WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |

«ПОДОЛЬНИКОВА ЮЛИЯ АЛЕКСАНДРОВНА ОСОБЕННОСТИ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОГО СТАТУСА МОЛОКА КОРОВ УРБАНИЗИРОВАННОЙ ТЕРРИТОРИИ (НА ПРИМЕРЕ ОМСКОЙ ОБЛАСТИ) Специальность: 03.02.08 – экология ...»

-- [ Страница 3 ] --

3.1.2. Интенсивность процессов липопероксидации молока крупного рогатого скота Для оценки интенсивности свободнорадикальных процессов необходимо оценить степень подверженности молока процессам пероксидации липидов в зависимости от воздействия факторов урбанизации. Основным показателем свободнорадикального окисления липидов является образование в полиненасыщенных жирных кислотах сопряженных связей, в результате чего происходит появление первичных молекулярных продуктов - диеновых конъюгатов и вторичных продуктов триеновых коньюгатов. Продукты пероксидации липидов имеющие в составе карбонильные группы, взаимодействующие со свободными аминогруппами фосфолипидов, белков, аминокислот и других соединений с образованием конечных продуктов окисления липидов – основания Шиффа [11, 18].

Содержание первичных, вторичных и конечных продуктов пероксидации липидов определяли с помощью экстракционно-спектрометрического метода с раздельной регистрацией липопероксидов в гептановой и изопропанольной фазах липидного экстракта молока [21, 60].

Относительное содержание шиффовых оснований определяли в соответствии с рекомендациями Львовской Е.И. и др. (1991) [60]. Содержание продуктов свободнорадикального окисления липидов выражали в единицах индекса окисления Е232\Е220 - первичные, Е278\Е220 - вторичные, Е400\Е220 – конечные.

Относительное содержание продуктов липопероксидации молока в зимний период года представлены в таблицах 3.1.2.1 и 3.1.2.2.

Полученные данные свидетельствуют о различном содержании продуктов пероксидации липидов молока в зависимости от расположения относительно промышленного центра как в зимний так и летний периоды года.

Таблица 3.1.

2.1

–  –  –

Увеличение уровня конечных продуктов липопероксидации молока, полученного в пригородной зоне города по отношению к другим районам области как в гептановой так и изопропанольной фазах липидного экстракта свидетельствует о более интенсивном течении перекисного окисления липидов молока в этом районе в зимний период года. В зимний период, содержание первичных (диеновых конъюгатов) и вторичных (кетодиенов и сопряженных триенов) продуктов липопероксидации в гептановой фазе липидного экстракта молока коров существенно не отличалось в различных районах Омской области. Содержание конечных продуктов пероксидации липидов оснований Шиффа в гептановой фазе липидного экстракта молока из хозяйств пригорода Омска на 37,5% (Р=0,017) выше по сравнению с южными районами области. Известно, что в гептан экстрагируются эфиры высших жирных кислот и спиртов, а в изопропанол – фосфолипиды [21]. Повышение уровня конечных продуктов пероксидации липидов в гептановой фазе липидного экстракта молока свидетельствует о более интенсивном нарушении нативной структуры нейтральных липидов в молоке пригородной зоны Омска по отношению к южным районам области.

Таблица 3.1.

2.2

–  –  –

тов липопероксидации. Уровень кетодиенов и сопряженных триенов в пригородной зоне города, на 24% (р=0,037) выше, чем в северных районах Омской области.

В то же время зарегистрировано существенное повышение оснований Шиффа в молоке из хозяйств пригорода на 68% (Р=0,004) и 72% (Р0,001) выше по сравнению с северными и южными районами соответственно.

Результаты содержания продуктов пероксидации липидов молока в летний период года представлены в таблицах 3.1.2.3 и 3.1.2.4.

Таблица 3.1.

2.3

–  –  –

Содержание диеновых коньюгатов в изопропанольной фазе липидного экстракта в молоке из хозяйств северных районов на 9,5% выше по сравнению с пригородом. Однако уровень вторичных продуктов липопероксидации молока, полученного из хозяйств пригорода Омска, на 20% (Р=0,010) и 34% (Р=0,047) выше по сравнению с молоком из южных и северных районов области. Данный факт свидетельствует о более интенсивном окислении фосфолипидов молока, полученного в пригороде Омска в летний период года.

Таблица 3.1.

2.4

–  –  –

Примечание.*- статистически значимые отличия от северных районов (Р0,05), ** - Р0,001; х - статистически значимые отличия от южных районов (Р0,05);

Отсутствие значимых изменений содержания оснований Шиффа в гептановой и изопропанольной фазах липидного экстракта исследуемых проб молока в летний период года, возможно, объясняется более богатым антиоксидантами пастбищным рационом кормления животных в данный период.

Существенных различий продуктов ПОЛ молока между северными и южными районами, как в зимний, так и летний период года выявлено не было. Возможно, это объясняется удаленностью от промышленного центра и как следствие меньшим поступлением из внешней среды прооксидантов антропогенного характера [20].

Анализируя полученные данные в зимний и летний периоды года, можно сделать вывод о том, что липиды молока коров, полученного из хозяйств находящихся в непосредственной близости от промышленного центра, легче подвергаются процессам ПОЛ. В зимний период года фосфолипиды молока, полученного в пригородной зоне, сильнее подвержены процессам перекисного окисления относительно летнего периода. Данный факт можно объяснить недостатком витаминов и минеральных веществ [87] в рационе кормления в этот период года.

Следует заметить, что в летний период года наблюдается более интенсивное течение свободнорадикального окисления нейтральных липидов молока, проявляющееся в повышенном содержании кетодиенов и сопряженных триенов в гептановой фазе липидного экстракта. Это можно объяснить сезонными изменениями состава молочного жира [34]. Летний период характеризуется повышенным содержанием ненасыщенных жирных кислот в липидах молока, которые легче подвергаются окислению.

Полученные данные о содержании продуктов пероксидации липидов в молоке, полученном от разноудаленных от промышленного центра хозяйств, позволяют выделить хозяйства пригорода на расстоянии 5-15 км от города, как район с наиболее интенсивным перекисным окислением липидов молока.

3.2. Интенсивность окислительной модификации белков молока крупного рогатого скота хозяйств, расположенных на различных расстояниях от промышленного центра 3.2.1 Уровень карбонилированных производных белков молока в разные сезоны года Свободнорадикальному окислению способны подвергаться не только липиды, но и белки. С целью определения степени воздействия антропогенных факторов на окислительные процессы молока нами определены показатели спонтанной и металлкатализируемой ОМБ спектрофотометрическим методом. Определено содержание ранних альдегид-динитрофенилгидразонов при длине волны – 274 нм, альдегид-динитрофенилгидразонов нейтрального характера – 356нм, кетондинитрофенилгидразонов нейтрального характера – 370нм, альдегиддинитрофенилгидразонов основного характера – 430нм, кетондинитрофенилгидразонов основного характера – 530нм, позволяя полнее охарактеризовать степень воздействия свободнорадикального окисления в летний и зимний периоды года.

