WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:     | 1 | 2 || 4 |

«ИММУНОДИАГНОСТИЧЕСКАЯ СИСТЕМА ДЛЯ ОЦЕНКИ НАПРЯЖЕННОСТИ ПОСТВАКЦИНАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА К КОКЛЮШУ, ДИФТЕРИИ И СТОЛБНЯКУ ...»

-- [ Страница 3 ] --

Число детей в соответствующих группах было следующим: 20, 15, 28, 27, 23 и 22.

Для каждой группы были рассчитаны средние геометрические обратных титров (1титр) гемагглютининов (СГТ). Нулевые титры в ходе статистической обработки выражали как титр 1:5 (половина от минимального предела детекции набора) [108]. В дальнейшем все полученные титры антител для удобства статистической обработки логарифмировали по формуле = log 2 (1 титр).

Средние значения концентраций антител к КТ составили 13,4 (95% доверительный интервал:

-1,8 – 28,8) МЕ/мл для группы «БВ», 4,7 (95%ДИ 1,1 – 8,4) МЕ/мл для группы «В», 3,2 (95%ДИ 0,8 – 5,6) МЕ/мл для группы «РВ-1», 3,5 (95%ДИ -1,4 – 8,5) МЕ/мл для группы «РВ-5», 33,9 (95%ДИ 10,3 – 57,5) МЕ/мл для группы «РВ-10», 22,3 (95%ДИ 6,6 – 38,1) МЕ/мл для группы «РВ-15» (Рисунок 21).

Группы сравнили попарно при помощи теста Манна-Уитни, достоверное различие было продемонстрировано лишь между группами «РВ-5» и «РВ-10», что соответствует дошкольному и среднему школьному возрасту. Таким образом, было продемонстрировано, что вакцинация и ревакцинация цельноклеточной коклюшной вакциной не отразилась на уровне антител к коклюшному токсину у детей (отсутствие достоверных различий между группами «БВ», «В» и «РВ-1»).

По результатам РА для каждой исследованной группы были рассчитаны СГТ:

в группе «БВ» 1:4, в группе «В» 1:71, в группе «РВ-1» 1:160, в группе «РВ-5» 1:53, в группе «РВ-10» 1:107, в группе «РВ-15» 1:74 (Рисунок 22).

После логарифмирования титров агглютининов нормальное распределение было получено во всех группах, кроме группы не вакцинированных детей.

Последовательное сравнение титров антител в возрастных группах проводили при помощи теста Стьюдента, за исключением сравнения групп «БВ» и «В», для сравнения которых применили критерий Манна-Уитни. Результаты сравнения упомянутых групп продемонстрировали достоверные различия между титрами антител у не вакцинированных и вакцинированных детей, а также между группами «РВ-1» и «РВ-5».

Рисунок 21 – Средние концентрации антител к коклюшному токсину (±95%ДИ) в возрастных группах детей. Выделены статистически достоверные различия между группами: * - по критерию Манна-Уитни, p0,05 Рисунок 22 – Средние геометрические обратных титров агглютининов (СГТ) (±95%ДИ) в возрастных группах детей Таким образом, вакцинация детей цельноклеточной вакциной приводит к достоверному увеличению уровня агглютининов, достоверное снижение титра происходит у детей спустя 5 лет после ревакцинации (Рисунок 23).

Рисунок 23 – Сравнение средних (±95%ДИ) логарифмов обратных титров агглютининов (СЛТ) в различных возрастных группах детей.

Выделены статистически достоверные различия между группами: * - по критерию Манна-Уитни, p0,05, ** - по непарному t-критерию Стьюдента, p0,05 Процент серопозитивных лиц (титр 1:160 и более) составил 47,8% от общего числа вакцинированных детей (55 из 115).

10.2. Содержание дифтерийного и столбнячного антитоксинов у детей Исследуя содержание антитоксинов у детей, мы не стали осуществлять разделение на возрастные группы и проводить сравнительный анализ.

Обусловлено это было прежде всего тем, что эти данные не вызывали особого интереса изначально. На протяжении последних лет уровень противостолбнячного и, чуть в меньшей степени, противодифтерийного иммунитета среди детей остается стабильно высоким. Низкий уровень заболеваемости этими инфекциями также заставил нас обратить внимание в большей степени на анализ состояния противококлюшного иммунитета.

Для антитоксинов мы рассчитали лишь уровень серопозитивности, а также количество детей с содержанием антител менее 0,1 МЕ/мл, от 0,1 до 1 МЕ/мл и более 1 МЕ/мл. Всего было исследовано 73 сыворотки детей в возрасте от 2 недель до 17 лет, не болевших дифтерией и столбняком, вакцинированных от этих инфекций согласно Национальному календарю прививок.

Из 60 детей, вакцинированных против столбняка, лишь у одного антитела были выявлены в концентрации менее 0,1 МЕ/мл. У 25 детей антитела были выявлены в концентрации 1 МЕ/мл и выше.

Не так радужно обстояли дела с противодифтерийным иммунитетом: из 60 вакцинированных у десятерых содержание антитоксинов было ниже 0,1 МЕ/мл.

Семеро из них получали дозу противодифтерийной вакцины 5 и более лет назад.

Антитела в концентрации более 1 МЕ/мл были выявлены у 28 детей.

Материалы данной главы представлены в публикации:

Раев, М.Б. Проблемы контроля над коллективным иммунитетом к коклюшу / М.Б. Раев, П.В. Храмцов, М.С. Бочкова и др. // Российский иммунологический журнал. – 2015. – Т.9 (18). – №2 (1). – С.147–150.

–  –  –

На стрипы из нитроцеллюлозной мембраны сорбировали суспензию инактивированных клеток Bordetella pertussis в концентрации 20 МОЕ, дифтерийный анатоксин в концентрации 0,1 мг/мл, столбнячный анатоксин в концентрации 0,05 мг/мл, также IgG в концентрации 0,01 мг/мл в качестве положительного контроля. Объем сорбированных анти-лигандов составлял 3,5 мкл. После сорбции стрипы высушивали в течение двух часов при комнатной температуре и помещали в лунки планшетов из ABS-пластика.

Блокирование осуществляли 300 мкл 1%-ного раствором БСА в ЗФРТ в течение часа, после чего диски трехкратно промывали 600 мкл ЗФРТ. Далее в лунки вносили образцы сывороток крови детей, разведенные 1:40 в блокирующем буфере в объеме 300 мкл. В общей сложности было протестировано 155 сывороток крови.

В качестве Калибровочных растворов использовали:

Пулы сывороток крови детей, содержащих коклюшные агглютинины в титрах 1:40 и 1:160, разведенные в блокирующем буфере в 40 раз;

Стандарт дифтерийного антитоксина, разведенный блокирующим буфером до концентраций 0,025 МЕ/ил и 0,0025 МЕ/мл;

Стандарт столбнячного антитоксина, разведенный блокирующим буфером до концентраций 0,025 МЕ/ил и 0,0025 МЕ/мл;

Калибровочные растворы вносили в лунки в объеме 300 мкл.

Длительность инкубации иммуносорбента с калибраторами и образцами сывороток крови составляла 30 мин. По окончании инкубации стрипы трехкратно промывали 600 мкл ЗФРТ и производили детекцию специфических антител 300 мкл углеродного диагностикума, разведенного 1:45 в ЗФРТ, в течение часа. По истечении этого срока диски трехкратно промывали ЗФРТ, высушивали и производили учет результатов (Рисунок 24).

