WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 |

«ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ ВЫЯВЛЕНИЯ ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО НЕКРОЗА ГЕМОПОЭТИЧЕСКОЙ ТКАНИ ЛОСОСЕВЫХ РЫБ ...»

-- [ Страница 4 ] --

В ходе исследований нами было выявлено, что в нейтральной среде при увеличении ионной силы буферного раствора уменьшалась степень адсорбции иммуноглобулинов G на поверхности частиц со всеми исследованными группами. Это объясняется снижением стабильности нативной структуры белков и ослаблением сил электростатического взаимодействия между IgG и поверхностью латекса, что согласуется с литературными данными [38, 47, 118, 146, 147]. При ионной силе 100 ммоль/л и более в нейтральной среде степень адсорбции антител была ниже 50%, и в этих условиях она практически не зависела от рН ГСБР. При снижении концентрации компонентов буферного раствора до 5 ммоль/л в среде с рН 7 наблюдался рост количества адсорбированных антител.

Серьезной проблемой при проведении РАЛ может быть возникновение спонтанной агглютинации [38, 94, 118]. Количество ложноположительных результатов минимизируют благодаря приготовлению серии разведений исследуемого образца, однако это может снизить чувствительность латексных препаратов [119]. Уменьшить вероятность спонтанной агглютинации, вызванной формированием цепей или мостиков из микросфер, возможно благодаря блокированию открытых сайтов связывания на поверхности частиц. Для этого авторы предлагают использовать неиммунную сыворотку лошади, бычий сывороточный альбумин (BSA), сухое обезжиренное молоко, желатин или другие компоненты [8, 14, 30, 38, 94, 117, 147]. Нами было установлено, что наиболее полное связывание открытых сайтов на поверхности сенсибилизированных частиц латекса достигалось при использовании 1% BSA.

Оценивали влияние диаметра микросфер латекса на степень адсорбции антител против вируса ИНГТ. Снижение диаметра частиц приводило к увеличению степени сенсибилизации микросфер за счет возрастания их поверхностно-массового отношения, что подтверждается литературными данными [43, 48, 71, 92, 94, 118, 146, 147]. При этом удобно было использовать латексы с диаметром не менее 340 нм, так как работа с частицами меньшего размера осложняется высокой вероятностью повреждения нативной структуры антител при высокоскоростном центрифугировании сенсибилизированных латексов.

Как следует из литературных данных [47, 48, 118, 146, 147, 158, 163], увеличение концентрация частиц и активных групп на их поверхности способствует росту степени связывания белка. Проведенные нами эксперименты позволили считать, что для достижения высоких значений степени сенсибилизации частиц достаточно, чтобы их содержание в латексной суспензии составляло 1,5 % с концентрацией активных групп 1,98 мкг-экв/м2, что подтверждается данными публикаций [118, 158, 163]. При этом катионные латексы (с –NH2 группами) адсорбировали на 4,2 – 10,0% больше специфичных антител по сравнению с анионными (с - COOH, - SO4 группами).

Определяли концентрацию сенсибилизирующих антител, достаточную для достижения наибольшей степени сенсибилизации латексных частиц. При этом в качестве дополнительного компонента для связывания антител с поверхностью латекса использовали 1% стрептококковый белок А в ГСБР.

Установили, что концентрация антител около 1000 мкг/мл является оптимальной для получения латексных препаратов, выявляющих вирус ИНГТ. Эта величина находилась в диапазоне концентраций антител, которые использовались для иммобилизации частиц латекса и были указаны в публикациях [94, 117, 146, 147].

Сенсибилизация латексов биолигандом возможна не только в процессе физической адсорбции, но и благодаря ковалентному связыванию белка [119].

Химическая адсорбции позволяет снижать вероятность спонтанной агглютинации, а также десорбции комплекса «латекс-белок». По данным литературы [74, 131, 150, 156], латексные тест-системы, полученные в процессе ковалентного связывания антител, характеризуются более высокой степенью адсорбции и имеют продолжительный срок хранения. В литературе, посвященной вопросам адсорбции иммунобиологических лигандов, описаны разные приемы их связывания с активными группами латекса [30]. Нами было установлено, что применение глутаральдегида в качестве модификатора для химической адсорбции позволило связать на 9,0-9,2 % больше специфичных антител по сравнению с белком А. Благодаря этому латексные диагностикумы, синтезированные с использованием глутарового альдегида, выявляли вирус ИНГТ с более низким титром накопления (3,11 lgТЦД50/см3), что согласуется с литературными данными [117, 131, 156].

В настоящее время существует большое количество латексных препаратов, полученных на основе как поликлональных, так и моноклональных антител [8, 18, 31, 36, 42, 93, 118, 151]. Для синтеза диагностикумов нами были использованы поликлональные антитела с активностью в ТФ непрямом варианте ИФА 1:256000, и моноклональные антитела, специфичные к N-белку и G-белку, с активностью 1:192000 и 1:384000, соответственно. По результатам исследований, степени адсорбции поликлональных и моноклональных антител на поверхности частиц не отличались друг от друга и составляли 82,8-83,8 %.

Аналитическая чувствительность полученных препаратов составляла 3,11-3,20 lg ТЦД50/см3. При оценке специфичности препаратов, полученных с использованием моноклональных антител, отмечали отсутствие положительной реакции с антигенами вирусов ВГС, ВВК и ИНПЖ с титром накопления 7,0 lgТЦД50/см3 и ниже. Специфичность диагностикумов на основе поликлональных антител составляла 6,0 lgТЦД50/см3 и ниже. Результаты наших исследований согласуются с опубликованными данными, полученными при оценке тестсистем для выявления других антигенов [8, 18, 31, 36, 93, 118]. Таким образом, для проведения диагностических исследований биоматериала на ИНГТ надежнее применять латексные препараты на основе моноклональных антител.

С помощью латексов, сенсибилизированных моноклональными антителами, из 500 образцов, отрицательных по результатам вирусвыделения в культуре клеток, ИФА, РИФ и ОТ-ПЦР, 4 пробы в РАЛ вызвали агглютинацию на 1-2 креста. Следовательно, по результатам данного исследования, диагностическая специфичность полученной тест-системы составила 99,2%. При тестировании 50 положительных образцов, инфицированных вирусом ИНГТ, в РАЛ 46 образцов были определены в качестве положительных (титр накопления составлял 3,20-5,00 lgТЦД50/см3), 1 проба – сомнительная (3,18 lgТЦД50/см3), 3 пробы – отрицательные (3,00, 3,10, 3,15 lgТЦД50/см3). Следовательно, диагностическая чувствительность латексных препаратов на основе моноклональных антител составила 92%. Полученные результаты согласуются с литературными данными [18, 36, 51, 118, 158].

Одним из основных требований, предъявляемых к латексным диагностическим суспензиям, является их коллоидная стабильность, снижение которой может привести к возникновению спонтанной агглютинации и получению ложноположительных результатов [46, 47, 118]. Для длительного сохранения препаратов в электростатически устойчивом состоянии Peula, J.M., Puig, J. и др. предлагают проводить блокирование сайтов неспецифичного связывания на поверхности латекса [118, 131, 146]. Также повышать устойчивость латексных суспензий возможно за счет применения различных стабилизаторов [47, 69, 127]. По результатам проведенных нами исследований установлено, что с целью сохранения в течение 9 месяцев коллоидной стабильности и высоких диагностических показателей препаратов для выявления вируса ИНГТ, сенсибилизированные частицы оптимально хранить в ГСБР, содержащем модификатор (2-оксиэтил)-триметиламмония хлорид (50 мМ).

–  –  –

Актуальной в настоящее время является разработка молекулярнобиологических экспресс-методов диагностики вирусных болезней рыб.