Результаты содержания продуктов спонтанной и металлкатализированной окислительной деструкции белков молока разных районов области в летний период года приведены в таблицах 3.2.1.1 и 3.2.1.2.

Уровень спонтанной ОМБ молока отличается в разных районах Омской области. Содержание альдегид-динитрофенилгидразонов (274 нм) - ранних маркеров окислительной деструкции белков – по данным Иванова В.В. с соавтр. [19] в молоке, полученном от молочных хозяйств пригорода г. Омска, выше на 15,6 % (Р=0,01) и на 16 % (Р=0,02), кетон-динитрофенилгидразонов основного характера на 36,4 % (Р=0,02) и на 42,4 % (Р=0,003) относительно северных и южных районах области, соответственно. Отсутствие изменений между показателями ОМБ молока в северных и южных районах области, возможно, объясняется наличием богатого антиоксидантами рациона кормления в данный период года и менее интенсивным воздействием негативных факторов окружающей среды.

–  –  –

Примечание: * - статистически значимые различия от северных районов; x- статистически значимые различия от южных районов, Р0,05;

Аналогично увеличению продуктов спонтанной ОМБ молока из хозяйств пригорода, происходит повышение ее металлкатализируемых показателей, ранних маркеров окислительной деструкции белков (274нм) на 15% (Р=0,031) и 39% (Р0,001) относительно северных и южных районов области так и более поздних альдегид-динитрофенилгидразонов нейтрального характера на 38% (Р=0,001) относительно южных районов. В молоке коров из хозяйств пригорода Омска выявлено значительное повышение и кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального характера на 40% (Р=0,002) по сравнению с южными районами, альдегиддинитрофнилгидразонов основного характера на 30 % (Р=0,030) и 47%(Р=0,001) относительно северных и южных районов области, а также кетондинитрофенилгидразонов основного характера на 58% (Р=0,007) по отношению к северным районам области. Повышение содержания продуктов стимулированной окислительной деструкции белков в непосредственной близости промышленного центра при всех указанных длинах волн свидетельствует о более интенсивном течении свободнорадикальных процессов в данном районе.

Выявлены некоторые отличия в показателях индуцируемой окислительной модификации белков при сравнении молока хозяйств северного и южного районов в летний период. Так, если содержание ранних альдегидфенилгидразонов в северных районах области выше на 28% (Р0,001), то уровень поздних кетондинитрофенилпроизводных основного характера на 48% (Р=0,014) ниже по отношению к южным районам. Полученные данные могут свидетельствовать о разной способности молока этих районов подвергаться окислительной деструкции.

–  –  –

Оценивая степень окислительной деструкции белков в летний период года, выявили достоверное повышение продуктов спонтанной и металлкатализированной ОМБ молока, полученного из хозяйств в пригородной зоне по отношению к более отдаленным от города районам. Уровень спонтанной ОМБ в пригороде проявляется в повышении как ранних маркеров окисления белков альдегиддинитрофенилгидразонов (274 нм), так и более поздних кетондинитрофенилгидразонов основного характера. Данный факт свидетельствует о более высоком окислительном потенциале организма животных в пригородной зоне промышленного центра. Повышение показателей металлкатализированной окислительной деструкции молока крупного рогатого скота пригородной зоны по отношению к другим районам области наблюдается при всех исследуемых длинах волн. Это свидетельствует о большей подверженности окислительной деструкции белков молока от хозяйств пригородной зоны под действием неблагоприятных факторов внешней среды и как следствие более низкой антиоксидантной способностью молока данного района.

Можно предположить, что изменение составных частей молока и рациона кормления животных в зимний период года способны привести к изменению интенсивности окислительной деструкции белков. Для этого проведено исследование ОМБ в зимний период.

Данные о содержании продуктов окислительной модификации белков молока разных районов области в зимний период представлены в таблицах 3.2.1.3 и 3.2.1.4.

Содержание продуктов спонтанной ОМБ молока выражается в повышении уровня альдегид-динитрофенилгидразонов нейтрального характера в северных районах на 35% (Р=0,009), кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального характера на 36% (Р=0,035) относительно молока, полученного от хозяйств, расположенных в пригородной зоне Омска. Установлено понижение уровня альдегиддинитрофнилгидразонов основного характера в молоке из хозяйств пригорода на 42% (Р=0,014) и 48% (Р0,001) по отношению к южным и северным районам соответственно.

Однако, показатели металлкатализируемой ОМБ молока проявлялись существенным повышением в пригороде Омска уровня как ранних алифатических альдегид-динитрофенилгидразонов нейтрального характера (274нм) на 36% (Р0,001) и 39% (Р0,001), кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального характера на 44% (Р=0,036) и 45% (Р=0,001), так и кетон-динитрофенилгидразонов основного характера на 25% (Р=0,007) и 37% (Р0,001) относительно южных и северных районов области соответственно.

–  –  –

Содержание более поздних алифатических альдегиддинитрофенилгидразонов нейтрального характера в молоке из пригорода Омска на 44% (Р=0,014), альдегид-динитрофенилгидразонов основного характера на 38 % (Р=0,001) выше относительно северных районов области.

Статистически значимые различия между показателями металлкатализированной окислительной деструкции белков северных и южных районов области проявляются повышением кетон-динитрофенилгидразонов основного характера в молоке крупного рогатого скота южных районов на 16% (Р=0,021) относительно северных районов области Таблица 3.2.

1.4 Содержание металлкатализируемых карбонильных производных белков молока в зимний период года, Ме (Q1; Q3)

–  –  –

Сравнивая данные ОМБ молока северных и южных районов области, удалось обнаружить, что молоко южных районов больше подвержено окислительной деструкции относительно молока, полученного в северных районах.

Таким образом, анализируя результаты окислительной деструкции белков молока можно выделить зону наиболее подверженную окислительной деструкции

– пригород Омска, и наименее подверженную данному процессу – северные районы области.

Полученные данные дают возможность более полноценно охарактеризовать степень влияния антропогенных факторов на интенсивность свободнорадикальных процессов молока и отдельных его компонентов в частности.

При пересчете данных на грамм белка содержание продуктов спонтанной и металлкатализированной ОМБ молока различается в разных районах Омской области. Результаты содержания продуктов окислительной деструкции белков молока на грамм белка в исследуемых районах области в летний и зимний период года представлены в таблицах 3.2.1.5 - 3.2.1.8.

