WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:     | 1 || 3 | 4 |

««Эффективность методов вакцинации против ньюкаслской болезни в промышленном птицеводстве» ...»

-- [ Страница 2 ] --

Самым надежным, простым в исполнении и воспроизводимым тестом является РТГА(РЗГА) - реакция торможения (задержки) гемагглютинации [121, 119, 141, 231, 203, 79]. Основой метода является способность вирусов агглютинировать эритроциты. Для стандартизации реакции можно применять фиксированные эритроциты. Титры антител, определяемые в РТГА, коррелируют с устойчивостью птицы к заболеванию и гибелью при контрольном заражении вирулентными штаммами вируса, что позволяет четко интерпретировать иммунный ответ привитого поголовья [122, 95, 191, 230, 232].

ИФА широко используется для ретроспективной диагностики вирусных болезней. Доказана корреляция между значениями титров антител в ИФА и РТГА и защитой от заражения вирулентными вирусами НБ [215, 135, 247, 249, 227, 139]. Поскольку степень защиты зависит от множества переменных величин: вакцинный штамм, степень вирулентности циркулирующего полевого штамма, тип и возраст птицы, способ и сроки применения препарата, температура в помещении и качество кормов [115, 133, 178], следует получать подтверждение в виде наличия положительных защитных титров антител [8]. Так, для НБ, полученный в ИФА титр 1:4000, обеспечивающий сохранность поголовья в одном птицехозяйстве, в условиях другого, даже находящегося по соседству, может быть недостаточным для защиты птиц от полевых вирусов Многие производители [209].

предпочитают подстраховываться, сопоставляя значения титров антител с уровнем защиты [8, 79].

Критическим аспектом любого серологического исследования является количество отбираемых образцов [18]. Если серологические исследования проводят для постановки диагноза, необходимо учитывать распространенность болезни в стаде (процентное отношение птиц, которые могут заразиться). Количество образцов, отбираемых для исследований, определяется чувствительностью метода - статистической мерой процента инфицированных животных, выявленных данным тестом. Специфичность теста — статистическая мера процента неинфицированных животных, выявленных данным методом [10]. В промышленном птицеводстве принято отбирать 15-20 образцов крови для постановки точного диагноза.

Увеличение титров к вирусу НБ в сыворотке крови птицы до 11,0-12,0 log2 наблюдается в случае циркуляции вирулентного вируса в стаде [77]. Для серологических исследований возможно применение РН (реакция нейтрализации)и РДП (реакция диффузной преципитации) [106].

Для детекции вируса НБ используется современный RT-LAMP метод, который позволяет провести исследования в короткое время и результаты их продемонстрировать наглядно [30]. Обратно-транскриптазная ПНР является чувствительным и специфичным способом обнаружения и дифференциации вируса НБ в патологическом материале [235, 221, 28].

2.3 Заключение по обзору литературы Сегодня в РФ успешно развивается птицеводческая отрасль, в состав которой входят крупные промышленные предприятия (86% от всего птицепоголовья), а также фермерские и лично-подсобные хозяйства, их поголовье увеличивается с каждым годом. Для последних необходимо разрабатывать специальные ветеринарно-профилактические мероприятия и препараты.

В птицеводстве существует реальная угроза заболевания ньюкаслской болезнью, что заставляет промышленные предприятия РФ вакцинировать все птицепоголовье против этой инфекции.

Динамический прогноз эпизоотической ситуации по НБ в нашей стране и мире на 2010 г. предусматривает превышение тренда инцидентности вспышек этого заболевания [99, 100]. К зонам повышенного риска распространения НБ относятся: Центральный, Южный, Приволжский федеральные округа и отдельные территории Уральского, Сибирского и Дальневосточного федеральных округов Российской Федерации. Наличие малых хозяйств в непосредственной близости от крупных птицеводческих предприятий усугубляет ситуацию, так как в них могут прикармливаться синантропные птицы. Домашняя птица, контактируя с дикой, способствует таким образом переносу возбудителя НБ.

Для фермерских и лично-подсобных хозяйств необходимо иметь вакцины против НБ в мелкой дозировке и удобные в применении.

Наиболее эффективным средством борьбы с этим заболеванием является специфическая вакцинопрофилактика. Следует отметить, что нет таких условий, когда вакцинацию можно будет считать альтернативой хорошей практике управления и гигиены при выращивании домашней птицы.

У нас в стране и за рубежом специфическая профилактика НБ осуществляется как живыми, так и инактивированными вакцинами [27].

Живые – из штаммов Н, Комаров, Роакин, В1, Ф, ФР, Ла-Сота, Бор-74, Банковский, Муктесвар, Миннесота, Бургас, Нью-Джерси, Нью-Йорк, КД и других инактивированные гидроокисьалюминиевая, масляноэмульсионная, эмбрионформолвакцина, кристаллвиолетэмбрионвакцина, бета-пропиолактоновая вакцина.

Штаммы “B1” [71] и “LaSota” [60] ВНБ наиболее широко используются как эффективные эмбриональные вирусные вакцины для профилактики ньюкаслской болезни во всем мире. Эти вакцины индуцируют образование в крови цыплят антител IgA, IgY и IgM с высокими титрами.

Они также после окулярного введения индуцируют образование местного иммунного ответа – выработку IgA в Гардлеровой железе наряду со слезными IgM [126].

Живые вирусвакцины применяют для вакцинации птиц per os с питьевой водой, путём грубо – и мелкодисперсного аэрозолей или же интраназально и окулярно. Мезогенные вакцины применяют внутримышечно. Отмечено, что менее аттенуированные штаммы (мезогенные) обладают большей иммуногенностью, однако чаще вызывают поствакцинальные осложнения [74, 121].

В некоторых странах приняты законы, касающиеся применения и контроля качества вакцин, которые сильно варьируют в зависимости от энзоотического статуса или угрозы НБ. Некоторые страны, такие как Дания, запрещают использование любых вакцин, тогда как другие, например Голландия, применяют вакцины на всём поголовье. В настоящее время имеется несколько схем вакцинации против НБ. Как правило, одна вакцинация цыплят в двухнедельном возрасте не обеспечивает адекватную защиту птицы [90], поэтому, чтобы стимулировать более высокий и длительный уровень иммунитета, проводят ревакцинацию. Для введения живых вакцин, таких как Ла-Сота, широко применяются B1, интраокулярный, интраназальный, пероральный, а также аэрозольный методы вакцинации. Эти вакцины индуцируют гуморальный и клеточный иммунитет [135].

Ретроспективный анализ за последние 25 лет показал рост числа вакцинаций птицы, количество прививок выросло почти в 4 раза. В настоящее время схемы вакцинопрофилактики включают от 7 до 15 иммунизации цыплят яичных пород, 7-8 вакцинаций цыплят-бройлеров; 9-10 раз прививают поголовье индюков-бройлеров. Племенную птицу прививают до 23 раз против вирусных, бактериальных и паразитарных инфекций.

