинства авторов, внутрикожная аллергическая диагностика с использованием специфического аллергена, дает весьма хорошие результаты при выявлении скрытых форм инфекционного процесса, в достоверно неблагополучных по заболеванию хозяйствах (Альшецкий М.В., 2004; Бойко А.А., 1991; Евглевский Ал.А., 1997; Кузин А.И., 1978,1992). Но за последние десятилетия, данная проба постепенно утрачивала свою специфичность в связи с возросшим количеством неспецифических реакций (Евглевский А.А., 2004; Евглевский Ал.А., Дубинин А.Н., 1997;

Из–за развития крупных животноводческих ферм, Trenner P., 1986).

возрастания племенного поголовья, увеличения концентрации животных в помещениях, увеличения продуктивности, остается нерешенным вопрос о сбалансировании полноценного кормления животных и создания нормальных условий микроклимата. Все это, приводят к дисбалансу организма животного с внешней средой, к снижению общей резистентности поголовья. К вышеизложенным неблагоприятным факторам, влияющих на иммунный, в т.ч.

на аллергический статус организма, прибавились результаты научно– технической революции: постоянный рост количества токсических веществ во внешней среде, употребление в сельском хозяйстве громадного количества гербицидов, инсектицидов, минеральных удобрений, широкое применение в животноводстве антибиотиков, резкое увеличение количества применяемых вакцин (Урбан В.П. с соавт., 1974, 1982, 1983, 1995).

Урбан В.П. (1995) и Данко Ю.Ю. (1999) отмечают, что даже с активным туберкулезным процессом выявить всех животных аллергической пробой не удается, т.е. часть таких животных не реагируют на введенный туберкулин.

Отсюда следует, что отсутствие туберкулиновых реакций у животных не является гарантией, что данное животное не болеет, а тем более не заражено возбудителем туберкулеза. По мнению Джупина С.И. (1991), Донченко А.С.

(1995), Кузина А.И. (1978), Найманова А.Х. (2014) исчезновение реакций на туберкулин в оздоравливаемом стаде, где был туберкулез, не дает оснований для объявления стада благополучным.

Долгие годы в нашей стране применяли одновременно внутрикожную и глазную туберкулинизацию. Глазная проба имеет ряд преимуществ она более чувствительна, специфична, не вызывает десенсибилизации, так же выявляет животных с генерализованной формой туберкулеза, при плохой упитанности, в период стельности (Тупота Н.Л., 2010). Однако, не смотря на все преимущества при массовой диагностике, выявляется ряд недостатков: невозможность применения у животных с воспаленной оболочкой глаза, субъективности оценки реакции, возможности механического удаления секрета, поэтому учеными была предпринята попытка ее усовершенствования (Найманов А.Х., 1990). После многочисленных исследований Найманов А.Х. (1990), доказал, что глазная туберкулиновая проба не может использоваться, как самостоятельная диагностическая проба из–за недовыявления большого количества больных туберкулезом животных, трудоемкости и длительности ее выполнения. В связи с этим глазная проба использовалась как дополнительный и вспомогательный метод при дифференциации неспецифических реакций у животных реагирующих на ППД – туберкулин для млекопитающих. На сегодняшний день глазная проба не применяется ни в одной стране мира, в том числе и нашей, но ее иногда используют в благополучных хозяйствах в целях отбора животных для диагностического убоя.

Внутривенная туберкулиновая проба, впервые предложена Кальметт (A.

L. Ch. Calmette), Негрэ (Negre) и Боке (Boquet) в 1909г. После этого эффективность данной пробы изучали многие ученые (Бойко А.А., 1991;

Донченко А.С., 1997; Кузин А.И., 1978). Ими было установлено, что внутривенная проба является специфичной, но уступает по чувствительности внутрикожной и глазной пробе, не вызывает сенсибилизации на повторное введение. На основании этого рекомендуют применять внутривенную туберкулиновую пробу как дополнительный метод при оздоровлении неблагополучных по туберкулезу стад и предлагают ее для дифференциации неспецифических внутрикожных реакций, обусловленных сенсибилизацией животных атипичными микобактериями.

