WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:     | 1 |   ...   | 4 | 5 ||

«ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ И ПРАКТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ МОДЕЛИРОВАНИЯ ХРОНИЧЕСКОЙ ГЕРПЕСВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ ...»

-- [ Страница 6 ] --

Юшков, Б.Г. Система крови и экспериментальные воздействия на организм / Б.Г. Юшков, В.Г. Климин, М.В. Северин. – Екатеринбург.: АМБ, 1999. – 232 с.

Ярилин, А.А. Гомеостатические процессы в иммунной системе. Контроль численности лимфоцитов / А.А. Ярилин // Иммунология. – 2004. – №5. – С.

312-316.

140. Becker W. Fatal Disseminated Primari Herpesvirus Infection / W. Becker, F. Kipps // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. – 1999. - Vol. 121, N7 – P.

563-572

141. Bedson, S.P. Immunity in Experimental Herpes //British Journal of experimental Pahtology – 2001. – N8. – P. 138-149.

142. Connor, J. D. Experimental Herpes Simplex Infection in the Owi Monkey / J. D. Connor, L.A. Wilson // Bulletin of Experimental Biology and Medicine, - 2003, Vol. 125, N 12 – P. 1265-1272.

143. Cook, M. Herpetic encephalitis / M. Cook // British Journal of experimental Pahtology – 2003. – N1. – P. 147-156.

De Ture, F.AСвязь инфекционных заболеваний мочевыводящих путей 144.

и репродуктивных органов с мужским бесплодием : Репродуктивное здоровье/ под ред. Кейта Л.Г. - М.: Медицина, - 1988, - С. 294-327.

145. Duerst, R. Innante immunity to herpes simplex virus type 2 / R. Duerst // Journal of Viral Immunology. – 2003. – Vol. 16. N 4. – P. 475-490.

146. Emery, V.C. Human herpesvirus 6 and 7 in solid organ transplant recipients / V.C. Emery // Bulletin of Experimental Biology and Medicine – 2001. – Vol. 32.

– P. 1357-1360.

147. Han, X. Gender influences herpes simplex virus type 1 infection in normal and gamma interferon – mutant mice / X. Han, P. Lundberg, B. Tanamachi // Journal Virology – 2001. – Vol. 75, N 6. – P. 3048-3052.

148. Lerner, F. Inapparent Herpes Simplex Virus Infection in Inoculated Rabbits / F. Lerner, J.I. Connor // Bulletin of Experimental Biology and Medicine - 2000, - Vol.

122, N 4 – P. 752-755.

149. Lubinski, J.M. Herpes simplex virus type 1 evades the effects of antibody and complement in vivo / J.M. Lubinski, M. Jiang, L. Hook // Journal Virology – 2002.

– Vol. 76. – P. 9232-9241.

150. Milligan, G.N. Role of polimorphonuclear leukocytes in resolution of HSV-2 infection of the mouse vagina / G.N. Milligan, N. Bourne, K.L. Dudley // Journal of Reproductive Immunology. – 2001. – Vol. 49. – P. 49-65.

151. Neofytou, E. Prevalence of human herpes virus types 1-7 in the semen of men attending an infertility clinic and correlation with semen parameters / E. Neofytou, G. Sourvinos, M.Asmarianaki // Fertility and Sterility. – 2008. – Vol. 91, N 6. – P.

2487-2494.

152. Ramshaw, I.A. Cytokines and immunity to viral infections / I.A. Ramshaw, A.J. Ramsay, G. Karupiach // Bulletin of Experimental Biology and Medicine – 1998. – Vol. 159, N1. – P. 69-77.

153. Scott, L.A. Viral Exanthems / L.A. Scott, M.S. Stone // Dermatology Online Journal. – 2003. – Vol. 3, N 2. – P. 4-10.

154. Scott, T.F. Herpes Simplex Virus: Simple Method for Adapting Human Strains to Rabbits/ T. F. Scott, V.R. Coleman // Bulletin of Experimental Biology and Medicine – 2004. – Vol. 121, N 2 – P. 441-445.

155. Stevens, J. Herpetic encephalitis: Immunity and Pathology in Experimental Herpes / J. Stevens, P. Wok // British Journal of experimental Pahtology – 1999. – N3. – P. 118-13.