Неуклонно увеличивается набор антигенов. В 80-х годах XX века кур вакцинировали против болезни Марека и ньюкаслской болезни. В настоящее время схемы иммунизации предусматривают применение от 7 до 9 вакцин, в том числе против болезни Марека ньюкаслской болезни (БМ), (НБ), инфекционного бронхита кур (ИБК), инфекционной бурсальной болезни (ИББ), инфекционного ларинготрахеита (ИЛТ), инфекционного энцефаломиелита (ИЭМ), синдрома снижения яйценоскости (ССЯ) и других. Все программы иммунизации начинаются в инкубаториях с одной, чаще двух вакцинаций.

Интервал между последующими прививками составляет 7-10 дней, а в отдельные периоды сокращается до 2-5 суток. При этом на молодняк первых двух месяцев жизни приходится, более 90% всей антигенной нагрузки.

Исследование суточных цыплят показало, что при выводе 81-83% около 19% цыплят имеют отклонения живой массы выше или ниже показателей стандарта породы. При нарушениях режимов инкубации процент вывода снижается, а неоднородность цыплят по живой массе увеличивается до 25% и более. При вскрытии выбракованных цыплят наблюдаются признаки эмбрионального недоразвития, в том числе омфалиты и объемные нерассосавшиеся желточные мешки в грудобрюшной полости. Сравнение динамики гибели птицы разных партий показало, что ежедневная смертность птицы неблагополучной партии, полученной при низком выводе, превысила показатели благополучной партии в 2,7-3,5 раза, а при вспышке колибактериоза

- в 10-16 раз.

В процессе хранения, транспортировки, приготовления рабочих растворов имеет место снижение биологической активности вакцин. Степень снижения активности зависит от типа возбудителя, состава и физического состояния вируссодержащего материала, методов и технических средств применения, температуры и относительной влажности, времени нахождения в растворе до использования, состава защитных суспендирующих сред, концентрации газов в помещении.

В источниках литературы недостаточно отражены вопросы изучения чувствительности новых пород, кроссов и линий птиц, ориентированных на максимальную продуктивность, к живым вакцинным вирусам, эффективности стандартных схем применения вакцин и клиническим проявлениям болезни.

В связи с изложенным изучение указанных вопросов представляет определённый практический и теоретический интерес.

3 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

–  –  –

3.1.1. Вакцины Вакцина против ньюкаслской болезни из штамма «Ла-Сота» сухая ( организация производитель: ОАО «Покровский завод биопрепаратов» ), с содержанием во флаконе 3000 назальных доз, серия №11, контроль №11, изготовлена 06.2011, годна до 06.2012.

Вакцина против ньюкаслской болезни из штамма «Ла-Сота» сухая ( организация производитель: ОАО «Покровский завод биопрепаратов» ), с содержанием во флаконе 3000 назальных доз, серия №33, контроль №33, изготовлена 04.2013, годна до 04.2014.

Вакцина из штамма Ла-Сота, изготовленная во ВНИИВВиМ, серия № 8-13 изготовлена 10.2013г с биологической активностью 9,0 lg ЭИД50/см3.

3.1.2 Вирус Для контрольного заражения вакцинированных кур использовали эпизоотический вирус ньюкаслской болезни штамм Т-53, полученный из музея штаммов ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии с биологической активностью 8,5 lg ЭЛД 50/см3 3.1.3 Птицы Использовали цыплят – бройлеров кросса КОББ 500, различных возрастов, с одинаковыми возрастами родительского стада на момент снесения яйца, с одинаковыми условиями кормления и содержания, из благополучного по НБ хозяйства.

По сравнению с другими кроссами цыплят бройлеров, кросс КОББ 500 выделяется более высокой продуктивностью роста и меньшим сроком откорма. Кросс КОББ 500 имеет одну из самых низких конверсий корма ( затрат комбикорма на килограмм живого веса ), отличную скорость роста и способность прекрасно развиваться на более дешевых кормах. В 35 дней средний вес цыпленка должен составлять 1,9 кг., в 42 дня – 2,4 кг. Сочетание этих свойств дает кроссу КОББ 500 конкурентное преимущество за счет низких затрат на производство одного килограмма живой массы.

Основным отличием бройлеров КОББ 500 являются белые перья и генетически заложенный желтый цвет кожи, поэтому не требуется использование каких-либо специальных пигментов в кормах, как часто происходит с другими кроссами. Также этот кросс характеризуется отличной однородностью, т.е. птица соответствует всем потребительским критериям и большим выходом яиц (до 180 яиц за 65 недель).

3.1.4 Куриные эмбрионы Куриные эмбрионы в возрасте 9 дней, полученные от кур несушек, не имеющих антител к вирусу ньюкаслской болезни.

–  –  –

В работе использовали сыворотки крови от непривитых и привитых против ньюкаслской болезни кур.

3.1.6 Растворы и реактивы

- в качестве растворителя вакцины против НБ применяли питьевую воду, чистую, свободную от ионов железа и хлора, охлажденную до комнатной температуры.

-физиологический раствор рН 7,2-7,4;

-дистиллированная вода;

-3%-ный раствор перекиси водорода;

-5%-ный раствор йода;

-1%-ная суспензия куриных эритроцитов;

- спирт-ректификат;

- парафин;

- спирт-эфир;

- пенициллин;

- стрептомицин;

- глицерин чда;

- флюоресцеин натрия (уранин).

3.1.7 Приборы и инструменты

- пробирки Уленгута;

- штатив для пробирок;

- иглы инъекционные;

- предметные стёкла;

- восковые карандаши;

- пробойник;

- шприцы ёмкостью 1 см3;

- доски плексиглазовые с лунками;

- шприцы- автоматы ёмкостью 0,25; 0,50 см3 ;

- холодильник бытовой Бирюса;

- термостат электрический с водяной рубашкой (Россия);

- пипетки глазные;

- генератор аэрозолей САГ -2М;

- для крупнокапельной спрей - вакцинации цыплят-бройлеров применяли спреер «GLORIA» с ручным приводом Prima 5 Тур 42Е (Германия), создающем монодисперсные частицы диаметром 100 – 200 мкм.

3.1.8 Стабилизаторы

- сухое обезжиренное молоко;

- глицерин.

–  –  –

3.2.1 Титрование вакцины Титрование вакцины проводили на 9 – 10 суточных куриных эмбрионах Для этого содержимое трёх ампул вакцины [93].

ресуспендировали физиологическим раствором до первоначального объёма, полученные суспензии объединяли, тщательно перемешивали и использовали для приготовления десятикратных разведений на ЗФР.