Уровень спонтанной окислительной деструкции белков молока проявляется увеличением альдегид-динитрофенилгидразонов (274 нм) в пригороде на 20% (Р=0,001) и 29% (Р=0,003) относительно северных и южных районов области. Обнаружено повышение кетон-динитрофенилгидразонов основного характера являющихся маркерами поздней деструкции белков в пригороде на 38% (Р=0,007) и 51% (Р0,001) относительно северных и южных районов соответственно. Выявлены различия в ОМБ молока северных и южных районах области. В северных районах уровень кетон-динитрофенилгидразонов основного характера на 20% (Р=0,015) выше по отношению к южным районам.

–  –  –

(5,93;8,28) (4,27; 6,02) (7,91; 12,04) Примечание: * - статистически значимые различия от северных районов, Р0,05;

x

- статистически значимые различия от южных районов, Р0,05; xx- статистически значимые различия от южных районов, Р0,001;

Результаты металлкатализируемой ОМБ свидетельствуют о повышении альдегид-динитрофенилгидразонов (274 нм) в молоке пригорода на 12% (Р=0,042) и 51% (Р0,001) в сравнении с пробами молока из хозяйств северных и южных районов.

–  –  –

Примечание: * - статистически значимые различия от северных районов, Р0,05;

**

- статистически значимые различия от северных районов, Р0,001; xx- статистически значимые различия от южных районов, Р0,001;

В молоке из хозяйств пригорода обнаружено увеличение уровня алифатических альдегид-динитрофенилгидразонов нейтрального характера на 30% (Р=0,042) и на 51% (Р0,001), кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального характера на 25% (Р=0,041) и на 50% (Р0,001), а также альдегиддинитрофенилгидразонов основного характера на 23% (Р=0,022) и на 37%

–  –  –

В молоке из северных районах увеличено содержание альдегиддинитрофенилгидразонов (274 нм) на 44% (Р0,001), альдегиддинитрофенилгидразонов нейтрального характера на 30% (Р=0,015), кетондинитрофенилгидразонов нейтрального характера на 35% (Р=0,011), альдегиддинитрофенилгидразонов основного характера на 19% (Р=0,019) относительно южных районов. Содержание же кетон-динитрофенилгидразонов основного характера в молоке коров южных районов на 35% (Р=0,035) выше по сравнению с северными районами.

Таблица 3.2.

1.8

–  –  –

Показатели спонтанной окислительной модификации белков молока в зимний период определяется понижением в пригородной зоне альдегиддинитрофенилгидразонов нейтрального характера на 29% (Р=0,005), кетондинитрофенилгидразонов нейтрального характера на 38% (Р0,001) относительно северных районов, а также альдегид-динитрофенилгидразонов основного характера на 29% (Р0,001) и 45% (Р0,001) по отношению к южным и северным районам соответственно.

В пригороде наблюдается повышение содержания индуцированных железом продуктов окислительной деструкции белков в зимний период при всех исследуемых длинах волн по отношению к северным и южным районам области.

Полученные результаты свидетельствуют о более интенсивном карбонилировании белков молока в пригороде Омска как в летний так и зимний периоды года. Возможно, данный факт объясняется наличием различных крупных промышленных предприятий, выбросов автотранспорта и других потенциально опасных объектов, находящихся в непосредственной близости от исследуемых хозяйств пригородной зоны. Загрязнения этих объектов негативно влияет как на здоровье населения крупных городов [53], так и на окружающие его организмы [44]. Проникая в организм человека и животных, химические вещества подвергаются ряду биохимических превращений результатом которых является их обезвреживание и выведение из организма. В процессе обезвреживания данных веществ наблюдается повышение образования свободных радикалов и активных форм кислорода, приводящее к свободнорадикальному окислению белков, липидов и ДНК в организме [85].

3.2.2 Содержание тиоловых групп в различных фракциях молока в зимний и летний сезоны года Соотношение белковых фракций в молоке зависит от многих факторов: породы животного, рациона кормления, стадии лактации, возраста и условий содержания животного. Фракционный состав белков молока является важным критерием, определяющим его свойства.

Одними из естественных антиоксидантов молока и молочных продуктов, замедляющими свободнорадикальное окисление являются соединения содержащие в своем составе сульфгидрильные группы. К этим соединения относят белки, пептиды и свободные аминокислоты. Эти соединения выполняют свою антиокислительную функцию за счет подвижного атома водорода, нейтрализуя гидроксильные радикалы [33, 34].

Казеин молока имеет в своем составе по две тиоловые группы у молекулы s2 – казеина, и – казеина, а молекула – лактоглобулина содержит одну сульфгидрильную группу [90]. Доступность SH – групп зависит от разных факторов, таких как фракционный состав белков, степени технологического воздействия, вида молочного продукта [25, 56]. С целью определения содержания данных антиоксидантов в районах с различной степенью урбанизации было определено содержание доступных сульфгидрильных групп в молоке-сырье, молочной сыворотке и безбелковом надосадке молока в зимний и летний периоды года. Полученные результаты приведены в таблицах 3.2.2.1 и 3.2.2.2.

Анализируя результаты летнего периода, существенных различий по содержанию тиоловых групп в молоке-сырье и белках молока не выявлено. Определено достоверное снижение показателей доступных тиоловых групп пригородной зоны как в молочной сыворотке на 32% (Р0,001) и 33% (Р0,001), так и безбелковом надосадке молока на 12,1% (Р=0,005) и 12,4% (Р=0,017) по отношению к северным и южным районам.

Снижение доступных сульфгидрильных групп в молоке коров из хозяйств пригорода Омска подтверждают данные о более интенсивном окислении белков и липидов в летний период года.

–  –  –

Результаты, полученные в зимний период, свидетельствуют о различном содержании восстановленных SH-групп в исследуемых фракциях молока. В молоке, полученном в пригороде Омска, выявлено снижение уровня доступных сульфгидрильных групп белков молока на 32% (Р=0,025) и 26% (Р=0,007) относительно образцов, полученных в южных и северных районах соответственно.

Аналогично уменьшается содержание сульфгидрильных групп цельного молока на 13% (Р=0,013) и 15% (Р=0,014) относительно вышеуказанных районов. Существенных различий содержания доступных SH-групп в сыворотке молока, а также свободных тиоловых групп безбелкового фильтрата не выявлено.

