WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 | 6 |   ...   | 8 |

«СИНТЕЗ И ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВЕТЕРИНАРНЫХ ПРОТИВОПАРАЗИТАРНЫХ И АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ В РЯДУ АЗОТСОДЕРЖАЩИХ ГЕТЕРОЦИКЛОВ ...»

-- [ Страница 4 ] --

2.3. Методы оценки инсектоакарицидной, протистоцидной и антибактериальной активности синтезированных соединений Для исследования больших массивов соединений на тот или иной вид биологической активности необходима удобная и надежная методика. При изучении инсектоакарицидной активности нами предпринята попытка приспособить для этих целей один из наиболее доступных тест-объектов, а, именно, взрослых особей Musca domestica и Sarcophaga carnaria.

Методика заключалась в следующем: в садки помещали 20-30 особей и через отверстие, закрытое сеткой, опрыскивали насекомых приготовленными растворами или эмульсиями изучаемых веществ. Однако по ряду причин от этой методики пришлось отказаться: низкая воспроизводимость результатов, очень высокая чувствительность насекомых к растворителям, трудность приготовления суспензий для опрыскивания, высокая трудоёмкость.

Удобная, быстрая и надёжная методика разработана нами при использовании в качестве тест-объекта личинок Leptinotarsa decemlineata (колорадского жука) (Л.Н Фетисов, А.А. Зубенко, М.А., Должиков 2005; Л.Н Фетисов, А.А. Зубенко, И.В. Зубенко, 2007) В качестве растворителей для препаратов использовали ксилол, толуол, сольвент нефтяной, диметилформамид и воду. Концентрация испытуемых веществ в рабочих растворах или в эмульсиях составляла 0,2%. В качестве эмульгаторов при приготовлении концентратов-эмульсий использовали неонол, геронол, ОП-7 и другие. Объем расхода – 30,0 мл готового раствора или эмульсии на один куст с заселением не менее 20 личинок. Опрыскиванием обрабатывали кусты, заселенные личинками второго-третьего возрастов (растущие, активно питающиеся). Наблюдали 24 часа (в отдельных случаях - до 3-х суток). В контролях кусты опрыскивали растворами или эмульсиями без испытуемых веществ. Близкие по строению вещества испытывали вначале в виде смесей по 3-5 веществ в одной пробирке при стандартной концентрации 0,20 % по каждому веществу. В случае обнаружения инсектицидной активности смеси, испытывали отдельные соединения из этой смеси и находили активные вещества. Соединения, обнаружившие 100,0 % инсектицидную эффективность (ИЭ) в концентрации 0,20 %, испытывали в более низких концентрациях по методике «Определения минимально эффективной концентрации инсектицидных препаратов» (Поляков В.А.,1990). В наших исследованиях определяли активность веществ в 0,10%; 0,05%; 0,02%; 0,01% и 0,005% концентрациях.

Испытания инсектицидных свойств активно действующего вещества препарата ДИХИМ-1 в сравнении с известными препаратами проводили как на личинках Leptinotarsa decemlineata, так и на Ctenocephalides canis (на собаках и кошках). Для этого готовили растворы препарата с убывающей концентрацией, начиная с 0,01% и заканчивая 0,0001%. Препаратами сравнения были имидаклоприд, фипронил и дельтаметрин (бутокс). Использовали не менее 5 собак и 3 кошек на обработку раствором определённой концентрации.

Акарицидную активность определяли на клещах Varroa jacobsoni. Этот клещ виден невооруженным глазом, а при небольшом увеличении можно легко наблюдать его движения. Взрослые особи клеща могут находиться во внешней среде (вне хозяина) более суток, сохраняя при этом жизнеспособность и активность. Скрининг акарицидных веществ на данном виде клеща вели по следующей схеме. Клещей накапливали в пчелосемьях в течение всего периода медосбора, не обрабатывая пчёл летом. В начале осени (сентябрь) собиралось достаточное количество клещей, которые просеивались в поддон улья через сетчатое дно. Перед постановкой опыта с вечера чистили поддоны ульев, а утром недавно осыпавшихся активных клещей помещали в чашки Петри по 10

– 30 особей на фильтровальную бумагу, пропитанную испытуемым акарицидом заданной концентрации (диапазон испытуемых концентраций был от 0,20 % до 0,005%). Активность клещей определяли по их самостоятельному прикреплению к кончику препаровальной иглы. Чашки с клещами помещали в термостат с влажностью около 75,0 % при температуре 25,0 – 30,0 С. Оценка активности испытуемых веществ производилась по числу погибших и выживших клещей через 2,0; 4,0; 6,0; и 12,0 часов. В каждой серии испытаний ставились положительные (с дельтаметрином) и отрицательные (с дистиллированной водой) контроли (по 2 – 3 чашки), а также отдельно с растворителями и эмульгаторами, которые использовались при приготовлении концентратов эмульсий испытуемых веществ.

Акарицидную эффективность новых веществ рассчитывали по методике, описанной в кн.: “Ветеринарная энтомология и арахнология” (Поляков В.А.,1990).

Протистоцидную активность изучали по разработанной нами методике (Л.Н Фетисов, А.А. Зубенко, А.Н. Бодряков, 2012; Л.Н Фетисов, А.А. Зубенко, А.Н. Бодряков, М.А. Бодрякова, 2012; А.А. Зубенко, Л.Н Фетисов, А.Н.

Бодряков, 2012) на культурах: Tetrachimena piriformis, Paramecia caudatum, и других на средах, описанных в кн. «Методы Colpoda steinii экспериментальной химиотерапии», М., «Медицина», 1971, с.24-26).

Протистоцидную активность изучали методом серийных разведений. Наиболее удобным, доступным и «объективным» тест-объектом оказались колподы вида С. steinii. Работу выполняли в микропланшетах, например, для постановки ИФА. В качестве среды для переживания простейших использовали смесь кипяченой водопроводной воды и стерильной дистиллированной воды в равных объемах. Первоначальное разведение вещества готовили на дистиллированной воде. Серийные разведения готовили следующим образом:

Раствор №1. 5,0 мг вещества + 50,0 мкл 70,0 % водного раствора ДМСО + 5 мл дистиллированной при перемешивании стеклянной палочкой – учитываемая концентрация – 1000,0 мкг/мл.

Растворы №2-12 – в лунки №№ 2-12 автоматической восьмиканальной пипеткой вносят по 150 мкл воды (смесь кипяченой водопроводной и дистиллированной воды), затем во вторую лунку приливают 150 мкл раствора №1 и после перемешивания переносят 150,0 мкл в третью лунку и так далее до конца ряда, из 12 лунки после перемешивания удаляли 150,0 мкл. В лунку №1 вносят 150,0 мкл раствора №1.

Во все лунки с подготовленными разведениями веществ вносили по 30,0 мкл взвеси простейших трех суточного возраста. Взвесь простейших готовят таким образом, чтобы в каждом поле зрения при микроскопии на малом увеличении насчитывалось 10-15 активных особей. После внесения простейших планшет накрывают крышкой и оставляют при комнатной температуре (20,0— о

С) на 18,0-20,0 часов. Для учета результатов автоматической 22,0 микропипеткой с разовым наконечником набирали после перемешивания из последней лунки ряда 30мкл содержимого, наносили этот объем на чистое предметное стекло и просматривали под микроскопом на малом увеличении (1015). Отмечали наличие или отсутствие живых простейших. Просмотр производили справа налево. Первая лунка, где нет ни одной живой особи, считается содержащей минимальную протистоцидную концентрацию изучаемого вещества. Ставили контроли: контроль среды – вода для переживания + простейшие (5 лунок); контроль растворителя (используется при изучении активности водонерастворимых веществ) – 50,0 мкл ДМСО 70,0 % + 5,0 мл дистиллированной воды и далее серийные разведения как для вещества, затем в лунки вносили по 30,0 мкл взвеси простейших. Таким образом, в одном планшете (8 х 12 лунок) проводили испытания 8 веществ.