Для дифференциации специфических и параспецифических реакций у крупного рогатого скота в хозяйствах, благополучных по туберкулезу, применяют симультанную пробу с ППД – туберкулином для млекопитающих и сухим очищенным комплексным антигеном из атипичных микобактерий (КАМ). Использование симультанной пробы основано на видовой специфичности аллергии проявляющейся более выраженными реакциями на аллерген, родственным по антигенному составу микобактериям, вызвавшим состояние сенсибилизации (Шаров А.Н., 1982).

Обобщая данные литературы следует отметить, что до настоящего времени нет однозначной оценки этого диагностического теста, как по оценке его специфичности, так и по оценке результатов исследований.

Неспецифическая реакция при диагностике туберкулеза животных, проявляется повсеместно и превращается в актуальную проблему при диагностике туберкулеза. Существует ряд данных о причинах возникновения данной неспецифической реакции. Модель Л.М. говорит, о (1958) псевдоаллергической реакции на туберкулин для млекопитающих и птиц в связи не только с инфицированием организма атипичными микобактериями, но и с нарушением обмена веществ (белковый перекорм концентрированными кормами). Ряд ученных (Ашимова К.К., 1991; Донченко А.С. с соавт., 1997;

Евглевский А.А., Лазовская А.Л., допускали версию о 2004; 1976) сенсибилизации организма крупного рогатого скота белками и балластными веществами, входящими в состав мясо–пептонного бульона, на котором готовился альттуберкулин.

Такие реакции могут возникать вследствие сенсибилизации организма животных кислотоустойчивыми сапрофитами, наличия глистных инвазий и др.

По наблюдениям некоторых авторов (Мартма О.В., 1978,1991; Найманов А.Х., 2014) при воздействии на организм стрессовых факторов – резкой смены условий содержания, длительной транспортировки, перемены климата, ) t стельности и охоты, несоблюдения техники введения препарата, повреждения кожи, возникают неспецифические реакции на туберкулин. В последние месяцы стельности и в ранний послеродовой период больные туберкулезом коровы утрачивают способность к ответным аллергическим реакциям. Как отмечает ряд авторов (Овдиенко Н.Н., Донченко А.С., 1999), возникновению аллергических реакций на туберкулин способствуют и такие неспецифические факторы, как сильное травмирование кожи толстой иглой, попадание туберкулина прямо в кровеносный сосуд, гнойные или гнойно–некротические процессы, лепрозная и актиномикозная инфекция и др. (Овдиенко Н.П., Найманов А.Х., Нуратипов Р.А., 1995).

О зависимости уровня чувствительности организма к туберкулину и активности туберкулезного процесса у крупного рогатого скота нет единодушного мнения. Ряд исследователей (Ткаченко А.А., 2000; Тупота С.Г.,

2010) отмечают прямую зависимость между интенсивностью внутрикожных туберкулиновых проб и тяжестью туберкулезного процесса, другие (Урбан В.П., Данко Ю.Ю., 1983) считают, что по интенсивности внутрикожных туберкулиновых проб нельзя судить об активности туберкулезного процесса.

Ряд ученных (Вишневский Б.И., Нарвская О.В., Васильева С.Н.,2002) показали, что интенсивность туберкулиновых реакций усиливается с нарастанием туберкулезного процесса, а затем резко снижается, хотя туберкулез продолжает прогрессировать. Большое число исследователей (Авербах М.М., 1976; Шаров А.Н., 1970,1980,1982; Щуревский В.Е., Овдиенко А.М., Кадочкин А.А., Кудяков В.Н, 1984) утверждают, что у крупного рогатого скота реактивность к туберкулину угасает с возрастом, что, вероятней всего, обусловлено возрастанием функциональной активности Т–супрессоров.

По мере изучения разных методов аллергической диагностики и влияния на ее специфичность биотических и абиотических факторов изменились подходы к ее оценке и технологии проведения. В 1925 году была предложена Британской комиссией двойная внутрикожная туберкулиновая проба. Позже (1947), эта же комиссия. доказала что, однократное введение туберкулина, обладает такой же ценностью, что и двукратное. Постепенно данный метод применили в Америки, Африки и Западной Европе. На сегодняшний день двукратная внутрикожная проба не применяется не в одной стране мира. В СССР после доклада Вишневского П.П. в 1926 году предложена двойная внутрикожная проба. Считалось, что данный метод повышает выявляемость больных туберкулезом животных, что дало право авторам рекомендовать повторное введение туберкулина в одном цикле исследований. На сегодняшний день споры о кратности внутрикожного введения идут только в России. Урбан В.П., с соавт.(1974) утверждают что при многократном введении ППД – туберкулина с интервалом 45 дней сокращается число животных, реагирующих на первичное введение туберкулина и увеличивается реагирующих на повторное. При повторном введении туберкулина авторы дополнительно выявили 29–60% больных туберкулезом животных. Однако Найманов А.Х., 1981; Шаров А.Н., 1982, рекомендуют применять однократное введение ППД – туберкулина так как повторное введение является неспецифичным.