Существует большое количество публикаций, описывающих тест-системы на основе методов ОТ-ПЦР и ОТ-ПЦР-РВ для выявления вирусов ИНГТ, а также ВГС и ВВК [17, 54, 61, 66, 81, 85, 90, 117]. В литературе описано применение тест-систем для выявления РНК вирусов рыб на основе амплификации фрагментов N- и G-генов [17, 54, 64, 66, 72, 81, 86, 98, 107, 117]. В 90-е гг. XX в.

впервые были созданы тест-системы на основе ОТ-ПЦР-РВ в формате чипов. На сегодняшний день в нашей стране ООО «Люмэкс-Маркетинг» разработаны тестсистемы, позволяющие выявлять возбудителей различных вирусных и бактериальных болезней птиц и КРС (болезнь Ньюкасла, инфекционный бронхит кур; Chlamidophila abortus, Brucella spp., Leptospira interrogans, Ureaplasma diversum, Trichomonas foetus, Campylobacter fetus и др.).

В сотрудничестве с ООО «Люмэкс-Маркетинг» нами были проведены исследования по разработке метода ОТ-ПЦР-РВ с применением диагностических ПЦР-чипов для выявления вирусов ИНГТ, ВГС и ВВК.

Подобраны системы праймеров и зонды (структура отражена в табл. 4) для амплификации фрагментов гена N ДНК данных вирусов. Проведен поиск оптимальных температурных условий и времени термоциклирования для осуществления всех этапов реакции. Учитывая результаты наших исследований, обратную транскрипцию было предложено проводить в течение 20 мин при 37 С, предварительный цикл амплификации - 2 мин при 94С. На каждом из 45 циклов амплификации для денатурации кДНК вирусов ИНГТ и ВГС достаточным было воздействие 94С в течение 3 секунд, а для отжига праймеров и элонгации - 60С в течение 20 секунд. Для денатурации кДНК вируса ВВК использовали 95С в течение 3 секунд, а для отжига праймеров и элонгации - 60С в течение 24 секунд. Результаты наших исследований согласуются с опубликованными данными, полученными при оценке тест-систем для выявления других антигенов [164].

Полученные тест-системы позволяли выявлять РНК вирусов ИНГТ, ВГС и lg ТЦД50/см3.

ВВК с концентрацией 1,25 нг/мл с титром накопления 1,5 Эффективность амплификации полноразмерных фрагментов гена N вирусов ИНГТ, ВГС, ВВК составляла – 98,0-99,5%, что согласуется с литературными данными, опубликованными по результатам ОТ-ПЦР-РВ при исследовании патологического материала, содержащего вирус ИНГТ и другие рабдовирусы [57, 72, 110, 128, 135, 136].

С помощью разработанной тест-системы методом ОТ-ПЦР-РВ с применением диагностических ПЦР-чипов было исследовано по 500 проб патологического материала от лососевых и карповых рыб, не содержащих вирусов ИНГТ, ВГС, ВВК, по результатам вирусвыделения, ИФА и РИФ, по 50 проб, инфицированных вирусами ИНГТ, ВГС, ВВК. Учитывая результаты исследований, диагностическая чувствительность разработанных тест-систем составила 100 %, диагностическая специфичность – 99,6-99,8 %, что находит подтверждение в публикациях, повященных разработке метода ОТ-ПЦР-РВ для выявления РНК вируса ИНГТ и других рабдовирусов [57, 72, 110, 128, 135, 136].

Разработанные диагностические ПЦР-чипы были удобны в использовании, так как на дно микрореакторов заранее нанесена готовая смесь для реакции. При использовании полученных тест-систем значительно сокращается время проведения анализа за счет оптимизации режима термоциклирования и совмещения обратной транскрипции и ПЦР в одном микрореакторе. ОТ-ПЦРРВ, который проводится в пробирке, дешевле по сравнению с чиповым форматом. Однако анализ с применением диагностических ПЦР-чипов экспресснее и позволяет проводить скрининговые исследования патматериала одновременно на несколько вирусных болезней рыб (ИНГТ, ВГС и ВВК).

Амплификатор «АриаDNA» и ПЦР-чипы (ООО «Люмэкс-Маркетинг») отечественного производства, поэтому их стоимость дешевле по сравнению с зарубежными аналогами.

На основании полученных результатов были разработаны «Методические рекомендации по выявлению вирусов рыб в обратно-транскриптазной полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (ОТ-ПЦР-РВ) с применением диагностических ПЦР-чипов» и утверждены директором ФГБУ «ВНИИЗЖ» (см. Приложение 3).

Для возможности использования в работе штаммов вирусов ВГС и ВВК в качестве положительных контролей и контролей на специфичность проведена работа по их депонированию в Коллекцию штаммов микроорганизмов ФГБУ «ВНИИЗЖ» (см. Приложения 4 и 5).

4 ЗАКЛЮЧЕНИЕ Во многих странах мира одной из важнейших проблем выращивания аквакультуры является ИНГТ лососевых. Окончательный диагноз по данному заболеванию устанавливают на основе результатов лабораторных исследований патологического материала рыб. Мониторинг позволяет оценивать эпизоотическую обстановку по ИНГТ в РФ и, тем самым, предотвращать вспышки заболевания. Однако применение этих методов предполагает закупку дорогостоящих коммерческих наборов и оборудования для проведения анализа, наличие высококвалифицированного персонала, поэтому разработка экспрессметодов диагностики ИНГТ для дополнения существующей схемы актуальна.

В ходе проведенных исследований получены следующие результаты:

1. Оптимизированы условия получения культурального антигена вируса ИНГТ с концентрацией после очистки 0,7-2,0 мг/мл и титром накопления 7,0-8,5 lg ТЦД50/см3 для получения вирусспецифичных сывороток и моноклональных антител.

2. Получены и охарактеризованы 18 гибридом, продуцирующих моноклональные антитела к белкам вируса ИНГТ. Для разработки диагностических тест-систем выбраны 2 препарата: против N- и G-белка вируса ИНГТ с концентрациями 28,1 и 54,6 мг/мл и активностью в ИФА 1:192000 и 1:384000, соответственно.

3. Определены оптимальные параметры получения латексных препаратов для выявления вируса ИНГТ – глицин-солевой буферный раствор с ионной силой 5,0 мМ и рН 7,0, латексы с диаметром микросфер 340 нм и концентрацией -NH2 групп 1,98 мкг-экв/м2, концентрация сенсибилизирующих антител – 1 мг/мл, стабилизатор – (2-оксиэтил)-триметиламмония хлорид 50 мМ, позволяющий хранить латексные препараты сроком не менее 9 месяцев.

4. Разработан экспресс-метод РАЛ для выявления вируса ИНГТ с применением поликлональных и моноклональных антител. Чувствительность и специфичность тест-системы на основе поликлональных антител составила 99,0 и 98,2%, соответственно, с аналитической чувствительностью 3,11 lgТЦД50/см3.

Чувствительность и специфичность тест-системы на основе моноклональных антител составила 92,0 и 99,2%, соответственно, с аналитической чувствительностью 3,20 lgТЦД50/см3.

5. Разработан экспресс-метод ОТ-ПЦР-РВ с применением диагностических ПЦР-чипов для выявления вирусов ИНГТ, ВГС и ВВК. Диагностическая чувствительность разработанных тест-систем составила 100%, диагностическая специфичность – 99,6-99,8%. Аналитическая чувствительность – 1,25 нг/мл и 1,5 lgТЦД50/см3.

6. Разработанные методы апробированы при диагностических исследованиях 550 проб патматериала рыб, отобранных в 80 рыбохозяйствах Северо-западного, Центрального и Южного округов РФ в 2014-2015 гг. Результаты исследования, полученные с помощью разработанных методов РАЛ и ОТ-ПЦР-РВ, подтверждены с помощью классических методов диагностики вирусных болезней рыб.

