WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:     | 1 | 2 || 4 |

«ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СКАЙ-ФОРСА И ЕГО ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИ КОЛИБАКТЕРИОЗЕ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ ...»

-- [ Страница 3 ] --

Если судить по сохранности и среднесуточным приростам, то скайфорс имел более высокую терапевтическую эффективность в дозах 25 и 50 мг/кг, применяемых 1 раз в день, чем 50 мг/кг дважды в день. Пентациклин в испытанных дозах уступал скай-форсу и даже принятому в хозяйстве комплексному способу лечения колибактериоза. Самые низкие среднесуточные приросты были в контрольной группе, а сохранность – в группе, получавшей пентациклин в дозе 100 мг/кг один раз в сутки.

4.1.3. Определение токсичности скай-форса Первые опыты по изучению токсичности были проведены на телятах.

Установлена высокая переносимость препарата телятами и его эффективность при желудочно-кишечных и респираторных заболеваниях (Г.В. Сноз, Г.И. Горшков, Е.Г. Яковлева [и др.], 2010). Токсичность скайфорса для птиц неизвестна.

Целью наших исследований было определение токсичности и переносимости скай-форса с тем, чтобы обосновать его дозу для дальнейшего изучения как альтернативы антибиотиков.

Первый опыт проведен на базе Белгородской межобластной лаборатории на белых мышах (n=30) живой массой 20-22 г, распределенных на 6 групп, по 5 животных в каждой группе. Первая группа служила контролем. Мышам вводили через пищеводный зонд воду в объеме, эквивалентном раствору скай-форса, применяемому в опытных группах. В опытных группах раствор скай-форса применяли в возрастающих дозах, начиная с 25 мг/кг ж.м. Доза для мышей последней группы составила 75 мг/кг ж.м.

Во втором опыте преследовалась цель определить LD50 для цыплят.

Использовано 35 голов 19-суточных цыплят-бройлеров кросса Hubbard F-15 площадки откорма «Пятницкое-2» ЗАО «Приосколье» в период с 9 по 30 октября 2011 года. Цыплята были разделены на 7 групп, по 5 голов в каждой.

Средняя масса цыпленка в группах в начале опыта составляла 658 г.

Перед опытом и во время его проведения цыплята находились в одинаковых условиях кормления и содержания. Разделенных на группы цыплят в день проведения опыта выдерживали без корма 5 ч и без воды 2 ч.

Затем с помощью катетера вводили в зоб скай-форс с 2%-м содержанием

–  –  –

При наблюдении за белыми мышами как в первые часы после введения скай-форса, так и в последующие не выявлено каких-либо изменений в их общем состоянии. На протяжении всего времени наблюдения (14 сут) мыши были подвижны, адекватно реагировали на внешние раздражители, активно проявляли исследовательский рефлекс, потребляли корм и воду, свободно перемещались. Заболеваний и падежа не отмечено.

64 Таким образом, скай-форс во всех вариантах доз, примененный в данном опыте, оказался для белых мышей нетоксичным, поэтому вычислить LD50 не представляется возможным.

Во втором варианте опыта, проведенного на цыплятах, испытаны дозы 20-70 мг/кг массы тела. Результаты представлены в табл. 7.

–  –  –

После введения скай-форса никаких изменений у цыплят даже от дозы 70 мг/кг не наблюдалось. На вскрытии павшего цыпленка выявлено кровоизлияние и отечность перикарда. Другие органы были без визуальных изменений.

В третьем варианте опыта на 50 цыплятах испытаны повышенные дозы скай-форса. После их ежесуточного перорального введения (150-375 мг/кг), начиная с 14-суточного возраста (табл. 8), также не наблюдалось никакой выраженной реакции на препарат. Весь период наблюдения (до 22-х сут) цыплята ничем не отличались от интактных (по поведению, оперению, потреблению корма).

–  –  –

654,5 ±7,1 649,2 ±7,9 705,1 ±8,0 687,2 ±8,2 670,0 ±8,0 18 993,0 ±15,2 998,0 ±16,0 1076,0 ±16,5 1073,0 ±17,5 1030,0 ±17,7 1422,0 ±23,2 1475,0 ±24,5 1521,0 ±24,2 1428,0 ±24,9 28 1428,0 ±25,0 1883,0 ±33,1 1932,0 ±33,9 1915,0 ±34,2 1870,0 ±33,3 33 1823,0 ±34,0 После каждых 5 сут применения препарата и по окончании опыта из каждой группы было взято по два цыпленка-бройлера для контрольного убоя. Ниже приведены результаты вскрытия после убоя.

Слизистые оболочки и естественные отверстия. Слизистая оболочка ротовой полости и клоаки бледно-розовая. Веки без видимых повреждений, покраснение конъюнктивы.

Кожа, подкожная клетчатка. Кожа эластичная, тонкая. Оперение светлое. Подкожная клетчатка умеренно развита.

Ротовая полость плотно закрыта. Язык светло-розового цвета.

Глотка и пищевод. Слизистые оболочки гладкие, блестящие, светлорозового цвета.

Зоб заполнен кормовыми массами.

Гортань, трахея. Слизистые оболочки светло-розового цвета.

Легкие полнокровные, пропитаны серозной жидкостью, сосуды слабо кровенаполнены. Легкие чистые, без участков уплотнения, консистенция мягкая, в воде не тонут.

Воздухоносные мешки грудные и брюшные чистые без экссудата.

Сердце, сердечная сорочка и кровь. Сердце округлой формы, коронарные сосуды кровенаполнены. Сердечная сумка чистая, без изменений, в предсердиях и желудочках кровь в несвёрнутом состоянии.

Печень с обильным отложением фибрина на поверхности в виде студневидных масс, легко отделяющихся от капсулы, увеличена в объеме, дряблой консистенции желтовато-коричневого цвета, с притуплёнными краями. С поверхности разреза стекает кровь.

Мышечный желудок. Наличие кормовых масс, кутикула легко снимается; слизистая оболочка под кутикулой бледно-розового цвета без пятен и наложений.

Железистый желудок. Слизистая оболочка светло-розового цвета.

Селезёнка округлой формы, темно-вишневого цвета. На разрезе паренхима плотной консистенции.

Тонкий кишечник. Слизистая оболочка, в особенности двенадцатиперстной и тощей кишок, бледно-розовая, покрыта слизью.

Содержимое кишечника слизистое, желтого цвета.

Толстый отдел кишечника. Слизистая оболочка ободочной, слепых кишок бледно-розового цвета, влажная. Содержимое прямой кишки жидкое, светло-коричневого цвета, слизистая оболочка бледно-розового цвета.

Почки не увеличены в объёме, полнокровные.

Таким образом, в конце выращивания отмечалось некоторое увеличение печени и дистрофические её изменения в опытных группах.

Однако относить эти изменения на счет скай-форса нет оснований, т.к.

подобные изменения наблюдались и у цыплят из контрольной группы.

4.1.4. Гистоструктура иммунокомпетентных органов Существует множество работ по морфологии печени и других внутренних органов кур и их изменениям в процессе онтогенеза и условий существования (Г.П. Дементьев, 1962; Т. Абрамова, Н. Данилевская, 2006; В.

Никитченко, 2011), а также о роли лимфоидных органов в иммунологических реакциях организма.

Иммунная система объединяет органы и ткани, которые осуществляют защитные реакции организма и создают иммунитет. К центральным органам иммуногенеза птиц относят тимус (вилочковая железа) и фабрициеву бурсу (М.Е. Пилипенко, 1967; Г.Ф. Задарновская, 1977; Е.Т. Moticka, 1977; К.А.

