WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:     | 1 | 2 || 4 |

«РЫБНЫЕ КОЛЛАГЕНЫ: ПОЛУЧЕНИЕ, СВОЙСТВА И ПРИМЕНЕНИЕ ...»

-- [ Страница 3 ] --

Образцы наносились по 5 мкл в каждую лунку. В качестве маркера использовали коммерческий набор полипептидов. Во время миграции образцов в концентрирующем геле (~10% от общего объема геля) напряжение поддерживали на уровне 100В. При перемещении фронта в разделяющий гель напряжение повышали до 140В. Электрофорез проводили до выхода бромфенолового синего из геля. Гели окрашивали 0,25% раствором Кумасси синего R250 (Sigma, USA) в смеси вода: этанол: уксусная кислота (6:4:1). [32] (рис. 4.1) Как видно на рис.

4.1 фракционный состав коллагеновых дисперсий рыбного и животного происхождения, имеет отличия. Так, для животных коллагенов характерна миграция фракций в области свыше 212кДа. Имеются фракции, мигрирующие в области соответствующей диапазону 66-212кДа, что может быть связано с наличием минорных компонентов и сопутствующих белков. Однако количество их значительно меньше. Это свидетельствует о том, что даже в условиях денатурирующего электрофореза основную массу препарата составляет высокомолекулярные белки, для которых не характерна субъединичная структура. Для препарата рыбного происхождения также наблюдается миграция мономеров в высокомолекулярной области, выше 212кДа, однако количество этих фракций значительно меньше. Основная часть коллагена, полученная из рыбных шкур, мигрирует в области 212кДа. Также присутствует большое количество фракций, мигрирующих в области от 45 до 212кДа. [32] Как видно на рис. 4.1, белки коллагеновых субстанции представляют собой многокомпонентные системы с различной подвижностью фракций под действием электрического поля. Это свидетельствует о необходимости глубокой очистки и выделения фракций для тонких экспериментальных исследований. Возможно, это свидетельствует о деструктивном воздействии в условиях получения коллагеновой дисперсии Рис. 4.1 Электрофоретическое фракционирование образцов, содержащих коллаген. Дорожки 1,4,7,10 – маркеры молекулярной массы; дорожки 2,5,8 дорожки – образец, полученный из кожи рыб; дорожки 3,6,9 – образец, полученный из спилка шкуры КРС.

Согласно данным [41] коллаген имеет молекулярную массу около 300кДа, по данным С.А. Батечко и А.М. Ледзевирова коллаген, полученный польскими учеными из шкур рыб имеет значения 357-362кДа, для цепочек 2 значение около 130кДа, для 1 – 105кДа, а для – 250кДа и являются доминирующими единицами [19]. В целом следует отметить сходимость полученной информации с данными польских и украинских авторов и доказывает наличие третичной структуры тропоколлагена.

4.3 Электронно-микроскопический анализ коллагеновых дисперсий В связи с выявленными отличиями электрофоретической подвижности фракций препаратов полученных из спилка шкур КРС и шкур рыб, представляло интерес оценить морфологические отличия этих образцов. Для этого использовали метод атомно-силовой микроскопии (АСМ).

Препараты в буфере, содержащем 0,5 М уксусную кислоту, наносили на свежеприготовленный скол слюды и проводили абсорбцию в течение 5 минут, затем промывали дистиллятом и высушивали в течение 30 минут. Сканы, полученные в полуконтактном режиме, выявили ряд морфологических отличий в препаратах (Рис. 4.2).

[A] [B] [B] Рис. 4.2. Визуализация образцов с помощью АСМ. [A] Сканы препаратов, полученный из спилка шкуры КРС. 1 – Скан 5050 нм; 2 – Скан 46 нм; 3 – сечение, проведенное поперек молекулы. [B] Сканы препаратов, полученных из шкуры рыб. 1 – Скан препарата 1,81,8 нм; 2-4 – Сечение, проведенное через молекулярные конгломераты; 5 – Скан препарата 22 нм; 6-7 - Сечение, проведенное через молекулярные конгломераты; 8 – Скан препарата 3,53,5 нм; 9

– Сечение, проведенное вдоль наименьшей молекулы.

Изучение морфологии препарата животного происхождения соответствует общим классическим представлениям о структуре коллагенов. А именно, ширина молекулы составляет 1-2 нм, а длинна фибриллы более 300 нм, при этом, как правило, отдельные молекулы закручиваются в общий жгут. Анализ морфологии препарата, полученного из шкуры рыб, имеет ряд отличий. А именно: ширина частиц, обнаруженных в поле, составляет 4-5 нм, однако их морфология не гомогенна и, скорее всего, состоит из нескольких субъединиц. Однако длина этих частиц относительно одинаковая и составляет около 200 нм, что согласуется с данными, полученными в условиях денатурирующего электрофореза. Таким образом, можно сделать вывод о том, что величина молекул, формирующих фракции препарата рыбного происхождения, имеет значительно меньшие размеры и, вероятно, более низкие уровни организации пространственной структуры.

Есть экспериментальные доказательства ряда авторов, что рыбные коллагены представлены тропоколлагеном, имеющим три структурных уровня [41].

82 Полученные нами данные подтверждают эту версию и дополнительно указывают на возможно большие возможности в косметической промышленности и медицине из-за природных особенностей, которые реализованы рядом фирм для более современных косметических и медицинских средств при отменном эффекте

– стимулировании собственных биосинтетических механизмов организма человека, а не маскирование имеющихся дефектов.

Таким образом, особенности аминокислотного состава, данные электрофоретического исследования и атомно-силовой микроскопии свидетельствуют об имеющихся отличиях в структуре, а, следовательно, и свойствах.

4.4 Сравнительная оценка суммарных ароматов коллагеновых дисперсий различного происхождения Рыба, а, следовательно, и отходы от ее переработки, имеют сильный, специфический запах, обусловленный наличием триметиламина, его окиси или соединений. Так же на формирование «рыбного» запаха оказывают влияние липиды. Ненасыщенные липиды при хранении рыбы окисляются в гидроперекиси, которые являются предшественниками компонентов с прогорклым запахом. Носителями запаха и вкуса продуктов окисления липидов являются альдегиды, кетоны и метилкетоны с небольшой молекулярной массой, а также свободные жирные кислоты с короткой цепью. Для некоторых рыб причиной запаха может являться наличие легколетучих соединений содержащих серу. В связи с этим представляло интерес провести оценку суммарных ароматов коллагеновой дисперсии рыбного происхождения и сравнить с субстанцией животного происхождения.

Для установления содержания легколетучих соединений в равновесной газовой фазе (РГФ) над образцами коллагеновых субстанций различного происхождения сравнивали величины откликов всех выбранных сенсоров в массиве (табл. 4.2).

–  –  –

Рыбного происхождения Животного происхождения Установлено существенное различие содержания легколетучих органических соединений, на которые настроен массив сенсоров в равновесной газовой фазе над пробами. При «слепой» органолептической оценке запаха такие пробы воспринимаются дегустаторами как совершенно различные.

Установлено по откликам отдельных сенсоров, что в равновесной газовой фазе над образцами содержатся в основном гидрофильные соединения (полярные легколетучие) и вода, в тоже время заметна концентрация азотсодержащих соединений и кислот, сложных эфиров. Интенсивность (суммарная концентрация легколетучих соединений, детектируемая сенсорами) различается в 3,6 раза между пробами животного и рыбного происхождения.