Таким образом, в результате проделанной работы поставленные задачи были выполнены. Разработанные в ходе проведенных исследований методы применяются в ФГБУ «ВНИИЗЖ».

5 СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АТФ – аденозинтрифосфорная кислота БП – биологическая проба ВВК (SVC) – весенняя виремия карпа ВГС (VHS) – вирусная геморрагическая септицемия ВКО – внутренний контрольный образец ВНА – вирус нейтрализующие антитела ГСБР – глицин-солевой буферный раствор ДЛФО – теория коллоидной стабильности Дерягина-Ландау-Фервея-Овербека Е – эффективность амплификации ЕРС – клетки папулезной эпителомы карпа ЖКТ – желудочно-кишечный тракт ИГХМ – иммуногистохимический метод ИНГТ (IHN) – инфекционный некроз гемопоэтической ткани ИНПЖ (IPN) – инфекционный некроз поджелудочной железы ИХМ – иммунохимический метод КРС – крупный рогатый скот МА – моноклональные антитела н. п. – нуклеотидные пары ОТ-ПЦР-РВ – обратно транскриптазная полимеразная цепная реакция в режиме реального времени ПАВ – поверхностно-активные вещества ПМС - полиметилсалаксан ПЭГ – полиэтиленгликоль ПЭИ – полиэтиленимин РАЛ – реакция агглютинации латекса РДП – реакция диффузной преципитации РИФ – реакция иммунофлуоресценции рН – показатель кислотности РНП – рибонуклеопротеин СМ – спектрофотометрический метод ТФ ИФА – твердофазный иммуноферментный анализ ТЦД50 – тканевая цитопатическая доза, вызывающая гибель 50% клеточного монослоя ФБР – фосфатно-буферный раствор ФСБР – фосфатно-солевой буферный раствор ЦБР – цитратный буферный раствор ЦПД – цитопатическое действие ЭДТА – этилендиаминтетраацетат ЭПС – эндоплазматический ретикулюм BF-2 – клетки из хвостового стебля синежаберного солнечника BSA – бычий сывороточный альбумин Ct – пороговый цикл амплификации FAM - карбоксифлуоресцеин FНМ – клетки хвостового стебля черного толстоголова IgG – иммуноглобулин класса G NS – неиммунная сыворотка лошади pI – изоэлектрическая точка ROX – карбокси-х-родамин RTG-2 – клеточная линия из гонад радужной форели SDS – лаурилсульфат натрия Se – диагностическая чувствительность Sp – диагностическая специфичность TBS – трис-солевой буферный раствор TBST – трис-солевой буферный раствор с добавлением 0,1% твин-20 TMB – тетраметилбензидин

6 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Абтихи Б. Вирусные болезни рыб / Паразиты и болезни рыб: Сборник научных трудов // Редкол.: Безгачина Т.В., Недоговорова Т.В., Соколовская С.А., Юхименко Л.Н. – М.: Изд-во ВНИРО. - 2000. – 183 c.

2. Ашмарин, И.П. Быстрые методы статистической обработки и планирование экспериментов / И.П. Ашмарин, Н.Н. Васильев, В.А. Амбросов. – Л.: Изд-во Ленингр. ун-та, 1974. – 76 с.

3. Болезни лососевых и сиговых рыб в аквакультуре / Богданова Е.А. – СПб.:

ГосНИОРХ, 1994. – С. 17-21.

4. Бучацкий, Л.П. Вирусные инфекции морских и пресноводных животных / Л. П. Бучацкий. - Киев, 1994. - 130 с.

5. Ветеринарно-санитарные правила перевозки животных, птицы, рыбы, продуктов и сырья животного происхождения автомобильным транспортом, утв.

Госагропромом СССР 30.12.1986 № 432-5.

6. Видеоцифровой анализ для лабораторной диагностики: комплекс «экспертлаб» на основе сканера для документирования, объективизации и регистрации результатов латекс-агглютинационных, гемагглютинационных тестов, изосерологических и иммуноферментных исследований / Т.А. Старовойтова, В.В. Зайко, Н.А. Стериополо [и др.] // Лаборатория. – 2006. – № 1. – С. 19-22.

7. Вирусовыделение возбудителя инфекционного некроза гемопоэтической ткани лососевых / Л.Ю. Апасова и др. // Вет. Медицина. - 2008. - Вып. 90. - С. 38Волков М.С., Ирза В.Н., Черняева Т.Ю. Применение латексных антигенов в диагностике микоплазмозов птиц // Тр. Фед. Центра охраны здоровья животных. – 2011. – Т. IX. – С. 228-236.

9. Гарькин А.А., Изучение иммунобиологических свойств вакцин против оспы овец. Дисс.: … к.б.н., 2007 г.

10. Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц: пер. с англ. – М.:

Практика, 1999. – 459 с.

11. Головин, П.П. Проблемы охраны здоровья рыб / П.П. Головин, H.A.

Головина // Тезисы научн.-практ. конф. М.: Россельхозакадемия, 2000. - С. 50-51.

12. Грищенко, Л.И. Болезни рыб и основы рыбоводства / Л.И. Грищенко и др.

М.: Колос. – 1999. – 456 с.

13. Джупина, С.И. Методы эпизоотического исследования и теория эпизоотического процесса / С.И. Джупина. – Новосибирск: Наука, Сиб. отд-ние, 1991. – 142 с.

14. Думпес Ю. Я. Диагностические экспресс-тесты на твёрдофазных носителях для медицинских биохимических анализов // Рига.: Медицина.- 1986.

– 198 c.

15. Егоров А.М. Теория и практика иммуноферментного анализа / Ф.П.

Осипов, Б.Б. Дзантиев, Е.М. Гаврилова,- М. - Высшая школа. - 1991. – 271 c.

16. Завьялова Е.А. Цитоморфологическая характеристика культур клеток рыб и их чувствительность к некоторым вирусам: автореф. дисс. к.б.н. / М., 2006 г.

17. Завьялова Е.А., Кандрина Н.Ю., Ломакина Н.Ф., Гулюкин М.И.

Полимеразная цепная реакция в диагностике вирусных болезней рыб // Ветеринарная медицина, Харьков. – 2011. - №95. – С. 59-60.

18. Закономерности сорбции моноклональных антител на полистироловые латексные частицы. Асеева В.Г., Сухишвили С.А., Ярославов А.А., Падюков Л.Н. В сб. "Современные направления создания медицинских диагностикумов", Москва. – 1990. - С. 82.

19. Здоровая рыба. Профилактика, диагностика и лечение болезней / Ракхонен Р., Веннерстрем П., Ринтамяки-Киннунен П. и др. // НИИ охотничьего и рыбного хозяйства – Хельсинки, 2003. – 164 c.

20. Иммобилизованные клетки и ферменты / под ред. Дж. Вудворта; пер. с англ. – М.: Мир, 1998. – 321 c.

21. Ихтиопатология / Н.А. Головина, Ю.А. Стрелков, В.Н. Воронин и др. Под ред. Н.А. Головиной, О.Н. Бауера. – М.: Мир, 2003. – С. 95-97.

22. Карпищенко А.И. Медицинские лабораторные технологии / А.И.

Карпищенко // С-Пб.: Интермедика. - 2002. - С. 217-227, 577-578.

23. Каталог. Российская коллекция клеточных культур (РККК). – СПб, 2004, 315 с.

24. Козлов, В.И. Аквакультура / В.И. Козлов, Л.А. Никифоров-Никишин, А.Л.

Бородин. М.: Колос. – 2006. – 445 с.

25. Коллинз У.П. Новые методы иммуноанализа / М. Тертон, Д. Балангхем, под ред. У.П. Коллинза, пер. с англ. М.: Мир, 1991.- C. 151-154.

