WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 

«POЛЬ ГEHEТИЧECКИХ ФAКТOPOB B PAЗBИТИИ BPOЖДЁHНЫХ PACЩEЛИH ГУБЫ И HЁБA CPEДИ HACEЛEHИЯ КPACHOДAPCКOГO КPAЯ ...»

На правах рукописи

НЕХОРОШКИНА Мария Олеговна

POЛЬ ГEHEТИЧECКИХ ФAКТOPOB B PAЗBИТИИ BPOЖДЁHНЫХ

PACЩEЛИH ГУБЫ И HЁБA CPEДИ HACEЛEHИЯ КPACHOДAPCКOГO

КPAЯ

03.02.07 – генетика

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание учёной степени

кандидата медицинских наук

Белгород – 2014

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном

учреждении высшего профессионального образования «Кубанский государственный медицинский университет» (ГБOУ BПO КyбГМУ) Министерства здравоохранения Российской Федерации

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор ГОЛУБЦОВ Виктор Иванович

Официальные оппоненты:

Амелина Светлана Сергеевна, доктор медицинских наук, профессор, Научно-исследовательского института биологии Южного федерального университета, заведующая отделом прикладной биологии Петрин Александр Николаевич, доктор медицинских наук, профессор, ГБОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет имени А.И. Евдокимова» Минздрава России, заведующий лабораторией медицинских генетических технологий

Ведущая организация:

Государственное бюджетное образовательное учреждение дополнительного профессионального образования «Российская медицинская академия последипломного образования» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Защита диссертации состоится «____» ______________ 2015 года в «______»

часов на заседании совета по защите диссертаций на соискание учёной степени кандидата наук, на соискание учёной степени доктора наук Д 212.015.13 при ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет» по адресу: 308015, г. Белгород, ул. Победы, 85

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет» Минобрнауки России и на сайте www.bsu.edu.ru.

Автореферат разослан «____»____________ 201__ г.

И. о. учёного секретаря совета по защите диссертаций на соискание учёной степени кандидата наук, на соискание учёной степени доктора наук Д 212.015.13, доктор медицинских наук С. П. Пахомов

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Врождённые расщелины губы и/или нёба (ВРГ и/или Н) – это патология индивидуального развития, которая формируется на ранних стадиях эмбриогенеза человека и характеризуется наличием частичного или полного незаращения верхней губы и/или мягкого и/или твёрдого нёба.

В структуре мониторируемых врождённых пороков развития (ВПР) ВРГ и/или Н по частоте встречаемости находятся на втором месте и являются тяжёлой челюстно-лицевой патологией у новорождённых детей, приводящей к существенным структурным и функциональным нарушениям. Диапазон колебаний данного порока в различных регионах РФ – от 0,63 до 2,09 на 1000 новорождённых [Демикова Н. С., 2006]. Ориентировочные затраты государства на лечение и восстановление 1 пациента с ВРГ и/или Н составляют около 200 000 $ [Wehby and Cassell, 2010]. ВРГ и/или Н входит в перечень ВПР, регистрируемых по мониторингу в регионе, проводимого согласно приказу Департамента здравоохранения Краснодарского края № 176 от 20.09.1996 «О создании службы слежения за врождёнными пороками у детей и обязательной их регистрации в Краснодарском крае».

Об этиологии этих пороков развития нет однозначных представлений, так как они могут быть симптомами ряда наследственных синдромов (Ван дер Вуда, Пьера Робена, Аазе, Адамса – Оливера, Миллера, Патау, Эдвардса и др.), а также являются следствием воздействия экзогенных тератогенных факторов (физических, химических, биологических).

В последние годы активно изучается роль генов детоксикации, биохимические продукты которых нейтрализуют действие тератогенов, участвующих в формировании ВПР. Устойчивость организма к негативным воздействиям окружающей среды во многом зависит от работы ферментов детоксикации ксенобиотиков (ФБК) [Christopher J. Kennedy, 2013]. Система детоксикации сложна, индивидуальна для каждого конкретного человека и генетически уникальна [Liska DAJ, 1996]; она включает в себя большое количество звеньев, характеризующихся выраженными межиндивидуальными и популяционными различиями [Halliwell BMC, Gutteridges, 2007].

На сегодняшний день установлена взаимосвязь нарушений в функционировании системы биотрансформации ксенобиотиков и возникновении различных заболеваний [Liska DAJ, 1996], в том числе и ВПР [Раuli-Mаgnus C, 2004]. В связи с этим очевидна необходимость проведения молекулярно-генетических исследований, направленных на анализ взаимосвязей генов ферментов биотрансформации ксенобиотиков с риском развития ВРГ и/или Н в различных популяциях мира.

Цель: Изучить генетические факторы развития врождённых расщелин губы и/или нёба у детей, родившихся в Краснодарском крае - Юг России, за период 1996 – 2012 гг.

Задачи:

1. Определить распространённость ВРГ и/или Н среди детей, родившихся на территории Краснодарского края, за период 1996 – 2012 гг. с учётом клинического полиморфизма патологии и пола больных.

2. Установить основные генетические факторы – мутации (генные, хромосомные, геномные) у новорождённых детей с признаком ВРГ и/или Н.

3.Установить ассоциации полиморфизмов генов ФБК с учётом диагностированных клинических вариантов ВРГ и/или Н.