Для установления различий в составе (качественном и количественном) легколетучей фракции запаха проследили изменение общего содержания легколетучих компонентов в РГФ над пробами (рис. 4.4). По форме фигуры «визуального отпечатка» максимальных откликов всех сенсоров в массиве и особенно кинетических «визуальных отпечатков» установлена высокая степень их идентичности, что характеризует близкий химический состав проб.

Проследили изменения в количественном составе РГФ над пробой по относительному содержанию основных классов легколетучих соединений, оцененное методом нормировки (табл. 4.3).

–  –  –

* - отмечены значимые отличия содержания определенных классов соединений относительно стандарта.

Установлено, что по содержанию основных классов органических соединений образцы идентичны друг другу. Существенно отличается концентрация их в пробах. Различия в качественном составе: В коллагеновой дисперсии рыбного происхождения на 9,2 % меньше спиртов, альдегидов, кетонов, на 8,6 % специфических и серосодержащих соединений, чем в коллагеновой дисперсии животного происхождения. Незначительно больше короткоцепочечных кислот и на 6 % алкиламинов.

Изменения в качественном составе РГФ над пробами проследили с помощью параметра Аi/j, который показывает постоянство соотношения концентраций отдельных классов легколетучих соединений в РГФ (табл. 4.4).

По соотношению А абсолютных сигналов сенсоров с пленкой ПДЭГС (азотсодержащие органические соединения, вода) и с универсальной пленкой ПВП (ПДЭГС/ПВП) оценивали долю азотсодержащих соединений среди других полярных соединений и воды. Аналогично оценивали долю кислот (Tw с 18К6/ПВП), спиртов, кетонов (ПЭГ2000/ПВП), других соединений, по которым установлены некоторые особенности изменения состава анализируемых проб (табл. 4.4). Если показатели А для проб близки или совпадают для таких показателей РГФ над пробами по соотношению сигналов сенсоров, то можно считать, что соотношение содержания в пробах указанных соединений одинаково.

Если соотношение сигналов отличается от таковых для проб, то соотношение концентраций этих групп соединений различно (табл. 4.3).

–  –  –

Рисунок 4.3 «Визуальные отпечатки» максимальных сигналов и кинетические сигналы сенсоров в РГФ над пробами.

По осям указаны номера сенсоров в матрице. По вертикали – максимальные отклики сенсоров (Гц).

–  –  –

Установлено, что составы равновесных газовых фаз над пробами близки между собой, однако интенсивность запаха (концентрация этих соединений) над образцом рыбного происхождения на 72 % больше, чем над образцом животного происхождения. Такой результат можно объяснить высокой сорбционной емкостью рыбных коллагенов, что обусловлено наличием большого количества функциональных групп, а именно свободных карбоксильных и аминогрупп, что в свою очередь связано с различиями количественного аминокислотного состава. А так же тем, что рыбная коллагеновая дисперсия содержит большое количество альдегидов, аминов, кетонов, серосодержащих соединений, то есть веществ обуславливающих специфический запах.

4.5 Изучение структурообразования коллагеновых дисперсий

В настоящее время во многих отраслях промышленности, в том числе пищевой, одним из наиболее перспективных направлений является создание полимерных упаковочных материалов, отвечающих требованиям безопасности и экологичности.

Коллаген является природным биополимером, имеет упрочненную структуру и подходит для получения съедобных пленок и покрытий.

Модельные пленочные покрытия из коллагеновой дисперсии, получение которой описано в п. 3.3, разбавляли дистиллированной водой до 2-х %сухих веществ, формовали следующим образом: сухую, обезжиренную, пластиковую поверхность (проводились испытания со стеклянной и тефолоновой поверхностями, но наилучший результат достигается при использовании пластика) устанавливали горизонтально, на нее, методом налива с последующим равномерным распределением (с помощью шпателя) наносили коллагеновую дисперсию. Сушку проводили при температуре 20оС, без дополнительной конвекции, с принудительной циркуляцией воздуха и без нее. Степень высыхания определяли сенсорным методом по внешнему виду и по изменению массы пленочных покрытий.

По достижении необходимой степени высушивания, фиксировали время сушки, которое составило около 10 часов с принудительной циркуляцией воздуха и около 15 без нее. Пленочное покрытие, полученное из 2% коллагеновой дисперсии, прозрачное, тонкое, не эластичное, при снятии с подложки рвется.

Поэтому для улучшения качества пленочного покрытия было принято решение ввести пластификатор. В качестве такого вещества был выбран глицерин (Е422).

Он часто используется при производстве пленок для пищевых продуктов, имеет широкую доступность, низкую стоимость и разрешен в большинстве стран мира.

Для подбора оптимальной концентрации в коллагеновую дисперсию добавляли, в 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40 % глицерина. Полученные смеси перемешивали до однородного состояния, после чего делали модельные покрытия по методике, описанной выше.

Анализ полученных данных о влиянии соотношения коллагена и пластификатора в смеси на процесс пленкообразования (табл. 4.5) показал, что пленки с концентрацией глицерина от 5 до 40 % имеют заметные отличия.

–  –  –

Из данных таблицы 4.5 видно, пленочные покрытия приемлемого качества получаются при добавлении к 2-х% коллагеновой дисперсии от 10 до 20% глицерина (рисунок 4.4). Добавление 25-40% приводит к перерасходу глицерина, ухудшению механических свойств пленочных покрытий (рисунок 4.5).

Рисунок 4.4 Коллагеновая пленка с содержанием глицерина 10%

Рисунок 4.5 Пленочное покрытие, полученное из коллагеновой дисперсии с добавлением 35% глицерина Bзменение свойств растворов с различной концентрацией коллагена и пластификатора при переходе из жидкого состояния в твердое, объясняется резким и скачкообразным замедлением релаксационных процессов в полимерах.

При любых сочленениях двух твердых разнородных материалов обычно возникают напряжения, обусловленные различием их физических свойств и наличием адгезионного контакта. Основным внутренним фактором, вызывающим возникновение напряжений, является процесс испарения растворителя, в данном случае воды. При уменьшении количества растворителя в момент достижения определенного его значения пленочное покрытие начинает приобретать упругие свойства; одновременно в нем возникают внутренние напряжения, являющиеся результатом усадки. Введение пластификатора в полимер, особенно аморфного строения, позволяет снизить, а при определенных концентрациях и полностью устранить возникающие напряжения [113].

Молекулы пластификатора предназначены для уменьшения сил притяжения между молекулами белка при низких значениях влажности и для увеличения гибкости пленок. Важно отметить, что остаточное содержание влаги в пленочном покрытии также выступает в качестве пластификатора для гидрофильных пленок, и, видимо, поэтому белковые пленочные покрытия становятся более хрупкими в условиях низкой влажности (рисунок 4.6).

Рисунок 4.6 Коллагеновая пленка без добавления пластификатора Использование коллагеновой дисперсии, содержащей более 2-х % сухих веществ не является целесообразным в виду получения пленочных покрытий очень низкого качества, независимо от количества внесенного глицерина.