156. Thomas, J. On the essential involvement of neutrophils in the immunopathologicdisease: herpetic stromal keratitis / J. Thomas, S. Gangappa, S. Kanangat, B.T. Rouse // Bulletin of Experimental Biology and Medicine – 2006, - Vol. 7, N 5. – P.

1383-1391.

157. Wald, A. Reactivation of genital Herpes simplex type 1, 2 infection in asymptomatic seropositivepersons / A.Wald // New English Journal of Medicine. – 2000. – V. 23. – P. 844-850.

158. Wok P. Experimental Herpes: Histopathology / P. Wok // British Journal of experimental Pahtology – 2007. – N3. – P. 237-251.

178

–  –  –

Применение лиофилизированного препарата аллофибробластов для лечения заболеваний, вызванных вирусом герпеса Изобретение относится к области медицины и ветеринарии, а именно к созданию средств для лечения человека и животных от заболеваний, вызванных вирусами герпеса.

Семейство вирусов герпеса, которых сейчас насчитывается более 100, включает в себя вирусы не только человека, но и различных позвоночных животных (обезьян, лошадей, крупного рогатого скота, свиней, кроликов, кошек, собак, мышей и т.

д.). Герпесвирусы животных не патогенны для человека, за исключением герпесвируса В обезьян. Патогенностью для человека обладают 8 вирусов герпеса, наиболее распространенными из которых являются вирус простого герпеса 1-го типа (ВПГ-1), вирус простого герпеса 2-го типа (ВПГ-2). Следствием инфицирования человека ВПГ-1 являются, как правило, различные поражения кожных и слизистых покровов. ВПГ-2 вызывает заболевания половых органов, в частности, генитальный герпес, внутриутробное инфицирование плода и тяжелые заболевания новорожденных. По некоторым оценкам, вирусом простого герпеса инфицировано до 90% населения земли.

При герпетических поражениях слизистых оболочек и кожных покровов в инфекционный процесс вовлекаются не только клетки эпителия и дермы, но и регионарная лимфатическая система. Заболевание сопровождается выраженной местной воспалительной реакцией – в дерме наблюдается отек сосочкового слоя и инфильтраты, состоящие преимущественно из лимфоцитов и нейтрофилов, в ядрах дегенерированных клеток обнаруживаются ацидофильные включения. Иммунологический ответ развивается как на вирусный антиген, так и на клеточные антигены, что нередко приводит к формированию аутоиммунных заболеваний кожи и слизистых оболочек [В.А. Исаков, Е.И. Архипова, Д.В. Исаков. Герпесвирусная инфекция человека. СПб.:

2006; М.А. Самгин, А.А.Халдин. Простой герпес (дерматологические аспекты). М.: 2002].

Клиническая картина герпетических заболеваний глаз в 61,7% случаев осложняется сопутствующей инфекцией, в 55,4% - метаболическим поражением ткани глаза, повышением внутриглазного давления и вторичной глаукомой – в 16,8% случаев, нарушением прозрачности хрусталика и развитием катаракты – в 12,7%.

В основе поражения глазной стромы, при герпетических заболеваниях глаз, с последующим её разрушением и рубцеванием лежит неадекватный ответ иммунной системы на вирусный и роговичный антиген [Майчук Ю.Ф. Герпесвирусные заболевания глаз. М.: 200].

Препараты, применяемые в настоящее время для лечения герпесвирусных инфекций, исходя из особенностей патогенеза заболевания, делятся на 2 группы: комплекс противовирусных препаратов на основе ацикловира и иммунотропные препараты (миелопид, тактивин, иммуноглобулин, интерфероны и др.).

Ацикловир (зовиракс, ганцикловир) являются синтетическим аналогом чистого нуклеозида с высокой активностью против герпесвирусов человека. Препарат блокирует репродукцию вируса в процессе его репликации в клетке. Наружное применение препаратов на основе ацикловира также требует длительного применения – в течение 7-12 дней 5 раз в сутки – что связано с низкой проникающей способностью ацикловира в роговицу и кожу. При длительном его применении возможно возникновение вариантов вируса малочувствительных к действию ацикловира.