4. Изучить роль генов ФБК в патогенезе ВРГ и/или Н.

Научная новизна. Впервые на юге России проведено исследование распространённости ВРГ и/или Н среди новорождённых на территории Краснодарского края за период 1996 – 2012 гг. с анализом вероятных генетических факторов. Впервые установлена популяционная частота встречаемости и доля ВРГ и/или Н среди всех регистрируемых в крае пороков развития. Составлен регистр моногенно наследуемых синдромов с признаками ВРГ и/или Н, установлена частота встречаемости ВРГ и/или Н в сочетании с хромосомной патологией, а также доля ВРГ и/или Н мультифакториального генеза на территории Краснодарского края. Впервые был прoведён анализ пoлиморфизмов генoв ФБК: CYP1A2 (C154A), CYP1B1 (V432L), ABCB1 (С3435T), NQO1 (P187S) и NAT2 (G590А) с риском развития ВРГ и/или Н у жителей Краснодарского края и установлены пол-специфические эффекты полиморфных вариантов генов ФБК в отношении предрасположенности к ВРГ и/или Н.

Научно-практическое значение. По результатам молекулярногенетического исследования установлена роль полиморфных вариантов генов ФБК (NAT2, ABCB1,CYP1A2, CYP1B1, NQO1) в этиологии изолированных ВРГ и/или Н, что расширяет научные представления о молекулярных механизмах тератогенеза на ранних этапах эмбриогенеза человека. Изучение генетического влияния на процессы регуляции биотрансформации ксенобиотиков посредством оценки полиморфных генов ФБК позволит более полно охарактеризовать генетические механизмы формирования ВРГ и/или Н мультифакториального генеза. Проведённое комплексное медико-генетическое обследование позволило определить этиологию ВРГ и/или Н на территории Краснодарского края, что имеет важное значение в практическом здравоохранении при выборе тактики лечения и дальнейшей реабилитации данных больных. Результаты исследования позволят адекватно прогнозировать вероятность рождения здоровых детей в семьях с отягощённым анамнезом по исследованной патологии и могут быть использованы при медикогенетическом консультировании больных в ЛПУ Краснодарского края, ЮФО и на других территориях РФ. Данные настоящего исследования могут быть приняты для создания методических рекомендаций по курсам генетики, неврологии и стоматологии в медицинских вузах, а также на курсах усовершенствования медицинских работников.

Апробация работы. Материалы диссертационного исследования были представлены на II Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии» (Курск, 2011 г.), Краевой научнопрактической конференции «Обеспечение преемственности специалистов в комплексной реабилитации пациентов с врождённой патологией челюстнолицевой области» (Краснодар, 2013 г.), 74-й студенческой научно-практической конференции студенческого научного общества им. проф. Н.П. Пятницкого (Краснодар, 2013 г.), III научно-практической конференция с международным участием «Медицина: новое в теории и клинической практике» (Дубай, 2013 г.), 2-й Международной научно-практической конференции «Современная наука: актуальные проблемы и пути их решения» (Липецк, 2013 г.).

Личный вклад автора. Автором лично проанализированы отечественные и зарубежные источники по теме диссертационного исследования, определены цель и задачи исследования, разработаны подходы для их решения, проведён ретроспективный анализ данных. Автор самостоятельно производил первичный осмотр больных с ВРГ и/или Н, клинико-генеалогический анализ и отбор семей для дальнейшего исследования, проводил цитогенетическое исследование. Диссертантом лично проведено выделение геномной ДНК и генотипирование 5 полиморфизмов генов ФБК на выборке 261 человек. Автор лично проводил статистическую обработку, анализ и интерпретацию полученных результатов, подготовку публикаций по теме выполненной работы и оформление рукописи. Диссертант участвовала в апробации и внедрении результатов исследования.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 печатных работ, из которых 3 – в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ для публикаций результатов диссертационных исследований по медицинским наукам.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Частота ВРГ и/или Н и их нозологических форм в Краснодарском крае соответствует средним показателям по России. В структуре причин развития ВРГ и/или Н на территории Краснодарского края ведущее место занимают пороки развития мультифакториального генеза.

2. Гены ФБК участвуют в формировании предрасположенности к ВРГ и/или Н.

3. Ассоциации исследуемых генов ФБК с риском развития ВПР зависят от клинического варианта ВПР (ВРГ и/или Н), а также характеризуются полспецифичными эффектами полиморфизмов на подверженность болезни у мужчин и женщин.

4. Полиморфные варианты генов ФБК взаимодействуют между собой, что определяет их совместную вовлечённость в молекулярно-генетические механизмы патогенеза заболевания.

Структура и объём диссертации. Диссертация состоит из списка сокращений, введения, обзора литературы, главы с описанием материалов и методов исследования, главы с результатами собственного исследования, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы и приложений. Текст диссертации изложен на 161 странице машинописи, иллюстрирован 45 таблицами и 15 рисунками. Библиографический список содержит 243 источника, из которых 159 – зарубежных.