Со времени приготовления первого препарата для диагностики туберкулеза предложено было целый ряд туберкулинов. Основные из них – альттуберкулин и очищенный ППД – туберкулин для млекопитающих. Проводя сравнительное изучение ППД и альттуберкулинов для млекопитающих на крупном рогатом скоте большинство исследователей (Овдиенко Н.П., Найманов А.Х., 1996; Овдиенко Н.П., Донченко А.С., 1999) нашли, что ППД – туберкулин более специфичен.

В последние годы исследователями (Евглевский А.А., 2005) был предложен качественно новый туберкулин для диагностики туберкулеза – безальбумозный, активность которого, по мнению автора на 20% превосходит таковую у ППД – туберкулина в пересчете на содержание аллергеноактивных веществ.

Такое обилие противоречивых взглядов на механизм неспецифических реакций и на степень специфичности разных туберкулинов требует проведения дальнейших исследований.

методы диагностики туберкулеза животных

1.3.Лабораторные Бактериологические исследования на туберкулез проводятся, только в том случае если у реагирующих на туберкулин животных отсутствуют туберкулезные изменения в паренхиматозных органах. Используют бактериологический метод для выделения культур микобактерий, определений их видовой принадлежности. Они включают в себя бактериоскопию мазков отпечатков, культуральный и биологические методы (Найманов А.Х., 1989).

Существенным недостатком бактериологического метода является длительность исследований, медленный рост микобактерий (не менее 3 месяцев), большая продолжительность постановки биопробы и низкая эффективность культурального исследования.

1.3.1.Бактериоскопические метод исследования Бактериоскопию проводят в основном из биоматериала, где присутствуют кислотоустойчивые микобактерии. Данный метод иногда используют для прижизненной диагностики туберкулеза (микроскопии молока, бронхиальной и носовой слизи), но в основном он применяется при проведении послеубойных исследований патологоанатомического материала при отсутствии патологоанатомических изменений. Простота исследований мазков– отпечатков, полученных из лимфатических узлов и паренхиматозных органов одно из главных преимуществ данного метода. Поскольку бактериоскопия дает положительные результаты при содержание в 1 мл биоматериала не менее 100 тыс. микобактерий, то большинство авторов данные ограничения метода считают значительными (Донченко Н.А. с соавт., 2004; Иртуганов О.А., 2006;

Скородумов Д.И., 2005).

Данный метод не дает возможности дифференцировать различные виды микобактерий, указывая лишь на их наличие в данном биоматериале.

Существенным недостатком дополнительно является то, что кислотоустойчивостью обладают микроорганизмы рода: Rhodococcus, Nocardia, Legionella (Tsukamura, M., 1978).

Василев В.Н. (1971) указывая на то, что микобактерии окрашиваясь в красный цвет по методике Циль–Нильсена не всегда имеют однородную окраску, так как разные виды микобактерий в своей клеточной оболочке содержат разные количества липидов и миколовых кислот. Колычевым Н.М.

была предложена методика концентрирования микобактерий в (1985) исследуемом материале методом флотации. Более чувствительным считается люминесцентный метод микроскопии, основанный на способности адгезии липидов с флуорохромами при облучении ультрафиолетом. Донченко Н.А., (2004) и Иртугановым О.А., (2006) было отмечено, что микобактерии туберкулеза дают своеобразное свечение и хорошо видны в темном поле.

Следовательно, полученные положительные результаты люминесцентной микроскопии не могут быть основанием для остановки окончательного диагноза на туберкулез и должны быть подтверждены культуральными, биологическими или молекулярно–генетическим методам.