Интенсивность окрашивания точек сравнивали с оптической плотностью калибраторов дифтерийного и столбнячного антитоксинов, на основании чего сыворотки относили к одной из трех групп: концентрация IgG менее 0,1 МЕ/мл, от 0,1 до 1 МЕ/мл и более 1 МЕ/мл.

Рисунок 24 – Апробация тест-системы с несколькими образцами сывороток крови детей. В нижней части рисунка – схема сорбции антилигандов на тест-полоску Для определения наличия защитного уровня антител к коклюшу использовали данные ROC-анализа [164]. Данный статистический метод нашел множество применений в рамках клинической диагностики [68, 109, 156, 157].

Метод позволяет подобрать уровень оптической плотности сигнала, разделяющий серопозитивные и серонегативные образцы таким образом, что чувствительность и специфичность метода будут максимальными. Помимо этого, ROC-анализ позволяет в целом оценить диагностическую значимость метода. Для этой оценки служит параметр AUC (площадь под кривой, англ. area under curve). Пороговый уровень сигнала высчитывали на основе соотношения оптических плотностей двух опорных калибровочных образцов. Подобный подход ранее был использован в работе [159]. Для каждого образца высчитывалось числовое значение относительно калибраторов с титрами 1:40 и 1:640 по формуле: (ОП образца – ОП слабоположительного образца)/(ОП сильноположительного контроля – ОП негативного контроля). Критерием для выбора оптимального порогового значения аналитического сигнала служил индекс Юдена.

Индекс Юдена (J) – величина, предназначением которой является «адекватно охарактеризовать диагностический тест при помощи одного числа» [162].

J=чувствительность+специфичность-1. Наибольшее значение J соответствует оптимальному сочетанию чувствительности и специфичности при интерпретации данных ROC-анализа.

По результатам ROC-анализа было подобрано пороговое соотношение оптических плотностей образца и контролей, равное 0,1278, при котором индекс Юдена принимает максимальное значение (Рисунок 25). Величина AUC составила 0,951 (95% ДИ: 0,909 – 0,993, при p0,0001, n=135). Чувствительность и специфичность метода в отношении детекции антител к коклюшу равны 88%.

Рисунок 25 – ROC-кривая, полученная при сопоставлении результатов дот-иммуноанализа и реакции агглютинации Сравнительную оценку дот-иммуноанализа и референсных тестов проводили при помощи каппа-коэффициента [57] (Таблица 3).

–  –  –

Сравнение РА и дот-иммуноанализа продемонстрировало, что результаты тестов совпадали в 89,6% случаев, а каппа–коэффициент был равен 0,765 (95% ДИ 0,649–0,880).

Аналогичным образом определяли чувствительность и специфичность детекции противостолбнячных и противодифтерийных антител (Таблицы 4 и 5).

Таблица 4 – Сопоставление результатов ИФА и дот-иммуноанализа при выявлении антител к столбнячному анатоксину

–  –  –

Чувствительность выявления антител к столбняку составила 93,5% (95% ДИ 83,5%-97,9%), специфичность – 90,9% (95% ДИ 57,1%-99,5%), степень конкордантности, выражаемая каппа-коэффициентом, равна 0,800 (95%ДИ 0,678Таблица 5 – Сопоставление результатов ИФА и дот-иммуноанализа при выявлении антител к дифтерийному анатоксину

–  –  –

Чувствительность выявления антител к дифтерийному анатоксину составила 92,4% (95% ДИ 80,9%-97,5%), специфичность – 85% (95% ДИ 61,1%-96,0%), степень конкордантности, выражаемая каппа-коэффициентом, равна 0,813 (95%ДИ 0,700-0,927).

Сконструированная тест-система продемонстрировала удовлетворительные аналитические характеристики. Конкордантность с результатами референсных тест-систем, а также показатели чувствительности и специфичности находятся на высоком уровне.

Материалы данной главы представлены в публикациях:

Храмцов, П. В. Конструирование и оптимизация интерпретации 1.

результатов неинструментального столбнячного серологического теста / П.В.

Храмцов, М.С. Бочкова, М.Б. Раев // Российский иммунологический журнал. – 2015. – Т.9 (18). – №2 (1). – С.172–174.

Храмцов, П.В. Диагностическая система для комплексной 2.

персонализированной оценки эффективности вакцинации / Храмцов П.В. // Российский иммунологический журнал. – 2014. – Т.8(17). – №3. – С.926-929.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Итоги исследования и обсуждение полученных результатов На настоящий момент разработано множество серологических тест-систем, предназначенных для полуколичественной и количественной детекции антител к коклюшу, дифтерии и столбняку. Это иммуноферментные наборы, агглютинационные и дот-аналитические тесты. В этой диссертации нами показан процесс разработки и апробации диагностической системы, позволяющей осуществлять качественный и количественный анализ антител к антигенам коклюша, столбняка и дифтерии в одной постановке с использованием единственного разведения сыворотки крови. Именно это и является основным новшеством разработанного теста.

Ранее уже был предложен вариант мультианалитного теста, позволяющего осуществлять количественное определение антител одновременно к столбнячному и дифтерийному антитоксинам, а также ряду коклюшных антигенов [151].

Подобные тесты были разработаны и для других вакцинных антигенов [116, 139], входящих в состав поливакцин. Однако эти диагностические системы предназначены для мультиплексного анализа, основанного на применении флуоресцентных меток, детектируемых при помощи дорогостоящего специализированного оборудования, вследствие чего их массовое применение крайне ограничено.

Отличием разработанной дот-иммуноаналитической системы является ее простота и независимость от оснащенности лаборатории. Тем не менее, идея каждого из подходов одинакова: сократить до минимума количество аналитических процедур, сделать анализ унифицированным, более оперативным.

Еще одной выгодной чертой является использование для детекции антител углеродного диагностикума: конъюгата углеродных наночастиц с G белком стрептококка. Углеродный диагностикум обладает высокой стабильностью при хранении, не теряя своих функциональных свойств на протяжении нескольких лет [26], эта особенность позволяет увеличить срок хранения диагностикумов, а также значительно облегчает их транспортировку, что привлекательно в коммерческом плане, особенно в сравнении с термолабильными ферментными метками.

Используемые в настоящее время для серодиагностики инфекций, входящих в состав коклюшно-дифтерийно-столбнячной вакцины не являются идеальными.

Агглютинационные тесты, по-прежнему популярные в нашей стране требуют немало времени на подготовку проб (инактивацию, истощение, титрование сывороток крови) и постановку анализа. Они не предназначены для тестирования большого массива проб. Тем не менее, их простота и независимость от приборов позволяют им находить применение и в XXI веке. Иммуноферментные тесты объективны, позволяют производить анализ десятков проб, однако они привязаны к считывающему устройству, которое может позволить себе не каждая лаборатория.

Результатом проведенной работы не является создание готовой для немедленного внедрения на рынок диагностической системы. Несомненно, она нуждается в совершенствовании, в особенности в плане синтеза твердофазного реагента, увеличения чувствительности и специфичности, однако принципиальная возможность создания тест-системы, предназначенной для оценки уровня гуморального иммунитета к нескольким компонентам вакцины в одной постановке, основанной на применении углеродного диагностикума, была нами продемонстрирована.

На основании проведенных исследований нами был разработан макет тестнабора, предназначенного для оценки эффективности иммунизации коклюшнодифтерийно-столбнячной вакциной (рисунок 26).

