WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:     | 1 || 3 | 4 |

«ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СКАЙ-ФОРСА И ЕГО ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИ КОЛИБАКТЕРИОЗЕ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ ...»

-- [ Страница 2 ] --

Флорфеникол – структурный аналог тиамфеникола и хлорамфеникола, синтетическое средство широкого спектра действия, в молекуле которого гидроксильная группа заменена атомом фтора, что обусловливает снижение токсического действия на гемопоэтическую систему, высокую антибактериальную активность и предотвращение развития к нему бактериальной резистентности. Флорфеникол, связываясь в протоплазме бактериальной клетки с рибосомальной субъединицей 70S, блокирует пептидилтрансферазу, что приводит к торможению синтеза белка на уровне рибосом у чувствительных к нему микроорганизмов.

Обладает выраженным бактериостатическим действием на грамположительные и грамотрицательные бактерии различных родов, активен в отношении Pasteurella spp., Bordetella bronchiseptica, Actinobacillus pleuropneumoniae, Haemophilus spp., Micoplasma spp., Ornitobacterium rhinotracheale, Escherichia coli, Salmonella spp., Staphylococcus aureus, Streptococcus spp., Shigella spp., Машковский, Терапевтическая Klebsiella spp., Proteus (М.Д. 2006).

активность его выше, чем амоксициллина, окситетрациклина, энрофлоксацина (И.А. Воронина, А.В. Гараничева, А.Е. Оборин с соавт., 2012).

Клиндаспектин – созданный на основе спектиномицина и клиндамицина. Спектиномицин – природный антибиотик, относящийся к группе аминоциклитолов, который имеют структурное сходство с аминогликозидами. При взаимодействии с микроорганизмами происходит реагирование с 30S рибосомной субъединицей, что предотвращает синтез белка; в результате проявляется бактерицидный и бактериостатический эффект в отношении многих грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, включая кокков, клостридий, эшерихий, сальмонелл и др.

На микоплазм действует бактерицидно. Спектиномицин плохо всасывается в кишечнике. В незначительной степени связывается с белками плазмы крови (С. Ионов, А. Игнатова, Е. Елисеева, 2005).

Высокая активность фторхинолонов в отношении грамотрицательных и грамположительных аэробных бактерий подтверждена в многочисленных экспериментах in vitro, а также на моделях in vivo с использованием лабораторных животных (мыши, крысы, кролики, морские свинки) и высоких инфицирующих доз, при пероральном и парентеральном введении препаратов, в условиях раннего и отсроченного лечения (А. В. Гавриков, В.В.

Воронкова, 2010; Д.А. Журавлев, С.М. Гуськов, С.В. Енгашев, 2011).

Фторхинолоны эффективны при кишечных инфекциях птиц (А.А. Климов, 2003; И.Ю. Лесниченко, 2011).

Энрофлоксацин – концентрационно-зависимое противомикробное средство фторхинолонового ряда (Р.У. Хабриева, 2004). Активен в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий: E. coli, Haemophilus, Klebsiella, Pasteurella, Pseudomonas, Proteus, Bordetella, Brucella, Chlamydia, Enterobacter, Campylobacter, Erysipelothriх, Corynebacterium, Staphylococcus, Streptococcus, Actinobacillus, Clostridium, Bacteroides, Fusobacterium, а также микоплазм (Bishop Y, 2005). Его механизм действия основан на способности ингибировать активность фермента гиразы, обеспечивающего репликацию ДНК в бактериальной клетке.

Новый антибактериальный препарат широкого спектра действия – энроколи – создан на основе комплекса энрофлоксацина с колистином, он получил высокую оценку ветеринарных специалистов-птицеводов в Европе, а сейчас все большим спросом пользуется в России. Это объясняется тем, что постепенно у грамотрицательных микроорганизмов вырабатывается резистентность к препаратам, действующим веществом которых является энрофлоксацин, и врачи уже не получают того терапевтического эффекта, что 5-6 лет назад. Ассоциация энрофлоксацина с колистином обладает синергической активностью. Терапевтический эффект этого комплекса оказался выше, чем каждого антибиотика в отдельности (Л. Резниченко, А.

Хмыров, 2006).

Комплексные антибактериальные препараты тилоколин и диоксинор, используемые в качестве лечебно-профилактических средств при смешанных респираторных и желудочно-кишечных инфекциях, повышают сохранность и продуктивность поголовья, а также существенно экономят средства на необходимые ветеринарно-санитарные обработки.

Гидротриприм обладает бактерицидным действием в отношении энтеропатогенных бактерий, поражающих пищеварительный тракт ремонтного молодняка кур (Е. Кибардина, 2008).

Из лекарственных средств широкого спектра антимикробного действия в настоящее время чаще применяют антибиотики группы тетрациклинов.

Полусинтетический антибиотик этой группы – доксициклин – обладает преимуществами по сравнению с природными тетрациклинами. Его получают следующим образом: активная часть молекулы тетрациклина выделяется и модифицируется с помощью сложнейшего химического синтеза. В результате образуется принципиально новое биологически активное вещество – структурный изомер тетрациклина доксициклин (Д.Р.

Лоуренс, П.Н. Бенитт, 1993).

Как и все соединения группы тетрациклинов, доксициклин является ингибитором синтеза протеина. Препарат не предотвращает связывания аминокислот с т-РНК, но нарушает связь транспортных аминоацил-РНК с 30S субъединицей рибосомальной мембраны.

Доксициклин проникает в клетки микроорганизмов двумя путями:

пассивной диффузией, благодаря своей липофильности через фосфолипидный слой клеточной мембраны, и активным переносом с затратами энергии через гидрофильные поры в цитоплазматической мембране. Классические тетрациклины попадают внутрь бактерий только путем активного транспорта.

Доксициклин активен в отношении большинства грамположительных и грамотрицательных бактерий, действует бактериостатически в обычно применяемых концентрациях, а при повышенных – бактерицидно. Резистентность микроорганизмов (в основном стафилококков, эшерихий и сальмонелл) к доксициклину развивается медленно, по пенициллиновому типу.

Доксициклин имеет преимущества в сравнении с природными соединениями данной группы по полноте всасывания в желудочно-кишечном тракте (максимальное всасывание при пероральном применении в 5-10 раз интенсивнее, чем других тетрациклинов), кинетике распределения в организме (подвергается кишечной и почечной реабсорбции и может рециркулировать в организме), пролонгации действия (быстро всасывается и медленно выводится из организма). Выделяется из организма в основном с фекалиями и мочой.

Доксициклин в настоящее время широко применяется в ветеринарной практике при инфекционных болезнях молодняка сельскохозяйственных животных. На его основе создаются различные лекарственные формы.

Одними из широко известных лекарственных средств на основе доксициклина являются польодоксин и доксипрекс испанской компании "Инвеса".

2.2.1. Фармакологические препараты, используемые для стимуляции роста Фармакологические препараты широко используются для стимуляции роста и ускорения откорма животных. Среди множества препаратов этого типа действия значительный интерес представляют пробиотики и фитобиотики, которые применяют в рационах сельскохозяйственной птицы для профилактики патологических состояний, связанных с нарушениями баланса кишечной микрофлоры, и повышения переваривающей и трофической функции. В России функционирует около десяти производителей пробиотиков (А.Н. Панин, Н.И. Малик, О.С. Илаев, 2012).