26. Лакин, Г.Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин – М.: Высшая школа. – 1990. – С. 352.

27. Методические рекомендации по отбору проб для вирусологического исследования на обнаружение вирусов геморрагической септицемии, инфекционного некроза гемопоэтической ткани лососевых, инфекционного панкреатического некроза, весенней виремии карпа; В.А. Пыльнов, С.С.

Рыбаков, Н.В. Мороз; ФГБУ «ВНИИЗЖ». – Владимир, 2013. – 12 с.

28. Методические указания по идентификации и лабораторной диагностике вирусных болезней рыб. Вирусные болезни / Сб. инструкций по борьбе с болезнями рыб. – М.: Отдел маркетинга АМБ-агро, 1998. – Ч.1 – С. 60-113.

29. Методы культивирования клеток / под ред. Г.П.Пинаева – Ленинград.:

Наука, 1988. – 313 с.

30. Мешандин А.Г. Физико-химические аспекты сорбционных процессов при синтезе биолигандов: дис… д-ра тех. наук: 03.00.23.- М., - 1994. – С.216.

31. Назаров Н. А., Рыбаков С.С., Метлин А.Е. Латекс агглютинационный тест для диагностики бешенства животных // Ветеринария. - 2013. - №6. - С. 56-61.

32. Орлова О.Ю., Мешандин А.Г. Сопоставление различных видов твердых фаз при синтезе гидрозольных иммунохимических диагностикумов / Вятский медицинский вестник. Киров.: КГМА. - 2000. - № 3. - С. 53-58.

33. Очистка и концентрирование вируса инфекционного некроза гемопоэтической ткани лососевых рыб / Л.Ю. Апасова, Н.В. Мороз, С.С.

Рыбаков, Т.Б. Ефремеева // Тр. Федерального центра охраны здоровья животных.

– Владимир, 2009. – Т.7. – С. 234-239.

34. Пичугина, Т.Д. Влияние вирусных инфекций на развитие аквакультуры в России / Т.Д. Пичугина, Е.А. Завьялова // Вет. медицина: Международный тематический науч. сб. Вып. 85. – Харьков, 2005. – Т. 2. – С. 906-912.

35. Планц Стентон. Медико-биологическая статистика / Планц Стентон// М.:Практика. - 1998. - С.314-418.

36. Полетаева О.А., Мешандин А.Г. Иммуноагглютинационный диагностикум на основе моноклональных антител для скрининга эпителиального опухолевого маркера в цельной крови онкологических больных / Журн. Биотехнология. М. С. 46-47.

37. Получение гипериммунных специфических сывороток к вирусу инфекционного некроза гемопоэтической ткани / Н.В. Мороз, Л.Ю. Апасова, С.С. Рыбаков, Т.Б. Ефремова // Известия Национальной академии наук Беларуси.

Серия биологических наук «Молодежь в науке-2009». – Минск. - 2009. – С. 106Получение латексных диагностикумов. Асеева В.Г., Падюков Л.Н. В сб.

"Современные методы иммунохимической и молекулярно-биологической диагностики", Москва. – 1992. - С.103-110.

39. Приказ Минсельхоза РФ от 19.12.2011 № 476 "Об утверждении Перечня заразных и особо опасных болезней животных, предполагающих проведение карантинных мероприятий".

40. Рудакова С.Л. Некроз гемопоэтической ткани у производителей нерки и предполагаемые источники инфекции // Вопр. рыбол. - 2003. - Том 4, № 1 (13). – С. 93-102.

41. Сборник инструкций по борьбе с болезнями рыб. Инструкция о мероприятии по профилактике и борьбе с инфекционным некрозом гемопоэтической ткани лососевых рыб, Минсельхозпрод России Департамент Ветеринарии, № 13-4-2-1375 от 24.08.1998г. / М.: Отдел маркетинга АМБ-агро, 1998. – С. 310.

42. Свиридов В.В., Зайцев Е.М., Дельвиг А.А., Мазурова И.К., Семенов Б.Ф.

Применение моноклональных антител для определения дифтерийного токсина и его структурных компонентов // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. – 1986. - №1. – С. 30-35.

43. Скуркис Ю.О. Формирование поверхностной структуры монодисперсных микросфер на основе полистирола и сополимеров стирола с акролеином:

автореф. канд. хим. наук // СПб., 2005. – С. 23.

44. Станишевский Я.М. Полимерные дисперсные системы медикобиологического назначения// Дисс. канд. биол. наук. М. - 2001. - С. 127.

45. Тимофеева О.Ю. Критерии результативности в эксперименте: применение методов математической статистики: Учебно-методическое пособие. – М.:

АПКиППРО, 2008. – 36 с.

46. Улитин, М.В., Филиппов, Д.В., Лукин, М.В. Физико-химические свойства, устойчивость и коагуляция лиофобных дисперсных систем – Иваново: ГОУ ВПО Иван. Гос. Хим.-технол. ун-т. – 2007. – 108 с.

47. Фролов, Ю.Г. Курс коллоидной химии. – М.: Химия. – 1988. – 464 с.

48. Чайка Н.А. Реакция агглютинации латекса. // В кн.: Иммунологическая диагностика вирусных инфекций. / Под. ред. Т.В. Перадзе, П.М. Халонена.:

Медицина. - 1981. - С. 121-143.

49. Щелкунов И.С. Эпизоотическая ситуация по вирусным болезням культивируемых рыб // Ветеринария. – 2006. - №4. – С. 22-25.

50. Щелкунов, И.С. Получение постоянных клеточных линий рыб:

практические советы / И.С. Щелкунов, Т.И. Щелкунова // Актуальные вопросы пресноводной аквакультуры. М.: ВНИИПРХ, 2002. – Вып. 78. – С. 179 – 187.

51. Шошина Н.С. Получение и характеристика моноклональных антител для экспресс-анализа бактериальных токсинов. Дисс.: …к.х.н., 2013 г.

52. Эпизоотологический мониторинг заболеваний рыб в РФ / Гулюкин М.И., Борисова М.Н., Пичугина Т.Д. и др. // 90-й выпуск тематического научного сборника «Ветеринарная медицина», посвященного международной научнопрактической конференции «Актуальные проблемы охраны здоровья рыб и других гидробионтов». – Харьков, 2008. – С. 142-146.

53. Ammayappan A., LaPatra S.E., Vakharia V.N. Molecular characterization of the virulent IHNV strain 220-90. // Journal of Fish Diseases. – 2010. – Vol. 7, Issue 10 – 11p.

54. Arakawa C K, Deering R E, Higman K H, Oshima K H, O'Hara P J, Winton J R.

Polymerase chain reaction (PCR) amplification of a nucleoprotein gene sequence of infectious hematopoietic necrosis virus. // Dis Aquat Org – 1990. - №8. – Р. 165–170.

55. Arnzen J.M., Ristow S.S., Hesson C.P. and Lientz J. Rapid fluorescent antibody tests for infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) utilizing monoclonal antibodies to the nucleoprotein and glycoprotein. // J. Aquat. Anim. Healthю – 1991. Р. 109–113.

56. Arum Ammayappan, Scott E LaPatra, Vikram N Varharia. (2010). Molecular characterization of the virulent infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) strain 220-90. // Virol J. – 2010. - №7. – Р. 10.

Arun K. Dhar, Michelle M. Roux, and Kurt R. Klimpel.. Detection and 57.

Quantification of Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis Virus and White Spot Virus in Shrimp Using Real-Time Quantitative PCR and SYBR Green Chemistry. // J Clin Microbiol. – 2001. - №39 (8): Р. 2835–2845.

58. As A.H., Soltani M., Kazemi B., Haghdoust I.S., Sharifpour I. Use of immunohistochemical and PCR methods in diagnosis of infectious haematopoietic necrosis disease in some Rainbow trout hatcheries in Iran. // Pak J. Biol Sci. – 2007. – Vol. 10(2). – Р. 230-234.