В состав набора входят:

стрипы из нитроцеллюлозной мембраны, с сорбированными антилигандами: дифтерийным анатоксином, столбнячным анатоксином, суспензией клеток B. pertussis и иммуноглобулинами G мыши;

пластиковые планшеты, предназначенные для проведения анализа;

2.

концентраты промывочного буфера (ЗФРТ) и буфера для разведения 3.

сывороток крови (ЗФРТ с 1% БСА);

концентрированный раствор углеродного диагностикума;

4.

калибровочные растворы, содержащие антитела против коклюша, 5.

дифтерии и столбняка.

Процедура анализа включает в себя 30-минутную инкубацию иммуносорбента с сывороткой крови, разведенной 1:40, трехкратную промывку и часовую детекцию антител углеродным диагностикумом, разведенным до рабочего титра. Высушенные тест-полоски необходимо отсканировать, оптические плотности измерить при помощи программы ImageJ, доступной для свободного скачивания с сайта разработчика. Оптические плотности для каждого из образцов следует сравнить с оптическими плотностями калибраторов и сделать вывод о наличии/отсутствии защитного титра антител, а также о рекомендациях относительно дальнейшей вакцинации и серологического контроля.

Рисунок 26 – Макет диагностического набора для дот-иммуноанализа

Сконструированная тест-система позволяет осуществлять анализ в лаборатории, оснащенной некоторым минимумом инструментов: простейшая центрифуга, термостат, 2-3 дозатора и устройство для сканирования изображений.

Длительность анализа укладывается в пределы трех часов, начиная с подготовки проб и заканчивая получением результата. Такая длительность вполне сравнима с традиционным непрямым ИФА. Результаты анализа могут быть задокументированы и сохранены в карточке пациента в виде высушенной тестполоски, а также виде скана, что позволяет обратиться к ним повторно в случае необходимости. Простота, оперативность и приборонезависимость сконструированной тест-системы предоставляет возможность использовать ее при проведении экстренных серологических исследований, например в очагах эпидемий дифтерии, когда результат анализа должен быть получен в течение суток, а также в травматологических пунктах для быстрой оценки противостолбнячного иммунитета.

Дот-иммуноаналитическая система позволяет осуществить полуколичественное определение антител к дифтерии и столбняку и ранжировать полученные результаты в зависимости от наличия и длительности защиты от инфекции. Как уже говорилось ранее, подразделение на группы по концентрации дифтерийного и столбнячного анатоксинов основано на ряде публикаций, прежде всего немецких авторов, а также на данных из базы знаний об иммунизации столбнячным анатоксином населения Германии. Подобная система применяется производителями ИФА-тестов на антитела к дифтерии и столбняку в Германии, однако мы не видели подобной градации для тест-систем из других стран. Тем не менее, мы приняли решение опираться на эти границы титров антител, поскольку это был единственный подход, позволявший сделать нашу тест-систему более информативной. Вопрос о динамике угасания иммунитета и совершенствовании подходов к интерпретации результатов серологических тестов нуждается в более глубокой разработке.

Если говорить о коклюше, то на настоящее время не существует подобной градации для антител к этой инфекции, даже понятие «протективного титра»

является весьма размытым. Вследствие этого мы приняли решение сделать тест на антитела к коклюшу качественным, поскольку введение условных градаций «высокий титр» (например, более 1:640 или 1:1280) или «низкий титр» (1:20 или 1:40?) не добавило бы информативности, но усложнило бы процедуру анализа и разработку теста.

Результаты проведенных исследований противоинфекционного иммунитета в детской популяции г. Перми позволяют сделать некоторые заключения об ее иммуноструктуре, несмотря на небольшой объем выборки. Прежде всего бросается в глаза низкий уровень серопротекции: менее 50%. Очевидно, что целевой показатель в 80% не достигнут. Полученные данные вполне соотносятся с данными И.В. Фельдблюм с соавт. [33] 2005 года и результатами серологического мониторинга, осуществляемого региональными управлениями Роспотребнадзора:

в Приморском крае в 2014 г. было выявлено 60% серопозитивных лиц, в Иркутской области – 33%, в Пермском крае в 2013 г. – 43%, в Калмыкии в период с 2011 по 2013 гг. процент серопозитивных лиц колебался от 2% до 50% в зависимости от района, в котором проводился мониторинг. Как уже было сказано, понятие «протективный титр» применительно к коклюшу весьма условно, однако низкие показатели титров агглютининов в ряде регионов нашей страны призывают еще раз обратить внимание на эффективность вакцинопрофилактики этой инфекции.

Другими значимыми особенностями возрастной иммуноструктуры являются достоверное снижение титров агглютининов у детей дошкольного возраста, а также возрастание СГТ и концентрации антител к коклюшному токсину у детей старшего возраста. Полученные результаты в полной мере соответствуют литературным данным. Так, в работе Зайцева с соавт. [9] показано снижение концентраций IgG к комплексу антигенов B. pertussis с 5-летнего возраста и достижением минимума у детей 9-11 лет. Аналогичная динамика наблюдалась в работе [29], где было показано значительное падение уровня противококлюшных антител спустя 4 года после ревакцинации. Эти данные свидетельствуют о скрытой циркуляции возбудителя коклюша в детской популяции [13, 33, 35]. Подростки и взрослые болеют коклюшем в стертых формах, однако они являются источником заражения для невакцинированных детей в возрасте до года, для которых коклюш наиболее опасен. Особенно любопытным является возрастание антител к коклюшному токсину лишь у детей 11-12 лет. В более младших группах (1,5 года, 6 лет) уровень антител против КТ не отличается от довакцинального и даже ниже.

Такое полное «безразличие» уровня антител к КТ к вакцинации и ревакцинации цельноклеточной вакциной свидетельствует о том, что она не вызывает продукции антител такой направленности. Подобное явление – не новость в области вакцинопрофилактики само по себе: известно, что различные виды клеточных вакцины могут кардинально различаться по своему влиянию на продукцию антител к КТ [13, 61].

Однако, оно заставляет всерьез взглянуть на вопрос о методах контроля поствацинального иммунитета к коклюшу и о пригодности ИФА для этой цели. Именно ИФА на антитела к коклюшному токсину, либо к смеси коклюшный токсин+филаментозный гемагглютинин используют чаще всего в ходе серомониторинга. Однако крайне низкая продукция антитоксина заставляет усомниться в целесообразности такого выбора метода диагностики. Кроме того, стоит напомнить, что до сих пор не определен конкретный протективный антиген для коклюшной инфекции.

Таким образом, разработанная тест-система позволяет оперативно и с минимальными трудозатратами осуществлять единовременную оценку состояния поствакцинального иммунитета к коклюшу, дифтерии и столбняку в одной постановке. Описанные конструктивные преимущества характеризуют разработанную иммунодиагностическую систему как доступную, удобную и эффективную альтернативу современным методам серологической диагностики.

Перспективы дальнейшей разработки темы связаны с увеличением аналитической эффективности метода, а именно повышением воспроизводимости, чувствительности и специфичности в сопоставлении с референсными тестсистемами. Возможными путями достижения этих целей является автоматизация процесса синтеза твердофазного реагента, применение методов амплификации сигнала при помощи конъюгирования углеродных наночастиц с дополнительной ферментной меткой.

ВЫВОДЫ

Разработана технология синтеза твердофазного реагента на основе 1.