–  –  –

Объяснить отсутствие различий в содержании сульфгидрильных групп сыворотки молока и, в противоположность этому, значительные изменения их уровня в цельном молоке и, особенно, в содержании белковых тиоловых групп возможно данными о том, что -казеин (s1 и s2-казеин) и -казеин сильнее подвержены окислительной деструкции за счет более активного карбонилирования триптофана, метионина и гистидина, входящих в состав данных фракций белков по отношению к сывороточным белкам молока [119]

–  –  –

При пересчете полученных данных о содержании сульфгидрильных групп в различных фракциях молока на белок произошла коррекция некоторых результатов. В летний период, установлено снижение на пригородной территории содержания сульфгидрильных групп в безбелковом надосадке молока на 21% (Р=0,038) только в сравнении с показателями северных районов области. Результаты, полученные в зимний период года, свидетельствуют о понижение тиоловых групп молока из хозяйств пригорода на 29% (Р=0,014) по отношению к северным территориям области. Выявлены значительные различия сульфгидрильных групп между северными и южными районами области. Содержание SH – групп белков молока и безбелковом надосадке молока в северных районах на 20% (Р=0,014) и на 27% (Р=0,048) выше по сравнению с южными районами области.

3.2.3 Антиокислительная защита ферментативных компонентов молока в районах с различной степенью урбанизации К компонентам молока, обуславливающим антиоксидантную активность, относят ферменты нативного и микробного происхождения. К ним относят супероксиддисмутазу продуцируемую бифидо- и молочнокислыми бактериями. Данный фермент катализирует реакцию дисмутации, благодаря восстановлению супероксидных радикалов, предотвращая окисление компонентов молока. В сыром коровьем молоке значительная роль в проявлении АОА принадлежит глутатионпероксидазе, которая катализирует взаимодействие восстановленного глутатиона с пероксидом водорода и другими пероксидами [98, 99].

В таблицах 3.2.3.1 и 3.2.3.2 представлены результаты об активности СОД и ГПО молока при различной удаленности от промышленного центра.

При определении активности данных ферментов в молоке, полученном в хозяйствах, расположенных на различном расстоянии от промышленного центра, выявлены следующие отличия.

–  –  –

Активность СОД молока, полученного в пригороде в летний период снижается на 17% (Р=0,035) и 32,5% (Р0,001) относительно северных и южных районов. Активность фермента в северных и южных районах различна. В молоке коров из южных районов активность СОД на 19% (Р=0,018) выше по отношению к северным районам. Статистически значимых различий между показателями активности ГПО молока не обнаружено.

В зимний период активность СОД в молоке коров из пригорода и южных районов на 44% (Р0,001) и 43% (Р=0,025) выше относительно северных районов.

Однако активность ГПО молока из хозяйств пригорода на 41% (Р=0,004) и 47% (Р0,001) ниже относительно южных и северных районов области.

Это может отражать более интенсивные проявления окислительного стресса у животных из пригородной зоны Омска в зимний период года, когда рацион кормления содержит меньше антиоксидантов и сильнее подвергается негативным

–  –  –

В таблице 3.2.3.3 представлены результаты об активности СОД и ГПО молока при различной удаленности от промышленного центра в пересчете на грамм белка.

Пересчет данных по активности ферментов антиоксидантной защиты молока на белок произошла коррекция некоторых результатов. По результатам летнего периода в молоке из пригорода установлено снижение активности супероксиддисмутазы на 21% (Р=0,009) по сравнению с южными районами. В северных районах выявлено повышение активности ГПО молока на 22% (Р=0,043) и на 26% (Р=0,009) по сравнению с южными районами и пригородом соответственно.

Зимний период характеризуется снижением активности ГПО в молоке из хозяйств пригорода на 43% (Р0,001) и на 32% (Р=0,020) по сравнению с север

–  –  –

3.3 Сравнительная характеристика свободнорадикальных процессов молока коз зааненской и швейцарской пород и коров черно-пестрой породы Молоко обладает высокими пищевыми свойствами, обусловленными его компонентным составом. Состав молока разных пород животных имеет определенные отличия[33, 34]. Например, козье молоко обладает иным фракционным составом белков относительно коровьего молока. Содержание s1 - казеина в козьем молоке в 2 раза меньше, а - казеина в 2,3 раза выше, чем в коровьем, что способствует образованию более мягкого сгустка, легко перевариваемого в желудке человека [181]. Содержание лактозы в козьем молоке немного ниже (4,1% против 4,7%) в молоке коров. Этот факт важно учитывать людям, страдающим непереносимостью лактозы. Значительно различаются между собой по химическому составу и соотношению компонентов молочного жира коровье и козье молоко. Особенностью козьего молока является относительно малый размер жировых глобул, составляющий 2 мкм, относительно коровьего молока (21-31 мкм), что обеспечивает более легкую усвояемость молочного жира козьего молока, а также высокий уровень насыщенных жирных кислот с короткой и средней длиной цепи [196]. Существуют противоречивые данные о содержании субстратов свободнорадикального окисления, полиненасыщенных кислот, в молоке коз: по данным одних авторов оно ниже [70], а по другим данным не отличается или несколько выше [96, 251]. Уровень антиоксидантов от которого зависит степень окислительных процессов компонентов молока коз несколько выше, чем коровьем молоке. Так в козьем молоке содержание ретинола, аскорбиновой кислоты выше при одинаковом уровне токоферола [70].

Учитывая вышеизложенное, можно предположить, что различия химического состава козьего и коровьего молока могут влиять на интенсивность свободнорадикальных процессов и антиокислительную активность данных видов молока.

<

3.3.1 Антиокислительные свойства козьего и коровьего молока

В литературе имеются публикации [23, 27] о том, что в летний период года молоко коз обладает более высокими антиокислительными свойствами а также повышенным содержанием витамина С и доступных тиоловых групп по сравнению с молоком полученным от коров. Для выяснения воздействия климатических условий, породы животного, особенностей рациона нами проведено определение антиоксидантных свойств коровьего и козьего молока определенных пород в зимний период года.

Для исследования использовали полученное в лесостепной зоне натуральное молоко коров черно-пестрой породы и коз швейцарской и зааненской пород.

Результаты антиокислительной активности молока коз швейцарской и зааненской пород и коровьего молока черно-пестрой породы в зимний период года представлены в таблице 3.3.1

–  –  –

Антиокислительную активность определяли по способности угнетать хемилюминесценцию модельной системы, полученной из желточных липопротеинов куриного желтка по Г.К. Клебанову (1998), и выражали % от угнетения светосуммы ХЛ модельной системы.

Полученные результаты свидетельствуют о различной степени антиокислительной активности в молоке животных исследуемых пород. Антиокислительная активность коровьего молока на 16% (Р=0,003) и на 19% (Р=0,005) выше относительно козьего молока зааненской и швейцарской пород. Существенных различий между показателями антиокислительной активности молока коз вышеуказанных пород не выявлено.

С целью установления интенсивности свободнорадикального окисления определены параметры Fe2+ - индуцированной люминолзависимой хемилюминесценции: светосумма, спонтанная светимость, амплитуда быстрой и медленной вспышки таблица 3.3.2.