(рисунок 4.7) Рисунок 4.7 Пленочное покрытие, полученное из 7% коллагеновой дисперсии с добавлением 10 % глицерина Таким образом, для получения пищевых пленочных покрытий нами была выбрана коллагеновая дисперсия с содержанием сухих веществ 2% с добавлением 10% глицерина в качестве пластифицирующего вещества. Для этой смеси и полученных из нее пленочных покрытий, были определены параметры, представленные в таблице 4.6.

–  –  –

Одним из важных факторов, определяющих технологические свойства пленкообразующей смеси, является толщина покрытия, образующегося на поверхности продукта.

Для ее оценки использовали морфометрическое исследование образцов, основанное на микроскопировании и измерении толщины покрытия. В качестве образцов служили срезы 1х1 см, приготовленные из рыбного изделия покрытого пленкообразующей смесью. Микроскопирование проводили при малом увеличении (х3,8, zoom х 4, кратность 22,8) на микроскопе фирмы Биомед, измерение толщины с помощью программы Meta Vision v.1.2, одно деление стандарта соответствовала 10 мкм = 1,503 точки (рисунок 4.8, 4.9).

Исследования проводили для закономерно повторяющихся структур среза, где измеряли ширину изучаемого участка образца.

Рисунок 4.8 Рабочее окно программы Meta Vision для коллагенового покрытия без добавления пластификатора Рисунок 4.

9 Рабочее окно программы Meta Vision для коллагенового покрытия с добавлением пластификатора

–  –  –

где hср1 – средняя толщина для пленочного покрытия, полученного из коллагеновой дисперсии без добавления глицерина в качестве пластификатора;

hср2 – средняя толщина для пленочного покрытия, полученного из коллагеновой дисперсии с добавлением глицерина в качестве пластификатора;

Таким образом, коллагеновая дисперсия и смесь коллагеновой дисперсии и 10 % глицерина позволяет получить пленочные покрытия, которые можно использовать для формирования пищевых оболочек, однако требует доработки технологии, внесения дополнительных веществ и, скорее всего, дубления.

95 ГЛАВА 5. Разработка рекомендаций по рациональному применению коллагеновых дисперсий

5.1 Использование коллагеновых дисперсий в технологиях пищевыхпродуктов

В соответствии с современной теорией питания роль соединительнотканных белков пересмотрена. Установлено положительное влияние ингредиентов соединительной ткани на процесс пищеварения, состояние и функцию полезной кишечной микрофлоры. Коллаген является аналогом пищевых волокон, а его технологические качества позволяют разрабатывать модифицированные рецептуры рыбных полуфабрикатов. Оценка таких функциональнотехнологических свойств как влагоудерживающая способность (ВУС), влагосвязывающая способность (ВСС) и жироудерживающая способность (ЖУС) необходима при производстве полуфабрикатов.

В качестве объектов исследования были выбраны: рыбный фарш (минтай) без добавления коллагена в качестве контроля и рыбный фарш, с массовой долей замены в нем основного сырья на коллагеновую дисперсию от 5-25%. Показатели ВСС, ВУС, ЖУС приведены на рисунке. 5.1.

70 ВСС ФТС, % ВУС ЖУС

–  –  –

Рисунок 5.2 – Структурная схема производства рыбных котлет «Юбилейные»

Фарш рыбный размораживают при температуре +15 оС в течение 10-12 ч.

Затем добавляют коллагеновую дисперсию (20% от массы фарша). Свежие овощи (морковь и репчатый лук) проверяют, очищают, промывают холодной водой и измельчают. Зелень свежую или предварительно замоченную сухую, проверяют, промывают, измельчают и добавляют в фарш. Далее всыпают манную крупу.

Соль и перец добавляют в сухом виде, предварительно просеивая. Перемешивают компоненты фарша на фаршемешалке до образования однородной массы, причем температура фарша должна быть не выше 14С. Из приготовленного фарша формуют котлеты овальной формы, затем панируют.

Замораживают полуфабрикаты в морозильных камерах до температуры в центре фарша не выше минус 10 С, соответственно режимам, рекомендуемым действующими технологическими инструкциями.[66] Добавление 20% коллагеновой дисперсии обеспечивает удовлетворение потребности в пищевых волокнах на 10% от нормы в пересчете на 100 г готового продукта.

В таблицах 5.2, 5.3 представлены результаты исследования органолептических, физико-химических и микробиологических исследований.

–  –  –

45,44 БЦ, % 21,81 Рисунок 5.3 Биологическая ценность котлет «Юбилейные» по традиционной и модифицированной рецептурам Использование защитных пищевых покрытий способствует сохранению качества, увеличению срока хранения, предотвращению потерь продукции при транспортировке и хранении.

Для получения рубленного, рыбного полуфабриката с коллагеновым покрытием составляли фарш по традиционной рецептуре котлет «Юбилейные»

(таблица 5.2), где заменили панировочные сухари на пленкообразующую смесь,

–  –  –

Примечание: в контроле в качестве панировки использовали сухари, в опыте коллагеновую дисперсию.

Для разработки рекомендаций по применению полуфабрикатов в коллагеновой оболочке проводили сравнительную оценку выхода продукта при различной термообработке (на пару, жарение, СВЧ). Результаты представлены на рисунке 5.4.

–  –  –

23,8 БЦ, % 21,81 Рисунок 5.5 Биологическая ценность котлет «Юбилейные» с коллагеновым покрытием и без него Полученные данные показывают целесообразность применения в качестве покрытия коллагеновые дисперсии. При этом улучшаются органолептические показатели и увеличивается выход продукта, что экономически целесообразно.

5.2 Проведение технических и токсикологических испытаний в рамках доклинических исследований В условиях научно-исследовательской лаборатории Воронежского государственного медицинского университета им. Н.Н. Бурденко в опытах на теплокровных животных (in vivo) были проведены технические и токсикологические исследования рыбной коллагеновой субстанции в рамках доклинических испытаний.

При изучении острой токсичности проводили токсиметрическую оценку коллагеновой субстанции на белых крысах и мышах. В течение 14 дней после затравки учитывали количество павших и выживших животных. При этом коллагеновую субстанцию вводили внутрижелудочно через зонт в различных дозах (500- 1500 мг/кг живой массы). В результате опытов коллагеновая субстанция рыбного происхождения отнесена к 4-му классу по токсичности и является безопасной.

–  –  –

На течение и продолжительность беременности субстанция не оказывала влияния. Так, у контрольных и опытных крыс беременность продолжалась 22-23 дня, у самок, которые получали субстанцию - 23 дня. Была отмечена разница в численности помета крысят и дальнейшем их развитии. Проводилось сравнение развития крысят опытной и контрольной групп.

Установлено, что двигательная активность крысят, матери которых получали коллагеновую субстанцию, практически не отличалась от двигательной активности контрольных.

Проведенные эксперименты показали, что потомство, родившиеся у крыс, получавших при беременности коллагеновую субстанцию не отличалось от контрольного увеличенной ориентировочной активностью. На 20 день жизни число крысят, мамы которых во время беременности получали препарат, и контрольных животных, поднявшихся по сетке, было одинаковым. Изменение ориентировочных рефлексов у животных опытной группы не носило статистически значимого характера. Порог болевого раздражения (зажатие хвоста) у животных обеих групп был одинаков.

Тератогенное действие коллагеновой субстанции изучали на белых крысах.