нитроцеллюлозной мембраны с сорбированными антигенами возбудителей коклюша, дифтерии и столбняка. Подобраны концентрации анти-лигандов, определена наиболее эффективная процедура блокирования, отработаны условия постановки анализа, обеспечивающие возможность детекции антител к каждому из целевых антигенов в пределах диагностически значимых диапазонов их концентраций.

Сконструирована иммунодиагностическая система в формате дотиммуноанализа на тест-полосках, позволяющая производить единовременную детекцию антител к дифтерийному и столбнячному анатоксинам, а также к цельноклеточному коклюшному антигену в образцах сывороток крови при суммарной длительности анализа менее трех часов (от подготовки проб до получения результата).

Установлено, что воспроизводимость результатов тест-системы 3.

соответствует принятым стандартам (коэффициент вариации менее 15%).

Подтверждено наличие параллелизма детекции противодифтерийных и противостолбнячных антител при помощи международных стандартов антитоксинов. Продемонстрирован высокий уровень конкордантности результатов дот-иммуноанализа и референсных серологических тестов.

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ

– акрилонитрилбутадиенстирол ABS

– площадь под кривой (area under curve) AUC БСА – бычий сывороточный альбумин ДИ – доверительный интервал ЗФР – забуференный фосфатами физраствор ЗФРТ – забуференный фосфатами физраствор с твином-20 ИОДРС – измерение обратного динамического светорассеяния КВ – коэффициент вариации КТ – коклюшный токсин МЕ – международные единицы МОЕ – международные оптические единицы ОП – оптическая плотность ПААГ – полиакриламидный гель РА – реакция агглютинации СГТ – средняя геометрическая обратных титров агглютининов СЛТ – средняя логарифмов обратных титров антител ФГА – филаментозный гемагглютинин

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Антипов, О.Н. Проблемы организации непрерывного контроля 1.

температурного режима при хранении и транспортировании вакцин / О.Н.

Антипов, И.В. Михеева, А.А. Мельникова // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. – 2009. – №4. – С. 70–72.

Басов, А.А. Эпидемический процесс коклюша в Российской Федерации в 2.

условиях массовой специфической профилактики / А.А. Басов, А.С.

Пименова, О.В. Цвиркун и др. // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. – 2012. – № 4. – С. 23–28.

Бочкова, М.С. Решение проблемы неспецифических взаимодействий в 3.

твердофазном неинструментальном дот–иммуноанализе / М.С. Бочкова, В.П.

Тимганова, М.Б. Раев // Доклады академии наук. – 2013. – Т.449. – №1. – С.101–103.

Буркин, М.А. Иммуноферментное определение столбнячного токсина и 4.

анатоксина с использованием моноклональных антител / М.А. Буркин, В.В.

Свиридов, О.В. Перелыгина // Прикладная биохимия и микробиология. – 2004. – Т.40. – №4. – С.478–484.

Воронов, А.В. Выработка требований к логистике термолабильных 5.

лекарственных препаратов на 4 уровне «холодовой цепи» / А.В. Воронов, А.В. Кухаренко, С.Ю. Балдин и др. // Фундаментальные исследования. – 2015. – № 2–1. – С. 63–67.

Воронок, В.М. Состояние и перспективы профилактики инфекционных 6.

заболеваний в Приморском крае / В.М. Воронок, Е.И. Аббасова, И.П.

Люкшинова и др. // Здоровье. Медицинская экология. Наука. – 2014. – Т. 58.

– № 4. – С. 132–137.

Вязникова, Т.В. Конструирование иммуноферментных тест–систем на 7.

основе авидин–биотинового взаимодействия для определения антител:

дифтерийных, столбнячных, коклюшных, анти–HBs: Дис.... канд. мед. наук / Т.В. Вязникова. – Пермь, 2007. — 135 с.

8. Длаксин, Д.Ю. Метод стереоспецифического анализа и метод получения конъюгата для стереоспецифического анализа [Электронный ресурс] – 1997.

– Режим доступа: http://ru-patent.info/20/85-89/2089912.html Зайцев, Е.М. Гуморальный иммунитет к коклюшу и его уровень среди 9.

населения / Е.М. Зайцев, И.К. Мазурова, Л.И. Краснопрошина и др. // ЖМЭИ.

– 2009. –№1. – С. 56–58.

10. Ильина, С.В. Техногенное загрязнение окружающей среды и эффективность вакцинопрофилактики у детского населения / С.В. Ильина, Е.Д. Савилов // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. – 2009. – № 4. – С. 57–62.

11. Инфекционная заболеваемость в Российской Федерации за январь-декабрь 2014 г. [Электронный ресурс] – 2014. Режим доступа: http: //rospotrebnadzor.ru /activities /statistical– materials/ statictic_details. php ? ELEMENT_ID=2938.

12. Краева, Л.А. Современные подходы к комплексным лабораторным исследованиям на дифтерию / Л.А. Краева, Е.А. Алексеева, Г.Я. Ценева и др.

// Инфекция и иммунитет. – 2012. – Т.2. – №4. – С. 729–734.

13. Курова, Н.Н. Противококлюшный иммунитет у детей в городах Северо– западного федерального округа с разной численностью населения / Н.Н.

Курова, Г.Я. Ценева, А.Б. Жебрун // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. – 2013. – № 4. – С. 33–37.

14. Лялина, Л.В. Интенсивность эпидемического процесса краснухи и эффективность вакцинации на территориях с различным уровнем загрязнения атмосферного воздуха / Л.В. Лялина, А.В. Тулисов, А.П. Щербо // Профилактическая и клиническая медицина. – 2006. – № 2. – С. 42–45.

15. Макарова, В.Г. Иммунологический профиль и состояние поствакцинального иммунитета к инфекциям, управляемым средствами иммунопрофилактики у детей в условиях комбинированной аэрогенной экспозиции химическими веществами техногенного происхождения / В.Г. Макарова, О.Ю. Устинова, О.В. Долгих и др. // Здоровье населения и среда обитания. – 2013. – № 11. – С. 27–29.

16. Методические указания. МУ 3.1.2943–11. Профилактика инфекционных болезней. Организация и проведение серологического мониторинга состояния коллективного иммунитета к инфекциям, управляемым средствами специфической профилактики (дифтерия, столбняк,коклюш, корь, краснуха, эпидемический паротит,полиомиелит, гепатит b)". – М.:

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия населения, 2011. – 24 с.

17. Николаева, А.М. Конструирование комбинированных вакцин и иммуноферментных тест–систем для профилактики и диагностики управляемых инфекций (дифтерия, столбняк, коклюш, гепатит B): Дис.... дра биол. наук / А.М. Николаева. – Пермь, 2003. — 258 с.

18. О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в

Российской Федерации в 2012 году: Государственный доклад. — М.:

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2013. — 176 с.

19. Полтавченко, А.Г. Бесприборная иммунодиагностика инфекционных заболеваний на основе высокодисперсных корпускулярных маркеров: дис. … докт. биол. наук / Полтавченко Александр Георгиевич. – Кольцово, 2008. – 311 с.

20. Раев, М.Б. Частицы коллоидного углерода в системах неинструментальной диагностики / М.Б. Раев // Клиническая лабораторная диагностика. – 2008. – №2. – С.45–48.

21. Раев, М.Б. Нанобиотехнологии в неинструментальной иммуноаналитике / М.Б. Раев; под общ. ред. В.А. Демакова – Екатеринбург: РИО УрО РАН, 2012.

– 140 с.