1.3.2.Культуральный метод исследования Данный метод исследования базируется на способности микобактерий рекультивироваться на различных питательных средах. Метод позволяет получить изоляты микобактерий для дальнейшей их идентификации, изучения фенотипических, молекулярно–генетических особенностей. Патогенные микобактерии в большинстве своем содержат малое количество ферментов и веществ стимулирующих их рост и требуют обогащения питательных сред (Донченко А.С. с соавт., 2000; Ерошенко Л.А. с соавт., 2001; Тупота Н.Л., 2010). Репродукция популяций микобактерий происходит в течение 18–24 часов (Ощепков В.Г., Таллер Л.А., 2010). Преимущество культурального метода заключается в том, что он в состоянии на специальных питательных средах выделить микобактерии, как с различным уровнем патогенности, так и совершенно безобидных сапрофитов, данный метод позволяет накопив культуральную массу определить вирулентность, биологические, биохимические свойства микобактерий, наличие миколовых кислот и генетических маркеров (Колычев Н.М., Ощепков В.Г., 2001).

Поскольку в микобактериях происходят очень медленно обменные процессы, что сопровождается естественным медленным ростом на питательных средах, то существуют определенные сложности при использование культурального метода. По данным Драбкиной Р.О. (1963), критерий чувствительности данного метода является нахождение в 1 мл от 20 до 100 микобактерий. Ранее Аликаевой А.П. (1963) и Кузиным А.И. (1978) было предложено для обработки биоматериала перед его посевом использовать 2–4% или 8–10% растворы серной кислоты. Но позднее (Кадочкиным А.М., 1984, Тажгалиевым Н.М., 1987) предположили, что эффективнее использовать серную, соляную и щавелевую кислоты.

Для повышения элективных свойств питательных сред были предложены биологически–активные добавки, по мнению авторов оказывающее достоверное стимулирующие воздействие на рост микобактерий. В мировой практике используется радиометрическая система BAKTEC, для быстрого обнаружения МБ в жидкой питательной среде (Оттен, Т.Ф., Васильева А.В., 2005).

Подытожив выше изложенные данные необходимо отметить, что в ветеринарной фтизиатрии постоянно ведутся исследования, как по совершенствованию методов предпосевной обработки так и созданию высокоэлективных питательных сред для выращивания микобактерий.

1.3.3.Патологоанатомический метод исследования Для патологоанатомической диагностики туберкулеза крупного рогатого скота чаще всего используют лимфатические узлы, где содержаться творожистые некротические желтоватого цвета с содержанием извести уплотненные очажки. Данный метод исследования является основным в большинстве государств мира для первичной диагностики туберкулеза.

Недостатком данного метода является то, что в некоторых случаях патологоанатомические изменения у убитых животных не проявляются вышеперечисленными изменениями, что обусловлено волнообразным течением, как инфекционного, так и патологического процесса. Многие исследователи считают, кровоизлияние в лимфатических узлах началом инфекционного процесса, хотя это довольно полемические утверждения (Ильинская З.Д., 1973; Найманов А.Х., Гулюкин М.И., 2014). Туберкулы имеющие в основном округлую форму светло серо–желтого оттенка плотные на ощупь, с творожистой массой в центре, обизвестленые в большинстве случаев окружены плотной соединительной тканью (Якушева О.В., Суворов B.C., Колоскова Э.Л., 2004). Согласно инструкции по диагностике туберкулеза осмотру подвергают заглоточные, подчелюстные, бронхиальные, средостенные предлопаточные брыжеечные, надвыменные, портальные лимфатические узлы и паренхиматозные органы: легкие, селезенка, печень, плевра, брюшина, кишечник и молочная железа. Туберкулез поражает любые органные и тканевые структуры. При генерализованной форме туберкулеза патологоанатомические изменения наблюдаются в матке, яичниках, кишечнике, костной ткани, коже и подкожной клетчатке.

эпизоотического процесса при туберкулезе

1.4.Характеристика крупного рогатого скота Хотя о туберкулезе известно с давних времен и с момента открытия Робертом Кохом (1882) прошло много времени – туберкулез остается особо опасным и широко распространенным заболеванием. К данному заболеванию восприимчив человек, домашние и дикие животные в т. ч. и птицы.