Практическое использование микробных культур-антагонистов для борьбы с болезнетворными бактериями предложил в 1903 г. И. И. Мечников.

Использование ростостимулирующих и лечебно-профилактических препаратов, способствующих увеличению среднесуточного прироста, лучшему потреблению и усвоению кормов, снижению падежа и себестоимости продукции, является одним из путей интенсификации бройлерного птицеводства (В.И. Фисинин, И.А. Егоров, 2011). Но известно, что включение в рацион животных биологически активных препаратов может привести к их накоплению в органах и тканях птицы и отрицательно влиять на здоровье конечного потребителя (Т.Н. Ермашова, 2003; Ермолина С.А., Созинов В.А., Глухова М.В. с соавт., 2009; К.В. Булдакова, В.А. Созинов, 2012).

В связи с этим актуален поиск таких веществ, которые бы давали положительный эффект при откорме птицы, но при этом исключались бы нежелательные последствия их применения при употреблении в пищу мясной продукции от обработанных ими животных (В.С. Петухов, 2006; С.М.

Преображенская, 2008). Таким требованиям отвечают пробиотики. Они повышают сохранность и продуктивность птицы, продукция от применения их не представляет никакой опасности для человека (Н.П. Ковехова, Н.А.

Пышманцева, И.А. Лебедева, 2011; Н.А. Пышманцева, Н.П. Ковехова, 2011).

Эффективность пробиотиков связана с вызываемыми ими благоприятными метаболическими изменениями в пищеварительном тракте, лучшим усвоением питательных веществ, повышением сопротивляемости организма, а также с антагонистическим действием на вредную для организма микрофлору. Они не перевариваются и не всасываются в желудке и тонком отделе кишечника (Н.В. Данилевская, 2007; А.П. Гриб, О.В.

Ларичев, 2009; Л.В. Хорошевская, А.П. Хорошевский, 2012).

Пробиотики не вызывают побочных реакций, не имеют противопоказаний к применению и в комплексе с ветеринарно-санитарными мероприятиями могут положительно влиять на микробиоценоз в животноводческих помещениях (Б.Т. Стегний, С.А. Гужвинская, 2005; С.

Лысенко, А. Баранников, А. Васильев, 2007; В. Тедтова, 2007; Р. Кабисов, Б.

Цугкиев, А. Хозиев, А. Мурзабеков, 2010; В. Курманаева, А. Бушов, 2012).

При введении в корм цыплятам-бройлерам пробиотики стимулируют их рост и развитие, позволяют достичь 100% сохранности птицы и на тех же кормах повышать массу тела на 6,8% (В.Н. Никулин, В.В. Герасименко, Т.В.

Коткова с соавт., 2012).

Наиболее известны по своим пробиотическим свойствам микроорганизмы рода Bifidobacterium, Enterococcus, Lactobacterium, Propionobacterium.

Пребиотики – субстраты, стимулирующие естественную микрофлору, которые в норме поступают в организм животных в составе рациона. Они так же, как и пробиотики, не всасываются в желудке и кишечнике, а, попадая в толстый отдел кишечника, используются в качестве питательной среды для нормальной симбионтной микрофлоры. При этом через продукты жизнедеятельности пробиотических бактерий обеспечивается физиологическая целостность многих систем организма, связанных с формированием иммунной системы и локального местного иммунитета слизистой кишечника, гормональной и эндокринной регуляции.

Пробиотики способствуют нормализации биохимических показателей сыворотки крови животных, в т.ч. птицы, восстановлению кальцийфосфорного отношения, снижению активности щелочной фосфатазы. У ослабленных особей они уменьшают риск рецидивов болезней и повышают сохранность. Под влиянием пробиотиков быстро восстанавливается кишечный биоценоз, нарушенный вследствие применения антибиотиков. В опытах на птице установлено снижение колонизационной резистентности кишечника к инфицированию сальмонеллами.

Микроорганизмы, входящие в состав пробиотиков, способны положительно влиять на регуляторные системы, активизировать неспецифическую резистентность организма, что приводит к повышению устойчивости молодняка и взрослой птицы к инфекционным заболеваниям.

Особенно перспективны комбинации живых бифидо-, лакто- и пропионовокислых бактерий. В симбиозе с другими микроорганизмами они поселяются в желудочно-кишечном тракте и выделяют ферменты, повышающие переваримость и использование питательных веществ корма (Р. Кабисов, Б. Цугкиев, А. Хозиев, А. Мурзабеков, 2010).

Проведенные опыты показали, что пробиотики – лактобифадол, лактобактерин и бифитрилак – способны стимулировать иммунитет, нормализовать микробиоценозы кишечника, повышать сохранность, интенсивность роста и резистентность цыплят-бройлеров (Н.В. Данилевская, 2007; С. Лысенко, А. Бараников, А. Васильев, 2007).

Многие пробиотики на основе В. subtilis включают генетически модифицированные штаммы микроорганизмов (ГММО). Использование ГММО, их интродукция в окружающую среду, в том числе и путем использования в составе пробиотических препаратов, должны быть крайне осторожными.

Перспективным в птицеводстве становится использование, для профилактики желудочно-кишечных заболеваний и улучшения энергии роста птицы, заквасок прямого внесения из молочнокислых бактерий определённых видов и штаммов. Правильно подобранная комбинация штаммов позволяет значительно усилить ингибирующий эффект в отношении патогенных штаммов. Обсуждаются вопросы о применении пробиотических штаммов в будущем в качестве векторов для вакцинных штаммов, а также о генетически модифицированных пробиотиках (A.

Focareta, J.C. Paton, R. Morona, 2006).

Для влияния на иммунную систему используются различные иммунокорректоры как природного, так и синтетического происхождения.

С их помощью возможно повышение иммунореактивности при иммунодефицитах (иммунорегуляторы) или снижение её при перенапряженном состоянии (иммунодепрессоры) (И. Егоров, Н. Мухина, 2010). В последнее время особенно возрос интерес к иммуномодуляторам природного происхождения, которые оказывают нормализующее влияние – при иммунодисфункциях повышают напряженность иммунитета, при гиперреактивности снижают её (М.В. Задорожная, С.Б. Лыско, А.П.

Красиков, 2013).

Имеются сообщения о возможности применения для нормализации иммунитета различных органических кислот (лимонной, молочной, муравьиной, пропионовой, сорбиновой, щавелевой, яблочной, янтарной и др.) и их солей, которые к тому же повышают переваримость питательных веществ корма, интенсивность роста животных, подавляют развитие патогенных микроорганизмов (В.И. Фисинин, T.M. Околелова, 1989; В.Д.

Соколов, Н.Л. Андреева с соавт., 1995; А. Иванов, 2002; Т.О. Азарнова, А.Е. Бобылева, И.С. Ярцева, 2013).

Большое значение имеют работы, направленные на изучение влияния на качество и сохранность мяса, полученного от цыплят-бройлеров, потребляемых БВМК в составе комбикормов (А.Н. Мышакин, 2002; И.П.

Салеева, 2007; О.А. Пикалина, 2007; Н.Ф. Белова, 2009; В.А. Корнилова, 2009; С.М. Преображенская, 2009; А.А. Антипов, А.А. Молчанов, 2011; О.В.