После спаривания самкам через день в течение всей беременности вводили максимально возможную дозу по объему для введения в желудок — 5000 мг/кг, и получили от них потомство. У новорожденных крысят изменений, классифицируемых как уродства, не было выявлено.

В течение всего опыта за подопытными животными вели наблюдение, учитывали поедаемость корма, прием воды, состояние слизистых оболочек, волосяного покрова, поведение, взвешивали в начале и в конце эксперимента.

В результате у грызунов не зарегистрировали гибели, не отмечали признаков интоксикации и заболеваний. Динамика прироста массы тела представлена на рисунке 5.6.

–  –  –

Рисунок 5.6 - Прирост массы тела крыс при применении коллагеновой субстанции в течение 45 дней, граммов Таким образом, применение коллагеновой субстанции в течение 45 дней опыта не снижало прироста массы тела опытных животных, а наоборот способствовало увеличению данного показателя на 63, 48 % в 1-й группе и на 1,6 во 2-й группе по сравнению с контролем.

В конце опыта грызуны были убиты, проведено анатомическое вскрытие и взвешивание внутренних органов. Результаты представлены в таблице 5.8.

Таблица 5.8 Весовые индексы внутренних органов белых крыс (в % к живой массе тела)

–  –  –

Достоверных различий по массе тушек и внутренних органов у белых крыс в опыте и контроле не выявлено, не установлено также и патологических 106 изменений во внутренних органах при скармливании коллагеновой субстанции в течение 45 дней.

Морфологические показатели крови (количество эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина и гематокрит) у животных всех групп существенно не отличались и находились в пределах нормы.

Углеводная, белково-образовательная и мочевинообразовательная функции печени не нарушены.

На основании вышеизложенного можно заключить, что проведенными токсикологическими исследованиями не установлено отрицательного влияния коллагеновой субстанции на организм экспериментальных животных, не выявлены противопоказания к проведению дальнейших исследований и использованию.

5.3 Применение коллагеновых дисперсий в качестве биологически активного компонента косметических средств Как уже говорилось ранее, коллаген является самым распространенным белком в организме млекопитающих и человека в том числе. Однако с возрастом его выработка постепенно сокращается (рис. 5.7). [41] Рисунок 5.7 – Выработка коллагена в организме человека Сокращение количества коллагена влияет на состояние кожи, ее увлажненность и упругость. Поэтому для сохранения здоровья, молодости и красоты кожи необходимо восполнять недостаток коллагена с помощью внешних аппликаций косметических средств и БАД для нутритивной коррекции.

Для того чтобы использовать полученные рыбные коллагеновые белки, как активный компонент косметических средств было необходимо провести проверку на соответствие ТР ТС 009/2011 «О безопасности парфюмерно-косметической продукции»[140]. Исследования проводились в ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Воронежской области». Результаты представлены в таблице 5.9.

–  –  –

Полученная коллагеновая дисперсия отвечает требованиям ТР ТС009/2011 «О безопасности парфюмерно-косметической продукции» и может использоваться в косметических средствах без ограничений.

На базе ИЦ «Бирюч» (Белгородская обл.) были проведены исследования потребительских свойств коллагеновой дисперсии рыбного происхождения, а так же косметических средств: без коллагена, с коммерческим коллагеном (животного происхождения, фирмы «CRODA») с коллагеном рыбного происхождения. Косметические средства производились сотрудниками исследовательского центра, по запатентованным рецептурам.

В испытаниях принимали участие 30 женщин в возрасте от 20 до 48 лет.

Критериями включения в исследование являлись:

- возраст от 18 лет;

- клиническое здоровье;

- осознанное и добровольное согласие на участие в апробации.

Критериями исключения из исследования служили:

- повышенная чувствительность к компонентам, входящим в состав исследуемого продукта;

- гиперреактивность кожи на внешние и/или внутренние стимулы, проявляющаяся субъективными и/или объективными симптомами, связанными с развитием воспаления;

- дерматологические заболевания в фазе обострения, наличие повреждений целостности кожных покровов в области кистей;

- одновременное участие в другом клиническом исследовании;

- планирование беременности, беременность и период лактации.

Во время испытаний исключалось использование каких-либо косметических продуктов для ухода за кожей и волосами (таких как, например, кремы, бальзамы, шампуни и т.д.).

Объектами исследования были волосы для испытания шампуня и бальзама и кожа внутренней стороны запястья для крема и коллагеновой дисперсии.

Испытания проводились по схеме, представленной на рисунке 5.8.

–  –  –

Средства для кожи:

Состояние кожи до и после Аппаратные измерения Упругость кожи Увлажненность Увлажненность кожи Жирность Покраснение Степень выраженности морщин Шелушение Исходя из данных, полученных в результате компаративного исследования средств для волос и средств для кожи без содержания коллагена, с содержанием коммерческого коллагена и с содержанием коллагеновой дисперсии, следует, что средства с содержанием коллагеновой дисперсии проявляют свойства на уровне коммерческого аналога.

Показатели, полученные аппаратными методами исследования после использования средств для волос с рыбной коллагеновой дисперсией находятся в пределах нормы. По субъективным оценкам пробантов действие средств с рыбным коллагеном сравнимо с действием коммерческого аналога. Согласно мнению респондентов, средства с рыбной коллагеновой дисперсией проявляют достаточно высокую смываемость, не вызывают эффекта утяжеления и жирности волос.

Исследование потребительских свойств средств для кожи с глицерином, с коммерческим коллагеном, а также с рыбным коллагеном, показало, что крем с рыбной коллагеновой дисперсией продемонстрировал результаты на уровне коммерческого аналога, а в рамках субъективной оценки состояния кожи до и после использования — превзошел коммерческий аналог.

Анализ действия коллагеновой дисперсии, без каких-либо добавок позволяет сделать вывод, что после использования в течение двух недель уровень увлажненности кожи рук увеличился на 21% (степень увлажненности увеличилась у 9 из 10 пробантов), а степень покраснения и шелушения кожных покровов снизилась в среднем на 5% у большей части пробантов (рис. 5.9, 5.10).

–  –  –

100 57,67 60 47,77 60 % % 20 20 0,1

–  –  –

300 249,83 238,79 % 150 % 25,41 40 26,85

–  –  –

7,5 8 6,2

–  –  –

Рисунок 5.10 – Тестирование коллагеновой дисперсии.

Метод прямых оценок 113 Испытания на людях-добровольцах с нормальной здоровой кожей продемонстрировали отсутствие отрицательного воздействия исследуемого продукта на кожу респондентов.

В соответствии с поставленными задачами и на основании полученных результатов исследований представляется возможным сформулировать следующие выводы.

ВЫВОДЫ

Патентно-информационный поиск показал целесообразность поиска 1.

новых источников коллагеновых белков. Наиболее перспективным отходом рыбоперерабатывающей промышленности для получения коллагена является шкура рыб, так как ее выход составляет 4%.

Шкура толстолобика содержит 16,5% белка, большая часть которого 2.

относится к щелочерастворимым, имеет рыхлую структуру соединительной ткани и содержит 83% коллагена, это говорит о том, что данный вид сырья можно рекомендовать для получения коллагена.

На основании анализа закономерностей влияния химических 3.