Борьба с туберкулезом, как и с любой инфекцией должна вестись с помощью выявления источника возбудителя инфекции (Global tuberculosis control, 2008).

Источник возбудителя инфекции – это первичное звено эпизоотической цепи. Зараженный организм в котором происходит размножение, сохранение и накапливание возбудителя, т.

е. больное животное – является источником возбудителя инфекции при туберкулезе. Необходимо учитывать, что не только животные могут переносчиками туберкулеза, но и человек. Так в Московском зоопарке, очень остро стояла проблема заражения приматов, где источником инфекции служил обслуживающий персонал и посетители (Альшинецкий М.В., 2004). Очень часто регистрируют заболевание у диких животных: барсуков, лисиц, львов, гепардов, оленей, бурых медведей. Поэтому в 1996 году международное эпизоотическое бюро, потребовало наблюдать за дикими животными и убивать их при обнаружение заражения в целях сохранения всего вида.

Важную роль помимо источника возбудителя инфекции играет, передача инфекции от больного животного к здоровому, т.е. механизм передачи возбудителя (Яременко Н.А., 2002). Основной путь заражения туберкулезом является аэрогенный и алиментарный. Есть данные, что инфицирование может происходить внутриутробно, через кожу, соски вымени (Кузин А.И., 1978). При заражение у крупного рогатого скота поражаются лимфатические узлы, кишечник. Инкубационный период длится от нескольких месяцев до года, это в первую очередь зависит от физиологического состояния организма, его содержания и кормления. Так как при туберкулезе локализация М.bovis происходит во всем организме, то и выделение возбудителя происходит множественно (с мокротой при кашле, фекалии, молоко). Объекты внешней среды служат лишь факторами передачи инфекции, так как не могут быть средой обитаний микобактерий. Хотя в тоже время при выделение их из организма больного животного сохраняется их вирулентность и жизнеспособность: в навозе – до 7 месяцев; в трупах – до года; в почве – более двух лет; в мясе – до года (Кузин А.И., 1992). Их устойчивость к воздействию различных физических и химических факторов, объясняется строением клеточной стенки и высокого содержания в ней липидов и восков. Поэтому контаминированные объекты внешней среды–воздух, почва, вода, корма и продукты животноводства играют важную роль в возникновении новых очагов туберкулеза.

Особое значение в распространении туберкулеза имеет месторасположение больных животных. Некоторыми учеными (Деканосидзе Т.В., 1989; Дудницкий И.А. с соавт., 1989) удалось выделить из старых кормушек микобактерии с утраченной вирулентностью, но при наличии восприимчивых животных и определенных условиях эта инфекция могла проявиться снова. Таким образом, повторное возникновение эпизоотического процесса может быть обусловлено как присутствием латентных микобактерионосителей, так и объектов внешней среды, контаминированных МБТ (Смолянинов Ю.И., 1994; Солодова И.В., 2011). Говоря об атипичных микобактериях, то они свободно размножаются в окружающей среде (почве, воде). Атипичные микобактерии выделяют из почвы лугов, пастбищ, скотоводческих угодий, проб соломы, силоса, сена и сенажа, комбикорма, с овощей из проб торфа, деревьев, а также водоемов, колодцев и водопроводной воды.

При определенных условиях атипичные микобактерии, попадая в организм животных могут приживаться в нем, вызывая сенсибилизацию к туберкулину. Это объясняется антигенным родством их с возбудителем туберкулеза, тем самым давая перекрестную реакцию с туберкулином. Что подтверждается выделением их из патматериала убитых животных, реагирующих на туберкулин (Тупота С.Г., 2010; Шаров А.Н., 2002). Таким образом, в естественных условиях – очень распространенным явлением бывает сенсибилизация крупного рогатого скота атипичными микобактериями (Щуревский В.Е. с соавт., 1984). В некоторых случаях некоторые виды атипичных микобактерий могут вызвать классические туберкулезные поражения (MAIS).

Учитывая большую устойчивость микобактерий туберкулеза к воздействию различных физических, химических факторов и длительную жизнеспособность в различных объектах окружающей среды, то факторы передачи представляющие угрозу возникновения новых случаев вспышек требуют особого внимания при разрыве эпизоотической цепи.