59. Banerjee AK. Transcription and replication of rhabdoviruses. // Microbiol Rev. – 1987. - №51. – Р. 66–87.

60. Bangs, L.B., “Latex Immunoassays” // J. Clin. Immunoassays. – 1990. – № 13/3. – Р. 127-131.

61. Barlic-Maganja D., Strancar M. Comparison of the efficiency and sensitivity of virus isolation and molecular methods for routine diagnosis of IHNV and IPNV. // Journal of Fish Diseases. – 2002. – Vol. 25, Issue 2 – P. 73-80.

62. Belogurov A.A., Kurkova J.N. et al. Recognition and degradation of myelin basic protein peptides by serum autoantibodies: novel biomarker for multiple sclerosis.

// Journal Immunol. – 2008. – Vol. 180 (2). – P. 1258-1267.

63. Breyta R., Jones A., Stewart B., Brunson R., Thomas J., Kerwin J., Bertolini J., Mumford S., Patterson C., Kurath G. Emergence of MD type infectious hematopoietic necrosis virus in Washington State coastal steelhead trout. // Dis Aquat Organ. - 2013.

– Vol. 104(3). – Р. 179-195.

64. Bruchhof, B. Differential diagnosis of fish pathogenic rhabdoviruses by reverse transcriptase-dependent polymerase chain reaction / B/ Bruchhof, O. Marquardt, P.J.

Enzmann // J. Virol. Methods. – 1995. – Vol. 55, №1. – Р. 111-119.

65. Carl T. Wittwer, Mark G. Herrmann, Cameron N. Gundry, and Kojo S. J.

Elenitoba-Johnson. Real-Time Multiplex PCR Assays. // Methods. – 2001. - №25. – Р. 430–442.

66. Chiou P.P, Drolet B S, Leong J C. Polymerase chain amplification of infectious hematopoietic necrosis virus RNA extracted from fixed and embedded fish tissue. J Aquat Anim Health. – 1995. - №7. – Р. 9–15.

67. Christin M. Bendof, Carry O. Kelley, Susan C. Yun, Gael Kurath, Karl B.

Andree, Ronald P. Hedrick. Genetic Diversity of Infectious Hematopoietic Necrosis from Feather River and Lake Oroville, California, and Virulence of Selected Isolates for Chinook Salmon and Rainbow Trout. // J. of Aquatic Animal Health. – 2007. – Vol. 19, Issue 4. – P. 254-269.

68. Coll, J.M. The glycoprotein G of rhabdoviruses // Arch. Virology. -1995. - Vol.

140. - P. 827-851.

69. De Witt J.A., Van De Ven N.G.M. The effect of neutral polymers and electrolyte on the stability of aqueous polystyrene latex // Adv. Colloid Interface Sci. Vоl. 42. P. 41-64.

70. Deering R.E., Arakawa C.K., Oshima K.H., Ohara P.J., Landolt M.L. and Winton J.R. Development of a biotinylated DNA probe for detection and identification of infectious hematopoietic necrosis virus. // Dis. Aquat. Org. – 1991. - №11. – Р. 57– 65.

71. Degre, G.; Brunet, E.; Dodge, A.; Tabeling, P. Improving agglutination tests by working in microfluidic channels. // Lab Chip. – 2005. - №5. – Р. 691-694.

72. Dhar A.K., Bowers R.M., Licon K.S., Lapatra S.E. Detection and quantification of infectious hematopoietic necrosis virus in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) by SYBR Green real-time reverse transcriptase-polymerase chain reaction. // J. Virol Methods. - 2008. – Vol. 147(1). – Р. 157-166.

73. Dietzgen R.G., Calisher C.H., Kurath G. et al Rhabdoviruses // In: Virus Taxonomy: Ninth report of the International Committee on taxonomy of viruses / Eds.

A.M.Q. King, M.J. Adams, E.B. Carstens. – Elsevier Press, 2012. – P. 686-713.

74. Douglas, A.S., Monteith, C.A., “Improvements to Immunoassays by Use of Covalent Binding Assay Plates”. // Clin. Chem. – 1994. - №40/9. – Р. 1833-1837.

75. Emmenegger E.J., Meyers T.R., Burton T.O. and Kurath G. Genetic diversity and epidemiology of infectious hematopoietic necrosis virus in Alaska. // Dis. Aquat.

Org. – 2000. - №40. – Р. 163–176.

76. Enzmann P.J., Castric J., Bovo G., Thiery R., Fichther D., Schutze H. and Wahlt T. Evolution of infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV), a fish rhabdovirus, in Europe over 20 years: implications for control. // Dis. Aquat. Org – 2010. - №89. – Р. 9–15.

77. Enzmann P.J., Kurath G., Fichtner D., Bergmann S.M. Infectious hematopoietic necrosis virus: Monophyletic origin of European IHNV isolates from North-American genogroup M. Dis. // Aquat. Org. – 2005. - №66. – Р. 187–195.

78. Eric D. Anderson, H. Mark Engelking, Eveline J. Emmenegger, G. Kurath.

Molecular Epidemiology Reveals Emergence of a Virulent Infectious Hematopoietic Necrosis (IHN) Virus Strain in Wild Salmon and Its Transmission to Hatchery Fish. // J. of Aquatic Animal Health. – 2000. – Vol. 12, Issue 2. – P. 85-99.

79. Garver, K.A., Batts, W.N., Kurath, G. (2006). Virulence comparisons of infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) U and M genogroups in sockeye salmon and rainbow trout. // J. Aquat. Anim. Health. – 2006. - №18. – Р. 232–243.

80. Galfre G., Mulstein C. Preperties of the monoclonal antibodies produced by hybridoma technology and their application to the study of diseases. // UNDP/World Bank/WHO. – 1982. – Р. 1.

81. Gunimaladevi I., Kono T., LaPatra S.E. and Sakai M. A loop mediated isothermal amplification (LAMP) method for detection of infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). // Arch. Virol. – 2005.

- №150. – Р. 899–909.

82. Han, J.H.; Kim, K.S.; Yoon, J.Y. The enhanced diffusional mixing for latex immunoagglutination assay in a microfluidic device. // Anal. Chim. Acta. - 2007. Р. 252-259.

83. Hechemy, K. and E. Michaelson, “Latex Particle Assays in Laboratory Medicine. Part I and Part II.” // Laboratory Management. – 1984. - № 40. – Р. 26-34.

84. Hill B J. Physico-chemical and serological characterization of five rhabdoviruses infecting fish. // J Gen Virol. – 1975. - №27. – Р. 369–378.

85. Hoffman B., Beer M., Schutze H. et al. Fish rhabdoviruses: molecular epidemiology and evolution // Curr. Top. Microbiol. Ummunol. – 2005. – Vol. 292 – P. 81-117.

86. Hostnik P., Barlic-Maganja D, Strancar M., Jencic V., Toplak I., Grom J.

Influence of storage temperature on infectious hematopoietic necrosis virus detection by cell culture isolation and RT-PCR methods. // Dis Aquat Organ. 2002. – Vol. 52(3).

– Р. 179-184.

87. Huang C., CHien M-S., Landolt M. and Winton J.R. Characterization of the infectious hematopoietic necrosis virus glycoprotein using neutralizing monoclonal antibodies. // Dis. Aquat. Org. – 1994. - №18. – Р. 29–35.

88. International Committe on Taxonomy of Viruses [electronic resource]. – URL:

http://www.ictvonline.org/virusTaxonomy.asp. – 13.11.2013.

