WWW.KONF.X-PDF.RU
БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА - Авторефераты, диссертации, конференции
 


Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 6 |

«ФАРМАКОТОКСИКОЛОГИЯ И ЭФФЕКТИВНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ ТРИЛАКТОСОРБ В МЯСНОМ ПЕРЕПЕЛОВОДСТВЕ ...»

-- [ Страница 3 ] --

Представляет собой термофильные, гомоферментативные, факультативноанаэробные, грамположительные, не образующие спор палочки правильной формы. Интервал температуры роста составляет 20,0,055,0 °С; оптимум молоке 40,045,0 °С. Предельная кислотность достигаемая в 200,0350,0 °Т. В микропрепарате культура представлена крупными палочками с закругленными концами, размером (0,81,5) (2,020,0) мкм, расположены одиночно, цепочки различной длины, часто зернистые (рисунок 7).

Рисунок 7 Микропрепарат чистой культуры Lbc. debrueckii subsp. bulgaricus.

Увеличение 1500.

Lactobacillus acidophilus В-8634 (ацидофильная палочка) сильный кислотообразователь, антагонист патогенной и технически вредной микрофлоры. Представляет собой термофильные, гомоферментативные, факультативно-анаэробные грамположительные неспорообразующие палочки правильной формы. Интервал температуры роста составляет 20,055,0 °С; оптимум 37,045,0 °С. Предельная кислотность, достигаемая в молоке 180,0300,0 °Т. В микропрепарате культура представлена крупными прямыми палочками размером (0,61,5) (3,040,0) мкм, расположенные одиночно, парно или в виде коротких цепочек (рисунок 8).

Рисунок 8 – Микропрепарат чистой культуры Lbc. acidophilus.

Увеличение 1500.

2. Получение продуктов переработки сои – растительной основы кормовой добавки.

Для получения соевого молока и окары, как основы для производства кормовой добавки Трилактосорб использовали сою сорта Альба. Соевое зерно тщательно промывали водой, заливали 3–4 частями воды по отношению к массе сухого зерна и оставляется при температуре 16-17 °С на 12–14 часов.

Разбухшие зерна вновь промывали водой, размалывали на дробилке и вальцах, с добавлением воды (из расчета 0,5 литра на 1 кг сухого зерна).

Затем массу пропускали через вальцы. К размолотой массе добавляли воду температурой 20 °С из расчета 6 частей воды на 1 часть сухого зерна. Массу размешивали с водой, и выдерживали 30 мин, после чего фильтровали через сито с отверстиями, диаметр которых равен 0,2 мм. После фильтрования получали нерастворимый соевый остаток (окару) и суспензию (молоко). Затем соевое молоко и окару автоклавируют для разрушения антипитательных веществ и дальнейшего засева культуры.

3. Технология получения добавки.

Для получения кормовой добавки Трилактосорб использовали сухие бактериальные концентраты трех видов молочнокислых микроорганизмов (Streptococcus thermophiles В-2894, Lactobacillus delbruеckii subsp. bulgaricus В-6543, Lactobacillus acidophilus В-8634). Бактериальную культуры каждого микроорганизма, содержащая 1 ЕА жизнеспособных клеток, совместно активизировали в 1,0 л соевого молока в течение суток при температуре 4042 °С.

Далее в стерильных условиях от массы стерилизованной питательной среды (соевой окары) засевали на неё 10,0 % активизированной культуры. Засев микрофлоры на указанную питательную среду осуществляли при температуре 3840 °С, что способствует снижению температурного «шока» микроорганизмов. В процессе выращивания температуру субстрата повышали на 4-5 °С/ч, доводя до температуры не менее, чем до 5052 °С. Культивирование при данной температуре проводили в течение 67 ч, что позволяет ускорить процесс выращивания микроорганизмов, а кроме того, при последующем вводе микрофлоры в виде добавки в организм хозяина обеспечивает их высокую жизнеспособность [126]. По истечению данного времени для снижения влажности субстрата и придания будующей пробиотической добавке сорбирующих и антитоксических свойств, от массы питательной среды, методом ступенчатого смешивания, вводили 10,0 % минерального сорбента (вспученный вермикулит – ТУ 5712-001-76685354-09), что обеспечивало его равномерное распределение в смеси. Затем, для достижения необходимой массовой доли влаги смесь подсушивали в течение 24 ч при температуре 4042 °С, что обеспечивало максимальное сохранение жизнеспособных клеток. Высушенную массу измельчали и упаковывали.

4. Контроль качества кормовой добавки Трилактосорб.

Оценку качества готовой кормовой добавки проводят по органолептическим, физико-химическим и биологическим показателям, которые должны соответствовать требованиям и нормам, указанным в таблице 4.

Внешний вид, цвет и запах. Определение внешнего вида и цвета добавки проводили визуально при дневном рассеянном свете. Пробиотическая кормовая добавка Трилактосорб должна представлять собой однородную сыпучую массу, соломенного цвета со слабым запахом.

–  –  –

Массовая доля влаги. Сущность метода заключается в определении уменьшения массы пробы после её высушивания в течении 1 ч при температуре 105 °С.

Определение влажности проводили в трех параллельных навесках готовой добавки. 1,0 г навески, выделенной из средней пробы кормовой добавки, тщательно перемешивали и помещали в каждую взвешенную бюксу, после чего их закрывали крышками и ставили в эксикатор. Сушильный шкаф разогревали до 105,0 °С и помещали в него открытые бюксы с навесками добавки. Высушивание добавки проводили в течении 60 мин. По завершению процесса высушивания бюксы с продуктом вынимали из шкафа специальными щипцами, закрывали крышками и переносили в эксикатор для полного охлаждения. Затем охлажденные бюксы взвешивали с погрешностью не более 0,01 г и помещали в эксикатор до окончания обработки результатов анализа. Массовую долю влаги в процентах (Х) вычисляли согласно формуле:

–  –  –

где W0 – масса бюксы без пробы, г; W1 – масса навески исследуемой добавки до высушивания, г; W2 – масса навески исследуемой добавки после высушивания, г.

Расхождение между результатами трех параллельных измерений не должно превышать 0,5 %. За окончательный результат анализа принимали среднее арифметическое результатов трех параллельных измерений. Массовая доля влаги в кормовой добавке Трилактосорб не должна превышать 10,0 %.

Содержание токсичных элементов. Уровень токсических элементов в готовом продукте определяли методом атомно-абсорбционной спектрометрии с электротермической атомизацией химических элементов на спектрометре «Квант-Z.ЭТА». Метод основан на минерализации продукта смесью кислот и реагентов-окислителей, проведении реакций элементов в полученном растворе-минерализате, отгонки летучего соединения потоком аргона в разогретую кварцевую кювету-атомизатор и измерении доли токсического элемента атомно-абсорбционным методом по величине атомного поглощения на резонансной длине волны. Определение проводили согласно ниже приведенной документации:

свинец и кадмий – МУК 4.1.986-2000;

мышьяк – по ГОСТ Р 51766-2001;

ртуть – по ГОСТ 26927-86;

Кормовая добавка Трилактосорб по содержанию токсичных элементов соответствовала требованиям СаНПиН 2.3.2.1078-01 «Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов» (индекс 1.2.9).

