WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 

Pages:   || 2 | 3 |

«РАЗРАБОТКА НОВЫХ СРЕДСТВ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЭШЕРИХИОЗОВ ТЕЛЯТ И ПОРОСЯТ ...»

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

СЕТДЕКОВ РИНАТ АБДУЛХАКОВИЧ

РАЗРАБОТКА НОВЫХ СРЕДСТВ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ

ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЭШЕРИХИОЗОВ ТЕЛЯТ И

ПОРОСЯТ

06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология,

микология с микотоксикологией и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

Казань - 2015

Работа выполнена в отделе биологической безопасности Федерального государственного бюджетного учреждения «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности»

(ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ») (г. Казань)

Научный консультант: Юсупов Расых Халиуллович доктор ветеринарных наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ и РТ

Официальные оппоненты:

Сочнев Василий Васильевич, доктор ветеринарных наук, членкорреспондент РАН, профессор, заслуженный деятель науки РФ, заведующий кафедрой эпизоотологии и инфекционных болезней ФГБОУ ВПО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия»

Петрянкин Федор Петрович, доктор ветеринарных наук, профессор, старший научный сотрудник лаборатории бионанотехнологии ФГБОУ ВПО «Чувашская государственная сельскохозяйственная академия»

Золотухин Сергей Николаевич, доктор биологических наук, профессор, профессор кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы ФГБОУ ВПО «Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия имени П.А.Столыпина»

Ведущая организация: Государственное научное учреждение «Научноисследовательский ветеринарный институт Нечерноземной зоны Российской Федерации» (ГНУ НИВИ НЗ РФ), г. Нижний Новгород

Защита состоится «23» октября 2015 года в 14.00 часов на заседании диссертационного совета Д 220.034.01 при федеральном государственного бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана» (420074, г. Казань, Сибирский тракт, 35).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке и на сайте федерального государственного бюджетного http://www.ksavm.senet.ru/ образовательного учреждения высшего профессионального образования «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»

Автореферат разослан «____»__________2015г.

Ученый секретарь диссертационного совета Трофимова Елена Николаевна

1

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы исследования. Одной из сложнейших проблем, стоящих перед ветеринарной наукой и практикой, являются желудочнокишечные болезни новорожденных телят и поросят инфекционной природы, которые имеют широкое распространение, сопровождаются высокой смертностью и наносят значительный экономический ущерб.

Установлено, что ведущее место в этиологии инфекционной диареи телят и поросят принадлежит энтеропатогенным штаммам Escherichia coli, обладающих широким набором серовариантов, продуцирующим адгезивные антигены К99, К88, F41, 987Р, А20, которым и принадлежит ведущая роль в развитии эшерихиозов (Гаффаров Х.З. и др., 2002; Зароза В.Г., 1991;

Иванов А.В. и др., 2006; Попов Е.М. и др., 1991; Светоч Е.А. и др., 1997;

Тугаринов О.А. и др., 1991; Шахов А.Г., 2003; Т. Asai, 2011). Немаловажное значение в развитии эшерихиозов среди молодняка играют комплекс предрасполагающих и сопутствующих факторов которым относят: нарушения обмена веществ, низкий уровень естественной резистентности и иммунологической реактивности у коров и свиноматок вследствие дисбаланса питательных веществ в рационах, содержание животных при неудовлетворительных параметрах микроклимата, нарушение гигиены проведения отелов и опросов, послеродовая патология у маточного поголовья, несвоевременная выпойка молозива новорожденным телятам, гипогалактия у свиноматок (Джупина С.И., 2001; Мищенко В.А., 2005; Папуниди К.Х., 2000;

Петрянкин Ф.П., 2008; Сисягина Е.П., 2010; Смирнов А.М., 2010).

В настоящее время главным направлением борьбы с эшерихиозами является активная иммунизация стельных коров и супоросных свиноматок, с молозивом и молоком от которых специфические антитела поступают в организм новорожденных. Для этих целей разработаны и используются противоэшерихиозные вакцины (Дворкин Г.Л. и др., 1985; Иванов А.А. и др., 2012; Лавровская В.М. и др., 1993; Малахов Ю.А. и др., 1993; Новак Д.Д. и др., 1996; Пирожков М.К. и др., 1994; Спиридонов Г.Н. и др., 2011).

Следует отметить, что иммунизация стельных коров и супоросных свиноматок существующими вакцинами в ряде случаев не обеспечивает выраженный колостральный иммунитет у нарождающего молодняка (Сидоров М.А. и др., 2008). Это по мнению ряда авторов (Гаффаров Х.З. и др., 2002; Зароза В.Г., 1991; Шахов А.Г. и др., 1995) связано с наличием у больных телят и поросят широкого набора серовариантов возбудителя E. coli.

Например, у больных телят обнаружены более 165 вариантов О-антигена, 55 Н-антигена и 90 вариантов К-антигена (Гаффаров Х.З. и др., 2002; Зароза В.Г., 1991). При типизации возбудителя колибактериоза выделенных от больных диареей поросят чаще всего обнаруживали эшерихии следующих серовариантов: О1, О2, О4, О8, О15, О26, О78, О103, О119, О126, О137, О138, О139, О141, О147, О149, а также А20, К99, К88, 987Р, F41 (Шахов А.Г. и др., 1995). В связи с этим для противоинфекционной защиты новорожденных телят и поросят проводят пассивную иммунизацию путем парентерального и орального введения им специфических гипериммунных сывороток, иммуноглобулинов (Гайзатуллин Р.Р., 2012; Гаффаров, Х.З. и др., 1996;

Малахов, Ю.А. и др., 1993; Сисягин, П.Н. и др., 2001; Федоров Ю.Н. и др., 2009). Следует однако отметить, что в лечебных сывороток биофабричного изготовления в ряде случаев наблюдается низкий титр антител, особенно к адгезивным антигенам К88, К99, 987Р и F41, а также ТЛ- и ТСэнтеротоксинам. Поэтому имеется необходимость усовершенствования существующих и создания нового поколения вакцин против эшерихиозов, а также лечебных средств на основе современных достижений биотехнологии и иммунологии. При этом получение и очистка специфических и иммуногенных белков из E. coli и изыскание средств и способов повышения их антигенной активности, позволяющих увеличить продолжительность и напряженность колострального иммунитета у телят и поросят, является весьма актуальной.

Степень разработанности темы. Значительным достижением в области изучения антигенной структуры E. coli стало обнаружение у микроба образований, играющих роль органа адгезии бактерии к клеткам макроорганизма, названными адгезивными фимбриями или пили (Jann K. et al., 1987; Jsaacson R., 1986; Kuzuya M., 1988; Nataro J.P. et al., 1987).

Применение вакцины против колибактериоза из очищенных пилей типа 1, содержащей антигены К88, К99 и 987Р приводило к существенному снижению смертности от эшерихиоза поросят и телят (To S.C. e.a., 1983; 1984).

Однако опыт создания и использования субъединичных вакцин против эшерихиоза в нашей стране небольшой, что диктует необходимость разработки и всесторонней оценки эффективности таких вакцин (Светоч Е.А и др., 1997).