Зеленская, 2011).

Итак, для повышения сохранности и продуктивности поголовья необходимо рационально использовать и эрготропные, и химиотерапевтические препараты, а также рассчитывать себестоимость их применения: она не должна быть высокой, что делает производство конкурентоспособным (Б. Ф. Бессарабов, 2009). Эффективность применения и конкурентоспособность – главные критерии оценки новых препаратов, предлагаемых для птицеводства.

Успех химиотерапии и химиопрофилактики во многом зависит от правильного выбора не только нового, но и известного препарата; при этом крайне важно располагать сведениями о чувствительности возбудителя болезни к избираемому средству.

Учитывая, что заболевания редко протекают в виде моноинфекций, а чаще в сочетании, для борьбы с ассоциациями микроорганизмов требуются препараты широкого спектра действия, в том числе комплексы антибиотиков, одновременно действующих на нескольких возбудителей. В случае смешанной инфекции при использовании сочетаний антибактериальных препаратов учитывают то, что каждый компонент сочетания активен в отношении определенного возбудителя микробной ассоциации.

При одновременном применении нескольких соединений можно уменьшить курсовую дозу каждого из препаратов, входящих в комплекс, что снижает вероятность возникновения побочных реакций со стороны макроорганизма (А. Перес Куэвас, А.В. Семенычев, 2006).

2.3.Устойчивость микроорганизмов к антибактериальным средствам В птицеводческих хозяйствах широко распространены различные штаммы грамотрицательных и грамположительных микроорганизмов (Salmonella sp., Escherichia coli, Proteus sp., Pasteurella multocida и др.), которые являются возбудителями респираторных и кишечных инфекций.

Наиболее часто в борьбе с этими инфекциями у цыплят-бройлеров применяют препараты фторхинолонового ряда (энрофлоксацин) в сочетании с колистином, гентамицином, тетрациклинами, макролидами и др.

противомикробными средствами. Фторхинолоны только введены в практику птицеводства, но уже и к ним выявляются устойчивые формы патогенной микрофлоры (Б.В. Виолин, В.Е. Абрамов, В.Ф. Ковалев, 2001; A. Krutkiewicz, Rzewuska с соавт., 2009; M. Muhammad, L.U.

A. Satamaszynska-Guz, M.

Muchammad, A.-C. Ambali с соавт., 2010). На фоне уже развившейся резистентности повышенные дозы не эффективны (Ю. Прохорова, 2010; М.

Гирин, 2011).

Известны штаммы с природной устойчивостью, например, к амоксициллину, клебсиеллам, энтеробактериям, псевдомонам и другим видам возбудителей (Е. Bouza, 2002; И.С. Плитов, 2010), но чаще устойчивость приобретается за счет межвидовой передачи генов, кодирующих -лактамазы, при нарушении правил химиотерапии (Н.А.

Лагункин, 2006; Г.И. Горшков, С.Б. Носков, Е.Г. Яковлева, 2009).

Условно-патогенная и патогенная микрофлора быстро адаптируется к применяемым средствам и обретает к ним резистентность (Ю. Юшков, 2004;

M. Ruzauskas, R. Slugzdiniene, J. Spakauskas с соавт., 2009).

Скорость развития и степень выраженности невосприимчивости к ХТС наиболее часты у стафилококков (Wang Li-ping, Lu Cheng-ping, 2009), эшерихий, сальмонелл, микоплазм, протея, синегнойной палочки (А. Перес Куэвас, А.В. Семенычев, 2006). Эшерихии уже практически полностью неуязвимы к тетрациклинам, левомицетину (В.Г. Пилипейко, А.Г. Мындря, О.П. Татарчук, 2005), сульфаниламидам, и ряд исследователей считает, что альтернативой ХТС могут быть бактериофаги, чувствительность штаммов к которым составляет 85% (М. Кереселидзе, Т. Габисония, И. Макадзе с соавт., 2005).

В работах ряда исследователей дан анализ основы устойчивости микроорганизмов к ХТС. Выявлены гены устойчивости к ПМС, в частности к триметоприму (A.M. Ahmed, Е.Е.А. Younis, S.A. Osman, 2009), доказано мутационное происхождение пенициллинсвязывающих белков (И.С. Плитов, 2011), выделены внехромосомные генетические элементы у бактерий, резистентных к сульфаниламидам (Т. Габисония, М. Кереселидзе, Г. Мелашвили с соавт., 2006). У многих штаммов обнаружена множественная устойчивость к антибиотикам: у изолятов сальмонелл – ко всем основным ХТС (Ю. Юшков, 2004), к гентамицину, энрофлоксацину (Т. Габисония, Г.

Мелашвили, К. Дидебулидзе с соавт., 2009), канамицину, офлаксацину, окситетрациклину, стрептомицину, триметоприму (Z. Pan, X. Wang, X. Zhang с соавт., 2009), налидиксовой кислоте, тетрациклину и стрептомицину, а также к ампициллину, цефалотину, цефатазидину, трехвалентной сере, ципрофлоксацину, различным хинолонам (М. Muhammad, L.U. Muhammad, A.-G. Ambali с соавт., 2010). Все изоляты сальмонелл были устойчивы к спектомицину (К. Schwaiger, Е.-М. V. Schmied, J. Bauer, 2008).

Антибиотикорезистентные клоны способны восстанавливать свою вирулентность благодаря дополнительным компенсаторным мутациям (Т.

Габисония, Г. Мелашвили, К. Дидебулидзе с соавт., 2009).

Для большей части стафилококков характерна множественная устойчивость к 2-6 антибиотикам. Особенно часто она встречается к ципрофлоксацину, тетрациклину и неомицину, в меньшей мере - к цефотрексилу, ампициллину, гентамицину (М. Кереселидзе, Т. Габисония, Г.

Мелашвили с соавт., 2006).

Антибиотикорезистентность особенно выражена у энтеробактерий A. Satamaszynska-Guz, 2009). Они устойчивы ко всем (A. Krutkiewicz, современным цефалоспоринам, которые широко используются для лечения разных инфекций (Т. Габисония, К. Дидебулиндзе, Г. Мелашвили с соавт., 2008). При тестировании в 2008-2009 гг. чувствительности к противомикробным средствам у изолятов Enterococcus, выделенных на птицефермах Литвы, обнаружен высокий процент изолятов, не чувствительных к хинолонам (82,4%) и пенициллинам (71,6%) (M.

Ruzauskas, R. Slugzdiniene, J. Spakauskas с соавт, 2009).

Резистентность к химиотерапевтическим средствам связана с их селективными свойствами и изменениями на уровне хромосом, что ведет к формированию штаммов возбудителей, не чувствительных к известным, ранее эффективным средствам профилактики и терапии болезней (Б.В.

Виолин, В.Е. Абрамов, В.Ф. Ковалев, 2001). Вполне возможен обмен генами лекарственной устойчивости между микроорганизмами в естественных условиях, например, в составе микробиоценоза желудочно-кишечного тракта птицы.

Следовательно, независимо от количества антибиотиков в природе против каждого возбудителя вырабатывается ген самозащиты (ген устойчивости), причем ген самозащиты к каждому новому антибиотику вначале появляется у клинических штаммов, а затем продолжает циркулировать в природе (И.С. Плитов, 2011).