Количество жизнеспособных микроорганизмов. Для определения титра жизнеспособных микроорганизмов 1,0 г кормовой добавки Трилактосорб помещали в колбу со 100,0 см3 стерильного физ. раствора, оставляли на 1 ч и тщательно перемешивали на аппарате для встряхивания жидкости в течение 30 мин. Получали разведение 1:100, после чего готовили ряд последовательных десятикратных разведений до 10-8. Разведения 10-6, 10-7 и 10-8 в параллелях высевали в чашки Петри с питательной средой. Чашки с засеянными средами помещали в термостат и выдерживали при (40,0±1) °С в течение 72 ч. По количеству выросших колоний определяли общий титр микроорганизмов по формуле:

–  –  –

где N – среднеарифметическое значение числа колоний в чашках Петри; Р – порядковый номер десятикратного разведения, в котором отмечается рост бактерий.

За окончательный результат испытания принимали среднее арифметическое значение параллельных измерений, расхождение между которыми не должно превышать 10 %. В целом, кормовая добавка Трилактосорб должна содержать не менее 1 108 КОЕ/г.

Определение бактерий группы кишечных палочек. Метод основан на способности бактерий группы кишечных палочек сбраживать в питательной среде лактозу с образованием кислоты и газа при (37±1) °С в течение 24 ч.

Для этого 0,1 г Трилактосорба засевали в пробирки с 5 мл среды Кесслера. Пробирки помещали в термостат при (37±1) °С на 24 часа. Через сутки анализировали результат по наличию или отсутствию газообразования.

Через сутки после культивирования в термостате, в изучаемых пробирках, куду делали посев кормовой добавки Трилактосорб, не было выявлено газообразования, что свидетельствовало об отсутствии данных видов бактерий.

Определение Staphylococcus aureus. Метод определения S. аureus без предварительного обогащения посевом на агаризованные селективные среды основан на высеве продукта на поверхность плотной среды, инкубировании, подсчете типичных колоний.

Для этого 1,0 мл кормовой добавки Трилактосорб в разведении 1:1

с физиологическим раствором наносили на поверхность молочно-солевого агара в три чашки Петри и тщательно растирали шпателем. Посевы инкубировали при (37,0±1) °С в течение 2448 ч. Чашки инкубировали дном вверх.

После термостатирования подсчитывали количество характерных колоний на каждой чашке.

Результаты исследований показали, что после термостатирования на чашках Петри не было выявлено роста колоний, характеризующие золотистого стафилококка.

Определение бактерий рода Salmonella. Метод выявления сальмонелл основан на использовании прибора Vidas для процедуры автоматической иммуноконцентрации сальмонелл в наборе Vidas ICS после предварительного неселективного обогащения с последующим автоматизированным определением микроорганизмов в наборе Vidas SLM. При положительном результате на приборе, продолжают дальнейшее выделение бактерий, образующих типичные колонии на агаризованных дифференциально-диагностических средах, имеющих типичные для бактерий рода Salmonella биохимические и серологические характеристики. Результаты теста показали отсутствие в кормовой добавке Трилактосорб бактерий рода сальмонелл.

Определение дрожжей и плесеней. Метод основан на высеве продукта в питательные среды, определении принадлежности выделенных микроорганизмов к плесневым грибам и дрожжам по характерному росту на питательных средах и по морфологии клеток.

Для дифференцирования дрожжей и плесени от молочнокислых микроорганизмов в добавке использовали питательную среду на основе сывороточного агара БФ в комплекте с антибиотиком левомицетином. Для этого 1,0 г добавки добавляли в чашку Петри и заливали расплавленной питательной средой, охлажденная до 45 °С. Круговым движением чашек Петри в них перемешивали среду и оставляют до застывания агара. Чашки с засеянными средами помещали в термостат и выдерживали при (24±1) °С в течении 5 суток.

Рост дрожжей на агаризованных средах сопровождается образованием крупных, выпуклых, блестящих, серовато-белых колоний с гладкой поверхностью и ровными краями.

Развитие плесневых грибов на питательных средах сопровождается появлением мицелия различной окраски.

Для количественного подсчета отбирают чашки, на которых выросло от 15 до 150 колоний дрожжей и (или) от 5 до 50 колоний плесневых грибов.

Результаты обрабатывают и пересчитывают отдельно для дрожжей и плесневых грибов согласно требований ГОСТ 10444.12-88 (пункт 5.4).

В результате исследований на питательной среде после культивирования кормовой добавки Трилактосорб не было выявлено роста колоний и появления мицелия, характеризующие дрожжи и плесневые грибы.

Определение подлинности. Подлинность кормовой добавки Трилактосорб определяли методом бактериологического контроля в мазках, окрашенных по Граму. В мазках должны быть микроорганизмы вида Streptococcus thermophilus, Lactobacillus delbruеckii subsp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus определение которых проводиться согласно «Определитель бактерий Берджи» [122].

Определение токсичности. Определение безвредности кормовой добавки Трилактосорб проводят согласно ГОСТ Р 52337-2005, который предусматривает экспресс-метод и основной метод.

Экспресс-метод основан на культивировании стилонихий и воздействии на них различных фракций токсических веществ, извлеченных из исследуемой добавки водным и ацетоновым экстрактами. Основной метод определения общей токсичности заключается в извлечении токсичных веществ из добавки ацетоном или водой и в ведении данного экстракта однократно в желудок клинически здоровым белым лабораторным мышам.

Таким образом, разработана технология получения и контроль качества кормовой добавки Трилактосорб.

–  –  –

Одним из главных показателей технологического процесса является определение изменения жизнеспособности молочнокислых микроорганизмов, входящих в состав кормовой добавки Трилактосорб в процессе её хранения.

Для проведения данного исследования определяли титр культуры, а также нарастание титруемой кислотности при её активизации на момент изготовления добавки, а также в разные периоды её хранения – через 1; 2; 3; 4;

5; 6 и 7 месяцев.

Кормовую добавку Трилактосорб хранили во влагонепроницаемых пакетах, в сухом темном помещении при температуре 20-24 °С. Результаты изучения жизнеспособности микроорганизмов, входящие в состав пробиотической кормовой добавки Трилактосорб, а также титруемой кислотности в процессе хранения представлены в таблице 5.

–  –  –

Из данных таблицы 5 видно, что общий титр микроорганизмов, входящих в состав кормовой добавки Трилактосорб в процессе срока хранения уменьшается. Однако следует отметить, что минимальное количество микроорганизмов, которое будет обеспечивать профилактический эффект добавки выявлено на 6-й месяц хранения, что в сравнении с жидкими пробиотиками, срок хранения которых составляет 13 мес., является положительным показателям качества кормовой добавки Трилактосорб.

Изучение кислотности по Тернеру используемой добавки показало, что титруемая кислотность на момент выпуска Трилактосорба составляла 88,33 °Т, что является оптимальной для жизнеспособности микроорганизмов.