Антимикробную активность новых соединений и препаратов сравнения определяли in vitro по методике серийных разведений в жидкой питательной среде, описанной в кн.: «Методы экспериментальной химиотерапии», М., Медицина, 1971.- С.100-105. Бактериостатическую активность каждого вещества определяли в ряду из 10 разведений от 500,0 мкг/мл до 0,98 мкг/мл.

Учитываемая бактериальная нагрузка составляла 250 тысяч микробных клеток в 1,0 мл. Каждое определение проводили в двух параллельных рядах.

Антимикробную активность 1,3-Дизамещенных 2-иминобензимидазолина определяли, помимо того, на плотной питательной среде Luria-Bertani (LB).

Исходные суспензии, содержащие 109 микробных клеток (м.кл.) в 1,0 мл забуференного физиологического раствора (ЗФР), готовили по оптическому стандарту плотности (Государственный научно-исследовательский институт стандартизации и контроля медицинских и биологических препаратов им. А.Н.

Тарасевича) из суточной агаровой культуры. Бактериальные суспензии разводили в ЗФР до концентрации 107 м.кл. в 1,0 мл. Для тестирования антимикробной активности изучаемых веществ использовали классический метод двукратных серийных разведений в плотной питательной среде LB, к

–  –  –

имидазола Производные пиридина Соединения других классов Обозначения: «Реф.» - референтный штамм; «Пол.» - полевой изолят

2.4. Методы оценки токсичности полученных соединений Фармакологическое и токсикологическое исследование массивов новых соединений проводили в соответствии с практическим руководством «Методы экспериментальной химиотерапии» (Фармакологическое и токсикологическое изучение химиотерапевтических препаратов.- М.Д.Машковский.- С. 524 - 539)

– М., 1971; «Методическими указаниями по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве» (1991), а также согласно «Руководству по экспериметальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» под ред. Р.У. Хабриева, (2005).

Острую токсичность новых соединений изучали на лабораторных крысах по следующей методике: в предварительном опыте на малом количестве лабораторных животных (по 3 крысы в группе) устанавливали максимально переносимую дозу (МПД), и дозу, вызывающую 100,0% гибель животных (ЛД100). Затем в основном опыте каждую из 5-7 доз препарата, лежащую в интервале между МПД и ЛД100, вводили 5 лабораторным крысам. Расчет ЛД50 производили по методу Кербера. В предварительном и основном опытах соединения вводили внутрижелудочно с помощью зонда в виде водных растворов или суспензии в изотоническом растворе хлорида натрия (0,85 % р-р по NaCl). Срок наблюдения – 14 дней. Определяли также острую токсичность путём купания крыс в растворе препарата определённой концентрации с полным погружением (экспозиция 15 секунд). Применяли растворы 0,1%; 0,5%;

1,0% и 2,0% концентрации.

Определение токсических свойств АДВ (2-(4,5-дихлор-1имидазолилметил)-2-(нитровинил)-имидазолидина) провели на лабораторных крысах массой 150,0-180,0 г. Препарат вводили внутрибрюшинно в виде тонкой суспензии в изотоническом растворе (0,85%) хлорида натрия в дозах 500,0;

250,0; 125,0; 62,50 и 30,0 мг/кг массы тела. Объем вводимой суспензии составлял от 0,25 до 1,0 мл на животное.

Хроническую (подострую) токсичность новых веществ, (при многократном введении) изучали с учетом «Требований к документации, направляемой в Ветеринарный фармакологический совет» (Утверждено ГУВ МСХ СССР 18 мая 1973 года) по следующей методике: 24 лабораторных крысы массой по 150 граммов разделяли на две группы – опытную и контрольную.

Животным опытной группы (6 самок и 6 самцов) ежедневно вводили в желудок с помощью зонда изучаемое соединение в дозе близкой к расчетной терапевтической дозе. После окончания введения препарата (11-й день опыта), а также через 5 дней после окончания введения (16-й день опыта) у части животных (6 голов – 3 самки и 3 самца) брали материал для гематологических и гистологических исследований. Кусочки внутренних органов (сердце, печень, почки, легкие, желудок, толстый и тонкий отделы кишечника) фиксировали в растворе нейтрального формалина, проводили через спирты 10%-м повышающейся концентрации, готовили парафиновые срезы, которые окрашивали гематоксилин-эозином.

При гематологических исследованиях определяли количество эритроцитов и гемоглобина, цветной показатель, количество лейкоцитов и их состав (лейкоцитарная формула); в сыворотке крови – содержание фосфора (по С.А.Ивановскому), кальция (комплексонометрическим методом с мурексидом), общего белка (рефрактометрическим методом). Биохимические исследования также проводили на автоматическом анализаторе EOS Bravo forte (Hospitex Diagnostics Italia), гематологические исследования – на автоматическом анализаторе Hema Screen 18 (Hospitex Diagnostcs Italia).

2.5. Методы изучения терапевтической эффективности препарата ДИХИМ-1 при арахноэнтомозах животных.

Саркоптоз свиней. Опыт №1 Место проведения испытаний – экспериментальная база ГНУ СКЗНИВИ Россельхозакадемии.

Сроки испытаний - февраль-апрель 2009г.

Количество животных – 53 головы.

Возраст свиней - 4-6 месяцев.

Диагноз: При осмотре установили, что животные испытывают сильный зуд и постоянное беспокойство. В начальной стадии заболевания очаги поражения кожи обнаружили вокруг глаз, на щеках и ушах. В тяжелых случаях (15 голов) наблюдали утолщение кожи, складчатость, трещины, выпадение щетины. У всех животных находили на коже узелки и корки. Диагноз подтверждали микроскопией соскобов кожи с двух-трех участков (из периферии очага поражения) от каждого животного. Во всех случаях обнаруживали клещей Sarcoptes suis.

Ход испытаний:

Обработку свиней проводили путем двукратного опрыскивания 0,05% водным раствором препарата ДИХИМ-1, содержащего в качестве активно действующего вещества (АДВ) 2-(4,5-Дихлоримидазолилметил)-2нитровинил)-имидазолидин, а в качестве вспомогательных веществ диметилсульфоксид (ДМСО) и эмульгатор ОП-7 при следующем соотношении компонентов в маточном растворе, вес.% :

АДВ - 10 ДМСО - 75 ОП-7 - 5 Вода - 10.

Рабочий раствор готовили непосредственно перед обработкой: 100 мл маточного раствора растворяли в 20,0 литрах воды. Интервал между обработками составлял 10 дней.

Норма расхода – 15,0 мл рабочего раствора препарата на 1 кг массы тела животных.

Группа из 15 свиней служила контролем, где животных обрабатывали препаратом неоцидол согласно инструкции.

Чистым контролем служила группа из 10 свиней, где лечение не проводили.