Материалы используемых в работе разведений вакцины инокулировали в аллантоисную полость куриных эмбрионов в количестве по 0,1 см3. При заражении эмбрион фиксировали вертикально тупым концом вверх, дезинфицировали поверхность скорлупы 70%-ным раствором этанола и 2%ным раствором йода на 96%-ном этаноле. В скорлупе над воздушной камерой делали отверстие для выхода части воздуха. Отверстие для заражения делали на участке бессосудистой зоны хориоаллантоисной оболочки (ХАО). Иглу вводили на глубину не более 2 – 3 мм. Отверстия закрывали расплавленным парафином. Заражённые эмбрионы инкубировали при 370С и влажностью 60 – 70% с ежедневным овоскопированием в течение 5 суток. Гибель эмбрионов в первые 24 часа после заражения считали неспецифической. В дальнейшем погибшие эмбрионы отбирали и сохраняли в холодильнике при 4 – 60 C. Через 5 суток все оставшиеся эмбрионы охлаждали в течение 12 – 24 часов при 4 – 60 C. В дальнейшем проводили вскрытие эмбрионов, отбирали аллантоисную жидкость и определяли гемагглютинирующую активность аллантоисной жидкости в РГА с 1 – 2% суспензией эритроцитов петуха.

Активность вируса рассчитывали по методу Рида и Менча [148].

3.2.2 Постановка реакции агглютинации эритроцитов Реакцию агглютинации проводили макро и микро методами в пластиковых планшетах с круглодонными или коническими лунками или на предметных стёклах. При работе макро методом в один ряд лунок вносили по 0,5 см3 физраствора. Затем в первую лунку вносили 0,5 см3 вируссодержащего материала и готовили двукратные разведения с обязательной сменой пипеток. Из последней лунки после пипетирования удаляли 0,5 см3содержимого. После этого к полученным разведениям вируса добавляли по 0,5 см3 1% - ной суспензии эритроцитов. Затем планшетку встряхивали круговыми движениями для смешивания компонентов и оставляли при комнатной температуре на 20 – 45 мин. Гемагглютинацию учитывали по форме и величине осадка эритроцитов. При образовании осадка в виде «зонтика» реакцию оценивали положительно, а в виде пуговки отрицательно. Титром гемагглютинирующей активности считали наибольшее разведение вируса, дающее чётко выраженную агглютинацию эритроцитов в виде «зонтика». При постановке РГА обязательно ставили контроль на наличие неспецифической агглютинации эритроцитов. Для этого к 0,5 см3 физиологического раствора добавляли 0,5 см3 1% - ной суспензии эритроцитов. Если эритроциты не обладают спонтанной агглютинацией, на дно лунки выпадает осадок эритроцитов в виде «пуговки» (отрицательная реакция). По оседанию эритроцитов в контроле определяют время учёта реакции.

При постановке РГА на предметных стеклах их делили восковым карандашом на четыре части, на каждую часть стекла наносили каплю испытуемой вируссодержащей жидкости и каплю 2%-ных эритроцитов.

Круговым покачиванием стёкол содержимое капель перемешивали и оставляли стёкла при комнатной температуре. Реакцию учитывали через 10минут. При положительной РГА эритроциты при круговом покачивании стекла располагались по капле в виде россыпи мелкого песочка, а при отрицательной- в виде косички.

Постановка РГА микро методом отличается от таковой при макро методе количеством компонентов, а именно -вместо 0,5 см3 в реакцию берут по 0,025 см3 и используют 96-луночные планшеты. Учет реакции проводят при вертикальном наклоне планшетки примерно на 45-500. При отсутствии агглютинации на дне лунки образуется пуговка, которая при наклоне планшета принимает форму слезинки.

Постановка реакции задержки гемагглютинации 3.2.3эритроцитов

Реакцию задержки (торможения) гемагглютинации (РТГА, РЗГА) ставили в микромодификации по J.L.Sever с 1% суспензией куриных эритроцитов в планшетах для микротитрования с U и V-образными лунками [30, 59]. РТГА выполняли с 4 ГАЕ антигена. Контакт антигенов и антител осуществляли при комнатной температуре в течение 1 часа.

В каждую лунку полистиролового 96-тилуночного планшета с Vобразной формой дна добавляли по 0.025 мкл ЗФР. В лунки первой линии добавляли по 0.025 мкл исследуемых образцов сыворотки крови и проводили их двукратное разведение по схеме: 2-n, n=2, 3, …, 8. Лунки последней линии использовали для контроля гемагглютинационных свойств используемого антигена вируса ньюкаслской болезни. Затем в каждую лунку вносили по 0.025 мкл, содержащего 4 гемагглютинирующие единицы, вирусного антигена и инкубировали 30 мин при комнатной температуре, после чего в каждую лунку добавляли по 0.025 мкл 1 %-ой взвеси эритроцитов и после легкого встряхивания оставляли на контакт в течение 40 минут при комнатной температуре. Титр сыворотки определяли по наивысшему разведению, в котором наблюдалось торможение гемагглютинации. Торможение гемагглютинации выражалось образованием на дне лунки пуговки, которая при наклоне планшеты принимала форму слезинки. Сыворотку крови считали положительной в РТГА, если её титр был не менее чем 1:8.

3.2.4 Определение напряженности иммунитета

Напряженность иммунитета оценивали по уровню специфических антител в сыворотках крови вакцинированной птицы и по результатам их контрольного заражения. В возрасте 1, 3, 7, 11 и 13 дней перед вакцинацией от 20-25 цыплят каждого опытного корпуса отбирали кровь для исследования на наличие специфических антител к вирусу болезни Ньюкасла. После вакцинации отбор крови для определения специфических поствакцинальных антител отбирали в возрасте 20, 28 и 38 дней, т.е. через 7,14 и 24 дня после прививки. Перед определением сыворотки были освобождены от ингибиторов и изогемагглютининов [59].

Вакцинацию считали успешной, если в 80 и более процентах проб сывороток крови вакцинированной птицы титр антигемагглютининов в РТГА был 1:8 и выше.

Уровень защиты определяли по выживаемости птицы (в процентах) при контрольном заражении вирусом вирулентного штамма «Т-53» в дозе путем внутримышечных инъекций в бедро с последующим 5,0 lgЛД50 /гол.

наблюдением за зараженной птицей в течение 10 дней. При постановке опытов по определению иммунологической эффективности вакцины птицу контрольной и опытной групп содержали вместе.

3.2.5 Оральная вакцинация Для проведения вакцинации использовали живую вирусвакцину против НБ из штамма Ла-Сота производства Покровского завода биопрепаратов с биологической активностью 8,5 lgЭИД50/см3.Цыплят вакцинировали орально с питьевой водой в возрасте 12-14 дней. Процесс оральной вакцинации через ниппельные поилки показан на рисунке 1.

Рисунок 1-Оральная вакцинация через систему ниппельного поения птиц До начала вакцинации определяли количество воды, выпиваемой одной птицей за 1-1,5 часа, и рассчитывали ее объем на все прививаемое поголовье. Имеющиеся ниппельные поилки промывали проточной водопроводной водой, без добавления дезинфицирующих средств.

Обеспечивали свободный доступ всего иммунизируемого поголовья к системам поения с вакцинным раствором. Фронт поения определялся возрастом птицы и технологией выращивания. Перед вакцинацией птицу выдерживали без воды в течение 2-3 часов, в зависимости от климатических условий.