К моменту окончания срока хранения добавки кислотность составила 197,74-209,73 °Т, что является критическим показателем для жизнедеятельности молочнокислой микрофлоры.

Таким образом, результаты наших исследований показали, что максимальный срок хранения кормовой добавки Трилактосорб составляет 6 месяцев. Более длительное хранение и дальнейшее её использование снижает титр и не будет обеспечивать максимальный профилактический эффект.

3.3 Оценка общего титра штаммов-пробионтов, входящих в состав кормовой добавки Трилактосорб Определение общего титра жизнеспособных микроорганизмов, входящих в состав кормовой добавки Трилактосорб, по отдельности и при их совместном использовании проводили в стерильных условиях ламинар-бокса.

По технологии получения кормовой добавки Трилактосорб, аналогично выращивали культуры штаммов-пробионтов по отдельности. Затем готовили ряд последовательных разведений культур соответствующего штаммапробионта и исследуемой добавки до 10-8, из которых последние три (10-6;

10-7; 10-8) высевали на чашки Петри с агаризованным гидролизованным молоком и подсчитывали количество выросших колоний через 72 ч., по формуле согласно ГОСТ 10444.11-89 [40].

Результаты жизнеспособности культур по отдельности и в составе кормовой добавки Трилактосорб представлены на рисунке 9.

Результаты исследований показали, что при совместном использовании культур в составе кормовой добавка Трилактосорб общий титр полезной микрофлоры выше, чем их раздельное применение.

Рисунок 9 – Общий титр штаммов-пробионтов по отдельности и в составе кормовой добавки Трилактосорб Таким образом, совокупность трех видов термофильных молочнокислых культур (Streptococcus thermophiles В-2894, Lactobacillus delbruеckii subsp. bulgaricus В-6543, Lactobacillus acidophilus В-8634) в кормовой добавке Трилактосорб будет обеспечивать максимальный желаемый эффект.

3.4 Оценка токсикологического и раздражающего действия кормовой добавки Трилактосорб Одним из главных параметров биологической активности любого нового препарата, в том числе кормовой добавки Трилактосорб, является изучение токсичности и раздражающего свойства, так как их обнаружение может быть основной причиной проявления у сельскохозяйственной птицы токсикозов, а также другой патологии.

3.4.1 Определение токсичности на стилонихиях

Токсикологическая оценка на стилонихиях изучалась экспресс-методом согласно ГОСТ Р 52337-2005, по условиям которого корма и добавки растительного происхождения, отнесенные к нетоксичным, могут быть использованы по непосредственному способу их применения. В связи с тем, что культура стилонихий чувствительна к химическим реактивам, её выращивание и биотестирование проводили в отдельном помещении, а также в химически чистой лабораторной посуде. Тестирование осуществлялось на суточной культуре простейших, которые находились в стадии активного роста.

Для этого за сутки до биотеста стилонихии отсаживали на свежеприготовленный рабочий раствор Лозина–Лозинского с кормом, в качестве которого выступали высушенные пекарские дрожжи. Затем культуру ставили в термостат и культивировали при температуре 22–24 °С. Для проведения опыта готовили раствор ацетонового и водного экстрактов. Для этого в две плотно закрывающиеся колбы помещали навески исследуемой добавки массой 10,0 ± 0,1 г в каждую. В первой колбе содержимое заливали определенным объемом ацетона, но таким образом, чтобы толщина растворителя была не менее 2,0 мм над уровнем исследуемой смеси. Колбу встряхивали не менее 23 мин, а затем отстаивали. Надосадочную жидкость ацетонового экстракта объемом 0,5 мл переносили в колбу с 40,0 мл водного раствора Лозина-Лозинского для получения водного раствора данного экстракта. Во вторую емкость наливали 100,0 мл дистиллированной воды и подвергали её встряхиванию на автоматической качалке в течение 20 мин. Затем содержимое колбы отфильтровывали через бумажный фильтр для получения водного экстракта исследуемой пробиотической кормовой добавки. Пробу пробиотической кормовой добавки Трилактосорб для каждого экстракта исследовали в пяти повторностях. Токсичность определяли по проценту выживаемости простейших в течение определенного времени: при экстракции ацетоном – 1,5 ч, а при экстракции водой – 3 ч. и определяли из расчета:

70–100 % выживаемости стилонихий – изучаемая добавка нетоксична;

40–69 % выживаемости стилонихий – изучаемая добавка слаботоксична;

0–39 % выживаемости стилонихий – изучаемая добавка токсична.

На начало опыта в каждой лунке было от 15 до 20 шт. стилонихий.

В качестве контроля использовали 1 %-й раствор ацетона (1%-й РА) и минеральный раствор Лозина-Лозинского (МР ЛЛ).

Результаты экспресс-метода на инфузориях представлены в таблице 6.

Таблица 6 – Токсикологическая оценка кормовой добавки Трилактосорб экспресс-методом на инфузориях

–  –  –

Результаты эксресс-оценки показали, что выживаемость стилонихий при действии на них водного и ацетонового экстрактов кормовой добавки Трилактосорб, соответственно, составила 97,8 и 94,7 %, что согласно ГОСТ Р 52337-2005 находится в пределах, характеризующих её как нетоксичную добавку растительного происхождения.

3.4.2 Определение острой токсичности на лабораторных животных

Оценку острой токсичности осуществляли на клинически здоровых беспородных белых мышах и половозрелых беспородных белых крысах путем однократного применения кормовой добавки Трилактосорб в смеси с кормов лабораторным животным натощак согласно ГОСТ Р ИСО 10993-11-2009 [62].

В эксперименте методом групп-аналогов было сформировано по пять групп животных обоего пола 6 особей в каждой. Согласно научной литературы эффективная доза, характерная для данной группы фармакологических добавок составляет 0,2 % от массы корма [64; 95; 96; 97; 98; 99; 100; 101; 102; 120;

129; 130; 131; 132; 133; 134; 160; 161]. Нами было испытано 3 дозы кормовой добавки Трилактосорб от научно-предполагаемой: 3-; 5- и 10-кратные. В качестве групп-контроля использовали: отрицательный контроль (ОК) мыши и крысы получали только стандартный лабораторный гранулированный корм ПК 120-3 и контроль модельной среды (КМС), в которой лабораторные животные употребляли стандартный комбикорм и субстрат, входящий в состав кормовой добавки Трилактосорб, в 10-кратной дозе от предполагаемой эффективной. Наблюдение за животными проводили в течение 14 дней с учетом изменения их сохранности, общего состояния и поведения.

Результаты острой токсичности кормовой добавки Трилактосорб на подопытных животных представлены в таблице 7.

–  –  –

Из таблицы 7 видно, что однократное пероральное использование исследуемых доз кормовой добавки Трилактосорб не вызывает гибели лабораторных животных за весь период наблюдения. Состояние подопытных мышей и крыс оставалось удовлетворительным, с хорошо выраженным аппетитом, животные были подвижны, реакция на внешние раздражители оставалась такой же, как и до употребления добавки. Нарушения в функциональной активности органов пищеварительной и мочевыделительной систем, а также проявление других токсических явлений – отсутствовали.