Опыт№2 Место проведения испытаний – экспериментальная база ГНУ СКЗНИВИ Россельхозакадемии.

Сроки испытаний - февраль-апрель 2010г.

Количество животных – 128 голов.

Возраст свиней - 4-6 месяцев.

Диагноз: При осмотре установили, что животные испытывают сильный зуд и постоянное беспокойство. В начальной стадии заболевания очаги поражения кожи обнаружили вокруг глаз, на щеках и ушах. В тяжелых случаях (15 голов) наблюдали утолщение кожи, складчатость, трещины, выпадение щетины. У всех животных находили на коже узелки и корки. Диагноз подтверждали микроскопией соскобов кожи с двух-трех участков (из периферии очага поражения) от каждого животного. Во всех случаях обнаруживали клещей Sarcoptes suis.

Ход испытаний:

Обработку свиней проводили путем двукратного опрыскивания 0,05% водным раствором препарата ДИХИМ-1, содержащего в качестве активно действующего вещества (АДВ) 2-(4,5-Дихлоримидазолилметил)-2нитровинил)-имидазолидин, а в качестве вспомогательных веществ диметилсульфоксид (ДМСО) и эмульгатор ОП-7 при следующем соотношении компонентов в маточном растворе, вес.% :

АДВ - 10,0 ДМСО - 75,0 ОП-7 - 5,0 Вода - 10,0.

Рабочий раствор готовили непосредственно перед обработкой: 100,0 мл маточного раствора растворяли в 20,0 литрах воды. Интервал между обработками составлял 10 дней.

Норма расхода – 15,0 мл рабочего раствора препарата на 1 кг массы тела животных.

Группа из 15 свиней служила контролем, где животных обрабатывали препаратом бутокс согласно инструкции.

Чистым контролем служила группа из 10 свиней.

Опыт №3.

Место проведения испытаний – ОАО «Батайское», Азовский р-н, Ростовская обл.

Сроки испытаний – февраль-апрель 2010г.

Опытная группа – 50 свиней 4-6 мес. возраста, контрольная группа – 20 свиней 4-6 мес. возраста.

Диагноз: установили по клиническим признакам и результатам микроскопии соскобов кожи с мест поражения. У всех обследованных животных обнаружили клещей Sarcoptes suis.

Ход испытаний:

Обработку свиней опытной группы проводили путем двукратного опрыскивания 0,05% водным раствором препарата ДИХИМ-1, содержащего в качестве АДВ 2-(4,5-Дихлоримидазолилметил)-2-(нитровинил)-имидазолидин.

Рабочий раствор готовили перед обработкой: 100,0 мл маточного раствора растворяли в 20,0 литрах воды. Интервал между обработками составлял 10 дней. Норма расхода – 15,0 мл рабочего раствора препарата на 1,0 кг массы тела животных. В контрольной группе свиней обрабатывали опрыскиванием раствором бутокса согласно инструкции, двукратно с интервалом 10 дней.

Сифункулятоз свиней. Опыт№1 Место проведения испытаний – пригородные хозяйства г. Новочеркасска.

Сроки испытаний - февраль-апрель 2009г.

Количество животных – 46 свиней разных возрастов.

Диагноз: Диагноз установили по известным методам паразитологии. На животных находили в большом количестве вшей Haematopinus suis.

Ход испытаний:

Пораженных животных обрабатывали двукратно опрыскиванием раствором препарата 0,005 % концентрации по АДВ. Для приготовления рабочего раствора 10 мл маточного раствора препарата ДИХИМ -1 растворяли в 20,0 л воды. Норма расхода составляла 7,0-10,0 мл рабочего раствора на 1,0 кг массы тела животных. Интервал между обработками составлял 10 дней.

Препаратом сравнения был 0,005 % раствор бутокса. Группу свиней из 36 голов обработали опрыскиванием, дважды с интервалом в 10 дней. У части обработанных ДИХИМ-1 свиней (10 голов) на второй день после второй обработки была взята кровь для цитологических и биохимических исследований (контрольные образцы крови взяты от 10 не обработанных препаратами свиней).

Опыт №2 Место проведения испытаний – пригородные хозяйства г. Новочеркасска.

Сроки испытаний - февраль-апрель 2010г.

Количество животных – 96 свиней разных возрастов.

Диагноз: Диагноз установили по известным методам паразитологии. На животных находили в большом количестве вшей Haematopinus suis.

Ход испытаний:

Пораженных животных обрабатывали двукратно опрыскиванием раствором препарата 0,005 % концентрации по АДВ. Для приготовления рабочего раствора 10 мл маточного раствора препарата ДИХИМ -1 растворяли в 20,0 л воды. Норма расхода составляла 7,0-10,0 мл рабочего раствора на 1 кг массы тела животных. Интервал между обработками составлял 10 дней.

Препаратом сравнения был 0,005 % раствор бутокса. Группу свиней из 36 голов обработали опрыскиванием, дважды с интервалом в 10 дней. Через 1 сутки после второй обработки у свиней взяли пробы крови (от 10 свиней каждой группы) для гематологических и биохимических исследований.

Псороптоз кроликов Опыт №1.

Сроки испытаний – январь – апрель 2010г.

Место проведения испытаний - экспериментальная база ГНУ СКЗНИВИ Россельхозакадемии, виварий.

Количество животных - 60 кроликов разных возрастов

Диагноз:

При осмотре установлено, что животные беспокоились, трясли головой, пытались чесать ушные раковины. В слуховых проходах обнаруживали очаги воспаления. У некоторых животных отмечали гиперемию кожи и отечность ушных раковин. На внутренней поверхности ушных раковин находили корки.

У 30,0 % больных животных в слуховых проходах образовались пробки из экссудата и слущенного эпителия. У больных кроликов с мест поражения брали соскобы кожи и просматривали под малым увеличением. У всех обследованных животных находили в соскобах большое количество клещей Psoroptes cuniculi:

в соскобах площадью 0,25см2 обнаруживали 15-30 клещей.

Ход испытаний:

Состав препарата (маточный раствор), вес. % :

Активно действующее вещество (АДВ)–2-(4,5-Дихлоримидазолилметил)нитровинил)-имидазолидин - 10,0 Диметилсульфоксид (ДМСО) – 75,0 Эмульгатор ОП-7 - 5,0 Вода - 10,0 Приготовление рабочего 2,50 % раствора препарата ДИХИМ-1: 10,0 мл маточного раствора смешивали с 30,0 мл дистиллированной воды. В слуховой проход и на кожу ушных раковин наносили 2,50 % раствор ДИХИМ-1 по 0,50мл в каждое ухо, уши слегка массировали. Через 7 дней обработку повторяли аналогичным образом.

В качестве препарата сравнения использовали 2,0 % эмульсию креолина на 10 больных псороптозом кроликах. Этих животных обрабатывали также двукратно с интервалом 7 дней. За животными обеих групп вели наблюдение в течение 30 дней после второй обработки.

Опыт №2 Сроки испытаний – февраль – май 2011г.

Место проведения испытаний - экспериментальная база ГНУ СКЗНИВИ Россельхозакадемии, виварий.

Количество животных - 150 кроликов разных возрастов

Диагноз:

При осмотре установлено, что животные беспокоились, трясли головой, пытались чесать ушные раковины. В слуховых проходах обнаруживали очаги воспаления. У некоторых животных отмечали гиперемию кожи и отечность ушных раковин. На внутренней поверхности ушных раковин находили корки.