реагентов на растворимость коллагенов шкуры. Применение пероксиднощелочной смеси и уксусной кислоты в установленных режимах и условиях позволяет получить коллагеновую дисперсию обладающую характеристиками:

прозрачная желеобразная субстанция, рН 4,8, массовая доля сухих веществ 1,95массовая доля коллагена 0,92.

Применение метода ИК-спектроскопии позволило доказать, что 4.

полученная дисперсия состоит преимущественно из коллагеновых белков.

Установлена оптимальная температура 0оС и срок хранения дисперсии 26 недель.

В составе аминокислот белков отсутствует триптофан, пролин и 5.

оксипролин превалируют, что является структурным признаком коллагеновых белков и доказывает эффективности рыбного коллагена. Электрофоретическая подвижность свидетельствует о наличие в белках рыбной дисперсии 2, 1, цепей, с третичной структурой. Методом АСМ установлены морфологические отличия коллагенов животного и рыбного происхождения. Анализ суммарных ароматов показал идентичность состава РГФ, но интенсивность запаха рыбного коллагена на 72% выше. Установлено, что рыбные коллагеновые дисперсии структурируются при нанесении на пластиковую поверхность, при температуре 20оС, с принудительной циркуляцией воздуха. При внесении 10 % пластификатора образуются пленки высокого качества, применимые для покрытия пищевых продуктов.

Полученная рыбная дисперсия относится к 4 классу опасности 6.

(безопасна) и соответствует ТР ТС 009/2011 «О безопасности парфюмернокосметической продукции».

Использование коллагеновой дисперсии в качестве замены 20% 7.

основного сырья, обеспечивает улучшение ФТС. Коллагеновые пленочные покрытия увеличивают выход готового продукта. Косметические средства с применением полученного коллагена обладают биологически активным действием и на основании оценки потребительских свойств и в аппаратном опыте продукта показали отсутствие отрицательного воздействия, при улучшении состояния кожи и волос.

Разработан и утвержден проект ТУ 9283-001-02068108-2015 8.

Субстанция коллагеновая. Проведена апробация рыбных котлет в коллагеновом пленочном покрытии в кафе «Виктория», г. Бобров и коллагеновой дисперсии рыбного происхождения ООО «ЛДЦ Альдомед плюс» г. Лиски. Получение коллагена из рыбного сырья снижает себестоимость на 960,6 тыс. р., рентабельность продукции выше на 15,9 %.

Список используемых источников

«Норд Плас» организует в особой экономической зоне производство 1.

коллагена – URL: http://karpovka.com/2014/04/02/168233/ (дата обращения:04.04.2015)

2. Adamson, E.D. The localization and synthesis of some collagen types in developing mouse embryos. E. D. [Text] / Adamson, S. E. Ayers // Cell. – 1979. V.16. Р.953–965.

3. Andriopoulos, N.A. [Text] / Antibodies to human native and denatured collagens in synovial fluids of patients with rheumatoid arthritis. N.A. Andriopoulos, J.

Mestecky, E.J. Miller, J.C. Bennett // Clin Immunol Immunopathol. - 1976. - № 6. - Р.

209–212.

4. Antipova L.V. Prospects of obtaining and applying wound healing materials based on fish collagen / L.V. Antipova, S.A. Storublevtsev, S.B. Bolgova, L.V. Kozhanova // Materials of 1st International Congress Industrial-academic networks in cooperation activities for pharmaceutical, chemical and food fields, 2014. p.

116-120.

5. Bechir, A. The Nanobiotechnology of Obtaining of Collagen Gels from Marin Fish Skin and Yours Reological Properties for using Like New Materials in Dental [Text] / A. Bechir, R. Sirbu, M. Leca, M. Maris, D.A. Maris, E.M. Cadar, M.M., Medicine International Journal of Medical, Health, Biomedical, Bioengineering and Pharmaceutical Engineering Vol:2, No:6, 2008, p. 190-196.

Collagen as an implantable material in medicine and dentistry – URL:

6.

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12498470 (дата обращения:13.07.2015)

Collagen coating of glass bottom dishes and glass bottom plates – URL:

7.

http://www.cellvis.com/collagen_coating_of_glass_bottom_dish_plate.php (дата обращения:28.05.2015)

8. Collagen from fish? Yes, it is possible. // http://cebiotech.com/ 1.09.2014.

URL: http://cebiotech.com/articles/Collagen-from-fish-yes-it-is-possible-interviewwith-dr-olga-bukovskaya-and-julia-blokhina,261(дата обращения: 21.08.2015)

–  –  –

http://news.rice.edu/2014/04/09/synthetic-collagen-promotes-natural-clotting/ (дата обращения:27.08.2015)

Types of Collagen // tropocollagen.eu 07 октября 2014. URL:

19.

http://www.tropocollagen.eu/types-of-collagen/ (дата обращения: 11.08.2015)

20. Voicu, G. Synthesis, characterization and bio-evaluation of bioactive composites scaffolds based on collagen and glass ceramic [Text] / G. Voicu, S.I. Jinga, R. Trusca, F. Iordache Digest Journal of Nanomaterials and Biostructures Vol. 9, No. 1, January – March 2014, p. 99 – 108

21. Wetzel, D.L. Synchrotron infrared microspectroscopic analysis of collagens I, III, and elastin on the shoulders of human thin-cap fibroatheromas [Text] / David L. Wetzel, Ginell R. Post, Robert A. Lodder // Vibr. Spectrosc. - 2005. – V. 38, № 1-2. - P. 53-59.

What is fish collagen? – URL: http://www.wisegeek.com/what-is-fishcollagen.htm (дата обращения 10.03.2015)

Адлер, Ю.П. управление качеством [Текст] / Ю.П. Адлер. – М.:

23.

МИСиС, 2000. – 163 с.

Антипова Л.В. Шкуры рыб - как объект для получения коллагеновых 24.

субстанций [Текст] / Л.В. Антипова, С.А. Сторублевцев, М.В. Бобрешова // Научная конференция хранителна наука, техника и технологии – Научнитрудове Университет по хранителни технологии Пловдив Том LIX. - Volume LIX. – 2012.

– С.976-978.

Антипова, Л.В. Влияние ароматизаторов с коллагеновыми носителями 25.

на срок хранения фарша / Л.В. Антипова, Т.А, Кучменко, М.М. Данылив, В.В.

Зверев // Мясная индустрия – 2007 – №3 – с. 39-41 Антипова, Л.В. Исследование йодосвязывающей способности 26.

коллагеновых белков кож прудовых рыб / Л.В. Антипова, В.С. Слободяник, О.П.

Дворянинова, Лы Тхи Иен // Вестник ВГТА – 2008 – №3 – с. 31-36 Антипова, Л.В. Исследование процесса сорбции йода на коллагеновом 27.

носителе в получении функционального ингредиента для пищевых систем / Л.В.

Антипова, А.Н. Рязанов, С.А. Сторублевцев, Ф.С. Базрова // Вестник ВГУИТ – 2013 – №3 – с. 102-105.

Антипова, Л.В. Коллаген рыбного происхождения: свойства и 28.

перспективы применения в косметологии и медицине [Текст] / Л.В. Антипова, С.Б. Болгова // Материалы 19-ой Международной Пущинской школыконференции молодых ученых «Биология – наука ХХI века». – Пущино, 2015г. – с.5.