Материалы и методы исследования Общая характеристика выборки Объектом для данного исследования являлись дети с ВРГ и/или Н, родившиеся в Краснодарском крае за период 1996 – 2012 гг. и зарегистрированные в Кубанской межрегиональной медико-генетической консультации (ККМГК) в порядке проводимого мониторинга ВПР, дети, состоящие на диспансерном учёте в Центре лечения детей с врождённой патологией челюстно-лицевой области (ЦЛДВПЧЛО) ГБУЗ ДККБ г. Краснодара, а также дети, проходившие послеоперационную реабилитацию в Центре восстановительной медицины и реабилитации (ЦВМиР) ГУЗ г. Краснодара. Критериями включения в группу исследования были: пациенты с изолированной ВРГ и/или Н (без сочетанной патологии со стороны других органов и систем), родившиеся и проживающие на территории Краснодарского края, преимущественно русской этнической группы, при наличии и согласии родственников I линии родства (родители исследуемых). Всего клинически обследованы 967 человек, в том числе 810 больных с ВРГ и/или Н и 157 человек без признаков исследуемой патологии контрольная группа. Ретроспективно были проанализированы 1024 амбулаторных карт и историй болезни больных с ВРГ и/или Н из архивных материалов ЦЛДВПЧЛО, 810 амбулаторных карт ККМГК и 107 историй болезни ЦВМиР г. Краснодара.

При клиническом осмотре больных были учтены имеющиеся заключения смежных специалистов (ортопед, невролог, кардиолог и др.). Для постановки первичного диагноза использовалась клинико-анатомическая классификация Московского государственного медико-стоматологического университета (1990 г.). Для научно-исследовательских целей полученные данные протоколировались по стандартам Этического комитета Российской Федерации.

Вся информация вносилась в специально составленную нами «Карту регистрации новорождённых с ВПР», в которую были включены:

витальные характеристики (пол, масса тела, рост) пробанда, сведения о родителях: возраст, порядковый номер беременности/родов, протекание и исходы предыдущих беременностей, а также результаты генеалогического анализа.

Клинико-генеалогический анализ Для формирования группы больных с изолированными ВРГ и/или Н всем зарегистрированным в крае семьям, отягощённым этой патологией и прибывшим на клинический осмотр, проведён клинико-генеалогический анализ. На основании полученных данных определяли доминирующий патогенетический фактор, а при выявлении наследственной природы порока устанавливали тип наследования патологии. При наличии у больных с ВРГ и/или Н других патологических признаков определяли нозологическую форму наследственного синдрома.

Цитогенетическое исследование Для проведения цитогенетического исследования у обследуемых проводился забор венозной крови. Лабораторное диагностическое обследование пациентов было проведено в цитогенетической лаборатории КММГК и включало в себя анализ числа и морфологической структуры хромосом стандартным цитогенетическим методом – кариотипированием.

Культивирование крови и приготовление препаратов метафазных хромосом проводили по общепринятой методике Hungerford [Hungerford D.A., 1965;

Кулешов Н.П., 1991]. Заключение о кариотипе составляли в соответствии с правилами Международной номенклатуры хромосом ISCN – 2005 [ISCN (2005), 2005]. Основной задачей использования данного метода в исследовании был анализ хромосом в метафазе с целью установления количественных и структурных отклонений от нормы в хромосомном наборе у больных с ВРГ и/или Н. Всего 214 пациентам было проведено первичное кариотипирование.

Молекулярно-генетическое исследование Молекулярно-генетические исследования проведены у 104 больных детей и 157 человек контрольной группы. Забор крови осуществляли в объёме 5 мл из локтевой вены в пробирки с консервантом 0,5М раствор ЭДТА (рН=8.0).

После этого кровь замораживали при -20С. Выделение геномной ДНК из цельнозамороженной крови осуществляли в медико-генетической лаборатории Курского государственного медицинского университета и лаборатории медикогенетических исследований на базе Кубанского государственного медицинского университета методом фенольно-хлороформной экстракции [Mathew, 1984].

В рамках работы проводилось генотипирование 5 полиморфизмов (SNPмаркеры) 5 генов ФБК: CYP1B1 (V432L), MDR1 (C3435T), NAT2 (G590A), CYP1A2 (A154C), NQO1 (P187S).

Генотипирование осуществляли методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени в лаборатории медико-генетических исследований на базе Кубанского государственного медицинского университета и молекулярно-генетической лаборатории кафедры биологии, медицинской генетики и экологии Курского государственного медицинского университета. Амплификацию проводили на амплификаторах CFX96 (Bio-Rad) и Rotor Gеnе Q5 рlеx HRM (Qiаqеn) с использованием праймеров и зондов, синтезированных ООО «Синтол». Генотипирование полиморфизмов генов ФБК проводили методом дискриминации аллелей с помощью TagMan-зондов. С целью оптимизации ПЦР для каждой пары праймеров был рассчитан оптимальный температурно-временной режим отжига и подобрана соответствующая концентрация MgCl2.

Статистические методы исследования Статистический анализ полученных данных проводился на ПК с использованием пакета прикладных программ Statistiсa 6.0 фирмы StatSoft Inc.

(США) и MS Excel. Оценка соответствия распределений генотипов ожидаемым значениям при равновесии Харди – Вайнберга (РХВ) и сравнение распределений частот генотипов и аллелей в выборках больных и здоровых осуществлялись с использованием критерия 2 Пирсона.