22. Раев, М.Б. Полуколичественное определение альфа–фетопротеина в системе неинструментального иммуноанализа / М.Б. Раев, М.С. Бочкова // Доклады академии наук. – 2012. – Т.444. – С.343–345.

23. Раев, М.Б. Неферментная тест–система для безынструментального определения антител к видоспецифическим белкам Yersinia pseudotuberculosis на основе наноразмерных углеродных частиц / М.Б. Раев, Н.Ф. Тимченко, М.С. Бочкова с соавт. // Доклады академии наук. – 2013. – Т.451. – №4. – С.1–4.

24. Раев, М.Б. Дот–аналитическая система определения антител к Treponema pallidum / М.Б. Раев, М.С. Бочкова, П.В. Храмцов // Доклады академии наук.

– 2014. – Т.457. – №4. – С.491–493.

25. Раев, М.Б. Иммунохроматографическая система для диагностики псевдотуберкулеза /М.Б. Раев, М.С. Бочкова, П.В. Храмцов и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины – 2014. – Т. 158. – №12. – С. 804.

26. Раев, М.Б. Исследование размеров углеродных наночастиц, ковалентно функционализированных белковыми макромолекулами / М.Б. Раев, П.В.

Храмцов, М.С. Бочкова // Российские нанотехнологии. – 2015. – Т.10. – №1– 2. – С. 116–122.

27. Резолюция региональных совещаний по совершенствованию эпидемиологического надзора за корью и краснухой. – М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия населения. – 2010. – 6 с.

28. Савилов, Е.Д. Теоретические аспекты управления инфекционной заболеваемостью в условиях техногенного загрязнения окружающей среды. / Е.Д. Савилов // Сибирский научный медицинский журнал. – 2008. – Т.28. – № 1. – С. 43–46.

29. Семенова, Л.В. Мониторинг иммуноструктуры детского населения к коклюшу в свердловской области / Л.В. Семенова, В.В. Романенко, Т.В.

Скорюнова // Инфекция и иммунитет. – 2012. – №1–2. – С. 53.

30. Степаненко, Л.А. Состояния специфического иммунитета к управляемым инфекциям у детей (на примере кори и полиомиелита) в условиях воздействия техногенной нагрузки / Л.А. Степаненко, С.В. Ильина, Е.Д.

Савилов // Бюллетень Восточно–Сибирского научного центра Сибирского отделения Российской академии медицинских наук. – 2007. – № 53. – С. 66– 68.

31. Таточенко, В.К. Коклюш - недоуправляемая инфекция / В.К. Таточенко // Вопросы современной педиатрии. – 2014. – Т. 13. – № 2. – С. 78-82.

32. Устинова, О.Ю. Поствакцинальный иммунитет к дифтерии, кори, столбняку, коклюшу у детей в условиях воздействия химических факторов риска среды обитания / О.Ю. Устинова, В.Г. Макарова, О.В. Долгих // Анализ риска здоровью. – 2013. – №2. – С. 27–38.

33. Фельдблюм, И.В. Характеристика эпидемического процесса коклюша и состояние популяционного иммунитета детского населения на территории Пермской области / И.В. Фельдблюм, Е.В. Гореликова, Е.В. Сармометов и др.

// Эпидемиология и вакцинопрофилактика. – 2005. – № 5. – С. 30–33.

34. Фесенко, М.В. Протективная эффективность пертактин–содержащих бесклеточных АКДС–вакцин / М.В. Фесенко, Л.С. Намазова // Вопросы современной педиатрии. – 2008. – №2. – С. 77–81.

35. Фисенко, Е.Г. Иммуноструктура к коклюшу среди детского населения г.

Минска / Е.Г. Фисенко, В.А. Логотько, И.Н. Глинская и др. // Медицинский журнал. – 2012. – № 3 – С. 128–131.

36. Харит, С.М. Специфическая профилактика коклюша: проблемы и перспективы / С.М. Харит, О.Л. Воронина, Е.А. Лакоткина и др. // Вопросы современной педиатрии. – 2007. – Т. 6. – № 2. – С. 71–77.

37. Харит, С.М. Вакцинация: современные возможности снижения заболеваемости / С.М. Харит // Фарматека. – 2014. – № 3. – С. 8-13.

38. Храмцов, П.В. Диагностическая система для комплексной персонализированной оценки эффективности вакцинации / П.В. Храмцов // Российский иммунологический журнал. – Т. 8. – №3. – 2014. – С.926–929.

39. Храмцов, П.В. Применение диагностикума на основе функционализированных углеродных наночастиц для мониторинга аффинной очистки иммуноглобулинов / П.В. Храмцов, М.С. Бочкова, М.Б.

Раев // Прикладная биохимия и микробиология. – 2014. – №6. – C. 612–618.

40. Храмцов, П.В. Система индивидуальной оценки напряженности иммунитета к коклюшу / П.В. Храмцов, М.С. Бочкова, М.Б. Раев. // Цитокины и воспаление. – 2014. – Т.13. – №1. – С.128.

41.Amirthalingam, G. Pertussis immunisation and control in England and Wales, 1957 to 2012: a historical review [Электронный ресурс] / G. Amirthalingam, S. Gupta,

H. Campbell // Eurosurveillance. – 2013. – V.18. – art. no. 4. – Режим доступа:

http://www.eurosurveillance.org/ViewArticle.aspx?ArticleId=20587.

42. Ashworth, L. Antigens in whooping cough vaccine and antibody levels induced by vaccination of children / L. Ashworth, A. Robinson, L. Irons et al. // Lancet. – 1983.

– V.2. – P. 878–881.

43. Aybay, C. Development of a Diagnostic and Screening Elisa System for Measuring Tetanus Antitoxoid Levels / C. Aybay, R. Karakus, A. Gundogdu // Turkish Journal of Medical Sciences. – 2003. – V. 33. – P. 289–294.

44. Baker, J. Antibody response to Bordetella pertussis antigens after immunization with American and Canadian whole–cell vaccines / J. Baker, S. Halperin, K.

Edwards et al. // Journal of Pediatrics. – 1992. – V.121. – P. 523–527.

45. Balmer, P. The Immunological Basis for Immunization Series: Tetanus / P. Balmer, R. Borrow, M. Roper – Geneva: WHO Document Production Services, 2007. – 52 p.

46. Baraff, L. Immunologic response to early and routine DTP immunization in infants / L. Baraff, R. Leake, D. Burstyn // Pediatrics. – 1984. – V.73. – P. 3742.

47. Barkoff, A. Appearance of Bordetella pertussis strains not expressing the vaccine antigen pertactin in Finland / A. Barkoff, J. Mertsola, S. Guillot et al. // Clinical and Vaccine Immunology. – 2012. – V.19. – P.1703–1704.

48. Baslund, B. A rapid and semi–quantitative method for the detection of autoantibodies by multiple spot immunoassay / B. Baslund, J. Wieslander //, Journal of Immunological Methods. – 1994. – V. 169. – P. 183–193.

49. Blazkova, M. Immunochromatographic colloidal carbon–based assay for detection of methiocarb in surface water / M. Blazkova, B. Mickova–Holubova, P. Rauch et al. // Biosensors and Bioelectronics. – 2009. – V.25. – P. 753–758.

50. Blakov, M. Immunochromatographic strip test for detection of genus Cronobacter / M. Blakov, B. Javrkov, L. Fukal et al. // Biosensors and Bioelectronics. – 2011. – V. 26. – P. 2828–2834.

