WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:     | 1 |   ...   | 5 | 6 ||

«РАЗРАБОТКА СБОРА НЕЙРОПРОТЕКТИВНОГО И ЭКСТРАКТА СУХОГО НА ЕГО ОСНОВЕ ...»

-- [ Страница 7 ] --

Полученные результаты при оценке метода количественного определения суммы свободных аминокислот в корнях астрагала перепончатого в пересчете на аспарагин, позволяют оценить метод положительно по параметрам: правильность, прецинзионность: сходимость и воспроизводимость, линейность и диапазон, специфичность, аналитическая область Заключение: Метод количественного определения суммы свободных аминокислот в пересчете на аспарагин в корнях астрагала перепончатого дает результаты, соответствующие нормативной документации.

Литература

1.Государственный стандарт Российской Федерации. Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002.

2. Рекомендации по межгосударственной стандартизации. РМГ 61-2003. Государственная система обеспечения единства измерений. Показатели точности, правильности, прецизионности методик количественного химического анализа. Методы оценки — М: ИПК Издательство стандартов, 2004. -41 с.

3. ГФ XI изд., вып. 1, 1987 г.

4. Алдашева Ж.И. Практические аспекты работ по валидации аналитических методик / Ж.И. Алдашева, В.В.

Беляев, В.В. Береговых // Фармация. - 2008. -№7. - С. 9-14.

5. Арзамасцев А.П., Садчикова Н.П., Харитонов Ю.Я. Валидация фармакопейных методов (проект общей фармакопейной статьи) // Ведомости научного центра экспертиза и контроля качества лекарственных средств. - МЗ РФ, 2001. - № 1. — С.28-29.

6. The United States Pharmacopoeia / The national Formular XXVII/19. - 2004. - P. 2622-2625.

–  –  –

1.Цель Цель: подтверждение, что метод количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на байкалин в сборе нейропротективном постоянно дает результаты, которые соответствуют нормативной документации.

2. Предмет Название объекта – сбор нейропротектиный.

Название определяемого вещества – сумма флавоноидов.

Определяемый параметр – количество.

3.Определения

3.1. Валидация – это подтверждение обоснованности выбора метода для определения показателей и норм качества фармацевтической продукции по каждому разделу НД.

3.2. Специфичность (specificity) — это способность методики, безусловно, определять анализируемое вещество в присутствии компонентов, которые могут быть в пробе. Как правило, ими являются примеси, продукты распада, плацебо и т. д. Отсутствие специфичности у отдельной аналитической методики может быть компенсировано использованием другой дополнительной аналитической методики.

Это определение имеет следующие приложения:

проверка подлинности (обеспечить подлинность анализируемого вещества);

испытания на чистоту (обеспечить, что выполненные аналитические методики позволяют правильно определить содержание примесей, т. е. родственных примесей, Тяжелых металлов, остаточных растворителей и т. д.);

количественное определение (обеспечить точность измерения при определении содержания/активности анализируемого вещества в пробе).

3.3. Правильность (accuracy). Правильность аналитической методики определяет степень близости между известным истинным значением или принятой справочной величиной и значением, полученным по данной методике. Иногда употребляется термин «истинность» (trueness).

3.4. Прецизионность (precision). Прецизионность аналитической методики выражает степень близости (степень дисперсии) между сериями измерений, полученных при параллельных измерениях одного однородного образца, в установленных условиях. Прецизионность может исследоваться на следующих уровнях: повторяемость, промежуточная прецизионность и воспроизводимость. Прецизионность должна оцениваться на однородных аутентичных образцах. Однако если невозможно получить однородный образец, она может определяться с использованием специально приготовленных образцов или испытуемых растворов.

3.5. Прецизионность аналитической методики обычно выражается как дисперсия, стандартное отклонение или коэффициент вариабельности серий результатов измерений.

3.6. Повторяемость (repeatability) выражает прецизионность методики при ее выполнении в одних и тех же условиях в течение короткого интервала времени. Повторяемость также называют внутренней прецизионностью (intra-assay precision).

3.7. Промежуточная прецизионность (intermediate precision) выражает внутри-лабораторную изменчивость:

разные дни, разные аналитики, разное оборудование и т. д.

3.8.Воспроизводимость (reproducibitity) выражает межлабораторную прецизионность (межлабораторные испытания, часто использующиеся для стандартизации методологии испытания).

3.9. Предел обнаружения (detection limit). Предел обнаружения отдельной аналитической методики представляет собой наименьшее количество анализируемого вещества в пробе, которое может быть обнаружено, но не обязательно выражено точным значением.

3.10. Предел количественного обнаружения (quantitation limit). Предел количественного обнаружения отдельной аналитической методики представляет собой наименьшее количество анализируемого вещества в пробе, которое может быть оценено количественно с приемлемой правильностью и прецизионностью. Предел количественного обнаружения является параметром методик определения количественного содержания компонентов, присутствующих в образце плацебо (т. е. все вещества, кроме действующего вещества) в низких концентрациях, и в частности, используется для характеристики методик определения примесей и/или продуктов деградации.

3.11. Линейность (linearity). Линейность аналитической методики — это способность методики (в пределах определенного диапазона) получать результаты, которые прямо пропорциональны концентрации (количеству) вещества в пробе.

3.12. Диапазон применения (range). Диапазон применения аналитической методики — это интервал между верхним и нижним значениями концентрации (количества) анализируемого компонента в пробе (включая эти значения), в рамках которого доказана приемлемая прецизионность, правильность и линейность методики.

3.13. Робастность (robustness). Робастность аналитической методики -это измерение ее способности оставаться неизменной при небольших, намеренных изменениях условий 2

4. Приборы для тестирования

–  –  –

5. Критерии оценки

5.1. Правильность. Критерий приемлемости: процент восстановления при использовании концентраций 80, 100, 120%, скорректированный на 100% должен находиться в пределах 95,0-105,0%. Процент восстановления R:

R = A / B 100%, где А – измеренное содержание;

В – заданное содержание.

5.2. Воспроизводимость; сходимость. Характеризуется величиной стандартного отклонения (SD) и величиной относительного стандартного отклонения (RSD) (коэффициента вариации CV)

SD

RSD = SD / X 100%, где М – результат отдельного определения;

X – среднее арифметическое всех определений;

N – число испытаний;

SD – стандартное отклонение;

RSD (CV) – относительное стандартное отклонение (коэффициент вариации).

Критерий приемлемости: коэффициент вариации для 6 измерений должен быть не более 10% при определении сходимости и не более 15% при определении воспроизводимости.