Показанием для назначения иммунотропных препаратов является иммунологическая недостаточность, проявляющаяся снижением одного из показателей Т-звена и/или моноцитар Приложение 2 но-макрофагального звена, а также снижение функциональной активности фагоцитарных клеток. Иммунотропные препараты целесообразно сочетать с противовирусной терапией, для предотвращения появления резистентных к ацикловиру вариантов вируса. Препараты группы интерферона (реаферон, -интерферон, роферон, лейкинферон, виферон) применяется при герпетических заболеваниях любой локализации.

К недостаткам известных препаратов следует отнести привыкание и побочные эффекты, такие как чувство жжения, боли, дискомфорта, шелушения от мазей.

Например, известное противовирусное средство в форме геля, содержащие в 1 г: интерферон концентрированный 5000-10000 МЕ, нипагин 0,002-0,004 г, 2%-ный раствор сополимера стирола с малеиновым ангидридом [Патент RU 2302881, МПК А61К38/21, А61К9/06, А61Р31/12, 2007].

Также известна фармацевтическая композиция для лечения и профилактики генитального герпеса, хронической папилломавирусной инфекции и профилактики рака шейки матки, содержащая в 1 г:

интерферон – 100000-1000000 МЕ, Є – аминокапроновую кислоту – 0,1-0,5 г, поливинилпирролидон – 0,005-0,15 г, окись алюминия – 0,5-1,5 мг, ланолин – до 100,0 мг [Патент RU 2180593, МПК А61К38/19, А61К38/21, А61К45/00, А61К31/197, А61К9/06, А61Р31/22, А61Р35/00, 2002].

Известно также иммунокорригирующее противовирусное лекарственное средство, содержащие на 1 г: интерферон человеческий рекомбинантный альфа и/или бета, и/или гамма – 100МЕ – 20 млн МЕ, токоферола ацетата или производные токоферола – 0,010-0,070 г, аскорбат натрия или кальция или аскорбил пальминат – 0,010-0,050 г, кальция пантотенат – 0,010-0,030 г, антивирусный компонент – 0,010-0,40 г, формообразующие и вспомогательные вещества – остальное [Патент RU 2411039, МПК А61К38/21, А61К31/355, А61К31/475, А61К31/522, А61К47/00, А61К9/02, А61К9/06, А61К9/08, А61Р31/12, 2011].

Препараты на основе интерферона человеческого обладают высокой противогерпетической активностью.

Для лечения герпетических заболеваний используют также составы из растительного сырья. Например, известен противовирусный препарат «Алпизарин», полученный из травы копеечника альпийского и копеечника желтеющего или из листьев манго, и выпускающийся в виде таблеток или мази [М.Д. Машковский. Лекарственные средства. М.: Медицина, 1993, т. II, с.

401]. Кроме того, известна спиртовая настойка цветов и листьев боярышника кроваво-красного и молодых листьев клена платановидного при их соотношении 2-4:1-2 и при соотношении сырья и спирта 1:3 [Патент RU 2196598, МПК А61К35/78, А61К9/06, 2003].

Недостатком известных препаратов из растительного сырья является недостаточная противовирусная активность.

Известны и другие комплексные препараты на основе различных действующих веществ, таких как, например, фуллеренполигидрополиаминокапроновая кислота [Патент RU 2333752, МПК А61К31/195, А61К33/44, А61К9/06, А61Р31/12, 2008], гидрохлориды (3-R-1-адаманил)-1этиламинов [Патент RU 2247714, МПК С07С215/14, А61К31/14, А61Р31/16, А61Р31/22, 2005] и на основе других веществ, которые также имеют побочное действие и не обладают достаточным регенерирующим действием на ткани, поврежденные вирусом.

Лечение сельскохозяйственных животных от заболеваний герпесвирусной этиологии также является важной задачей. Так для лечения вульвовагинита крупного рогатого скота, например, используют вакцины, приготовленные на основе штамма вируса герпеса ИРТ, вызывающего данное заболевание [Патент RU 2279474, МПК С12N7/00, А61К39/265, С12R1/93, 2006; Патент RU 2111011, МПК А61К39/295, А61К39/15, А61К39/155, А61К39/265, 1998]. Кроме того, известно применение вагинальных средств, например, свечей, содержащих на одну свечу: виватон

– 1,0 г, ланолин (хч) – 1,0 г, АСД-2ф – 0,5 г, масло

Приложение 2 какао – 8,0 г [Патент RU 2375067, А61К35/12, А61К35/32, А61К35/34, А61К36/00,А61Р15/00, А61Р15/02, 2009].