У 30,0 % больных животных в слуховых проходах образовались пробки из экссудата и слущенного эпителия. У больных кроликов с мест поражения брали соскобы кожи и просматривали под малым увеличением. У всех обследованных животных находили в соскобах большое количество клещей Psoroptes cuniculi:

в соскобах площадью 0,25 см2 обнаруживали 15-30 клещей.

Ход испытаний:

Состав препарата (маточный раствор), вес. % :

Активно действующее вещество (АДВ)–2-(4,5-Дихлоримидазолилметил)нитровинил)-имидазолидин - 10 Диметилсульфоксид (ДМСО) – 75 Эмульгатор ОП-7 -5 Вода - 10 Приготовление рабочего 2,50 % раствора препарата ДИХИМ-1: 10,0 мл маточного раствора смешивали с 30,0 мл дистиллированной воды. В слуховой проход и на кожу ушных раковин наносили 2,50 % раствор ДИХИМ-1 по 0,50мл в каждое ухо, уши слегка массировали. Через 7 дней обработку повторяли аналогичным образом.

В качестве препарата сравнения использовали 2,0 % эмульсию креолина на 10 больных псороптозом кроликах. Этих животных обрабатывали также двукратно с интервалом 7 дней. За животными обеих групп вели наблюдение в течение 30 дней после второй обработки.

Ктеноцефалидоз собак и кошек. Опыты №1-2 Место проведения испытаний – экспериментальная база ГНУ СКЗНИВИ Росссльхозакадемии.

Сроки испытаний - июнь-октябрь 2009г, июнь-июль 2010г.

Количество животных – 64 собаки, 36 кошек.

Цель испытаний: установить минимальные эффективные концентрации АДВ в препарате ДИХИМ-1.

Диагноз: устанавливали по известным методикам.

Ход испытаний:

Изучали инсектицидную активность препарата ДИХИМ-1, содержащего в качестве активно действующего вещества (АДВ) 2-(4,5Дихлоримидазолилметил)-2-(нитровинил)-имидазолидин, а в качестве вспомогательных веществ диметилсульфоксид (ДМСО) и эмульгатор ОП-7 при следующем соотношении компонентов в маточном растворе, вес. % :

АДВ - 10,0 ДМСО - 75,0 ОП-7 - 5,0 Вода - 10,0.

Рабочие растворы готовили непосредственно перед обработкой, начиная с высокоэффективной концентрации 0,005% по АДВ (как было установлено ранее) и далее ступенчато снижая концентрацию АДВ: 0,004%, 0,003%, 0,002%, 0,001% и 0,0005%.

Готовили также рабочие растворы бутокса с аналогичными концентрациями по АДВ (дельтаметрину).

Затем больных животных опрыскивали рабочими растворами препаратов из расчета 7,0-10,0 мл на 1,0 кг массы тела. Опрыскивали не менее 5 собак и 3 кошек раствором определенной концентрации. Эффективность определяли через сутки после обработки, путем визуального осмотра кожного покрова животных на наличие живых блох.

Отодектоз кошек. Опыт №1 Место проведения испытаний – ветеринарная клиника «Доктор Айболит»

г. Ростов-на-Дону.

Сроки испытаний - январь-март 2009г.

Количество животных – 15 кошек.

Ход испытания: При осмотре кошек различных пород разного возраста установили, что животные спонтанно заражены клещами Otodectes cynotes. У кошек отмечали постоянное беспокойство, зуд и расчесы кожи ушных раковин.

Больные животные часто чесали уши, трясли головой. На коже слухового прохода находили язвочки, а в полости среднего и внутреннего уха катаральный экссудат. Диагноз подтверждался микроскопией соскобов кожи с мест поражения. Во всех случаях находили в большом количестве клещей Otodectes cynotes. После очистки слухового прохода рабочую эмульсию препарата (2,50% по АДВ) ватно-марлевым тампоном наносили на поверхность слухового прохода с последующим массажем ушной раковины. На одну обработку расходовали 1,0-2,0 мл препарата. Вторую обработку по той же методике проводили через 7 дней.

2.6. Изучение особенностей фармакокинетики препарата ДИХИМ-1 Сформировали по принципу аналогов две группы белых крыс (опытную и контрольную) по 12 голов в каждой. Масса животных составляла 140-160 граммов. Животные опытной группы были искупаны (экспозиция – 5 минут) в растворе препарата ДИХИМ-1 0,05% концентрации. Животные контрольной группы были искупаны в растворе вспомогательных веществ препарата ДИХИМ-1. Концентрация вспомогательных веществ была эквивалентна таковой в опытной группе. Через 6, 12, 24 и 48 часов часть животных (по 3 головы) убивали и определяли содержание АДВ ДИХИМ-1 в коже, мышцах и печени животных. Метод идентификации – биологический, с использованием личинок колорадского жука 2-3 – дневного возраста, которые погибают при концентрации АДВ 5 мкг/мл. Методика обработки биологического материала:

кожный покров площадью 25 см2 или навеску органа в 1г измельчали, смешивали с 10 мл этанола и перемешивали при 35-400С в течение 30 минут, центрифугировали 10 минут при 3000 об/мин. Надосадочную жидкость отбирали, а из остатка повторно проводили экстракцию при тех же условиях.

Объединённые экстракты упаривали досуха на водяной бане. К остатку прибавляли 0,1 мл дистиллированной воды и тщательно растирали. В полученную смесь помещали 5 личинок колорадского жука 2-3 – дневного возраста. При наличии АДВ препарата ДИХИМ-1 в исследуемом образце гибель личинок наступала в течение 3-5 минут. Двукратно разбавляя экстракт, определяли объём воды V, применение которого даёт активную в отношении личинок смесь и вычисляли количество АДВ в образце биологического материала по формуле:

M = V х 5, где М - количество АДВ в образце в микрограммах.

Например, разбавление экстракта водой в объёме 10 мл даёт активную в отношении личинок смесь, а дальнейшее разбавление приводит к потере активности. Следовательно, в экстракте содержится 10 х 5=50 микрограммов АДВ препарата ДИХИМ-1.

2.7. Методы оценки фармако-токсикологических свойств донорноакцепторных комплексов йода с азотсодержащими гетероциклами Изучение развития резистентности к перйодидам 5,6E.coli диметилбензимидазола, гексаметилентетрамина и 1,2-диметил-5метоксибензимидазола проводили методом пассажей («Методы экспериментальной химиотерапии», М., Медицина.-1971.-С.404-406) при многократных пересевах на бульоне Хоттингера с возрастающими концентрациями препарата: 500,0; 1000,0; 1500,0 и 2000,0 мкг/мл. Очередные пассажи производили через 24,0-48,0 часов. Материалом для каждого последующего пассажа служила культура, давшая рост на среде, содержащей наибольшее количество препарата. Из этой же пробирки (разведения) через каждые 10 пассажей проводили отсев (высев) на скошенный мясопептонный агар. Через сутки полученную культуру тестировали на чувствительность к соответствующему перйодиду с определением бактерицидной активности препарата. В этом эксперименте использовали штамм E.coli O115.