Антипова, Л.В. Коллагены: источники, свойства, применение / 29.

Л.В.Антипова, С.А. Сторублевцев – Воронеж: ВГУИТ, 2014. – 512 с.

Антипова, Л.В. Новые белковые источники для косметических 30.

средств по уходу за кожей и волосами [Текст] / Л.В. Антипова, С.А.

Сторублевцев, С.Б. Болгова, О.Г. Стукало // Материалы II конференции «Инновации и решения в косметической индустрии». – Воронеж, 2015г. – с.28.

Антипова, Л.В. Оценка возможности использования природных 31.

биополимеров рыбного происхождения в технологиях лакокрасочных покрытий / Л.В. Антипова, О.П. Дворянинова, А.В. Соколов, Т.С. Гаршина, С.С.

Канонистова, К.В. Матасова // Материалы Международной научно-технической конференции Продовольственная безопасность: научное, кадровое и информационное обеспечение, Воронеж, 2014 – с.271-277.

Антипова, Л.В. Оценка молекулярно-массового распределения 32.

белковых фракций коллагеновых субстанций рыбного и животного происхождения [Текст] / Л.В. Антипова, С.Б. Болгова // Материалы Международной научно-технической конференции «Продовольственная безопасность: научное, кадровое и информационное обеспечение». – Воронеж, 2014 г. – с. 56-59.

Антипова, Л.В. Перспектива создания препаратов с асептическими 33.

свойствами на основе гидролизованных форм коллагена / Антипова Л.В.

Сторублевцев С.А. Гребенщиков А.В., Макарова Е.Л., Лакиза В.В. // INTERNATIONAL JOURNAL OF EXPERIMENTAL EDUCATION – 2011 – № 11 – с. 50-51 Антипова, Л.В. Применении коллагеновых субстанций в отраслях 34.

экономики [Текст] / Л.В. Антипова, С.А. Сторублевцев, С.Б. Болгова, И.В. Сухов, К.В. Матасова, И.Ю. Жданова, К.В. Майорова // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2015. – № 10, ч.4. – с. 601-604.

Антипова, Л.В. Рыбные коллагены: источники, свойства и применение 35.

[Текст] / Л.В. Антипова, С.А. Сторублевцев, С.Б. Болгова, И.Ю. Жданова, К.В.

Майорова // Сырье и упаковка для парфюмерии, косметики и бытовой химии. – 2015. – №7 (169) - с.15-17.

Антипова, Л.В. Свойства препаратов функциональных биополимеров 36.

рыбного происхождения / Антипова Л.В., Дворянинова О.П., Сторублевцев С.А., Черкесов А.З // Вестник ВГУИТ – 2014 – №3 –с 103-105 Антипова, Л.В. Современные методы исследования сырья и 37.

продуктов животного происхождения / Антипова Л. В. – Воронеж.: Воронежский ЦНТИ – филиал ФГБУ «РЭА» Минэнерго России, 2014. – 531 с.

Антипова, Л.В. Сорбционная способность биомодифицированной 38.

соединительной ткани убойных животных / Антипова Л.В. Сторублевцев С.А. // Мясная индустрия – 2009 – №2 – с. 63-64 Антипова, Л.В. Сравнительный анализ аминокислотного состава 39.

коллагеновых субстанций рыбного и животного происхождения [Текст] / Л.В.

Антипова, С.Б. Болгова // Материалы Международной научно-технической конференции «Продовольственная безопасность: научное, кадровое и информационное обеспечение». – Воронеж, 2014 г. – с. 59-61.

Банников, Г.А. Проблемы биологии развития, явления индукции и 40.

дифференцировки при опухолевом росте [Текст] /Г.А. Банников, В.И. Гельштейн, В.С. Глейберман, А.В. Любимов, Т.Г. Мойжесс, В.И. Самойлов // Издательство "Наука" М:, - 1981 - 263 с.

Батечко, С.А. Коллаген. Новая стратегия сохранения здоровья и 41.

продления молодости [Текст] / С.А. Батечко, А.М. Ледзевиров – Колечково, 2010.

– 244с.

Бауэр, О. Болезни прудовых рыб / О. Бауэр, В. Мусселиус, Ю.

42.

Стрелков – Колос, 1969 г – 336с.

Бегма, А.Н. Опыт применения коллагеновых повязок и губок 43.

Метуракол в хирургической практике / Бегма А.Н., Бегма И.В., Хомякова Е.К. – URL: http://www.rmj.ru/articles_9589.htm (дата обращения:23.06.2015) Березов, Т.Т. Биологическая химия [Текст] /Т.Т Березов., Б.Ф.

44.

Коровкин Учебник.– 3-е изд., перераб. и доп.– М.: Медицина, 1998.– 704 с.

Биоматериалы – URL: http://www.rusimplant.ru/catalog/biomaterials/ 45.

(дата обращения:29.06.2015) Биотестовый анализ – интегральный метод оценки качества объектов 46.

окружающей среды: учебно-методическое пособие / А.Г. Бубнов [и др.]; под общей ред. В,И. Гриневича; ГОУ ВПО Иван. гос. хим.-технол. ун-т. – Иваново, 2007. – 112с.

Биохимия. Под ред. Чл.-корр. РАН, проф. Е.С. Северина. – Москва – 47.

2003 – 779 с.

Болгова, С.Б. Идентификация коллагенов на основании электронномикроскопического анализа [Текст] / С.Б. Болгова, Л.В. Антипова // Международный студенческий научный вестник. – 2015. – №3 - с.249-250.

Болгова, С.Б. Перспектива применения рыбного коллагена в 49.

косметической и фармацевтической промышленности [Текст] / С.Б. Болгова, Л.В.

Антипова, А.В. Гребенщиков // ХII Международная научно-практическая конференция: «Научные перспективы ХХI века. Достижения и перспективы нового столетия» 10-11.07.2015, Новосибирск – Россия, с. 128-131.

Болтыхов, Ю.В. Получение и применение коллагеносодержащих 50.

пленкообразующих композиций в технологии мясных продуктов: диссертация на соискание ученой степени кандидата технических наук: 05.18.07 / Болтыхов Юрий Владимирович - Воронеж, 2009.- 249 с.

Борискина, Е.П. Физические факторы стабильности трехспиральных 51.

структур коллагенового типа [Текст] / Е.П.Борискина, Т.В. Больбух, М.А.

Семенов, В.Я. Малеев // Биополимеры и клетка,2006, №6 с. 458-467.

–  –  –

Гитлер не дошел до этого: из чего делают косметику – URL:

61.

http://newsland.com/news/detail/id/608453/ Глотова, И. А. Реологические характеристики полифункциональных 62.

дисперсных систем на основе коллагеновых белков животных тканей / И.А.

Глотова, Ю.В. Болтыхов.// Успехи современного естествознания.- 2008. - № 2. - с.

43-44.

Глотова, И.А. Инновационные направления в использовании 63.

вторичного коллагенсодержащего сырья / И.А. Глотова // Мясные технологии. С.56-59.

Глотова, И.А. Получение функциональных дисперсных систем на 64.

основе коллагеновых белков: формализованный подход к описанию тепломассообменных процессов / Глотова И.А. Ряжских В.И. Галочкина Н.А.