Расчет критерий Стьюдента SD tэкс – критерий Стьюдента экспериментальный;

X – среднее арифметическое всех определений;

SD – стандартное отклонение;

m – истинное значение определяемой величины;

N – число испытаний.

5.3. Специфичность.

Критерий приемлемости: спектр поглощения комплекса стандартного вещества, полученный по методике должен быть идентичен спектру поглощения комплекса с извлечением из сырья.

5.4. Линейность и диапазон.

Критерий приемлемости: метод считается линейным, если коэффициент корреляции между рядом полученных значений будет не ниже 0,99. Формула расчета коэффициента линейной корреляции:

, где r – коэффициент корреляции;

xi yi – i-тая пара экспериментальных значений;

m – объем выборки;

уравнение линейной зависимости: у = b х + а, где у – измеряемая величина;

b – угловой коэффициент линейной зависимости;

а – свободный член.

5.5. Аналитическая область методики. Критерий приемлемости: для количественного содержания анализируемого вещества в образце 80% - 120% от определяемой величины.

5.6. Выводы.

5.6.1. Отрицательный результат валидации:

- выявлено отсутствие специфичности и линейности;

- выявлено несоответствие показателей точности (правильность, прецизионность, сходимость, воспроизводимость) к допустимому диапазону показателя, установленному в НД на сырье).

6. Проведение испытаний

6.1. Методика количественного определения суммы флавоноидов в сборе нейропротективном Аналитическую пробу сбора измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм.

Около 1 г (точная навеска) измельченного сбора помещают в колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляют 100 мл 60% спирта, взвешивают с погрешностью ± 0,01. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и экстрагируют на кипящей водяной бане в течение 1 часа. Колбу с содержимым охлаждают, взвешивают, доводят до первоначальной массы 60% спиртом. Извлечение фильтруют через бумажный складчатый фильтр «красная лента», отбрасывая первые 10 мл фильтрата (раствор А). 0,5 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора 60% спиртом до метки и перемешивают (раствор Б). Измеряют оптическую плотность раствора Б на спектрофотометре при длине волны 279±2 нм. В качестве раствора сравнения используют 60% спирт.

Параллельно в тех же условиях измеряют оптическую плотность раствора РСО байкалина (раствор В).

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на байкалин и абсолютно сухое сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

–  –  –

где D - оптическая плотность испытуемого раствора;

D0 - оптическая плотность раствора РСО байкалина;

m - масса сбора нейропротективного, г;

m0 - масса РСО байкалина, г;

W - влажность сбора нейропротективного, %.

–  –  –

6.2. Правильность 6.2.1. Проверка метода на модельных растворах с РСО байкалина. Модельные растворы готовили трех концентраций с содержанием байкалина в % 80, 100, 120. Определение проводилось в 3 повторностях для каждой концентрации.

4

–  –  –

6.3. Прецизионность 6.3.1. Сходимость. Испытание проводили в разные дни с использованием спектрофотометра ПЭ-5400 УФ одним и тем же специалистом на одном образце сбора нейропротективного в 6 повторностях.

–  –  –

6.3.2. Воспроизводимость. Определение проводилось на одном образце сбора нейропротективного в двух лабораториях на приборах СФ-2000 и ПЭ -5400 УФ в 6 повторностях.

–  –  –

Спектрофотометрия. По методике количественного определения суммы флавоноидов были получены спектры поглощения сбора нейропротективного и РСО байкалина, которые снимали на спектрофотометре ПЭ-5400 УФ, в интервале длин волн от 250 до 400 нм. Результаты проведенных исследований приведены на рисунке.

0,7 0,6

–  –  –

Согласно полученным данным 60% спиртовое извлечение сбора нейропротективного имеет максимум поглощения идентичный максимуму поглощения РСО байкалина при длине волны 279 нм.

6.5. Линейность и диапазон. Линейность определялась на пяти уровнях концентраций РСО байкалина 80,90,100,110,120% от теоретического содержания суммы флавоноидов в пересчете на байкалин в сборе нейропротективном.

–  –  –

6.7. Аналитическая область методики. Линейная зависимость охватывает нижний предел содержания суммы флавоноидов в сборе нейропротективном в пересчете на байкалин (не менее 7,74%), линейность метода сохраняется в интервале концентраций 7,74 до 11,60 мкг/мл.

–  –  –

Полученные результаты при оценке метода количественного определения суммы флавоноидов в сборе нейропропротективном в пересчете на байкалин, позволяют оценить метод положительно по параметрам:

правильность, прецинзионность: сходимость и воспроизводимость, линейность и диапазон, специфичность, аналитическая область.

Заключение: Метод количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на байкалин в сборе нейропротективном дает результаты, соответствующие нормативной документации.

Литература

1.Государственный стандарт Российской Федерации. Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002.

2. Рекомендации по межгосударственной стандартизации. РМГ 61-2003. Государственная система обеспечения единства измерений. Показатели точности, правильности, прецизионности методик количественного химического анализа. Методы оценки — М: ИПК Издательство стандартов, 2004. -41 с.

3. ГФ XI изд., вып. 1, 1987 г.

4. Аладышева Ж.И. Практические аспекты работ по валидации аналитических методик / Ж.И. Аладышева, В.В.

Беляев, В.В. Береговых // Фармация. - 2008. -№7. - С. 9-14.

5. Арзамасцев А.П., Садчикова Н.П., Харитонов Ю.Я. Валидация фармакопейных методов (проект общей фармакопейной статьи) // Ведомости научного центра экспертиза и контроля качества лекарственных средств. - МЗ РФ, 2001. - № 1. — С.28-29.

6. The United States Pharmacopoeia / The national Formular XXVII/19. - 2004. - P. 2622-2625.

8

–  –  –

1.Цель Цель: подтверждение, что метод количественного определения суммы свободных аминокислот в пересчете на аргинин в сборе нейропротективном постоянно дает результаты, которые соответствуют нормативной документации.

2. Предмет Название объекта – сбор нейропротективный.

Название определяемого вещества – сумма свободных аминокислот.

Определяемый параметр – количество.

3.Определения

3.1. Валидация – это подтверждение обоснованности выбора метода для определения показателей и норм качества фармацевтической продукции по каждому разделу НД.

3.2. Специфичность (specificity) — это способность методики, безусловно, определять анализируемое вещество в присутствии компонентов, которые могут быть в пробе. Как правило, ими являются примеси, продукты распада, плацебо и т. д. Отсутствие специфичности у отдельной аналитической методики может быть компенсировано использованием другой дополнительной аналитической методики.