Определение коэффициента кумуляции трёх перйодидов азотсодержащих гетероциклов проводили на 20 лабораторных крысах для каждого препарата (10 самок и 10 самцов) по тесту субхронической токсичности (И.В. Саноцкий «Методы определения токсичности и опасности химических веществ», М., 1970.- С. 107-108). Препарат вводили в желудок с помощью зонда в виде суспензии в 0,20 % растворе агара, 1 раз в день, начальная доза – одна десятая от ЛД50, затем дозу ступенчато повышали каждые 4 дня в 1,5 раза, длительность введения 20 дней. Расчет коэффициента кумуляции (Кк) проводили по формуле: Кк=(ЛД501 х S1) (ЛД50n х Sn), где ЛД 501 и ЛД 50n - cредне смертельные дозы при однократном и n-кратном введении; S1 и Sn - функция угла наклона прямой смертельных доз к оси абсцисс при однократном и nкратном введении.

Изучение влияния перйодидов азотсодержащтх гетероциклов на активность лактоглобулинов по нашей просьбе провели в Ростовском-на-Дону научно-исследовательском институе эпидемиологии, микробиологии и гигиены к.м.н. Соболева С.В. и к.б.н. Минеева Л.Д. Активность противоколипротейного лактоглобулина при совместном применении с перйодидами азотсодержащих гетероциклов изучали в сравнении с активностью нативного препарата лактоглобулина. К 10,0 мл 5,0 % белкового лактоглобулина добавляли 10,0 мг соответствующего перйодида, взвесь прогревали при 37,0о С в течение 3-х часов, периодически встряхивая. В качестве контроля использовали 5,0% белковый раствор лактоглобулина, инкубированный при тех же условиях опыта, без добавления соответствующего перйодида. По окончании инкубации опытные и контрольные образцы препарата лактоглобулина центрифугировали при 1500 об/мин в течение 20,0 минут, отбирали супернатант и определяи общий белок, белковые фракции, количественное содержание основных классов иммуноглобулинов и уровень специфических антител. Общий белок определяли биуретовой реакцией. Фракционный состав препарата определяли методом электро - и иммуноэлектрофореза в агаровом геле. Количественное определение основных классов иммуноглобулинов проводили методом радиальной иммунодифузии в геле, используя монорецепторные сыворотки против иммуноглобулинов молозива коров. Титры антител к вакцинным штаммам E.coli O111 Pr.mirabilis определяли в РПГА с приготовленными эритроцитарными диагностикумами.

Совместимость перйодидов азотсодержащих гетероциклов с известными антибактериальными средствами определяли по двум показателям: по изменению антибактериальной активности и по изменению токсичности соответствующих смесей в сравнении с антибактериальной активностью и токсичностью каждого из компонентов смеси в отдельности. Вначале устанавливали уровень бактерицидной активности препаратов в отдельности, а затем двойных смесей (перйодид + известное средство). Бактерицидную активность определяли методом серийных разведений («Методы экспериментальной химиотерапии», М., Медицина, 1971.-С.104-105).

Совместимыми на данном этапе считали смеси, антимикробная активность которых была не ниже таковой для более активного из компонентов.

Отобранные совместимые смеси вводили внутрижелудочно с помощью зонда 3 лабораторным крысам в максимально переносимой дозе по более токсичному из компонентов. Соотношение компонентов при этом пропорционально их терапевтическим дозам. Объем вводимой смеси – 3,0 мл, растворитель – физиологический раствор (0,85% водный раствор хлорида натрия).

Совместимыми на этом этапе считались смеси, не вызвавшие гибели животных.

Совместимость перйодидов азотсодержащих гетероциклов со средствами регидратации определяли по двум тестам - изменению антибактериальной активности и изменению токсичности смеси для лабораторных крыс в сравнении с соответствующим перйодидом. Изучили сочетания с раствором Рингера, Регидральтаном и ИФР.

Скорость разложения перйодидов 5,6-диметилбензимидазола, 1,2диметил-5-метоксибензимидазола и гексаметилентетрамина в желудочнокишечном тракте определяли по следующей методике: для каждого из трёх изучаемых препаратов формировали 14 групп лабораторных крыс (по 3 крысы в группе) и вводили животным в желудок с помощью зонда соответствующий препарат в дозе 0,25 г/кг массы тела. Затем через определенные промежутки времени после введения (20, 40, 60, 80 и 100 минут, 2; 2,5; 3; 3,5; 4; 5; 6; 7 и 8 часов) трёх животных убивали и содержимое их желудочно-кишечного тракта исследовали йод-крахмальной реакцией на содержание активного йода. При этом отдельно изучали содержимое желудка, тонкого и толстого отделов кишечника.

Поиск оптимальных условий синтеза перйодидов азотсодержащих гетероциклов осуществляли путем варьирования продолжительности синтеза (от 5 до 30 минут), объема растворителя, времени нагревания реакционной массы до начала реакции, температурных условий сушки препарата (от 20,0 до 50,0 оС с интервалом 10 минут). Оптимальным считали параметр, дающий лучший выход и качество продукта (температура плавления не должна была отличаться более чем на 2,0 оС от температуры плавления химически чистого препарата).

Изучение терапевтической эффективности перйодида 2.8.

гексаметилентетрамина и препарата на его основе «Колицид» при колибактериозе телят Опыты проводили в хозяйствах Ростовской области и Краснодарского края.

Препарат «Колицид» готовили по следующей методике: 500г бентонита и 100г уротропина высыпали при перемешивании в 4л воды и оставляли стоять на 4-5 часов. Затем перемешивали до исчезновения пастообразных комков и образования однородной гелеобразной суспензии. К полученной смеси приливали раствор 20г йода и 40г йодистого калия (общий объем жидкости – 100 мл). Доводили объем смеси до 5 литров и интенсивно перемешивали в течение 5 минут. При этом происходит взаимодействие йода с третичным атомом азота уротропина, образуется перйодид уротропина, особенности которого мы описали выше. Препарат применяют при колибактериозе новорожденных телят (энтеральная форма), а также при диареях, осложненных патогенной и условно-патогенной микрофлорой. Полученную смесь хранили в стеклянной, эмалированной или полиэтиленовой посуде не более 5 суток.

Полученный таким образом препарат содержит 50 доз объемом 100 мл каждая.

Препарат может выпускаться производственными ветеринарными лабораториями в виде полуфабриката. Завершающая стадия приготовления «колицида» проводится непосредственно в хозяйствах и на фермах.

Применяемый препарат состоял из следующих компонентов (масс.%):

Перйодид уротропина – 0,6 Бентонит – 10,0 Уротропин – 1,8 Калий йодистый – 0,8 Вода - остальное Диагноз устанавливали на основании клинической картины, особенностей проявления болезни, условий содержания и кормления телят, патологоанатомической картины, результатов лабораторной диагностики, результатов ранее проводимого лечения. Клинический осмотр животных проводили по общепринятой схеме. При первичном осмотре проводили измерение температуры тела, выясняли срок заболевания, определяли тяжесть течения. Лабораторную диагностику колибактериоза телят проводили в Межрайонных ветеринарных лабораториях Ростовской области и в лаборатории по изучению болезней молодняка сельскохозяйственных животных ГНУ СКЗНИВИ.

Терапевтическую эффективность при колибактериозе телят изучали на 220 опытных и 150 контрольных телятах.

–  –  –

5-10 мкг/мл Справа представлены структуры, в спейсере которых имеется дополнительно одно или два метиленовых звена, что приводит к полной потере активности. Все производные имидазола были испытаны на акарицидную активность в отношении клеща Varroa Jacobsoni. Интервал эффективных концентраций для этих соединений лежит в диапозоне 50-1000 мкг/мл.