89. Johansson T., Einer-Jensen K., Batts W., Ahrens P., Bjorkblom C., Kurath G., Bjorklund H. and Lorenzen N. Genetic and serological typing of European infectious haematopoietic necrosis virus (IHNV) isolates. // Dis. Aquat. Org. – 2009. - № 86. – Р.

213–221.

90. Jonstrup S.P., Kahns S., Skall H.F., Boutrup T.S., Olesen N.J. Development and validation of a novel Tagman-based real-time Rt-PCA assay suitable for demonstrating freedom from viral haemorrhagic septicaemia virus. // J. Fish Dis. - 2013. – Vol. 36(1).

– P. 9-23.

91. Jorgensen P.E.V., Olesen N.J., Lorenzen N., Winton J.R., Ristow S.S. (1991)

Infectious hematopoietic necrosis (IHN) and viral hemorrhagic septicemia (VHS):

detection of trout antibodies to the causative viruses by means of plaque neutralization, immunofluorescence, and enzyme-linked immunosorbent assay. // J. Aquat. Anim.

Health. – 1991. - №3. – Р. 100–108.

92. Joser Serra, F. Javier Gella and Juan Gener (1991) Latex agglutination procedures in immunodiagnosis. // Pure & Appl, Chem. – 1991. - Vol, 63, № 8 - P.

1131-1134.

93. Kasempimolporn S., Saengseeson W., Lumlertdacha B., Sitprija V. Detection of rabies virus antigen in dog saliva using a latex agglutination test. // J Clin Microbiol.

– 2000. - №38(8). – Р. 3098–3099.

94. Kawaguchi. H., Sakamoto K., Ohtsuka. Y., Ohtake. T., Sekiguchi. H., Iri H., Fundamental Study on Latex Reagents for Agglutination Tests. // Biomaterials. – 1989. - №10. – Р. 225-229.

95. Kelley G.O., Bendorf C.M., Yun S.C., Kurath G., Hedrick R.P. Genotypes and phylogeographical relationships of infectious hematopoietic necrosis virus in California, USA. // Dis Aquat Organ. - 2007. – Vol. 77(1). – Р. 29-40.

96. Kim W.S., Oh M.J., Nishizawa T., Park J.W., Kurath G., Yoshimizu M..

Genotyping of Korean isolates of infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) based on the glycoprotein gene. // Arch Virol. – 2007. – Vol. 152(11). – P. 2119-2124.

97. Knuesel R., Segner H., Wahli T. A survey of viral diseases in farmed and feral salmonids in Switzerland. // Journal of Fish Diseases. – 2003. – Vol. 26, Issue 3. – P.

167-182.

98. Knusel R., Bergmann S.M. Virus isolation vs RT-PCR: which method is more successful in detecting VHSV and IHNV in fish tissue sampled under field conditions?

// Journal of Fish Diseases. – 2007. – Vol. 30, Issue 9 – P. 559-568.

99. Kohler G., Milstein C. Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity. // J. Nature. – 1975. – Vol. 256. – P. 495–499.

100. Kolodziejek J., Schachner O., Drrwald R., Latif M., Nowotny N. "Mid-G" region sequences of the glycoprotein gene of Austrian infectious hematopoietic necrosis virus isolates form two lineages within European isolates and are distinct from American and Asian lineages. // J. Clin Microbiol. – 2008. – Vol. 46(1). – Р. 22Kurath G, Garver K.A., LaPatra S.E., Purcell M.K. Resistance and protective immunity in Redfish Lake sockeye salmon exposed to M type infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV). // J. Aquat Anim Health. – 2010. – Vol. 22(2). – Р.129-139.

102. Kurath G. Biotechnology and DNA vaccines for aquatic animals. // Rev. Sci.

Tech. Off. Int. Epiz. – 2008. - № 27. – Р. 175–196.

103. Kurath G., Garver K.A., Troyer R.M., Emmenegger E.J., Einer-Jensen K., Anderson E.D. Phylogeography of infectious haematopoietic necrosis virus in North America. // J. Gen Virol. - 2003. – Vol. 84(4). – Р.803-814.

104. Kurath, G. Distribution and variation of NV genes in fish rhabdoviruses / G. I.

Curath, K.H. Higman, H.V. Bjorklund // J. Gen. 1997. - Vol.78, № 1. - P.113-117.

105. Kyle A. Garver, William N. Batts, Gael Kurath. Virulens Comparisons of Infectious Hematopoietic Necrosis U and M Genogroups in Sockeye Salmon and Rainbow Trout. // J. of Aquatic Animal Health. – 2006. – Vol. 18, Issue 4. – P. 232Laemmli U. K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. // J. Nature. – 1970. – Vol. 227(5259). – P. 680-685.

107. LaPatra S.E., Batts W.N. Negligible risk associated with the movement of processed rainbow trout, Oncorhynchus mykiss (Walbaum), from an IHNV endemic area. // Journal of Fish Diseases. – 2001. – Vol. 24, Issue 7 – P. 399-408.

108. LaPatra S.E., Roberti K.A., Rohovec J.S. and Fryer J.L. (1989). Fluorescent antibody test for the rapid diagnosis infectious hematopoietic necrosis virus. // J.

Aquat. Anim. Health. – 1989. - №1. – Р. 29–36.

109. Leong, J., Y. L. Hsu, H. M. Engelking, and D. Mulcahy. Strains of infectious hematopoietic necrosis (IHN) virus may be identified by structural protein differences.

// Develop. Biol. Standard. – 1981. - № 49. – Р. 43-55.

110. Liu Z, Teng Y, Liu H, Jiang Y, Xie X, et al. (2008) Simultaneous detection of three fish rhabdoviruses using multiplex real-time quantitative RT-PCR assay. // J Virol Methods. – 2008. - №149. – Р. 103–109.

111. Lorenzen, E. Inter-laboratory comparison of cell lines for susceptibility to three viruses: VHSV, IHNV and IPNV / E. Lorenzen, B. Carstensen, N. J. Olesen // Dis.

Aquat Organ. 1999. - Vol. 37, № 2. - P.81-88.

112. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement with Folin phenol reagent // J. Biol. Chem. - 1951. - Vol. 193, №1. - P. 265-275.

113. McAllister P.E., Wagner R.R. Structural proteins of two salmonid rhabdoviruses. // Journal of virology. – 1975. - №15. – Р. 733–738.

114. McClure C., Saksida S, Karreman G., Constantine J., Robinson J., Traxler G., Hammell L. Evaluation of a reverse transcriptase polymerase chain reaction test and virus isolation on field samples collected for the diagnosis of infectious hematopoietic necrosis virus in cultured Atlantic salmon in British Columbia. // J. Aquat Anim Health. 2008. – Vol. 20(1). – Р. 12-18.

115. Mebatsion T, Weiland F, Conzelmann KK. Matrix protein of rabies virus is responsible for the assembly and budding of bullet-shaped particles and interacts with the transmembrane spike glycoprotein G. // J Virol. - 1999. - №73. – Р. 242–250.

116. MEGA5: Molecular evolutionary genetics analysis using maximum likelihood, evolutionary distance, and maximum parsimony methods / K. Tamura, D. Peterson, N.

Peterson [et al.] // Molecular Biology and Evolution. – 2011. – Vol. 28. – P. 2731Millard P.J., Bickerstaff L.E., Detection of IHNV and ISAV by molecular padlock amplification. // Journal of Fish Diseases. – 2006. – Vol. 29, Issue 4 – P. 201 – 213.

118. Molina-Bolivar J.A., Galisteo-Gonzalez F.. Latex Immunoagglutination Assays. // J. of Macromolecular Science Part C-Polymer Reviews. – 2005. - Vol. 45. – P. 59-98.

119. Molina-Bolivar J.A., Galisteo-Gonzalez F., Quesada-Perez M., HidalgoAlvarez R. Agglutination kinetics of F(ab')2 coated polymer colloids // Colloid Polym.