Это определение имеет следующие приложения:

проверка подлинности (обеспечить подлинность анализируемого вещества);

испытания на чистоту (обеспечить, что выполненные аналитические методики позволяют правильно определить содержание примесей, т. е. родственных примесей, Тяжелых металлов, остаточных растворителей и т. д.);

количественное определение (обеспечить точность измерения при определении содержания/активности анализируемого вещества в пробе).

3.3. Правильность (accuracy). Правильность аналитической методики определяет степень близости между известным истинным значением или принятой справочной величиной и значением, полученным по данной методике. Иногда употребляется термин «истинность» (trueness).

3.4. Прецизионность (precision). Прецизионность аналитической методики выражает степень близости (степень дисперсии) между сериями измерений, полученных при параллельных измерениях одного однородного образца, в установленных условиях. Прецизионность может исследоваться на следующих уровнях: повторяемость, промежуточная прецизионность и воспроизводимость. Прецизионность должна оцениваться на однородных аутентичных образцах. Однако если невозможно получить однородный образец, она может определяться с использованием специально приготовленных образцов или испытуемых растворов.

3.5. Прецизионность аналитической методики обычно выражается как дисперсия, стандартное отклонение или коэффициент вариабельности серий результатов измерений.

3.6. Повторяемость (repeatability) выражает прецизионность методики при ее выполнении в одних и тех же условиях в течение короткого интервала времени. Повторяемость также называют внутренней прецизионностью (intra-assay precision).

3.7. Промежуточная прецизионность (intermediate precision) выражает внутри-лабораторную изменчивость:

разные дни, разные аналитики, разное оборудование и т. д.

3.8.Воспроизводимость (reproducibitity) выражает межлабораторную прецизионность (межлабораторные испытания, часто использующиеся для стандартизации методологии испытания).

3.9. Предел обнаружения (detection limit). Предел обнаружения отдельной аналитической методики представляет собой наименьшее количество анализируемого вещества в пробе, которое может быть обнаружено, но не обязательно выражено точным значением.

3.10. Предел количественного обнаружения (quantitation limit). Предел количественного обнаружения отдельной аналитической методики представляет собой наименьшее количество анализируемого вещества в пробе, которое может быть оценено количественно с приемлемой правильностью и прецизионностью. Предел количественного обнаружения является параметром методик определения количественного содержания компонентов, присутствующих в образце плацебо (т. е. все вещества, кроме действующего вещества) в низких концентрациях, и в частности, используется для характеристики методик определения примесей и/или продуктов деградации.

3.11. Линейность (linearity). Линейность аналитической методики — это способность методики (в пределах определенного диапазона) получать результаты, которые прямо пропорциональны концентрации (количеству) вещества в пробе.

3.12. Диапазон применения (range). Диапазон применения аналитической методики — это интервал между верхним и нижним значениями концентрации (количества) анализируемого компонента в пробе (включая эти значения), в рамках которого доказана приемлемая прецизионность, правильность и линейность методики.

3.13. Робастность (robustness). Робастность аналитической методики -это измерение ее способности оставаться неизменной при небольших, намеренных изменениях условий 2

–  –  –

5. Критерии оценки

5.1. Правильность. Критерий приемлемости: процент восстановления при использовании концентраций 80, 100, 120%, скорректированный на 100% должен находиться в пределах 95,0-105,0%. Процент восстановления R:

R = A / B 100%, где А – измеренное содержание;

В – заданное содержание.

5.2. Воспроизводимость; сходимость. Характеризуется величиной стандартного отклонения (SD) и величиной относительного стандартного отклонения (RSD) (коэффициента вариации CV)

SD

RSD = SD/ X 100%, где М – результат отдельного определения;

X – среднее арифметическое всех определений;

N – число испытаний;

SD – стандартное отклонение.

RSD (CV) – относительное стандартное отклонение (коэффициент вариации).

Критерий приемлемости: коэффициент вариации для 6 измерений должен быть не более 10% при определении сходимости и не более 15% при определении воспроизводимости.

Расчет критерий Стьюдента SD tэкс – критерий Стьюдента экспериментальный;

X – среднее арифметическое;

SD – стандартное отклонение;

m – истинное значение определяемой величины;

N – число испытаний.

5.3. Специфичность.

Критерий приемлемости: спектр поглощения комплекса стандартного вещества, полученный по методике должен быть идентичен спектру поглощения комплекса с извлечением из сырья.

5.4. Линейность и диапазон.

Критерий приемлемости: метод считается линейным, если коэффициент корреляции между рядом полученных значений будет не ниже 0,99. Формула расчета коэффициента линейной корреляции:

–  –  –

r – коэффициент корреляции;

xi yi – i-тая пара экспериментальных значений;

m – объем выборки;

уравнение линейной зависимости: у = b х + а, где у – измеряемая величина;

b – угловой коэффициент линейной зависимости;

а – свободный член.

5.5. Аналитическая область методики. Критерий приемлемости: для количественного содержания анализируемого вещества в образце 80% - 120% от определяемой величины.

–  –  –

5.6.1. Отрицательный результат валидации:

- выявлено отсутствие специфичности и линейности;

- выявлено несоответствие показателей точности (правильность, прецизионность, сходимость, воспроизводимость) к допустимому диапазону показателя, установленному в НД на сырье).

6. Проведение испытаний

6.1. Методика количественного определения суммы свободных аминокислот в сборе нейропротективном.

Аналитическую пробу сбора измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм.

Около 1 г (точная навеска) измельченного сбора помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 150 мл воды очищенной, взвешивают с погрешностью ± 0,01 г. Содержимое колбы экстрагируют на водяной бане с обратным холодильником при температуре 90°C в течение 1 часа. Затем колбу с содержимым охлаждают, взвешивают, доводят до первоначальной массы водой очищенной.

Извлечение фильтруют через бумажный складчатый фильтр «красная лента», отбрасывая первые 10 мл фильтрата (раствор А).

В пробирку вместимостью 25 мл помещают 1 мл раствора А, прибавляют к нему 2 мл ацетатного буфера 4,5, 2 мл 0,05% водного раствора аскорбиновой кислоты, 1 мл 0,2% водного раствора нингидрина и нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 минут. После охлаждения раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и через 1 час после начала реакции определяют оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 568±2 нм.