По результатам изучения острой токсичности кормовой добавки Трилактосорб можно сделать заключение о том, что определить полулетальную дозу (ЛД50) не удалось. Таким образом, учитывая то, что использование кормовой добавки Трилактосорб переносится подопытными животными без каких-либо видимых последствий в максимально-используемой дозе, её можно отнести как малотоксичным препаратам данной фармакологической группы.

3.4.3 Определение хронической токсичности на лабораторных животных и птице Изучение хронической токсичности кормовой добавки Трилактосорб осуществляли согласно ГОСТ Р ИСО 10993-11-2009. Для постановки опыта использовали клинически здоровых беспородных белых мышей и перепелов породы фараон. Из лабораторных объектов методом групп-аналогов формировали контрольные и опытные группы по 6 особей в каждой. От предполагаемой эффективной (0,2 % от массы корма) всего испытано три дозы пробиотической кормовой добавки Трилактосорб: 3-; 5- и 10-кратные. В качестве групп-контроля в опыте использовали следующие: отрицательный контроль (ОК) мыши получали стандартный лабораторный корм ПК 120-3, а кормление перепелов осуществлялось комбикормом, сбалансированным по основным питательным веществам в соответствии с возрастными нормами ВНИТИП;

контроль модельной среды (КМС) – лабораторные мыши и птица употребляли стандартные корма и субстрат, входящий в состав пробиотической кормовой добавки Трилактосорб, в 10-кратной дозе (2,0 %). Смешивание пробиотической кормовой добавки Трилактосорб с кормом осуществлялось ежедневно, на протяжении 42 дней, что соответствует периоду выращивания данного вида сельскохозяйственной птицы на мясо в условиях производства.

Результаты влияния кормовой добавки Трилактосорб на лабораторных животных и птиц представлены в таблице 8.

–  –  –

Из таблицы 8 видно, что в опытных группах, как и группах-контроля количество животных и птиц на конец экспериментах не изменилось. Подопытные мыши и перепела удовлетворительно переносили изучаемую кормовую добавку, без какой-либо видимой патологии.

Животные и птица были клинически здоровы в течение всего эксперимента, отмечено нарушений в поведении, приеме корма и воды не было. Исследуемые объекты были подвижны, активны, шерстный и перьевой покров оставался гладким с характерным блеском.

Данные по влиянию кормовой добавки Трилактосорб на массу тела опытных и контрольных лабораторных объектов представлены в таблице 9.

–  –  –

Данные таблицы 9 показывают, что живая масса лабораторных мышей в 1-й, 2-й и 3-й опытных группах, получавших разные дозы кормовой добавки Трилактосорб, была статистически достоверно выше, чем в группе отрицательного контроля, соответственно, на 15,12; 17,77 и 23,36 % (Р 0,05), а также достоверно выше, чем в группе контроля модельной среды на 13,46;

16,08 и 21,58 % (Р 0,05). Прирост лабораторных мышей за весь период эксперимента, в изучаемых опытных группах, составил 15,16; 15,66 и 16,67 г, что выше, чем в группе отрицательного контроля на 22,10; 26,29 и 34,43 %, а в группе контроля модельной среды, соответственно, на 19,87; 23,99 и 31,99 %.

Аналогичная статистически достоверная разница по влиянию кормовой добавки Трилактосорб наблюдается на живую массу перепелов породы фараон. Из таблицы 9 видно, что живая масса птиц опытных групп выше изучаемого показателя, относительно группы отрицательного контроля, на 4,71; 6,22 и 7,39 %, а также группы контроля модельной среды, соответственно, на 3,81;

5,31 и 6,46 % (Р 0,05). В целом, за 42 дня прирост живой массы опытных групп перепелов был выше, чем в группе отрицательного контроля на 4,95;

6,51 и 7,69 %, а также выше группы модельной среды на 3,98; 5,53 и 6,70 %.

Далее нами изучалось влияние кормовой добавки Трилактосорб на обмен веществ организма опытных групп лабораторных мышей по их морфологическим, а также биохимическим показателям крови, результаты которых приведены в таблице 10.

Данные таблицы 10 свидетельствуют о том, что использование пробиотической кормовой добавки Трилактосорб не оказывает негативного влияния на морфо-биохимические показатели крови лабораторных животных.

Так, наблюдалась тенденция возрастания в 1-й, 2-й и 3-й опытных группах, по сравнению с группой отрицательного контроля и контроля модельной среды, количества эритроцитов, соответственно, на 3,53; 3,77; 2,70 % и 2,22;

2,57; 2,10 %, а также содержание гемоглобина на 8,89; 12,12; 13,79 % и 5,58;

8,72; 10,34 %. Так как гемоглобин способен обратимо связываться с кислородом, а эритроциты переносят его по организму с током крови, то возрастание данных показателей свидетельствует о том, что происходит улучшение насыщения им органов и тканей, а это в свою очередь обеспечивает более ускоренное протекание окислительно-восстановительных процессов. Кроме того, гемоглобин способен связывать в тканях небольшое количество диоксида углерода, что будет обеспечивать лучшее его освобождение в лёгких.

Лейкоциты играют важную роль в специфической и неспецифической защите организма от внешних и внутренних патогенных агентов. Таким образом, так как количество данных форменных элементов в крови подопытных мышей после применения добавки Трилактосорб находилось в пределах нормы, то это говорит об отсутствии токсического действия и патологических изменений в организме животных.

–  –  –

Изучение сыворотки крови мышей опытных групп показало, что после использования кормовой добавки Трилактосорб было выявлено достоверное повышение содержания общего белка по сравнению с группой отрицательного контроля на 23,04; 24,61 и 25,58 %, а к контролю модельной среды, соответственно, на 19,71; 21,24 и 22,18 % (Р 0,05). Интенсивность обменных реакций в организме также отражает белковый коэффициент (А/Г), значение которого в 1-й, 2-й и 3-й опытных группах мышей было выше, чем в группе отрицательного контроля на 5,63; 15,49 и 7,04 %, а также группы модельной среды на 4,17; 13,89 и 5,56 %, что свидетельствует о более интенсивном протекании процессов биосинтеза белка. По остальным изучаемым биохимическим показателям сыворотки крови (холестерин, мочевина, фосфор, кальций, активность АСТ и АЛТ) наблюдалась физиологическая норма, характерная для данного вида лабораторного животного.

Результаты влияния кормовой добавки Трилактосорб на морфобиохимические показатели крови подопытных перепелов представлены в таблице 11.

–  –  –

Из таблицы 11 видно, что у подопытных перепелов наблюдаются аналогичные результаты по морфо-биохимическим показателя крови. Так, статистически достоверное повышение (Р 0,05) было выявлено во 2-й и 3-й опытных группах птиц при изучение в сыворотке крови таких показателей как общего белка, альбуминов, глобулинов, холестерина и кальция. В 1-й опытной группе наблюдалась тенденция к возрастанию данных показателей. В целом, при использовании в рационе перепелов кормовой добавки Трилактосорб, патологических изменений за весь период эксперимента выявлено не было.