При сравнении частот аллелей и генотипов между различными группами использовали критерий 2 с поправкой Йетса на непрерывность [Реброва О.Ю., 2003]. Об ассоциации аллелей или генотипов с предрасположенностью к заболеваниям судили по величине отношения шансов (OR) [Pearce N., 1993;

Реброва О.Ю., 2003] – показателю, отражающему, во сколько раз вероятность оказаться в группе «случай» (больные) отличается от вероятности оказаться в группе «контроль» (здоровые) для носителя изучаемого генотипа: OR = (A/B)/(C/D), где A и B – количество больных, имеющих и не имеющих мутантный аллель или генотип соответственно; D и C – количество человек в контрольной группе, имеющих и не имеющих мутантный аллель или генотип соответственно. При OR=1 судили об отсутствии ассоциации; OR1 рассматривалось как наличие положительной ассоциации ДНК-маркера («фактор риска») и заболевания; OR1 – свидетельствовало об отрицательной ассоциации ДНК-маркера («фактор устойчивости») с заболеванием. Границы 95%-го доверительного интервала (CI) для OR вычисляли методом B. Woolf.

Результаты собственных исследований

1. Распространённость ВРГ и/или Н на территории Краснодарского края. За период 1996 – 2012 гг. на территории Краснодарского края родилось 920 471 детей, из которых у 22 604 новорождённых (2,45 %) диагностировали ВПР, в том числе у 1024 – ВРГ и/или Н, что определило популяционную частоту этого порока на территории Краснодарского края - 1,11 ‰, а среди всех диагностированных пороков – 4,5 % и 70,6 % из числа всех зарегистрированных пороков развития челюстно-лицевой области в крае.

0,18 14 0,15 0,12 0,09 0,06 4 0,03 2

–  –  –

Как показано на рисунке 1, за период 1996 – 2012 гг. отмечается снижение доли ВРГ и/или Н, как среди всех регистрируемых ВПР на территории Краснодарского края, так и среди всех новорождённых.

Среди всех больных с ВРГ и/или Н данная патология чаще наблюдалась у лиц мужского пола – 53,7%, а показатель среди лиц женского пола – 46,3%. В нозологическом спектре больных с ВРГ и/или Н доминировали (40,33 %) изолированные расщелины нёба, 38,67 % составили сочетанные расщелины губы и нёба и 21,0 % – врождённые расщелины губы (ВРГ).

Частоты нозологических форм ВРГ и/или Н в соответствии с полом больных распределились следующим образом: ВРГ- 37,7 % (жен.) и 62,3 % (муж.), ВРН- 57,7 % (жен.) и 42,3 % (муж.), ВРГ и Н- 39,1 % (жен.) и 60,9 % (муж.).

При рассмотрении частоты ВРГ и/или Н в отдельных административных районах края выявлена выраженная дисперсия этого показателя, вследствие чего проведённый анализ частоты ВРГ и/или Н по отдельным районам края представлялся не корректным из-за статистически недостаточного числа рождений в них здоровых детей, а также больных. В связи с этим мы условно раздели территорию Краснодарского края на 6 регионов, в которые объединены административные районы с примерно одинаковым народонаселением и сходные по климато-географическим условиям (Рисунок 2).

–  –  –

Рисунок 2. Регионы условного территориального подразделения Краснодарского края и доля (%) среди всех больных ВРГ и/или Н в соответствующем регионе.

При этом увеличивалась общая численность народонаселения объединённых административных районов, что позволяло более объективно оценивать частоту рождения больных с ВРГ и/или Н применительно к конкретному региону края. В результате установлено, что наиболее часто ВРГ и/или Н регистрировались в Центральном регионе – 36,6 %, а более редко – в Северном регионе (4,6 %).

При расчёте частоты ВРГ и/или Н среди всех новорождённых, а также дифференцировано по нозологическим формам установлено, что в 5-ти регионах (кроме Приазовского) частота одинакова и составляет 1,0–1,3 ‰ (Таблица 1).

–  –  –

2. Клинико-генеалогический анализ при дифференциальной диагностике ВРГ и/или Н. Клинико-генеалогический анализ, проведённый в семьях больных, позволил установить аналогичную патологию у 41 (5,06 %) родственника пробандов. У остальных 769 осмотренных нами больных данный ВПР оценён как спорадический вариант патологии, из которых у 98 (12,1 %) больных с МВПР диагностировано 13 моногенных наследственных синдромов с разными типами наследования (Таблица 2).

–  –  –

3. Цитогенетическое обследование больных с ВРГ и/или Н. С целью исключения хромосомной патологии был проведён цитогенетический анализ.

Группа больных с ВРГ и/или Н была сформирована за период 1996 по 2012 гг., в группу обследуемых вошли больные, ранее прокариотипированные в ККМГК, а также дети, не проходившие обследование, не состоящие на учёте в ККМГК (214 пациентов, которым было проведено первичное кариотипирование). Обследуемые имели как изолированные ВРГ и/или Н, так и сочетанные пороки развития со стороны других органов или систем. В результате цитогенетического исследования у 44 обследуемых был установлен аномальный кариотип. Структура и частота диагностированной хромосомной патологии на территории Краснодарского края за исследуемый временной период представлена в Таблице 3.