Таким образом, широкое и бессистемное применение антибиотиков для лечения и профилактики болезней птицы, а также в качестве стимуляторов продуктивности, быстро становится неэффективным и наносит существенный ущерб из-за сокращения перечня выбора ХТС. Эта тенденция характерна не для какой-то отдельной страны, а является мировой проблемой (F. Shahada, Т. Sugiyama Chuma, М. Sueyoshi, К. Okamoto, 2010). Возникает острая необходимость введения в арсенал антибактериальных препаратов многофункциональных или совершенно новых средств, альтернативных антибиотикам не только по своему механизму действия, но и по способу применения.

Как видно из представленных данных, сведения исследователей о резистентности бактерий к ХТС весьма пестры и противоречивы, что можно объяснить различными предпочтениями в выборе средств терапии, разной продолжительностью их использования, неодинаковыми режимами применения, предшествующими выявлению бактериальных изолятов, и пр.

Несомненным остается одно – эффективность средств химиотерапии по мере их применения снижается. Чтобы не потерять «достижения ХХ века» арсенал ХТС должен постоянно пополняться новыми средствами, для нейтрализации которых у бактерий ещё не выработались адаптивные механизмы.

Ведутся интенсивные поиски альтернативы антибиотиков, применяемых в птицеводстве, новых кормовых добавок, что позволит добиться высокой конкурентоспособности на рынке (В.И. Фисинин, 2009).

Большие надежды возлагаются на новые препараты, полученные с помощью нанотехнологий.

Нанотехнология – область фундаментальной и прикладной науки и техники, имеющая дело с совокупностью теории и практики, методов исследований, а также производства и применения продуктов с заданной атомной структурой (Б.М. Уша, А.А. Концевова, А.М. Смирнов с соавт., 2012). Различные аспекты нанобиотехнологии в ветеринарии связаны с разработкой и созданием лекарственных средств, диагностических систем, биоцидов и методов электронно-микроскопических и иммуноморфологических исследований. Эти направления в современной ветеринарии основаны на использовании уникальных свойств наноматериалов и нанообъектов для конструирования, контроля и изменения биологических систем на молекулярном уровне.

Так, уже разработаны наночастицы, которые способны реагировать на изменение рН в органах и тканях, агрегировать или расщепляться в кислотной среде. Эти данные можно использовать в создании средств направленной доставки лекарственных препаратов в опухоли и пораженные ткани. Осуществляются проекты по созданию нанопрепаратов для лечения болезней, в т.ч. вызванных генно-инженерным биологическим оружием (В.Е. Романов, М.Б. Тарасов, И.П. Погорельский, 2013).

Заключение по обзору литературы Из-за широкого использования антибиотиков в борьбе с болезнями животных появились устойчивые к ним формы бактерий. Последние способны достаточно быстро вырабатывать механизмы резистентности практически к любому из вновь предлагаемых антибиотиков. Появившийся в медицине сравнительно недавно термин multi drug resistant (множественная лекарственная резистентность) объединяет основные проблемы лечения животных при инфекциях, вызванных этими возбудителями. При этом широкая циркуляция антибиотикорезистентных форм возбудителей желудочно-кишечных болезней в популяциях животных не только снизила эффективность антимикробной терапии, но и стала создавать реальную угрозу горизонтального переноса резистентных форм патогенов от животных к человеку.

Цикличность промышленного птицеводства приводит к персистенции бактерий и появлению возбудителей, устойчивых к ХТС. Борьба с такими возбудителями представляет собой серьезную проблему. Многие фармацевтические предприятия прилагают усилия по созданию замены антибиотиков.

Выход из создавшейся ситуации состоит во введении в практику новых препаратов, отличающихся противомикробным механизмом от ранее применявшихся средств. В ООО «НПФ НаноТехПром» М.Б. Тарасовым (2006) были созданы такие препараты. Одним из них является скай-форс, опытные партии которого были предоставлены нам для исследований. Этому и посвящена данная диссертационная работа.

3.МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Работа выполнялась в период с 2010 по 2013 гг. на цыплятахбройлерах в ЗАО «Приосколье» (откормочная площадка «Пятницкое-2»), а также на лабораторных животных в ФГУ «Белгородская межобластная ветеринарная лаборатория» и в Белгородской государственной сельскохозяйственной академии им. В.Я. Горина (кафедра морфологии и физиологии).

Откормочная площадка «Пятницкое-2» имеет ограждение. Въезд на территорию оснащен мойкой для транспорта и обогреваемым дезбарьером. Территория разделена на «чистые» и «грязные» дороги. При входе на территорию площадки имеется ветсанпропускник, разделенный на чистую и грязную зоны, где находятся душевые, прачечная, столовая.

На откормочной площадке содержатся бройлеры в 36 корпусах.

Каждый корпус рассчитан на посадку 55 тысяч голов птицы одновременно.

Убой птицы производится на птицеперерабатывающем заводе ЗАО «Приосколье», ст. Холки. Для доставки птицы на убой имеется специальный транспорт.

Ветеринарная служба откормочной площадки самостоятельно выполняет дезинфекционные, дезинсекционные и дератизационные работы.

Для выполнения этих работ в хозяйстве имеется все необходимое, чтобы вовремя проводить санитарную подготовку помещений (механическую очистку, мойку, ремонтные работы, дезинфекцию, побелку), имеются технические средства и оборудование, которые закреплены за специальной бригадой.

Дезсредствами, ветеринарными препаратами, биопрепаратами хозяйство обеспечено в достаточном количестве. Средства сосредоточены в ветеринарной аптеке, где созданы все необходимые условия для их хранения.

С целью профилактики остроинфекционных заболеваний регулярно проводится вакцинация бройлеров против болезни Ньюкасла, болезни

–  –  –

Производственная лаборатория находится под контролем НИИЗЖ (г.

Москва) и межобластной ветеринарной лаборатории (г. Белгород), куда пробы сыворотки отправляются периодически.

В соответствии с планом лечебно-профилактических мероприятий проводится обработка птицы против колибактериоза, сальмонеллеза, микоплазмоза и других секундарных инфекций.

Суточный молодняк доставляется из инкубатора ЗАО «Приосколье»

спецавтотранспортом.

Выращивание бройлеров продолжается до 38 сут в специализированных корпусах с автоматическим контролем микроклимата, автоматической системой кормления и поения.

В экспериментальной части работы использовано 30 белых мышей (масса тела 19-22 г) и 1400 цыплят различных возрастных групп; в клинических и научно-производственных испытаниях – 900000 цыплятбройлеров кросса Hubbard F-15. Все технологические параметры и нормы микроклимата соблюдались согласно нормативам для данного кросса.

Общая схема исследования приведена в табл. 2.

Первичное фармакологическое и токсикологическое исследования скай-форса проводили согласно требованиям к доклиническому изучению новых фармакологических веществ, а также с учётом имеющихся по этому вопросу руководств (И. А. Кассирский, Г. А. Алексеев, 1970; Г.Н. Першин, 1971; В. В. Гацура, 1974; Б. И. Антонов, 1989; М.Н. Аргунов, 2007).

Препарат скай-форс (скай – англ. «небо», форс – англ. «сила») представляет собою мелкодисперсный порошок песочно-красноватооранжевого цвета, плотностью 1,52 г/см2. Легко растворим в воде.