Лебедев, И.Д. Понякина, В.С. Авдеева, 1991; Ю.В. Конопатов, 2000; G.

2001; H. Arakawa, J.-M. Buerstedde, 2004; Т.К. Давтян, Г.А.

Casotti, Геворкян, Д.А. Погосян, 2007; Л.А. Захарова, 2009; Д. А. Боков, А.А.

Стадников, Е. А. Дьяконова с соавт., 2013).

Становление и развитие лимфоидной системы ассоциировано с иммуногенезом и адаптировано с поддержанием постоянства внутренней среды организма (И.В. Бородулина, 2009).

Перед нами стояла цель – изучить гистологическую структуру печени, тимуса, фабрициевой сумки и селезенки у цыплят-бройлеров в динамике их роста на фоне применения препарата скай-форс.

Для опыта были сформированы 5 групп, по 10 голов в каждой. Первая группа получала скай-форс в дозе 150, вторая – 225, третья – 300, четвертая – 375 мг/ кг ж.м.; пятая служила контролем.

Продолжительность опыта – до 23 сут (с 14-суточного возраста до 36суточного). Препарат вводили ежедневно индивидуально каждому цыпленку.

В течение всего периода опыта вели клинические наблюдения за цыплятами, учитывали случаи заболеваний и вынужденного убоя, проводили

–  –  –

гистологической картины птиц контрольной группы не обнаружено.

Конденсированный хроматин в ядрах гепатоцитов четко выражен. Ядра гепатоцитов содержали 1-2 ядрышка.

Двуядерные гепатоциты практически не встречались. Признаков кариорексиса или кариопикноза нет. Так же, как и в контроле, отмечалось некоторая вакуолизация цитоплазмы гепатоцитов, которая имела диффузный характер.

–  –  –

гепатоцитов часто неравномерно окрашена, вакуолизирована, характер изменений – диссеминированный по всей дольке, различий между дольками нет.

Отмечалось некоторые изменения в соединительно-тканном компоненте печени. Как центролобулярно, так и перилобулярно можно было отметить повышенную частоту (рис. 6) встречаемости фибробластов в сравнении с группами 1, 2 и контрольной. Однако признаков цирротических изменений нет, равно как и фиброматоза. Микроциркуляторное русло (капиллярная сеть) также умеренно кровенаполнено.

Группа 4. Возраст 36 сут.

Доза 375 мг/кг ж.м. Гистологические срезы печени были однородны, кровоизлияний и очаговых поражений паренхимы органа не отмечается. Признаков цитолиза, апоптоза, острых воспалительных реакций нет. Гистоархитектоника органа соответствовала нормальному гистологическому строению. Строма органа имела тонкую фибриллярную структуру, слабо выраженную, признаки фиброматоза, цирротические изменения отсутствовали. Однако, как и в группе 3, количество фибробластов выросло. Тем не менее, капиллярное русло не расширено, отека пространств Диссэ нет. Существенных отличий от гистологической картины птиц контрольной группы не обнаружено. Конденсированный хроматин в ядрах гепатоцитов четко выражен. В ядрах гепатоцитов – по 1-2 ядрышка. Двуядерные гепатоциты практически не встречались. Признаков кариорексиса или кариопикноза нет.

Выявляется некоторая вакуолизация цитоплазмы гепатоцитов.

Тимус. Опытная группа 1. Возраст 26 сут. Доза 150 мг/кг ж.м.

Структура тимуса сформирована дольками и стромой, включая жировую клетчатку между дольками. В дольках можно выделить мозговое и корковое вещество. Корковая зона была хорошо выражена, не имела признаков делимфатизации. Клеточный состав сформирован преимущественно малыми и средними лимфоцитами, редко встречались макрофаги и небольшое количество ретикулоцитов. Гистологических отличий от тимуса птиц контрольной группы нет. В мозговой зоне клеточный состав более разнообразен, что соответствует норме. Клеточный состав представлен макрофагами, ретикулоцитами, незначительным количеством малых и средних лимфоцитов (превалируют большие лимфоциты) и эпителиоцитами, формирующими тельца Гассаля (ответственные за продукцию цитокинов и имеют важное значение на ранних этапах формирования тимуса в

–  –  –

Опытная группа 2. Возраст 26 сут. Доза 225 мг/кг ж.м. Структура тимуса сформирована дольками и стромой, включая жировую клетчатку между дольками (рис.7).

В дольках можно выделить мозговое и корковое вещество. Корковая зона хорошо выражена, без признаков делимфатизации. Клеточный состав сформирован, изменений не выявлено. Гистоструктура органа не отличалась от контроля. В мозговой зоне клеточный состав более разнообразен и в целом соответствовал гистоархитектонике нормального тимуса. Клеточный состав был представлен макрофагами, ретикулоцитами, незначительным количеством малых и средних лимфоцитов (превалировали большие лимфоциты). Однако некоторые отклонения от нормы (в отличие от

–  –  –

Строма не утолщена. Клеточный состав стромы представлен как фибробластами, так и фиброцитами. Между дольками нередко встречались участки жировой клетчатки. Отдельные дольки редуцированы в размерах.

–  –  –

Как видно из таблицы, по сохранности цыплят максимальный эффект получен от скай-форса, применяемого в дозе 100 мг/кг в сутки, далее следуют контрольная группа, затем скай-форс в дозе 25 мг/кг. По среднесуточным приростам обе группы, получавшие скай-форс, превосходили контроль на 5,1 и 4,4%. Следует отметить, что во всех трех группах среднесуточный прирост массы тела был выше стандарта для изучаемого кросса на 9,6 (контроль), 15,1 (скай-форс 25 мг/кг) и 14,3% (скайфорс 100 мг/кг).

Исследования показали, что наноструктурный препарат скай-форс может использоваться с профилактической целью с первых дней выращивания цыплят и для их лечения при колибактериозе. Его эффективность выше, чем пентациклина и используемых в хозяйстве химиотерапевтических средств. На фоне применения скай-форса отмечались более высокие показатели прироста живой массы и сохранности цыплят.

Какое-либо его побочное действие на организм цыплят не выявлено.

Учитывая полученные результаты по исследованию на переносимость, сохранность и прирост цыплят, можно сделать заключение, что скай-форс и пентациклин представляют интерес для практической ветеринарии как возможные заменители антибиотиков, к которым уже сформировались резистентные штаммы патогенных бактерий.

4.1.6. Предполагаемый механизм противомикробного действия скай-форса Скай-форс представляет собой наноструктурную частицу, в которой сорбированы или находится в физико-химической связи молекулы противомикробного вещества. Попадая в очаг поражения, наночастица под влиянием рН, или повышенной температуры, либо других активаторов распадается, связанные с ней молекулы противомикробного средства высвобождаются и оказывают своё действие локально, без насыщения всего организма ХТС (М.Б. Тарасов, 2006; М. Б. Тарасов, Г.И. Горшков, 2010; М.

Б. Тарасов, 2012), подобно тому, как это имеет место после применения гексаметилентетрамина. В кислой среде гексаметилентетрамин распадается на формалин и аммиак. Аммиак метаболизируется или выводится из организма, а формальдегид оказывает противомикробное и противовоспалительное влияние (И.Е. Мозгов, 1969).

Известно, что в качестве основы в технологии создания скай-форса использован зашифрованный фармакопейный препарат, относящийся к категории ХТС. Сама технология препаратов не раскрыта (М.Б. Тарасов, 2012).