Параллельно проводят реакцию свежеприготовленного раствора РСО аргинина (1 мл) с 0,2 % водным раствором нингидрина (1 мл) в присутствии ацетатного буфера 4,5 (2 мл), 0,05% водного раствора аскорбиновой кислоты (2 мл) и измеряют оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 568±2 нм. В качестве раствора сравнения используют воду.

Содержание суммы свободных аминокислот в пересчете на аргинин и абсолютно сухое сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

–  –  –

6.2. Правильность 6.2.1. Проверка метода на модельных растворах с РСО аргинина. Модельные растворы готовили 3 концентраций с содержанием аргинина в % 80, 100, 120. Определение проводилось в 3 повторностях для каждой концентрации.

–  –  –

6.3.1. Сходимость. Испытание проводили в разные дни с использованием спектрофотометра ПЭ-5400 УФ одним и тем же специалистом на одном образце сбора нейропротективного в 6 повторностях.

5

–  –  –

6.3.2. Воспроизводимость. Определение проводилось на одном образце сбора нейропротективного в двух лабораториях на приборах СФ-2000 и ПЭ-5400 УФ в 6 повторностях.

–  –  –

Спектрофотометрия. По методике количественного определения суммы свободных аминокислот были получены окрашенные комплексы водного извлечения сбора нейропротективного и РСО аргинина с 0,2% водным раствором нингидрина. Спектры поглощения полученных комплексов снимали на спектрофотометре ПЭ-5400 УФ, в интервале длин волн от 250 до 400 нм. Результаты проведенных исследований приведены на рисунке.

6

–  –  –

Согласно полученным данным продукт взаимодействия извлечения сбора нейропротективного с 0,2% водным раствором нингидрина имеет максимум поглощения идентичный максимуму поглощения продукта взаимодействия РСО аргинина с 0,2% водным раствором нингидрина при длине волны 568 нм.

6.5. Линейность и диапазон. Линейность определялась на пяти уровнях концентраций РСО аргинина 80, 90, 100, 110, 120% от теоретического содержания суммы свободных аминокислот в пересчете на аргинин в сборе нейропротективном.

–  –  –

6.7. Аналитическая область методики. Линейная зависимость охватывает нижний предел содержания суммы свободных аминокислот в сборе нейропротективном в пересчете на аргинин (не менее 2,93 %), линейность метода сохраняется в интервале концентраций 3,90 до 5,86 мкг/мл.

–  –  –

Полученные результаты при оценке метода количественного определения суммы свободных аминокислот в сборе нейропропротективном в пересчете на аргинин, позволяют оценить метод положительно по параметрам:

правильность, прецизионность (сходимость и воспроизводимость), линейность и диапазон, специфичность, аналитическая область.

Заключение: Метод количественного определения суммы свободных аминокислот в пересчете на аргинин в сборе нейропротективном дает результаты, соответствующие нормативной документации.

Литература

1.Государственный стандарт Российской Федерации. Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002.

2. Рекомендации по межгосударственной стандартизации. РМГ 61-2003. Государственная система обеспечения единства измерений. Показатели точности, правильности, прецизионности методик количественного химического анализа. Методы оценки — М: ИПК Издательство стандартов, 2004. -41 с.

3. ГФ XI изд., вып. 1, 1987 г.

4. Аладышева Ж.И. Практические аспекты работ по валидации аналитических методик / Ж.И. Аладышева, В.В.

Беляев, В.В. Береговых // Фармация. - 2008. -№7. - С. 9-14.

5. Арзамасцев А.П., Садчикова Н.П., Харитонов Ю.Я. Валидация фармакопейных методов (проект общей фармакопейной статьи) // Ведомости научного центра экспертиза и контроля качества лекарственных средств. - МЗ РФ, 2001. - № 1. — С.28-29.

6. The United States Pharmacopoeia / The national Formular XXVII/19. - 2004. - P. 2622-2625.

8

–  –  –

1.Цель Цель: подтверждение, что метод количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на байкалин в «Брэйн-Профит» экстракте сухом постоянно дает результаты, которые соответствуют нормативной документации.

2. Предмет Название объекта – «Брэйн-профит» экстракт сухой.

Название определяемого вещества – сумма флавоноидов.

Определяемый параметр – количество.

3.Определения

3.1. Валидация – это подтверждение обоснованности выбора метода для определения показателей и норм качества фармацевтической продукции по каждому разделу НД.

3.2. Специфичность (specificity) — это способность методики, безусловно, определять анализируемое вещество в присутствии компонентов, которые могут быть в пробе. Как правило, ими являются примеси, продукты распада, плацебо и т. д. Отсутствие специфичности у отдельной аналитической методики может быть компенсировано использованием другой дополнительной аналитической методики.

Это определение имеет следующие приложения:

проверка подлинности (обеспечить подлинность анализируемого вещества);

испытания на чистоту (обеспечить, что выполненные аналитические методики позволяют правильно определить содержание примесей, т. е. родственных примесей, Тяжелых металлов, остаточных растворителей и т. д.);

количественное определение (обеспечить точность измерения при определении содержания/активности анализируемого вещества в пробе).

3.3. Правильность (accuracy). Правильность аналитической методики определяет степень близости между известным истинным значением или принятой справочной величиной и значением, полученным по данной методике. Иногда употребляется термин «истинность» (trueness).

3.4. Прецизионность (precision). Прецизионность аналитической методики выражает степень близости (степень дисперсии) между сериями измерений, полученных при параллельных измерениях одного однородного образца, в установленных условиях. Прецизионность может исследоваться на следующих уровнях: повторяемость, промежуточная прецизионность и воспроизводимость. Прецизионность должна оцениваться на однородных аутентичных образцах. Однако если невозможно получить однородный образец, она может определяться с использованием специально приготовленных образцов или испытуемых растворов.

3.5. Прецизионность аналитической методики обычно выражается как дисперсия, стандартное отклонение или коэффициент вариабельности серий результатов измерений.

3.6. Повторяемость (repeatability) выражает прецизионность методики при ее выполнении в одних и тех же условиях в течение короткого интервала времени. Повторяемость также называют внутренней прецизионностью (intra-assay precision).

3.7. Промежуточная прецизионность (intermediate precision) выражает внутри-лабораторную изменчивость:

разные дни, разные аналитики, разное оборудование и т. д.

3.8.Воспроизводимость (reproducibitity) выражает межлабораторную прецизионность (межлабораторные испытания, часто использующиеся для стандартизации методологии испытания).