С целью повышения эффективности вакцинопрофилактики и лечебных средств ряд исследователей рекомендуют применять их в комбинации с продуктами пчеловодства (Андреева А.В., 2003; Исмагилов А.М. и др., 2000;

Кивалкина В.П., 1948; Кивалкина В.П., 1948; Кивалкина В.П. и др., 1991;

Маннапова Р.Т. и др., 2000; Панин А.Н. и др., 2000; Тетерев И.И., 1998).

Как видно проблема поиска новых, высокоэффективных средств и способов повышения антигенной активности вакцины против эшерихий, а также изучение иммуностимулирующих и иммуномодулирующих свойств апипрепаратов в сочетании с вакцинными и лечебными средствами является весьма актуальной.

Все вышеизложенное послужило основанием для проведения исследований по разработке композиционного препарата, включающего глобулины, продукты пчеловодства, продукты метаболизма пробиотических микроорганизмов и природные адсорбенты, а также полиантигенного комплекса на основе пилезных (фимбриальных) антигенов в сочетании с продуктами пчеловодства и высокодисперсным природным адсорбентом.

Цель и задачи. Целью исследований явилось разработка технологии получения новых средств специфической профилактики и лечения телят и поросят от эшерихиоза.

Для выполнения вышеуказанной цели были поставлены следующие задачи:

- провести эпизоотологический мониторинг болезней свиней и крупного рогатого скота в Нижегородской области;

- теоретически обосновать возможность и необходимость получения лечебно-профилактических средств нового поколения;

- разработать полиантигенный комплекс на основе пилезных антигенов и иммуномодуляторов для профилактики эшерихиоза телят и поросят;

- разработать иммунотерапевтический композиционный препарат на основе иммуноглобулинов, апифитопродуктов и минеральных сорбентов;

- определить токсичность и безвредность полученных лечебнопрофилактических средств на лабораторных животных;

провести оценку лечебно-профилактической эффективности разработанных средств на лабораторных и сельскохозяйственных животных;

- изучить формирование противоэшерихиозной защиты животных на фоне применения разработанных лечебно-профилактических средств;

- разработать наборы препаратов и инструкции по их применению для выявления антител к бактериям E. coli методом иммуноферментного анализа, реакции непрямой гемагглютинации и реакции бентонитовой флокуляции.

Научная новизна. Теоретически обоснована и экспериментально подтверждена возможность получения противоэшерихиозной субъединичной вакцины на основе пилезных антигенов К88, К99, 987Р и F41, выделенных из энтеротоксигенных штаммов E. coli методом афинной хроматографии.

Однократное подкожное введение субъединичной четырехпилезной вакцины стельным коровам и супоросным свиноматкам индуцирует в их организме выработку специфических антител с последующей передачей специфических антител молозивом новорожденным телятам и поросятам. Колостральный иммунитет обеспечивает сохранность телят и поросят в 90-92,8% случаях в очаге колибактериоза. С учетом патогенеза эшерихиозной инфекции разработан лечебно-профилактический препарат «Пабисорб» на основе специфических глобулинов, бифидогенных и сорбционно-детоксикационных средств. Показано, что лечебно-профилактическое действие «Пабисорба»

реализуется путем гемо- и миелопротекторного действия иммуноглобулинов, а также антиоксидантного и антибактериального действия апипродуктов, бифидогенного и детоксицирующего действия микрочастиц природного минерала-монтмориллонита.

Разработаны наборы препаратов для выявления антител в сыворотке крови к бактериям E. coli методом иммуноферментного анализа (ИФА), реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) и реакции бентонитовой флокуляции. По результатам исследований подана заявка на изобретение №2014118171 от 5 мая 2014 года.

Теоретическая и практическая значимость. Полученные данные указывают на фундаментальное значение антигенной структуры возбудителя эшерихиоза, в которой ключевую роль играют пилезные антигены, обеспечивающие в оптимальных количественных соотношениях в полиантигенном комплексе индуцировать выработку специфических антител в организме стельных коров и супоросных свиноматок с последующей передачей их молозивом новорожденным телятам и поросятам. Установленная возможность получения полиантигенного комплекса с иммуномодулятором нового поколения – природным биополимером – апизаном открывает перспективу использования последнего в качестве иммуностимулирующего, но и активатора иммунофармакологического действия композиционного противоэшерихиозного лечебного препарата.

На основании собственных исследований разработаны:

1. Методические указания по диагностике, профилактике и лечению колибактериоза телят и поросят с применением средств, полученных на основе бионанотехнологии (в порядке производственного испытания). Утв. академик

– секретарем Отделения ветеринарной медицины Российской академии сельскохозяйственных наук, академиком РАСХН А.М. Смирновым 17.10.2013г.

2. Инструкция по применению субъединичной вакцины против колибактериоза телят и поросят (в порядке производственного опыта). Утв.

директором ФГБУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», член-корр. РАН, профессором А.В. Ивановым и согласована начальником ГУВ Кабинета Министров Республики Татарстан А.Г. Хисамутдиновым.

3. Инструкция по применению «Набора препаратов для выявления антител к бактериям Echerichia coli методом иммуноферментного анализа».

Утв. директором ФГБУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», член-корр. РАН, профессором А.В. Ивановым и согласована начальником ГУВ Кабинета Министров Республики Татарстан А.Г. Хисамутдиновым.

4. Технические условия на набор препаратов для выявления антител к бактериям Echerichia coli методом иммуноферментного анализа (в порядке производственного испытания) Утв. директором ФГБУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», член-корр.

РАН, профессором А.В. Ивановым и согласована начальником ГУВ Кабинета Министров Республики Татарстан А.Г. Хисамутдиновым.

5. Инструкция по применению «Набора препаратов для выявления антител к бактериям Echerichia coli методом реакции непрямой гемагглютинации». Утв. директором ФГБУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», член-корр.

РАН, профессором А.В. Ивановым.

6. Инструкция по применению «Набора препаратов для выявления антител к бактериям Echerichia coli методом реакции бентонитовой флокуляции». Утв. директором ФГБУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», член-корр.

РАН, профессором А.В. Ивановым.

Методология и методы исследований. Методологической основой проведенных исследований явилось обоснование конструирования вакцинного полиантигенного комплекса на основе пилезных антигенов и иммуномодуляторов для профилактики эшерихиоза телят и поросят, иммунотерапевтического композиционного препарата на основе иммуноглобулинов, апифитопродуктов и минеральных сорбентов.

Объектом исследований являлись крупный рогатый скот и свиньи различного возраста (в том числе новорожденные телята и поросята), кровь, внутренние органы мышей, белых крыс, кроликов, а также микроорганизмы и первичные культуры лимфоцитов.

Исследования проводились с использованием следующих методических подходов:

1. Выделение и очистка пилезных антигенов из токсигенных E. coli методом афинной хроматографии.

2. Микроскопические – определение с использованием светового микроскопа тинкториальных и морфологических свойств бактерий в мазках отпечатках из проб органов и культур бактерий.

3. Бактериологические – изучение культуральных характеристик бактерий с использованием методов выделения чистых культур.

4. Биологические – иммунизация разработанными комплексными антигенами и заражение референтными штаммами E. coli лабораторных животных и изучение иммунологических показателей у иммунизированных сельскохозяйственных животных.