Антимикробные свойства скай-форса изучались не только на культуре кишечной палочки (Е.соli С 6ОО), но и на золотистом стафилококке (S.

aureus АТСС 25178–1), кишечных иерсиниях (Y. еnterocolitica 1407). В опытах in vitro, проведенных методом серийных разведений, установлено, что МПК скай-форса для этих микроорганизмов находилась в пределе 1мг/мл1, а бактериостатическая концентрация 0,01мг·мл 1. Эти равна данные подтверждаются в поздних исследованиях проведенными другими учеными: скай-форс в концентрации 1 мг·мл 1 обладает антимикробными свойствами в отношении Е.coli., S.saprophyticus, B.cereus и B.subtilis (М.В.

Глухова, И.П. Погорельский, М.Б. Тарасов, 2015).

Ниже приведены фото воздействия скай-форса на Е.coli.

Рис.18. Исходные клетки кишечной палочки. Увеличение х50000 Рис.19. Начальная стадия деструкции клетки. Прошла 1 мин.

Увеличение х5000

–  –  –

На приведенных выше рисунках видно, что в опытах in vitro проявляется разрушающее влияние скай-форса на Е. coli С 600. Это отмечалось после нанесения частиц препарата на поверхность плотной питательной среды, засеянной кишечной палочкой. Вначале происходил контакт частиц препарата с бактериальной клеткой, затем разрушалась бактериальная стенка, и всё завершалось лизисом клеток через пять мин.

Основываясь на приведенном фото, можно отметить, что кластерные частицы препарата составляют размер от 5 до 10 нм.

–  –  –

Из данных табл. 12 видно, что в группе, где применялся препарат с содержанием активного вещества 4% (корпус 16), сохранность выше на 1,64%, среднесуточный прирост массы тела – на 0,3 г, конверсия корма – на 0,057 кг, а там, где применялся 6%-ной концентрации выше только показатель полученного мяса с м2 – на 0,52 кг. Следовательно, более предпочтительным оказался препарат 4%-ной концентрации.

В табл. 13 приведены данные динамики массы тела.

Таблица 13 – Динамика массы тела цыплят-бройлеров

–  –  –

– – – 154 ±4,8 158 ±4,9 7 16,4 17 163 422 ±13 432 ±11 14 38,3 39,1 443 40 831 ±16 852 ±15 21 58,4 60 877 62 1390 ±33 1387 ±31 28 79,9 76,4 1428 79 1990 ±28 1948 ±30 35 85,7 80,1 1990 80 2081 ±23 2078 ±25 37 55,2 55,1 2110 55,9 Данные табл. 13 показывают, что в опытном корпусе 16 в 7-суточном возрасте средняя масса цыпленка была выше, чем в 15-м корпусе, но затем картина поменялась к 28 сут срока выращивания. Происходила как бы «компенсация» за отставание. К концу выращивания различие в пользу 15-го корпуса составило всего 3 г. Средние показатели к концу опыта практически не отличались от норматива для кросса.

4.2.2.Эффективность препарата при ассоциированной инфекции В последнее время проблема смешанных инфекций в промышленном птицеводстве чрезвычайно актуальна в связи с возрастающей частотой появления такой сложной формы патологии (А.С. Алиев, М.В. Бурлаков, И.Н. Громов с соавт., 2013).

В корпусах п.о. «Пятницкое-2» с 5.04.12 по 15.05.12 года было проведено испытание скай-форса-1 (концентрация активного вещества составляла 1%) при ассоциированной инфекции. Для этого было сформировано две группы: 1-я группа (n=157500) – опытная (корпуса 34; 35 и 36); 2-я группа (n=157500) – контрольная (корпуса 31; 32 и 33).

При исследовании эмбрионов 18,5-суточного возраста, а также слабых суточных, затем 6- и 22-суточных цыплят были выделены возбудители St. xylosus, Ent.faecalis и E.coli.

В опытной группе скай-форс применялся с 1 по 7 сут выращивания в дозе 25 мг/кг ж.м. Затем – с 19-х по 23-и сут, с 29-х сут до 33-х сут в аналогичной дозе. В контрольной группе цыплята-бройлеры получали с 1-х сут по 5-е витроцил, гентамицин. Затем в период выращивания применялись такие препараты, как карифлокс, гидроколистин. Антибиотики применялись в лечебных дозах согласно инструкции. В табл. 14 представлена динамика массы тела леченых цыплят-бройлеров.

–  –  –

12.04.12 7 16,4 17,1 15,3 14,9 15,9 16,6 163 ±4,7 ±4,9 ±4,6 ±4,8 ±4,7 ±4,8 430 ±11 40 19.04.12 14 38,6 38,6 39,4 36,7 38,1 40,3 443 ±12 ±12 ±11 ±12 ±13 830 ±18 62 26.04.12 21 59,4 57,1 54,3 56,1 59,1 58,3 877 ±19 ±19 ±18 ±17 ±20 03.05.12 28 72,1 75,1 76,7 73,1 76,7 76,9 1 428 ±31 ±30 ±32 ±33 ±30 ±33 10.05.12 35 84,7 79,1 77,6 80,0 72,4 83,1 1 990 ±29 ±28 ±30 ±31 ±30 ±26

–  –  –

Из вышеприведенных данных видно, что применяемая в опыте 1%-ная концентрация активного вещества в скай-форсе недостаточна. Так как показатель среднесуточного прироста, сохранность, конверсия корма оставались на том же уровне, что и в группах, получавших антибиотики. А масса с 1 кв. м. получена даже на 1,15 кг меньше, чем в контроле. Индекс продуктивности в контроле был также больше на 4,9 единиц. Однако следует отметить, что на фоне применения скай-форса среднесуточные приросты и масса мяса с м2 были больше, чем в других корпусах, не задействованных в эксперименте.

4.2.3. Лечебная эффективность скай-форса Первый опыт по испытанию скай-форса, содержащего 2% активного вещества, был проведен в корпусах 22 и 23 п.о. «Пятницкое-2» с 21.09 по 30.10.11 года. Наличие колибактериоза в корпусах подтверждено микробиологическим исследованием трупов цыплят. Цель опыта – профилактика спонтанных болезней бактериальной и вирусной этиологии с первых суток выращивания цыплят-бройлеров и до убоя.

Для этого были сформированы 2 группы из суточного молодняка цыплят-бройлеров, по 52331 гол в каждой группе. Молодняк был получен от родительского стада «Ровеньской бройлер», возраст несушек – 37 нед.

Схема опыта: 1-я группа (контрольная) – корпус 22 (n=52331); 2-я группа (опытная) – 23-й корпус (n=52331).

В контрольной группе цыплята получали антибиотики по разработанному в хозяйстве способу (табл. 16).

Таблица 16 – Схема применения ветеринарных препаратов, корпус 22 (контрольная группа) Возраст, сут Название препарата Доза

–  –  –

Рис.22. Сравнение падежа цыплят-бройлеров, получавших скай-форс, с «нормативным» для кросса падежом.

0,60 0,55 0,50 0,45 0,40 0,35 0,30 0,25 0,20 0,15 0,10 0,05 0,00

–  –  –

Рис.23. Сравнение падежа цыплят-бройлеров контрольной группы с «нормативным» для кросса падежом.

На вышеизображенных графиках (рис. 22 и 23) видно, что в опытном корпусе динамика падежа незначительно превышала норму для данного кросса, при этом колебание составляло от 0,04 до 0,09% в сут, а с 29суточного возраста была ниже и лишь с 38 сут превысила норму. Тогда как в

–  –  –

166 ±4,9 165 ±5,1 7 17,9 17,7 164 18 430 ±11 436 ±13 14 37,7 38,7 434 39 841 ±18 861 ±17 21 58,7 60,7 849 59 1360 ± 33 1376 ±32 28 74,1 73,6 1350 72 1965 ±42 2020 ±41 35 86,4 92 1830 69 2321 ±35 2244 ±33 Данные табл. 18 показывают, что в опытной группе до 35 суток выращивания были самые высокие показатели массы тела и среднесуточных приростов цыплят-бройлеров. К убою средняя масса цыплёнка был выше в контроле на 77 г, чем в опытной группе.