Насыщенный раствор в дистиллированной воде при температуре 20°С составляет 32%. Органолептические показатели: вкус – сладковато-горький;

запах – характерный, почти не ощущается. Легко смешивается с водой и комбикормом.

Физико-химическая и биологическая характеристика скай-форса

–  –  –

При исследовании скай-форса методами спектрофотометрии в видимой и ультрафиолетовой областях использовали спектрофотометр УФС – 01, кюветы с окнами из увиолевого стекла с длиной оптического слоя 10 мм.

Измерение рН и ЭДС проводились комбинированным электродом ЭСК-1063.

Использовались растворы препарата 1; 2; 3; 4 и 6%-ных концентраций.

Острую токсичность препарата изучали при пероральном его введении общепринятым методом (Г.Н. Першин, 1971). Опытные и контрольные группы лабораторных животных и цыплят формировали по принципу аналогов с учетом живой массы, возраста, пола, общего состояния и др. В течение опыта животные всех групп находились в одинаковых условиях содержания и кормления. В опытах использовали белых мышей и цыплят-бройлеров. О токсичности препарата судили по клинической картине, количеству погибших животных и по результатам патологоанатомического вскрытия. Среднюю смертельную дозу (LD50) определяли по Керберу. Об общем действии судили по изменению поведения животных, появлению у них после введения препарата тех или иных признаков, не наблюдавшихся в параллельном контроле после применения плацебо.

Хроническую токсичность определяли на цыплятах-бройлерах. В течение всего экспериментального периода (продолжительностью до 23 сут) цыплята находились под ежедневным наблюдением, во время которого учитывали общее состояние, потребление корма и воды, состояние перьевого покрова и видимых слизистых оболочек, проявление рефлекса дефекации, динамику массы тела, а после умерщвления – гистологический анализ внутренних органов (печень, селезенка, клоакальная бурса, тимус).

Испытуемый препарат применяли опытным животным в течение всего периода их выращивания (Требования к доклиническому изучению общетоксического действия новых фармакологических веществ, 1976).

Исследование крови (серологические исследования) проводили на базе Белгородской межобластной ветеринарной лаборатории (ФГБУ «Белгородская МВЛ»), а также в лаборатории ЗАО «Приосколье» с помощью ИФА с использованием тест-наборов производства компании «BioChek B.V.» согласно наставлениям к наборам диагностикумов. При этом исследовались такие заболевания, как инфекционный бронхит, инфекционная анемия кур, инфекционный ринотрахеит, аденовирусная инфекция (FAV-1), инфекционный бурсит кур, реовирусная инфекция, сальмонеллез; выявляли наличие антител к орнитобактериям, напряженность иммунитета к болезни Ньюкасла.

Для определения (согласно ГОСТу 25587-83) содержания антител в сыворотке кровь брали из подкрыльцевой вены цыплят-бройлеров 36-38суточного возраста в пробирки, увлажненные физиологическим раствором.

Её выдерживали при комнатной температуре до образования сгустка.

Слитую сыворотку исследовали в РТГА.

Биохимические исследования крови проводили на базе клинической лаборатории ФВМ БелГСХА и в Белгородской межобластной ветеринарной лаборатории с использованием биохимического анализатора Hitachi 902.

В сыворотке крови общепринятыми методами (В.В. Гацура, 1974; Б.И.

Антонов, В.И.Федотова, Н.А. Сухая, 1989; И.П. Кондрахин, А.В. Архипов, В.И.Левченко с соавт., 2004; В.С. Камышников, 2004) определяли содержание общего белка и его фракций, сумму иммуноглобулинов, билирубин, мочевину, содержание витаминов А, Е, С, каротина, кальция, фосфора, цинка и йода, активность ферментов АлТ и AсT.

В работе по оценке антимикробных свойств матричного наноструктурного препарата скай-форса (В.Е. Романов, М.Б. Тарасов, И.П.

Погорельский, 2013) проводили методом серийных разведений, при этом использовали следующие штаммы бактерий: кишечной палочки – Е.соli С 6ОО, золотистого стафилококка – S. aureus АТСС 25178 - 1 и кишечного иерсиниоза – Y. еnterocolitica 1407. Бактерии выращивали на бульоне и агаре Хоттингера при оптимальной температуре. Изучение ультраструктуры бактерий Е.сoli С 600 проводили с помощью сканирующего электронного микроскопа JЕОL JSМ – 6510LV (Япония) при следующих контролируемых параметрах: ускоряющее напряжение – 20 кВ; рабочее расстояние – 11 мм;

размер фокусного пятна – 30%; режим вакуума – глубокий вакуум.

Исследование препарата скай-форс проводили методом спектрофотометрии в видимой и ультрафиолетовой областях спектра. Пробы представляли собой порошки от буро-рыжего до коричневого цвета, массой около 5 г в пузырьках. Исследованы 3 серии проб.

Серия 1. К навескам порошков массой 2 г каждый прибавляли 5 мл бидистиллированной воды, перемешивали 1/2 часа до насыщения.

Отстаивали 1/2 часа. Надосадочную жидкость осторожно отбирали пипеткой и переносили в увиолевую кювету, затем фотометрировали в режиме записи спектра в видимой и УФ-областях спектра (220-920 нм).

Серия 2. К навескам порошков массой 0,2 г каждый прибавляли 10 мл бидистиллированной воды, перемешивали до полного растворения порошка.

Окрашенную жидкость переносили в увиолевую кювету, затем фотометрировали в режиме записи спектра в видимой области (360-630 нм).

Концентрация активного вещества скай-форса в растворе 2,02%.

Серия 3. К навескам порошков массой 2 г каждый прибавляли 5 мл метанола (х.

ч.), перемешивали 1/2 часа до насыщения. Отстаивали 10 мин.

Надосадочную жидкость осторожно отбирали пипеткой и переносили в увиолевую кювету, затем фотометрировали в режиме записи спектра в УФобласти (200-359 нм).

Источником света в УФ-области служила дейтериевая лампа D 2-6 НИИОФИ, Москва; в видимой области – галогенная лампа 12 V. Диапазоны измерений: в видимой и УФ-областях спектра – 220-920 нм, шаг сканирования – 1 нм, время накопления – 20 мс; в видимой области – 360нм, шаг сканирования – 1 нм, время накопления – 100 мс; в УФ-области – 200-359 нм, шаг сканирования 1 нм, время накопления – 200 мс. Выбор шкалы по ординате оптической плотности (в ед. оптической плотности) – автоматически. Смена светофильтров – автоматически. Спектры сравнения:

для 1-й и 2-й серии – бидистиллированная вода; для 3-й серии – метанол.

Усреднение – с использованием фильтра Голея-Савицкого с параметрами L=3, P=9. Для сильно шумящей УФ-области – L=9, P=25. Поиск максимумов

– автоматически с применением сигнал/шум от 10 до 99% методом визуализации спектра.

При выявлении ионной активности водных растворов препарата скайфорс использовали рН-метр 150 МИ со встроенным термометром. Измерение рН и ЭДС проводилось комбинированным электродом ЭСК-1063 по методике, описанной В.П. Васильевым (2002). Для растворения препарата использовалась дистиллированная вода. В качестве максимальной концентрации использовался насыщенный раствор скай-форса при температуре 220С (концентрация составила 32%). Концентрация каждого последующего раствора уменьшалась в два раза (в целом – с 32 до 0,125%).