Вакцину разводили в чистой, свободной от ионов железа и хлора, охлажденной до комнатной температуры питьевой воде, с добавлением 5% сухого обезжиренного молока, с таким расчетом, чтобы 10 интраназальных доз вакцины, содержалось в объеме воды, выпиваемой одной птицей за 1-1,5 часа. Рабочим раствором вакцины заполняли систему водообеспечения и следили за равномерным и полным ее потреблением.

В процессе проведения оральной вакцинации выпойкой в одном цехе задействованы ветсанитар и птичница в течение 2,5 часов. Трудоемкость составляет 5 чел.час., расходы на оплату труда 480 руб., расходы на приобретение вакцины 6 000 руб.

Подачу воды разрешали через 2 часа после проведения иммунизации.

Реакцию цыплят на оральную вакцинацию оценивали по проявлению поствакцинальных реакций и осложнений, по сохранности поголовья и привесам. Иммунологическую эффективность вакцинации оценивали по уровню поствакцинальных антител.

Экономические показатели расчитывали по затратам на проведение прививки.

Расход рабочего разведения составлял при оральном применении 10 см3/гол.

3.2.6 Окулярная вакцинация

–  –  –

В процессе проведения окулярной вакцинации в одном цехе задействованы четыре ветсанитара, птичница, слесарь в течение 5 часов.

Трудоемкость составляет 30 чел.час., расходы на оплату труда 1920 руб., расходы на приобретение вакцины 600 руб.. Процесс вакцинации показан на рисунке 2. Возраст вакцинируемых цыплят 14 дней.

–  –  –

Реакцию цыплят на вакцинацию оценивали по клиническим признакам заболевания, падежу, привесам. Иммунологическую эффективность вакцины оценивали по уровню поствакцинальных антител.

Экономические показатели расчитывали по затратам на проведение прививки.

Во флакон с вакциной добавляли стерильный изотонический ( 0,9%) раствор хлорида натрия, доводили до исходного объема и далее вакцину разбавляли из расчета 0,1 см3 на одну дозу препарата. Подготовленную вакцину закапывали глазной пипеткой в носовую щель каждого цыпленка в объеме 0,1 см3 (2 капли), другую носовую щель при этом закрывали пальцем, чем достигалось более глубокое проникновение препарата в носовую полость. В случаях закупорки носовой щели, вакцину в том же объеме наносили на конъюнктиву глаза.

3.2.7 Вакцинация спрей методом (крупнокапельным распылением) Для иммунизации бройлеров спрей методом использовали сухую живую вирусвакцину из штамма Ла-Сота, изготовленную на Покровском с биологической активностью 8,5 lg ЭИД 50/см3.

заводе биопрепаратов Расход вакцины при применении методом спрей составил 1 назальную дозу на голову. Вакцину растворяли в чистой охлажденной до комнатной температуры воде, свободной от ионов железа и хлора, из расчета 1000 назальных доз на один литр воды. Показателем правильно проведенной вакцинации являлось равномерное увлажнение оперения птиц. Перед проведением вакцинации включали свет для повышения подвижности птицы, проходили по центру помещения для образования коридора без птиц, затем уменьшали освещение до минимума, что позволяло в определённой степени сгруппировать птиц. Отключали обогрев и вентиляцию. Распыление вакцины проводили из расчёта 0,5 л/1000 кур с высоты 40 см над головами птиц спреером марки «Глория» при давлении 2 атм., создающим монодисперсные частицы размером 100 – 200 мкм. Для исключения погрешностей в иммунизации предварительно определялась производительность используемого распылителя путем разбрызгивания расчетного количества чистой воды без вакцины. Процесс распыления вакцины показан на рисунке 3.

Рисунок 3-Вакцинация крупнокапельным распылением (спрей метод) Во время вакцинации все вентиляционные отверстия закрывали..

Вентиляцию и освещение включали через 30 мин после окончания вакцинации. Расход вакцины на один птичник составил 30 000 назальных доз. В процессе проведения спрей вакцинации в одном цехе была задействована бригада из 3-х ветеринарных санитаров в течении 2,5 часов.

Трудоёмкость составляет 7,5 чел/час., а расходы на оплату труда - 480 рублей, расходы на приобретение вакцины 600 рублей.

Цыплят вакцинировали в возрасте 14 дней. Реакцию цыплят на вакцинацию оценивали по клиническим признакам заболевания, падежу, привесам. Иммунологическую эффективность вакцинации оценивали по уровню поствакцинальных антител. Экономические показатели оценивали по затратам на проведение прививки.

3.2.8 Определение расчётной дозы вакцины против ньюкаслской болезни при применении спрей методом Эксперименты проводили в помещении площадью 20 м2 и объёмом 80 м3 путём распыления вакцины по методике аэрозольной вакцинации и по спрей методу.

Вакцину для аэрозольного применения использовали в расчитанном рабочем разведении на 10%-ном растворе глицерина с добавлением в качестве метки флюоресцеина натрия. Распыление вакцины осуществляли генератором аэрозолей САГ-2М.

Вакцину для спрей метода готовили на дистиллированной воде из расчёта 2 назальных дозы в одном миллилитре для распыления из расчёта 0,5 см3/голову с добавлением в качестве метки флюоресцеина натрия и 5% сухого обезжиренного молока в качестве защитной среды. Экспозиция в обоих случаях составляла 60 минут.

Пробы аэрозолей из воздуха отбирали контрольными приборами концентрации (КПК-1) со скоростью 0,2 и 5 л/мин в течение первых двух минут после распыления вакцины и в дальнейшем через каждые 20 минут в течение 20 минут. Для оценки количества аэрозоля, осевшего на поверхность пола и поверхность оперения цыплят, на полу помещения размещали с разным наклоном подложки стандартной площадью (10 см2), которые снимали для анализа через каждые 2 минуты в течение первых 20 минут экспозиции и затем через каждые 5 минут до конца экспозиции. Через каждые 4 минуты на одну минуту включали вентилятор для возбуждения потоков воздуха, имитирующих движение птиц. В процессе распыления из факела распыляемого материала отбирали пробы для определения размера частиц.

3.2.9 Статистическая обработка результатов исследований Статистический анализ результатов исследований проводили согласно рекомендаций Г.Ф. Лакина с пакетом прикладных программ Statgrafics версия 2.1 или MSExel.

4 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

–  –  –

предприятием с замкнутым циклом производства начиная от производства инкубационного яйца и заканчивая глубокой переработкой мяса птицы и реализации мясопродукции через собственную розничную сеть.

Производственная мощность птицефабрики 18 тыс. тонн мяса в год.

Выращиваются цыплята кросса КОББ 500, комплектование ремонтного молодняка проводится 4 раза в год поголовьем из Нидерландов и Германии.

На территории птицефабрики находятся 6 цехов содержания ремонтного молодняка (68619гол.) и 16 цехов содержания родительского стада (87491 гол.). За сутки производится 55000 яиц из которых 94-97% идут на инкубацию. Хозяйство имеет статус племенного и полностью обеспечивает себя инкубационным яйцом. Хозяйство имеет инкубаторий производства Pas Reform Нидерланды. Среднемесячная закладка составляет 1 млн. 300 тыс.