51. Callahan, J. Testing the Null Hypothesis for a Specified Difference — The Right Way to Test for Parallelism / J. Callahan, N. Sajjadi // BioProcessing Journal. – 2003. –V.2. – P. 71–77.

52. Castro, A. Novel Point–of–Care Test for Simultaneous Detection of Nontreponemal and Treponemal Antibodies in Patients with Syphilis / A. Castro, J. Esfandiari, S. Kumar et al. // Journal of Clinical Microbiology. – 2010. – V.48.

– P. 4615–4619.

53. Centers for Disease Control and Prevention. Pertussis. Surveillance and Reporting ресурс]. – – Режим доступа:

[Электронный 2015.

http://www.cdc.gov/pertussis/surv-reporting.html.

54. Cherry, J. A search for serologic correlates of immunity to Bordetella pertussis cough illnesses / J. Cherry, J. Gornbein, U. Heininger et al. // Vaccine. – 1998. – V. 16. – P. 1901–1906.

55. Cherry, J. Pertussis: Challenges Today and for the Future / J. Cherry // PLoS Pathogens. – 2013. – V. 9. – P. e1003418

56. Coelho, J. A multianalyte Dot–ELISA for simultaneous detection of malaria, Chagas disease, and syphilis–specific IgG antibodies / J. Coelho, I. Soares, E. de Lemos et al. // Diagnostic Microbiology and Infectious Disease. – 2006. – V.58. – P. 223 – 230.

57. Cohen, J. A coefficient of agreement for nominal scales / J. Cohen // Educational and Psychological Measurement. – 1960. – V.20. – P. 37–46.

58. Cortese, M. A "New Age" in Pertussis Prevention: New Opportunities Through Adult Vaccination / M. Cortese, A. Baughman, K. Brown et al. // American Journal of Preventive Medicine. – 2007. – V. 32. – №3. – P. 177–185.

59. Craig, W. Application of checkerboard immunoblotting (CBIB) to the detection of anti–viral IgG in human serum / W. Craig, S. Poulin, P. Dorsett et al. // Journal of Clinical Laboratory Analysis. – 1993. – V.7. – P. 203–208.

60. Crowther, J.R. The ELISA Guidebook. Springer Protocols: Methods in Molecular Biology / J.R. Crowther. – New Jersey: Humana Press, 2009. – 566 p.

61. Edwards, K. Differences in Antibody Response to Whole–Cell Pertussis Vaccines / K. Edwards, M. Decker, N. Halsey // Pediatrics. – 1991. – V.88. – P. 1019–1023.

62. Ekins, R. The precision profile: its use in assay design, assessment and quality control / R. Ekins // Immunoassays for Clinical Chemistry / Churchill Livingstone.

– Edinburgh, 1983. – P. 76–105.

63. Finger, H. Serological diagnosis of whooping cough / H. Finger, W. von Koenig // Developments in biological standardization. – 1985. – V.61. – P. 331–335.

64. Gabutti, G. Pertussis: A Review of Disease Epidemiology Worldwide and in Italy / G. Gabutti, M. Rota // International Journal of Environmental Research and Public Health. – 2012. – V.9. – P. 4626–4638.

65. Galazka M. The Immunological Basis for Immunization Series: Pertussis / M.

Galazka – Geneva: WHO Document Production Services, 1993. – 20 p.

66. Galazka, A. Resurgence of diphtheria / A. Galazka, S. Robertson, G. Oblapenko // European Journal of Epidemiology. – 1995. – V.11. – P. 95–105.

67. Gannot, G. Layered Peptide Arrays / G. Gannot, M. Tangrea, R. Chuaqui et al. // Annals of the New York Academy of Sciences. – 2007. – V.1098. – P. 451–453.

68. Ghosh, N. Serodiagnosis of Human Cutaneous Anthrax in India Using an Indirect Anti–Lethal Factor IgG Enzyme–Linked Immunosorbent Assay / N. Ghosh, I.

Tomar, H. Lukka et al. // Clinical and Vaccine Immunology: CVI. – 2013. – V. 20.

– №2. – P. 282–286.

69. Grandjean, P. Serum Vaccine Antibody Concentrations in Children Exposed to Perfluorinated Compounds / P. Grandjean, E. Andersen, E. Budtz–Jrgensen, et al.

// Journal of the American Medical Association. – 2012. – V. 307. – 4. – P.391– 397.

70. Granstrm, M. Serological diagnosis of whooping cough by an enzyme–linked immunosorbent assay using fimbrial hemagglutinin as antigen / M. Granstrm, G.

Granstrm, A. Lindfors et al. // The Journal of Infectious Diseases. – 1982. – V.146. – P. 741–745.

71. Granum, B. Pre–natal exposure to perfluoroalkyl substances may be associated with altered vaccine antibody levels and immune–related health outcomes in early childhood / B. Granum, L. Haug, E. Namork et al. // Journal of Immunotoxicology.

– 2013. – V. 10. – №4. – P. 373–379.

72. Greaves, M. A comparison of the sensitivity of cell cultures to diphtheria toxin by the dye–uptake method / M. Greaves, C. Potter, M. McEntegart // Journal of Medical Microbiology. – 1971. – V.4. – P. 519–527.

73. Gupta, R. Comparative analysis of tetanus antitoxin titers of sera from immunized mice and guinea pigs determined by toxin neutralization test and enzyme–linked immunosorbent assay / R. Gupta, G. Siber // Biologicals: Journal of the International Association of Biological Standardization. – 1994. – V. 22. – P. 215– 219.

74. Hagstrm, A. Sensitive Detection of Norovirus Using Phage Nanoparticle Reporters in Lateral–Flow Assay / A. Hagstrm, G. Garvey, A. Paterson et al. // PLoS ONE. – 2015. – V.10. – e012657.

75. Hawkes, R. A dot–immunobinding assay for monoclonal and other antibodies / R.

Hawkes, E. Niday, J. Gordon //Analytical Biochemistry. – 1982. – V. 119. – P.

142–147.

76. Hegerle, N. Evolution of French Bordetella pertussis and Bordetella parapertussis isolates: increase of Bordetellae not expressing pertactin / N. Hegerle, A. Paris, D.

Brun et al. // Clinical Microbiology and Infection. – 2012. – V.18. – P. E340–E346.

77. Heilmann, C. Reduced Antibody Responses to Vaccinations in Children Exposed to Polychlorinated Biphenyls / C. Heilmann, P. Grandjean, P. Weihe et al. // Reduced Antibody Responses to Vaccinations in Children Exposed to Polychlorinated Biphenyls. – 2006. – PLOS Medicine. – V. 3. – №8. – e311.

78. Hellwig, S. Crucial Role of Antibodies to Pertactin in Bordetella pertussis Immunity / S. Hellwig, M. Rodriguez, G. Berbers et al. // Journal of Infectious Diseases. – 2003. – V. 188. – P. 738–742.

79. Hendriksen, C. The toxin binding inhibition test as a reliable in vitro alternative to the toxin neutralization test in mice for the estimation of tetanus antitoxin in human sera / C. Hendriksen, J. Gun, J. Nagel et al. // Journal of Biological Standardization.

– 1988. – V. 16. – P. 287–297.

80. Hewlett, E. Serological correlates of immunity to Bordetella pertussis / E. Hewlett, S. Halperin // Vaccine. – 1998. – V. 16. – P. 1899–1900.