–  –  –

Из представленных в таблице данных видно, что ВРГ и/или Н могут проявиться как один из симптомов МВПР при хромосомных аномалиях и не являются специфичными для какого-либо одного хромосомного синдрома, возникая как при геномных мутациях, так и при хромосомных аберрациях (делециях). Диагностированная хромосомная патология чаще встречалась у лиц мужского пола - 56,82 %, а среди женского – 43,18 %. Частота встречаемости у больных ВРГ и/или Н в сочетании с хромосомной патологией на территории Краснодарского края составила 4,3 %.

Установлена популяционная частота встречаемости ВРГ и/или Н среди новорождённых с диагностированной хромосомной патологией по Краснодарскому краю, которая составила 0,05 ‰.

4.1. Популяционная характеристика частот аллелей и генотипов исследованных генов ФБК у больных с ВРГ и/или Н и здоровых (контроль).

Проведено молекулярно-генетическое исследование 104 семей, в которых были достоверно установлены изолированные ВРГ и/или Н у 104 пробандов; в качестве группы контроля были отобраны здоровые родители пробандов в количестве 157 человек. Распределение частот генотипов полиморфизмов генов системы ФБК и их соответствие популяционному равновесию уравнения Харди

– Вайнберга проводилось раздельно в группе детей с ВРГ и/или Н и в контрольной группе. Отклонения от равновесия уравнения Харди – Вайнберга в сравниваемых группах не обнаружено.

12

–  –  –

Как показано в таблицах 4–5, статистически достоверных различий между группами не обнаружено. Однако при проведении сравнительного стратификационного анализа в группах с различными нозологическими формами изучаемой патологии обнаружена взаимосвязь исследуемых маркеров с различными формами ВРГ и/или Н (результаты представлены в таблицах 6-7).

–  –  –

4.2. Особенности ассоциации полиморфизма генов ФБК с предрасположенностью к ВРГ и/или Н в зависимости от пола. При проведении сравнительного анализа частот аллелей исследованных генетических маркеров у больных мужского пола с ВРГ и здоровых мужчин из контрольной группы (Таблица 8) установлено статистически достоверное уменьшение частоты вариантного аллеля С полиморфизма A154C гена CYP1A2 у мужчин с ВРГ: 2=4,24, Р=0,04; OR=0,32, 95 % CI=0,12-0,84.

–  –  –

Также выявлен протективный эффект мутантного аллеля 432L полиморфизма V432L гена CYP1B1 относительно риска развития ВРН у мужчин: 2=3,92, Р=0,05; OR=0,55, 95 % CI=0,31-1,00. При этом у женщин с ВРН частота мутантного аллеля по данному маркеру была выше, чем в контрольной группе, хотя различия не достигали статистически значимого уровня: 2=3,15, Р=0,08; OR=1,91, 95% CI=0,93-3,92. Нами обнаружено увеличение частоты гомозигот по дикому аллелю 432VV полиморфного варианта V432L гена CYP1B1 в обобщённой группе больных мужского пола с ВРГ и/или Н (2=3,92, Р=0,05; OR=0,55, 95 % CI=0,31-1,00).

У мужчин с ВРН наблюдалась тенденция к накоплению гомозигот по аллелю дикого типа 432VV полиморфизма V432L гена СYP1B1 по сравнению с контрольной группой, однако различия не достигали уровня статистически значимых: 2=3,55, Р=0,06; OR=0,24, 95% CI=0,06-0,90 (Таблица 9).

–  –  –

4.3. Анализ ассоциации парных комбинаций генотипов генов ФБК в формировании предрасположенности к ВРГ и/или Н. Проведён анализ межгенных взаимодействий, определяющих предрасположенность к исследуемым заболеваниям, без учёта полового диморфизма (Таблица 10).

–  –  –

Обнаружено 7 комбинаций, ассоциированых с риском развития ВРГ и/или Н. Наиболее значимые из них: гетерозиготное носительство по генам ABCB1 и NQO1 коррелировало с увеличением риска ВРГ и/или Н почти в 2 раза (2=4,41, Р=0,04; OR=1,85, 95 % CI=1,04-3,29), в тоже время сочетание гомозиготного генотипа по дикому аллелю 187 PP гена NQO1 и гомозиготного генотипа по вариантному аллелю гена CYP1A2 154AA ассоциировало с протективным эффектом (2=5,06, Р=0,02; OR=0,36, 95 % CI=0,15-0,86).

В таблице 11 представлены статистически значимые ассоциации межгенных взаимодействий генотипов генов ФБК с развитием различных нозологических форм ВРГ и/или Н.

–  –  –

Выводы

1. Частота ВРГ и/или Н у детей, родившихся в Краснодарском крае за период 1996 – 2012 гг., составила 1,11 ‰ среди всех живорождённых и 4,5 % от числа всех зарегистрированных ВПР и практически одинакова во всех шести регионах условного территориального подразделения административных районов Краснодарского края.

2. В нозологическом спектре больных с ВРГ и/или Н доминировали (40,33 %) изолированные расщелины нёба, 38,67 % составили сочетанные расщелины губы и нёба, и 21,0 % составили врождённые расщелины губы.

3. В структуре исследованных ВПР у больных с признаком расщелины губы и/или нёба моногенные синдромы (13 нозологий) составили 12,1 %;

наследственно детерминированные изолированные ВРГ и/или Н – 5,06 %;

хромосомные синдромы – 4,3 % и пороки с невыясненной этиологией (повидимому, мультифакториального генеза) – 78,54 %.