яиц, а среднемесячный вывод-1 млн. 100тыс цыплят. Средний процент вывода-84. Цех выращивания состоит из пяти обособленных производственных площадок на которых в 54 цехах напольно содержатся цыплята –бройлеры. Площадь каждого цеха 1728 м2. Среднемесячное поголовье составляет 1 млн. 400 тыс. голов. В каждом цехе содержится от 28 до 30 тыс. голов цыплят-бройлеров. Птичник напольного содержания бройлеров представлен на рисунке 4. Средняя продолжительность откорма дней, сохранность-93%, среднесуточный привес граммов.

39 -55 Птицефабрика благополучна по острым инфекционным болезням. Из незаразных заболеваний встречается нефрит, гепатит, пневмония, отек легких, энтерит. Данные заболевания не имеют массового распространения, и возникают в основном из-за причин, связанных с нарушением технологии выращивания цыплят – бройлеров.

Рисунок 4 - Цех напольного содержания бройлеров В ОАО «Птицефабрика Верхневолжская» действует следующая схема прививок цыплят – бройлеров и лечебно-профилактических обработок ремонтного молодняка и родительского стада, которая показана в таблице 1.

Цыплят-бройлеров промышленного стада обрабатывают следующим образом:

- в суточном возрасте против инфекционного бронхита и ньюкаслской болезни методом спрей;

- в возрасте 10 дней против инфекционной бурсальной болезни ( шт. Винтерфилд ); (выпойка);

- в возрасте 14 дней повторно против ньюкаслской болезни методом спрей;в возрасте 21 день повторно против инфекционного бронхита кур методом спрей.

–  –  –

Рабочие разведения вакцин готовят с учётом биологической активности, указанной изготовителем в сопроводительных документах.

Корма изготавливаются комбикормовым заводом, входящим в состав холдинга. Рецептура кормов соответствует рекомендациям по выращиванию цыплят кросса КОББ 500.

Системы кормления, поения, микроклимата в цехах полностью автоматизированы.

4.2 Определение титров вакцинных препаратов Перед проведением экспериментов приобретённые на Покровском заводе биопрепаратов и во ВНИИВВиМ были проверены на биологическую активность с целью уточнения титра, который мог измениться в процессе транспортировки и хранения после изготовления. Результаты титрований представлены в таблице 2.

Таблица 2 – Результаты титрования вакцины на КЭn=3

–  –  –

11 06.2011 8,5 33 04.2013 8,5 8-13 10.2013 9,0 Данные таблицы 2 свидетельствуют о том, что использованная в опытах вакцина по биологической активности соответствовала паспортным данным изготовителя. Эти результаты учитывали при приготовлении рабочих разведений вакцины при оральном, окулярном и спрей методах применения.

4.3Оценка эффективности орального, окулярного и спрей методов вакцинации бройлеров кросса КОББ 500 против ньюкаслской болезни 4.3.1 Определение уровня материнских антител у цыплят до вакцинации.

Результаты исследования сывороток крови цыплят на наличие специфически антител к НБ исследовали в возрасте 1, 3, 7, 11, 13 дней.

Результаты серологических исследований представлены в таблице 3.

Таблица 3 - Результаты исследований проб сывороток крови цыплят

–  –  –

13 115 54 14 17 12 10 5 3 53 2,75 Приведенные в таблице данные свидетельствуют о наличии пассивного иммунитета к ньюкаслской болезни у цыплят до 7-дневного возраста, а начиная с 11 дневного возраста пассивный иммунитет у большинства поголовья находится ниже 80%, что по действующим документам по профилактике НБ требует проведения соответствующей вакцинации.

В наставлении по применению вакцины против НБ из штамма Ла-Сота указано, что минимальный защитный уровень титров антител должен быть от 3 log2 и выше, в производственных условиях принято считать защитный титр с 4 log2 и выше.

4.4 Оценка эффективности вакцинации против НБ оральным методом В опытах по оценке эффективности вакцинации против НБ оральным методом использовано 215 523 голов цыплят-бройлеров. Вакцину применяли согласно наставления из расчёта 10 назальных доз на голову однократно. Результаты проведенных исследований представлены в таблицах 4, 5 и 6.

–  –  –

Данные таблицы свидетельствуют, что после контрольного заражения все цыплята выжили. Средний уровень специфических антител перед заражением составил 4,7 log2.

Производственные показатели орально вакцинированного поголовья представлены в таблице 5.

Таблица 6- Производственные показатели орально привитых кур n=4 Показатели

–  –  –

93,15 ±0,8 55,10 ±1,0 2038±26,0 36,58±0,5 7,1±0,8 ( 57,0) (2100) ( 37,8) ( 95,0) (5,0) Примечание: цифры в скобках – нормативные данные.

Приведенные в таблице данные свидетельствуют о высоком уровне производственных показателей. Причинами падежа являлись энтериты, гепатиты, нефриты. Специфических антител и вируса ньюкаслской болезни от павших цыплят не выделяли. Видимых клинических признаков реакции и изменений физиологического состояния птиц после оральной вакцинации не наблюдали.

4.5 Оценка эффективности окулярного метода вакцинации бройлеров Кросса КОББ 500 против ньюкаслской болезни В опытах по оценке эффективности окулярного метода вакцинации кур мясного направления использовано 122 322 голов цыплят - бройлеров.

Вакцину применяли согласно действующему наставлению из расчёта 1 назальная доза на голову

–  –  –

наци и Из данных таблицы следует, что после прививки через 14 дней уровень защитных антител обнаруживается у 96,5% привитых на уровне 5,46 log2, а сероконверсия составила 2,71 log2. Через 24 дня после прививки окулярным методом уровень защитных антител обнаруживается у 100% а сероконверсия составила 3,37 log2. Результаты контрольного заражения окулярно привитых цыплят представлены в таблице 7. В процессе проведения окулярной вакцинации в одном цехе задействованы четыре ветсанитара, птичница, слесарь в течение 5 часов. Трудоемкость составляет 30 чел.час., расходы на оплату труда 1920 руб., расходы на приобретение вакцины 600 руб.

–  –  –

Данные таблицы свидетельствуют, что после контрольного заражения все привитые окулярным методом цыплята оказались устойчивыми к инфицированию эпизоотическим вирусом. Средний уровень специфических антител перед заражением составил 5,8 log2.

Производственные показатели окулярно вакцинированного поголовья представлены в таблице 9.

Таблица 9- Производственные показатели окулярно привитых кур Показатели

–  –  –

92,00±0,7 55,43±1,0 2056±38 37,04±0,5 8,0±0,8 (95,0) (57,0) (2100) (5,0) (37,8) Примечание: цифры в скобках – нормативные данные.

Приведенные в таблице данные свидетельствуют о том, что производственные показатели после окулярной вакцинации близки к нормативным показателям. Причинами падежа являлись энтериты, гепатиты, нефриты. Клиническая реакция на введение вакцины окулярным методом отмечена с третьих по10 сутки в виде вялости, снижения поедаемости корма и иногда одышки. В процессе проведения окулярной вакцинации в одном цехе была задействована бригада из 4-х ветеринарных санитаров, слесаря и птичницы в течении 5 часов. Трудоёмкость составляет 30 чел/час., а расходы на оплату труда - 1920 рублей, расходы на приобретение вакцины 600 рублей.