Для изучения патологоанатомического состояния внутренних органов и тканей лабораторных мышей, а также перепелов, после использования кормовой добавки Трилактосорб, их подвергали умерщвлению, путем декапитации и вскрытию (рисунок 10).

А Б Рисунок 10 Патологоанатомическое вскрытие подопытных мышей (А) и перепелов (Б) после использования кормовой добавки Трилактосорб Результаты исследований показали, что изменений в структуре органов и тканей лабораторных животных и птиц не обнаружено. Внутренние органы у изучаемых особей располагались анатомически правильно. В плевральной и брюшной полостях зарегистрировано наличие жидкости не было. Просвет органов дыхательной системы (трахея и бронхи) – свободный, ткань легких имела слабо-розовый цвет. Слизистая оболочка желудочно-кишечного тракта, в частности желудка и кишечника после использования кормовой добавки Трилактосорб имела серо-розовый цвет, наличие эрозий, язв, кровоизлияний и других видимых изъявлений не отмечалось. Почечная капсула легко снималась, мозговое и корковое вещество органа у мышей хорошо различимы на разрезе, в то время как у перепелов выраженной границы не наблюдалось, что связано с видовой особенностью данного вида сельскохозяйственной птицы.

В целом, длительное применение кормовой добавки Трилактосорб в различных дозах белым мышам и перепелам не вызвало у них патологических изменений, как на общее состояние организма, так и на внутренние органы, а также выстилающие их ткани, что характеризует её как безопасную кормовую смесь для дальнейшего использования в промышленном перепеловодстве.

3.4.4 Определение кожно-резорбтивного и раздражающего свойства

Свободное пероральное использование добавок с кормом сельскохозяйственной птицей, в том числе перепелами в производстве, предполагает возможное их попадание на кожу, а также слизистые оболочки глаз, что может вызывать негативное воздействие на организм. В результате чего, нами изучалось раздражающее свойство кормовой добавки Трилактосорб на кожу и конъюнктиву глаз, а также дополнительное раздражающее действие на слизистую ротовой полости.

Изучение кожно-резорбтивного действия испытуемой добавки проводили на 2-х половозрелых кроликах-альбиносах обоего пола массой 2,2-2,5 кг, которым за сутки до проведения опыта выстригали шерсть на симметричных участках обоих боков для аппликации, одна из которых служила контролем. Размер обрабатываемой поверхности кожи составлял от 5 до 8 % поверхности тела подопытного животного. 1,0 г пробиотической кормовой добавки Трилактосорб разводили небольшим объемом воды, затем смачивали ватным тампоном и наносили на участок кожи, а сверху фиксировали повязкой. Местно-раздражающее действие Трилактосорба на кожу оценивалась после 4-часовой экспозицией, а также через 24; 48 и 72 часов. Обращали внимание на степень кожного проявления (покраснение, повышение чувствительности, припухлость, воспаление), включая эритему и отек, а также возможность появления общей реакции организма кроликов-альбиносов.

Результаты накожных аппликаций показали, что в ходе эксперимента у лабораторных животных местного покраснения не отмечалось, отсутствовали повышение чувствительности, припухлость, воспаление, образование эритемы и отек кожи. Таким образом, индекс первичного раздражения кормовой добавки Трилактосорб равнялся нулю.

Оценка раздражающего действия Трилактосорба на конъюнктиву глаз проводилась на 2-х половозрелых кроликах-альбиносах обоего пола массой 2,83,0 кг. Перед началом опыта, для выявления выраженных повреждений, обращали внимание на состояние глаз каждого подопытного животного.

Эксперимент начинали с того, что кроликам-альбиносам аккуратно в нижний отдел конъюнктивального мешка левого глаза вводили такое количество добавки, которое занимает объем 0,1 мл. После инсоляции нижнее и верхнее веко соединяли и в таком положении выдерживали в течение 2–3 сек. Правый глаз служил контролем. Обследование глаза лабораторных животных после введения кормовой добавки Трилактосорб проводили через 1; 24; 48 и 72 часа. Обращали внимание на состояние конъюнктивы, роговицы, радужной оболочки, проявление хематоза (отек конъюнктивы), а также наличие выделений из глаза.

Результаты исследований показали, что введение кормовой добавки Трилактосорб в нижний отдел конъюнктивального мешка левого глаза вызывает незначительное покраснение слизистой оболочки и выделение слезных желез сразу после инсоляции, которые исчезали через несколько минут.

Дальнейшие наблюдения за кроликами не выявили иной патологии:

не отмечалось помутнения роговицы глаза, радужная оболочка была без видимых изменений, хематоз и выделения из глаз отсутствовали. Общее состояние кроликов-альбиносов на всех этапах исследований оставалось удовлетворительным, без изменений.

Изучение дополнительного раздражающего действия кормовой добавки Трилактосорб на слизистую ротовой полости проводили на здоровых половозрелых хомячках обоего пола массой 230250 г, из которых формировали три группы подопытных животных по 6 голов в каждой, получавших разные дозы добавки. Кормовую добавку Трилактосорб в дозе 0,6; 1,0 и 2,0 г разводили в 10,0 мл 0,9%-го раствора хлорида натрия, затем ими пропитывали ватно-марлевые тампоны. Далее помещали их в один защечный мешок каждого лабораторного животного, а другой мешок служил контролем. Продолжительность контакта слизистой рта с материалов составила десять минут. Для предотвращения выталкивания тампона изо рта на каждого хомячка надевали бумажный воротник, располагающийся вокруг шеи так, чтобы не мешать нормальному питанию и дыханию. В конце эксперимента отчет включал в себя макроскопическое исследование защечных мешков сразу после извлечения тампонов, а также оценку состояния слизистой и степень раздражающей реакции.

Проведенный анализ исследований выявил следующую клиническую картину лабораторных животных: слизистая защечного мешка с обеих сторон во всех опытных группах хомячков была чистой, без покраснений, припухлостей, образование отеков и эритем зарегистрировано не было, состояние животных до и после эксперимента не изменилось. В целом, индекс раздражающего действия Трилактосорба можно оценить как нулевой, что свидетельствует об отсутствии данного явления на слизистую ротовой полости исследуемой пробиотической кормовой добавки.

Таким образом, результаты кожно-резорбтивного действия и влияния на слизистую глаз, а также ротовой полости показали, что кормовая добавка Трилактосорб не проявляет раздражающего свойства.

3.4.5 Оценка антибактериальной и кислотообразующей активностей штаммов-пробионтов Проявление антибактериальной активности культуры в отношении патогенных микроорганизмов, является одним из основных параметров, обеспечивающий лечебный и профилактический эффект.