Большинство перечисленных известных средств и составов против герпесвирусной инфекции имеют побочные эффекты. Кроме того, почти все известные препараты не вызывают регенерацию поврежденных вирусом тканей.

Цель настоящего изобретения – расширение ассортимента эффективных иммунобиологических препаратов для лечения заболеваний человека и животных, вызванных вирусом герпеса, обладающих высокими регенерирующими свойствами и отсутствием побочных эффектов.

Поставленная задача решается тем, что для лечения герпесвирусных заболеваний человека и животных предлагается применять лиофилизированный препарат из аллофибробластов, а именно клеток ЛЭЧ-4(81).

Аллофибробласты – это аллогенные (культивированные) фибробласты.

Фибробласты (от лат. fibra – волокно и греч. blastos – зародыш, росток) – основная клеточная форма соединительной ткани организма позвоночных животных и человека. Фибробласты формируются в процессе эмбриогенеза из стволовых клеток мезенхимного происхождения.

Фибробласты вырабатывают волокна и основное вещество соединительной ткани. Например, известно, что фибробласты могут продуцировать коллагены I и II типов и компоненты внеклеточного матрикса: ламинин, нидоген, тинасцин, хондроитин-4-сульфат, протеогликан, фибронектин, а также цитокины, под которыми понимают разнообразные факторы роста, интерфероны, хемокины и интерлейкины. Цитокины, в основном, играют регулирующую роль в межклеточных взаимодействиях, активируя или ингибируя активность определенных клеток, в том числе, клеток, участвующих в воспалении, регенерации и развитии иммунного ответа. Локальность действия цитокинов связана с их способностью соединяться с большим количеством рецепторов на поверхности клеток.

В настоящее время культуры аллофибробластов широко используются для лечения поверхностных поражений кожи и слизистых оболочек, в частности, тяжелых ожогов, трофических язв и других поверхностных поражений кожи и слизистых покровов. Клеточные системы составляют центральный элемент клеточных терапевтических технологий, используемых в кардиологии, неврологии, гематологии, гепатологии, стоматологии, эндокринологии и для целей ревитализации.

Известно применение аллофибробластов, а именно клеток штамма ЛЭЧ-4(81) в качестве клеточной культуры для заместительной терапии, которую используют в виде взвеси или в виде клеток на синтетической подложке для лечения ожоговых больных, больных с травмами опорно-двигательного аппарата, при восстановлении и коррекции функций поврежденных органов и тканей [Патент RU 2213775, МПК С12N5/08, А61К35/12, С12R1:91, 2003].

Известно применение аллофибробластов в хирургическом лечении парадонтита и в дентальной имплантации [Патент RU 2204332, МПК А61В17/00, А61К35/48, С12Т7/00, 2003; «Использование аллофибробластов при дентальной имплантации» и «Новые биотехнологии при хирургическом лечении парадонтита», авторы – С.Н. Федотов, С.Г. Шуневич, Н.А. Соловьев.

Материалы VII Всероссийского научного форума с международным участием «Стоматология 2005», Москва – 2005, с. 279-281]. Также известно применение аллофибробластов в хирургии повреждений лицевого черепа [«Клеточные культуры в хирургии повреждений лицевого черепа», М.В. Турунцев, Н.Л. Кузнецова, С.А. Мальцев, www.medline.ru том 8, Хирургия, май 2007].

По настоящему изобретению клеточные препараты лиофилизированных АФБ на основе клеток штамма ЛЭЧ-4(81) предлагается применять для лечения герпетических поражений кожи и слизистых оболочек у животных и человека.

Исследования Екатеринбургского НИИ вирусных инфекций (ЕНИИВИ) показали, что лиофилизированный препарат аллофибробластов (АФБ), а именно клеток штамма ЛЭЧ-4(81), позволяет сокращать сроки лечения и снижать тяжесть течения герпесвирусного заболевания не Приложение 2 только человека, но и позвоночных млекопитающих. Таким образом, обнаружено, что АФБ воздействует не только на вирусы герпеса человека (ВПГ-1, ВПГ-2), но и на вирусы герпеса, патогенные для животных. При применении заявляемого препарата побочных эффектов не выявлено.