4.6 Оценка эффективности спрей – метода вакцинации бройлеров кросса КОББ 500 против ньюкаслской болезни В опытах использовали 113 162 голов цыплят – бройлеров. При вакцинации, в одном цехе задействованы три ветеринарных санитара в течение 2,5 часов. Результаты серологических исследований и биопробы представлены в таблицах 9, 10, 11 соответственно. В процессе проведения спрей вакцинации в одном цехе была задействована бригада из 3-х ветеринарных санитаров в течении 2,5 часов. Трудоёмкость составляет 7,5 чел/час., а расходы на оплату труда - 480 рублей, расходы на приобретение вакцины 600 рублей.

Таблица 10 - Результаты исследований сыворотки крови цыплят, привитых методом спрей

–  –  –

Из данных таблицы следует, что через 14 дней уровень защитных антител обнаруживается у 97,5 % привитых на уровне 6,80 log2.

Сероконверсия через 14 дней составила 4,05 log2. Через 24 дней после вакцинации уровень защитных антител обнаруживался у 91,2 % привитых на уровне 5,51 log2. Сероконверсия через 24 дня составила 2,76 log2. Результаты контрольного заражения привитых методом спрей цыплят представлены в таблице 11.

Таблица 11- Результаты биологической пробы

–  –  –

Данные таблицы свидетельствуют, что после контрольного заражения все привитые методом спрей цыплята оказались устойчивыми к инфицированию эпизоотическим вирусом. Средний уровень специфических антител перед заражением составил 6,8 log2.

Производственные показатели по привитому спрей методом поголовью представлены в таблице 12.

–  –  –

93,20±0,7 59,63±1,0 2086 ±48 6,8±0,8 39,00±0,5 (95,0) (57,0) (2100) (5,0) (37,8) Примечание: цифры в скобках – нормативные данные.

Приведенные в таблице данные свидетельствуют о том, что производственные показатели близки к плановым нормам для данной породы.

Испытанные методы вакцинации выраженного воздействия на привесы поголовья не оказывали, куры развивались в соответствии с характерными для данной породы физиологическими нормами.

–  –  –

то время как после орального и спрей методов иммунизации имеет место существенное снижение уровня защитных антител.

Из данных таблицы также следует что: при оральном методе вакцинации получены более высокие показатели сохранности птицы (93,15%), и более низкие показатели живой массы (2038 гр.). Получено живой массы на одну посаженную голову: 1, 898 кг.; при окулярном методе вакцинации получены средние показатели сохранности птицы (92,0%), и средние показатели живой массы (2056 гр.). Получено живой массы на одну посаженную голову:1, 891 кг.; при спрей методе вакцинации получены самая низкая сохранность птицы (91,65%) и самые высокие показатели живой массы ( 2086 гр.). Получено живой массы птицы на одну посаженную голову: 1, 912 кг.

Таблица 14 - Средне – статистические сводные данные производственных показателей, полученных после вакцинации цыплят против НБ оральным, окулярным и спрей методами.

–  –  –

Анализ результатов исследований при вакцинации бройлеров против ньюкаслской болезни с использованием метода спрей показал, что слабая ответная реакция на введенную назальную дозу вакцины обусловлена не только пониженной иммунореактивностью бройлеров кросса КОББ 500, но и недостаточной дозой вакцины.

4.7 Результаты определения расчётной дозы вакцины против ньюкаслской болезни при спрей методе применения При воспроизведении методики аэрозольной иммунизации было установлено, что концентрация аэрозоля в первые 20 минут после распыления составила 0,34 мг/л, а к концу экспозиции-0,028 мг/л (среднее значение концентрации за 60 минут составило 0,151 мг/л).

При воспроизведении методики спрей вакцинации в первые 20 минут концентрация вакцины в воздухе составила 0,064 мг/л, а к концу экспозиции-0,004 мг/л.

Изменение концентрации создаваемых аэрозолей вакцины при обоих методах распыления во времени представлено на рисунке 5.

Рисунок 5- Изменение концентрации создаваемых аэрозолей вакцины при аэрозольном и спрей методах распыления Примечания: 1 – концентрация аэрозоля в воздухе (мг/л);

–  –  –

Количество вакцины, осевшее на поверхность пола и поверхность тела птиц в расчёте на 1см2 поверхности и расчётные дозы вакцины при аэрозольном и спрей методах иммунизации представлены в таблицах 13 и

14.Для расчётов условно приняли, что исходная биологическая активность вакцины равна 109 ЭИД 50/см3 (при аэрозольной иммунизации активность в расчёте на мг составляет 2372 ЭИД а при спрей методе-2000 ЭИД50), 50, масса цыплёнка-100 г, величина минутной легочной вентиляции-0,062 л/мин, экспозиция-60 минут. Площадь поверхности ноздри цыплёнка принята равной 0,2см2,площадь поверхности глаза цыплёнка принята равной 0,25 см2, оральная доза расчитана при условии склёвывания 1/10 части вакцины, осевшей на тело птицы.

Приведенные в таблицах 15 и 16 и на рисунке 5 данные свидетельствуют о том, что при спрей методе применения вакцины её концентрация в воздухе в 5-7 раз ниже, чем при аэрозольной иммунизации.

На поверхность тела курицы при спрей методе оседает в 5-7 раз больше вакцины чем при аэрозольной иммунизации, при этом в обоих случаях имеет место увеличение количества осевшей на пол вакцины, что можно объяснить стряхиванием осадка с тела птиц на пол в результате движений привитого поголовья.

–  –  –

Примечание: *-при аэрозольной иммунизации назальная доза является составной частью ингаляционной и существенной самостоятельной роли не играет.

–  –  –

0-20 0,064 0,114 0,187 158,7 91,2 114 7980 21-40 0,016 0,290 0,280 39,7 232,0 290 20300 41-60 0,004 0,213 0,213 9,7 272,0 340 23800 0,084 0,617 0,680 208,3 595,2 744 52080

–  –  –

суммарное значение величины доз за 60 мин. экспозиции.

Если принять во внимание тот факт, что оптимальная доза вакцины из штамма Ла-Сота при аэрозольном применении составляет 800-1200 ЭИД50, при назальном и окулярном методах -106ЭИД50 и при оральном-107ЭИД50, задаваемые дозы вакцины при спрей методе применения в 5-7 раз ниже оптимальной аэрозольной, в тысячу и более раз ниже оптимальной назальной, окулярной и оральной доз. В связи с недостаточными дозами вакцины при всех путях проникновения антигена во время прививки спрей методом имеет место формирование непродолжительного по времени и низкого по напряженности поствакцинального иммунитета. Следует предположить, что положительный эффект в основном обеспечен за счёт аэрозольного пути проникновения вакцины в количествах несколько больших, чем показывают расчёты, так как в расчётах не принимали во внимание вторичные аэрозоли.