3.9. Предел обнаружения (detection limit). Предел обнаружения отдельной аналитической методики представляет собой наименьшее количество анализируемого вещества в пробе, которое может быть обнаружено, но не обязательно выражено точным значением.

3.10. Предел количественного обнаружения (quantitation limit). Предел количественного обнаружения отдельной аналитической методики представляет собой наименьшее количество анализируемого вещества в пробе, которое может быть оценено количественно с приемлемой правильностью и прецизионностью. Предел количественного обнаружения является параметром методик определения количественного содержания компонентов, присутствующих в образце плацебо (т. е. все вещества, кроме действующего вещества) в низких концентрациях, и в частности, используется для характеристики методик определения примесей и/или продуктов деградации.

3.11. Линейность (linearity). Линейность аналитической методики — это способность методики (в пределах определенного диапазона) получать результаты, которые прямо пропорциональны концентрации (количеству) вещества в пробе.

3.12. Диапазон применения (range). Диапазон применения аналитической методики — это интервал между верхним и нижним значениями концентрации (количества) анализируемого компонента в пробе (включая эти значения), в рамках которого доказана приемлемая прецизионность, правильность и линейность методики.

3.13. Робастность (robustness). Робастность аналитической методики -это измерение ее способности оставаться неизменной при небольших, намеренных изменениях условий 2

–  –  –

5. Критерии оценки

5.1. Правильность. Критерий приемлемости: процент восстановления при использовании концентраций 80, 100, 120%, скорректированный на 100% должен находиться в пределах 95,0-105,0%. Процент восстановления R:

R = A / B 100%, где А – измеренное содержание;

В – заданное содержание.

5.2. Воспроизводимость; сходимость. Характеризуется величиной стандартного отклонения (SD) и величиной относительного стандартного отклонения (RSD) (коэффициента вариации CV)

SD

RSD = SD / X 100%, где М – результат отдельного определения;

X – среднее арифметическое всех определений;

N – число испытаний;

SD – стандартное отклонение;

RSD (CV) – относительное стандартное отклонение (коэффициент вариации).

Критерий приемлемости: коэффициент вариации для 6 измерений должен быть не более 10% при определении сходимости и не более 15% при определении воспроизводимости.

Расчет критерий Стьюдента SD tэкс – критерий Стьюдента экспериментальный;

X – среднее арифметическое;

SD – стандартное отклонение;

m – истинное значение определяемой величины;

N – число испытаний.

5.3. Специфичность.

Критерий приемлемости: спектр поглощения комплекса стандартного вещества, полученный по методике должен быть идентичен спектру поглощения комплекса с извлечением из сырья.

5.4. Линейность и диапазон.

Критерий приемлемости: метод считается линейным, если коэффициент корреляции между рядом полученных значений будет не ниже 0,99. Формула расчета коэффициента линейной корреляции:

–  –  –

а – свободный член.

5.5. Аналитическая область методики. Критерий приемлемости: для количественного содержания анализируемого вещества в образце 80% - 120% от определяемой величины.

–  –  –

5.6.1. Отрицательный результат валидации:

- выявлено отсутствие специфичности и линейности;

- выявлено несоответствие показателей точности (правильность, прецизионность, сходимость, воспроизводимость) к допустимому диапазону показателя, установленному в НД на сырье).

–  –  –

6.1. Методика количественного определения суммы флавоноидов пересчете на байкалин в «Брэйнпрофит» экстракте сухом Около 0,3 г (точная навеска) экстракта сухого помещают в плоскодонную колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляют 50-60 мл 60% спирта, нагревают на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 15 минут, периодически перемешивая, охлаждают. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора 60% спиртом до метки (раствор А). 0,5 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора 60% спиртом до метки, перемешивают. Оптическую плотность раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны 279±2 нм. В качестве раствора сравнения используют 60% спирт.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора РСО байкалина.

Содержание суммы флавоноидов в экстракте сухом в пересчете на байкалин в процентах (Х) вычисляют по формуле:

D m 40000 D1 m0 2 100 50 100 100 X 10 ;

D0 m 100 50 0,5 (100 W ) D0 m (100 W ) где D – оптическая плотность испытуемого раствора;

D0 – оптическая плотность раствора РСО байкалина;

m– масса экстракта сухого, г;

m0 – масса РСО байкалина, г;

W- потеря в массе при высушивании экстракта сухого, %.

6.2. Правильность 6.2.1. Проверка метода на модельных растворах с РСО байкалина. Модельные растворы готовили 3 концентраций с содержанием байкалина в % 80, 100, 120. Определение проводилось в 3 повторностях для каждой концентрации.

4

–  –  –

6.3.1. Сходимость. Испытание проводили в разные дни с использованием спектрофотометра ПЭ-5400 УФ одним и тем же специалистом на одном образце «Брэйн-профит» экстракта сухого в 6 повторностях.

5

–  –  –

6.3.2. Воспроизводимость. Определение проводилось на одном образце «Брэйн-профит» экстракта сухого в двух лабораториях на приборах СФ-2000 и ПЭ-5400 УФ в 6 повторностях.

–  –  –

Спектрофотометрия. По методике количественного определения суммы флавоноидов были получены спектры поглощения 60% спиртовых растворов «Брэйн-профит» экстракта сухого и РСО байкалина. Спектры поглощения полученных растворов снимали на спектрофотометре ПЭ-5400 УФ, в интервале длин волн от 250 до 400 нм. Результаты проведенных исследований приведены на рисунке 1.

6 1.2 Absorbance (AU) 0.8 0.6 0.4 0.2

–  –  –

Согласно полученным данным 60% спиртовой раствор «Брэйн-профит» экстракта сухого имеет максимум поглощения идентичный максимуму поглощения РСО байкалина при длине волны 279 нм.

6.5. Линейность и диапазон. Линейность определялась на пяти уровнях концентраций РСО байкалина 80, 90, 100, 110, 120% от теоретического содержания суммы флавоноидов в пересчете на байкалин в «Брэйн-профит»

экстракте сухом.

–  –  –

6.7. Аналитическая область методики. Линейная зависимость охватывает нижний предел содержания суммы флавоноидов в «Брэйн-профит» экстракте сухом в пересчете на байкалин (не менее 24,21%), линейность метода сохраняется в интервале концентраций 7,26 до 10,90 мкг/мл.

7. Выводы

–  –  –

Полученные результаты при оценке метода количественного определения суммы флавоноидов в «Брэйнпрофит» экстракте сухом в пересчете на байкалин, позволяют оценить метод положительно по параметрам:

правильность, прецизионность (сходимость и воспроизводимость), линейность и диапазон, специфичность, аналитическая область.