5. Серологические – разработка и постановка ИФА, РНГА, реакции бентонитовой флокуляции и РА, а также выделение гисто- и сывороточных иммуноглобулинов в соответствии с общепринятыми в иммунологии методами.

6. Токсикологические – в процессе составления многокомпонентных вакцинных и лечебных препаратов определяли их совместимость, безвредность, токсичность, раздражающие свойства в соответствии с общепринятыми в токсикологии, иммунологии, вакцинно-сывороточном деле методами.

7. Статистические – обработку экспериментально полученного цифрового материала проводили методом вариационной статистики с применением критерия достоверности по Стьюденту на персональном компьютере с использованием программного пакета «Microsoft Excel 2007», «Microsoft Word 2007».

Положения, выносимые на защиту:

- Субъединичная противоэшерихиозная вакцина разработанная на основе пилезных антигенов К88, К99, 987Р, F41, аписогенного иммуностимулятора и минерального иммуносорбента индуцирует выработку специфических антител в организме стельных коров и супоросных свиноматок.

- Колостральный иммунитет обеспечивает сохранность телят и поросят в 90-91,8% случаях в очаге колибактериоза.

Композиционный инъекционный препарат «Пабисорб»

сконструированный с использованием специфического иммуноглобулина, этанолового экстракта биологически активный кормовой добавки «ВитаФорце М», метаболизма B.bifidum и микрочастицы минерального иммуносорбента – монтмориллонита является нетоксичным и безвредным.

- Однократное подкожное введение инъекционного препарата «Пабисорб» в дозах 1,0-1,5 см3 оказывает выраженное профилактическое действие при колибактериозе телят, предохраняя от заболевания 60-80% животных.

- Разработаны и утверждены методические указания по диагностике, профилактике колибактериоза телят и поросят с применением средств, полученных на основе бионанотехнологии, диагностические наборы для выявления специфических антител к E. coli в сыворотке крови животных методом ИФА, РНГА и реакции бентонитовой флокуляции (РБФ).

Степень достоверности и апробация материалов диссертации.

Исследования выполнены на большом поголовье лабораторных и сельскохозяйственных животных. Проведен статистический анализ полученного материала с использованием компьютерных программ. Научные выводы и практические предложения теоретически и экспериментально обоснованы, что подтверждается фактическими данными. Они логически вытекают из содержания работы, согласуются с поставленными целью и задачами.

Основные результаты исследований доложены, обсуждены и одобрены на отчетных сессиях ученого Совета ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» по рассмотрению отчетов НИР (Казань, 2008-2014), на Международных и Всероссийских научно-практических конференциях (Казань, 2011, 2012, 2013, 2014).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 19 научных работ, в том числе 15 статей в журналах, рекомендованных ВАК России, 5 нормативных документа.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 313 страницах, состоит из введения, обзора литературы, основной части, заключения, списка сокращенных терминов, списка использованной литературы и 8 приложений.

Работа иллюстрирована 44 таблицами. Список литературы включает 392 источника, в том числе 88 на иностранных языках.

2 ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

2.1 Материалы и методы исследования Работа выполнялась в 2007-2014 гг. в отделе биобезопасности ФГБУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности» по заданию «Эпизоотический мониторинг» № госрегистрации 01200202602, 01200202604, а также в ветеринарных лабораториях области, в условиях хозяйств Краснооктябрьского, Сеченовского районов и непосредственно в личных хозяйствах граждан Краснооктябрьского района Нижегородской области.

Отдельные этапы работы были выполнены с участием профессора Низамова Р.Н., кандидатов наук Спиридонова Г.Н., Евстифеева В.В., Гумерова В.Г., которым выражаю искреннюю признательность.

2.1.1 Материалы Подопытные животные. В опытах было использовано 1438 животных, в том числе 355 белых мышей, 75 белых крыс, 47 кроликов, 634 новорожденных поросят, 90 новорожденных телят, 60 телят 2-4 мес. возраста, 155 свиноматок, 72 гол. взрослого крупного рогатого скота.

Штаммы микроорганизмов: производственные штаммы E. coli «ПЛ-6» № 1154115 – эшерихиозной диареи поросят; 3 эпизоотических штамма E. coli «УК-2» № 1153/15 – возбудитель диареи поросят; штамм «КВ-1» № 1156/15 – возбудитель эшерихиоза поросят; штамм «ПЗ-3» № 378 – возбудитель эшерихиоза телят, полученные из коллекции штаммов лаборатории по изучению возбудителей особо опасных болезней ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»;

коммерческие производственные штаммы B. subtilis (шт. 3) и B. bifidum (шт.

1). Для определения колициногенности производственного и штаммовизолятов использовали индикаторные штаммы E. coli К-12, Ж-116, для определения лизоцимной активности использовали стандартную культуру M. lysoidecticus.

Антигены: субъединичные антигены К88, К99, 987Р и F41, выделенные из культур E. coli, эндо- и энтеротоксин E. coli, вакцины против ротакоронавирусного энтерита (ТГС) и эшерихиозной диареи поросят инактивированная гидроокисьалюминиевая, формолвакцина поливалентная гидроокисьалюминиевая (ФВ ПВ ГОА).

Сыворотки и антисыворотки: антиадгезивные, антитоксические, агглютинирующие, коммерческие диагностические наборы сывороток к антигенам E. coli, моновалентная антиколибациллезная, бивалентная колипаратифозная сыворотка, антисыворотка к ассоциированному полиантигенному комплексу вакцины против рота-коронавирусного энтерита и эшерихиозной диареи поросят, 12 видов элюатов из органов и тканей, подвергнутых эшерихиозной интоксикации животных.

Кроме того, в качестве одного из новых иммуномодуляторов мы использовали апизан (пчелозан) из подмора пчел полученный в отделе радиобиологии ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ». Апизан представляет собой природный биополимер – N-ацетил-2-амино-2-диокси-D-глюкозамин, лиофилизированный порошок светло-коричневого цвета, растворимый в кислой среде при рН 5,5, влажность – 8-10%, содержание золы – 1-2%, протеина 1-2%, вязкость – 5-10сП5.

2.1.2 Методы исследований Исходными материалами служили результаты собственных исследований и данные ветеринарной отчетности. При этом учитывали распространение болезни, заболеваемость, смертность, летальность, возрастные особенности и сезонную динамику, бактерионосительство и экономический ущерб, наносимый колибактериозом. Основные эпизоотологические показатели определяли по методике И.А. Бакулова с соавт. (1975). Распространение болезни, сроки заболевания, сезонную динамику регистрировали в каждом хозяйстве с учетом условий содержания и выращивания поросят и телят.

Характер проявления и клиническое течение колибактериоза поросят и телят наблюдали у 233 больных животных различных возрастов.

Патологоанатомические изменения изучали при вскрытии 153 трупов поросят и телят, в условиях санитарной бойни хозяйства по общепринятой методике.

Диагноз на колибактериоз устанавливали на основании данных эпизоотологического обследования, клинических признаков, патологоанатомических изменений с проведением бактериологического исследования, материалом для которого служили трупы павших и вынужденно убитых поросят и телят.

Бактериологические исследования патологического материала проводили согласно «Методическим указаниям по бактериологической диагностике кишечной инфекции молодняка животных, вызываемой патогенными энтеробактериями» (1991). Видовую принадлежность микроорганизмов определяли в соответствии с рекомендациями, изложенными в определителе зоопатогенных микроорганизмов.