В связи с недостаточными дозами вакцины при всех путях проникновения антигена во время прививки методом «спрей» имеет место формирование непродолжительного по времени и низкого по напряженности поствакцинального иммунитета. Следует предположить, что положительный эффект в основном обеспечен за счёт аэрозольного пути проникновения вакцины в количествах несколько больших, чем показывают расчёты, так как в расчётах не принимали во внимание вторичные аэрозоли. Положительный эффект применения вакцины против ньюкаслской болезни в ОАО «Птицефабрика Верхневолжская» подтвержден на привитом поголовье в количестве более 100 тысяч где получили несколько лучшие экономические показатели по сравнению с окулярным и оральным методами вакцинации, где были заданы дозы в соответствии с действующим наставлением, которые вызвали заметную иммунологическую реакцию и естественно отразились на снижении экономических показателей [53]. В данном случае спрей метод оказался ближе к контролю и поэтому показатели (непривитым) экономической эффективности в поствакцинальный период лучше, чем при других методах прививок. В иммунологическом плане вакцина при крупнокапельном распылении не обеспечивает надёжной защиты поголовья от возникновения заболевания, а спрей метод «прижился» на птицеводческих предприятиях благодаря высокому уровню ветеринарно-санитарной защищённости технологий выращивания птиц.

Существенным недостатком спрей метода вакцинации является необходимость постоянного присутствия людей в процессе распыления вакцины, что при недостаточной индивидуальной защищённости может отрицательно сказаться на безопасности обслуживающего персонала, у которого могут развиваться различного рода аллергические реакции и сопутствующие им заболевания.

4.8 Схема вакцинации цыплят промышленного стада в ОАО «Птицефабрика Верхневолжская» Тверской области Проведенный анализ уровня материнских антител у цыплят суточного возраста позволил рекомендовать отмену прививки против НБ в суточном возрасте. Эта изменённая схема представлена на рисунке 6.

ИБК ИББ НБ ИБК

Рисунок 6 - Рекомендуемая схема вакцинации цыплят – бройлеров По этой схеме суточном возрасте вакцинируют против инфекционного бронхита; в возрасте 10 дней вакцинируют против инфекционной бурсальной болезни ( шт. Винтерфилд) методом выпойки; в возрасте 14 дней повторно вакцинируют против ньюкаслской болезни методом спрей; в возрасте 21 день повторно вакцинируют против инфекционного бронхита кур методом спрей.

В настоящее время эта схема вошла в разработанные методические

рекомендации по совершенствованию противоэпизоотических мероприятий при профилактике и борьбе с ньюкаслской болезнью в ОАО «Птицефабрика Верхневолжская», Тверской области, утвержденные 6 февраля 2015 года заместителем начальника Главного управления государственной инспекции по ветеринарии Тверской области Н.М. Щагиной.

Рабочие разведения вакцин готовят с учётом биологической активности, указанной изготовителем в сопроводительных документах и установленной при проверке биологической активности в процессе хранения вакцинных препаратов.

Перед проведением прививки от птиц берут пробы крови и оценивают уровень пассивного или поствакцинального иммунитета. Если титры антител у 20% исследованных особей отсутствуют или ниже 1:8 поголовье подвергают прививке, а если титры антител у 85% исследованных проб крови 1:8 и выше, то вакцинацию переносят на более поздние сроки.

Вакцинацию против НБ осуществляют по принятой в хозяйстве схеме, которая соответствует эпизоотическому состоянию по ньюкаслской болезни (благополучное).

В соответствии с выбранным методом вакцинации создают условия для эффективного применения вакцины. При пероральном применении готовят поилки и кормушки, а при аэрозольном применении обеспечивают герметичность помещений, наличие вытяжной вентиляции, готовность генераторов аэрозолей и компрессора), при спрей методе готовят соответствующие распылители и возможность регулирования интенсивности освещения, для назальной и окулярной прививки готовят соответствующие инструменты. Подготовку персонала осуществляют соответствующими инструктажами.

Непосредственно перед вакцинацией проводят клинический осмотр поголовья и удаляют больных птиц. За трое суток до прививки и трое суток после прививки исключают дачу в корм антибиотиков и других химиопрепаратов.

В обязательном порядке определяют уровень поствакцинальных антител перед повторной вакцинацией против НБ.

5 ОБСУЖДЕНИЕ Пути введения в организм вакцин через желудочно-кишечный и респираторный тракты являются одной из актуальных проблем в медицине и ветеринарии. Фундаментальными и прикладными работами установлено, что энтеральные пути введения вакцин лишены недостатков, присущих парэнтеральным методам (опасность передачи так называемых "шприцевых" инфекций, аллергические и местные гнойно-воспалительные реакции, реактогенность). Самым простым и физиологичным является пероральный способ иммунизации, которому нет альтернативы при вакцинации домашних и особенно диких животных, размещенных с малой плотностью на сравнительно обширных территориях. Пероральный способ прост по технике исполнения, наиболее щадящий из всех способов введения антигенов и позволяет осуществлять массовую профилактику одновременно большого количества животных. Однако в виду медленного проникновения антигена, введенного в желудочно-кишечный тракт, формирование иммунитета происходит более длительное время. Существенным недостатком является и то, что эффективные иммунизирующие дозы при пероральном введении в десятки и сотни раз больше, чем при подкожной вакцинации [83, 12].

Известно так же, что в развитии иммунитета основное значение имеет лимфоидная система, которая особенно богато представлена рядом лимфатических образований на протяжении всего желудочно-кишечного тракта. При энтеральной иммунизации это обусловливает возможность быстрого включения в иммунный ответ большого количества лимфоидной ткани и органов.

В настоящее время птицеводческие предприятия для профилактики НБ применяют оральный, назальный, аэрозольный и спрей методы прививок.

Сообщения о возможности и эффективности аэрозольной вакцинации, которые появились в период до начала восьмидесятых годов прошлого века, носили весьма разноречивый характер и препятствовали широкому внедрению этого прогрессивного метода в ветеринарную практику. Так в одних случаях сообщалось о высокой реактогенности вакцин при этом методе применения, а в других - об отсутствии иммунитета. Это было обусловлено применением вакцин с неизвестной биологической активностью (на упаковках указывалось только количество назальных доз, а что представляла собой назальная доза сразу после выпуска вакцины и через различные сроки хранения после изготовления было неизвестно).



Pages:     | 1 || 3 | 4 |

Похожие работы:

«Любас Артем Александрович ПАЛЕОРЕКОНСТРУКЦИЯ СРЕДЫ ОБИТАНИЯ ПРЕСНОВОДНЫХ МОЛЛЮСКОВ В НЕОГЕН-ЧЕТВЕРТИЧНЫХ ВОДОТОКАХ С ЭКСТРЕМАЛЬНЫМИ ПРИРОДНЫМИ УСЛОВИЯМИ Специальность 25.00.25 – геоморфология и эволюционная география Диссертация на соискание ученой степени кандидата географических наук Научный руководитель: доктор биологических наук...»