В борьбе с туберкулезом благодаря оздоровительным противотуберкулезным мероприятиям достигнуты большие успехи. Широкое распространение туберкулезной инфекции среди крупного рогатого скота наблюдалось в первые десятилетия ХХ века, когда в большинстве стран Западной Европы было обнаружено до 90% неблагополучных хозяйств, а пораженность животных в них достигала более 70% (Legosi L., 1959).

Так в годы благодаря проведению масштабных 50–60 противотуберкулезных мероприятий количество неблагополучных пунктов снизилось до 50%. К 1984 году количество стран, свободных от туберкулеза увеличилось до 25%. В 1985 году не регистрировали случаев заболевания животных туберкулезом в 35 странах, а в 1987 году в 55 странах. В некоторых случаях оздоровление неблагополучных по заболеванию туберкулезом хозяйств происходило от 40 до 80 лет(Овдиенко Н.П., Найманов А.Х., Солодова И.В., 2004). Но после оздоровления поголовья крупного рогатого скота в некоторых странах заболевания животных туберкулезом возникало повторно (Овдиенко Н.П., Ведерников В.А., Найманов А.Х., Пыталев П.Н., 1990). Причиной этому были присутствие в стадах 1–3% больных животных, которые оставались в состоянии анергии, а также инфицированные дикие животные.



Pages:   || 2 | 3 | 4 | 5 |

Похожие работы:

«Лёвкина Ксения Викторовна Влияние сроков, норм высева и удобрений на урожайность и качество зерна озимой твердой пшеницы в подзоне светло-каштановых почв Волгоградской области Специальность: 06.01.01 – общее земледелие, растениеводство Диссертация на соискание учёной степени кандидата сельскохозяйственных наук Научный...»

«ПОПОВ ВИКТОР СЕРГЕЕВИЧ ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ИССЛЕДОВАНИЙ СРЕДСТВ И СПОСОБОВ ИММУНОМЕТАБОЛИЧЕСКОЙ КОРРЕКЦИИ У СВИНЕЙ 06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук Научный консультант: доктор...»

«ПОЛУЭКТОВА ЕКАТЕРИНА ВИКТОРОВНА ФИТОТОКСИЧЕСКИЕ МЕТАБОЛИТЫ ГРИБА PARAPHOMA SP. ВИЗР 1.46 И ПЕРСПЕКТИВЫ ИХ ПРАКТИЧЕСКОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ Шифр и наименование специальности: 03.02.12 – микология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: Берестецкий А.О. кандидат биологических наук Санкт-Петербург...»

«Артеменков Алексей Александрович КОНЦЕПЦИЯ ОПТИМИЗАЦИИ ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ И ПОВЫШЕНИЯ АДАПТАЦИОННЫХ ВОЗМОЖНОСТЕЙ ЧЕЛОВЕКА 03.03.01 – Физиология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант: доктор биологических наук, профессор Брук...»

«ПОЕДИНОК НАТАЛЬЯ ЛЕОНИДОВНА УДК 602.3:582.282/284:57.086.83]:[681.7.069.24+577.34 БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ИНТЕНСИФИКАЦИИ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ СЪЕДОБНЫХ И ЛЕКАРСТВЕННЫХ МАКРОМИЦЕТОВ С ПОМОЩЬЮ СВЕТА НИЗКОЙ ИНТЕНСИВНОСТИ 03.00.20 – биотехнология Диссертация на соискание научной степени доктора биологических наук Научный консультант Дудка Ирина...»

«Дандал Али Шебли ПАТОГЕНИТЕЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО БРОНХИТА КУР 06.02.02 «ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология» Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных...»

«Шумилова Анна Алексеевна ПОТЕНЦИАЛ БИОРАЗРУШАЕМЫХ ПОЛИГИДРОКСИАЛКАНОАТОВ В КАЧЕСТВЕ КОСТНОПЛАСТИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ Специальность 03.01.06 – биотехнология (в том числе бионанотехнологии) ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук Шишацкая Екатерина Игоревна Красноярск...»

«ЖУРАВЛЕВА МАРИЯ СПАРТАКОВНА Количественная характеристика показателей иммунного ответа у кур на различные типы антигенов 06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Научный руководитель:...»