Наибольшую активность показало соединение 1 (10,0-30,0 мкг/мл).

В таблице 4 представлены сравнительные испытания эффективности АДВ ДИХИМ-1 и известных инсектоакарицидов в отношении личинок L.decemlineata.

–  –  –

3.3.2 Исследование токсических свойств препарата ДИХИМ-1 Установлено, что ЛД100 АДВ ДИХИМ-1составляет 500,0 мг/кг массы тела.

Рассчитанная по методу Кербера ЛД50 составляет 292,0 мг/кг массы тела.

При внутрижелудочном введении АДВ препарата ДИХИМ-1 менее токсично: доза 0,30 г/кг массы тела не вызывает острых токсических реакций. В течение 14,0 суток после введения препарата крысы оставались здоровыми и активными, общее состояние, поведенческие и кормовые реакции были адекватны физиологическим.

Купание крыс в растворе препарата 0,1%; 0,5%; 1,0% и 2,0% концентрации (экспозиция 15секунд) не вызывает гибели лабораторных животных.

Изучение «хронической» токсичности препарата ДИХИМ-1 показало, что трехкратная обработка крыс в рабочем растворе препарата (0,05% по АДВ) не вызывает у животных очевидной токсической реакции. Обработку купанием с двукратным полным погружением животные переносили без осложнений.

После обработок животных помещали в чистые клетки с умеренной подстилкой, принудительную сушку не применяли. Животные имели возможность заниматься собственным туалетом самостоятельно, что подразумевало и возможность облизывать шерсть и кожу после обработок.

Установлено, что показатели функциональной активности за 12,0 часовой период до купания во всех группах были практически одинаковыми: индекс функциональной активности (ИФА - передвижение по клетке, почесывания,

–  –  –

Как в опытной, так и в контрольной группе показатели форменных элементов крови находились в пределах физиологических колебаний для данного вида животных. Среднестатистические данные по каждой группе животных не выходили за пределы нормативных показателей. В таблице 6 представлены биохимические показатели крови опытных и контрольных животных. Из данных таблицы видно, что уровни общего белка, глобулинов, билирубина, неорганического фосфора и общего кальция были в пределах физиологических колебаний и достоверно не отличались.

–  –  –

В совокупности данные по изучению хронической токсичности позволяют отнести препарат ДИХИМ-1 к мало токсичным при неоднократной купке в 0,05% растворе препарата.

Изучена «острая» токсичность ДИХИМ-1 путем купания животных в рабочих растворах препарата с более высокими концентрациями по АДВ.

Установлено, что однократная купка животных в рабочих растворах с концентрацией по АДВ 0,1%; 0,5%; 1% и 2% (4 группы по 5 голов) не вызывает у животных видимой токсической реакции. Животные всех групп имели удовлетворительное общее состояние и аппетит, были опрятны, шерстный покров был чистым и блестящим, кожный покров не был гиперемирован, шелушения кожи и узелковой сыпи не наблюдали.

Таким образом, в дозах, превышающих терапевтическую в 4-10 раз, препарат хорошо переносится животными.

Результаты цитологических и биохимических исследований проб крови свиней, дважды обработанных опрыскиванием препаратом ДИХИМ-1, представлены в таблицах 7 и 8 (кровь взята у части животных (10 опытных и 10 контрольных), которые были задействованы в опыте по изучению терапевтической эффективности при сифункулятозе свиней)

–  –  –

Исследование эффективности препарата ДИХИМ-1 при 3.3.3 различных заболеваниях животных Саркоптоз свиней. Испытание провели на 231 голове (в трех опытах) свиней по методике, изложенной в разделе 2 «Материалы и методики исследований». Обработку приводили путем двукратного опрыскивания 0,05% (по АДВ) растворам препарата ДИХИМ-1. Наблюдениями в течение 10 дней после второй обработки установили, что общее состояние животных опытной группы улучшилось, беспокойство и зуд прекратились, ранки и язвочки на коже подсохли, новые очаги поражения не обнаруживались, клещей в соскобах кожи не находили. В группе, обработанной неоцидолом у части свиней (5 из 15 контрольных), которые были наиболее поражены, беспокойство и зуд уменьшились, но не прекратились полностью. Поэтому они были обработаны препаратом ДИХИМ-1. В группе чистого контроля признаки чесотки усилились зуд и беспокойства нарастали, у животных снизался аппетит, развивалось угнетение. В двух опытах животных контрольных групп обрабатывали бутоксом по инструкции. В одном из них ДИХИМ-1 и бутокс показали приблизительно одинаковый терапевтический эффект, в другом опыте после двукратной обработки бутоксом у части животных обнаруживали клещей в соскобах кожи, что потребовало третьей обработки.

Заключение. Установлено, что двукратная обработка с интервалом 10 дней свиней препаратом ДИХИМ-1 0,05% концентрации по АДВ путем опрыскивание из расчёта 15мл на 1кг массы тела освобождает животных от клещей Sarcoptes suis. Испытания показали, что ДИХИМ-1 превышает по эффективности неоцидол и, в отдельных случаях, бутокс.

Сифункулятоз свиней. Испытания провели на 214 головах свиней.

Установлено, что уже после первой обработки препаратом ДИХИМ-1 0,005% по АДВ зуд у животных прекращался. После второй обработке (через сутки) животных обследовали на наличие живых вшей. В опытной группе (ДИХИМ-1) живых вшей не обнаруживали. В контрольной группе (препарат сравнения бутокс 0,005% по АДВ) у части животных (10,0-15,0% от числа обработанных) обнаруживали на коже живых вшей.

Заключение. Препарат ДИХИМ-1 в концентрации 0,005% по АДВ превосходит по эффективности бутокс в концентрации 0,005% при сифункулятозе свиней. Двукратная обработка опрыскиванием препаратом в ДИХИМ-1 полностью освобождает животных от вшей.

Ктеноцефалидоз собак и кошек. Сравнительные испытания показали, что препарат ДИХИМ-1 эффективен в 3 раза более низкой концентрации, чем бутокс (дельтаметрин). Результаты представлены в таблице 9.

–  –  –

3.3.4 Особенности распределения препарата ДИХИМ-1 в организме лабораторных животных В мышцах и печени активно-действующее вещество препарата не обнаруживается. В кожном покрове площадью 25 см2 через 6 часов после обработки обнаружено 90-120 микрограммов АДВ, через 12 часов – 50-70 микрограммов, через 24 часа – 15-25 микрограммов, через 48 часов – 5-15 микрограммов.

3.3.5 Разработка методических положений и инструкции по применению препарата ДИХИМ-1 Нами разработаны и утверждены Отделением ветеринарной медицины Россельхозакадемии (секция «Инвазионные болезни животных») «Методические положения по применению препарата ДИХИМ-1 при арахноэнтомозах животных» (протокол №3 от 23 сентября 2010г.), а также «Регламент лабораторный приготовления препарата ДИХИМ-1 для лечения эктопаразитозов животных» (протокол № 3 от 23 сентября 2010г.).