Выделение культур кишечной палочки из патологического материала от поросят и телят, павших от колибактериоза проводили по методике М.Н. Еремеева (1965). При этом содержимое кишечника, мезентериальных лимфатических узлов (посмертно), фекалии (прижизненно) суспендировали в физиологическом растворе и засевали на среду Эндо, а затем выросшие колонии E.coli - в кровяной агар и бульон. По окраске (кровяно-лаковый цвет) бульонной культуры определяли гемолитические свойства изучаемого штамма. Посевы кишечного содержимого первоначально засевали на среду Эндо с последующим пересевом изолированных колоний в бульон с кровью.

У выделенных штаммов кишечной палочки определяли морфологические, культуральные, биохимические, гемолитические, серологические и патогенные свойства. Культуральные свойства гемолитических штаммов кишечной палочки изучали по результатам роста на МПБ, МПА, ПЖА (pH=7,2-7,4) и агаре Эндо после инкубирования посевов в термостате в течение 18-24 ч при температуре 37оС. Тинкториальные и морфологические свойства выделенных культур устанавливали путем микроскопирования мазков из агаровых и бульонных культур, окрашенных по Граму. Морфологию полученных колоний изучали микроскопией в косопадающем свете. Для этого исследуемые культуры засевали по методу Дрегальского на поверхность 1,5%ного просветленного МПА.

Для изучения серологических свойств кишечной палочки использовали стандартные наборы агглютинирующих О-коли сывороток, выпускаемых Армавирской биофабрикой, состоящих из 4 поливалентных и 30 моновалентных сывороток к серовариантам 01, 02, 04, 08, 09, 015, 018, 020, 026, 033, 035, 041, 055, 078, 086, 0101, 0103, 0111, 0115, 0117, 0119, 0126, 0127, 0137, 0138, 0139, 0141, 0142, 0147, 0149. Реакцию агглютинации ставили согласно наставлению по их применению.

Патогенность культур кишечной палочки с определением LD50 устанавливали на белых мышах живой массой 14-16 г путем внутрибрюшинного введения смыва суточной агаровой культуры. Культуры считались патогенными в случае гибели одной или более мышей в первые 4 суток после заражения.

Для определения LD50 готовили последовательные десятикратные разведения из 500 млн микробной взвеси, из каждого разведения по 0,5 мл взвеси вводили внутрибрюшинно 6 мышам. Результаты учитывали в течение 7 дней. Для расчета LD50 использовали метод Рида-Менча.

Изолирование и очистку адгезивных антигенов осуществляли согласно методике, разработанной Kuzuya M. et al. (1988).

В состав вакцины кроме адгезивных антигенов (пили) вводили иммуномодуляторы (Т-активин, а также апизан, полученный из подмора пчел).

Методы и способы получения вакцины и специфических иммуноглобулинов, схемы их применения изложены в разделе «Результаты исследований».

При изучении возможности усиления терапевтической эффективности испытуемых средств, с целью составления многокомпонентных смесей и композиций на основе веществ фито-зоо-микробного и минерального происхождения, определяли их совместимость, безвредность, токсичность, раздражающие свойства, эмбриотоксичность и тератогенность в соответствии с общепринятыми в токсикологии, иммунологии, вакцинно-сывороточном деле сертифицированными методиками.

Гематологические и биохимические исследования крови проводили на анализаторе «Express Plus».

Содержание иммуноглобулинов А, М и G в крови животных и их концентрацию в молозиве коров и свиноматок определяли с помощью иммуноферментного анализатора «Униплан».

Количество Т-лимфацитов в крови определяли методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана, В-лимфоцитов – методом комплементарного розеткообразования с использованием стандартного кроличьего гемолизина в качестве комплемента – свежей сыворотки коров.

Бактерицидную активность сыворотки крови определяли по О.В. Смирновой и Т.А. Кузминой (1966), лизоцимную – по методу В.Г. Дорофейчук (1968), фагоцитарный индекс и число – по И.П. Кондрахину (1985).

Полученный в ходе экспериментов цифровой материал подвергали статистической обработке с использованием общепринятых параметрических методов, степень достоверности различий между сравнительными показателями определяли по критерию Стьюдента с применениями программ Microsoft Excel, Word 2007.

2.2 Состояние и тенденции развития животноводства в Нижегородской области РФ Результаты изучения состояния и тенденции развития животноводства в Нижегородской области РФ в динамике показало, что Нижегородская область является одним из крупных составных частей РФ как в плане производства продуктов растениеводства, так и животноводства. Здесь сохраняются основные традиционные отрасли животноводства: молочное скотоводство, свиноводство, развиваются птицеводство и овцеводство. Впервые за многие годы изменилась тенденция к росту численности овцепоголовья в области.

Однако по состоянию на 01.01.2013 г. в области не преодолена тенденция снижения численности поголовья крупного рогатого скота и свиней, что обобщены в табл. 1.

–  –  –

Крупный рогатый скот (тыс. голов) 266,4 244,5 239,8 234,3 227,2 97,0 в т.ч. коров (тыс. голов) 106,1 100,1 100,3 99,6 97,8 98,2 свиньи (тыс. голов) 176,5 196,3 192,6 73,3 67,6 92,1 Приведенные данные в табл. 1 убеждают, что животноводство Нижегородской области, несмотря на реструктуризацию и определенную депрессию в своем развитии, продолжает оставаться важным сектором экономики, влияющим на социальные, экономические, трудовые и производственные ресурсы. Такие выводы в развитии животноводства в Нижегородской области весьма активно поддерживают в своих исследованиях Е.А. Колобов (2013), Л.В. Шилкина (2014), проводимых под руководством член-корреспондента РАН, профессора В.В. Сочнева.

Эпизоотологический мониторинг болезней свиней в 2.3 Нижегородской области Анализ падежа среди свинопоголовья осуществляли по отчетам государственных ветеринарных управлений районов области. По данным отчетов изучали причины падежа свиней от незаразных болезней. Анализ же падежа свиней от болезней инфекционного характера проводили на основании годовых отчетов межрайонных ветеринарных лабораторий и годовых отчетов ГУНО «Областная ветеринарная лаборатория». Учитывали данные ветеринарной и лабораторной отчетности за последние пять лет, то есть за 2006-2010 годы. Данные обобщены в табл. 2.

–  –  –

Анализ и математические расчеты данных в табл. 2 показали, что большая часть заболевания и падежа свиней в Нижегородской области приходится на болезни органов пищеварения (37,7-45,8%), дыхания (17,2-21,5%) и нарушения обмена веществ (12,1-26,5%), реже от других незаразных болезней.

Падеж в основном, происходит среди молодняка. На долю падежа свиней от инфекционных заболеваний приходится 6,8-12,2% от общего количества павших животных. В этом случае больший падеж также происходит среди молодняка (99,9%).

Сведения о количестве неблагополучных пунктов с 2006 по 2010 годы приведены в табл.3.