Антибактериальные свойства используемых штаммов-пробионтов по отдельности, а также в составе кормовой добавки Трилактосорб изучали в отношении кишечной палочки (Escherichia coli) и золотистого стафилококка (Staphylococcus aureus). Результат учитывали по размеру зоны задержки роста тест-микроба под действием изучаемых пробионтом. Данные антибактериальных свойств штаммов-пробионтов представлены в таблице 12 и рисунке 11.

–  –  –

З Ж Рисунок 11 – Антагонистическая активность штаммов-пробионтов по отдельности и в составе кормовой добавки Трилактосорб (слева – E.coli;

справа – S. aureus): А, Б – Streptococcus thermophiles; В, Г – Lactobacillus delbruеckii subsp.

bulgaricus; Д, Е – Lactobacillus acidophilus; Ж, З –кормовая добавка Трилактосорб И данных таблицы 12 и рисунка 11 видно, что используемые в составе кормовой добавки Трилактосорб культуры молочнокислых микроорганизмов проявляют антибактериальное свойство по отношению к Escherichia coli и Staphylococcus aureus.

Установлено, что при раздельном использовании молочнокислых культур (Streptococcus thermophiles В-2894, Lactobacillus delbruеckii subsp. bulgaricus В-6543, Lactobacillus acidophilus В-8634) зона задержки роста кишечной палочки составила 3,5; 4,0 и 5,7 мм, а золотистого стафилококка, соответственно, 4,1; 4,4 и 5,0 мм. Однако следует отметить, что при совместном использовании данных культур, в пробиотической кормовой добавки Трилактосорб, антимикробная активность по отношению к E. coli составила 9,8 мм, а зона задержки роста S. аureus увеличилось до 9,3 мм.

Одним из главных параметров антибактериальной активности молочнокислых микроорганизмов в отношении патогенной микрофлоры является их способность продуцировать такие продукты метаболизма как органические кислоты. В этой связи, нами изучался ассортимент и количество кислот, которые вырабатывали используемые культуры, как по отдельности, так и в составе кормовой добавки Трилактосорб. Исследование проводили методом капиллярного электрофореза на полуавтоматическом приборе «Капель – 105». Данные кислотообразующих свойств представлены в таблице 13 и на рисунках 12–15.

–  –  –

Рисунок 15 Электрофореграмма органических кислот кормовой добавки Трилактосорб Из данных таблицы 13 и рисунков 12–15 видно, что при раздельном использовании культур образование органических кислот ниже, чем при их применении в составе добавки. Так, содержание молочной кислоты при использовании кормовой добавки Трилактосорб составило 4765,57 мг/л, уксусной кислоты 486,38 мг/л, а пропионовой 606,18 мг/л. Полученные нами результаты согласуются с данными других исследований, в которых продуцирование молочнокислыми микроорганизмами органических кислот, также являлось главным фактором антибактериальной активности полезной микрофлоры, входящих в состав пробиотических добавок и препаратов, в отношении патогенной микрофлоры [95; 96; 97; 119; 121; 160; 201; 204].

Таким образом, кормовая добавка Трилактосорб проявляет высокую антибактериальную активность в отношении патогенной микрофлоры, а это в свою очередь, будет обеспечивать её высокий лечебный и профилактический эффект.

–  –  –

Изучение фармакологических свойств кормовой добавки Трилактосорб осуществляли на перепелах породы фараон мясного направления, оценивая их основные процессы обмена веществ, а также хозяйственные показатели, полученные в процессе выращивания данного вида птицы на производстве.

Испытания проводились в КФХ «Пуклич Р. М.», Республика Адыгея.

Для подбора оптимальной дозы использования кормовой добавки Трилактосорб был проведен первый научно-хозяйственный опыт в производственных условиях. Для этого методом групп-аналогов было сформировано четыре группы перепелов по 90 голов в каждой: контрольная группа в рационе птиц присутствовал только основной полноценный комбикорм, рекомендованный ВНИТИП; 1-я опытная группа с основным рационом в течение всего периода выращивания задавали перепелам Трилактосорб в дозе 0,2 % к массе корма; 2-я опытная группа – в комбикорм добавляли Трилактосорб в дозе 0,5 % на массу корма; 3-я опытная группа – перепела получали комбикормом с Трилактосорбом в дозировке 1,0 % на массу корма.

Продолжительность научно-хозяйственного эксперимента составила 42 дня.

3.5.11Морфологические и биохимические показатели крови птиц

Изучение морфо-биохимического статуса крови живого организма имеет огромное значение не только в диагностике различных заболеваний, но и позволяет выявить влияние новых препаратов и добавок на его состояние в целом. В этой связи, в возрасте 42-х дней проводили забор крови у 10 перепелов из каждой исследуемой группы для изучения их морфологических и биохимических показателей после использования различных доз кормовой добавки Трилактосорб. Результаты морфо-биохимических показателей крови перепелов представлены в таблице 14.

–  –  –

Результаты изучения отдельных показателей общего анализа крови птиц, после использования различных доз кормовой добавки Трилактосорб показали, что в 1-й опытной группе, которая получала добавку в дозе 0,2 % к массе корма, количество эритроцитов было больше, чем в контрольной группе на 1,83 %. При этом, статистически достоверная разница по данному показателю была выражена во 2-й и 3-й опытных группах, в 1,0 мл крови которых содержание эритроцитов было значительно выше, чем в контроле на 7,32 и 8,54 % (P 0,05). Аналогичная тенденция наблюдалась при изучении гемоглобина в крови опытных птиц. Так, во 2-й и 3-й опытных группах содержание гемоглобина было достоверно выше, чем в контрольной группе на 18,32 и 20,03 % (P 0,05). По содержанию в крови тромбоцитов достоверных отличий в разрезе групп не наблюдалось, однако, была выражена незначительная тенденция к его увеличению в 1-й, 2-й и 3-й опытных группах по сравнению с группой контроля на 1,14; 5,34 и 4,49 %. Положительные данные были получены при изучении белых кровяных телец крови (лейкоцитов) опытных групп. Так, содержание лейкоцитов в опытных группах было незначительно ниже, чем в контрольной группе на 0,27; 2,89 и 3,71 % Полученные результаты свидетельствуют о том, что использование Трилактосорба способствует стимулированию образования красных клеток крови, насыщенности их гемоглобином, что приводит к нормализации уровня кислорода в организме и ускорению окислительно-восстановительных процессов, при отсутствии тех или иных патологических и воспалительных изменений, о чем говорят данные анализа лейкоцитов.