Методические положения изложены на 21 странице и включают введение, краткую характеристику ветеринарных инсектоакарицидов, описание препарата ДИХИМ-1, описание токсических свойств препарата ДИХИМ-1, результаты испытания инсектицидных свойств АДВ в сравнении с известными препаратами, описание опытов по применению ДИХИМ-1 при заболеваниях животных, схему применения препарата ДИХИМ-1 при заболеваниях животных и заключение. Методические положения и Регламент лабораторный прилагаем к диссертации в виде отдельных документов. Содержание Методических положений и Регламента изложены в различных разделах данной диссертационной работы.

«Инструкция по применению ДИХИМ-1 при арахноэнтомозах животных»

Общие сведения ДИХИМ-1 представляет собой комплексный препарат, содержащий активнодействующее вещество 2-(4,5-дихлор-1-имидазолилметил)-2нитровинил)-имидазолидин (10 вес.%), а также вспомогательные вещества диметилсульфоксид (75 вес.%), эмульгатор (5 вес.%) и воду (10 вес.%).

По внешнему виду представляет собой жидкость от светло-желтого до коричневого цвета.

Выпускают ДИХИМ-1 расфасованным по 5,10,100 мл в полипропиленовых или стеклянных флаконах. Маркируют каждую емкость с

–  –  –

Хранение препарата Хранить препарат ДИХИМ-1 следует в недоступных для детей местах.

Хранят препарат в сухом, защищенном от света месте, отдельно от продуктов питания и кормов, при температуре от 0 С0 до 30,0 С0. Срок годности при соблюдении условий хранения – 2 года со дня изготовления.

Целенаправленный синтез протистоцидных соединений, 3.4 основанный на научной гипотезе Научная гипотеза заключалась в том, что введение в структуру 2аминобензимидазола объёмных заместителей в положения 1 и 3 может усилить противопаразитарную активность. Впервые мы установили, что производные 2-аминобензимидазола с простыми алкильными заместителями в положениях 1 и 3 обладают выраженной антипротозойной активностью в отношении Colpoda steinii. Мы предположили, что липофильные заместители в указанных положениях бензимидазольного ядра придадут таким структурам поверхностно-активные свойства, что может усилить их биологическую активность.

–  –  –

На основании данных таблицы можно сделать заключение о том, что наличие в третьем положении бензимидазольного кольца гидрофильных заместителей или заместителей небольшого размера (соединения 2-11, 26-35, 65-69, 71, 74-76) приводит к потере протистоцидной активности. Соединения с двумя гидрофобными объёмными заместителями (38, 42-48, 52-57, 64) обладают выраженной активностью, что особенно заметно на примере структур, изображённых на схеме 26.

Таким образом, значительное число (около 3,0 %) исследованных соединений показывает высокую протистоцидную активность на модели Colpoda steinii. В отличие от этого, тотальный скрининг на антибактериальную и инсектоакарицидную активности дает намного меньшую цифру. Так в наших исследованиях на модели L.decemlineata при тотальном скрининге из более чем 2000 соединений выявлено 4-5 вещества со средней активностью, позволяющей говорить лишь о дальнейшей целесообразности поиска активных структур в этом же ряду. И только поиск на основании научной гепотезы, то есть целенаправленный подход, позволяет поднять процент активных структур, но и в этом случае не более чем до 1,0 %. Возникает естественный вопрос, являются ли полученные результаты на модели Colpoda steinii достаточным основанием для дальнейшей работы в направлении создания практически важных для ветеринарии антипротозойных препаратов. Чтобы ответить на этот вопрос, мы использовали наиболее активные препараты с МИК менее 1,0 мкг/мл в дополнительных исследованиях на модели задержки споруляции кокцидий, а также в опытах по определению терапевтической эффективности ряда препаратов на экспериментальной модели кокцидиоза птиц. Эти работы проведены совместно с Бодряковой М.А. и представлены в ее диссертационной работе (Воронеж,2015).

Необходимо отметить, что нами проведен поиск антипротозойных соединений среди других классов азотсодержащих гетероциклов. В частности, производные имидазола, изначально синтезированные для изучения их инсектоакарицидных свойств, испытаны также и на протистоцидную активность. Ниже представлены наиболее активные соединения с указанием структурных формул (схема 27).

–  –  –

Не менее активные вещества найдены и в ряду модифицированных природных азотсодержащих гетероциклических соединений (дезоксипеганина, вазицинона, пиридоксоля и др.) (схема 29)

–  –  –

Из данных таблици видно, что соединения обладают как антибактерильной, так и высокой протистоцидной активностью. На их основе, следовательно, возможна разработка комплексного препарата, что важно, например, при леченинии кокцидиоза животных и птиц.

–  –  –

При внутрижелудочном введении установлено, что LD50 составляет 300,0 мг/кг массы тела, что позволяет отнести это соединение к среднетоксичным.

Разработка препаратов на основе 2-аминобензимидазола охватывает более 200 структур и защищена тремя патентами (пат. РФ № 2423355 от10.07.2011; пат.

РФ №2514196; пат. РФ № 2513993).

Антимикробная активность 1,3-дизамещенных 2иминобензимидазолина Структуры соединений представлены на схеме 31 Схема 31 Результаты испытаний представлены в таблице 13.

–  –  –

Судя по приведенным в таблице данным, наибольшую антибактериальную активность проявило вещество 1с, которое с разной эффективностью действовало на грамположительные и грамотрицательные бактерии. При этом соединение 1с, активность действия которого на стафилококки (1,0 мкг/мл) была выше, чем у ампициллина, фуразолидона, канамицина и окситетрациклина, было менее активно в отношении E.coli.

Изучили «острую» токсичность соединения 1b на лабораторных крысах при введении суспензии препарата в желудок с помощью зонда. Установили,

–  –  –

* по данным Мохнача В.О. в кн.: «Йод и проблемы жизни».-Л.,Наука.С.89-90 ** по данным справочника «Рациональная антибиотикотерапия».

Навашин С.М., Фомина И.П., М., Медицина.-1982.-496 с.

Сравнивая приведенные в таблице данные видим, что активность метилсульфонил-пиридобензимидазола (1а) и этилсульфонил

-пиридобензимидазола (1б) превосходит активность йодинола, раствора йода, полимиксина, левомицетина и тетрациклина в отношении St.aureus, а также превосходит активность раствора йода, канамицина, левомицетина и тетрациклина в отношении E.coli. Соединения 1е и 1ж, имеющие в своей структуре сульфамидные группы, в 2 раза более активны.

«Острую» токсичность соединений 1а, 1б, 1е, и 1ж изучили на лабораторных крысах при введении растворов соединений в желудок. Доза 0,50 г/кг массы тела не вызывает гибели лабораторных животных (срок наблюдения 14 дней). Токсичность этих структур предварительно отнесли к среднему классу опасности. Сочетание высокой антибактериальной активности и низкой токсичности позволяет надеяться на получение практически значимых для ветеринарии препаратов.

Сводная таблица по результатам определения 3.5.2 антибактериальной активности Итоговая информация по результатам определения антибактериальной активности представлена в таблице 17

–  –  –



Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 | 6 |   ...   | 8 |

Похожие работы:

«ФЕДИН Андрей Викторович КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ ОСТРЫХ БАКТЕРИАЛЬНЫХ РИНОСИНУСИТОВ 14.03.09 – аллергология и иммунология 14.01.03 – болезни уха, горла и носа ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научные руководители: доктор...»