Фиксация показаний велась после их стабилизации и составляла от 3 до 10 мин, причем большее время стабилизации соответствовало меньшей концентрации раствора. Для исследования использовались растворы скайфорса от одно- до 6%-ной концентрации (с градацией в 1%).

Приготовление образцов для гистологического (печень, селезенка, клоакальная бурса, тимус) и гематологического исследования проводилось в испытательной лаборатории ФГБОУ ВПО «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия им. В.Я. Горина», а также в ФГУ «Белгородская межобластная ветеринарная лаборатория», а анализ и интерпретация полученных результатов – на базе ГНУ ИЭВСиДВ Россельхозакадемии. Материалом для гистологических исследований служили внутренние органы цыплят-бройлеров, отобранные в различные периоды опыта (тимус, клоакальная бурса, печень, селезенка). Материал фиксировали в 10-процентном нейтральном формалине. Заливку в парафин и изготовление парафиновых срезов толщиной 5-6 мкм с их окрашиванием гематоксилин-эозином делали на санном микротоме по общепринятой методике (Г.А. Меркулов, 1969; Р. Лилли, 1969; Д.С. Саркисов, Ю.Л.

Петров, 1996).

В качестве средства для лечения цыплят-бройлеров и профилактики колибактериоза испытывался новый наноструктурный препарат скай-форс, созданный М.Б. Тарасовым и предложенный им в качестве альтернативы другим антибиотикам.

Для клинических испытаний были созданы группы из цыплятбройлеров односуточного возраста. В каждых опытах выделяли контрольную и опытную группы. В опытных группах применяли растворенный в воде скай-форс перорально в дозе 25-100 мг ДВ/кг живой массы цыпленка. Схема применения была следующей: первый курс выпаивания препарата осуществляли с 1-х по 8-е сут выращивания; второй курс – с 19-х по 25-е сут выращивания; третий курс – с 28-х по 33-и сут. В контрольной группе вводили препараты сравнения в дозах и кратности согласно наставлениям по их применению. В качестве витаминных препаратов применяли В-антистресс (витамины группы В, К3, С) и кислоту аскорбиновую; для профилактики и лечения бактериальных инфекций применяли докси-10, гентамицин, карифлокс, гидроколистин, витроцил и диоксинор. В качестве кормовой добавки применяли Лупро Микс (состав в %: кислота пропионовая – 34, аммония пропионат – 5, кислота муравьиная– 15, аммония формиат – 26, вода – 20).

Витроцил в качестве действующего вещества содержит энрофлоксацин (100 мг/ см3 ) и колистина сульфат (1200000 МЕ/мл).

Витроцил действует бактериостатически против Escherichia coli, Haemophilus spp.,Pasteurella spp., Salmonella spp., Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Clostridium perfringens, Cаmpylobacter spp., Pseudomonas aeruginosa и др.

Докси-10 содержит в качестве ДВ доксициклина хихлат. Препарат эффективен в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, включая Escherichia coli, Haemophilus spp., Pasteurella spp., Salmonella spp., Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Clostridium perfringens, а также Mycoplasma spp.

Диоксинор в качестве действующего вещества содержит норфлоксацина гидрохлорид (90 мг/мл) и диоксидин (10 мг/мл). Диоксинор эффективен в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, в том числе Escherichia coli, Haemophilus spp., Pasteurella spp., Salmonella spp., Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Clostridium perfringens, Bordetella spp., Соmруlobacter spp., Corinebacterium spp., Pseudomonas spp., Mycobakterium spp., включая пеницилиназопродуцируемые и метицилинустойчивые штаммы, а также Mycoplasma spp.

В гентамицине ДВ является гентамицина сульфат. Действует бактерицидно против Escherichia coli, Enterobacter spp., Klebsiella pneumonia, Salmonella spp., Shigella spp., Campylobacter spp., Pseudomonas aeruginosa и др. Гидроколистин – колистина сульфат (200000000 ЕД). Действует губительно на Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumonia, Proteus spp., Salmonella spp., Pasteurella spp.

Карифлокс содержит энрофлоксацина 100 мг/см3, действует против Escherichia coli, Salmonella spp., Enterobacter spp., Proteus spp., Haemophilus spp., Klebsiella pneumonia, Pasteurella spp., Pseudomonas aeruginosa, Campylobacter spp., Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Clostridium perfringens, Mycoplasma spp.

Во всех группах (опытных и контрольных) применяли следующие вакцины: против болезни Ньюкасла и инфекционного бронхита кур – VH+H120; против болезни Гамборо – Табик МБ; против бронхита кур – IB VAR.

Определение сроков выведения остаточных количеств ДВ препарата скай-форса проводили на цыплятах-бройлерах после курсового применения в Белгородской межобластной ветеринарной лаборатории (ФГБУ «Белгородская МВЛ») и лаборатории ЗАО «Приосколье». Препарат вводили в дозе 25; 300 и 375 мг/кг ж.м. с концентрацией активного вещества 2; 4 и 6% в течении 5-8 суток (n=24). Через 4 часа после начала применения препарата и по истечении суток выпаивания с водой проводили вынужденный убой по 3 цыпленка в возрасте 36 суток и осуществляли отбор проб. Затем время ожидания после последнего применения препарата составляло от 2-х до 4-х сут. Пробы мяса исследовали на хроматографе (Капель) методом капиллярного электрофореза и ВЭЖХ-МС/МС.

За цыплятами вели ежедневное клиническое наблюдение. В течение экспериментального периода учитывали: изменения клинической картины заболевания и сроков выздоровления; массу тела и среднесуточные приросты за каждые семь сут – индивидуальным взвешиванием с использованием весов «ВАТ1» (производитель VEIT Electronics, Чешская республика); сохранность поголовья – путём ежедневного выявления павшей птицы с установлением причин падежа; затраты корма на единицу продукции

– расчетным методом. Все опыты имели повторности и завершались производственной проверкой.

Уровень фосфора в сыворотке крови определяли реакцией с аммония молибдатом в модификации ИЭВСиДВ (В.Н. Афонюшкин, С.В. Леонов, Ю.Г. Юшков, Е.В. Дударева, кальций – в реакции с 2005);

ортокрезолфталеинкомплексоном, общий белок – методом КингслеяВейксельбаума; альбумины – в реакции с бромкрезоловым зеленым; железо, глюкозу, триацилглицеролы, холестерол тестировали с использованием стандартных тест-систем фирмы «Вектор-Бэст». Фотометрирование реакционных смесей проводили на вертикальном спектрофотометре «Tecan Sunrise».

Ростостимулирующий эффект скай-форса изучали на цыплятах.

Препарат применяли периодически – в 1-8, 18-23, 28-35-е сут. Учитывали общее состояние, прирост массы тела, затраты корма на прирост, падёж. При вскрытии трупов учитывали причину падежа, характер и тяжесть патоморфологических изменений.

Цифровые данные обрабатывали в программе Exel и Statistika 6/0.