Сравнение параметров хемилюминесценции коровьего и козьего молока зааненской породы выявило, что спонтанная светимость козьего молока данной породы на 51% (Р=0,02) больше, чем коровьего молока черно-пестрой породы. Данный факт указывает на то, что даже без внешнего источника свободнорадикального окисления в молоке зааненской породы окислительные процессы происходят интенсивнее. Аналогично в молоке коз зааненской породы: амплитуда медленной вспышки (максимальная светимость) на 31% (Р=0,02) выше, чем в коровьем молоке.

Полученные данные могут свидетельствовать о меньшем содержании веществ в зимний период, способных препятствовать свободнорадикальным процессам. При сравнении показателей хемилюминесценции козьего молока швейцарской породы и коровьего молока значительных отклонений выявлено не было.

Не установлено существенных изменений между исследуемыми показателями козьего молока вышеуказанных пород. Это может указывать на одинаковую способность козьего молока обеих пород подвергаться и противостоять окислительным процессам.

–  –  –

Анализируя полученные в зимний период результаты, можно сделать заключение о том, что более высокой АОА обладает коровье молока черно-пестрой породы по отношению к исследуемым образцам козьего молока. Интенсивность свободнорадикальных процессов козьего молока зааненской породы значительно выше, чем в коровьем молоке.

3.3.2. Интенсивность процессов липопероксидации козьего и коровьего молока Учитывая различия в структуре и составе молочного жира коровьего и козьего молока и сезонные изменения его жирокислотного состава, вызывает интерес насколько липиды данных видов молока способны подвергаться процессам липопероксидации. Для этого определены первичные (диеновые конъюгаты) вторичные (кетодиены и сопряженные триены) и конечные (основания Шиффа) продукты пероксидации липидов. Результаты о содержании продуктов липопероксидации в молоке коров черно-пестрой породы и коз швейцарской и зааненской пород в летний и зимний периоды года представлены в таблицах 3.3.2.1-3.3.2.4 Данные, полученные в летний период, свидетельствуют о снижении уровня вторичных продуктов пероксидации липидов козьего молока зааненской породы в гептановой фазе на 36% (Р=0,030) и на 40% (Р=0,043) по отношению к козьему молоку швейцарской и коровьему молоку черно-пестрой породы. Это свидетельствует о меньшей интенсивности окисления нейтральных липидов в молоке коз зааненской породы в летний период.

Значительных изменений первичных и конечных продуктов как в гептановой, так и изопропанольной фазе липидного экстракта не выявлено. Однако, выявлено снижение содержания вторичных продуктов липопероксидации в изопропанольной фазе липидного экстракта в молоке коз швейцарской породы на 30% (Р=0,020) относительно коровьего молока. Следовательно, фосфолипиды коровьего молока сильнее подвержены перекисному окислению в данный период года.

Определение продуктов перекисного окисления липидов в зимний период выявило, что содержание первичных и вторичных продуктов липопероксидации в гептановой фазе липидного экстракта козьего молока зааненской и швейцарской пород не выявило существенных отличий от показателей коровьего молока.

–  –  –

Однако содержание конечных продуктов липопероксидации в гептановой фазе липидного экстракта свидетельствуют о некотором повышении шиффовых оснований козьего молока зааненской породы по сравнению с коровьим и козьим молоком швейцарской породы, что может быть обусловлено более интенсивными процессами липопероксидации в молоке коз зааненской породы.

Содержание кетодиенов и сопряженных триенов в изопропанольной фазе липидного экстракта козьего молока швейцарской породы на 30% (Р=0,048) ниже чем в коровьем молоке.

В изопропанольной фазе, содержащей фосфолипиды, уровень шиффовых оснований не повышался во всех видах молока, что указывает на одинаковую скорость липопероксидации.

–  –  –

Полученные результаты свидетельствуют о различной интенсивности процессов пероксидации липидов молока исследуемых пород животных. Нейтральные липиды в молоке коз зааненской породы в летний период менее подвержены окислительной деструкции.

–  –  –

Тем не менее, в зимний период скорость процессов липопероксидации молока коз данной породы максимальна по отношению к остальным исследуемым образцам молока.

Липиды молока коров черно-пестрой породы наиболее подвержено процессам липопероксидации. В молоке коз швейцарской породы выявлено значительное снижение вторичных продуктов пероксидации липидов в изопропанольной фазе липидного экстракта, как в зимний, так и летний периоды года.

–  –  –

Это свидетельствует о меньшей подверженности фосфолипидов данного вида молока процессам ПОЛ.

3.3.3 Окислительная модификация белков и содержание доступных тиоловых групп в молоке коз и коров Для наиболее полной оценки степени свободнорадикального повреждения молока исследуемых пород животных нами определены показатели окислительной модификации белков молока и содержание доступных сульфгидрильных

–  –  –

При сравнении параметров окислительной деструкции белков молока исследуемых пород животных в летний период достоверных отличий выявлено не было. Это можно объяснить повышенным содержанием в молоке витаминовантиоксидантов в рационе кормления животных в данный период.

Содержание доступных тиоловых групп в молоке и белках молока не отличается во всех исследуемых образцах. Однако установлено снижение количества доступных сульфгидрильных групп в сыворотке молока коз зааненской породы на 25% (Р=0,047) по отношению к сыворотке коровьего молока. Меньшее содержание доступных SH-групп в сыворотке козьего молока зааненской породы по сравнению с другими исследуемыми образцами, возможно, за счет сниженного содержания -лактоглобулина и альбумина сыворотки крови. Именно эти фракции содержат больше аминокислотных остатков цистеина[34, 94].

Значительных изменений при сравнении тиоловых групп сыворотки козьего молока швейцарской породы и коровьего молока не выявлено. Выявлено повышение содержания свободных сульфгидрильных групп в безбелковом надосадке козьего молока швейцарской породы на 24% (Р=0,007) относительно коровьего молока черно-пестрой породы.

Определение продуктов окислительной модификации белков в исследуемых образцах молока в зимний период выявило значительное снижение содержания карбонильных производных в молоке коз зааненской породы на 20% (Р=0,03) и на 31% (Р=0,05) относительно коровьего и козьего молока швейцарской породы.

Содержание доступных сульфгидрильных групп в молоке коз зааненской породы на 26% (Р=0,035) выше по отношению к коровьему молоку черно-пестрой породы. Наименьшее количество доступных SH-групп содержится в белках молока коров черно-пестрой породы. Содержание тиоловых групп в козьем молоке швейцарской породы существенно не отличается от содержания таковых в коровьем молоке (Р=0,74). Наибольшее количество сульфгидрильных групп содержится в белках молока коз зааненской породы; их количество на 30,7% больше (Р=0,01), чем в коровьем молоке и на 20,5% (Р=0,04) больше, чем в козьем швейцарской породы.