«Шапурко Валентина Николаевна РЕСУРСЫ И ЭКОЛОГИЧЕСКОЕ КАЧЕСТВО ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ (НА ПРИМЕРЕ БРЯНСКОЙ ОБЛАСТИ) Специальность 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«Цвиркун Ольга Валентиновна ЭПИДЕМИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС КОРИ В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКИ. 14.02.02 – эпидемиология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: заслуженный деятель науки РФ, лауреат Государственной премии СССР профессор, доктор медицинских наук Ющенко Галина Васильевна Москва – 20 Содержание...»

«КОЖАРСКАЯ ГАЛИНА ВАСИЛЬЕВНА КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ МАРКЕРОВ КОСТНОГО МЕТАБОЛИЗМА У БОЛЬНЫХ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ 14.01.12 онкология Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научные руководители: доктор биологических наук, Любимова Н.В. доктор медицинских наук, Портной С.М. Москва, 2015 г....»

«Ульянова Онега Владимировна МЕТОДОЛОГИЯ ПОВЫШЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ВАКЦИН НА МОДЕЛИ ВАКЦИННЫХ ШТАММОВ BRUCELLA ABORTUS 19 BA, FRANCISELLA TULARENSIS 15 НИИЭГ, YERSINIA PESTIS EV НИИЭГ 03.02.03 – микробиология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант:...»

«Сигнаевский Воладимир Дмитриевич МОРФОГЕНЕТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПРОДУКТИВНОСТИ ЯРОВОЙ МЯГКОЙ ПШЕНИЦЫ СОРТОВ САРАТОВСКОЙ СЕЛЕКЦИИ Специальность 03.02.01 — ботаника Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: д.б.н.,...»

«ТОМОШЕВИЧ Мария Анатольевна ФОРМИРОВАНИЕ ПАТОКОМПЛЕКСОВ ДРЕВЕСНЫХ РАСТЕНИЙ ПРИ ИНТРОДУКЦИИ В СИБИРИ 03.02.01 – «Ботаника» 03.02.08 – «Экология» Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант: д.б.н., академик РАН Коропачинский И.Ю. Новосибирск – 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ: ВВЕДЕНИЕ.. 4 ГЛАВА 1. АНАЛИЗ...»

«Гуськов Валентин Юрьевич МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ И ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ БУРОГО МЕДВЕДЯ URSUS ARCTOS LINNAEUS, 1758 ДАЛЬНЕГО ВОСТОКА РОССИИ 03.02.04 – зоология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель доктор биологических наук, с.н.с. А.П. Крюков Владивосток – 2015 Оглавление Введение Глава 1. Обзор...»

«Шемякина Анна Викторовна БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ ВЕЩЕСТВА ДАЛЬНЕВОСТОЧНЫХ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ РОДА BETULA L. 03.02.14 – Биологические ресурсы Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Колесникова Р.Д. Хабаровск – 20 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ.. ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ПО ТЕМЕ ИССЛЕДОВАНИЙ. 1.1 Общие...»

«АБДУЛЛАЕВ Ренат Абдуллаевич ГЕНЕТИЧЕСКОЕ РАЗНООБРАЗИЕ МЕСТНЫХ ФОРМ ЯЧМЕНЯ ИЗ ДАГЕСТАНА ПО АДАПТИВНО ВАЖНЫМ ПРИЗНАКАМ Шифр и наименование специальности 03.02.07 – генетика 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений ДИССЕРТАЦИЯ на соискание учёной степени кандидата...»

«МИГИНА ЕЛЕНА ИВАНОВНА ФАРМАКОТОКСИКОЛОГИЯ И ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ ТРИЛАКТОСОРБ В МЯСНОМ ПЕРЕПЕЛОВОДСТВЕ 06.02.03 – ветеринарная фармакология с токсикологией Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Кощаев Андрей...»

«Искам Николай Юрьевич ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ НОВОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ АЦИД-НИИММП НА ОСНОВЕ ОРГАНИЧЕСКИХ КИСЛОТ ПРИ ПРОИЗВОДСТВЕ ГОВЯДИНЫ 06.02.10 – частная зоотехния, технология производства продуктов животноводства; 06.02.08 – кормопроизводство, кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов. ДИССЕРТАЦИЯ на...»

«Сухарьков Андрей Юрьевич РАЗРАБОТКА МЕТОДОВ ОЦЕНКИ ОРАЛЬНОЙ АНТИРАБИЧЕСКОЙ ВАКЦИНАЦИИ ЖИВОТНЫХ 03.02.02 «Вирусология» Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат ветеринарных наук, Метлин Артем Евгеньевич Владимир 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ 1 ВВЕДЕНИЕ 2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 2.1 Характеристика возбудителя бешенства 2.2 Эпизоотологические...»

«СЕРГЕЕВА ЛЮДМИЛА ВАСИЛЬЕВНА ПРИМЕНЕНИЕ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ЗАКВАСОК ДЛЯ ОПТИМИЗАЦИИ ФУНКЦИОНАЛЬНО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ МЯСНОГО СЫРЬЯ И УЛУЧШЕНИЯ КАЧЕСТВА ПОЛУЧАЕМОЙ ПРОДУКЦИИ Специальность 03.01.06 – биотехнология ( в том числе бионанотехнологии) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель Доктор биологических наук, профессор Кадималиев Д.А. САРАНСК 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ.....»

«Якимова Татьяна Николаевна Эпидемиологический надзор за дифтерией в России в период регистрации единичных случаев заболевания 14.02.02 эпидемиология диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор...»

«Куяров Артём Александрович РОЛЬ НОРМАЛЬНОЙ МИКРОФЛОРЫ И ЛИЗОЦИМА В ВЫБОРЕ ПРОБИОТИЧЕСКИХ ШТАММОВ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У СТУДЕНЧЕСКОЙ МОЛОДЕЖИ СЕВЕРА 03.02.03 – микробиология 03.01.06 – биотехнология (в том числе бионанотехнологии) Диссертация на соискание учёной степени кандидата...»

«СИНЕЛЬЩИКОВА Александра Юрьевна Ночная миграция дроздов рода Turdus в юго-восточной Прибалтике Специальность 03.02.04 – Зоология Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор, главный научный сотрудник К.В. Большаков Санкт-Петербург Оглавление Введение... 3 Глава 1. Особенности миграции...»

«Платонова Ирина Александровна ПОСТПИРОГЕННАЯ ТРАНСФОРМАЦИЯ НАДЗЕМНОЙ ФИТОМАССЫ В СОСНЯКАХ СЕЛЕНГИНСКОГО СРЕДНЕГОРЬЯ Специальность 06.03.02 – Лесоведение и лесоводство, лесоустройство и лесная таксация ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: д.б.н., с.н.с. Г.А. Иванова Красноярск – 2015...»

«Петухов Илья Николаевич РОЛЬ МАССОВЫХ ВЕТРОВАЛОВ В ФОРМИРОВАНИИ ЛЕСНОГО ПОКРОВА В ПОДЗОНЕ ЮЖНОЙ ТАЙГИ (КОСТРОМСКАЯ ОБЛАСТЬ) Специальность: 03.02.08 экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор В.В. Шутов...»

«Смешливая Наталья Владимировна ЭКОЛОГО-ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ СИГОВЫХ РЫБ ОБЬ-ИРТЫШСКОГО БАССЕЙНА 03.02.06 Ихтиология Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель кандидат биологических наук, доцент Семенченко С.М. Тюмень – 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.