–  –  –

РРСС Как видно из табл. 3, наибольшее количество неблагополучных пунктов было зарегистрировано по колибактериозу и отечной болезни, чуть меньше сальмонеллезу и дизентерии. Больше всех неблагополучных пунктов при этом было в Арзамасском (10), Починковском (10), Ковернинском (8), Богородском (8), Выксунском (6), Борском (6), Воротынском (5), Володарском (5), Лысковском, Большемурашкинском, Уренском, Шахунском районах (по 4). В других районах – Бутурлинском, Дальнеконстантиновском, Семеновском, Кстовском, Пильнинском, Спасском, Павловском, Городецком, Дзержинском, Краснооктябрьском от 1-го до 3-х неблагополучных пунктов.

Для уточнения диагноза мы проводили микробиологические исследования патологического материала от павших поросят в хозяйствах разных форм собственности Краснооктябрьского и Большеболдинского районов Нижегородской области.

Всего было исследовано 88 проб патологического материала от поросят с подозрением на колибактериоз. При этом в 56-и случаях была выделена культура кишечной палочки различных штаммов, а именно О8 - в 13-и, О26 - в 9-и, О101 и О115 - в 7-и, О20 - в 6-и, О139 и О78 - в 4-х, О140 и О137 в 3-х случаях и О111 в 1-ом случае. Кроме кишечной палочки в пробах патологического материала была обнаружена другая микрофлора. Так в 14-и случаях из 56-и (25%) выделялись кокки. В частности, в 5-и случаях выделялся Staphilococcus epidermidis, по 1-му случаю Staphylococcus aureus и Streptococcus suis. В остальных 7-и случаях идентификация кокковой микрофлоры не проводилась.

Кроме кокков в исследуемых материалах также выделялась Pasteurella haemolitica - 3 случая, Citrobacter freundii – 2 случая, в одном случае выделен Proteus vulgaris. Данные микробы выделялись как отдельно друг от друга, так и в ассоциации. При этом как правило было присутствие в исследуемом материале того или иного штамма кишечной палочки. По нашему мнению, выделенная секундарная микрофлора не вызывала самостоятельного заболевания, а лишь осложняла основное заболевание – колибактериоз.

Нами еще в 2003 году была предпринята попытка лечения отечной болезни поросят бактериофагами и антибактериальными препаратами.

Исследования проводились на неблагополучных по отечной болезни сельхозпредприятиях и личных подворьях граждан Краснооктябрьского района и в одном из сельхозпредприятий Большеболдинского района Нижегородской области. Для изучения профилактической эффективности отобрали левомицетина сукцинат натрия, неомицина сульфат и фуразолидон с сульфадимезином. Поросята послеотъемного возраста в количестве 167 голов были разделены на три опытные группы (95, 34 и 38 голов соответственно).

Для сравнения использовали три контрольные группы по 50 поросят в каждой.

Животным первой опытной группы вводили левомицетина сукцинат натрия внутримышечно 20 мг на 1 кг живой массы в течение 5 дней. Вторая группа поросят получала неомицина сульфат внутримышечно в дозе 10 тыс. ед. на 1 кг массы тела в течение 5 дней. Поросята третьей группы в течение 7 дней ежедневно с кормом получали 0,3 г фуразолидона и 0,5г сульфадимезина.

Изучение терапевтической эффективности антибактериальных препаратов проводили во время энзотии отечной болезни поросят на свинохозяйствах двух сельхозпредприятий Краснооктябрьского района. Для этого отобрали гентамицин, левомицетина сукцинат натрия и сульфадимезин с фуразолидоном. Для опыта создали три группы поросят отъемного возраста (210,118 и 64 головы соответственно), группу в 10 голов использовали как контрольную. Поросятам первой группы ежедневно вводили гентамицин внутримышечно в дозе 1 мг на 1 кг массы животного до полного выздоровления. Сто восемнадцати поросятам (вторая группа) вводили левомицетина сукцинат натрия в дозе 20 мг на 1кг массы тела внутримышечно 2 раза в день. Третьей группе поросят (64 головы) фуразолидон 0,3 г и сульфадимезин 0,5 г на голову давали с кормом в течение 7 дней. Животные контрольной группы антибактериальных препаратов не получали.

Для лечения и профилактики отечной болезни применяли также поливалентный бактериофаг (полифаг) – смесь фагов против колибактериоза, сальмонеллеза, пастереллеза, стафилококкоза, клебсиеллеза, протея и различных серологических вариантов гемолитической кишечной палочки.

Полифаг был сконструирован и изготовлен в научно-производственной лаборатории «Вак-ФАГ» Ульяновской сельскохозяйственной академии.

Исследования по применению полифага проводились в СПК «Черновское»

Большеболдинского района Нижегородской области – стационарно неблагополучном по отечной болезни. Вначале бактериофаг испытывали на новорожденных поросятах. Для этого было сформировано три группы поросят 10-15 дневного возраста по 100 голов в каждой, где третья группа служила контролем. Поросята первой группы получали полифаг внутрь в дозе 10 мл один раз в день три дня подряд, животные второй группы – внутримышечно в дозе 5 мл один раз в день в течение трех дней. Поросята третьей (контрольной) группы полифага не получали. Далее полифагом обрабатывали супоросных свиноматок и учитывали сохранность полученных от них поросят к десятому дню жизни и к моменту отъема. Для этого создали две группы свиноматок по 25 голов в каждой (первая – опытная, вторая – контрольная). Животным первой группы полифаг вводили внутримышечно в дозе 15 - 30 мл на голову 3 дня подряд. Свиноматки второй группы полифага не получали.

Терапевтическую эффективность поливалентного бактериофага испытывали на поросятах 50 – 60 дневного возраста в количестве 180 голов, сравнивая результаты с контрольной группой.

За животными опытных и контрольных групп вели постоянное наблюдение. Павших животных подвергали патологоанатомическому вскрытию для окончательной постановки диагноза. Среди поросят, где с профилактической целью применяли левомицетина сукцинат натрия сохранность составила 93,4 %, неомицина сульфат – 83 % и фуразолидон с сульфадимезином – 84,1 % при контроле 82 %. При лечении поросят, больных отечной болезнью, гентамицином сохранность составила 82 %, при лечении левомицетином сукцинат натрия – 80,5 %, при лечении сульфадимезином с фуразолидоном – 73,5 % при контроле 60 %. Проведенные многочисленные исследования и наблюдения позволяют сделать вывод, что лечение поросят при отечной болезни эффективно только в начальной стадии заболевания, а профилактика антибактериальными препаратами дает незначительный эффект.

При пероральном применении полифага для профилактики отечной болезни сохранность среди поросят 10-12 дневного возраста составила 91 %, при внутримышечном применении полифага - 97 % при контроле 84 %.

Сохранность поросят, полученных от свиноматок, обработанных полифагом, составила к десятому дню 97 %, к моменту отъема – 90,8 % при контроле 92 и 76,6 % к десятому дню жизни и к моменту отъема соответственно. Следует отметить, что полифаг дает хороший профилактический эффект как при пероральном, так и при внутримышечном применении, хотя пероральное применение дало несколько меньший эффект, а обработка полифагом супоросных свиноматок оказывает существенное положительное влияние на сохранность поросят.