Из данных табл. 19 видно, что при одинаково посаженном поголовье цыплят одного родительского стада сохранность в опыте составила 96,72%, что выше, чем в контроле на 3,87%, конверсия корма была 1,75 кг, тогда как в контроле – 1,79 кг. Индекс продуктивности в опыте был выше на 10 единиц и составил 307 против 297 в контроле.

–  –  –

Данные табл. 20 показывают, что при одинаковом сроке выращивания среднесуточный прирост в опытной группе выше чем в контроле на 2,7 г, мяса с м2 получено больше на 1,52 кг, соответственно лучше индекс продуктивности на 6 единиц. Также существенным преимуществом

–  –  –

166 ±4,8 164 ±4,7 7 17,9 17,6 163 18 454 ±12 451 ±11 14 41,1 41 443 40 885 ±19 882 ±18 21 61,6 61,6 877 62 1450 ±34 1448 ±33 28 80,7 80,9 1428 79 2015 ±32 1995 ±31 35 80,7 78,1 1990 80 2299 ±29 2226 ±25 38 59,4 57,5 2167 56 Из приведенных данных видно, что в опытной группе цыплята на всем протяжении выращивания имели среднюю массу выше, чем в контроле.

Разница появилась с 7-сут. возраста и удерживалась до убоя. На финише средняя масса опытного цыпленка превысила контроль и составила 2299 г.

Что больше на 73 г, или на 3,2%. Это можно объяснить снижением бактериального «давления» на организм и выздоровлением цыплят. Как известно, здоровая птица – высокие привесы, и наоборот.

4.2.4.Влияние скай-форса на динамику живой массы В опыте, проведенном на расширенном поголовье цыплят-бройлеров, определяли влияние скай-форса на динамику живой массы и среднесуточные приросты.

Схема опыта:

1-я группа (n=150) – хозяйственный способ профилактики, 2-я группа (n=150) – скай-форс 25 мг/кг 1 раз в сутки, 3-я группа (n=150) – скай-форс 50 мг/кг 1 раза в сутки, 4-я группа (n=150) – скай-форс 50 мг/кг 2 раза в сутки.

–  –  –

129 ±4,5 134 ±4,6 144 ±4,8 143 ±4,6 5 17,4 18,4 20,4 20,2 116 15 292 ±9 301 ±8 310 ±9,3 10 32,6 33,4 32,4 33,4 261 29 306±9,5 523 ±12 563 ±11 556 ±13 562 ±13 15 46,2 52,4 50 50,4 486 45 827 ±17 885 ±18 900 ±18 892 ±17 20 60,8 64,4 68,8 66 784 60 1194 ±25 1287 ±27 1296 ±28 1245 ±25 25 73,4 80,4 79,2 70,6 1124 68 1616 ±30 1731 ±31 1687 ±31 1581 ±32 30 84,5 88,9 78,2 67,2 1509 77 2022 ±32 2083 ±31 2030 ±32 1948 ±30 35 81,1 70,4 68,6 73,5 1801 58

–  –  –

Данные табл. 22 показывают, что в группах 2 и 3 до 30-суточного возраста были самые высокие показатели массы тела и среднесуточных приростов, а в группе 4 – только с 1-х по 20-е сут. Увеличение дозы свыше 50 мг/ кг ж.м. не приводило к увеличению интенсивности набора массы тела, что можно объяснить пределом адаптационных возможностей организма.

95

4.3.Влияние скай-форса на серологические показатели и напряженность иммунитета Параллельно с учетом параметров роста цыплят изучалась напряженность иммунитета к болезни Ньюкасла, инфекционному бронхиту, инфекционной анемии кур, инфекционному ринотрахеиту, аденовирусной инфекции (FAV - 1), инфекционному бурситу кур, реовирусной инфекции, сальмонеллезу.

Мы выявляли также наличие антител к орнитобактериям (Ornithobacterium rhinotracheale), которые рассматриваются как возбудитель нового респираторного заболевания птиц – орнитобактериоза, протекающего с высокой смертностью, задержкой в развитии и сокращением яичного производства.

Многие авторы указывают на возникновение вспышек данного заболевания в основном у домашних кур-несушек, бройлеров и индеек. Но возбудитель орниторинотрахеале (ОРТ) также выделен от куропаток, фазанов, голубей, чаек, страусов, диких уток, гусей, грачей и, что особенно важно, попугаев. Этот факт указывает на возможный резервуар возбудителя во внешней среде. Материнские антитела против орнитобактерий обнаруживают в яйцах и крови старых птиц, но не всегда бактерионосительство сопровождается клинической картиной респираторных расстройств.

Для выявления зараженности птиц указанными выше инфекционными заболеваниями используются серологический метод, ИФА, тестнаборы производства компании «BioChek B. V.» (Голландия). В составе набора содержатся химические и иммунологические реагенты, позволяющие обнаруживать в сыворотке крови птиц антитела к наиболее распространенным инфекционным болезням. С помощью тест-системы можно проводить экспресс-анализ для выявления материнских и поствакцинальных антител.

Кровь брали два раза от цыплят-бройлеров в возрасте 37 и 38 сут.

Результаты исследования приведены в табл. 23 и 24, где первая группа опытная, вторая – контрольная.

Из приведенных данных видно, что наличие титров антител к инфекционным болезням, таким, как инфекционный ринотрахеит, аденовирусная (FAV-1) и реовирусная инфекция, говорит о присутствии в птичниках инфекционных агентов, на что у птицы вырабатываются антитела.

Показатель титров для инфекционного бронхита, инфекционного бурсита кур имеет среднее значение, т.е. характерное при применении вакцины к данным заболеваниям. Не подтвердили анализы наличия инфекционной анемии кур, орнитобактериоза, сальмонеллеза и микоплазмоза кур.

–  –  –

1/1024 1/2048

–  –  –

1 / 16 1/128 1/256 1/5 1 /32 1/64

–  –  –

1/0 1/2 1/4

–  –  –

1 18,2 4,2 10,00 0,246 190,4 12,41 13,24 1,02 1,48 2,64 +1,1 +0,59 +0,97 +0,027 +10,71 +0,5 +2,4 +0,03 +0,04 +0,11 13 20,5 7,68 1,5 0,380 513,4 13,48 24,93 1,25 2,19 4,31 +2,0 +1,16 + 0,48 +0,053 +52,9 +0,88 +4,6 +1,26 +0,63 +0,97 19 27,3 11,00 3,47 0,131 198,1 11,67 12,67 1,07 1,47 4,23 +1,5 +0,83 +0,27 +0,005 +43,4 +0,17 +0,73 +0,03 +0,06 +0,11 30 34,0 16,75 3,6 0,219 178,5 8,05 25,5 0,98 2,21 3,33 +3,4 +0,54 +0,0005 +0,005 +29,75 +1,61 +1,66 +0,04 +0,13 +0,09

– 35 14,8 2,99 0,159 297,5 9,78 21,9 0,94 2,46 8,98 +1,76 +0,10 +0,03 +23,8 +0,5 +1,64 +0,05 +0,06 +0,47 39 32,6 10,50 3,11 0,107 142,8 9,50 12,5 0,98 1,85 2,89 +1,2 +0,59 +0,17 +0,004 +20,23 +1,22 +2,66 +0,11 +0,06 +0,07 Проанализировав биохимические показатели крови цыплят-бройлеров в возрасте 1-13 сут, можно утверждать, что идет этап адаптации организма после вывода. На этом этапе ЖКТ и печень функционируют недостаточно эффективно, в результате этого происходит низкое усвоение белка корма и появляется избыток мочевой кислоты как следствие катаболизма неиспользованных аминокислот.