4. По результатам исследования пяти полиморфных генов ФБК (NAT2, ABCB1, CYP1A2, CYP1B1, NQO1) установлено, что генотип 187PS гена NQO1, а также аллель 154A гена CYP1A2 ассоциированы с повышенным риском развития ВРГ.

5. Полиморфные варианты генов CYP1A2, CYP1B1 опосредуют формирование ВРГ и/или Н у больных мужского пола; при этом аллель 154А гена CYP1A2 ассоциирован с повышенным риском развития ВРГ, аллель 432V гена CYP1B1

– с повышенным риском развития ВРН.

6. Установлены ассоциации парных сочетаний генотипов, при которых предрасположенность к ВРГ и/или Н наблюдалась чаще, в их числе: 3 парных сочетания генотипов, определяющих предрасположенность к ВРГ, одно сочетание – к ВРН и 1 парная комбинация, связанная с предрасположенностью к сочетанной патологии ВРГ и Н.

Практические рекомендации

1. Рекомендовать практическим врачам при постановке первичного диагноза ВРГ и/или Н направлять пациентов в медико-генетическую консультацию с целью установления окончательного диагноза, а так же прогноза рождения здоровых детей в семьях с отягощённым анамнезом по данной патологии.

2. Рекомендовать для внедрения в практику медико-генетического консультирования генотипирование полиморфизмов генов ФБК (NQO1 187РS, CYР1B1 V432L, CYР1А2 А154C) с целью индивидуального прогнозирования риска развития несиндромальных ВРГ и/или Н в семьях с отягощённым анамнезом по данной патологии.

3. Рекомендовать клиническим врачам-генетикам при постановке диагноза ВРГ и/или Н применять комплексный алгоритм молекулярно-генетического обследования больных с целью установления генеза этих пороков для более точного прогнозирования рождения здоровых детей в семьях с отягощённым анамнезом по данной патологии.

4. Внедрить результаты молекулярно-генетического исследования в образовательный процесс в рамках лекций и практических занятий по генетике человека и медицинской генетике в медицинских вузах с целью расширения представлений о генезе ВРГ и/или Н.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АД аутосомно-доминантный (тип наследования) АР аутосомно-рецессивный (тип наследования) ВРГ и/или Н врождённые расщелины губы и/или нёба ВРГ врождённые расщелины губы ВРН врождённые расщелины нёба ВРГ и Н врождённые расщелины губы и нёба ВПР врождённые пороки развития ГБOУ BПO Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования ГБУЗ Государственное бюджетное учреждение здравоохранения ГУЗ Государственное учреждение здравоохранения ДККБ детская краевая клиническая больница КММГК Кубанская межрегиональная медико-генетическая консультация ЛПУ лечебно-профилактические учреждения МВПР множественные врождённые пороки развития ПЦР полимеразная цепная реакция РФ Российская Федерация РХВ равновесие Харди – Вайнберга ФБК ферменты биотрансформации ксенобиотиков ЦВМиР Центр восстановительной медицины и реабилитации ЦЛДВПЧЛО Центр лечения детей с врождённой патологией челюстнолицевой области ЭМ электронная микроскопия ЭДТА этилендиаминтетрауксусная кислота ЮФО Южный Федеральный Округ СYР1А2 цитохром Р-450, семейство А, подсемейство II СYР1В1 цитохром Р-450, семейство В, подсемейство I N-ацетилтрансфераза 2 NAT2 НАД(Ф) дегидрогеназа, хинон 1 NQO1 ABCB1 (MDR1) Ген множественной лекарственной резистентности (гликопротеин-Р) Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Нехорошкина М.О. Анализ частоты врождённой расщелины губы и/или нёба среди новорождённых в Краснодарском крае/ М.О. Нехорошкина, К.Ю. Лазарев // Материалы II Всероссийской конференции с междунар.

участием. «Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии».

– Курск, 2011. – С. 224.

2. Голубцов В.И., Лазарев К.Ю., Нехорошкина М.О. Наследственные синдромы с признаком расщелины верхней губы и/или нёба (учебное пособие для студентов). – Краснодар, 2013. – С. 46.

3. Нехорошкина М.О. Определение этиологических факторов, детерминирующих клинический полиморфизм врождённых расщелин губы и/или нёба у детей Краснодарского края / М.О. Нехорошкина, А.В. Кариди, О.Ю. Бушуева [и др.] // Научно-практический журнал «Врач-аспирант» – 2013.

– № 5,2 (60). – C. 374–381.

4. Нехорошкина М.О. Анализ структуры и распространённости врождённых расщелин губы и/или нёба на территории Краснодарского края за период 1996 – 2012 гг. / М.О. Нехорошкина // Кубанский научный медицинский вестник Медицинский академический журнал. – 2013. – № 6 (141). – 134–138.

5. Нехорошкина М.О. Организация реабилитационных мероприятий при врождённых расщелинах губы и/или нёба в Краснодарском крае / М.О. Нехорошкина, Л.Е. Черкашина, А.В. Гонтмахер // Академический журнал Западной Сибири – 2013. – Т.9. – С. 5–6.