81. Higgs R. Immunity to the respiratory pathogen Bordetella pertussis / R. Higgs, S.

Higgins, P. Ross et al. // Mucosal Immunology. – 2012. –V. 5. – P. 485–500.

82. Huang, H. Epidemiological features of pertussis resurgence based on community populations with high vaccination coverage in China / H. Huang, T. Zhu, C. Gao et al. // Epidemiology & Infection. – 2015. – V. 143. – P. 1950–1956.

83. Immunoassays: A Practical Approach. / ed. by J. Gosling. – New York: Oxford University Press, 2000. – 304 p.

84. Increase of pertussis incidence in 2010 to 2012 after 12 years of low circulation in Spain [Электронный ресурс] // Eurosurveillance. – 2014. – V.19. – art. no. 2. –

Режим доступа:

http://www.eurosurveillance.org/ViewArticle.aspx?ArticleId=20875.

85. Jgi, P. Seroprevalence of IgG antibodies to pertussis toxin in children and adolescents in Estonia / P. Jgi, M. Oona, K. Toompere et al. // Vaccine. – 2014. – V. 32. – P. 5311–5315.

86. Jonkman, J. Equivalence Testing for Parallelism in the Four–Parameter Logistic Model / J. Jonkman, K. Sidik // Journal of Biopharmaceutical Statistics. – 2009. – V.19. – P. 818–837.

87. Khlebtsov, N. Analytical and Theranostic Applications of Gold Nanoparticles and Multifunctional Nanocomposites / N. Khlebtsov, V. Bogatyrev, L. Dykman et al.

// Theranostics. – 2013. – V.3. – P. 167–180.

88. Kristiansen, M. Improved ELISA for determination of anti–diphtheria and/or anti– tetanus antitoxin antibodies in sera / M. Kristiansen, H. Aggerbeck, I. Heron // APMIS. – 1997. – V.105. – P. 843–853.

89. Laemmli, U. Cleavage of Structural Proteins during the Assembly of the Head of Bacteriophage T4 / U. Laemmli // Nature. – 1970. – V.227. – P. 680–685.

90. Lawrence, A. Efficacy of enzyme–linked immunosorbent assay for rapid diagnosis of Bordetella pertussis infection / A. Lawrence, J. Paton // Journal of Clinical Microbiology. – 1987. – V.25. – P. 2102–2104.

91. Layton, G. A micro–enzyme–linked immunosorbent assay (ELISA) and radioimmunosorbent technique (RIST) for the detection of immunity to clinical tetanus / G. Layton // Medical Laboratory Science. – 1980. – V.37. – P.323–329.

92. Levaditi, C. Socit de Biologie. – 1913. – V.74. – P. 614.

93. Liko, J. Priming with Whole–Cell versus Acellular Pertussis Vaccine / J. Liko, S.

Robison, P. Cieslak // New England Journal of Medicine. – 2013. – V. 368. –P.

581–582.

94. Linares, E. Enhancement of the Detection Limit for Lateral Flow Immunoassays:

Evaluation and Comparison of Bioconjugates / E. Linares, L. Kubota, J. Michaelis et al. // Journal of Immunological Methods. – 2012. – V. 375. – P. 264–270.

95. Lonnberg, M. Quantitative Detection in the Attomole Range for Immunochromatographic Tests by Means of a Flatbed Scanner / M. Lonnberg, J.

Carlsson // Analytical Biochemistry. – 2001. – V. 293. – P. 224–231.

96. Lonnberg, M. Ultra–Sensitive Immunochromatographic Assay for Quantitative Determination of Erythropoietin / M. Lonnberg, M. Drevin, J. Carlsson // Journal of Immunological Methods. – 2008. – V. 339. – P. 236–244.

97. Marr, N. Protective activity of the Bordetella pertussis BrkA autotransporter in the murine lung colonization model / N. Marr, D. Oliver, V. Laurent et al. // Vaccine.– 2008. – V. 26. – P. 4306–4311.

98. Medical Research Council. Vaccination against whooping cough: relation between protection in children and results of laboratory tests. British Medical Journal. – 1956. – V.2. – P. 454–462.

99. Melville–Smith, M. A comparison of enzyme–linked immunosorbent assay (ELISA) with the toxin neutralization test in mice as a method for the estimation of tetanus antitoxin in human sera / M. Melville–Smith, V. Seagroatt, J. Watkins // Journal of Biological Standardization. – 1983. – V. 11. – P. 137–144.

100. Melville–Smith, M. Estimation of Corynebacterium diphtheriae antitoxin in human sera: a comparison of an enzyme–linked immunosorbent assay with the toxin neutralization test / M. Melville–Smith, A. Balfour // Journal of Medical Microbiology. – 1988. – V.25. – P.279–283.

101. Mertsola, J. Serologic diagnosis of pertussis: comparison of enzyme–linked immunosorbent assay and bacterial agglutination / J. Mertsola, O. Ruuskanen, T.

Kuronen et al. // The Journal of Infectious Diseases. – 1983. – V.147. – P. 252– 257.

102. Miller, J. An agglutinative reaction for hemophilus pertussis / J. Miller, R.

Silverberg, T. Saito et al. // The Journal of Pediatrics. – 1943. – V. 22. – P. 644– 651.

103. Mills, K. Immunity to Bordetella pertussis / K. Mills // Microbes and Infection. – 2001. – V. 3. – P. 655–677.

104. Miyamura, K. Micro cell culture method for determination of diphtheria toxin and antitoxin titres using VERO cells / K. Miyamura, S.Nishio, A. Ito et al. // Journal of Biological Standardization. – 1974. – V. 2. – P. 189–201.

105. Mujawar, L. Rapid mastitis detection assay on porous nitrocellulose membrane slides / L. Mujawar, A. Moers, Norde W. et al. // Analytical and Bioanalytical Chemistry. – 2013. – V. 405. – P. 7469–7476.

106. Munnik, T. Lipid–binding analysis using a fat blot assay / T. Munnik, M.

Wierzchowiecka // Methods in molecular biology. – 2013. – V. 1009. – P. 253– 259.

107. Nagel, J. Serum IgA antibody to Bordetella pertussis as an indicator of infection / J. Nagel, E. Poot–Scholtens // Journal of Medical Microbiology. – 1983. – V.16. – P. 417–426.

108. Nauta, J. On the relationship between mean antibody level, seroprotection and clinical protection from influenza / J. Nauta, W. Beyer, A. Osterhaus // Biologicals. – 2009. – V.37. – P. 216–221.

109. Nick, A. The ROC ‘n’ role of the multiplex assay for early detection of ovarian cancer / A. Nick, A. Sood. // Nature Reviews Clinical Oncology. – 2008. – V. 5. – P. 568–569.

110. Nitrocellulose Membrane, 0.45 µm [Электронный ресурс]. – 2015. – Режим доступа: http://www.bio–rad.com/en–us/product/nitrocellulose–membrane–0– 45–um#.

111. Noguera, P. Carbon nanoparticles in lateral flow methods to detect genes encoding virulence factors of Shiga toxin–producing Escherichia coli / P. Noguera, G.

Posthuma–Trumpie, M. van Tuil et al. // Analytical and Bioanalytical Chemistry.

– 2011. – V.399. – P. 831–838.

112. Novick, S. A Bayesian Approach to Parallelism Testing in Bioassay / S. Novick, H. Yang, J. Peterson // Statistics in Biopharmaceutical Research. – 2012. – V. 4. – P. 357–374.