Заключение: Метод количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на байкалин в «Брэйнпрофит» экстракте сухом дает результаты, соответствующие нормативной документации.

Литература

1.Государственный стандарт Российской Федерации. Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002.

2. Рекомендации по межгосударственной стандартизации. РМГ 61-2003. Государственная система обеспечения единства измерений. Показатели точности, правильности, прецизионности методик количественного химического анализа. Методы оценки — М: ИПК Издательство стандартов, 2004. -41 с.

3. ГФ XI изд., вып. 1, 1987 г.

4. Аладышева Ж.И. Практические аспекты работ по валидации аналитических методик / Ж.И. Аладышева, В.В.

Беляев, В.В. Береговых // Фармация. - 2008. -№7. - С. 9-14.

5. Арзамасцев А.П., Садчикова Н.П., Харитонов Ю.Я. Валидация фармакопейных методов (проект общей фармакопейной статьи) // Ведомости научного центра экспертиза и контроля качества лекарственных средств. - МЗ РФ, 2001. - № 1. — С.28-29.

6. The United States Pharmacopoeia / The national Formular XXVII. /19. - 2004. - P. 2622-2625.

8

–  –  –

1.Цель Цель: подтверждение, что метод количественного определения суммы свободных аминокислот в пересчете на аргинин в «Брэйн-Профит» экстракте сухом постоянно дает результаты, которые соответствуют нормативной документации.

2. Предмет Название объекта – «Брэйн-профит» экстракт сухой.

Название определяемого вещества – сумма свободных аминокислот.

Определяемый параметр – количество.

3.Определения

3.1. Валидация – это подтверждение обоснованности выбора метода для определения показателей и норм качества фармацевтической продукции по каждому разделу НД.

3.2. Специфичность (specificity) — это способность методики, безусловно, определять анализируемое вещество в присутствии компонентов, которые могут быть в пробе. Как правило, ими являются примеси, продукты распада, плацебо и т. д. Отсутствие специфичности у отдельной аналитической методики может быть компенсировано использованием другой дополнительной аналитической методики.

Это определение имеет следующие приложения:

проверка подлинности (обеспечить подлинность анализируемого вещества);

испытания на чистоту (обеспечить, что выполненные аналитические методики позволяют правильно определить содержание примесей, т. е. родственных примесей, Тяжелых металлов, остаточных растворителей и т. д.);

количественное определение (обеспечить точность измерения при определении содержания/активности анализируемого вещества в пробе).

3.3. Правильность (accuracy). Правильность аналитической методики определяет степень близости между известным истинным значением или принятой справочной величиной и значением, полученным по данной методике. Иногда употребляется термин «истинность» (trueness).

3.4. Прецизионность (precision). Прецизионность аналитической методики выражает степень близости (степень дисперсии) между сериями измерений, полученных при параллельных измерениях одного однородного образца, в установленных условиях. Прецизионность может исследоваться на следующих уровнях: повторяемость, промежуточная прецизионность и воспроизводимость. Прецизионность должна оцениваться на однородных аутентичных образцах. Однако если невозможно получить однородный образец, она может определяться с использованием специально приготовленных образцов или испытуемых растворов.

3.5. Прецизионность аналитической методики обычно выражается как дисперсия, стандартное отклонение или коэффициент вариабельности серий результатов измерений.

3.6. Повторяемость (repeatability) выражает прецизионность методики при ее выполнении в одних и тех же условиях в течение короткого интервала времени. Повторяемость также называют внутренней прецизионностью (intra-assay precision).

3.7. Промежуточная прецизионность (intermediate precision) выражает внутри-лабораторную изменчивость:

разные дни, разные аналитики, разное оборудование и т. д.

3.8.Воспроизводимость (reproducibitity) выражает межлабораторную прецизионность (межлабораторные испытания, часто использующиеся для стандартизации методологии испытания).

3.9. Предел обнаружения (detection limit). Предел обнаружения отдельной аналитической методики представляет собой наименьшее количество анализируемого вещества в пробе, которое может быть обнаружено, но не обязательно выражено точным значением.

3.10. Предел количественного обнаружения (quantitation limit). Предел количественного обнаружения отдельной аналитической методики представляет собой наименьшее количество анализируемого вещества в пробе, которое может быть оценено количественно с приемлемой правильностью и прецизионностью. Предел количественного обнаружения является параметром методик определения количественного содержания компонентов, присутствующих в образце плацебо (т. е. все вещества, кроме действующего вещества) в низких концентрациях, и в частности, используется для характеристики методик определения примесей и/или продуктов деградации.

3.11. Линейность (linearity). Линейность аналитической методики — это способность методики (в пределах определенного диапазона) получать результаты, которые прямо пропорциональны концентрации (количеству) вещества в пробе.

3.12. Диапазон применения (range). Диапазон применения аналитической методики — это интервал между верхним и нижним значениями концентрации (количества) анализируемого компонента в пробе (включая эти значения), в рамках которого доказана приемлемая прецизионность, правильность и линейность методики.

3.13. Робастность (robustness). Робастность аналитической методики -это измерение ее способности оставаться неизменной при небольших, намеренных изменениях условий 2

–  –  –

5. Критерии оценки

5.1. Правильность. Критерий приемлемости: процент восстановления при использовании концентраций 80, 100, 120%, скорректированный на 100% должен находиться в пределах 95,0-105,0%. Процент восстановления R:

R = A / B 100%, где А – измеренное содержание;

В – заданное содержание.

5.2. Воспроизводимость; сходимость. Характеризуется величиной стандартного отклонения (SD) и величиной относительного стандартного отклонения (RSD) (коэффициента вариации CV)

SD

RSD = SD/ X 100%, где М – результат отдельного определения;

X – среднее арифметическое всех определений;

N – число испытаний;

SD – стандартное отклонение;

RSD (CV) – относительное стандартное отклонение (коэффициент вариации).

Критерий приемлемости: коэффициент вариации для 6 измерений должен быть не более 10% при определении сходимости и не более 15% при определении воспроизводимости.

Расчет критерий Стьюдента SD tэкс – критерий Стьюдента экспериментальный;

X – среднее арифметическое;

SD – стандартное отклонение;

m – истинное значение определяемой величины;

N – число испытаний.

5.3. Специфичность.

Критерий приемлемости: спектр поглощения комплекса стандартного вещества, полученный по методике должен быть идентичен спектру поглощения комплекса с извлечением из сырья.