6. Нехорошкина М.О., Кариди А.В., Рыжкова А.В. Исследование кариотипов больных с врождённой расщелиной губы и/или нёба в Краснодарской популяции / М.О. Нехорошкина, А.В. Кариди, А.В. Рыжкова // Современная наука: актуальные проблемы и пути их решения – 2013. – № 2. – С.52–54.

7. Нехорошкина М.О. Клинико-генеалогический анализ при дифференциальной диагностике врождённых расщелин губы и нёба / М.О. Нехорошкина // Международный журнал экспериментального образования – 2013. – №5. – С. 432–434.

8. Нехорошкина М.О. Исследование ассоциации полиморфизма G590A гена NAT2 с развитием врождённых расщелин губы и нёба в Краснодарском крае. / М.О. Нехорошкина, О.Ю. Бушуева, А.В. Полоников [и др.] // Курский научнопрактический вестник «Человек и его здоровье» – 2013. – № 4. – С. 33-38.



 

Похожие работы:

«Бантыш Ольга Борисовна Биосинтез пептид-нуклеотидного антибиотика микроцина С и его гомологов Специальность 03.01.03 молекулярная биология АВТОРЕФЕРАТ Диссертация на соискание учной степени кандидата биологических наук Москва Работа выполнена в лаборатории молекулярной генетики микроорганизмов Федерального государственного бюджетного учреждения науки Института биологии гена Российской академии наук. Научный руководитель: Северинов Константин Викторович, доктор биологических...»

«НЕСТЕРОВ Александр Александрович УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИИ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ВАКЦИН ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОГО РИНОТРАХЕИТА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА 06.02.02 «Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология» Aвтореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Владимир – 2015 Работа выполнена в федеральном государственном бюджетном учреждении «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГБУ «ВНИИЗЖ»)....»

«НИКИТИНА ЕКАТЕРИНА ГЕННАДЬЕВНА ПАТТЕРН ЭКСПРЕССИИ микроРНК ПРИ ПРЕДОПУХОЛЕВЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ И РАКЕ ГОРТАНИ 14.01.12 – онкология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Томск Работа выполнена в федеральном государственном бюджетном научном учреждении «Томский научно-исследовательский институт онкологии» и Национальном исследовательском Томском государственном университете Научный руководитель: доктор биологических наук Литвяков Николай...»

«Фомина Светлана Григорьевна ПЕЙЗАЖ ЭНТЕРОВИРУСОВ У ДЕТЕЙ С ОСТРОЙ КИШЕЧНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ 03.02.02. – вирусология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва – 2013 Работа выполнена в Федеральном бюджетном учреждении науки «Нижегородский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. академика И.Н. Блохиной» Роспотребнадзора. Новикова Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Надежда Алексеевна...»

«Фомина Светлана Григорьевна ПЕЙЗАЖ ЭНТЕРОВИРУСОВ У ДЕТЕЙ С ОСТРОЙ КИШЕЧНОЙ ИНФЕКЦИЕЙ 03.02.02. – вирусология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва – 2013 Работа выполнена в Федеральном бюджетном учреждении науки «Нижегородский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. академика И.Н. Блохиной» Роспотребнадзора. Новикова Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Надежда Алексеевна...»

«СУДНИК Светлана Александровна ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ РЕПРОДУКТИВНЫХ СТРАТЕГИЙ КРЕВЕТОК 03.00.16 Экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Калининград 2008 Работа выполнена в Федеральном государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Калининградский государственный технический университет» Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Буруковский Рудольф Николаевич Официальные...»

«Сафранкова Екатерина Алексеевна КОМПЛЕКСНАЯ ЛИХЕНОИНДИКАЦИЯ ОБЩЕГО СОСТОЯНИЯ АТМОСФЕРЫ УРБОЭКОСИСТЕМ Специальность 03.02.08 – Экология (биологические науки) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учной степени кандидата биологических наук Брянск 2014 Работа выполнена на кафедре экологии и рационального природопользования ФГБОУ ВПО «Брянский государственный университет имени академика И.Г. Петровского» Научный руководитель: доктор сельскохозяйственных наук, профессор Анищенко...»

«Степина Елена Владимировна ЭКОЛОГО-ФЛОРИСТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СТЕПНОЙ РАСТИТЕЛЬНОСТИ ЮГО-ЗАПАДНЫХ РАЙОНОВ САРАТОВСКОЙ ОБЛАСТИ 03.02.08 – экология (биологические науки) Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Саратов – 2015 Работа выполнена в Балашовском институте (филиале) федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Саратовский государственный университет имени Н.Г....»

«АФГОНОВ МУХАММАДАЛИ МИРАЛИЕВИЧ Системно-деятельностный подход к гуманитарно-краеведческой воспитательной деятельности в общеобразовательных учреждениях Республики Таджикистан 13.00.01 общая педагогика, история педагогики и образования (педагогические науки) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора педагогических наук Душанбе 2015 Работа выполнена на общеуниверситетской кафедре педагогики Таджикского национального университета доктор педагогических наук,...»

«ШАХТАМИРОВ Иса Янарсаевич КАРИОПАТОЛОГИЯ У ЖИВОТНЫХ В ЗОНАХ СТОЙКИХ ОРГАНИЧЕСКИХ ЗАГРЯЗНИТЕЛЕЙ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ 03.02.07 – генетика АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Санкт-Петербург Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении высшего профессионального образования «Чеченский государственный университет» Научный консультант: доктор биологических наук, профессор Кравцов Вячеслав Юрьевич Официальные оппоненты:...»