Sci. - 1998. - Vol. 276. - №12. - P. 1117-1124.

120. Morzunov S.P., Winton J.R., Nichol S.T. The complete genome structure and phylogenetic relationship of IHNV // Virus Res. – 1995. – V.38. – P. 175-192.

121. Mulcahy D., Pascho R.J. Titre distribution patterns of IHNV in ovarian fluids of hatchery and feral salmon populations. // Journal of Fish Diseases. – 1983. – Vol. 6. – P. 183-188.

122. Mulcahy D., Pascho R.J. Vertical transmission of infectious haematopoietic necrosis virus in sockeye salmon, Oncorhynchus nerka Walbaum: isolation of virus from dead eggs and fry // J. Fish Diseases. №8, 1985. – Р. 393-396.

123. Nishizawa T., Kinoshita S., Kim W.S., Higashi S., Yoshimizu M. Nucleotide diversity of Japanese isolates of infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) based on the glycoprotein gene. // Dis Aquat Organ. – 2006. – Vol. 71(3). – Р. 267-272.

124. Noga, Edward I. Fish Disease: diagnosis and treatment. Mosby. - 1995. – P.

211-213.

OIE. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Aquatic Animals. Vol.1 6th 125.

ed. Paris, 2014. P. 300-313.

126. OIE. Quality standard and guidelines for veterinary laboratories: infectous diseases. 2-nd ed. Paris, 2010.

127. Ortega-Vinuesa J.L., Bastos-Gonzalez D. A review of factors affecting the performances of latex agglutination tests // J. Biomater. Sci/ Polymer End. – 2001. – Vol. 12, №4. – Р. 379-408.

128. Overturf K., LaPatra S. and Powell M. Real-time PCR for the detection and quantitative analysis of IHNV in salmonids. // J. Fish Dis. – 2001. - №24. – Р. 325– 333.

129. Palmer A.D., Emmenegger E.J. Susceptibility of Koi and Yellow Perch to infectious hematopoietic necrosis virus by experimental exposure. // J. Aquat Anim Health. – 2014. – Vol. 26(2). – Р. 78-83.

130. Petrova E.E., Komaleva R.L. et al. Preparation and characterization of monoclonal antibodies to the Cholera toxin. // Russ. J. Bioorgan Chemistry. – 2009. – Vol. 35. – Р. 357-367.

131. Peula J. M., Hidalgo-Alvarez R., Nieves F. J. Covalent Binding of Proteins to Acetal-Functionalized Latexes. I. Physics and Chemical Adsorption and Electrokinetic Characterization. // J. of Colloid and interface science. – 1998. – Vol. 201. – Р. 132– 138.

132. Philip E., McAllister. Fish Viruses and Viral Infections. // J. Comprehensine Virology. – 1979. - Chapter 7, Vol. 14. - P. 401 – 544.

133. Popova A.G., Oreshkova S.F., Zhchelkunov I.S., Rudakova S.L., Zhchelkunova T.I., Tikunova N.V., Blinova N.N., Ilichev A.A. RT-PCR-based methods for identification and typing of infectious hemopoietic necrosis virus in salmons. // Vopr Virusol. – 2008. - №53(3). – Р. 39-43.

134. Purcell M.K., Garver K.A., Conway C., Elliott D.G., Kurath G. Infectious haematopoietic necrosis virus genogroup-specific virulence mechanisms in sockeye salmon, Oncorhynchus nerka (Walbaum), from Redfish Lake, Idaho. // J. Fish Dis. Vol. 32(7). – Р. 619-631.

135. Purcell M.K., Hart S.A., Kurath G., Winton J.R. (2006). Strand-specific, realtime TR-PCA assay for quantification of genomic and positive-sense RNAs of the fish Rhabdovirus, infectios hematopoietic necrosis virus. // J. Virol.Methjds. – 2006. Р. 18–24.

136. Purcell M.K., Thompson R.L., Garver K.A., Hawley L.M., Batts W.N., Sprague L., Sampson C., Winton J.R. Universal reverse-transcriptase real-time PCR for infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV). // Dis Aquat Organ. – 2013. - Vol.

106(2). – Р. 103-115.

137. Purcell M.K., Marjara I.S., Batts W., Kurath G., Hansen J.D. Transcriptome analysis of rainbow trout infected with high and low virulence strains of infectious hematopoietic necrosis virus. // Fish Shellfish Immunol. - 2011. – Vol. 30(1). – Р. 84Quality control of latex diagnosticum. / Aseeva W.G., Paducov L.N. // "Abstracts of 6th International Congress of Rapid Methods and Automation in Microbiology and Immunology." - Finland. – 1990. - P.77.

139. Real-time PCR: Current technology and applications / Eds J. Logan, K. Edwards and N. Saunders, London, Caister Academic Press. - 2009. - 284 p.

140. Ristow S.S. and Arnzen de Avila J.M. Monoclonal antibodies to the glycoprotein and nucleoprotein of infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) reveal differences among isolates of the virus by fluorescence, neutralization and electrophoresis. // Dis. Aquat. Org. – 1991. - № 11. – Р. 105–115.

141. Rudakova S.L. Analysis of epizootic development of infectious hematopoietic necrosis among fry of sockeye salmon Oncorhynchus nerka (Walbaum) reared at the hatchery (Kamchatka). // J Probl Fish. - 2004. – №5. - Р. 362–374.

142. Rudakova S.L., Kurath G, Bochkova E.V. Occurrence and genetic typing of infectious hematopoietic necrosis virus in Kamchatka, Russia. // Dis Aquat Org. – 2007. - № 75. – Р. 1–11.

143. Saksida S.M. Infectious haematopoietic necrosis epidemic (2001 to 2003) in farmed Atlantic salmon Salmo salar in British Columbia. // Dis Aquat Organ. – 2006. Р. 213-223.

144. Sambrook, J. Molecular Cloning: A Laboratory Manual. – 2nd ed. / J. Sambrook, E.F. Fritsch, T. Maniatis. – N. Y.: Cold Spring Harbor, 1989.

145. Sanger, F. DNA sequencing with chain-terminating inhibitirs / F. Sanger, S.

Nicklen, A.R. Coulson // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. – 1977. – Vol. 74. – P. 5463Santos R.M., Forcada J. Acetal-functionalized polymer particles useful for immunoassays. III: Preparation of latex-protein complexes and their applications. // Journal of Materials Science: Materials in Medicin. – 2001. – Vol. 12. - Р. 173-180.

147. Sarobe J., Molina-Bolivar J.A., Forcada J., Galisteo F., Hidalgo-Alvarez R.

Functionalized Monodisperse Particles with Chloromethyl Groups for the Covalent Coupling of Proteins. // J. Macromolecules. – 1998. – Vol. 31, - P. 4282-4287.

148. Schramm L. Dictionary of Nanotechnology, Colloid and Interface Science. – Wiley, 2008. – Р. 298.

149. Shchelkunov I.S., Shchelkunova T.I., Kupinskaya O.A. et al. Infectios haemotopoietic necrosis (IHN): the first confirmed finding in Russia. 10th Intern.

Conference of the EAFP. Diseases of fish and shellfish. Book of abstracts. Dublin. P.44.

150. Spitznagel, T.M., D.S. Clark, "Surface-Density and Orientation Effects on Immobilized Antibodies and Antibody Fragments". // BioTechnology. – 1993. Р. 825-829.

151. Storch G.A., Reed C.A., Dalu Z.A. Evaluation of a latex agglutination test for herpes simplex virus. // J. Clin Microbiol. – 1988. - № 26(4). – Р. 787-788.

152. Suebsing R., Jeon C.H., Oh M.J., Kim J.H. Reverse transcriptase loop-mediated isothermal amplification assay for infectious hematopoietic necrosis virus in Oncorhynchus keta. // Dis Aquat Organ. - 2011. – Vol. 94(1). – Р. 1-8.