В возрасте 13 сут отмечался всплеск концентрации триацилглицеролов.

Это может быть связано с тем, что в 10-суточном возрасте происходила смена рациона. В его составе снижалось количество вводимых витаминов.

B12 и биотина в корме было меньше в два раза, холина – на 14,28%, тиамина и фолиевой кислоты – на 33,3%, пиридоксина – на 25%.

18

–  –  –

Рис. 24 – Динамика концентраций альбумина, мочевой кислоты и общего белка у цыплят-бройлеров. Примечание: цифры 1-7 соответствуют возрасту 1, 13, 19, 35, 36 и 39 сут соответственно.

Также уменьшалось количество аминокислот, например триптофана – на 9,52%. Происходило увеличение обменной энергии корма за счет ввода жиров на 20% и линолевой кислоты – на 10%. Снижение эффективности использования аминокислот понижало потребность в обменной энергии, при этом в рационе увеличивалось количество жиров.

Следует учитывать, что именно обменная энергия влияет на чувство насыщения, лимитирующего потребление корма. При этих обстоятельствах может дополнительно снижаться потребление витаминов и аминокислот.

Если синтез некоторых витаминов группы B в кишечнике может компенсировать снижение их содержания в рационе, то холин, B12, фолиевая кислота не компенсируются микрофлорой кишечника. Из этого следует, что резкое повышение концентрации триацилглицеролов ассоциируется с изменением структуры рациона, а не с применением скай-форса в первые 8 суток выращивания.

В возрасте 19 сут резко снижалась концентрации железа. Это могло происходить из-за снижения синтеза трансферрина в печени (на фоне снижения её функциональных возможностей). Количество железа на кг корма оставалось неизменным в течение всего периода выращивания (см.

табл. 25).

До 30-суточного возраста происходило увеличение концентрации альбумина, что можно связать с активным ростом цыплят, развитием органов и систем организма, образованием крови.

В 39-суточном возрасте концентрация альбумина начинала снижаться до нижней границы нормы. Такое снижение возможно при наличии воспалительных процессов в острой фазе, нарушении белоксинтезирующей функции печени, поражении почек. Если альбуминов в крови мало, резко повышается чувствительность организма к токсинам.

Увеличение концентрации мочевой кислоты связано со снижением альбумина. Например, коэффициент корреляции (по Пирсону) в возрасте 35 сут варьирует от 0,51 до 0,20 соответственно, что позволяет предполагать снижение концентрации альбумина на фоне активного катаболизма белков, а не дефицита аминокислот в корме или снижения синтеза белков в организме.

В 35-суточном возрасте происходил резкий скачок концентрации фосфора на фоне снижения альбумина и резкого подъема концентрации мочевой кислоты (см. рис. 24, 25, табл. 25). Это может быть следствием повышенной нагрузки на почки. Известно, что снижение поступления калия и хлоридов с кормами влечет за собой задержку их в организме и снижение выведения жидкости через почки ради поддержания электролитного баланса.

В последние годы получены данные, свидетельствующие о сложном влиянии нарушений фосфорно-кальциевого обмена на паракринную регуляцию роста и развития некоторых патологий почек и клоацитов.

10 7 6

–  –  –

Рис. 25 – Динамика концентрации кальция, фосфора и магния в сыворотке крови цыплят-бройлеров. Примечание: цифры 1-7 соответствуют возрасту 1, 13, 19, 35, 36 и 39 сут соответственно.

Гиперфосфатемия может возникнуть в результате избыточного применения витамина Д3, при повышении активности АсТ, положительной корреляции с увеличивающимся уровнем мочевой кислоты (в возрасте 30-39 сут коэффициент корреляции составил r=0,58). Высокий уровень корреляции свидетельствует об общности процессов обмена обоих веществ. Например, повышенный катаболизм белков (в т.ч. на фоне его избыточного поступления с кормом) способен привести как к повышению в крови уровня фосфора, так и мочевой кислоты. Сниженный уровень триацилглицеролов косвенно свидетельствует о повышенной потребности в энергии на этом этапе выращивания. Повышение концентрации мочевой кислоты провоцируется также уменьшением поступления в организм хлоридов и калия с кормом, что на фоне снижения реабсорбции воды в канальцах нефрона приведет к накоплению продуктов катаболизма белков (по причине их замедленного выведения через почки).

Следует учитывать, что с 21-х сут содержание кальция в корме было снижено на 5,5%, а начиная с возраста 34 сут – еще на 5%, чем и объясняется снижение уровня кальция в крови и нарушение кальцийфосфорного соотношения.

Таким образом, можно соотнести все нарушения метаболизма с изменениями состава рационов. Это подтверждает разнонаправленный характер изменений содержания метаболитов в сыворотке крови птиц разного возраста. В случае антагонистического взаимодействия токсических или фармакологических эффектов скай-форса с метаболическими реакциями в организме птицы следовало бы ожидать однотипных изменений в биохимической картине крови. К косвенным признакам отсутствия неблагоприятного воздействия скай-форса следует отнести отсутствие какихлибо нарушений метаболизма в период применения препарата.

4.5. Определение остаточных количеств препарата в тушках цыплят-бройлеров Использование лекарственных препаратов в ветеринарии неизбежно приводит к появлению их остаточных количеств в пищевом сырье (А.А.

Комаров, И.С. Нестеренко, Л.В. Беловодский, А.В. Жуков, 2011). В России приняты нормативные акты, в которых установлены максимально допустимые уровни (МДУ) химических загрязнителей в пищевых продуктах (А.Н. Панин, А.А. Комаров, 2005; О.И. Кальницкая, Б.В. Уша, Э.А. Мишиев, 2010).

Остаточное количество ХТС или его метаболитов после применения скай-форса в различных его концентрациях и дозах в мясе цыплят-бройлеров никто не изучал. Мы провели ряд исследований проб мяса и внутренних органов цыплят-бройлеров с целью определить сроки выведения и возможное наличие остаточных веществ левомицетина и тетрациклина (которые могли бы входить в наноструктуры скай-форса), в зависимости от продолжительности курса применения препарата и периода ожидания птицы на убой, а также в зависимости от концентрации действующего вещества и дозы. Препарат вводили в дозе 25; 300 и 375 мг/кг ж.м. с концентрацией активного вещества 2; 4 и 6% в течении 5-8 суток (n=24). Через 4 часа после начала применения препарата и по истечении суток выпаивания с водой проводили вынужденный убой по 3 цыпленка в возрасте 36 суток и осуществляли отбор проб. Затем время ожидания после последнего применения препарата составляло от 2-х до 4-х сут. Пробы мяса исследовали на хроматографе (Капель) методом капиллярного электрофореза и ВЭЖХМС/МС.

Учитывая то, что состав скай-форса является ноу-хау изобретателя, а контрольную проверку мяса птицы проводят на загрязненность наиболее стойкими антибиотиками, исследование проводилось на остаточное количество в мясе левомицетина и тетрациклинов. Предельно допустимый уровень в мясе этих антибиотиков составляет 10 мкг/кг каждого (СанПин Результаты исследования тушек цыплят-бройлеров 2.3.2.1078-01).