Изучение биохимических показателей сыворотки крови перепелов свидетельствовало о положительном влиянии кормовой добавки Трилактосорб на процесс обмена веществ в организме птиц. Так, наблюдалось статистически достоверная стимуляция обмена белков в организме 2-й и 3-й опытных групп по показателю общего белка в сыворотки крови, содержание которого было выше, чем в группе, которая не получала добавок, на 17,34 и 17,78 % (P 0,05). Одним из значительных показателей метаболизма белков в организме является белковый коэффициент (отношение альбумина к глобулину), повышение которого выявлено в опытных группах, получавших добавку в дозах 0,5 и 1,0 % к массе комбикорма и было больше, чем в контроле на 13,04 и 11,59 %. Наблюдалось достоверное понижение (P 0,05) во 2-й и 3-й опытных группах в сыворотке крови холестерина по отношению к контрольной, соответственно, на 3,99 и 3,72 %, что говорит о распаде в организме перепелов избытка жиров, энергия которых используется на интенсивный рост птиц. О физиологически нормальной работе печени и сердца свидетельствовали данные активности в сыворотки крови опытных групп аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы, значение которых находилось в пределах нормы. Наблюдалась незначительная тенденция в опытных группах к снижению уровня АСТ по отношению к контрольной группе на 3,07; 4,31 и 4,62 %, а АЛТ, соответственно, на 0,68; 1,58 и 3,15 %. Следует отметить, что было выявлено статистически достоверное увеличение в сыворотке крови 2-й и 3-й опытных группах по сравнению с контролем содержания кальция на 10,21 и 8,76 %, а также фосфора на 7,79 и 8,66 % (P 0,05).

Таким образом, использование кормовой добавки Трилактосорб в дозах 0,5 и 1,0 % к массе корма способствовало стимуляции метаболизма и энергии в организме перепелов, повышению иммунитета, что в целом обеспечивало птице опытной группе более высокую продуктивность и жизнеспособность.

3.5.2 Влияние на пищеварение

На основании данных, полученных по количественному учёту потребленного комбикорма, а также выделенного помета и проведенного анализа их химического состава, нами определялась переваримость питательных веществ комбикорма птицей и коэффициент использования отдельных элементов (фосфор, кальций). Данные анализа представлены в таблице 15.

Из данных таблицы 15 видно, что использование кормовой добавки Трилактосорб в рационе опытных перепелов всех групп способствовала повышению анализируемых показателей. Переваримость клетчатки в 1-й, 2-й и 3-й опытных группах птиц была выше, чем в контрольной на 4,49; 9,91 и 11,42 %. Переваримость белка в рационе 1-й опытной группы была выше по сравнению с контролем на 3,19 %, однако, статистически достоверная разница была обнаружена во 2-й и 3-й опытных группах перепелов, которые получали добавку Трилактосорб в дозах 0,5 и 1,0 % и она была выше, чем в группе контроля на 12,79 и 13,85 % (P 0,05). Статистически достоверная разница наблюдалась во 2-й и 3-й опытных группах при анализе переваримости жира, которого было выше по отношению к контрольной группе на 8,20 и 9,93 %, а также органического вещества, соответственно, на 8,66 и 9,59 % (P 0,05). При анализе остальных показателей переваримости питательных веществ комбикорма перепелами в опытных группах наблюдалась тенденция к их увеличению по сравнению с группой, где добавка не применялась.

–  –  –

Коэффициент использования фосфора и кальция из корма перепелами опытных групп был также выше по сравнению с группой контроля. Так, в 1-й опытной группе использование фосфора птицей было выше, чем в группе контроля на 3,95 %, а кальция на 3,81 %, однако разница недостоверна. Следует отметить, что достоверная разница по изучаемым показателям наблюдалась во 2-й и 3-й опытных группах, в которых коэффициент использования фосфора был выше, чем в контрольной – на 14,56 и 15,29 %, а кальция, соответственно, на 14,24 и 16,80 % (P 0,05).

В целом, следует обратить внимание, что полученные данные коррелируют с цифрами полученные при анализе сыворотки крови и химического состава мышечной ткани перепелов, получавшие с кормом кормовую добавку Трилактосорб.

Данные научной литературы показывают, что главным местом локализации молочнокислых микроорганизмов и бифидобактерий в желудочнокишечном тракте организма птиц являются слепые кишки (отростки толстого отдела кишечника) [98; 101; 133; 134; 161; 201]. Именно в этом отделе происходит рост и развитие данной микрофлоры, как одного из основного источника нормального физиологического пищеварения. Для того чтобы оценить работу препарата или добавки на основе живой микрофлоры, необходимо определить степень приживаемости микроорганизма в ЖКТ птиц не только в месте их непосредственной локализации, но и в самом отдаленном участке кишечника, как одного из главного показателя транзитного прохождения микрофлоры. В этой связи, нами изучалось содержание лактои бифидобактерий в слепых и прямой кишках всех групп перепелов. Результаты исследований представлены в таблице 16.

–  –  –

Данные таблицы 16 свидетельствуют об эффективном использовании в комбикормах микроорганизмов кормовой добавки Трилактосорб. Содержание молочнокислых микроорганизмов в слепых кишках перепелов опытных групп было выше, чем в контрольной группе на 6,82; 14,39 и 17,80 % при статистически достоверной разнице (P 0,05). Достоверная разница наблюдалась при подсчете титра бифидобактерий в слепой кишке перепелов во 2-й и 3-й опытных группах, которых было больше, чем в группе контроля на 11,35 и 12,29 % (P 0,05). Анализ титра молочнокислых микроорганизмов и бифидобактерий в прямой кишке показал, что в разрезе групп разницы не наблюдалось. Полученные нами данные свидетельствовали о том, что используемая микрофлора в кормовой добавке Трилактосорб обладает высокой приживаемостью и не проходит транзитом через желудочно-кишечный тракт перепелов.

Таким образом, использование в комбикорме перепелов кормовой добавки Трилактосорб способствует повышению титра лакто- и бифидобактерий, усилению секреторной функции желудочно-кишечного тракта птиц, а основной расход кислот ЖКТ участвует в переваримости комбикорма. Результатом данных явлений является повышение живой массы перепелов за счет мышечной ткани.

–  –  –

Применение кормовых добавок являются актуальным и перспективным направлением для повышения роста и сохранности отрасли птицеводства.

В связи с чем, критерии оценки роста и развития организма птицы, в частности перепелов, имеют важное значение для оценки эффективного использования кормовых добавок.

Для осуществления опыта в суточном возрасте были отобраны клинически здоровые перепелята с практически одинаковой массой тела. Каждодневные наблюдения за перепелами во время эксперимента показали, что общее состояние птиц во всех изучаемых группах было удовлетворительным, аппетит сохранен. Результаты влияния различных доз кормовой добавки Трилактосорб на хозяйственные показатели перепелов представлены в таблице 17.

–  –  –



Pages:     | 1 | 2 || 4 | 5 |   ...   | 6 |

Похожие работы:

«БРИТАНОВ Николай Григорьевич ГИГИЕНИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПЕРЕПРОФИЛИРОВАНИЯ ИЛИ ЛИКВИДАЦИИ ОБЪЕКТОВ ПО ХРАНЕНИЮ И УНИЧТОЖЕНИЮ ХИМИЧЕСКОГО ОРУЖИЯ 14.02.01 Гигиена Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор...»

«Ульянова Онега Владимировна МЕТОДОЛОГИЯ ПОВЫШЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ВАКЦИН НА МОДЕЛИ ВАКЦИННЫХ ШТАММОВ BRUCELLA ABORTUS 19 BA, FRANCISELLA TULARENSIS 15 НИИЭГ, YERSINIA PESTIS EV НИИЭГ 03.02.03 – микробиология Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант:...»