2.4 Эпизоотологический и иммунологический мониторинг крупного рогатого скота в отдельных хозяйствах Нижегородской области Опыты проводили в условиях трех животноводческих хозяйств Краснооктябрьского района (ООО «Развитие», ООО «Трехозерское» и СПК «Пошатовский», а также в Областной ветеринарной лаборатории, Сергачской межрайонной ветеринарной лаборатории. Данные по поголовью и падежу скота в вышеперечисленных хозяйствах приведены в табл. 4.

Как видно из данных таблицы, наибольший падеж за три года происходил в ООО «Развитие». При этом гибель во всех хозяйствах наблюдалась как среди молодняка, так и среди взрослого поголовья. Условия содержания во всех 3-х хозяйствах примерно одинаковые: скот содержится в типовых коровниках.

Полы в стойлах деревянные, в навозных и кормовых проходах бетонные.

Освещение искусственное и естественное. Навоз убирается при помощи скребковых транспортеров. Содержание - привязное.

Таблица 4 - Поголовье и количество падежа скота в некоторых хозяйствах Краснооктябрьского района

–  –  –

Анализ имеющейся ветеринарной документации показал, что падеж в хозяйствах происходил на фоне нарушений условий содержания и кормления:

высокая скученность, совместное содержание животных различных половозрастных групп, загазованность и недостаточная освещенность помещений, отсутствие активного моциона в зимне-стойловый период, а также не сбалансированность рациона кормления по питательным веществам, микро- и макроэлементам, кормление недоброкачественными кормами.

Например, при исследовании зернофуража из ООО «Развитие» Сергачская межрайонная ветлаборатория неоднократно выявляла рост грибов из род Mucor и Aspergillus. При исследовании силоса из этого же хозяйства отмечали повышенное содержание масляной и пониженное содержание молочной кислот.

При патологоанатомическом вскрытии павших взрослых животных выявляли цирроз печени, геморрагическое воспаление слизистой оболочки сычуга, тонкого и толстого отделов кишечника, поражение легких и атрофию селезенки. При вскрытии павших телят в основном выявляли поражение желудочно-кишечного тракта. При бактериологическом исследовании патологического материала в разное время выделялись в основном E. coli диплококки, стрептококки и стафилококки. Выделенные бактерии были чувствительны к антибиотикам пенициллинового и тетрациклинового ряда.

Принимая во внимание роль и значение возникновения эшерихиозов, мы проводили исследования по определению показателей естественной резистентности у новорожденных телят. Для исследований в СПК «Пошатовский» подобрали 10 новорожденных телят 2-4 - дневного возраста без признаков заболевания желудочно-кишечного тракта, а также 10 голов телят того же возраста, но у них были признаки желудочно-кишечной болезни.

Для проведения исследований использовали цельную кровь и сыворотку крови подопытных животных. Результаты исследований показали, что абсолютное количество лейкоцитов было снижено у больных телят на 17,6%, лимфоцитов – на 32,7%, относительное количество Т-лимфоцитов – на 25,5% и В-лимфоцитов – на 51,0%, уровень IgG – на 24,5%, IgM – на 59,2% ниже среднего значения физиологической нормы. Показатели фагоцитарной активности лейкоцитов были ниже среднего показателя физиологической нормы на 16,8%, бактерицидной активности сыворотки крови – на 21,2%, а лизоцимной активности – на 59,7%.

При этом следует отметить, что у здоровых телят все эти же показатели были на нижней границе физиологической нормы.

Таким образом, клеточные и гуморальные факторы естественной резистентности новорожденных телят с желудочно-кишечными болезнями бактериальной этиологии, характеризуются снижением их содержания по сравнению с физиологической нормой. Учитывая, что характер и интенсивность иммунологических процессов могут быть модулированы с применением фармакологических и биологических препаратов мы изучали влияние ксимедона на иммунологический статус новорожденных телят.

Опыты проводили в условиях СПК «Пошатовский» на 20 новорожденных телятах с начальными признаками желудочно-кишечной болезни. Животных разделили на две группы по 10 гол.

Телятам первой группы на 2 и 4-й день после рождения вводили ксимедон из расчета 30 мг/кг живой массы. Предварительно готовили стерильный раствор ксимедона на фосфатном буфере MIS рН 7-7,4 в объеме 2 мл на каждое введение. Контрольной группе телят вводили фосфатный буфер в объеме 2 мл.

Для проведения исследований использовали цельную кровь и сыворотку крови подопытных животных.

Исследования на наличие инфекций (вирусных и бактериальных) в хозяйстве проводили в районной и областной ветеринарной лаборатории. При бактериологическом исследовании проб фекалий (ф) от 10 здоровых, 15 больных телят и из патологического материала (п/м) от 5 павших телят были выделены изоляты микобактерий (Proteus vulgaris – в 8,0% случаях (ф) и 20,0% (п/м), Clostridium perfringens – в 4,0% случаях, Stahylococcus aureus – в 8,0% (ф). E.coli выделены в 60,0% случаях (ф) и 40,0% (п/м) исследуемых проб, их культуры были типированы как группа 1, серотипы 02 2, 082. Установлено, что к «бензилпенициллину», «неомицину» и «гентамицину» чувствительны стафилококки и эшерихии. К окситетрациклину и тиумулину чувствительны стафилококки, эшерихии, клостридии и протеи. В результате исследования патологического материала у 5 павших телят на наличие рота-, короновирусной инфекции методом иммуноферментного анализа получены отрицательные результаты.

Для оценки естественной резистентности, клеточного и гуморального иммунитета выбирали 20 клинически здоровых телят 4-6-дневного возраста, из которых 10 телятам вводили ксимедон.

Установлено, что у новорожденных телят с признаками колибактериоза наблюдается снижение показателя естественной резистентности. У таких животных снижено абсолютное количество лейкоцитов, лизоцимная активность, содержание иммуноглобулинов IgG, IgM по сравнению физиологической нормы. Двукратное введение телятам ксимедона из расчета 30 мг/кг живой массы способствует восстановлению изученных показателей.

При этом заметно повышается бактерицидная и лизоцимная активность, фагоцитарная активность лейкоцитов, содержание общего белка и его фракций, что указывает на стимулирующую роль ксимедона на иммунобиологическую реактивность организма.

Результаты исследований представлены в табл. 5.

–  –  –

Для изучения передачи специфических антител от матери телятам опыты проводились в условиях хозяйств Краснооктябрьского района Нижегородской области: ООО «Трехозерское» и СПК им. 1 мая. В каждом хозяйстве в опыт были взяты по 3 коровы, иммунизированные против ПГ-3, ИРТ и ВД-БС.

Вакцина изготовлена в ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ». От каждой группы опытных коров были получены новорожденные телята. При этом для исследования сывороток крови у телят кровь брали до и после получения ими молозива.

Сыворотки крови коров-матерей и новорожденных телят исследовали на наличие антител к вирусам парагриппа-3 (ПГ-3) в реакции торможения гемагглютинации (РТГА), инфекционного ринотрахеита (ИРТ) и вирусной диареи болезни слизистых (ВД-БС) в иммуноферментном анализе в условиях ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» совместно с ведущим научным сотрудником, к.в.н.

Гумеровым В.Г.

Установлено, что в сыворотках крови коров-матерей антитела обнаруживались в различных титрах (табл. 6).