представлены в табл. 26, 27 и 28 (в таблицах указано среднее значение из 4 определений).

Из табл.26 видно, что при выпаивании цыплятам препаратов с концентрацией 4 и 6% наличие остаточных веществ левомицетина и тетрациклина в пробах мяса не обнаружено как через 4 часа после выпаивания, так и по истечении суток непрерывного применения препарата.

–  –  –

1 2 25,05 30 3,3 2 2 2 36,03 30 2,2 2 3 3 6,28 30 0,9 2 4 3 12,03 30 0,9 2

Полученные результаты позволяют прийти к следующим выводам:

а) мясо подопытных цыплят безопасно для использования в пищу, т.к.

содержание в нем антибиотиков намного ниже допустимого уровня их остаточных количеств, даже при длительном применении скай-форса (20 сут);

б) связывать наличие остатков антибиотиков в мясе с тем, что они входили в состав скай-форса не представляется доказательным, поскольку такие малые количества их могло попасть в организм цыплят случайно (из тары для комбикорма; могли быть в самом комбикорме как следствие загрязнения в цехе кормоприготовления, попасть из загрязненной кормушки и т.п.). Для обоснованного ответа на возможные вопросы требуется проведение дополнительных экспериментов.

107

5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ Изучение наноструктурного препарата скай-форса было направлено на определение его идентификационных параметров, химиотерапевтических свойств и расширение нозологических показаний к его применению.

Результаты ионометрических исследований (измерение рН и титрование), спектрофотометрии с определением зависимости оптической плотности вещества от длины волны в двух различных растворителях с использованием растворов различной концентрации позволяют однозначно и достоверно идентифицировать исследуемое вещество путем сравнения результатов идентификационных измерений с эталонными значениями.

Изобретательским уровнем способа идентификации водорастворимого лекарственного вещества путем сравнения с эталоном является повышение достоверности идентификации сочетанием титриметрии, ионометрии и спектрофотометрии. Отличительной особенностью предлагаемого способа (наряду с сочетанием известных методов идентификации) является расширение диапазона концентрации исследуемого вещества: от насыщенного раствора до разбавленного в 250раз.

Важной характеристикой титриметрического метода в составе предлагаемого способа идентификации является определение не только количества титруемого вещества, но и характера протекания процесса нейтрализации во времени, фиксируемого, например, осциллографом или на экране дисплея при стабильной подаче титруемого раствора, что позволяет однозначно идентифицировать исследуемое вещество. Дополнительное измерение спектрофотометрических зависимостей не менее чем двух разных концентраций идентифицируемого вещества (насыщенного и разбавленного в 10 -20 раз раствора в бидистиллированной воде и в спирте) повышает достоверность идентификации.

Проведённые исследования показали высокую степень достоверности идентификации препарата скай-форс спектрофотометрическим методом.

Данные, полученные при совокупном применении предлагаемых методов измерения, позволили достоверно идентифицировать исследуемое вещество и используются как эталонные, в том числе для проведения последующих анализов. Так, скай-форс-4 и скай-форс-6 (по концентрации действующего вещества) имеют более высокие и продолжительные пики в водном насыщенном растворе по сравнению со скай-форсом-3. При исследовании в водном растворе метанола исследуемые образцы имеют одинаковые пики.

Физико-химические исследования показали, что скай-форс представляет собой не простую смесь компонентов, а целостные кластеры наноструктурных частиц с действующими веществами, имеющие специфические свойства, хорошо растворимые в воде и ограниченно – в метаноле.

При непосредственном контакте с бактериями при электронной микроскопии обнаруживается сначала разрушение бактериальных плазматических мембран, а затем и всей клетки. Это выявляется при увеличении в 50 тыс. раз. Можно предполагать, что вначале препарат разрушает муреиновый слой бактерии по типу действия хелата ЭДТА вместе с детергентом тритоном Х100, которые изымают из стенки клетки дивалентные катионы, что приводит к лизису самой клетки. Проникновение происходит через мембраны грамположительных и грамотрицательных бактерий.

При введении скай-форса цыплятам-бройлерам в максимальной дозе гистоструктура внутренних органов (печени, тимуса, селезенки, бурсы Фабрициуса) не отличалась от таковой у контрольных животных.

На срезах печени цыплят всех возрастов встречались признаки вакуолизации и белковой дистрофии, что может быть связано с особенностями содержания и кормления, так как эти признаки регистрировались и у опытных и у контрольных цыплят. Также отмечались признаки локального лобулярного инклюзионного гепатита (наличие внутриядерных телец-включений типа Рубарта, периваскулярные инфильтраты, поражение клеток системы СМФ). Однако отличий по частоте встречаемости и выраженности гистологических изменений между птицей опытной и контрольной групп не обнаружено.

В возрасте 36 сут от дозы 375 мг/кг увеличивалось содержание фибробластов по отношению к фиброцитам. Они располагались интерстициально и по периферии центральных венул дольки. Однако это не сопровождалось признаками нарушения микроциркуляции, воспалительными изменениями и иными патогистологическими признаками функциональной недостаточности органа. При увеличении длительности курса применения препарата в дозе 375 мг/кг можно прогнозировать высокий риск развития цирротических изменений.

Также обращает на себя внимание наличие деструктивных изменений в микроциркуляторном русле мозговой зоны долек тимуса в виде микротромбов в посткапиллярных венулах, лизиса эпителиальных клеток тимуса, формирования участков амилоидоза и нарушения формирования телец Гассаля (что может приводить к уменьшению синтеза тималина, Тактивина и, соответственно, к иммуносупрессии). Эти изменения отмечались преимущественно в возрасте 36 и 29 суток и затрагивали все опытные и контрольную группы. Возможно, эти изменения следует рассматривать как генетическую особенность кросса.

Проведенные на лабораторных животных (белые мыши) исследования показали, что новый наноструктурный препарат скай-форс не обладает острой токсичностью. Его добавки к комбикорму или питьевой воде для цыплят-бройлеров в дозах, в 19,5 раз превышающих терапевтическую дозу (25 мг/кг ж.м.), не вызывали каких-либо визуальных признаков токсичности и не сказывались отрицательно на интенсивности приростов их живой массы, не снижали сохранность поголовья. Это выше регламентированных токсических доз для 4 класса опасности по ГОСТ 12.1.007-76.

Уже на этапе первичных испытаний было выявлено положительное влияние скай-форса на организм цыплят-бройлеров, что в дальнейших опытах было подтверждено биохимическими исследованиями крови. Между биохимическими показателями выявлен ряд зависимостей: между фосфором и мочевой кислотой (положительная), альбуминами и мочевой кислотой (отрицательная), что связано с распадом белков (в т.ч. альбуминов) и последующим повышением концентрации их конечных продуктов обмена.

Все выявленные нарушения метаболизма совпадали с изменениями рациона и не относились к последствиям применения скай-форса.

Применение скай-форса как за сутки до вакцинации (методом выпаивания), через 4 часа после выпаивания вакцины, так и в более поздние сроки после вакцинации не вызывали каких-либо негативных явлений, что подтверждено лабораторными исследованиями. Более того, отмечено было даже некоторое повышение иммунных показателей.

В производственных испытаниях эффективность скай-форса, примененного при вспышке колибактериоза, не уступала антибиотикам. Его положительное влияние отмечалось как в случаях назначения с профилактической целью с первых дней выращивания цыплят, так и на фоне клинически проявляющегося колибактериоза. В вариантах применения скайфорса отмечались более высокие показатели прироста живой массы и сохранности цыплят. Какое-либо побочное его действие на организм цыплят не выявлено.