Макаркина Е.Н. Галочкин М.Н. // Фундаментальные исследования – 2012 – № 11с. 383-388 Глотова, И.А. Развитие научных и практических основ рационального 65.

использования коллагенсодержащих ресурсов в получении функциональных добавок, продуктов и пищевых покрытий: диссертация на соискание ученой степени доктора технических наук: 05.18.04, 05.18.07 / Глотова Ирина Анатольевна - Воронеж, 2003.- 458 с.

ГОСТ 23041-78 Мясо и продукты мясные. Метод определения 66.

оксипролина. – Введ. 1979-01-01. – М.: Стандартинформ, 2010, с. 6.

ГОСТ Р 51446-99 (ИСО 7218-96). Микробиология. Продукты 67.

пищевые. Общие правила микробиологических исследований [Текст] – М.: Изд-во стандартов, 1999.

Государственная Фармакопея Республики Беларусь. В 3 т. Т. 1. Общие 68.

методы контроля качества лекарственных средств / Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении; под общ. ред. Г. В. Годовальникова. - Минск: Минский государственный ПТК полиграфии, 2006 – с. 726.

Государственная Фармакопея Республики Беларусь. В 3 т. Т.2.

69.

Контроль качества лекарственных веществ и лекарственного растительного сырья / Центр экспертиз и испытаний в здравоохранении; под общ. ред. А. А Шерякова.

- Молодечно: «Типография «Победа», 2009 – с. 728.

Государственная фармакопея СССР XI издание выпуск 1. Общие 70.

методы анализа – URL: http://www.alppp.ru/law/hozjajstvennajadejatelnost/promyshlennost/35/gosudarstvennaja-farmakopeja-sssr---izdanie--vypusk-1obschie-metody-analiza.html (дата обращения:13.03.2015) Гремлих, Ганс-Ульрих Язык спектров. Введение в интерпретацию 71.

спектров органических соединений [Текст]. / Ганс-Ульрих Гремлих – ООО «Брукер Оптико», 2002. – 94 с.

Грищенко, Л. Болезни рыб с основами рыбоводства. Учебники и 72.

учебные пособия для студентов высших учебных заведений / Леонид Грищенко, Магомет Акбаев – КолосС, 2013 г – 480с.

Губчатая энцефалопатия крупного рогатого скота (BSE) – URL:

73.

http://www.vetlab.spb.ru/interesting/gubchataya-entsefalopatiya-krupnogo-rogatogoskota-bse (дата обращения:03.04.2015)

Губчатая энцефалопатия: прионы и вирусы в одной упряжке – URL:

74.

http://www.dw.com/ru/%D0%B3%D1%83%D0%B1%D1%87%D0%B0%D1%82%D0 %B0%D1%8FD1%8D%D0%BD%D1%86%D0%B5%D1%84%D0%B0%D0%BB%D0%BE%D0 %BF%D0%B0%D1%82%D0%B8%D1%8F- %D0%BF%D1%80%D0%B8%D0%BE%D0%BD%D1%8B-%D0%B8- %D0%B2%D0%B8%D1%80%D1%83%D1%81%D1%8B-%D0%B2- %D0%BE%D0%B4%D0%BD%D0%BE%D0%B9- %D1%83%D0%BF%D1%80%D1%8F%D0%B6%D0%BA%D0%B5/a-15486006 (дата обращения:23.04.2015) Дворянинова, О.П. Биотехнологический потенциал рыб внутренних 75.

водоемов: глубокая переработка и высокотехнологичные импортзамещающие производства: диссертация на соискание ученой степени доктора технических наук: 05.18.04, 05.18.07 / Дворянинова Ольга Павловна - Воронеж, 2013.- 508 с.

–  –  –

Кащенко, О.А. Изучение условий сорбции летучих веществ ароматов 85.

CO2-экстрактов на препаратах животных белков / Кащенко О.А., Данылив М.М., Антипова Л.В., Поленов И.В. // Современные наукоемкие технологии – 2010 – №3

– с. 40-41 Кендрью, Дж. Белки [Текст] // Под ред. Г.Нейрат, К. Бейли М.: ИЛ, 86.

1959. С. 400-435 Киселев, В.И. Применение коллагена в медицине – 87. URL:

http://mi32.narod.ru/02-02/kollagen.html (дата обращения:18.07.2015) Коллаген - применение в медицине и фармацевтических технологиях 88.

– URL: http://fishcollagen.ru/articles/203619 (дата обращения:28.05.2015) Коллаген в косметике для волос и лица. Достоинства и недостатки – 89.

URL: http://nipponkea.com/kollagen (дата обращения:12.07.2015) Коллаген: Мифы и реальность. Мнение Эксперта – 90. URL:

http://www.allvet.ru/articles/article78.php. (дата обращения:13.03.2015)

Коллагеновые материалы, пленки и способы их изготовления [Текст]:

91.

пат. 2455322 РФ: МПК: C08J5/00, C08J5/18, B32B9/02, B05D3/00, B29C67/20, C12N5/00, C12N11/04, A61K9/70 / Паукшто М. В., МакМартри Д. Х., Фуллер Д.

Д., Бобров Ю. А., Кирквуд Д. И.; заявители и патентообладатели КоллЭнджин, Инк., Зе Боард оф Трастис оф зе Лилэнд Стендфонд Юниор Юриверсити заявл. 05.12.2007; опубл. 10.07.2012.

Коровье бешенство и губчатая энцефалопатия человека. Медикус.ру – 92.

URL: http://www.medicus.ru/fphysician/patient/korove-beshenstvo-i-gubchatayaencefalopatiya-cheloveka-32989.phtml (дата обращения:13.08.2015) Крис Э. Болезни рыб. Профилактика и лечение / Крис Эндрюс, Э.

93.

Экселл, Н. Кэррингтон – Аквариум-Прин, Москва, 2007 – 208 с.

Курчаева, Л.В. Свойства коллагенов животного и рыбного 94.

происхождения / Л.В. Курчаева, Г.А. Хаустова, М.В. Мальцева // 14-я международная научно-практическая конференция, посвященная памяти В.М.

Горбатова «Перспективные направления исследований в области переработки мясного сырья и создания конкурентоспособных продуктов питания». — 2011.

Москва, с 137-141.

Курьянова, Н.Х Методы исследования мяса и мясных продуктов / 95.

сост. Н.Х. Курьянова – Димитровград: ТИ(ф)УГСХА, 2013. –71 с.

Кучменко, Т.А. Инновационные решения в аналитическом контроле 96.

[Текст]: учеб.пособие / Т.А. Кучменко// Воронеж. гос. технол. акад., ООО «СенТех». – Воронеж: 2009.- 252 с.;

Кучменко, Т.А. Контроль качества и безопасности пищевых 97.

продуктов, сырья [Текст]: лабораторный практикум: учеб.пособие / Т.А.

Кучменко, Р.П. Лисицкая, П.Т. Суханов, Ю.А. Асанова, Л.А. Харитонова // Воронеж. гос. технол. акад., ООО «СенТех». – Воронеж: 2010.- 116 с.

Кучменко, Т.А. Химические сенсоры на основе пьезокварцевых 98.

микровесов. В монографии Проблемы аналитической химии. Т. 14/ Под ред. Ю.Г.