5.4. Линейность и диапазон.

Критерий приемлемости: метод считается линейным, если коэффициент корреляции между рядом полученных значений будет не ниже 0,99. Формула расчета коэффициента линейной корреляции:

–  –  –

5.5. Аналитическая область методики. Критерий приемлемости: для количественного содержания анализируемого вещества в образце 80% - 120% от определяемой величины.

5.6. Выводы.

5.6.1. Отрицательный результат валидации:

- выявлено отсутствие специфичности и линейности;

- выявлено несоответствие показателей точности (правильность, прецизионность, сходимость, воспроизводимость) к допустимому диапазону показателя, установленному в НД на сырье).

–  –  –

6.1. Методика количественного определения суммы свободных аминокислот в пересчете на аргинин в «Брэйн-профит» экстракте сухом.

Около 0,3 г (точная навеска) экстракта сухого помещают в плоскодонную колбу со шлифом вместимостью 250 мл, добавляют 80 мл воды очищенной, нагревают на водяной бане при температуре 90°С с обратным холодильником в течение 15 минут. После охлаждения полученное извлечение фильтруют в мерную колбу вместимостью 100 мл через бумажный складчатый фильтр «красная лента», предварительно промытый 10 - 15 мл воды очищенной, доводят объем раствора водой очищенной до метки, перемешивают (раствор А).

В пробирку вместимостью 25 мл помещают 1 мл раствора А, прибавляют к нему 2 мл ацетатного буфера 4,5, 2 мл 0,05% водного раствора аскорбиновой кислоты, 1 мл 0,2% водного раствора нингидрина и нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 минут. После охлаждения раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и через 1 час после начала реакции измеряют оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 568±2 нм.

Параллельно проводят реакцию свежеприготовленного раствора РСО аргинина (1 мл) с 0,2% водным раствором нингидрина (1 мл) в присутствии ацетатного буфера 4,5 (2 мл), 0,05% водного раствора аскорбиновой кислоты (2 мл) и измеряют оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 568±2 нм. В качестве раствора сравнения используют воду.

Содержание суммы свободных аминокислот в экстракте сухом в пересчете на аргинин в процентах (Х) вычисляют по формуле:

–  –  –

6.2.1. Проверка метода на модельных растворах с РСО аргинина. Модельные растворы готовили трех концентраций с содержанием аргинина в % 80, 100, 120. Определение проводилось в 3 повторностях для каждой концентрации.

4

–  –  –

6.3.1. Сходимость. Испытание проводили в разные дни с использованием спектрофотометра ПЭ-5400 УФ одним и тем же специалистом на одном образце «Брэйн-профит» экстракта сухого в 6 повторностях.

5

–  –  –

6.3.2. Воспроизводимость. Определение проводилось на одном образце «Брэйн-профит» экстракта сухого в двух лабораториях на приборах СФ-2000 и ПЭ-5400 УФ в 6 повторностях.

–  –  –

Спектрофотометрия. По методике количественного определения суммы свободных аминокислот были получены окрашенные комплексы водного раствора «Брэйн-профит» экстракта сухого и РСО аргинина с 0,2% водным раствором нингидрина. Спектры поглощения полученных комплексов снимали на спектрофотометре ПЭУФ, в интервале длин волн от 400 до 800 нм. Результаты проведенных исследований приведены на рисунке.

6

–  –  –

Согласно полученным данным продукт взаимодействия водного раствора «Брэйн-профит» экстракта сухого с 0,2% водным раствором нингидрина имеет максимум поглощения идентичный максимуму поглощения РСО аргинина с 0,2% водным раствором нингидрина при длине волны 568 нм.

6.5. Линейность и диапазон. Линейность определялась на пяти уровнях концентраций РСО аргинина 80, 90, 100, 110, 120% от теоретического содержания суммы свободных аминокислот в пересчете на аргинин в «Брэйнпрофит» экстракте сухом.

–  –  –

5

6.7. Аналитическая область методики. Линейная зависимость охватывает нижний предел содержания суммы свободных аминокислот в «Брэйн-профит» экстракте сухом в пересчете на аргинин (не менее 7,41%), линейность метода сохраняется в интервале концентраций 4,45 до 6,67 мкг/мл.

7. Выводы

–  –  –

Полученные результаты при оценке метода количественного определения суммы свободных аминокислот в «Брэйн-профит» экстракте сухом в пересчете на аргинин, позволяют оценить метод положительно по параметрам: правильность, прецизионность (сходимость и воспроизводимость), линейность и диапазон, специфичность, аналитическая область.

Заключение: Метод количественного определения суммы свободных аминокислот в пересчете на аргинин в «Брэйн-профит» экстракте сухом дает результаты, соответствующие нормативной документации.

Литература

1.Государственный стандарт Российской Федерации. Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002.

2. Рекомендации по межгосударственной стандартизации. РМГ 61-2003. Государственная система обеспечения единства измерений. Показатели точности, правильности, прецизионности методик количественного химического анализа. Методы оценки — М: ИПК Издательство стандартов, 2004. -41 с.

3. ГФ XI изд., вып. 1, 1987 г.

4. Аладышева Ж.И. Практические аспекты работ по валидации аналитических методик / Ж.И. Аладышева, В.В.

Беляев, В.В. Береговых // Фармация. - 2008. -№7. - С. 9-14.

5. Арзамасцев А.П., Садчикова Н.П., Харитонов Ю.Я. Валидация фармакопейных методов (проект общей фармакопейной статьи) // Ведомости научного центра экспертиза и контроля качества лекарственных средств. - МЗ РФ, 2001. - № 1. — С.28-29.

6. The United States Pharmacopoeia / The national Formular XXVII. /19. - 2004. - P. 2622-2625.

8 Приложение 5 Протоколы изучения стабильности объектов исследования в процессе хранения

–  –  –



Pages:     | 1 |   ...   | 5 | 6 ||
 

Похожие работы:

«АБДУЛЛАЕВ Ренат Абдуллаевич ГЕНЕТИЧЕСКОЕ РАЗНООБРАЗИЕ МЕСТНЫХ ФОРМ ЯЧМЕНЯ ИЗ ДАГЕСТАНА ПО АДАПТИВНО ВАЖНЫМ ПРИЗНАКАМ Шифр и наименование специальности 03.02.07 – генетика 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений ДИССЕРТАЦИЯ на соискание учёной степени кандидата...»