153. Sweeney A, Blake S, Singer J T, Nicholson B L. Detection and identification of infectious pancreatic necrosis virus (IPNV) and infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) by polymerase chain reaction (PCR) In: Inui Y, Winton J, editors. New approaches to viral disease of aquatic animals. Nansei, Japan: National Research Institute of Aquaculture. - 1997. - Р. 42–47.

154. Thoulouze MI, Bouguyon E, Carpentier C, Bremont M. Essential role of the NV protein of Novirhabdovirus for pathogenicity in rainbow trout. // J Virol. – 2004. Р. 4098–4107.



Pages:     | 1 |   ...   | 2 | 3 || 5 |

Похожие работы:

«Доронин Максим Игоревич ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ ВЫЯВЛЕНИЯ ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО НЕКРОЗА ГЕМОПОЭТИЧЕСКОЙ ТКАНИ ЛОСОСЕВЫХ РЫБ 03.02.02 «Вирусология» Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, Мудрак Наталья Станиславовна Владимир 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ 1 ВВЕДЕНИЕ 2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 2.1 Характеристика возбудителя инфекционного...»

«СЕТДЕКОВ РИНАТ АБДУЛХАКОВИЧ РАЗРАБОТКА НОВЫХ СРЕДСТВ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЭШЕРИХИОЗОВ ТЕЛЯТ И ПОРОСЯТ 06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология Диссертация на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук Научный консультант: доктор ветеринарных наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ и РТ Юсупов...»

«Цвиркун Ольга Валентиновна ЭПИДЕМИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС КОРИ В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКИ. 14.02.02 – эпидемиология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: заслуженный деятель науки РФ, лауреат Государственной премии СССР профессор, доктор медицинских наук Ющенко Галина Васильевна Москва – 20 Содержание...»

«ШУБНИКОВА ЕЛЕНА ВЛАДИМИРОВНА ВЛИЯНИЕ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ И ФОРМ АДАПТИВНОЙ ИЗМЕНЧИВОСТИ НА ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ПАТОГЕННЫХ БУРКХОЛЬДЕРИЙ К ХИМИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИМ ПРЕПАРАТАМ 03.02.03 –...»

«Брит Владислав Иванович «Эффективность методов вакцинации против ньюкаслской болезни в промышленном птицеводстве» Специальность: 06.02.02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидат ветеринарных наук Научный руководитель:...»

«Баранов Михаил Евгеньевич Экологический эффект биогенных наночастиц ферригидрита при ремедиации нефтезагрязненных почвенных субстратов Специальность (03.02.08) – Экология (биология) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат...»

«Мухаммед Тауфик Ахмед Каид ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕНОТИПОВ С ХОРОШИМ КАЧЕСТВОМ КЛЕЙКОВИНЫ, ОТОБРАННЫХ ИЗ ГИБРИДНЫХ ПОПУЛЯЦИЙ АЛЛОЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ ЯРОВОЙ ПШЕНИЦЫ МЯГКОЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ДНК-МАРКЕРОВ Специальность 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Научный...»

«ПИМЕНОВА ЕКАТЕРИНА ВЛАДИМИРОВНА РАЗРАБОТКА МЕТОДА ОЦЕНКИ ЦИТОТОКСИЧНОСТИ АНТИГЕНОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ МЕЛИОИДОЗА IN VITRO НА МОДЕЛИ ПЕРЕВИВАЕМЫХ КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУР 03.02.03 – микробиология Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор...»

«БОЛОТОВ ВЛАДИМИР ПЕТРОВИЧ ОЦЕНКА СОДЕРЖАНИЯ И МИГРАЦИЯ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ В ЭКОСИСТЕМАХ ВОЛГОГРАДСКОГО ВОДОХРАНИЛИЩА Специальность: 03.02.08. Экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук,...»

«Абдуллоев Хушбахт Сатторович ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ВИРУСА ИНФЕКЦИОННОГО БРОНХИТА КУР ГЕНОТИПА QX 06.02.02 «ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология» Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Макаров Владимир Владимирович...»

«ХАПУГИН Анатолий Александрович РОД ROSA L. В БАССЕЙНЕ РЕКИ МОКША 03.02.01 – ботаника Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель Силаева Татьяна Борисовна д.б.н., профессор САРАНСК ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ Глава 1. ИСТОРИЯ ИЗУЧЕНИЯ РОДА ROSA L. В БАССЕЙНЕ МОКШИ. Глава 2. КРАТКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РОДА ROSA L. 2.1. Характеристика рода Rosa L. 2.2. Систематика рода Rosa L. Глава 3....»

«Ульянова Онега Владимировна МЕТОДОЛОГИЯ ПОВЫШЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ВАКЦИН НА МОДЕЛИ ВАКЦИННЫХ ШТАММОВ BRUCELLA ABORTUS 19 BA, FRANCISELLA TULARENSIS 15 НИИЭГ, YERSINIA PESTIS EV НИИЭГ 03.02.03 – микробиология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант:...»

«Мансуров Рашид Шамилович Применение препарата Солунат при выращивании бройлеров 06.02.08. – кормопроизводство, кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор, Заслуженный деятель науки Российской...»

«ДОРОНИН Игорь Владимирович Cистематика, филогения и распространение скальных ящериц надвидовых комплексов Darevskia (praticola), Darevskia (caucasica) и Darevskia (saxicola) 03.02.04 – зоология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, заслуженный эколог РФ Б.С. Туниев Санкт-Петербург Оглавление Стр....»

«УШАКОВА ЯНА ВЛАДИМИРОВНА ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИЙ ДНК-МАРКИРОВАНИЯ В СЕЛЕКЦИОННО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ ЯБЛОНИ Специальность 06.01.05. – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат биологических...»

«Моторыкина Татьяна Николаевна ЛАПЧАТКИ (РОД POTENTILLA L., ROSACEAE) ФЛОРЫ ПРИАМУРЬЯ И ПРИМОРЬЯ 03.02.01 – Ботаника Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, старший научный сотрудник Н.С. Пробатова Хабаровск Содержание Введение... Глава 1. Природные...»

«Палаткин Илья Владимирович Подготовка студентов вуза к здоровьесберегающей деятельности 13.00.01 общая педагогика, история педагогики и образования Диссертация на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Научные руководители: доктор биологических наук, профессор,...»

«Храмцов Павел Викторович ИММУНОДИАГНОСТИЧЕСКАЯ СИСТЕМА ДЛЯ ОЦЕНКИ НАПРЯЖЕННОСТИ ПОСТВАКЦИНАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА К КОКЛЮШУ, ДИФТЕРИИ И СТОЛБНЯКУ 14.03.09 – Клиническая иммунология, аллергология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, Раев Михаил Борисович...»

«Ульянова Онега Владимировна МЕТОДОЛОГИЯ ПОВЫШЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ВАКЦИН НА МОДЕЛИ ВАКЦИННЫХ ШТАММОВ BRUCELLA ABORTUS 19 BA, FRANCISELLA TULARENSIS 15 НИИЭГ, YERSINIA PESTIS EV НИИЭГ 03.02.03 – микробиология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант:...»

«Сухарьков Андрей Юрьевич РАЗРАБОТКА МЕТОДОВ ОЦЕНКИ ОРАЛЬНОЙ АНТИРАБИЧЕСКОЙ ВАКЦИНАЦИИ ЖИВОТНЫХ 03.02.02 «Вирусология» Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат ветеринарных наук, Метлин Артем Евгеньевич Владимир 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ 1 ВВЕДЕНИЕ 2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 2.1 Характеристика возбудителя бешенства 2.2 Эпизоотологические...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.