Анализ результатов исследований сывороток крови телят, до и после получения ими молозива от своих вакцинированных коров-матерей показал значительно отличающиеся данные.

Так, у новорожденных телят в ООО «Трехозерское» у двух телят до выпойки им молозива антитела отсутствовали, а после выпойки им молозива у двух антитела выявлены на уровне антител у матерей 1:160 и 1:400 к вирусам ПГ-3 и ВД-БС, а к возбудителю ИРТ они отсутствовали.

–  –  –

Приведенные данные подчеркивают справедливость мнения А.Г. Шахова (2001) о необходимости дальнейших, углубленных исследований по установлению прямой зависимости между уровнем неспецифической и специфической резистентности организма коров и внутриутробным развитием плода, состоянием здоровья новорожденных телят.

3 Теоретическое обоснование создания препаратов нового поколения для профилактики и лечения телят и поросят при колибактериозе В настоящее время в нашей стране и за рубежом производят большое количество вакцин против эшерихиоза, содержащих от 2 до 6 антигенов (цельноклеточные, ослабленные, инактивированные), приготовленные как из местных, так и из широкораспространенных штаммов; токсоиды (анатоксины);

субъединичные - из пили, выделенные из штаммов – продуцинтов указанных вакцин.

Для профилактики колибактериоза в США использовали трехвалентный бактерин, приготовленный из инактивированных энтеротоксигенных штаммов Е. coli, способных продуцировать К88, К99 и 987Р антигены. Смертность в вакцинированной группе была в 8 раз меньше, чем в контроле (То S. е.а., 1983). В ФРГ для профилактики эшерихиоза поросят применяли вакцину, содержащую 4 штамма с антигенами К88, К99, 987Р и F41, которая снижала процент больных диареей с 70 и 90 до 0 и 6 соответственно (Cieslidn M., 1989).

При вакцинации бактерин-токсоидом новорожденных поросят наблюдали стимуляцию продукции антител против наиболее важных пилезных антигенов (К88, К99, 987Р и F41) Е. coli (Huebert М. е.а., 1989). Применение вакцины против колибактериоза из очищенных пилей типа 1 и цельноклеточной вакцины, содержащей антигены К88, К99 и 987Р, а также пили типа 1, приводило к существенному снижению смертности от эшерихиоза поросят (То S. е.а., 1983).

Первая коммерческая вакцина из антигенов - пили была получена в Нидерландах в 1979 г. начали выпускать вакцину против диареи поросят, содержащую К88аб, К88ас и ТЛ-токсин. В 1983 г. в США методом генной инженерии была получена новая вакцина «Ecogen» против эшерихиоза поросят, содержащая пили трех штаммов Е. coli - К88, К99, 987Р.

Использование указанных вакцин обеспечивало снижение смертности от колидиареи с 61% до 5%.

В связи с открытием нового, четвертого антигена пилей энтеротоксигенных Е. coli, близкородственного или идентичного антигену F41, возникла необходимость выяснения возможности существования бактеринов, обеспечивающих защиту поросят против несущего такой антиген энтеротоксигенного Е. coli свиного происхождения. У супоросных свиноматок, вакцинированных 4-пили бактерином (К88, К99, 987Р и F41) отмечено появление существенно более высоких уровней сывороточных и колостральных антител, чем у свиноматок, вакцинированных 3-пили бактерином энтеротоксигенных Е. coli, содержащим 3 антигена пилей: К88, К99 и 987Р (Попов Е.М., 1991).

Следовательно, благодаря достижениям в области иммуногенетики и генной инженерии, в последние годы получены новые данные об эшерихиозе.

Установлены факторы патогенности Е. coli, вызывающей диарею поросят, пили - антигены и энтеротоксины. Эти новые сведения о возбудителе болезни позволяют раскрыть механизмы патогенеза и создать более совершенные субъединичные вакцины.

Однако существующие способы специфической профилактики и лечения эшерихиоза все еще несовершенны, когда часто отмечается недостаточная напряженность иммунитета, связанная с множеством серотипов Е. coli, вызывающие диарею телят и поросят. Ценность химио- и антибиотикотерапии для телят и поросят также часто сомнительна. Обеспечить защиту от заболевания молодняка в первые дни их жизни можно лишь путем пассивной иммунизации, применяя гипериммунные сыворотки или гомологичные иммуноглобулины в первые дни жизни, трансфузия крови от матери или иммунизированной коровы, а также терапевтическое и профилактическое применение специфических гипериммунных сывороток.



Pages:   || 2 | 3 |

Похожие работы:

«ДОБРЕНЬКОВ ДМИТРИЙ СЕРГЕЕВИЧ ХАРАКТЕРИСТИКА БИОЦЕНОТИЧЕСКИХ ОТНОШЕНИЙ БАКТЕРИАЛЬНЫХ СООБЩЕСТВ ПОЛОСТИ РТА И МИКРОЭКОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИНЦИПОВ БИОКОРРЕКЦИИ 03.02.03 – Микробиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Волгоград Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения...»

«Шумилова Анна Алексеевна ПОТЕНЦИАЛ БИОРАЗРУШАЕМЫХ ПОЛИГИДРОКСИАЛКАНОАТОВ В КАЧЕСТВЕ КОСТНОПЛАСТИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ 03.01.06 – Биотехнология (в том числе бионанотехологии) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Красноярск – 2015 Работа выполнена на базовой кафедре биотехнологии Института фундаментальной биологии и биотехнологии, Федерального государственного автономного образовательного учреждения высшего профессионального образования...»

«Курбонов Косим Муродович СОВРЕМЕННЫЕ ЭПИЗООТОЛОГО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ И НАДЗОР ЗА БРУЦЕЛЛЕЗОМ В РЕСПУБЛИКЕ ТАДЖИКИСТАН 14.02.02 – эпидемиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва – 2015 Работа выполнена в Таджикском научно-исследовательском институте профилактической медицины Министерства здравоохранения и социальной защиты населения Республики Таджикистан Научные руководители: Доктор медицинских наук, профессор...»

«ПОПОВ Игорь Юрьевич ВЫМИРАНИЕ MARGARITIFERA MARGARITIFERA (L.) НА ЮГЕ АРЕАЛА В РОССИИ И МОДЕЛЬ ПРИРОДОХРАННОГО ИССЛЕДОВАНИЯ 03.02.08 – экология Автореферат диссертации на соискания учёной степени доктора биологических наук Санкт-Петербург Работа выполнена в Санкт-Петербургском государственном университете Официальные оппоненты: Иешко Евгений Павлович, доктор биологических наук, Институт биологии Карельского научного центра РАН заведующий лабораторией паразитологии животных и...»

«ФЕДИН АНДРЕЙ ВИКТОРОВИЧ КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ ОСТРЫХ БАКТЕРИАЛЬНЫХ РИНОСИНУСИТОВ 14.03.09. – аллергология и иммунология 14.01.03. – болезни уха, горла и носа АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Пенза – 2015 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении дополнительного профессионального образования «Пензенский институт усовершенствования врачей» Министерства здравоохранения...»