–  –  –

Увеличение содержания тиоловых групп в козьем молоке может быть обусловлено различным количественным содержанием белков молока и особенностями их фракционного состава. Возможно, что в козьем молоке зааненской породы содержится больше s2 – казеина и -казеина, которые содержат SH-группы у остатка цистеина (по два остатка каждая фракция) [34, 94]. Повышенное содержание тиоловых групп в белках молока коз зааненской породы объясняет минимальную степень окислительной деструкции белков молока коз данной породы.

Существенных различий между содержанием тиоловых групп в сыворотке козьего молока швейцарской породы и коровьего молока в проведенных нами исследованиях не выявлено. Однако, количество доступных сульфгидрильных групп в сыворотке козьего молока зааненской породы на 32,2% ниже (Р=0,04) по сравнению с сывороткой коровьего молока. Так как содержание доступных сульфгидрильных групп в сыворотке козьего молока швейцарской и зааненской пород достоверно не отличаются (Р=0,841), можно предположить, что фракционный состав сывороточных белков козьего молока данных пород относительно одинаков. Установлено снижение доступных тиоловых групп в безбелковом надосадке молока коров черно-пестрой породы на 26% и на 41% по сравнению с молоком коз зааненской и швейцарской пород.

В зимний период установлено повышение свободных тиоловых групп в козьем молоке в сравнении с коровьим, что может быть обусловлено увеличенным содержанием свободных серосодержащих аминокислот и пептидов. Таким образом, если содержание сульфгидрильных групп в молоке коз швейцарской породы больше в свободной форме, то в молоке коз зааненской породы содержание сульфгидрильных групп увеличено в большей степени за счт SH-групп белков молока и в меньшей степени за счт свободных SH-групп в сравнении с коровьим молоком.

ГЛАВА 4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Негативное воздействие антропогенных факторов на окружающую среду в настоящее время приобрело глобальный характер. Промышленные предприятия и автотранспорт осуществляют выброс в окружающую среду большого количества химических веществ, оказывающих токсическое действие на представителей животного и растительного мира [7]. Установлено, что воздействие техногенного загрязнения окружающей среды на живые организмы и недостаточное содержание антиоксидантов в рационе кормления приводит к повышению в них интенсивности свободнорадикальных процессов [20, 46, 76]. Повышение свободнорадикального окисления сопровождается увеличением АФК, оказывающих повреждающее действие на компоненты клеток – белки, липиды, нуклеиновые кислоты. Окислительный стресс как результат дисбаланса про- и антиоксидантов способствует у людей приобретению целого ряда различных поражений верхних дыхательных путей, кроветворных органов, онкологических заболеваний [37]. Существуют данные о том, что показатели ОМБ при послеродовом эндометрите изменяются не только в крови, но и в молоке крупного рогатого скота [28]. По результатам Веселова П.В. (2010) на антиокислительную активность и степень свободнорадикального окисления оказывает влияние время года, особенности рациона кормления и ряд других экологических факторов среды [14].

В нашей работе для выявления интенсивности воздействия факторов урбанизации на интенсивность свободнорадикального окисления в молоке крупного рогатого скота использован ряд биохимических методов анализа и статистическая обработка данных. К данным методам относится определение продуктов пероксидации липидов, спонтанной и металлкатализированной окислительной модификации белков, хемилюминесцентный анализ, определение уровня доступных сульфгидрильных групп в молоке, белках молока, молочной сыворотке, в безбелковой надосадочной жидкости и активности супероксиддисмутазы, глутатионпероксидазы. Определение данных биохимических параметров позволит наиболее полно оценить степень влияния антропогенных факторов на антиоксидантную активность молока и как следствие интенсивность свободнорадикального окисления основных его компонентов.

Для выполнения поставленной цели нами в зимний период проведено определение антиокислительной активности молока коров черно-пестрой породы, полученного в пригородной зоне и на удалении не менее 100-150 км к северу и югу от промышленного центра с использованием модельной системы, состоящей из липопротеинов куриного желтка.

Результаты исследования выражали в процентах снижения значений светосуммы хемилюминесценции при добавлении исследуемого молока, принимая за 100% данные модельной системы. Полученные данные свидетельствуют о том, что антиокислительная активность в молоке, полученном из хозяйств пригородной зоны ниже на 12% и 9%, чем в южных и северных районах соответственно. Между показателями антиокислительной активности молока из хозяйств северных и южных районов области значительных различий выявлено не было. Данный факт, возможно, объясняется тем, что хозяйства пригородной зоны расположены на расстоянии не более 20 километров от города и сильнее подвержены различным воздействиям техногенных факторов внешней среды, снижающих антиоксидантную активность молока в данных хозяйствах.

Для уточнения степени окислительной деструкции компонентов молока определены продукты липопероксидации и окислительной модификации исследуемых проб в летний и зимний период года. Определение первичных, вторичных и конечных продуктов пероксидации липидов проведено с использованием экстракционно-спектрометрического метода с раздельной регистрацией липопероксидов в гептановой и изопропанольной фазах липидного экстракта исследуемых проб молока, так как известно, что в гептан экстрагируются нейтральные липиды, а в изопропанольную фазу липидного экстракта - фосфолипиды. Полученные результаты свидетельствуют о различном содержании продуктов липопероксидации молока в зависимости от расположения хозяйств относительно промышленного центра как в зимний, так и летний периоды года. В зимний период, содержание конечных продуктов пероксидации липидов оснований Шиффа в гептановой фазе липидного экстракта молока хозяйств в пригороде Омска на 37,5% (Р=0,017) выше по сравнению с южными районами области. Данный факт свидетельствует о более интенсивном нарушении нативной структуры нейтральных липидов в молоке хозяйств пригородной зоны Омска по отношению к южным районам области.

В изопропанольной фазе липидного экстракта молока в зимний период года наблюдались значительные различия в содержании вторичных и конечных продуктов липопероксидации. Уровень кетодиенов и сопряженных триенов молока хозяйств пригородной зоны города на 24% (р=0,037) выше, чем в северных районах Омской области. В то же время зарегистрировано существенное повышение оснований Шиффа в молоке из хозяйств пригорода на 68% (Р=0,004) и 72% (Р0,001) по сравнению с молоком северных и южных районов соответственно.

Увеличение уровня конечных продуктов липопероксидации молока, полученного в пригородной зоне города по отношению к другим районам области как в гептановой, так и изопропанольной фазах липидного экстракта свидетельствует о более интенсивном течении перекисного окисления липидов молока в этом регионе в исследуемый период года.