Штамм ЛЭЧ-4(81) представляет собой штамм диплоидных клеток, полученный в ЕНИИВИ (А.С. СССР № 1147748), сертифицированный Минздравом России (регистрационное удостоверение Р № 001402/1, 2002), зарегистрированный в качестве оригинального, сохраняемого в низкотемпературном банке-музее разработчика (заявителя).

Клеточная культура ЛЭЧ-4(81) представляет собой морфологически однородную популяцию клеток с ограниченным сроком жизни, определенного тканевого происхождения, сохраняющую стабильный кариотип (2n 75% клеток), свободную от посторонних агентов, онкогенно безопасную, культивируемую на искусственных питательных средах в стандартных бутылках для кровезаменителей.

Клетки штамма ЛЭЧ-4(81) лишены антигенов гистосовместимости, что позволяет применять их, в том числе и для лечения животных.

Результаты исследований ЕНИИВИ показали, что аллофибробласты ЛЭЧ-4(81) в дополнение к ранее известному регенерирующему, иммуномодулирующему и антибактериальному действию, проявили новые свойства – противовирусное действие при лечении кожных и слизистых покровов, пораженных вирусом герпеса.

Противовирусное действие заявляемого препарата может быть связано с увеличением количества цитокинов в лиофилизированном штамме ЛЭЧ-4(81).

Результаты исследований ЕНИИВИ показывают, что в клетках аллофибробластов в течение 5 суток культивирования активно экспрессируются гены цитокинов.

Лиофилизированную форму штамма ЛЭЧ-4(81) получают способом, описанном в патенте RU 2398873. В качестве исходного сырья используют криоконсервированные диплоидные клеточные культуры согласно нормативной документации («Выделение, культивирование и контроль штаммов диплоидных клеток». Методические указания. Министерство здравоохранения СССР, М., 1979 г., с. 16-22). В качестве исходного сырья могут быть использованы клеточные культуры, полученные из эмбриональной ткани млекопитающих, преимущественно ткани эмбрионов свиньи, овцы. Для проведения заявленного способа наиболее предпочтительными являются эмбриональные ткани первой половины срока беременности. Клетки, полученные из эмбриональной ткани раннего срока, менее дифференцированы, что положительно влияет на качество и количество конечного продукта. В качестве источника эмбриональной ткани могут быть использованы эмбрионы второй половины срока беременности (10-12 недель), однако в этом случае качество клеток ухудшается, а время эффективного культивирования существенно уменьшается.

Приготовление клеточной культуры осуществляли согласно регламентации, описанной в патенте RU 2392318.

Получение сухого препарата осуществляли путем лиофилизации предварительно обработанной клеточной культуры АФБ согласно патенту на изобретения № 2398873 RU 10.09.2010.

Полученный препарат стабилен при хранении при температуре +40С в течение не менее 12 месяцев.

В качестве примеров конкретного выполнения приводим результаты исследований действия Лиофилизированного препарата аллофибробластов (АФБ) на организмы мыши, крысы.

Приложение 2 Пример 1. Исследование реакции беспородных белых мышей на введение лиофилизированного препарата АФБ, а именно – влияние препарата на показатели гуморального иммунитета белых мышей.

Исследование проводились на беспородных белых мышах обоего пола, весом 18,0 – 22,0 г (648 особей). Мыши содержались в стандартных условиях вивария с одинаковым пищевым рационом. Работа с животными проводилась в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных», утвержденными приказом МЗ СССР №75 от 12.08.1977 г.

Влияние препарата на иммуногенез изучали in vivo. Исследуемый препарат вводили животным внутрибрюшинно в количестве 0,5 мл в различных разведениях в физиологическом растворе (0,9% раствор NaCl). Соответственно условиям эксперимента, животные были разделены на следующие группы:

I группа – животные, которым вводили 0,5 мкг/кг;

II группа – животные, которым вводили 5,0 мкг/кг;

III группа – животные, которым вводили 50,0 мкг/кг;

IV группа – животные, которым вводили 500,0 мкг/кг;

V группа – животные, которым вводили 5000,0 мкг/кг;

VI группа (контрольная) – животные, которым вводили физиологический раствор в количестве, равном объёму исследуемого препарата.