Учитывая предполагаемое избирательное действие наноструктурного препарата на возбудителей болезней за счет аффинности наноносителя к патологическому очагу, а также принимая во внимание безвредность применявшихся доз, хорошую их растворимость в воде и достаточность в сутки однократного перорального назначения, скай-форс представляет интерес для практической ветеринарии как химиотерапевтическое средство и возможный заменитель антибиотиков, к которым уже сформировались резистентные штаммы патогенных бактерий.

111

6. ВЫВОДЫ

1. В опытах на лабораторных животных и цыплятах-бройлерах острая токсичность возможных максимальных доз скай-форса не выявлена.

Согласно ГОСТ 12.1.007-76 скай-форс, по степени воздействия на организм относится к 4 классу опасности - малоопасное вещество.

2. Скай-форс, представляющий собой комплекс химиотерапевтических средств, обладает выраженным антимикробным действием в отношении возбудителя колибактериоза. По данным электронной микроскопии культуры эшерихий, обработанной препаратом, он оказывал деструктивное влияние на бактериальную клетку.

Антимикробное действие скай-форса для Escherichia coli, Staphylococcus aureus и Y. enterocolitica составляет 1мг-мл-1, а бактериостатическая концентрация равна 0,01мг-мл-1.

3. Пероральное введение скай-форса в течение 22 суток цыплятамбройлерам в дозах от 12,5 до 375 мг/кг ж.м. не вызывало видимых изменений в клиническом состоянии, существенных нарушений метаболизма в биохимическом составе крови и отклонений в гистологической структуре органов и тканей (тимус, селезенка, печень, клоакальная сумка).

Устойчивости возбудителя колибактериоза к препарату скай-форс 4.

не наблюдалось. При курсовым применение скай-форса по 6-8 суток подряд с интервалом 7-10 сут, его химиотерапевтическая эффективность при колибактериозе с каждым последующем курсом не снижалась.

5. Применение препарата до, совместно или после проведения вакцинации методом выпаивания вакцины против инфекционного бронхита кур, болезни Ньюкасла и инфекционной бурсальной болезни, не приводило к нарушению выработки иммунитета к данным заболеваниям, а наоборот, способствовало выработке антител. Групповой иммунитет против болезни Ньюкасла достигал 95-100%.

Из испытанных вариантов доз и концентрации активного вещества 6.

в скай-форсе более результативным был препарат 4%-ной концентрации в дозе 25 мг/кг ж.м. Эта концентрация ДВ препарата также оказалась самой стабильной по физико- химическим характеристикам. Убой птицы разрешается не ранее, чем через 3 суток после окончания применения препарата.

Применение препарата скай-форса цыплятам-бройлерам в дозе 25 7.

мг/кг ж.м. 6-8 суток подряд в условиях производства обеспечивало стабильные приросты их живой массы (от 55,1 до 60,2 г). Прекращение его применения при неполном оздоровлении поголовья сопровождалось снижением приростов живой массы цыплят. При повторном применении на том же поголовье положительное влияние возобновлялось.

При производственных испытаниях на цыплятах-бройлерах в ЗАО 8.

«Приосколье» терапевтическая эффективность препарата скай-форс в дозе 25 мг/кг ж.м. 6-8 суток двумя и тремя курсами подряд, составила соответственно 96,72 и 98,15%.

Применение скай-форса снизило затраты на ветеринарные 9.

препараты на 15% и не вызывало изменения качества мяса цыплятбройлеров, продемонстрировав значительный ростостимулирующий эффект (от 3,2% до 4,6%).

113

7. ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Скай-форс можно отнести к химиотерапевтическим препаратам первого выбора при колибактериозе цыплят и рекомендовать его для дальнейшего испытания как профилактическое и лечебное средство при других болезнях бактериальной этиологии у цыплят-бройлеров.

2. Рекомендуемая терапевтическая доза – 25 мг/кг живой массы 1 раз в сутки тремя курсами по 6-8 сут; профилактическая доза – та же 6-8 сут подряд добавлять к питьевой воде. При повторных курсах лечения (профилактики) эффективность не снижается.

3. Материалы исследований вошли в инструкцию по применению препарата скай-форс.

В заключение настоящей работы считаю своим долгом выразить благодарность и признательность:

глубокоуважаемому доктору биологических наук профессору Вятского государственного университета и его исследовательской группе – за проведение электронной микроскопии, анализ полученных снимков и консультации по физико-химической характеристике скай-форса;

генеральному директору НПФ «НаноТехПром», изобретателю СССР Тарасову Михаилу Борисовичу – за приобщение меня к изучению предложенного им оригинального препарата скай-форса, содействие и консультации в процессе проведения опытов по определению эффективности его применения в птицеводстве.

114

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

Абрамова Т. Состояние печени у цыплят, откармливаемых на мясо/Т.

1.

Абрамова, Н. Данилевская // Птицеводство. – 2006. – №3. – С. 29 Азарнова Т.О. Профилактика окислительного стресса, как способ 2.

повышения естественной резистентности цыплят / Т.О. Азарнова, А.Е.

Бобылева, И.С. Ярцева // Веткорм. – 2013. – №1. – С. 34 Андреева Н.Л. Изучение бактериальных инфекций на птицефабриках / 3.

Н.Л. Андреева, М.Е. Дмитриева, А.А. Климов, Л.С. Фогель// Ветеринария. – 2004. – №5. – С. 14 Алиев А.С. Ассоциативное течение инфекционной анемии цыплят и 4.

инфекционной бурсальной болезни / А.С. Алиев, М.В. Бурлаков, И.Н. Громов [и др.] // Ветеринария. – 2013. – №3. – С. 3-7 Альпейсов Ш.А. Микробиологические препараты в рационах 5.

молодняка/ Ш. А. Альпейсов, Д. Ахмеджанов, А. Едыгенов//Птицеводство. – 2009. –№10. – С. 51 Антипов А.А. Мясная продуктивность и качество мяса цыплятбройлеров на фоне применения БВМК в составе комбикормов / А.А. Антипов, А.А. Молчанов // Веткорм. – 2011. – №2. – С. 30

Антонов Б.И. Лабораторные исследования в ветеринарии. Химикотоксикологические методы / Б.И. Антонов, В.И. Федотова, Н.А. Сухая – М.:

Агропромиздат, 1989. – 320 с.

Аргунов М.Н. Ветеринарная токсикология с основами экологии / М.Н.

8.

Аргунов. – СПб.:Лань. – 2007. – 416 с.

Афонюшкин В.Н. Использование клинической биохимии в ИФАформате для контроля органопатологий и нарушений метаболизма сельскохозяйственной птицы: Методические рекомендации / В.Н.

Афонюшкин, С.В. Леонов, Ю.Г. Юшков, Е.В. Дударева // РАСХН.

Сибирское отделение. – Новосибирск: ГНУ ИЭВСиДВ, 2005. – 28 с.

Белова Н.Ф. Обмен веществ и качество мяса цыплят-бройлеров в 10.

зависимости от включения в комбикорм биологически активных добавок:



Pages:     | 1 | 2 || 4 |

Похожие работы:

«Палаткин Илья Владимирович Подготовка студентов вуза к здоровьесберегающей деятельности 13.00.01 общая педагогика, история педагогики и образования Диссертация на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Научные руководители: доктор биологических наук, профессор,...»

«Брит Владислав Иванович «Эффективность методов вакцинации против ньюкаслской болезни в промышленном птицеводстве» Специальность: 06.02.02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидат ветеринарных наук Научный руководитель:...»