В летний период, наблюдались существенные изменения кетодиенов и сопряженных триенов гептановой фазе липидного экстракта: их содержание в молоке, полученном в непосредственной близости от промышленного центра на 26% (Р=0,04) и 32% (Р=0,02) выше по отношению к северным и южным районам области соответственно. Уровень диеновых коньюгатов в данной фазе липидного экстракта молока в пригороде на 4,2% (Р=0,003) относительно северных районов области.

Содержание диеновых коньюгатов в изопропанольной фазе липидного экстракта в молоке северных районах на 9,5% выше по сравнению с пригородом.

Однако уровень вторичных продуктов липопероксидации молока, полученного от хозяйств пригорода Омска на 20% (Р=0,010) и 34% (Р=0,047) выше по сравнению с молоком из южных и северных районов области. Данный факт свидетельствует о более интенсивном окислении фосфолипидов молока, полученного в пригороде Омска в летний период года.

Отсутствие значимых изменений содержания оснований Шиффа в гептановой и изопропанольной фазах липидного экстракта молока в летний период года, возможно, объясняется более богатым антиоксидантами пастбищным рационом кормления животных в данный период.

Существенных различий продуктов ПОЛ между северными и южными районами, как в зимний, так и летний период года выявлено не было. Возможно, это объясняется удаленностью от промышленного центра и как следствие меньшим поступлением из внешней среды прооксидантов антропогенного характера [20].

Анализируя полученные данные о содержании продуктов липопероксидации в зимний и летний периоды года, можно сделать вывод о том, что липиды молока, полученного из хозяйств, находящихся в непосредственной близости от промышленного центра, легче подвергаются процессам ПОЛ. В зимний период года фосфолипиды молока, полученного в пригородной зоне сильнее подвержены процессам перекисного окисления относительно летнего периода. Данный факт можно объяснить недостатком витаминов и минеральных веществ[87] в рационе кормления в данный период года.

Следует заметить, что в летний период года наблюдается более интенсивное свободнорадикальное окисление нейтральных липидов, проявляющееся в повышенном содержании кетодиенов и сопряженных триенов в гептановой фазе липидного экстракта. Это можно объяснить сезонными изменениями состава молочного жира [34]. Летний период характеризуется повышенным содержанием ненасыщенных жирных кислот в липидах молока, которые легче подвергаются окислению.

Данные о содержании продуктов пероксидации липидов в молоке, полученном в разноудаленных хозяйствах от промышленного центра, позволяют выделить хозяйства пригорода, находящихся на расстоянии от 5 до 15 км от города, как зону с наиболее интенсивным перекисным окислением липидов молока рупного рогатого скота.

Уровень спонтанной окислительной ОМБ определяли методом, основанным на реакции взаимодействия окисленных аминокислотных остатков с 2,4динитрофенилгидразином и образованием производных 2,4динитрофенилгидразона. Оценку металлкатализированного окисления белков молока проводили по содержанию карбонилированных белков при индуцировании свободнорадикального окисления системой Fe2+/ H2O2.Оптическую плотность образовавшихся динитрофенилгидразонов регистрировали спектрофотометрически при следующих длинах волн: 274, 356, 370, 430 и 530 нм [30].

Предполагая о том, что изменение составных частей молока и рациона кормления животных в разные периоды года способны привести к изменению интенсивности окислительной деструкции белков молока, данное исследование проведено как в летний, так и зимний периоды года.

Уровень спонтанной ОМБ молока отличается в разных районах Омской области. Содержание альдегид-динитрофенилгидразонов (274 нм) - ранних маркеров окислительной деструкции белков, в молоке, полученном от хозяйств пригорода г. Омска на 15,6 % (Р=0,01) и 16 % (Р=0,02), кетон-динитрофенилгидразонов основного характера на 36,4 % (Р=0,02) и 42,4 % (Р=0,003) выше относительно северных и южных районов области, соответственно. Отсутствие изменений между показателями ОМБ молока в северных и южных районах области, возможно, объясняется наличием богатого антиоксидантами рациона кормления в данный период года и менее интенсивным воздействием негативных факторов окружающей среды.

Аналогично увеличению продуктов спонтанной ОМБ молока в пригороде происходит повышение ее металлкатализируемых показателей: ранних маркеров окислительной деструкции белков(274нм) на 15% (Р=0,031) и 39% (Р0,001) относительно северных и южных районов области, так и более поздних альдегиддинитрофенилгидразонов нейтрального характера на 38% (Р=0,001) относительно южных районов. В молоке из хозяйств пригорода Омска выявлено значительное повышение и кетон-динитрофенилгидразонов нейтрального характера на 40% (Р=0,002) по отношению к южным районам, альдегид-динитрофнилгидразонов основного характера на 30 % (Р=0,030) и 47%(Р=0,001) относительно северных и южных районов области, а также кетон-динитрофенилгидразонов основного характера на 58% (Р=0,007) относительно северных районов области. Повышение содержания продуктов стимулированной окислительной деструкции белков молока в непосредственной близости промышленного центра при всех указанных длинах волн свидетельствует о более интенсивном течении свободнорадикальных процессов в молоке данного района.

Выявлены некоторые отличия в показателях индуцируемой окислительной модификации белков при сравнении молока хозяйств северного и южного районов в летний период. Так если содержание ранних альдегидфенилгидразонов в молоке северных районов области выше на 28% (Р0,001), то уровень поздних кетон-динитрофенилпроизводных основного характера на 48% (Р=0,014) ниже по отношению к южным районам. Полученные данные, могут свидетельствовать о разной способности молока этих районов подвергаться окислительной деструкции.



Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |
 

Похожие работы:

«НГУЕН ВУ ХОАНГ ФЫОНГ ОЦЕНКА ЭКОЛОГИЧЕСКОЙ СИТУАЦИИ КРУПНЫХ ГОРОДОВ В СОЦИАЛИСТИЧЕСКОЙ РЕСПУБЛИКЕ ВЬЕТНАМ Специальность: 03.02.08экология (биология) Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Чернышов В.И. Москва ОГЛАВЛЕНИЕ ГЛАВА 1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА...»

«Куяров Артём Александрович РОЛЬ НОРМАЛЬНОЙ МИКРОФЛОРЫ И ЛИЗОЦИМА В ВЫБОРЕ ПРОБИОТИЧЕСКИХ ШТАММОВ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У СТУДЕНЧЕСКОЙ МОЛОДЕЖИ СЕВЕРА 03.02.03 – микробиология 03.01.06 – биотехнология (в том числе бионанотехнологии) Диссертация на соискание учёной степени кандидата...»

«Абдуллоев Хушбахт Сатторович ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО БРОНХИТА КУР ГЕНОТИПА QX 06.02.02 «ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология» Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Макаров Владимир Владимирович...»