«Кошелева Оксана Владимировна НАЕЗДНИКИ СЕМЕЙСТВА EULOPHIDAE (HYMENOPTERA, CHALCIDOIDEA) СТАВРОПОЛЬСКОГО КРАЯ СО СПЕЦИАЛЬНЫМ ОБСУЖДЕНИЕМ ПОДСЕМЕЙСТВА TETRASTICHINAE 03.02.05 – энтомология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, С. А. Белокобыльский Санкт-Петербург...»

«_ ТЕМИРОВ Николай Николаевич КОРРЕКЦИЯ АФАКИИ РАЗЛИЧНОГО ГЕНЕЗА МУЛЬТИФОКАЛЬНЫМИ ИНТРАОКУЛЯРНЫМИ ЛИНЗАМИ С АСИММЕТРИЧНОЙ РОТАЦИОННОЙ ОПТИКОЙ Специальность 14.01.07 – «Глазные болезни» ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор медицинских...»

«Радугина Елена Александровна РЕГУЛЯЦИЯ МОРФОГЕНЕЗА РЕГЕНЕРИРУЮЩЕГО ХВОСТА ТРИТОНА В НОРМЕ И В УСЛОВИЯХ ИЗМЕНЕННОЙ ГРАВИТАЦИОННОЙ НАГРУЗКИ 03.03.05 – биология развития, эмбриология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: Доктор биологических наук Э.Н. Григорян Москва – 2015 Оглавление Введение Обзор литературы 1 Регенерация...»

«БРИТАНОВ Николай Григорьевич ГИГИЕНИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПЕРЕПРОФИЛИРОВАНИЯ ИЛИ ЛИКВИДАЦИИ ОБЪЕКТОВ ПО ХРАНЕНИЮ И УНИЧТОЖЕНИЮ ХИМИЧЕСКОГО ОРУЖИЯ 14.02.01 Гигиена Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор...»

«Черкасова Анна Владимировна НОВЫЕ КАРОТИНСОДЕРЖАЩИЕ БАД: ПОЛУЧЕНИЕ, СВОЙСТВА И ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ОБОГАЩЕНИЯ МОЛОЧНЫХ ПРОДУКТОВ Специальность: 05.18.07– Биотехнология пищевых продуктов и биологических активных веществ Диссертация на соискание ученой степени кандидата технических наук Научный руководитель: доктор технических наук,...»

«Абдуллоев Хушбахт Сатторович ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО БРОНХИТА КУР ГЕНОТИПА QX 06.02.02 «ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология» Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Макаров Владимир Владимирович...»

«Сафранкова Екатерина Алексеевна КОМПЛЕКСНАЯ ЛИХЕНОИНДИКАЦИЯ ОБЩЕГО СОСТОЯНИЯ АТМОСФЕРЫ УРБОЭКОСИСТЕМ Специальность 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«Головань Екатерина Викторовна Ресурсы декоративных растений для озеленения внутриквартальных территорий (на примере г. Владивостока) 03.02.14 – биологические ресурсы Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: д.б.н., доцент О.В. Храпко Владивосток — Оглавление Введение Глава 1. Современные подходы...»

«СЕТДЕКОВ РИНАТ АБДУЛХАКОВИЧ РАЗРАБОТКА НОВЫХ СРЕДСТВ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЭШЕРИХИОЗОВ ТЕЛЯТ И ПОРОСЯТ 06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология Диссертация на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук Научный консультант: доктор ветеринарных наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ и РТ Юсупов...»

«Палаткин Илья Владимирович Подготовка студентов вуза к здоровьесберегающей деятельности 13.00.01 общая педагогика, история педагогики и образования Диссертация на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Научные руководители: доктор биологических наук, профессор,...»

«Ядрихинская Варвара Константиновна ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ОСТРЫХ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ В Г. ЯКУТСКЕ И РЕСПУБЛИКЕ САХА (ЯКУТИЯ) 03.02.08 – экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель кандидат биологических наук, доцент М.В. Щелчкова Якутск 2015...»

«Трубилин Александр Владимирович СРАВНИТЕЛЬНАЯ КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА КАПСУЛОРЕКСИСА ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ФАКОЭМУЛЬСИФИКАЦИИ КАТАРАКТЫ НА ОСНОВЕ ФЕМТОЛАЗЕРНОЙ И МЕХАНИЧЕСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ 14.01.07 – глазные болезни Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.