«Радугина Елена Александровна РЕГУЛЯЦИЯ МОРФОГЕНЕЗА РЕГЕНЕРИРУЮЩЕГО ХВОСТА ТРИТОНА В НОРМЕ И В УСЛОВИЯХ ИЗМЕНЕННОЙ ГРАВИТАЦИОННОЙ НАГРУЗКИ 03.03.05 – биология развития, эмбриология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: Доктор биологических наук Э.Н. Григорян Москва – 2015 Оглавление Введение Обзор литературы 1 Регенерация...»

«Сафранкова Екатерина Алексеевна КОМПЛЕКСНАЯ ЛИХЕНОИНДИКАЦИЯ ОБЩЕГО СОСТОЯНИЯ АТМОСФЕРЫ УРБОЭКОСИСТЕМ Специальность 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«Карачевцев Захар Юрьевич ОЦЕНКА ПИЩЕВЫХ (АКАРИЦИДНЫХ) СВОЙСТВ РЯДА СУБТРОПИЧЕСКИХ И ТРОПИЧЕСКИХ РАСТЕНИЙ В ОТНОШЕНИИ ПАУТИННОГО КЛЕЩА TETRANYCHUS ATLANTICUS MСGREGOR Специальность: 06.01.07 – защита растений Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель: Попов Сергей...»

«АУЖАНОВА АСАРГУЛЬ ДЮСЕМБАЕВНА ОЦЕНКА ДЕЙСТВИЯ АБИОТИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ И БИОПРЕПАРАТА РИЗОАГРИН НА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ ПОЧВЫ, АДАПТИВНОСТЬ И ПРОДУКТИВНОСТЬ ЯРОВОЙ МЯГКОЙ ПШЕНИЦЫ 03.02.08 – Экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«Палаткин Илья Владимирович Подготовка студентов вуза к здоровьесберегающей деятельности 13.00.01 общая педагогика, история педагогики и образования Диссертация на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Научные руководители: доктор биологических наук, профессор,...»

«Смешливая Наталья Владимировна ЭКОЛОГО-ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ СИГОВЫХ РЫБ ОБЬ-ИРТЫШСКОГО БАССЕЙНА 03.02.06 Ихтиология Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель кандидат биологических наук, доцент Семенченко С.М. Тюмень – 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ...»

«Будилова Елена Вениаминовна Эволюция жизненного цикла человека: анализ глобальных данных и моделирование 03.02.08 – Экология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант доктор биологических наук, профессор А.Т. Терехин Москва 2015 Посвящается моим родителям, детям и мужу с любовью. Содержание Введение.. 5 1. Теория эволюции жизненного цикла. 19...»

«Цвиркун Ольга Валентиновна ЭПИДЕМИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС КОРИ В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКИ. 14.02.02 – эпидемиология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: заслуженный деятель науки РФ, лауреат Государственной премии СССР профессор, доктор медицинских наук Ющенко Галина Васильевна Москва – 20 Содержание...»

«ХАПУГИН Анатолий Александрович РОД ROSA L. В БАССЕЙНЕ РЕКИ МОКША 03.02.01 – ботаника Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель Силаева Татьяна Борисовна д.б.н., профессор САРАНСК ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ Глава 1. ИСТОРИЯ ИЗУЧЕНИЯ РОДА ROSA L. В БАССЕЙНЕ МОКШИ. Глава 2. КРАТКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РОДА ROSA L. 2.1. Характеристика рода Rosa L. 2.2. Систематика рода Rosa L. Глава 3....»

«Цховребова Альбина Ирадионовна ВЛИЯНИЕ ФАКТОРОВ СРЕДЫ НА РАЗВИТИЕ БЕСХВОСТЫХ АМФИБИЙ СЕВЕРНЫХ СКЛОНОВ ЦЕНТРАЛЬНОГО КАВКАЗА Специальность 03.02.14 – биологические ресурсы Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель доктор биологических наук профессор Калабеков Артур Лазаревич Владикавказ 2015 Содержание Ведение..3 Глава I. Обзор литературных данных. 1.1....»

«БОЛОТОВ ВЛАДИМИР ПЕТРОВИЧ ОЦЕНКА СОДЕРЖАНИЯ И МИГРАЦИЯ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ В ЭКОСИСТЕМАХ ВОЛГОГРАДСКОГО ВОДОХРАНИЛИЩА Специальность: 03.02.08. Экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук,...»

«СИДОРОВА ТАТЬЯНА АЛЕКСАНДРОВНА ОСОБЕННОСТИ АДАПТИВНЫХ РЕАКЦИЙ У ДЕВУШЕК К УСЛОВИЯМ ГОРОДСКОЙ СРЕДЫ 03.02.08 Экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, доцент Драгич О.А. Омск-2015 СОДЕРЖАНИЕ Введение.. Глава 1 Обзор литературы.. 1.1. Механизмы адаптации организма человека к окружающей среде 1.2. Закономерности развития...»

«Вафула Арнольд Мамати РАЗРАБОТКА ЭЛЕМЕНТОВ ТЕХНОЛОГИИ ВЫРАЩИВАНИЯ ПАПАЙИ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ЗДОРОВОГО ПОСАДОЧНОГО МАТЕРИАЛА И ЭКСТРАКТОВ С БИОПЕСТИЦИДНЫМИ СВОЙСТВАМИ ДЛЯ ЗАЩИТЫ ЕЕ ОТ ВРЕДНЫХ ОРГАНИЗМОВ Специальности: 06.01.07 – защита растений 06.01.01 – общее земледелие и растениеводство Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных...»

«Брит Владислав Иванович «Эффективность методов вакцинации против ньюкаслской болезни в промышленном птицеводстве» Специальность: 06.02.02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидат ветеринарных наук Научный руководитель:...»

«Любас Артем Александрович ПАЛЕОРЕКОНСТРУКЦИЯ СРЕДЫ ОБИТАНИЯ ПРЕСНОВОДНЫХ МОЛЛЮСКОВ В НЕОГЕН-ЧЕТВЕРТИЧНЫХ ВОДОТОКАХ С ЭКСТРЕМАЛЬНЫМИ ПРИРОДНЫМИ УСЛОВИЯМИ Специальность 25.00.25 – геоморфология и эволюционная география Диссертация на соискание ученой степени кандидата географических наук Научный руководитель: доктор биологических наук...»

«СЕРГЕЕВА ЛЮДМИЛА ВАСИЛЬЕВНА ПРИМЕНЕНИЕ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ЗАКВАСОК ДЛЯ ОПТИМИЗАЦИИ ФУНКЦИОНАЛЬНО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ МЯСНОГО СЫРЬЯ И УЛУЧШЕНИЯ КАЧЕСТВА ПОЛУЧАЕМОЙ ПРОДУКЦИИ Специальность 03.01.06 – биотехнология ( в том числе бионанотехнологии) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель Доктор биологических наук, профессор Кадималиев Д.А. САРАНСК 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ.....»

«Петренко Дмитрий Владимирович Влияние производства фосфорных удобрений на содержание стронция в ландшафтах Специальность 03.02.08 экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Белюченко Иван Степанович Москва – 2014 г. Содержание Введение Глава 1.Состояние изученности вопроса и цель работы 1.1 Экологическая...»

«Ульянова Онега Владимировна МЕТОДОЛОГИЯ ПОВЫШЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ВАКЦИН НА МОДЕЛИ ВАКЦИННЫХ ШТАММОВ BRUCELLA ABORTUS 19 BA, FRANCISELLA TULARENSIS 15 НИИЭГ, YERSINIA PESTIS EV НИИЭГ 03.02.03 – микробиология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант:...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.