Коэффициент корреляции определяли по Пирсону; при этом пользовались общепринятым методом (Б.Ф. Бессарабов, С.А. Алексеева, Л.В. Клетикова, 2008). В описании Н. А. Плохинского (1987) вычисляли средние арифметические (М) показатели, среднестатистические ошибки (m) и критерии достоверности (р), по аргументу Стьюдента (td). Различия между сравниваемыми группами считали достоверными при р0,05.

Статистический анализ цифровых показателей приведен согласно описанию Г.Ф. Лакина (1973).

4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Исследования проводились в три этапа.

На первом этапе изучали физико-химические и фарматоксикологические свойства скай-форса, а в провизорных испытаниях определяли переносимость к нему цыплят-бройлеров.

Второй этап был направлен на определение лечебной и профилактической эффективности скай-форса в сравнении с другими ХТС, рекомендованными и часто используемыми при бактериальных инфекциях птиц. Проводили гематологические исследования цыплят-бройлеров, получавших препарат.

На третьем этапе проведены производственные испытания.

4.1. Первый этап исследования 4.1.1. Физико-химическая характеристика скай-форса Большие надежды на новые препараты, созданные с помощью нанотехнологий, связаны с тем, что эти препараты расширяют возможности поиска новых и совершенствования уже применяемых во врачебной практике средств. Хорошо известно, что одно только микроструктурирование может в определенных границах на порядок и более увеличить доступность и силу действия вещества. Это доказано в отношении сорбентов (В.Е. Харламова, В.М. Шмандий, Л.Я. Безденежных с соавт., 2012), микроэлементов (А.Г. Грушкин, А.А. Брылев, Н.С. Шевелев с соавт.,

2009) и других средств.

Дисперсность вещества, растворимость, агрегатное состояние, взаиморасположение атомов в его молекуле и другие физические и химические параметры изменяют как степень его лечебной эффективности, так и токсичность.

Наночастицы (10-100 нм и менее) могут быть использованы для переноса биологически активных веществ к месту их метаболизации, для транспортировки лекарств к очагу поражения в организме, для формирования наноструктур с их уникальными свойствами, для изменения фазового состояния композитов (Н.Л. Воропаева, 2012).

Одной из перспективных разработок для практической ветеринарной медицины является наноструктурный препарат скай-форс, созданный в ООО «НПФ НаноТехПром» М.Б. Тарасовым. Конструирование матричного кластера, содержащего активирующиеся в очаге поражения нанокомпоненты, позволяет оказывать «прицельное» действие на патогенную микрофлору (М.Б. Тарасов, 2006).

Чтобы определить физико-химические свойства препарата, мы провели совместно с изобретателем М.Б. Тарасовым спектрофотометрию и определили ионную активность водных растворов препарата.

Изучение этих свойств скай-форса проведено впервые с целью исследования полученных данных для разработки метода идентификации.

Известны методы, используемые в фармации по определению (идентификации) лекарственных веществ, включающие ионометрию (прямая потенциометрия), титриметрию (например, алкалиметрия с применением NaОН). Дополнением к аналитическим методам или основным способом идентификации является определение спектрофотометрическим способом подлинности вещества. В аналитической химии спектр исследуемого органического вещества сравнивают с полученным при тех же условиях спектром эталонного образца.

Известен способ сертификации лекарственных средств, включающий изучение токсичности и биологической активности контролируемых веществ методами аналитической химии и сравнения значений высоты спектральных пиков. Но существенное влияние качества растворителей, зависимость от условий проведения анализа значительно снижают достоверность идентификации, и метод имеет узкую область своего применения. Известен также ионометрический метод идентификации лекарственных веществ (ГФ XI, 1987). Но его недостатки состоят в том, что он не позволяет достоверно идентифицировать лекарственное вещество в случае неполной информации о его составе или структуре. Кроме того, результаты ионометрических измерений зависят от качества исходных растворов (например, стабильности параметров во времени, стабильности используемой дистиллированной воды, параметров окружающей воздушной среды, атмосферного давления и др.).

Решение поставленной задачи и достижение ожидаемого результата стало возможным благодаря тому, что способ идентификации водорастворимого лекарственного вещества путем сравнения с эталоном характеризуется проведением ионометрии, титриметрии, спектрофотометрии. При ионометрии используют различные концентрации индентифицируемого вещества, начиная от насыщенного раствора с кратным уменьшением его в последующих образцах.

Измерение спектрофотометрических зависимостей проводят не менее чем в двух разных концентрациях: насыщенного раствора и разбавленного в 10-20 раз или в бидистиллированной воде или ином растворителе из ряда спиртов Результаты исследований в наших опытах представлены ниже.

Таблица 3. Результаты измерений рН и mv сразу после приготовления растворов скай-форса

–  –  –

В табл. 3 приведены данные измерений различных концентраций скайфорса сразу после приготовления его растворов, в табл. 4 – через 6 сут после их приготовления.

Исследования, проведенные методом ионометрии, показывают однозначную зависимость показателя рН от концентрации водного раствора скай-форса. Титриметрический метод выявил характерную для препарата зависимость протекания во времени реакции нейтрализации 0,5%-ным раствором NаОН, показанную на осциллограммах (Приложения, рис. 1-8).

–  –  –

исследовании раствора препарата в метаноле погрешность не превышала 1,09%. При исследовании водного насыщенного раствора препарата расхождений на основной частоте поглощения не было, на второй частоте – 0,61%, на третьей – 1,84%. При исследовании 2%-ного водного раствора на основной частоте поглощения погрешность не превышала 1,36%, на второй

– не более 0,35%.

4.1.2. Провизорные испытания химиотерапевтической эффективности скай-форса Опыт проведен в период с 15.01 по 29.01.2011 г. на площадке откорма «Покровская» ЗАО «Приосколье». Для этого было сформировано 7 групп (n=210), включая контрольную. В каждую группу входило по 30 голов 25суточных цыплят-бройлеров. В качестве лечебных препаратов применяли:

энрофлоксацин 10% в лечебных дозах; пентациклин в дозах 100-200 мг/кг ж.м.; скай-форс – 25-100 мг/кг ж.м. Схема применения препаратов отражена в табл. 5. После применения препаратов птица до убоя находилась под наблюдением и получала только воду.

Установлено, что скай-форс, применяемый цыплятам-бройлерам с целью профилактики и лечения заболеваний различной бактериальной этиологии, оказывает выраженное лечебно-профилактическое действие, не уступающее энрофлоксацину. Данные на этот счет приведены в табл. 5.

Как видно из таблицы, первое взвешивание цыплят было проведено перед назначением препарата, второе – через 14 сут от начала опыта или 9 сут после его окончания. За этот период средний прирост одного цыпленка в контрольной группе составил 1,0 кг, или 71 г/сут.

В группе, где применяли лечение сложившимся в хозяйстве способом, прирост живой массы был 1,08 кг, среднесуточный прирост – 77 г, в группе с применением пентациклина 1 раз в сутки – 0,94 кг и 67 г, после двукратного применения в сутки – 1,03 кг и 74 г, от скай-форса 25 мг/кг 1 раз в сутки – 1,17 кг и 84 г, от 50 мг/кг 1 раз в сутки – 0,95 кг и 83 г, 2 раза в сутки – 1,16 кг и 68 г.