Исследование гуморального иммунитета проводили через 6 и 24 часа после экспозиции растворов исследуемого препарата путем оценки следующих количественных показателей крови:

- титр иммуноглобулинов М (IgM), мг/мл;

- титр иммуноглобулинов G (IgG), мг/мл;

- титр иммуноглобулинов А (IgА), мг/мл;

- титр -интерферона (-ИФН), пг/мл;

- титр – фактора некроза опухоли (-ФНО), пг/мл;

- титр интерлейкина-1 (ИЛ-1), пг/мл;

- титр интерлейкина-2 (ИЛ-2), пг/мл;

- титр интерлейкина-6 (ИЛ-6), пг/мл.

Количественное определение титров иммуноглобулинов и цитокинов в сыворотке крови проводили с помощью тест-систем, основанных на классическом твердофазном двухступенчатом «сэндвич» методе иммуноферментного анализа на микропланшетах.

Состояние форменных элементов периферической крови у экспериментальных мышей регистрировали на гематологическом автоматическом анализаторе Digicell – 500+ (Австрия) через 24 часа после введения препарата.

Статистическую обработку полученных экспериментальных данных проводили согласно общепринятым методам, с расчетом среднего арифметического значения и доверительного интервала (m). Оценку достоверности различий определяли по критерию Стьюдента.

По результатам проведенных исследований достоверно установлено следующее.

Заявляемый препарат обладает выраженным иммуномодулирующим действием. Стимулирующее влияние отмечено для дозы препарата 500 мкг/кг и выше при внутрибрюшинном способе введения. В первую очередь активируется выработка -ФНО, ИЛ-1 и ИЛ-2. Подавление синтеза ИЛ-6 выражено в течение короткого срока времени (срок наблюдения 6 часов) и нивелируется спустя 24 часа (Таблица 1).

Приложение 2 Заявляемый препарат не оказывает сенсибилизирующего действия на макроорганизм, так как уровень IgE во всех группах подопытных животных оставался близким к значениям величин в контрольной группе мышей.

Повышение уровня концентраций IgM и IgG при введении препарата в дозах, превышающих 500 мкг/кг, по-видимому, является следствием неспецифической реакции на ксеногенный белок, содержащийся в испытуемом препарате.

Показатели количественного состава форменных элементов периферической крови (Таблица 2) свидетельствуют о том, что при внутрибрюшинном введении препарат не оказывает влияния на гемопоэз экспериментальных животных – через 24 часа показатели форменных элементов крови оставались подобными показателям, полученным у мышей контрольной группы при введении физиологического раствора.

Пример 2. Изучение действия заявляемого препарата на модели офтальмогерпеса крыс.

Модель воспроизводится на крысах путем внесения вируса простого герпеса на скарифицированную роговицу глаза.

Цель эксперимента – определение защитных свойств заявляемого препарата при локализованном очаге инфекции.

Препарат разводили инъекционной водой (5мл на флакон). В 0,025 мл раствора содержится 5 тысяч клеток (при расчете лиофилизации).

Лабораторных крыс (18 особей) весом 180 -200 г под эфирным наркозом заражали нанесением суспензии ВПГ-1 (с инфекционным титром 4,5lg ТЦД50/мл) на скарифицированную роговицу глаза (в объёме 0,025 мл).

После инфицирования крыс разделили на 3 группы по 6 особей:

I группа – «Контроль вируса»;

II группа – «Эксперимент»;

III группа – «Ацикловир».

Шести крысам группы «Эксперимент» через 24 часа после инфицирования провели двукратную аппликацию раствора заявляемого препарата с 3 часовым интервалом между манипуляциями. Указанную процедуру проводили в течение 3 суток с момента заражения.

Шести крысам группы «Ацикловир» через 24 часа после инфицирования двукратно наносили глазную мазь «Ацикловир Гексал» с 3 часовым интервалом между манипуляциями. Указанную процедуру проводили в течение 5 суток.

Шесть крыс группы «Контроль вируса» лечения не получала.