Власова. - Воронеж - 2011.- С.127-202.;



Pages:     | 1 | 2 || 4 |
 

Похожие работы:

«Горовой Александр Иванович БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ ВЕЩЕСТВА ДРЕВЕСНОЙ ЗЕЛЕНИ И ШИШЕК PINUS KORAIENSIS (ПОЛУЧЕНИЕ, СОСТАВ, ИСПОЛЬЗОВАНИЕ) 03.02.14 – биологические ресурсы Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Тагильцев Ю. Г. Хабаровск – 2015 СОДЕРЖАНИЕ стр Введение.. 4 Глава 1 Обзор...»

«Якимова Татьяна Николаевна Эпидемиологический надзор за дифтерией в России в период регистрации единичных случаев заболевания 14.02.02 эпидемиология диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор...»

«Брит Владислав Иванович «Эффективность методов вакцинации против ньюкаслской болезни в промышленном птицеводстве» Специальность: 06.02.02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидат ветеринарных наук Научный руководитель:...»

«Шемякина Анна Викторовна БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ ВЕЩЕСТВА ДАЛЬНЕВОСТОЧНЫХ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ РОДА BETULA L. 03.02.14 – Биологические ресурсы Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Колесникова Р.Д. Хабаровск – 20 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ.. ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ПО ТЕМЕ ИССЛЕДОВАНИЙ. 1.1 Общие...»

«Карачевцев Захар Юрьевич ОЦЕНКА ПИЩЕВЫХ (АКАРИЦИДНЫХ) СВОЙСТВ РЯДА СУБТРОПИЧЕСКИХ И ТРОПИЧЕСКИХ РАСТЕНИЙ В ОТНОШЕНИИ ПАУТИННОГО КЛЕЩА TETRANYCHUS ATLANTICUS MСGREGOR Специальность: 06.01.07 – защита растений Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель: Попов Сергей...»

«Моторыкина Татьяна Николаевна ЛАПЧАТКИ (РОД POTENTILLA L., ROSACEAE) ФЛОРЫ ПРИАМУРЬЯ И ПРИМОРЬЯ 03.02.01 – Ботаника Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, старший научный сотрудник Н.С. Пробатова Хабаровск Содержание Введение... Глава 1. Природные...»

«Шинкаренко Андрей Семенович Формирование безопасного и здорового образа жизни школьников на современном этапе развития общества Специальность 13.00.01– общая педагогика, история педагогики и образования Диссертация на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Научные...»

«Смешливая Наталья Владимировна ЭКОЛОГО-ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ СИГОВЫХ РЫБ ОБЬ-ИРТЫШСКОГО БАССЕЙНА 03.02.06 Ихтиология Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель кандидат биологических наук, доцент Семенченко С.М. Тюмень – 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ...»

«Трубилин Александр Владимирович СРАВНИТЕЛЬНАЯ КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА КАПСУЛОРЕКСИСА ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ФАКОЭМУЛЬСИФИКАЦИИ КАТАРАКТЫ НА ОСНОВЕ ФЕМТОЛАЗЕРНОЙ И МЕХАНИЧЕСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ 14.01.07 – глазные болезни Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный...»

«Петухов Илья Николаевич РОЛЬ МАССОВЫХ ВЕТРОВАЛОВ В ФОРМИРОВАНИИ ЛЕСНОГО ПОКРОВА В ПОДЗОНЕ ЮЖНОЙ ТАЙГИ (КОСТРОМСКАЯ ОБЛАСТЬ) Специальность: 03.02.08 экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор В.В. Шутов...»

«Баранов Михаил Евгеньевич Экологический эффект биогенных наночастиц ферригидрита при ремедиации нефтезагрязненных почвенных субстратов Специальность (03.02.08) – Экология (биология) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат...»

«Мансуров Рашид Шамилович Применение препарата Солунат при выращивании бройлеров 06.02.08. – кормопроизводство, кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор, Заслуженный деятель науки Российской...»

«Будилова Елена Вениаминовна Эволюция жизненного цикла человека: анализ глобальных данных и моделирование 03.02.08 – Экология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант доктор биологических наук, профессор А.Т. Терехин Москва 2015 Посвящается моим родителям, детям и мужу с любовью. Содержание Введение.. 5 1. Теория эволюции жизненного цикла. 19...»

«БРИТАНОВ Николай Григорьевич ГИГИЕНИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПЕРЕПРОФИЛИРОВАНИЯ ИЛИ ЛИКВИДАЦИИ ОБЪЕКТОВ ПО ХРАНЕНИЮ И УНИЧТОЖЕНИЮ ХИМИЧЕСКОГО ОРУЖИЯ 14.02.01 Гигиена Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор...»

«АУЖАНОВА АСАРГУЛЬ ДЮСЕМБАЕВНА ОЦЕНКА ДЕЙСТВИЯ АБИОТИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ И БИОПРЕПАРАТА РИЗОАГРИН НА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ ПОЧВЫ, АДАПТИВНОСТЬ И ПРОДУКТИВНОСТЬ ЯРОВОЙ МЯГКОЙ ПШЕНИЦЫ 03.02.08 – Экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«Петро ва Ю лия Геннад ь евна «ШКОЛА УХОДА ЗА ПАЦИЕНТАМИ» ПР И ПР ОВЕДЕНИИ МЕДИЦИНСКОЙ Р ЕАБИЛИТАЦИИ ПОСЛЕ ЦЕР ЕБР АЛЬНОГО ИНСУЛЬ ТА 14.01.11 – нервные болезни ДИССЕРТАЦИЯ на соискание учёной степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор медицинских наук, Пряников И.В. профессор Москва – 2015 стр ВВЕДЕНИЕ ГЛАВА 1. СПЕЦИФИКА И ОСОБЕННОСТИ ПРОВЕДЕНИЯ МЕДИЦИНСКОЙ...»

«Хохлова Светлана Викторовна ИНДИВИДУАЛИЗАЦИЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ РАКОМ ЯИЧНИКОВ 14.01.12-онкология ДИССЕРТАЦИЯ На соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: Доктор медицинских наук, профессор Горбунова В.А Москва 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ Введение Глава 1. Обзор литературы 1.1. Общая характеристика рака яичников 1.1.1. Молекулярно-биологические и...»

«Сафранкова Екатерина Алексеевна КОМПЛЕКСНАЯ ЛИХЕНОИНДИКАЦИЯ ОБЩЕГО СОСТОЯНИЯ АТМОСФЕРЫ УРБОЭКОСИСТЕМ Специальность 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«ГОЛОЩАПОВА СВЕТЛАНА СЕРГЕЕВНА МИКРОЦИРКУЛЯТОРНЫЕ ЭФФЕКТЫ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ АПИПРОДУКТА ИЗ ТРУТНЕВОГО РАСПЛОДА В УСЛОВИЯХ ПОВЫШЕННОГО ДВИГАТЕЛЬНОГО РЕЖИМА (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-ГИСТОФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ) Специальность 03.03.01 – Физиология Диссертация на соискание ученой степени кандидата...»

«ДОРОНИН Игорь Владимирович Cистематика, филогения и распространение скальных ящериц надвидовых комплексов Darevskia (praticola), Darevskia (caucasica) и Darevskia (saxicola) 03.02.04 – зоология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, заслуженный эколог РФ Б.С. Туниев Санкт-Петербург Оглавление Стр....»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.