«ХАФИЗОВ ТОИР ДАДАДЖАНОВИЧ ОСОБЕННОСТИ РОСТ, РАЗВИТИЕ И ПРОДУКТИВНОСТИ ЧАЙОТА (SECHIUM EDULE L. – CHAYOTE) В УСЛОВИЯХ ГИССАРСКОЙ ДОЛИНЫ ТАДЖИКИСТАНА Специальность: 06.01.01 – общее земледелие, растениеводство Автореферат Диссертации на соискание ученой степени кандидата сельского хозяйства Душанбе 2015 Работа выполнена на кафедре плодоовощеводства и виноградарства, Таджикского аграрного университета им. Ш.Шотемур. Научный руководитель: Гулов Саидали Маъмурович, доктор...»

«Овчинникова Зинаида Алексеевна ГИГИЕНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ УСЛОВИЙ ОБУЧЕНИЯ НА ЗДОРОВЬЕ ШКОЛЬНИКОВ МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИХ КЛАССОВ 14.02.01 – гигиена Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва 2015 Работа выполнена на кафедре гигиены государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н. И. Пирогова» Минздрава России Научный...»

«УСАЧЕВ ИВАН ИВАНОВИЧ Микробиоценоз кишечника, его оценка и контроль у овец, целенаправленное формирование у новорожденных ягнят 06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук Москва-2014 Работа выполнена в ФГБОУ ВПО «Брянская государственная сельскохозяйственная академия», на кафедре терапии, хирургии, ветеринарного акушерства и...»

«СОФРОНОВА Октябрина Николаевна МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ И ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ШТАММОВ ИЕРСИНИЙ, ЦИРКУЛИРУЮЩИХ НА ТЕРРИТОРИИ ЯКУТИИ 03.02.03 – микробиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Санкт-Петербург – 2014 Работа выполнена в Федеральном бюджетном учреждении науки «СанктПетербургский научноисследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Пастера» Научный руководитель: Заслуженный деятель науки РФ, доктор...»

«ГУТОР Сергей Сергеевич ПРОГНОСТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ И МОЛЕКУЛЯРНЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ СОСТОЯНИЯ МИОКАРДА ДЛЯ ИСХОДОВ ХИРУРГИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ ИШЕМИЧЕСКОЙ КАРДИОМИОПАТИЕЙ 03.03.04 – клеточная биология, цитология, гистология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Томск – 2014 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Сибирский государственный медицинский...»

«БАММАТОВ ДЖАНБОЛАТ МУСАЕВИЧ СОЧЕТАННЫЕ ПРИРОДНЫЕ ОЧАГИ ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ В РАВНИННО-ПРЕДГОРНОЙ ЧАСТИ РЕСПУБЛИКИ ДАГЕСТАН 14.02.02 – эпидемиология 03.02.03 микробиология Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских наук Ставрополь – 2013 Работа выполнена в Федеральном казнном учреждении здравоохранения «Дагестанская противочумная станция» и Федеральном казнном учреждении здравоохранения «Ставропольский научно-исследовательский противочумный...»

«Бирюкова Лидия Игоревна Диагностика, клинико-морфологическая характеристика и лечение накожного папилломатоза и дерматоза внутренней поверхности ушной раковины у лошадей 06.02.04 – ветеринарная хирургия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Москва 2015 Работа выполнена в ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии МВА имени К.И. Скрябина» Научный руководитель: Сотникова Лариса Федоровна, доктор...»

«Мечов Максим Павлович КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РЕПАРАТИВНОГО ОСТЕОГЕНЕЗА ПРИ ИМПЛАНТАЦИИ ФИКСАТОРОВ С ПОКРЫТИЕМ НА ОСНОВЕ МЕТАЛЛОВ IV ГРУППЫ 06.02.04 – ветеринарная хирургия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Москва – 2015 Работа выполнена на кафедре ветеринарной хирургии ФГБОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана» Научный руководитель Шакирова Фаина Владимировна доктор...»

«АЛЕКСЕЕВА Татьяна Васильевна БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ ПОТЕНЦИАЛ ФРАКЦИЙ ГЛУБОКОЙ ПЕРЕРАБОТКИ НИЗКОМАСЛИЧНОГО СЫРЬЯ: БАЛАНСИРОВАНИЕ ПНЖК СОСТАВА, ПРОГНОЗИРОВАНИЕ КАЧЕСТВА, НОВЫЕ ТЕХНОЛОГИИ Биотехнология пищевых продуктов и биологических 05.18.07 – активных веществ Технология и товароведение пищевых продуктов 05.18.15 – и функционального и специализированного назначения и общественного питания АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора технических наук Воронеж Работа...»

«ВАНГЕЛИ СЕРГЕЙ ВАЛЕРЬЕВИЧ СРАВНИТЕЛЬНАЯ УЛЬТРАСТРУКТУРНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА КУЛЬТУР КЛЕТОК, ХРОНИЧЕСКИ ИНФИЦИРОВАННЫХ ВИРУСОМ ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА 06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Москва – 201 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном научном учреждении научно-исследовательский институт...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.