Наблюдение за развитием клинического процесса (Таблица 3) осуществляли следующими методами:

- Определение показателя защищенности (ПЗ)

–  –  –



Pages:     | 1 |   ...   | 4 | 5 ||
 

Похожие работы:

«Петренко Дмитрий Владимирович Влияние производства фосфорных удобрений на содержание стронция в ландшафтах Специальность 03.02.08 экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Белюченко Иван Степанович Москва – 2014 г. Содержание Введение Глава 1.Состояние изученности вопроса и цель работы 1.1 Экологическая...»

«Абдуллоев Хушбахт Сатторович ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО БРОНХИТА КУР ГЕНОТИПА QX 06.02.02 «ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология» Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Макаров Владимир Владимирович...»

«АУЖАНОВА АСАРГУЛЬ ДЮСЕМБАЕВНА ОЦЕНКА ДЕЙСТВИЯ АБИОТИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ И БИОПРЕПАРАТА РИЗОАГРИН НА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ ПОЧВЫ, АДАПТИВНОСТЬ И ПРОДУКТИВНОСТЬ ЯРОВОЙ МЯГКОЙ ПШЕНИЦЫ 03.02.08 – Экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«БОЛОТОВ ВЛАДИМИР ПЕТРОВИЧ ОЦЕНКА СОДЕРЖАНИЯ И МИГРАЦИЯ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ В ЭКОСИСТЕМАХ ВОЛГОГРАДСКОГО ВОДОХРАНИЛИЩА Специальность: 03.02.08. Экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук,...»

«Петро ва Ю лия Геннад ь евна «ШКОЛА УХОДА ЗА ПАЦИЕНТАМИ» ПР И ПР ОВЕДЕНИИ МЕДИЦИНСКОЙ Р ЕАБИЛИТАЦИИ ПОСЛЕ ЦЕР ЕБР АЛЬНОГО ИНСУЛЬ ТА 14.01.11 – нервные болезни ДИССЕРТАЦИЯ на соискание учёной степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор медицинских наук, Пряников И.В. профессор Москва – 2015 стр ВВЕДЕНИЕ ГЛАВА 1. СПЕЦИФИКА И ОСОБЕННОСТИ ПРОВЕДЕНИЯ МЕДИЦИНСКОЙ...»

«Петухов Илья Николаевич РОЛЬ МАССОВЫХ ВЕТРОВАЛОВ В ФОРМИРОВАНИИ ЛЕСНОГО ПОКРОВА В ПОДЗОНЕ ЮЖНОЙ ТАЙГИ (КОСТРОМСКАЯ ОБЛАСТЬ) Специальность: 03.02.08 экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор В.В. Шутов...»

«Палаткин Илья Владимирович Подготовка студентов вуза к здоровьесберегающей деятельности 13.00.01 общая педагогика, история педагогики и образования Диссертация на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Научные руководители: доктор биологических наук, профессор,...»

«МИГИНА ЕЛЕНА ИВАНОВНА ФАРМАКОТОКСИКОЛОГИЯ И ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ ТРИЛАКТОСОРБ В МЯСНОМ ПЕРЕПЕЛОВОДСТВЕ 06.02.03 – ветеринарная фармакология с токсикологией Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Кощаев Андрей...»

«АБДУЛЛАЕВ Ренат Абдуллаевич ГЕНЕТИЧЕСКОЕ РАЗНООБРАЗИЕ МЕСТНЫХ ФОРМ ЯЧМЕНЯ ИЗ ДАГЕСТАНА ПО АДАПТИВНО ВАЖНЫМ ПРИЗНАКАМ Шифр и наименование специальности 03.02.07 – генетика 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений ДИССЕРТАЦИЯ на соискание учёной степени кандидата...»

«Карачевцев Захар Юрьевич ОЦЕНКА ПИЩЕВЫХ (АКАРИЦИДНЫХ) СВОЙСТВ РЯДА СУБТРОПИЧЕСКИХ И ТРОПИЧЕСКИХ РАСТЕНИЙ В ОТНОШЕНИИ ПАУТИННОГО КЛЕЩА TETRANYCHUS ATLANTICUS MСGREGOR Специальность: 06.01.07 – защита растений Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель: Попов Сергей...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.