«Цховребова Альбина Ирадионовна ВЛИЯНИЕ ФАКТОРОВ СРЕДЫ НА РАЗВИТИЕ БЕСХВОСТЫХ АМФИБИЙ СЕВЕРНЫХ СКЛОНОВ ЦЕНТРАЛЬНОГО КАВКАЗА Специальность 03.02.14 – биологические ресурсы Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель доктор биологических наук профессор Калабеков Артур Лазаревич Владикавказ 2015 Содержание Ведение..3 Глава I. Обзор литературных данных. 1.1....»

«Алексеев Иван Викторович РАЗВИТИЕ КОМПЛЕКСНОГО ИНЖЕНЕРНО-ГЕОЛОГИЧЕСКОГО И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО МОНИТОРИНГА НА ЯКОВЛЕВСКОМ РУДНИКЕ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ ВЕДЕНИЯ ОЧИСТНЫХ РАБОТ ПОД НЕОСУШЕННЫМИ ВОДОНОСНЫМИ ГОРИЗОНТАМИ Специальность 25.00.08 – Инженерная геология,...»

«УШАКОВА ЯНА ВЛАДИМИРОВНА ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИЙ ДНК-МАРКИРОВАНИЯ В СЕЛЕКЦИОННО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ ЯБЛОНИ Специальность 06.01.05. – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат биологических...»

«АБДУЛЛАЕВ Ренат Абдуллаевич ГЕНЕТИЧЕСКОЕ РАЗНООБРАЗИЕ МЕСТНЫХ ФОРМ ЯЧМЕНЯ ИЗ ДАГЕСТАНА ПО АДАПТИВНО ВАЖНЫМ ПРИЗНАКАМ Шифр и наименование специальности 03.02.07 – генетика 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений ДИССЕРТАЦИЯ на соискание учёной степени кандидата...»

«Палаткин Илья Владимирович Подготовка студентов вуза к здоровьесберегающей деятельности 13.00.01 общая педагогика, история педагогики и образования Диссертация на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Научные руководители: доктор биологических наук, профессор,...»

«Цвиркун Ольга Валентиновна ЭПИДЕМИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС КОРИ В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКИ. 14.02.02 – эпидемиология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: заслуженный деятель науки РФ, лауреат Государственной премии СССР профессор, доктор медицинских наук Ющенко Галина Васильевна Москва – 20 Содержание...»

«БАБЕШКО Кирилл Владимирович ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕДПОЧТЕНИЯ СФАГНОБИОНТНЫХ РАКОВИННЫХ АМЕБ И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ДЛЯ РЕКОНСТРУКЦИИ ГИДРОЛОГИЧЕСКОГО РЕЖИМА БОЛОТ В ГОЛОЦЕНЕ Специальность 03.02.08 – экология (биология) диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат биологических наук Цыганов...»

«Моторыкина Татьяна Николаевна ЛАПЧАТКИ (РОД POTENTILLA L., ROSACEAE) ФЛОРЫ ПРИАМУРЬЯ И ПРИМОРЬЯ 03.02.01 – Ботаника Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, старший научный сотрудник Н.С. Пробатова Хабаровск Содержание Введение... Глава 1. Природные...»

«Степина Елена Владимировна ЭКОЛОГО-ФЛОРИСТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СТЕПНОЙ РАСТИТЕЛЬНОСТИ ЮГО-ЗАПАДНЫХ РАЙОНОВ САРАТОВСКОЙ ОБЛАСТИ 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«БОЛОТОВ ВЛАДИМИР ПЕТРОВИЧ ОЦЕНКА СОДЕРЖАНИЯ И МИГРАЦИЯ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ В ЭКОСИСТЕМАХ ВОЛГОГРАДСКОГО ВОДОХРАНИЛИЩА Специальность: 03.02.08. Экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук,...»

«Сухарьков Андрей Юрьевич РАЗРАБОТКА МЕТОДОВ ОЦЕНКИ ОРАЛЬНОЙ АНТИРАБИЧЕСКОЙ ВАКЦИНАЦИИ ЖИВОТНЫХ 03.02.02 «Вирусология» Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат ветеринарных наук, Метлин Артем Евгеньевич Владимир 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ 1 ВВЕДЕНИЕ 2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 2.1 Характеристика возбудителя бешенства 2.2 Эпизоотологические...»

«Кириллин Егор Владимирович ЭКОЛОГИЯ ОВЦЕБЫКА (OVIBOS MOSCHATUS ZIMMERMANN, 1780) В ТУНДРОВОЙ ЗОНЕ ЯКУТИИ 03.02.08 – экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: д. б. н., профессор Мордосов И. И. Якутск – 2015 Содержание Введение.. Глава 1. Краткая физико-географическая...»

«Сафранкова Екатерина Алексеевна КОМПЛЕКСНАЯ ЛИХЕНОИНДИКАЦИЯ ОБЩЕГО СОСТОЯНИЯ АТМОСФЕРЫ УРБОЭКОСИСТЕМ Специальность 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«ДОРОНИН Игорь Владимирович Cистематика, филогения и распространение скальных ящериц надвидовых комплексов Darevskia (praticola), Darevskia (caucasica) и Darevskia (saxicola) 03.02.04 – зоология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, заслуженный эколог РФ Б.С. Туниев Санкт-Петербург Оглавление Стр....»

«СЕРГЕЕВА ЛЮДМИЛА ВАСИЛЬЕВНА ПРИМЕНЕНИЕ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ЗАКВАСОК ДЛЯ ОПТИМИЗАЦИИ ФУНКЦИОНАЛЬНО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ МЯСНОГО СЫРЬЯ И УЛУЧШЕНИЯ КАЧЕСТВА ПОЛУЧАЕМОЙ ПРОДУКЦИИ Специальность 03.01.06 – биотехнология ( в том числе бионанотехнологии) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель Доктор биологических наук, профессор Кадималиев Д.А. САРАНСК 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ.....»

«КОЖАРСКАЯ ГАЛИНА ВАСИЛЬЕВНА КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ МАРКЕРОВ КОСТНОГО МЕТАБОЛИЗМА У БОЛЬНЫХ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ 14.01.12 онкология Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научные руководители: доктор биологических наук, Любимова Н.В. доктор медицинских наук, Портной С.М. Москва, 2015 г....»

«Вафула Арнольд Мамати РАЗРАБОТКА ЭЛЕМЕНТОВ ТЕХНОЛОГИИ ВЫРАЩИВАНИЯ ПАПАЙИ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ЗДОРОВОГО ПОСАДОЧНОГО МАТЕРИАЛА И ЭКСТРАКТОВ С БИОПЕСТИЦИДНЫМИ СВОЙСТВАМИ ДЛЯ ЗАЩИТЫ ЕЕ ОТ ВРЕДНЫХ ОРГАНИЗМОВ Специальности: 06.01.07 – защита растений 06.01.01 – общее земледелие и растениеводство Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.