«Брит Владислав Иванович «Эффективность методов вакцинации против ньюкаслской болезни в промышленном птицеводстве» Специальность: 06.02.02 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидат ветеринарных наук Научный руководитель:...»

«Шапурко Валентина Николаевна РЕСУРСЫ И ЭКОЛОГИЧЕСКОЕ КАЧЕСТВО ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ (НА ПРИМЕРЕ БРЯНСКОЙ ОБЛАСТИ) Специальность 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«Моторыкина Татьяна Николаевна ЛАПЧАТКИ (РОД POTENTILLA L., ROSACEAE) ФЛОРЫ ПРИАМУРЬЯ И ПРИМОРЬЯ 03.02.01 – Ботаника Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, старший научный сотрудник Н.С. Пробатова Хабаровск Содержание Введение... Глава 1. Природные...»

«Ядрихинская Варвара Константиновна ЭКОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ОСТРЫХ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ В Г. ЯКУТСКЕ И РЕСПУБЛИКЕ САХА (ЯКУТИЯ) 03.02.08 – экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель кандидат биологических наук, доцент М.В. Щелчкова Якутск 2015...»

«БРИТАНОВ Николай Григорьевич ГИГИЕНИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПЕРЕПРОФИЛИРОВАНИЯ ИЛИ ЛИКВИДАЦИИ ОБЪЕКТОВ ПО ХРАНЕНИЮ И УНИЧТОЖЕНИЮ ХИМИЧЕСКОГО ОРУЖИЯ 14.02.01 Гигиена Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор...»

«Хохлова Светлана Викторовна ИНДИВИДУАЛИЗАЦИЯ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ РАКОМ ЯИЧНИКОВ 14.01.12-онкология ДИССЕРТАЦИЯ На соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: Доктор медицинских наук, профессор Горбунова В.А Москва 2015 ОГЛАВЛЕНИЕ Введение Глава 1. Обзор литературы 1.1. Общая характеристика рака яичников 1.1.1. Молекулярно-биологические и...»

«Сухарьков Андрей Юрьевич РАЗРАБОТКА МЕТОДОВ ОЦЕНКИ ОРАЛЬНОЙ АНТИРАБИЧЕСКОЙ ВАКЦИНАЦИИ ЖИВОТНЫХ 03.02.02 «Вирусология» Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат ветеринарных наук, Метлин Артем Евгеньевич Владимир 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ 1 ВВЕДЕНИЕ 2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 2.1 Характеристика возбудителя бешенства 2.2 Эпизоотологические...»

«Кириллин Егор Владимирович ЭКОЛОГИЯ ОВЦЕБЫКА (OVIBOS MOSCHATUS ZIMMERMANN, 1780) В ТУНДРОВОЙ ЗОНЕ ЯКУТИИ 03.02.08 – экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: д. б. н., профессор Мордосов И. И. Якутск – 2015 Содержание Введение.. Глава 1. Краткая физико-географическая...»

«Цвиркун Ольга Валентиновна ЭПИДЕМИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС КОРИ В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКИ. 14.02.02 – эпидемиология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени доктора медицинских наук Научный консультант: заслуженный деятель науки РФ, лауреат Государственной премии СССР профессор, доктор медицинских наук Ющенко Галина Васильевна Москва – 20 Содержание...»

«УШАКОВА ЯНА ВЛАДИМИРОВНА ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ТЕХНОЛОГИЙ ДНК-МАРКИРОВАНИЯ В СЕЛЕКЦИОННО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ ЯБЛОНИ Специальность 06.01.05. – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат биологических...»

«КОЖАРСКАЯ ГАЛИНА ВАСИЛЬЕВНА КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ МАРКЕРОВ КОСТНОГО МЕТАБОЛИЗМА У БОЛЬНЫХ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ 14.01.12 онкология Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научные руководители: доктор биологических наук, Любимова Н.В. доктор медицинских наук, Портной С.М. Москва, 2015 г....»

«ПИМЕНОВА ЕКАТЕРИНА ВЛАДИМИРОВНА РАЗРАБОТКА МЕТОДА ОЦЕНКИ ЦИТОТОКСИЧНОСТИ АНТИГЕНОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ МЕЛИОИДОЗА IN VITRO НА МОДЕЛИ ПЕРЕВИВАЕМЫХ КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУР 03.02.03 – микробиология Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научный руководитель: доктор...»

«Мухаммед Тауфик Ахмед Каид ХАРАКТЕРИСТИКА ГЕНОТИПОВ С ХОРОШИМ КАЧЕСТВОМ КЛЕЙКОВИНЫ, ОТОБРАННЫХ ИЗ ГИБРИДНЫХ ПОПУЛЯЦИЙ АЛЛОЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ ЯРОВОЙ ПШЕНИЦЫ МЯГКОЙ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ДНК-МАРКЕРОВ Специальность 06.01.05 – селекция и семеноводство сельскохозяйственных растений Диссертация на соискание ученой степени кандидата сельскохозяйственных наук Научный...»

«Карачевцев Захар Юрьевич ОЦЕНКА ПИЩЕВЫХ (АКАРИЦИДНЫХ) СВОЙСТВ РЯДА СУБТРОПИЧЕСКИХ И ТРОПИЧЕСКИХ РАСТЕНИЙ В ОТНОШЕНИИ ПАУТИННОГО КЛЕЩА TETRANYCHUS ATLANTICUS MСGREGOR Специальность: 06.01.07 – защита растений Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель: Попов Сергей...»

«Цховребова Альбина Ирадионовна ВЛИЯНИЕ ФАКТОРОВ СРЕДЫ НА РАЗВИТИЕ БЕСХВОСТЫХ АМФИБИЙ СЕВЕРНЫХ СКЛОНОВ ЦЕНТРАЛЬНОГО КАВКАЗА Специальность 03.02.14 – биологические ресурсы Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель доктор биологических наук профессор Калабеков Артур Лазаревич Владикавказ 2015 Содержание Ведение..3 Глава I. Обзор литературных данных. 1.1....»

«Шинкаренко Андрей Семенович Формирование безопасного и здорового образа жизни школьников на современном этапе развития общества Специальность 13.00.01– общая педагогика, история педагогики и образования Диссертация на соискание ученой степени кандидата педагогических наук Научные...»

«Степина Елена Владимировна ЭКОЛОГО-ФЛОРИСТИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА СТЕПНОЙ РАСТИТЕЛЬНОСТИ ЮГО-ЗАПАДНЫХ РАЙОНОВ САРАТОВСКОЙ ОБЛАСТИ 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»

«Сафранкова Екатерина Алексеевна КОМПЛЕКСНАЯ ЛИХЕНОИНДИКАЦИЯ ОБЩЕГО СОСТОЯНИЯ АТМОСФЕРЫ УРБОЭКОСИСТЕМ Специальность 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор...»







 
2016 www.konf.x-pdf.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты, диссертации, конференции»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.