«ШИТОВ АЛЕКСАНДР ВИКТОРОВИЧ ВЛИЯНИЕ СЕЙСМИЧНОСТИ И СОПУТСТВУЮЩИХ ГЕОЛОГИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ НА АБИОТИЧЕСКИЕ И БИОТИЧЕСКИЕ КОМПОНЕНТЫ ЭКОСИСТЕМ (НА ПРИМЕРЕ ЧУЙСКОГО ЗЕМЛЕТРЯСЕНИЯ И ЕГО АФТЕРШОКОВ) 25.00.36 – Геоэкология (науки о Земле) Диссертация на соискание ученой степени доктора геолого-минералогических наук Горно-Алтайск 201...»

«Палаткин Илья Владимирович Подготовка студентов вуза к здоровьесберегающей деятельности 13.00.01 общая педагогика, история педагогики и образования Диссертация на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Научные руководители: доктор биологических наук, профессор,...»

«Будилова Елена Вениаминовна Эволюция жизненного цикла человека: анализ глобальных данных и моделирование 03.02.08 – Экология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант доктор биологических наук, профессор А.Т. Терехин Москва 2015 Посвящается моим родителям, детям и мужу с любовью. Содержание Введение.. 5 1. Теория эволюции жизненного цикла. 19...»

«ДОРОНИН Игорь Владимирович Cистематика, филогения и распространение скальных ящериц надвидовых комплексов Darevskia (praticola), Darevskia (caucasica) и Darevskia (saxicola) 03.02.04 – зоология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, заслуженный эколог РФ Б.С. Туниев Санкт-Петербург Оглавление Стр....»

«Шинкаренко Андрей Семенович Формирование безопасного и здорового образа жизни школьников на современном этапе развития общества Специальность 13.00.01– общая педагогика, история педагогики и образования Диссертация на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Научные...»

«Палаткин Илья Владимирович Подготовка студентов вуза к здоровьесберегающей деятельности 13.00.01 общая педагогика, история педагогики и образования Диссертация на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Научные руководители: доктор биологических наук, профессор,...»

«Баранов Михаил Евгеньевич Экологический эффект биогенных наночастиц ферригидрита при ремедиации нефтезагрязненных почвенных субстратов Специальность (03.02.08) – Экология (биология) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат...»

«Якимова Татьяна Николаевна Эпидемиологический надзор за дифтерией в России в период регистрации единичных случаев заболевания 14.02.02 эпидемиология диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор...»

«Алексеев Иван Викторович РАЗВИТИЕ КОМПЛЕКСНОГО ИНЖЕНЕРНО-ГЕОЛОГИЧЕСКОГО И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО МОНИТОРИНГА НА ЯКОВЛЕВСКОМ РУДНИКЕ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ ВЕДЕНИЯ ОЧИСТНЫХ РАБОТ ПОД НЕОСУШЕННЫМИ ВОДОНОСНЫМИ ГОРИЗОНТАМИ Специальность 25.00.08 – Инженерная геология,...»

«Труш Роман Викторович ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СКАЙ-ФОРСА И ЕГО ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИ КОЛИБАКТЕРИОЗЕ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ 06.02.03 – ветеринарная фармакология с токсикологией Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Научный руководитель Горшков Григорий Иванович заслуженный деятель науки РФ, доктор биологических наук, профессор Белгород – п. Майский 2015 г. СОДЕРЖАНИЕ...»

«Шапурко Валентина Николаевна РЕСУРСЫ И ЭКОЛОГИЧЕСКОЕ КАЧЕСТВО ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ (НА ПРИМЕРЕ БРЯНСКОЙ ОБЛАСТИ) Специальность 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«Абдуллоев Хушбахт Сатторович ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО БРОНХИТА КУР ГЕНОТИПА QX 06.02.02 «ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология» Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Макаров Владимир Владимирович...»

«Петренко Дмитрий Владимирович Влияние производства фосфорных удобрений на содержание стронция в ландшафтах Специальность 03.02.08 экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Белюченко Иван Степанович Москва – 2014 г. Содержание Введение Глава 1.Состояние изученности вопроса и цель работы 1.1 Экологическая...»

«Доронин Максим Игоревич ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ ВЫЯВЛЕНИЯ ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО НЕКРОЗА ГЕМОПОЭТИЧЕСКОЙ ТКАНИ ЛОСОСЕВЫХ РЫБ 03.02.02 «Вирусология» Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, Мудрак Наталья Станиславовна Владимир 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ 1 ВВЕДЕНИЕ 2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 2.1 Характеристика возбудителя инфекционного...»

«ХАПУГИН Анатолий Александрович РОД ROSA L. В БАССЕЙНЕ РЕКИ МОКША 03.02.01 – ботаника Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель Силаева Татьяна Борисовна д.б.н., профессор САРАНСК ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ Глава 1. ИСТОРИЯ ИЗУЧЕНИЯ РОДА ROSA L. В БАССЕЙНЕ МОКШИ. Глава 2. КРАТКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РОДА ROSA L. 2.1. Характеристика рода Rosa L. 2.2. Систематика рода Rosa L. Глава 3....»

«Хохлова Светлана Викторовна ИНДИВИДУАЛИЗАЦИЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ РАКОМ ЯИЧНИКОВ 14.01.12-онкология ДИССЕРТАЦИЯ На соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: Доктор медицинских наук, профессор Горбунова В.А Москва 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ Введение Глава 1. Обзор литературы 1.1. Общая характеристика рака яичников 1.1.1. Молекулярно-биологические и...»

«Ульянова Онега Владимировна МЕТОДОЛОГИЯ ПОВЫШЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ВАКЦИН НА МОДЕЛИ ВАКЦИННЫХ ШТАММОВ BRUCELLA ABORTUS 19 BA, FRANCISELLA TULARENSIS 15 НИИЭГ, YERSINIA PESTIS EV НИИЭГ 03.02.03 – микробиология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант:...»

«Якимова Татьяна Николаевна Эпидемиологический надзор за дифтерией в России в период регистрации единичных случаев заболевания 14.02.02 эпидемиология диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор...»

«Кириллин Егор Владимирович ЭКОЛОГИЯ ОВЦЕБЫКА (OVIBOS MOSCHATUS ZIMMERMANN, 1780) В ТУНДРОВОЙ ЗОНЕ ЯКУТИИ 03.02.08 – экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: д. б. н., профессор Мордосов И. И. Якутск – 2015 Содержание Введение.. Глава 1. Краткая физико-географическая...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.