Pages:     | 1 | 2 || 4 |
 

Похожие работы:

«Вафула Арнольд Мамати РАЗРАБОТКА ЭЛЕМЕНТОВ ТЕХНОЛОГИИ ВЫРАЩИВАНИЯ ПАПАЙИ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ЗДОРОВОГО ПОСАДОЧНОГО МАТЕРИАЛА И ЭКСТРАКТОВ С БИОПЕСТИЦИДНЫМИ СВОЙСТВАМИ ДЛЯ ЗАЩИТЫ ЕЕ ОТ ВРЕДНЫХ ОРГАНИЗМОВ Специальности: 06.01.07 – защита растений 06.01.01 – общее земледелие и растениеводство Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных...»

«Цвиркун Ольга Валентиновна ЭПИДЕМИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС КОРИ В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКИ. 14.02.02 – эпидемиология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: заслуженный деятель науки РФ, лауреат Государственной премии СССР профессор, доктор медицинских наук Ющенко Галина Васильевна Москва – 20 Содержание...»

«Ядрихинская Варвара Константиновна ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ОСТРЫХ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ В Г. ЯКУТСКЕ И РЕСПУБЛИКЕ САХА (ЯКУТИЯ) 03.02.08 – экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель кандидат биологических наук, доцент М.В. Щелчкова Якутск 2015...»

«Шумилова Анна Алексеевна ПОТЕНЦИАЛ БИОРАЗРУШАЕМЫХ ПОЛИГИДРОКСИАЛКАНОАТОВ В КАЧЕСТВЕ КОСТНОПЛАСТИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ Специальность 03.01.06 – биотехнология (в том числе бионанотехнологии) ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук Шишацкая Екатерина Игоревна Красноярск...»

«Любас Артем Александрович ПАЛЕОРЕКОНСТРУКЦИЯ СРЕДЫ ОБИТАНИЯ ПРЕСНОВОДНЫХ МОЛЛЮСКОВ В НЕОГЕН-ЧЕТВЕРТИЧНЫХ ВОДОТОКАХ С ЭКСТРЕМАЛЬНЫМИ ПРИРОДНЫМИ УСЛОВИЯМИ Специальность 25.00.25 – геоморфология и эволюционная география Диссертация на соискание ученой степени кандидата географических наук Научный руководитель: доктор биологических наук...»

«Якимова Татьяна Николаевна Эпидемиологический надзор за дифтерией в России в период регистрации единичных случаев заболевания 14.02.02 эпидемиология диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор...»

«Ульянова Онега Владимировна МЕТОДОЛОГИЯ ПОВЫШЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ВАКЦИН НА МОДЕЛИ ВАКЦИННЫХ ШТАММОВ BRUCELLA ABORTUS 19 BA, FRANCISELLA TULARENSIS 15 НИИЭГ, YERSINIA PESTIS EV НИИЭГ 03.02.03 – микробиология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант:...»

«Моторыкина Татьяна Николаевна ЛАПЧАТКИ (РОД POTENTILLA L., ROSACEAE) ФЛОРЫ ПРИАМУРЬЯ И ПРИМОРЬЯ 03.02.01 – Ботаника Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, старший научный сотрудник Н.С. Пробатова Хабаровск Содержание Введение... Глава 1. Природные...»

«Будилова Елена Вениаминовна Эволюция жизненного цикла человека: анализ глобальных данных и моделирование 03.02.08 – Экология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант доктор биологических наук, профессор А.Т. Терехин Москва 2015 Посвящается моим родителям, детям и мужу с любовью. Содержание Введение.. 5 1. Теория эволюции жизненного цикла. 19...»

«Куяров Артём Александрович РОЛЬ НОРМАЛЬНОЙ МИКРОФЛОРЫ И ЛИЗОЦИМА В ВЫБОРЕ ПРОБИОТИЧЕСКИХ ШТАММОВ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У СТУДЕНЧЕСКОЙ МОЛОДЕЖИ СЕВЕРА 03.02.03 – микробиология 03.01.06 – биотехнология (в том числе бионанотехнологии) Диссертация на соискание учёной степени кандидата...»

«Шинкаренко Андрей Семенович Формирование безопасного и здорового образа жизни школьников на современном этапе развития общества Специальность 13.00.01– общая педагогика, история педагогики и образования Диссертация на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Научные...»

«БАБЕШКО Кирилл Владимирович ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕДПОЧТЕНИЯ СФАГНОБИОНТНЫХ РАКОВИННЫХ АМЕБ И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ДЛЯ РЕКОНСТРУКЦИИ ГИДРОЛОГИЧЕСКОГО РЕЖИМА БОЛОТ В ГОЛОЦЕНЕ Специальность 03.02.08 – экология (биология) диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат биологических наук Цыганов...»

«Шапурко Валентина Николаевна РЕСУРСЫ И ЭКОЛОГИЧЕСКОЕ КАЧЕСТВО ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ (НА ПРИМЕРЕ БРЯНСКОЙ ОБЛАСТИ) Специальность 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«Брит Владислав Иванович «Эффективность методов вакцинации против ньюкаслской болезни в промышленном птицеводстве» Специальность: 06.02.02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидат ветеринарных наук Научный руководитель:...»

«Сафранкова Екатерина Алексеевна КОМПЛЕКСНАЯ ЛИХЕНОИНДИКАЦИЯ ОБЩЕГО СОСТОЯНИЯ АТМОСФЕРЫ УРБОЭКОСИСТЕМ Специальность 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«Хохлова Светлана Викторовна ИНДИВИДУАЛИЗАЦИЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ РАКОМ ЯИЧНИКОВ 14.01.12-онкология ДИССЕРТАЦИЯ На соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: Доктор медицинских наук, профессор Горбунова В.А Москва 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ Введение Глава 1. Обзор литературы 1.1. Общая характеристика рака яичников 1.1.1. Молекулярно-биологические и...»

«БРИТАНОВ Николай Григорьевич ГИГИЕНИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПЕРЕПРОФИЛИРОВАНИЯ ИЛИ ЛИКВИДАЦИИ ОБЪЕКТОВ ПО ХРАНЕНИЮ И УНИЧТОЖЕНИЮ ХИМИЧЕСКОГО ОРУЖИЯ 14.02.01 Гигиена Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор...»

«ШУБНИКОВА ЕЛЕНА ВЛАДИМИРОВНА ВЛИЯНИЕ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ И ФОРМ АДАПТИВНОЙ ИЗМЕНЧИВОСТИ НА ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ПАТОГЕННЫХ БУРКХОЛЬДЕРИЙ К ХИМИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИМ ПРЕПАРАТАМ 03.02.03 –...»

«КОЖАРСКАЯ ГАЛИНА ВАСИЛЬЕВНА КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ МАРКЕРОВ КОСТНОГО МЕТАБОЛИЗМА У БОЛЬНЫХ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ 14.01.12 онкология Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научные руководители: доктор биологических наук, Любимова Н.В. доктор медицинских наук, Портной С.М. Москва, 2015 г....»

«СЕТДЕКОВ РИНАТ АБДУЛХАКОВИЧ РАЗРАБОТКА НОВЫХ СРЕДСТВ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЭШЕРИХИОЗОВ ТЕЛЯТ И ПОРОСЯТ 06.02.02 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология Диссертация на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук Научный консультант: доктор ветеринарных наук, профессор, заслуженный деятель науки РФ и РТ Юсупов...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.