–  –  –



Pages:     | 1 || 3 | 4 |

Похожие работы:

«АБДУЛЛАЕВ Ренат Абдуллаевич ГЕНЕТИЧЕСКОЕ РАЗНООБРАЗИЕ МЕСТНЫХ ФОРМ ЯЧМЕНЯ ИЗ ДАГЕСТАНА ПО АДАПТИВНО ВАЖНЫМ ПРИЗНАКАМ Шифр и наименование специальности 03.02.07 – генетика 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений ДИССЕРТАЦИЯ на соискание учёной степени кандидата...»

«БАБЕШКО Кирилл Владимирович ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕДПОЧТЕНИЯ СФАГНОБИОНТНЫХ РАКОВИННЫХ АМЕБ И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ДЛЯ РЕКОНСТРУКЦИИ ГИДРОЛОГИЧЕСКОГО РЕЖИМА БОЛОТ В ГОЛОЦЕНЕ Специальность 03.02.08 – экология (биология) диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат биологических наук Цыганов...»

«УШАКОВА ЯНА ВЛАДИМИРОВНА ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИЙ ДНК-МАРКИРОВАНИЯ В СЕЛЕКЦИОННО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ ЯБЛОНИ Специальность 06.01.05. – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат биологических...»

«СЕРГЕЕВА ЛЮДМИЛА ВАСИЛЬЕВНА ПРИМЕНЕНИЕ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ЗАКВАСОК ДЛЯ ОПТИМИЗАЦИИ ФУНКЦИОНАЛЬНО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ МЯСНОГО СЫРЬЯ И УЛУЧШЕНИЯ КАЧЕСТВА ПОЛУЧАЕМОЙ ПРОДУКЦИИ Специальность 03.01.06 – биотехнология ( в том числе бионанотехнологии) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель Доктор биологических наук, профессор Кадималиев Д.А. САРАНСК 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ.....»

«Моторыкина Татьяна Николаевна ЛАПЧАТКИ (РОД POTENTILLA L., ROSACEAE) ФЛОРЫ ПРИАМУРЬЯ И ПРИМОРЬЯ 03.02.01 – Ботаника Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, старший научный сотрудник Н.С. Пробатова Хабаровск Содержание Введение... Глава 1. Природные...»

«Мухаммед Тауфик Ахмед Каид ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕНОТИПОВ С ХОРОШИМ КАЧЕСТВОМ КЛЕЙКОВИНЫ, ОТОБРАННЫХ ИЗ ГИБРИДНЫХ ПОПУЛЯЦИЙ АЛЛОЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ ЯРОВОЙ ПШЕНИЦЫ МЯГКОЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ДНК-МАРКЕРОВ Специальность 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Научный...»

«Брит Владислав Иванович «Эффективность методов вакцинации против ньюкаслской болезни в промышленном птицеводстве» Специальность: 06.02.02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидат ветеринарных наук Научный руководитель:...»

«БРИТАНОВ Николай Григорьевич ГИГИЕНИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПЕРЕПРОФИЛИРОВАНИЯ ИЛИ ЛИКВИДАЦИИ ОБЪЕКТОВ ПО ХРАНЕНИЮ И УНИЧТОЖЕНИЮ ХИМИЧЕСКОГО ОРУЖИЯ 14.02.01 Гигиена Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор...»

«Хохлова Светлана Викторовна ИНДИВИДУАЛИЗАЦИЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ РАКОМ ЯИЧНИКОВ 14.01.12-онкология ДИССЕРТАЦИЯ На соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: Доктор медицинских наук, профессор Горбунова В.А Москва 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ Введение Глава 1. Обзор литературы 1.1. Общая характеристика рака яичников 1.1.1. Молекулярно-биологические и...»

«СЕТДЕКОВ РИНАТ АБДУЛХАКОВИЧ РАЗРАБОТКА НОВЫХ СРЕДСТВ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЭШЕРИХИОЗОВ ТЕЛЯТ И ПОРОСЯТ 06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология Диссертация на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук Научный консультант: доктор ветеринарных наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ и РТ Юсупов...»

«Баранов Михаил Евгеньевич Экологический эффект биогенных наночастиц ферригидрита при ремедиации нефтезагрязненных почвенных субстратов Специальность (03.02.08) – Экология (биология) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат...»

«Мансуров Рашид Шамилович Применение препарата Солунат при выращивании бройлеров 06.02.08. – кормопроизводство, кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор, Заслуженный деятель науки Российской...»

«Палаткин Илья Владимирович Подготовка студентов вуза к здоровьесберегающей деятельности 13.00.01 общая педагогика, история педагогики и образования Диссертация на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Научные руководители: доктор биологических наук, профессор,...»

«Храмцов Павел Викторович ИММУНОДИАГНОСТИЧЕСКАЯ СИСТЕМА ДЛЯ ОЦЕНКИ НАПРЯЖЕННОСТИ ПОСТВАКЦИНАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА К КОКЛЮШУ, ДИФТЕРИИ И СТОЛБНЯКУ 14.03.09 – Клиническая иммунология, аллергология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, Раев Михаил Борисович...»

«Шапурко Валентина Николаевна РЕСУРСЫ И ЭКОЛОГИЧЕСКОЕ КАЧЕСТВО ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ (НА ПРИМЕРЕ БРЯНСКОЙ ОБЛАСТИ) Специальность 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«Ульянова Онега Владимировна МЕТОДОЛОГИЯ ПОВЫШЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ВАКЦИН НА МОДЕЛИ ВАКЦИННЫХ ШТАММОВ BRUCELLA ABORTUS 19 BA, FRANCISELLA TULARENSIS 15 НИИЭГ, YERSINIA PESTIS EV НИИЭГ 03.02.03 – микробиология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант:...»

«Алексеев Иван Викторович РАЗВИТИЕ КОМПЛЕКСНОГО ИНЖЕНЕРНО-ГЕОЛОГИЧЕСКОГО И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО МОНИТОРИНГА НА ЯКОВЛЕВСКОМ РУДНИКЕ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ ВЕДЕНИЯ ОЧИСТНЫХ РАБОТ ПОД НЕОСУШЕННЫМИ ВОДОНОСНЫМИ ГОРИЗОНТАМИ Специальность 25.00.08 – Инженерная геология,...»

«АСБАГАНОВ Сергей Валентинович БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ИНТРОДУКЦИИ РЯБИНЫ (SORBUS L.) В ЗАПАДНОЙ СИБИРИ 03.02.01 – «Ботаника» ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: к.б.н., с.н.с. А.Б. Горбунов Новосибирск 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ.. 4 Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.. 8 Ботаническая...»

«Петренко Дмитрий Владимирович Влияние производства фосфорных удобрений на содержание стронция в ландшафтах Специальность 03.02.08 экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Белюченко Иван Степанович Москва – 2014 г. Содержание Введение Глава 1.Состояние изученности вопроса и цель работы 1.1 Экологическая...»

«Ульянова Онега Владимировна МЕТОДОЛОГИЯ ПОВЫШЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ВАКЦИН НА МОДЕЛИ ВАКЦИННЫХ ШТАММОВ BRUCELLA ABORTUS 19 BA, FRANCISELLA TULARENSIS 15 НИИЭГ, YERSINIA PESTIS EV НИИЭГ 03.02.03 – микробиология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант:...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.