«МЕЛЬЧЕНКО Александр Иванович МИГРАЦИЯ РАДИОНУКЛИДОВ В АГРОЭКОЦЕНОЗАХ В УСЛОВИЯХ ЛЕСОСТЕПНОЙ И СТЕПНОЙ ЧЕРНОЗЕМНОЙ БИОГЕОХИМИЧЕСКОЙ ЗОНЫ ЮГА РОССИИ Специальность 03.02.08 – Экология (биология) Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Краснодар 2014 Работа выполнена в лаборатории радиационной и химической экологии Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Всероссийский научно-исследовательский институт биологической...»

«Филимонова Марина Владимировна ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА И РАДИОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ЭФФЕКТЫ ЛИНЕЙНЫХ И ЦИКЛИЧЕСКИХ ПРОИЗВОДНЫХ ИЗОТИОМОЧЕВИНЫ – КОНКУРЕНТНЫХ ИНГИБИТОРОВ СИНТАЗ ОКСИДА АЗОТА 14.03.06 – фармакология, клиническая фармакология 03.01.01 – радиобиология Автореферат диссертации на соискание учной степени доктора биологических наук Обнинск 2015 Работа выполнена в Медицинском радиологическом научном центре им. А.Ф. Цыба – филиале Федерального государственного бюджетного...»

«ВАНГЕЛИ СЕРГЕЙ ВАЛЕРЬЕВИЧ СРАВНИТЕЛЬНАЯ УЛЬТРАСТРУКТУРНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА КУЛЬТУР КЛЕТОК, ХРОНИЧЕСКИ ИНФИЦИРОВАННЫХ ВИРУСОМ ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА 06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Москва – 201 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном научном учреждении научно-исследовательский институт...»

«СЕЛИФОНОВА Жанна Павловна СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ЭКОСИСТЕМ ЗАЛИВОВ И БУХТ ЧЕРНОГО И АЗОВСКОГО МОРЕЙ (РОССИЙСКИЙ СЕКТОР) Специальность 25.00.28 – Океанология Д 002.140.01 Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Мурманск, 2016 -2Работа выполнена в ФГБУН Мурманском морском биологическом институте...»

«НАУМОВ Юрий Анатольевич АНТРОПОГЕННАЯ ТРАНСФОРМАЦИЯ ПРИБРЕЖНО-ШЕЛЬФОВЫХ ГЕОСИСТЕМ ОКРАИННЫХ МОРЕЙ ДАЛЬНЕГО ВОСТОКА РОССИИ 25.00.36 – Геоэкология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора географических наук Томск 2008 Работа выполнена на кафедре экологии и природопользования Владивостокского государственного университета экономики и сервиса Научный консультант: доктор географических наук, профессор Кочуров Борис Иванович Официальные оппоненты: доктор...»

«АНДОСОВА ЛАРИСА ДМИТРИЕВНА КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНЫЕ АСПЕКТЫ В ОЦЕНКЕ ЗАБОЛЕВАНИЙ ШЕЙКИ МАТКИ ПРИ ПАПИЛЛОМАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ 14.03.10 – клиническая лабораторная диагностика Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Нижний Новгород – 2014 Работа выполнена в ГБОУ ВПО «Нижегородская государственная медицинская академия» Минздрава России Научный консультант: Конторщикова Клавдия Николаевна – доктор биологических наук, профессор Официальные оппоненты:...»

«Нгуен Тхи Тху Ха МЕДОНОСНЫЕ РЕСУРСЫ ЛЕСНОГО ФОНДА ЛЕНИНГРАДСКОЙ ОБЛАСТИ И ЦЕНТРАЛЬНОГО ВЬЕТНАМА 06.03.02 Лесоведение, лесоводство, лесоустройство и лесная таксация АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Санкт-Петербург 2015 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы исследования. Использование недревесных ресурсов вносит существенный вклад в улучшение качества жизни населения многих стран, включая Россию и Вьетнам. До настоящего...»

«Цвиркун Ольга Валентиновна ЭПИДЕМИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС КОРИ В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКИ. 14.02.02 эпидемиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Москва – 2014 Работа выполнена в Федеральном бюджетном учреждении науки « Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского» Роспотребнадзора Научный консультант: Заслуженный деятель науки РФ, профессор, доктор медицинских наук Ющенко...»

«Моисеева Елена Владимировна БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ПОВЫШЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ РАЗВЕДЕНИЯ РАДУЖНОЙ ФОРЕЛИ PARASALMO (= ONCORHYNCHUS) MYKISS В УСЛОВИЯХ ПЛЕМЕННЫХ ЗАВОДОВ 03.02.06 – Ихтиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата биологических наук Москва 2015 Работа выполнена на кафедре водных биоресурсов и аквакультуры Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Кубанский государственный...»

«Сафина Лейсэн Фаритовна Анафилактический шок на ужаления перепончатокрылыми насекомыми (частота встречаемости, иммунодиагностика и прогнозирование) 14.03.09. – клиническая иммунология, аллергология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва 2016 Работа выполнена в Федеральном бюджетном учреждении науки «Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав...»

«Абросимова Светлана Борисовна Совершенствование методов селекции картофеля на устойчивость к золотистой цистообразующей нематоде (Globodera rostochiensis (Woll.) Специальность: 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата сельскохозяйственных наук Москва – 2014 Диссертационная работа выполнена в Государственном научном учреждении Всероссийский научно-исследовательский институт картофельного...»

«КОМИССАР АЛЛА БОРИСОВНА КЛИНИКО-ОФТАЛЬМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ХРОНИЧЕСКОГО ЭНДОГЕННОГО ХОРИОРЕТИНИТА У КОШЕК 06.02.04 – ветеринарная хирургия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Москва 2014 Работа выполнена на кафедре биологии и патологии мелких домашних, лабораторных и экзотических животных факультета ветеринарной медицины ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К. И. Скрябина»...»

«Баянов Николай Георгиевич ОПЫТ ЭКОЛОГИЧЕСКОГО МОНИТОРИНГА КАРСТОВЫХ И ПОЙМЕННЫХ ОЗЁР В ЗАПОВЕДНИКАХ РОССИИ (НА ПРИМЕРЕ ПИНЕЖСКОГО И КЕРЖЕНСКОГО ЗАПОВЕДНИКОВ) 03.02.08 – экология Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Петрозаводск – 2015 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном учреждении Государственный природный биосферный заповедник «Керженский» доктор географических наук Научный консультант Бобровицкая Нелли...»

«САГИТОВА МИНЗИЛЯ ГАБДУЛХАЕВНА ГИГИЕНИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ ПОЛИСАХАРИДА «ГРАМО» В ПТИЦЕВОДСТВЕ 06.02.05 ветеринарная санитария, экология, зоогигиена и ветеринарно-санитарная экспертиза АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Казань – 2015 Работа выполнена в условиях кафедры зоогигиены федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Казанская государственная академия...»

«ГАЛИНИЧЕВ АНДРЕЙ ВАСИЛЬЕВИЧ ЦИКАДОВЫЕ (HEMIPTERA, CICADINA) УРАЛА: СОСТАВ ФАУНЫ, ЭКОЛОГИЯ И ХОРОЛОГИЯ 03.02.08 – экология (биологические науки) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Нижний Новгород Работа выполнена на кафедре зоологии федерального государственного автономного образовательного учреждения высшего образования «Нижегородский государственный университет им. Н. И. Лобачевского» Научный руководитель: доктор биологических...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.