«Кириллин Егор Владимирович ЭКОЛОГИЯ ОВЦЕБЫКА (OVIBOS MOSCHATUS ZIMMERMANN, 1780) В ТУНДРОВОЙ ЗОНЕ ЯКУТИИ 03.02.08 – экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: д. б. н., профессор Мордосов И. И. Якутск – 2015 Содержание Введение.. Глава 1. Краткая физико-географическая...»

«БРИТАНОВ Николай Григорьевич ГИГИЕНИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПЕРЕПРОФИЛИРОВАНИЯ ИЛИ ЛИКВИДАЦИИ ОБЪЕКТОВ ПО ХРАНЕНИЮ И УНИЧТОЖЕНИЮ ХИМИЧЕСКОГО ОРУЖИЯ 14.02.01 Гигиена Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор...»

«Ядрихинская Варвара Константиновна ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ОСТРЫХ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ В Г. ЯКУТСКЕ И РЕСПУБЛИКЕ САХА (ЯКУТИЯ) 03.02.08 – экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель кандидат биологических наук, доцент М.В. Щелчкова Якутск 2015...»

«Будилова Елена Вениаминовна Эволюция жизненного цикла человека: анализ глобальных данных и моделирование 03.02.08 – Экология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант доктор биологических наук, профессор А.Т. Терехин Москва 2015 Посвящается моим родителям, детям и мужу с любовью. Содержание Введение.. 5 1. Теория эволюции жизненного цикла. 19...»

«ДОРОНИН Игорь Владимирович Cистематика, филогения и распространение скальных ящериц надвидовых комплексов Darevskia (praticola), Darevskia (caucasica) и Darevskia (saxicola) 03.02.04 – зоология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, заслуженный эколог РФ Б.С. Туниев Санкт-Петербург Оглавление Стр....»

«Баранов Михаил Евгеньевич Экологический эффект биогенных наночастиц ферригидрита при ремедиации нефтезагрязненных почвенных субстратов Специальность (03.02.08) – Экология (биология) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат...»

«Хохлова Светлана Викторовна ИНДИВИДУАЛИЗАЦИЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ РАКОМ ЯИЧНИКОВ 14.01.12-онкология ДИССЕРТАЦИЯ На соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: Доктор медицинских наук, профессор Горбунова В.А Москва 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ Введение Глава 1. Обзор литературы 1.1. Общая характеристика рака яичников 1.1.1. Молекулярно-биологические и...»

«Брит Владислав Иванович «Эффективность методов вакцинации против ньюкаслской болезни в промышленном птицеводстве» Специальность: 06.02.02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидат ветеринарных наук Научный руководитель:...»

«УШАКОВА ЯНА ВЛАДИМИРОВНА ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИЙ ДНК-МАРКИРОВАНИЯ В СЕЛЕКЦИОННО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ ЯБЛОНИ Специальность 06.01.05. – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат биологических...»

«КОЖАРСКАЯ ГАЛИНА ВАСИЛЬЕВНА КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ МАРКЕРОВ КОСТНОГО МЕТАБОЛИЗМА У БОЛЬНЫХ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ 14.01.12 онкология Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научные руководители: доктор биологических наук, Любимова Н.В. доктор медицинских наук, Портной С.М. Москва, 2015 г....»

«АСБАГАНОВ Сергей Валентинович БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ИНТРОДУКЦИИ РЯБИНЫ (SORBUS L.) В ЗАПАДНОЙ СИБИРИ 03.02.01 – «Ботаника» ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: к.б.н., с.н.с. А.Б. Горбунов Новосибирск 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ.. 4 Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.. 8 Ботаническая...»

«ХАПУГИН Анатолий Александрович РОД ROSA L. В БАССЕЙНЕ РЕКИ МОКША 03.02.01 – ботаника Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель Силаева Татьяна Борисовна д.б.н., профессор САРАНСК ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ Глава 1. ИСТОРИЯ ИЗУЧЕНИЯ РОДА ROSA L. В БАССЕЙНЕ МОКШИ. Глава 2. КРАТКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РОДА ROSA L. 2.1. Характеристика рода Rosa L. 2.2. Систематика рода Rosa L. Глава 3....»

«Мухаммед Тауфик Ахмед Каид ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕНОТИПОВ С ХОРОШИМ КАЧЕСТВОМ КЛЕЙКОВИНЫ, ОТОБРАННЫХ ИЗ ГИБРИДНЫХ ПОПУЛЯЦИЙ АЛЛОЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ ЯРОВОЙ ПШЕНИЦЫ МЯГКОЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ДНК-МАРКЕРОВ Специальность 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Научный...»

«БОЛОТОВ ВЛАДИМИР ПЕТРОВИЧ ОЦЕНКА СОДЕРЖАНИЯ И МИГРАЦИЯ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ В ЭКОСИСТЕМАХ ВОЛГОГРАДСКОГО ВОДОХРАНИЛИЩА Специальность: 03.02.08. Экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук,...»

«СЕРГЕЕВА ЛЮДМИЛА ВАСИЛЬЕВНА ПРИМЕНЕНИЕ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ЗАКВАСОК ДЛЯ ОПТИМИЗАЦИИ ФУНКЦИОНАЛЬНО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ МЯСНОГО СЫРЬЯ И УЛУЧШЕНИЯ КАЧЕСТВА ПОЛУЧАЕМОЙ ПРОДУКЦИИ Специальность 03.01.06 – биотехнология ( в том числе бионанотехнологии) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель Доктор биологических наук, профессор Кадималиев Д.А. САРАНСК 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ.....»

«Мансуров Рашид Шамилович Применение препарата Солунат при выращивании бройлеров 06.02.08. – кормопроизводство, кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор, Заслуженный деятель науки Российской...»

«СЕРГЕЕВА ЛЮДМИЛА ВАСИЛЬЕВНА ПРИМЕНЕНИЕ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ЗАКВАСОК ДЛЯ ОПТИМИЗАЦИИ ФУНКЦИОНАЛЬНО-ТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ МЯСНОГО СЫРЬЯ И УЛУЧШЕНИЯ КАЧЕСТВА ПОЛУЧАЕМОЙ ПРОДУКЦИИ Специальность 03.01.06 – биотехнология ( в том числе бионанотехнологии) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель Доктор биологических наук, профессор Кадималиев Д.А. САРАНСК 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ.....»

«Смешливая Наталья Владимировна ЭКОЛОГО-ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ СИГОВЫХ РЫБ ОБЬ-ИРТЫШСКОГО БАССЕЙНА 03.02.06 Ихтиология Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель кандидат биологических наук, доцент Семенченко С.М. Тюмень – 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ...»

«Ульянова Онега Владимировна МЕТОДОЛОГИЯ ПОВЫШЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ВАКЦИН НА МОДЕЛИ ВАКЦИННЫХ ШТАММОВ BRUCELLA ABORTUS 19 BA, FRANCISELLA TULARENSIS 15 НИИЭГ, YERSINIA PESTIS EV НИИЭГ 03.02.03 – микробиология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант:...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.